專利名稱：廣譜殺菌和抗單純皰疹病毒外用液體制劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種從傳統(tǒng)中藥中提取有效成分并與其它成分制成制劑以及該制劑的用途。
黃精是百合科(Liliaceae)黃精屬(Ploygonatum)多種植物的干燥根莖，我國有30余種，《中國藥典》(2000年版一部)收藏了3種即黃精polygonatum sibiricum Red.，多花黃精P.cyrtonema Hua及滇黃精P.kingianum Coll.et Hemsl.。黃精始載于《名醫(yī)別錄》，具補腎益精、滋陰潤燥之功，用于滋補強身和治療腎虛精虧，肺虛燥咳以及脾胃虛弱之證已有很長歷史，是中醫(yī)常用藥物之一。近年來對黃精的研究逐漸增多并不斷深入。現(xiàn)代藥理學(xué)研究證明黃精具有增強免疫，降低血脂、血糖，延緩衰老等多種藥理作用。對黃精化學(xué)成分的研究表明黃精含有黃精皂苷，菸酸，糖類，醌類，氨基酸及微量元素。近年來對黃精多糖的研究取得一些很有意義的進展，藥理學(xué)研究證明黃精多糖具有免疫激發(fā)，增強免疫，延緩衰老，抗病毒等作用，黃精多糖是黃精生物學(xué)活性物質(zhì)的一個非常重要的成分。
近十余年來，由于膜化學(xué)、免疫物質(zhì)的化學(xué)研究和發(fā)展以及新藥資源尋找與研究等方面的進展，發(fā)現(xiàn)糖類參與了生命現(xiàn)象中細胞和機體的各種活動，具有多種多樣的生物學(xué)功能，因而對糖的研究逐漸活躍，尤其對分子量幾千左右，具很強生物活性多糖的研究曰益受到重視，其生理活性、化學(xué)結(jié)構(gòu)以及相互關(guān)系成為多糖研究的熱點，取得了很大的進展。
在抗病毒和抗炎方面的實驗表明，黃精多糖具有極強地抗病毒和抗炎癥活性。用家兔眼結(jié)膜、角膜炎癥模型，口服黃精多糖，視察黃精多糖的抗炎藥理研究結(jié)果表明，黃精多糖消除兔模型結(jié)膜充血、水腫、分泌物增加、角膜混濁、睫狀充血等局部表現(xiàn)；能明顯抑制小鼠耳廓腫脹、大鼠足趾腫脹；降低大鼠肉芽腫的重量，減少肉芽腫內(nèi)滲出；對治療大鼠免疫性關(guān)節(jié)炎的原發(fā)病灶和繼發(fā)病變有顯著療效。用0.2％黃精多糖液、2mg/ml黃精多糖注射液及0.5％黃精多糖口服液三種黃精多糖制劑治療家兔實驗性單純皰疹病毒性角膜炎，與無環(huán)鳥苷治療組及氯霉素組進行對照，結(jié)果表明各種黃精多糖制劑組與氯霉素組比較，療效均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)；黃精多糖滴眼液配合黃精多糖注射液結(jié)膜下注射和黃精多糖滴眼液配合黃精多糖口服液2組療效優(yōu)于無環(huán)鳥苷組(P＜0.05)；從中藥黃精的塊狀根莖中用水提醇沉法制備的黃精多糖，純度大于90％，作體外細胞培養(yǎng)抗單純皰疹病毒II型實驗，分別用1.感染病毒后再加入供試黃精多糖2.病毒和供試黃精多糖同時加入細胞培養(yǎng)3.培養(yǎng)細胞中先加入供試黃精多糖再感染病毒三種不同實驗條件測試黃精多糖的抗病毒活性，以無環(huán)鳥苷作為陽性對照。結(jié)果表明供試黃精多糖具有明顯的抗HSV-II的作用，在濃度0.1---0.8％范圍內(nèi)均無細胞毒性反應(yīng)(無細胞病變及損傷)，空斑抑制率分別為95.31％、100％、100％；且以濃度為0.4％-----0.8％的黃精多糖先作用細胞后再感染HSV-II時，可見對細胞的保護作用，提高了空斑抑制率。
二癸基-二甲基溴化銨是一種雙鏈季銨鹽型殺菌劑(DidecylDimethyl Ammonium Bromide)由兩條石蠟長鏈取代兩個原子團，使殺菌力倍增，再結(jié)合殺菌力強的原子使分子中的親水性和親脂基團比一般單鏈季銨鹽化合物強幾倍。從而使雙鏈季銨化合物無論是殺菌能力還是親水、親脂性方面都是一般單鏈季銨鹽化合物所不能比擬的。
蛇床子，苦參，百部，大黃，黃柏等中藥，長期作為外用中藥，對皮膚病有一定療效。
基于上述，本發(fā)明的目的是以黃精多糖和中藥水提物及二癸基-二甲基溴化銨為主要成分，制成一種具廣譜殺菌和抗單純皰疹病毒外用液體制劑以及該制劑的用途。
本發(fā)明的技術(shù)關(guān)鍵及方案是先從中藥黃精中提取分離出具抗病毒活性的黃精多糖，再將具殺菌止癢功能的中藥配伍進行提取得中藥水提物，添加高效殺菌成份雙鏈季銨鹽-----二癸基-二甲基溴化銨并按一定配比混合再添加丙二醇制成具高效殺菌和抗單純皰疹病毒活性的外用液體制劑并將該制劑進行應(yīng)用。
下面詳細介紹該制劑的制作和應(yīng)用一、黃精多糖的制備1、原料藥，黃精生藥以選擇無霉變、顏色黃純、無雜什的中藥黃精塊根為原料?！吨袊幍洹肥蛰d的3種黃精即黃精polygonatum sibiricumRed.，多花黃精P.cyrtonema Hua及滇黃精P.kingianum Coll.et Hemsl.之一種或多種，以多花黃精P.cyrtonema Hua品種療效更好。2、洗滌干凈，切片。3、干燥(可用烘干設(shè)備等，干燥至含水量12％左右為宜)，粉碎成細顆粒。4、乙醇回流，將粉碎后的黃精生藥投入回流容器中，用高濃度乙醇(70％以上的乙醇)進行回流處理，去除色素等小分子物質(zhì)。5、過濾、浸提，可用濾器(也可用離心設(shè)備)過濾，取濾渣供浸提黃精多糖用，乙醇回收蒸餾后再用。用適當濃度的乙醇(30～60％)浸提濾渣，提取具生物活性的黃精多糖浸提液備用。6、濃縮，采用負壓濃縮至含糖量為＞10％。7、冷藏保存黃精多糖濃縮液備用。二、中藥水提物的制備。將中藥蛇床子、苦參、百部、大黃、黃柏(按等量)混合水煎煮沸10--30分鐘，取水煎液，連續(xù)三次水煎，三次水煎液混合。用少量70％乙醇將冰片(用量為中藥水煎液的0.5-1.0％)溶解后加入中藥水煎液中。三、本發(fā)明的主要成分配比黃精多糖含量 1---3％二癸基-二甲基溴化銨， 0.1％---0.2％中藥(蛇床子、苦參、百部等)提取物 20％----50％丙二醇5％-----10％去離子水 余量先量取總體積20--30％的去離子水，再加入占總體積10-30％的黃精多糖濃縮液，攪拌溶解后，加入二癸基-二甲基溴化銨，中藥提取物混合，攪拌下逐漸加10％的脂肪醇聚氧乙烯醚水溶液，直至溶液澄清，然后加入丙二醇，并加去離子水至100％，攪拌均勻。若添加相應(yīng)適當?shù)幕|(zhì)和輔料，可開發(fā)生產(chǎn)成不同的產(chǎn)品形式，如軟膏劑，霜劑，栓劑等。四、本制劑定量殺菌效果在25℃下檢測，對大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、白色念珠菌，分別以奧得福爾消毒液制劑原液1∶1稀釋液及1∶5稀釋液作用1分鐘、5分鐘、10分鐘、20分鐘、30分鐘，結(jié)果該消毒劑原液1∶1稀釋液作用1分鐘，對大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、白色念珠菌對殺滅率達99.9％以上；消毒劑原液1∶5稀釋液作用10分鐘，對大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、白色念珠菌殺滅率均達99.9％以上，且殺滅率隨作用時間延長，消毒液濃度增加而上升。
本制劑安全性試驗結(jié)果1.小鼠經(jīng)口急性毒性試驗結(jié)果表明本制劑為實際無毒。2.大鼠皮膚刺激試驗結(jié)果表明本制劑對大鼠皮膚無刺激。3.家兔眼粘膜刺激試驗結(jié)果表明本制劑對家兔眼粘膜無刺激性。
本發(fā)明具有以下優(yōu)點1、制作工藝簡單；2、無毒；3、應(yīng)用廣泛。
實施例1本廣譜抗病毒殺菌外用液體制劑的生產(chǎn)制備，原料黃精多糖1-3％；二癸基-二甲基溴化銨1％；中藥(蛇床子、苦參、百部等)提取物50％；丙二醇10％；脂肪醇聚氧乙烯醚(乳化劑)適量；去離子水加至100％。配制方法先量取總體積20--30％的去離子水，加入黃精多糖，攪拌溶解后，加入二癸基-二甲基溴化銨，中藥提取物混合，攪拌下逐漸加入10％的脂肪醇聚氧乙烯醚水溶液，直至溶液澄清，然后加入丙二醇，并加去離子水至100％，攪拌均勻。實施例2采用實施例1生產(chǎn)工藝制備的黃精多糖和中藥水提取物及二癸基-二甲基溴化銨為主要功效成分制備的外用液體制劑，經(jīng)藥效和藥理試驗及安全性試驗表明，本組合物液體制劑對大腸桿菌、金黃色葡萄球菌和白色念珠菌作用10分鐘，殺滅率均可達99.9％以上；本組合物液體制劑放置室溫下穩(wěn)定，有機物的存在對殺滅作用有輕度影響，但殺滅率仍可達99.9％以上；體外抗病毒試驗結(jié)果表明，該制劑的主要抗病毒功效成分------黃精多糖，對單純皰疹病毒的空斑抑制率達到100％；穩(wěn)定性試驗表明，該制劑常溫下存放一年其殺菌率不變；動物急性毒性試驗表明本品屬實際無毒級；對正常皮膚無刺激性；家兔眼刺激試驗表明對眼粘膜無刺激性。實施例3本組合物液體制劑臨床治療生殖器皰疹應(yīng)用效果有如下77例，男性38例，女性39例，年齡最大為56歲，最小為18歲，診斷標準生殖器皰疹采用PCR或酶聯(lián)免疫確診，療效標準顯效為臨床癥狀消失或明顯減輕，有效為臨床癥狀減輕。生殖器皰疹治愈為臨床癥狀消失60天以上，顯效為臨床癥狀消失或明顯減輕，有效為臨床癥狀減輕。臨床應(yīng)用結(jié)果表明本組合物液體制劑對單純皰疹病毒感染引起的生殖器皰疹，治愈率為76.6％，顯效率為92.2％；總有效率為96.1％。實施例4本組合物液體制劑臨床治療細菌性和真菌性陰道炎42例，診斷標準細菌性和真菌性陰道炎由菌檢確診。療效標準細菌性和真菌性陰道炎治愈為臨床癥狀消失60天以上，菌檢為陰性者；顯效為臨床癥狀消失或明顯減輕，菌檢為陽性者；有效為臨床癥狀減輕，菌檢為陽性者。治療結(jié)果表明，本組合物液體制劑對細菌性和真菌性感染引起的陰道炎具有很好的治療作用，治愈率為84.4％％，顯效率為93.3％，總有效率為100％。
權(quán)利要求
1.一種由黃精多糖和中藥水提物及二癸基-二甲基溴化銨為主要功效成分組成的廣譜殺菌和抗單純皰疹病毒外用液體制劑，其特征是由采用生化技術(shù)從中藥黃精中提取的抗病毒生物活性成分黃精多糖以及中藥水提物和二癸基-二甲基溴化銨及丙二醇組成并按一定比例混勻制備而成的的液體制劑。
2.如權(quán)利要求1所述的外用液體制劑，其特征是制劑的組成為黃精多糖含量1～3％二癸基-二甲基溴化銨 0.1％中藥(蛇床子、苦參、百部等)提取物 50％丙二醇 10％脂肪醇聚氧乙烯醚(乳化劑) 1～5％去離子水補加至100％
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的外用液體制劑，其特征是黃精多糖采用中藥黃精切片干燥，粉碎，70％以上高濃度乙醇去除小分子物質(zhì)，過濾后用30-60％乙醇提取濾渣，得到黃精多糖浸提液。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述外用液體制劑，其特征是中藥提取物采用蛇床子5-20％、苦參5-20％、百部5-20％、冰片1-3％、大黃10-20％、黃柏10-20％混合水煎，水煎液負壓濃縮而得。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的外用液體制劑，其特征是具有快速殺滅革蘭氏陽性細菌、革蘭氏陰性細菌、真菌和單純皰疹病毒作用。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的外用液體制劑，其特征是可用于治療和預(yù)防生殖器部位的性疾病病原物感染。
7.據(jù)權(quán)利要求5所述的外用液體制劑，其特征是可用于治療和預(yù)防病毒性皮膚病包括口唇皰疹、眼皰疹、皰疹性甲溝炎、濕疹性皰疹及全身性單純皰疹。
8.根據(jù)權(quán)利要求5所述的液體制劑，其特征是可用于治療和預(yù)防細菌性皮膚病如.淋病(gonorrhea)、金黃色葡萄球菌性燙傷樣綜合癥(staphylococcal scalded skin syndrome，SSSS)毛囊炎、癤及癤病、膿皰瘡(impetigo vulgaris)、細菌性陰道病(bacterial vaginosis，BV)、增殖性皮炎(dermatitis vegetans)、棒狀桿菌癬樣紅斑(dermatomycoid erythemacorynebacteris)、腋毛棒狀桿菌病(corynebacteriasis axillaris)、窩狀角質(zhì)松解癥(pitted keratolysis)。
9.據(jù)權(quán)利要求5所述的外用液體制劑，其特征是可用于治療和預(yù)防真菌性皮膚病及性病(Dermatoses and veneroses due to Fungi)如念珠菌病(candidiasis)。
10.根據(jù)權(quán)利要求5所述的外用液體制劑，其特征是可用于治療和預(yù)防生殖器部位非性傳播疾病包括瘙癢癥(pruritus)、陰道毛滴蟲病、燙傷、燒傷及創(chuàng)口的抗感染。
11.根據(jù)權(quán)利要求1所述的液體制劑，其特征是適合制成噴霧劑或涂抹液體制劑或洗滌劑。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種外用液體制劑的配制和用途，制劑采用黃精多糖和中藥水提物及二癸基－二甲基溴化銨為主要功效成分配制而成，具有制作工藝簡單、無毒、應(yīng)用廣泛的特點，可快速殺滅革蘭氏陽性細菌、革蘭氏陰性細菌、真菌和單純皰疹病毒的作用，且無毒副作用。
文檔編號A61K9/08GK1411802SQ0112893
公開日2003年4月23日 申請日期2001年10月8日 優(yōu)先權(quán)日2001年10月8日
發(fā)明者石林, 何開澤, 譚健, 李偉, 蒲薔, 蒙義文 申請人:中國科學(xué)院成都生物研究所