專利名稱：(－)－順－2－(2－氯苯基)－5,7－二羥基－8[4r－(3s－羥基－1－甲基)哌啶基]－4h ...的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明的技術(shù)背景(-)-順-2-(2-氯苯基)-5，7-二羥基-8[4R-(3S-羥基-1-甲基)哌啶基]-4H-1-苯并吡喃-4-酮化合物或一種其藥學(xué)上可接受的鹽形式(被稱作″Flavopiridol″)是一種免疫調(diào)節(jié)劑和抗炎劑(美國(guó)專利US4900727)，以及是致癌基因-編碼的激酶或生長(zhǎng)因子受體酪氨酸激酶的抑制劑(美國(guó)專利US5284856)。Flavopiridol是一種細(xì)胞周期蛋白依賴激酶(CDKs)的強(qiáng)抑制劑，具有通過(guò)與cdk抑制有關(guān)的多機(jī)制來(lái)抑制G1和G2中的細(xì)胞循環(huán)進(jìn)程的潛力，所述細(xì)胞周期蛋白依賴激酶包括CDK1，CDK2，CDK4，CDK6和CDK7(cdk1/細(xì)胞周期蛋白B；cdk2/細(xì)胞周期蛋白A；cdk2/細(xì)胞周期蛋白E；cdk4/細(xì)胞周期蛋白D；cdk6/細(xì)胞周期蛋白D；cdk7/細(xì)胞周期蛋白H)。參見(jiàn)國(guó)際腫瘤學(xué)雜志(International Journal ofOncology)91143-1168(1996)。Flavopiridol還被證實(shí)能夠抑制EGF受體家族，受體相關(guān)性SRC家族激酶和信號(hào)傳導(dǎo)激酶。體外和體內(nèi)實(shí)驗(yàn)已經(jīng)證實(shí)Flavopiridol能夠抑制多種類型的人體腫瘤，白血病和淋巴瘤。
(-)-順-2-(2-氯苯基)-5，7-二羥基-8[4R-(3S-羥基-1-甲基)哌啶基]-4H-1-苯并吡喃-4-酮或其一種藥學(xué)上可接受的鹽與溶劑如乙醇、DMSO、甲醇、乙腈/異丙醇、乙醇/異丙醇和異丙醇結(jié)晶成數(shù)目眾多的溶劑化物以及溶劑化物水合物，如乙醇/和異丙醇/水的組合。優(yōu)選的溶劑化物形式是Flavopiridol鹽酸鹽乙醇溶劑化物形式(下文被稱作“II型”)。
與其它用于制備溶劑化物的溶劑相比(例如，甲醇、異丙醇溶劑化物)，使用乙醇具有毒性小的優(yōu)點(diǎn)。
本發(fā)明的主題是II型的(-)-順-2-(2-氯苯基)-5，7-二羥基-8[4R-(3S-羥基-1-甲基)哌啶基]-4H-1-苯并吡喃-4-酮，這指的是乙醇與(-)-順-2-(2-氯苯基)-5，7-二羥基-8[4R-(3S-羥基-1-甲基)哌啶基]-4H-1-苯并吡喃-4-酮鹽酸鹽的溶劑化物。所述II型可以通過(guò)利用CuK-α輻射獲得的下列X-射線粉末衍射圖來(lái)描述D間隙-(D Space-)12.7636.3893.19413.2444.259以及更優(yōu)選地為D間隙-12.7636.3893.19413.2444.25912.0362.8248.6596.0125.3973.447。II型還可被進(jìn)一步定義為
II型還可被進(jìn)一步定義為
II型還可如表1所定義表1
II型可被用作藥物，任選地與藥學(xué)可接受載體和/或賦形劑結(jié)合。而且它可被用于制備(-)-順-2-(2-氯苯基)-5，7-二羥基-8[4R-(3S-羥基-1-甲基)哌啶基]-4H-1-苯并吡喃-4-酮的其它多晶型物或假多晶型物。
II型是吸濕性的。其能夠以不含水的形式或者以具有一定含水量的形式進(jìn)行使用。以基本不含水的形式進(jìn)行使用是優(yōu)選的。
本發(fā)明的另一個(gè)主題是一種用于制備II型的(-)-順-2-(2-氯苯基)-5，7-二羥基-8[4R-(3S-羥基-1-甲基)哌啶基]-4H-1-苯并吡喃-4-酮的方法。II型的(-)-順-2-(2-氯苯基)-5，7-二羥基-8[4R-(3S-羥基-1-甲基)哌啶基]-4H-1-苯并吡喃-4-酮的制備方法的步驟是a)將足量的(-)-順-2-(2-氯苯基)-5，7-二羥基-8[4R-(3S-羥基-1-甲基)哌啶基]-4H-1-苯并吡喃-4-酮鹽酸鹽溶解在足量的乙醇中從而形成一種混合物；b)將所述混合物加熱到約50至約80℃；c)任選地從所述混合物中濾掉不溶性物質(zhì)從而形成一種溶液；d)濃縮所述溶液直到約50至約90％的揮發(fā)物被除去；
e)冷卻所述溶液，例如冷卻到0至10℃并且任選地分離如此獲得的(-)-順-2-(2-氯苯基)-5，7-二羥基-8[4R-(3S-羥基-1-甲基)哌啶基]-4H-1-苯并吡喃-4-酮鹽酸鹽晶體；并且f)任選地干燥如此獲得的晶體。
一種“足量”的(-)-順-2-(2-氯苯基)-5，7-二羥基-8[4R-(3S-羥基-1-甲基)哌啶基]-4H-1-苯并吡喃-4-酮鹽酸鹽是指所述量足以按照本發(fā)明的步驟被溶解和加熱從而形成足夠的要被回收的晶體。同樣，一種“足量”的乙醇是指所述量足以溶解至少一部分被加入其中的(-)-順-2-(2-氯苯基)-5，7-二羥基-8[4R-(3S-羥基-1-甲基)哌啶基]-4H-1-苯并吡喃-4-酮鹽酸鹽以便溶解其中的一部分。這些量可以通過(guò)實(shí)驗(yàn)來(lái)確定。
所述“揮發(fā)物”是指可以在加熱過(guò)程中被蒸發(fā)的那些試劑如乙醇和/或水。
本發(fā)明還包括一種含有治療有效量的II型和一種藥學(xué)可接受載體的藥物組合物。
一種“藥學(xué)可接受載體”是一種非毒性的不干擾II型的治療過(guò)程以及適用于所述給藥方法的物質(zhì)。在癌癥化療的適當(dāng)階段，II型優(yōu)選地通過(guò)靜脈內(nèi)途徑給藥。優(yōu)選地II型與一種或多種藥學(xué)可接受載體混合。例如，II型可以與用于給患者進(jìn)行靜脈內(nèi)注射的等滲和pH調(diào)節(jié)用液體如水、葡萄糖/水或鹽水/水混合。
II型的“治療有效量”隨個(gè)體、合并治療、疾病和其它不定因素而變化。通常，該量大約為每天0.001mg/kg至100mg/kg。
II型被用作一種蛋白激酶抑制劑和細(xì)胞周期蛋白依賴激酶抑制劑，并且被用來(lái)治療不同類型的癌癥。合成在所述的制備方法的步驟a)中，將一份的(-)-順-2-(2-氯苯基)-5，7-二羥基-8[4R-(3S-羥基-1-甲基)哌啶基]-4H-1-苯并吡喃-4-酮溶解在10至30，優(yōu)選地15至25，更優(yōu)選地19至21份的乙醇中。優(yōu)選地，使用基本不含水的乙醇。按照美國(guó)專利US 5,284,856中公開(kāi)的方法可以得到(-)-順-2-(2-氯苯基)-5，7-二羥基-8[4R-(3S-羥基-1-甲基)哌啶基]-4H-1-苯并吡喃-4-酮；優(yōu)選地，(-)-順-2-(2-氯苯基)-5，7-二羥基-8[4R-(3S-羥基-1-甲基)哌啶基]-4H-1-苯并吡喃-4-酮按照下述實(shí)施例1中記載的方法來(lái)制備。
將獲得的所述混合物優(yōu)選地加熱一小時(shí)，使其溫度達(dá)到50至80，優(yōu)選地60至80和更優(yōu)選地70至79℃。如果觀察到所述溶液中有固體物質(zhì)存在，優(yōu)選地趁所述溶液仍然熱的時(shí)候，將所述固體物質(zhì)濾掉。
得到的溶液通過(guò)利用本技術(shù)領(lǐng)域的技術(shù)人員已知的方法進(jìn)行濃縮，優(yōu)選地通過(guò)在大氣壓下或低壓條件下進(jìn)行蒸餾來(lái)濃縮。濃縮一直進(jìn)行到有50-90％，優(yōu)選地55至85％，更優(yōu)選地60至80％的揮發(fā)物被除去。
將剩余的懸浮液冷卻，優(yōu)選地冷卻到0至10℃，并且優(yōu)選地通過(guò)過(guò)濾將得到的晶體從所述懸浮液中除去。
將得到的晶體干燥，優(yōu)選地在低壓條件下進(jìn)行干燥。
實(shí)施例1II型的合成在氮?dú)鈼l件下將(-)-順-1-甲基-4R-(2，4，6-三甲氧苯基)-3S-哌啶醇和醋酸酐裝到一個(gè)反應(yīng)器中。在攪拌和將得到的溶液冷卻到8-20℃的同時(shí)，以恒定的速率加入醚合三氟化硼。加完后，在20-30℃的條件下將所述混合物攪拌3-5小時(shí)。將所述反應(yīng)混合物冷卻到8-12℃并在攪拌過(guò)程中加入冰水然后通過(guò)加入氫氧化鈉水溶液使pH達(dá)到10-11。采用乙酸乙酯提取所述混合物。合并乙酸乙酯提取物并進(jìn)行真空濃縮。剩余物被吸收在甲醇和水中。然后加入氫氧化鈉(大約50％的水溶液)。將所述反應(yīng)混合物在20-30℃的條件下攪拌2-3小時(shí)。在低壓和≤80℃的條件下蒸發(fā)所述混合物。將剩余物冷卻到15-20℃并利用濃鹽酸將剩余物的pH調(diào)到8.5-9.5。過(guò)濾收集的固體沉淀用軟化水進(jìn)行沖洗并在減壓下進(jìn)行干燥從而得到(-)-順-1-甲基-4-(3-乙?；?4，6-二甲氧基-2-羥基)苯基-3-哌啶醇。
然后以不使溫度超過(guò)20℃的速率將(-)-順-1-甲基-4-(3-乙酰基-4，6-二甲氧基-2-羥基)苯基-3-哌啶醇分批加到被攪拌的叔丁醇鉀于干燥的N，N-二甲基甲酰胺當(dāng)中的懸浮液中。加完后，將得到的混合物在≤30℃的條件下攪拌一個(gè)小時(shí)。以不使溫度超過(guò)30℃的速率加入2-氯苯甲酸甲酯。將得到的混合物在20-30℃的條件下攪拌4-6小時(shí)。加入軟化水后用濃鹽酸將混合物的pH調(diào)到6-8。利用氯仿將所述混合物提取兩次。將所述氯仿提取物合并在一起并在減壓下進(jìn)行濃縮。
將剩余的油冷卻到40℃后，加入濃縮鹽酸。然后在≤40℃的條件下將所述混合物攪拌≤2小時(shí)，如果必要攪拌過(guò)夜。將所述混合物冷卻到15-30℃后加入水和氯仿。利用氫氧化鈉溶液(50％)將得到的混合物堿化到pH 8.5-10.5。進(jìn)行相分離。然后利用氯仿提取水層。在減壓下蒸發(fā)合并的有機(jī)提取物從而得到(-)-順-2-(2-氯苯基)-5，7-二羥基-8[4R-(3S-羥基-1-甲基)哌啶基]-4H-1-苯并吡喃-4-酮的油狀物，該產(chǎn)物不需要純化就被直接用于下一個(gè)步驟。
向(-)-順-2-(2-氯苯基)-5，7-二羥基-8[4R-(3S-羥基-1-甲基)哌啶基]-4H-1-苯并吡喃-4-酮中加入喹啉和吡啶鹽酸鹽。將得到的混合物邊攪拌邊加熱到160-190℃。將溫度保持在160-190℃下繼續(xù)攪拌2小時(shí)。將所述反應(yīng)混合物冷卻到90-110℃后加入水。利用飽和的碳酸鈉溶液將得到的混合物堿化到pH 7.5-8.5。利用乙醇和氯仿的混合物將所述混合物提取兩次。將合并的提取物蒸發(fā)至干從而得到(+)-順-2-(2-氯苯基)-5，7-二羥基-8[4R-(3S-羥基-1-甲基)哌啶基]-4H-1-苯并吡喃-4-酮粗品，為褐色膠狀，該粗品通過(guò)下述方法被純化。
向(+)-順-2-(2-氯苯基)-5，7-二羥基-8[4R-(3S-羥基-1-甲基)哌啶基]-4H-1-苯并吡喃-4-酮粗品中加入丙酮。在55-60℃下將得到的混合物攪拌30-60分鐘，然后冷卻到15-20℃再攪拌1-2小時(shí)。過(guò)濾分離沉淀的固體，用丙酮沖洗兩次并在減壓下進(jìn)行干燥從而得到純化形式的(+)-順-2-(2-氯苯基)-5，7-二羥基-8[4R-(3S-羥基-1-甲基)哌啶基]-4H-1-苯并吡喃-4-酮。
將從上述步驟得到的游離堿懸浮在乙醇中并利用濃鹽酸以溫度不超過(guò)30℃的速率進(jìn)行酸化。在這一過(guò)程中，最初所有固體都溶解了，然后鹽酸鹽沉淀出來(lái)。將懸浮液冷卻到0-10℃并在維持溫度的條件下攪拌1小時(shí)。過(guò)濾分離結(jié)晶并用冷卻的乙醇沖洗從而得到(-)-順-2-(2-氯苯基)-5，7-二羥基-8[4R-(3S-羥基-1-甲基)哌啶基]-4H-1-苯并吡喃-4-酮鹽酸鹽粗品。
向(-)-順-2-(2-氯苯基)-5，7-二羥基-8[4R-(3S-羥基-1-甲基)哌啶基]-4H-1-苯并吡喃-4-酮鹽酸鹽粗品中加入乙醇。將得到的混合物加熱到70-90℃，在維持溫度的條件下攪拌1小時(shí)，然后趁熱過(guò)濾。用熱乙醇清洗濾器。通過(guò)在大氣壓下進(jìn)行蒸餾濃縮所述濾液，直到大約50％至90％的揮發(fā)物被除去。然后將剩余懸浮液冷卻到0-10℃，進(jìn)行過(guò)濾分離并在減壓下進(jìn)行干燥從而得到被純化為黃色固體的(-)-順-2-(2-氯苯基)-5，7-二羥基-8[4R-(3S-羥基-1-甲基)哌啶基]-4H-1-苯并吡喃-4-酮鹽酸鹽的乙醇溶劑化物。
Flavopiridol被用于許多病癥的治療，而這種治療的效果是通過(guò)蛋白激酶的抑制，更具體地是通過(guò)上文記載的細(xì)胞周期蛋白依賴激酶的抑制達(dá)到的。預(yù)計(jì)Flavopiridol可被用于例如包括白血病、間皮瘤和肺癌(大細(xì)胞、小細(xì)胞和非小細(xì)胞)、結(jié)腸癌、乳腺癌、卵巢癌、前列腺癌、黑色素瘤、腎癌、子宮體瘤和中樞神經(jīng)系統(tǒng)癌癥在內(nèi)的多種癌癥的治療。
本文引用的所有文章和專利被作為參考。
權(quán)利要求
1.II型的(-)-順-2-(2-氯苯基)-5，7-二羥基-8[4R-(3S-羥基-1-甲基)哌啶基]-4H-1-苯并吡喃-4-酮。
2.II型的(-)-順-2-(2-氯苯基)-5，7-二羥基-8[4R-(3S-羥基-1-甲基)哌啶基]-4H-1-苯并吡喃-4-酮，其中II型的特征在于利用Cu K-α輻射獲得的下列X-射線粉末衍射圖D間隙-12.7636.3893.19413.2444.259。
3.II型的(-)-順-2-(2-氯苯基)-5，7-二羥基-8[4R-(3S-羥基-1-甲基)哌啶基]-4H-1-苯并吡喃-4-酮，其中II型的特征在于利用Cu K-α輻射獲得的下列X-射線粉末衍射圖
4.II型的(-)-順-2-(2-氯苯基)-5，7-二羥基-8[4R-(3S-羥基-1-甲基)哌啶基]-4H-1-苯并吡喃-4-酮，其中II型的特征在于利用Cu K-α輻射獲得的下列X-射線粉末衍射圖
5.一種制備II型的(-)-順-2-(2-氯苯基)-5，7-二羥基-8[4R-(3S-羥基-1-甲基)哌啶基]-4H-1-苯并吡喃-4-酮的方法，包括下列步驟a)將足量的(-)-順-2-(2-氯苯基)-5，7-二羥基-8[4R-(3S-羥基-1-甲基)哌啶基]-4H-1-苯并吡喃-4-酮鹽酸鹽溶解在足量的乙醇中從而形成一種混合物；b)將所述混合物加熱到約50至約80℃；c)任選地從所述混合物中濾掉不溶性物質(zhì)從而形成一種溶液；d)濃縮所述溶液直到約50至約90％的揮發(fā)物被除去；e)冷卻所述溶液并且任選地分離如此獲得的(-)-順-2-(2-氯苯基)-5，7-二羥基-8[4R-(3S-羥基-1-甲基)哌啶基]-4H-1-苯并吡喃-4-酮鹽酸鹽晶體；并且f)任選地干燥如此獲得的晶體。
6.如權(quán)利要求5所述的方法，其中將所述溶液冷卻到約0至約10℃。
7.II型的(-)-順-2-(2-氯苯基)-5，7-二羥基-8[4R-(3S-羥基-1-甲基)哌啶基]-4H-1-苯并吡喃-4-酮，其通過(guò)下列步驟制得a)將足量的(-)-順-2-(2-氯苯基)-5，7二羥基-8[4R-(3S-羥基-1-甲基)哌啶基]-4H-1-苯并吡喃-4酮鹽酸鹽溶解在足量的乙醇中從而形成一種混合物；b)將所述混合物加熱到約50至約80℃；c)任選地從所述混合物中濾掉不溶性物質(zhì)從而形成一種溶液；d)濃縮所述溶液直到約50至約90％的揮發(fā)物被除去；e)冷卻所述溶液并且任選地分離如此獲得的(-)-順-2-(2-氯苯基)-5，7-二羥基-8[4R-(3S-羥基-1-甲基)哌啶基]-4H-1-苯并吡喃-4-酮鹽酸鹽晶體；并且f)任選地干燥如此獲得的晶體。
8.一種含有治療有效量的II型的(-)-順-2-(2-氯苯基)-5，7-二羥基-8[4R-(3S-羥基-1-甲基)哌啶基]-4H-1-苯并吡喃-4-酮和藥學(xué)上可接受載體的藥物組合物。
9.如權(quán)利要求1，2，3或4所述的II型用于制備一種治療癌癥患者的藥物組合物的用途。
10.如權(quán)利要求1，2，3或4所述的II型作為一種藥物活性化合物的用途。
全文摘要
一種乙醇溶劑化物形式的(－)－順－2－(2－氯苯基)－5，7－二羥基－8[4R－(3S－羥基－1－甲基)哌啶基]－4H－1－苯并吡喃－4－酮(II型)，一種制備II型的方法和一種含有II型的組合物。
文檔編號(hào)A61P35/00GK1395577SQ01803857
公開(kāi)日2003年2月5日 申請(qǐng)日期2001年1月8日 優(yōu)先權(quán)日2000年1月18日
發(fā)明者K·M·凱塞勒 申請(qǐng)人:阿溫蒂斯藥物公司