專利名稱：含有藻酸鹽的藥物組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種治療和/或預(yù)防哺乳動(dòng)物粘膜損傷的藥物組合物。特別地，本發(fā)明涉及含有水溶性藻酸鹽的藥物組合物。
哺乳動(dòng)物的胃腸(GI)道由口腔、食管、胃、小腸和大腸組成。這個(gè)管道內(nèi)層被稱作粘膜的細(xì)胞層覆蓋，口腔和食管的粘膜由非角質(zhì)化的鱗狀上皮細(xì)胞重疊而成，其余部位則由柱狀上皮重疊而成。這些粘膜時(shí)常會(huì)遭受大量的侵襲，包括-機(jī)械性損傷和/或飲食的冷/熱刺激；-接觸來自胃和十二指腸的內(nèi)容物(反流)；和-系統(tǒng)性的和/或局部性的粘膜損傷，例如由前列腺素抑制劑(阿司匹林)或消炎痛作用所引起的。
上述所有的侵襲(特別是反流)都會(huì)造成受侵襲部位的粘膜損傷，這種損傷本身可以引起食管炎(粘膜的炎癥)，而且，在受到嚴(yán)重或長期的侵襲時(shí)，會(huì)導(dǎo)致Barrett食管(即食管下段由柱狀上皮覆蓋)。
上胃腸道有很多對抗上述侵襲的防御機(jī)能，其中包括-分泌粘液和碳酸氫鹽，一般認(rèn)為此功能兼有保護(hù)和中和作用；-分泌唾液可潤滑食管并提高口腔和食管的pH值；-食管下段或賁門括約肌可將胃內(nèi)容物禁閉在胃內(nèi)；-通過吞咽動(dòng)作產(chǎn)生蠕動(dòng)或清除，咀嚼過的食物團(tuán)隨蠕動(dòng)波經(jīng)食管到達(dá)胃。
但是，這些防御通常是不夠的，口腔、食管和/或胃的粘膜或細(xì)胞層的損傷時(shí)有發(fā)生。所有這些損傷的特點(diǎn)是粘膜的表層細(xì)胞受到損傷。
GB-A-2324725公開了一種適于覆蓋胃腸道的粘膜粘著劑的藥物組合物，該組合物含有甘露糖醛酸基和古洛糖醛酸基的比例(M/G)至少為1的藻酸鹽或藻酸。公開的這種組合物含有低粘度低分子量的藻酸鹽和高粘度高分子量的藻酸鹽。
GB-A-2324724公開了一種藥物組合物，該組合物含有高濃度(例如8-15％w/w)的且M/G比至少為0.6∶1的藻酸鈉。
EP-A-0059221公開了一種用于保護(hù)胃腸道的組合物，該組合物含有水溶性的藻酸鹽。這種水溶性鹽的分子量為60,000-250,000。
WO 91/11205公開了一種治療傷口的方法，該方法包括給傷口施用含有至少70％摩爾β-D-甘露糖醛酸鹽(酯)的生物高聚物組合物。該說明書提出，藻酸鹽生物高聚物可制成纖維并經(jīng)紡紗、織造、混合或其他途徑進(jìn)入傷口敷料。對于象潰瘍這樣的內(nèi)部損傷，生物高聚物可作為一種溶液涂在胃腸道內(nèi)壁上。
因此，需要一種可用于哺乳動(dòng)物粘膜損傷修復(fù)的藥物組合物。
還需要可用于哺乳動(dòng)物粘膜損傷修復(fù)的藥物組合物的制造方法。
根據(jù)本發(fā)明的第一個(gè)方面，本發(fā)明提供了一種用于細(xì)胞修復(fù)的藥物組合物，該組合物含有重量體積百分比為0.0001％w/v到2.0％w/v、分子量為從250,000以上到1000,000的藻酸或藻酸鹽，條件是如果這種組合物還含有分子量為20,000到250,000的藻酸或藻酸鹽，則其含量小于1％w/w。
所提到的分子量都指重均分子量(MW)。
中請人驚奇地發(fā)現(xiàn)，上文所述的藻酸或藻酸鹽的用量明顯少于現(xiàn)有技術(shù)所教導(dǎo)的有效量，但在哺乳動(dòng)物的細(xì)胞，尤其是粘膜細(xì)胞的修復(fù)中仍然是有效的。
根據(jù)本發(fā)明，術(shù)語“粘膜”包含哺乳動(dòng)物胃腸道內(nèi)壁覆蓋的組織層。所以，粘膜由含有大量粘液腺的上皮層和網(wǎng)狀的下層以及淋巴組織構(gòu)成。
本發(fā)明注意到這樣一個(gè)事實(shí)，那就是粘膜細(xì)胞的修復(fù)由細(xì)胞所表現(xiàn)的下列一個(gè)或多個(gè)特征得到了證實(shí)
-胞吞作用和/或邊緣波動(dòng)；-細(xì)胞間的粘附性下降；-細(xì)胞的能動(dòng)性增加，例如傷口的修復(fù)；和-表皮生長因子(EGF)的類似反應(yīng)，例如，表皮生長因子受體(EGFr)的興奮。
所以，本發(fā)明提供了一種藥物組合物，該藥物組合物可促進(jìn)前述的以下一個(gè)方面或多個(gè)方面-胞吞作用和/或邊緣波動(dòng)；-細(xì)胞間的粘附性下降；-細(xì)胞的能動(dòng)性增加；和-細(xì)胞，尤其是粘膜細(xì)胞內(nèi)表皮生長因子受體(EGFr)的興奮。
申請人驚奇地發(fā)現(xiàn)，在促進(jìn)胞吞作用和/或細(xì)胞邊緣波動(dòng)活動(dòng)性，和/或降低細(xì)胞間的粘附性，和/或增加細(xì)胞的能動(dòng)性，和/或模仿被細(xì)胞上的EGFr激活的表皮生長因子的作用方面，高分子量的藻酸和藻酸鹽，特別是水溶性鹽，比低分子量的藻酸和藻酸鹽更有效。
另外，申請人還驚奇地發(fā)現(xiàn)，盡管低分子量的水溶性藻酸鹽對于細(xì)胞的修復(fù)作用基本上沒有效果，但當(dāng)這些低分子量的鹽的濃度較高時(shí)的確有這種作用。
本發(fā)明中所用的藻酸或藻酸鹽的分子量為250,000到1,000,000，更優(yōu)選300,000到400,000。優(yōu)選水溶性鹽。適當(dāng)分子量級別的水溶性藻酸鹽的例子有FMC Biopolmer a.s.提供的Protanal SF/LF、SF60L和H120L鈉鹽。
另外一種特別優(yōu)選的藻酸鹽是聚β-D-甘露糖醛酸(Poly M)。
藻酸和藻酸鹽是含有β-D-甘露糖醛酸單元(記作M單元)和α-L-甘露糖醛酸單元(記作G單元)的線性雜多糖。在差向異構(gòu)酶的作用下，藻酸鹽如H120L中的某些M單元可被差向異構(gòu)化為G單元。例如H120L可被分別差向異構(gòu)化為H120LA或H120LB，其中H120LA是具有交替的G單元的交替酶(alternase)，H120LB是具有G單元嵌段的嵌段酶(blockase)。
聚β-D-甘露糖醛酸可含有95-100％的M單元，估計(jì)的分子量值最高為1,000,000。聚β-D-甘露糖醛酸可有輕度的差向異構(gòu)化，所以它所含的甘露糖醛酸少于100％。例如經(jīng)加熱，聚β-D-甘露糖醛酸可降解到分子量約為400,000。
本發(fā)明所用的藻酸或藻酸鹽的M/G優(yōu)選至少是1，也可以至少是10或更高。
本發(fā)明所要求的藻酸或藻酸鹽數(shù)量相對較小，優(yōu)選濃度為0.02-1.8％w/v，更優(yōu)選0.05-1.5w/v。
然而，結(jié)合以上所述，可以用低分子量的藻酸或藻酸鹽，但需相對較高的濃度。因此，可以用分子量為20,000到250,000、濃度為2.0-10％w/v，優(yōu)選2.5-8.0％w/v的藻酸或藻酸鹽。
適當(dāng)較低分子量級別的水溶性藻酸鹽的例子有FMC Biopolmer a.s.提供的Protanal SF/LF、SF60L和H120L的鈉鹽。
系統(tǒng)性的和/或局部性的粘膜損傷可以由例如服用前列腺素抑制劑或消炎痛以及與胃內(nèi)容物接觸而引起，也可由機(jī)械性刺激而引起。所述前列腺抑制劑為例如乙酰水楊酸(阿司匹林)。
胃內(nèi)容物通過反流作用于食管粘膜也可引起損傷(“不當(dāng)位置的微酸性”)。粘膜損傷可以發(fā)生在胃腸道上皮的任何部位，包括但不限于口腔、食管和胃。
此前，解決反流問題的一個(gè)方法是服用一種制劑，該制劑和胃酸結(jié)合產(chǎn)生一種充有二氧化碳的膠質(zhì)狀泡沫，這些泡沫象筏子一樣漂浮在胃內(nèi)容物上。發(fā)生反流時(shí)，這些筏子先于胃內(nèi)容物進(jìn)入食管，從而保護(hù)粘膜免受進(jìn)一步的刺激。已知的這類制劑包括含水溶性藻酸鹽、碳酸氫鈉和抗酸物質(zhì)的粉劑或片劑等固體制劑，或含藻酸鈉、碳酸氫鈉以及商品名為GAVISCON(RTM Reckitt Colman Product Ltd)的碳酸鈣的液體制劑。
所以，在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施例中，上述的組合物可以是液體的，或在劇烈震蕩時(shí)可變?yōu)橐后w。替代地，也可把這種組合物制成可嚼的片劑、顆粒劑、粉劑、軟膠囊和可復(fù)水的液體。
發(fā)明者發(fā)現(xiàn)，通過應(yīng)用上述的藻酸或藻酸鹽，可以得到一種藥物組合物，該組合物不但可防止粘膜遭受物理損傷(如GAVISCON(RTM))，而且可對已受損的粘膜起到修復(fù)作用。
然而，最廣義而言，本發(fā)明包括一種藥物組合物，該組合物包括曾被認(rèn)為是亞臨床劑量的藻酸或藻酸鹽的可選擇的形式，它們所表現(xiàn)的是在細(xì)胞水平上對粘膜的修復(fù)作用，而不是表現(xiàn)為反流的物理屏障和/或包覆作用(不同于常規(guī)的石膏敷料)。
水溶性藻酸鹽可以是鈉鹽、鉀鹽和/或鎂鹽。但該水溶性鹽優(yōu)選藻酸鈉。(本文中術(shù)語“藻酸鹽”和“藻酸”可互換)。
優(yōu)選地，采用高粘度的藻酸鈉來制備上述組合物。在20℃下，用Brookfield RVT粘度計(jì)采用3號錠子在20r.p.m下測定1％w/v的該藻酸鈉水溶液的粘度，所得粘度為200-1500mPa.s。適用的商品級藻酸鈉的例子是由FMC Biopolymer a.s.提供的Protanal H120L。
上述的組合物還可以進(jìn)一步包括防腐劑，以防止微生物的污染和隨后的變質(zhì)。適用的防腐劑的例子有對羥基苯甲酸甲酯、對羥基苯甲酸乙酯、對羥基苯甲酸丙酯和對羥基苯甲酸丁酯以及它們的鹽，其中優(yōu)選將對羥基苯甲酸甲酯和對羥基苯甲酸丙酯，或?qū)αu基苯甲酸乙酯和對羥基苯甲酸丁酯結(jié)合使用。
防腐劑優(yōu)選濃度為0.01-0.5％w/v。
上述的組合物還可包括下列一種或多種成分增稠劑、懸浮劑、成片劑、助流劑、稀釋劑、色素、甜味劑、香料和pH調(diào)節(jié)劑。
根據(jù)本發(fā)明的第二個(gè)方面，本發(fā)明提供了一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞修復(fù)的藥物組合物，該組合物含有重量體積百分比為0.0001％w/v到2.0％w/v、分子量為從250,000以上到1000,000的藻酸或藻酸鹽。該組合物對細(xì)胞的修復(fù)作用已通過其對以下一個(gè)或多個(gè)方面的促進(jìn)作用得到了證實(shí)-胞吞作用和/或邊緣波動(dòng)；-細(xì)胞間的粘附性下降；-細(xì)胞的能動(dòng)性增加；和-細(xì)胞內(nèi)表皮生長因子受體(EGFr)的興奮，條件是如果這種組合物還有分子量為20,000到250,000的藻酸或藻酸鹽，則該藻酸或藻酸鹽的含量小于1％w/v。
根據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)方面，本發(fā)明提供了藻酸和藻酸鹽在制造哺乳動(dòng)物細(xì)胞修復(fù)的藥物組合物中的應(yīng)用。該組合物對細(xì)胞的修復(fù)作用已通過其對以下一個(gè)或多個(gè)方面的促進(jìn)作用得到了證實(shí)-胞吞作用和/或邊緣波動(dòng)；-細(xì)胞間的粘附性下降；-細(xì)胞的能動(dòng)性增加；和-細(xì)胞內(nèi)表皮生長因子受體(EGFr)的興奮，所述組合物含有重量體積百分比為0.0001％w/v到2.0％w/v、分子量為從250,000到1000,000的藻酸或藻酸鹽，并且選擇性地含有重量體積百分比為2.0％w/v到10.0％w/v、分子量為20,000到250,000的藻酸或藻酸鹽。
治療方法包括給需要治療的哺乳動(dòng)物服用有效治療劑量的該組合物。該組合物的有效治療劑量可為哺乳動(dòng)物每千克體重給0.1-50mg的藻酸鹽，優(yōu)選1-10mg/kg。每隔4到24小時(shí)重復(fù)給以相同劑量。
根據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)方面，本發(fā)明提供了該藥物組合物的制備方法，所述組合物含有重量體積百分比為0.0001％w/v到2.0％w/v、分子量為從250,000以上到1000,000的藻酸或藻酸鹽和藥物可接受的載體，所述方法包括把藻酸或藻酸鹽加入載體并混合的步驟。
根據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)方面，本發(fā)明提供了哺乳動(dòng)物細(xì)胞修復(fù)的方法，所述方法包括給需要治療的哺乳動(dòng)物服用藥用有效劑量的藥物組合物，所述組合物含有重量體積百分比為0.0001％w/v到2.0％w/v、分子量為從250,000以上到1000,000的藻酸或藻酸鹽，選擇地含有重量體積百分比為2.0％w/v到10.0％w/v、分子量為20,000到250,000的藻酸或藻酸鹽。
給哺乳動(dòng)物服用的這種藥物組合物可促進(jìn)以下任何一個(gè)方面或多個(gè)方面-胞吞作用和/或邊緣波動(dòng)；-細(xì)胞間的粘附性下降；-細(xì)胞的能動(dòng)性增加；和-細(xì)胞，特別是粘膜細(xì)胞內(nèi)表皮生長因子受體(EGFr)的興奮。
參照附圖可進(jìn)一步說明本發(fā)明，其中

圖1A說明特定的藻酸鹽(2mg/ml)在促進(jìn)鱗癌細(xì)胞(OE21)的胞吞作用方面的效果。
圖1B說明特定的藻酸鹽(2mg/ml)在促進(jìn)腺癌細(xì)胞(OE33)的胞吞作用方面的效果。
圖2說明了OE33細(xì)胞系在不同濃度的H120L和LFR5/60的遷移量反應(yīng)。從這個(gè)圖例可清楚的看出低分子量的藻酸鹽如LFR5/60在低濃度時(shí)對細(xì)胞的遷移沒有明顯作用，而高分子量的藻酸鹽如H120L在這樣低的濃度的確有作用。
圖3說明了OE21細(xì)胞系在不同濃度的H120L的胞吞作用量反應(yīng)。從這個(gè)圖例可看出H120L濃度為5mg/ml時(shí)作用最大。
現(xiàn)在參照下列實(shí)施例來描述本發(fā)明。實(shí)施例1-消炎痛引起的大鼠的粘膜損傷。
研究中所用的藻酸鹽是Protanal H120L、LFR5/60和LF10L(由FMCBiopolymer a.s.提供)。
給大鼠經(jīng)胃管灌喂不同樣品的藻酸鹽(含有2％w/v羥丙基甲基纖維素(HPMC)的濃度為4mg/ml的水溶液)(每只大鼠2ml)。
經(jīng)胃管灌喂2％w/v的羥丙基甲基纖維素水溶液作為陰性對照。
經(jīng)胃管灌喂含有2％w/v羥丙基甲基纖維素的濃度為50μg/ml的表皮生長因子(EGF)水溶液作為陽性對照。
30分鐘后給所有大鼠皮下注射消炎痛20mg/kg(消炎痛溶于5％的碳酸氫鈉，濃度為20mg/ml)。然后將大鼠圈養(yǎng)在Bollman飼育器中。
3小時(shí)后將大鼠處死，取出它們的胃，在福爾馬林中保存過夜。把胃切開并展平釘住，以肉眼觀察胃粘膜的損傷，然后在上面放一張帶有1mm格子的透明紙，估算肉眼可見的損傷總面積。
結(jié)果如下表1肉眼可見的大鼠胃粘膜損傷的結(jié)果。
從這些結(jié)果可看出，藻酸鹽H120L對治療大鼠由消炎痛引起的系統(tǒng)性胃粘膜損傷有明顯優(yōu)勢。實(shí)施例2-消炎痛引起的大鼠的粘膜損傷(第二個(gè)研究實(shí)驗(yàn))。
采用與實(shí)施例1相同的方案，但是使用了下列藻酸鹽/對照溶液給大鼠給藥(均為重量體積百分比)
-2％HPMC-2％HPMC+50μg/kg EGF-50μg/kg EGF-4mg/ml H120L+2％HPMC-4mg/ml H120L-4mg/ml H120L(a)(已高壓滅菌)結(jié)果如下表2肉眼可見的大鼠胃粘膜損傷的結(jié)果。
這些結(jié)果顯示H120L和EGF對大鼠胃腸道粘膜的保護(hù)作用相似。HPMC溶液則沒有胃腸道粘膜保護(hù)作用，H120L經(jīng)高壓加熱后，其結(jié)構(gòu)被破壞(H120L(a))，對胃腸道粘膜保護(hù)作用也明顯下降。實(shí)施例3-細(xì)胞遷移在下面每種測試物中懸放帶有8μm微孔過濾器的細(xì)胞培養(yǎng)嵌入式坩堝(insert crucible)H120L(1mg/ml)；表皮生長因子(EGF)(10-8M)；將OE33食管的表皮生長因子受體(EGFr)為陰性的細(xì)胞放入坩堝并留置3小時(shí)。此后采用結(jié)合染色技術(shù)(bound dye technique)(甲苯胺藍(lán))，通過色度計(jì)分析來測量經(jīng)所述濾器遷移到測試物中的細(xì)胞數(shù)。結(jié)果如下表3細(xì)胞遷移分析
這些結(jié)果表明，H120L對細(xì)胞遷移的增加作用超過了表皮生長因子在這方面已知的作用。因此認(rèn)為H120L對細(xì)胞間的粘附性有相應(yīng)的負(fù)面作用，而對傷口的修復(fù)有積極作用。實(shí)施例4采用實(shí)施例3中所述技術(shù)，測試了下列測試物(均為1mg/ml)-表皮生長因子(EGF)-H120L-LFR5/60-聚β-D-甘露糖醛酸-聚β-D-甘露糖醛酸(降解的)-H120L-A-H120L-B對下列細(xì)胞系的遷移作用-AGS(胃的)-MKN(胃的)-OE-33(食管的)-KYSE-30(食管的)表4所列出的測試結(jié)果用相對于對照組的特定遷移百分?jǐn)?shù)來表示。
表4細(xì)胞遷移量分析
實(shí)施例5——胞吞作用實(shí)驗(yàn)前一天晚上，將HCT116細(xì)胞系種植到孔板中。所述細(xì)胞在濃度為0.2mg/ml和2mg/ml的藻酸樣品中孵育一小時(shí)。用聚苯乙烯微球式的分子探針(熒光體(RTM))做熒光標(biāo)記，并用流式細(xì)胞計(jì)量術(shù)分析細(xì)胞熒光。
此外，豬的食管活檢組織在Ussing管中孵育并用上述方法分析。
結(jié)果如下(校正至標(biāo)準(zhǔn)值1.0)表5胞吞作用分析
這些結(jié)果清楚地表明，藻酸鹽對促進(jìn)哺乳動(dòng)物胃腸細(xì)胞的攝粒作用有積極作用。實(shí)施例6實(shí)驗(yàn)前兩天，將OE21鱗癌和OE33腺癌的細(xì)胞系種植到孔板中。在濃度為2mg/ml的各種藻酸鹽樣品和濃度為10mg/ml的表皮生長因子中將所述細(xì)胞孵育一小時(shí)。用聚苯乙烯微球式分子探針(熒光體(RTM))做熒光標(biāo)記，并用流式細(xì)胞計(jì)量術(shù)分析細(xì)胞熒光。
這個(gè)實(shí)驗(yàn)所測試的藻酸鹽是-H120L-聚β-D-甘露糖醛酸圖1A和圖1B顯示了測定結(jié)果。這些結(jié)果表明藻酸鹽的存在顯著地提高了細(xì)胞的胞吞作用。實(shí)施例7—與表皮生長因子受體相結(jié)合將食管鱗癌細(xì)胞(OE33細(xì)胞系)在不同分子量級別的藻酸樣品SF60L、H120L、SF/LF和LFR5/60中孵育一小時(shí)。然后去除藻酸鹽，加入表皮生長因子。向細(xì)胞培養(yǎng)皿中同時(shí)加入熒光表皮生長因子和CT-b FITC(異硫氰酸熒光素)或運(yùn)鐵蛋白(transferring)，在37℃，5％二氧化碳的條件下孵育一小時(shí)。
用共聚焦顯微術(shù)和流式細(xì)胞計(jì)量術(shù)分析結(jié)果。觀察資料顯示，在藻酸鹽中孵育的細(xì)胞沒有表皮生長因子和表皮生長因子受體結(jié)合的跡象。藻酸鹽似乎可以與細(xì)胞膜上的表皮生長因子受體相結(jié)合，于是，這表明藻酸鹽似乎可以模仿細(xì)胞表皮生長因子的作用。實(shí)施例8-水溶液組合物I.一種組合物含有下列物質(zhì)藻酸鈉H120L 0.4％w/v乙基對羥基苯甲酸鈉 2.0％w/v丁基對羥基苯甲酸鈉 0.2％w/v甜味劑 適量香料適量去離子水到100％該組合物的制備過程如下
1.溶解防腐劑、香料和甜味劑。
2.加入藻酸鹽并攪拌使之溶解。
3.定容。
II.與上述過程相同，但要在第一步加入2％w/v的羥丙基甲基纖維素(25℃時(shí)粘度為100mPas-1的2％的溶液)III.緩沖液藻酸鈉H120L 0.6％w/v羥丙基甲基纖維素 2.0％w/v磷酸二氫鉀 0.02％w/v磷酸氫二鉀 0.04％w/v乙基對羥基苯甲酸鈉 2.0％w/v丁基對羥基苯甲酸鈉 0.2％w/v甜味劑 適量香料 適量去離子水 到100％IV.加入抗酸成分和上述III相同，再加入碳酸氫鈉和碳酸鈣，濃度均為2.0％w/v。實(shí)施例9——生物粘合劑I mg/10ml磷酸二氫鉀20.00磷酸氫二鉀40.00碳酸氫鈉 168.00對羥基苯甲酸乙酯 20.00丁基對羥基苯甲酸鈉2.22糖精鈉10.00
黃原膠49.00碳酸鈣80.00刺槐豆膠 21.00藻酸鈉H120L 4.00香料 7.00去離子水 到10mlIImg/10ml磷酸二氫鉀20.00磷酸氫二鉀40.00碳酸氫鈉 168.00乙基對羥基苯甲酸 20.00丁基對羥基苯甲酸鈉2.22糖精鈉10.00黃原膠49.00碳酸鈣80.00刺槐豆膠 21.00藻酸鈉H120L 4.00藻酸鈉LFR5/60 550.00香料 7.00去離子水 到10ml實(shí)施例10——粉劑服用前溶解于水的裝在小袋內(nèi)的干粉末混合物藻酸鈉H120L 0.2g蔗糖 4.8g香料 0.1g.
甜味劑 0.1g/袋干混并裝入小袋。將小袋內(nèi)容物倒入100ml水中，攪拌溶解而再復(fù)水。實(shí)施例11——可嚼的片劑1.藻酸鹽H120L5mg2.木糖醇 1000mg3.甘露醇 1350mg4.聚烯吡酮K3050mg5.香料 25mg6.硬脂酸鎂 25mg將1、2和3干混。用溶有4的異丙醇溶液制成顆粒狀，50℃下干燥。經(jīng)過1000微米的網(wǎng)孔。把5和6加入顆粒中，混合3分鐘并壓制成片劑。
咀嚼時(shí)，和大約10ml的唾液相結(jié)合形成0.05％w/v的活性藻酸鹽溶液。實(shí)施例12——口服膠囊藻酸鹽H120L 0.4％w/v羥丙基甲基纖維素 10.0％w/v乙基對羥基苯甲酸鈉 0.2％w/v丁基對羥基苯甲酸鈉 0.2％w/v甜味劑 適量香料 適量去離子水 到100％
權(quán)利要求
1.一種用于細(xì)胞修復(fù)的藥物組合物，所述組合物含有重量體積百分比0.0001％w/v到2.0％w/v、分子量為從250,000以上到1000,000的藻酸或藻酸鹽，條件是如果這種組合物還含有分子量為20,000到250,000的藻酸或藻酸鹽，則其含量小于1％w/w。
2.權(quán)利要求1的組合物，其中含有0.02％w/v到1.8％w/v、分子量為從300,000到400,000的藻酸或藻酸鹽。
3.權(quán)利要求1或2的組合物，其中藻酸或藻酸鹽的甘露糖醛酸基和古洛糖醛酸基的比例(M/G)至少為1。
4.權(quán)利要求3的組合物，其中M/G至少為10。
5.上述任一權(quán)利要求的組合物，其中將組合物制成液體、可嚼的片劑、顆粒劑、粉劑和軟膠囊。
6.上述任一權(quán)利要求的組合物，其中的藻酸鹽是水溶性鹽，選自鈉鹽、鉀鹽和鎂鹽。
7.上述任一權(quán)利要求的組合物，其中還含有一種或多種增稠劑、懸浮劑、成片劑、助流劑、稀釋劑、色素、甜味劑、食用香料、pH值調(diào)節(jié)劑和選自對羥基苯甲酸甲酯、對羥基苯甲酸乙酯、對羥基苯甲酸丙酯和對羥基苯甲酸丁酯以及它們的鹽的防腐劑。
8.一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞修復(fù)的藥物組合物，該組合物對細(xì)胞的修復(fù)作用通過其對以下一個(gè)或多個(gè)方面的促進(jìn)作用得到了證實(shí)-胞吞作用和/或邊緣波動(dòng)；-細(xì)胞間的粘附性下降；-細(xì)胞的能動(dòng)性增加；和-細(xì)胞內(nèi)表皮生長因子受體(EGFr)的興奮，該組合物含有重量體積百分比為0.0001％w/v到2.0％w/v、分子量為從250,000以上到1000,000的藻酸或藻酸鹽，條件是如果所述組合物還含有分子量為20,000到250,000的藻酸或藻酸鹽，則其量小于1％w/w。
9.權(quán)利要求8的應(yīng)用，其中的細(xì)胞是粘膜細(xì)胞。
10.藻酸和藻酸鹽在制造哺乳動(dòng)物細(xì)胞修復(fù)的藥物組合物中的應(yīng)用，所述組合物對細(xì)胞的修復(fù)作用通過其對以下一個(gè)或多個(gè)方面的促進(jìn)作用得到了證實(shí)-胞吞作用和/或邊緣波動(dòng)；-細(xì)胞間的粘附性下降；-細(xì)胞的能動(dòng)性增加；和-細(xì)胞內(nèi)表皮生長因子受體(EGFr)的興奮，所述組合物含有重量體積百分比為0.0001％w/v到2.0％w/v、分子量為從250,000到1000,000的藻酸或藻酸鹽，并選擇性地含有重量體積百分比為2.0％w/v到10.0％w/v、分子量為20,000到250,000的藻酸或藻酸鹽。
11.權(quán)利要求10的應(yīng)用，其中的細(xì)胞是粘膜細(xì)胞。
12.一種藥物組合物的制備方法，所述組合物含有重量體積百分比為0.0001％w/v到2.0％w/v、分子量為從250,000以上到1000,000的藻酸或藻酸鹽和藥用載體，所述方法包括把藻酸或藻酸鹽加入載體并混合的步驟。
13.一種哺乳動(dòng)物細(xì)胞的修復(fù)方法，該方法包括給需要治療的哺乳動(dòng)物服用藥用有效劑量的一種藥物組合物，該組合物含有重量體積百分比為0.0001％w/v到2.0％w/v、分子量為從250,000到1000,000的藻酸或藻酸鹽，并選擇性地含有重量體積百分比為2.0％w/v到10.0％w/v、分子量為20,000到250,000的藻酸或藻酸鹽。
14.權(quán)利要求13的方法，其中被施用這種藥物組合物的細(xì)胞是粘膜細(xì)胞。
15.權(quán)利要求14的方法，其中哺乳動(dòng)物服用的藥物組合物可促進(jìn)以下一個(gè)或多個(gè)方面-胞吞作用和/或邊緣波動(dòng)；-細(xì)胞間的粘附性下降；-細(xì)胞的能動(dòng)性增加；和-細(xì)胞內(nèi)表皮生長因子受體(EGFr)的刺激，優(yōu)選粘膜細(xì)胞。
16.權(quán)利要求1的一種藥物組合物，所述組合物基本上是說明書描述或舉例的組合物。
17.權(quán)利要求8或10的應(yīng)用，所述應(yīng)用基本上是說明書描述或舉例的應(yīng)用。
18.權(quán)利要求12的方法，所述方法基本上是說明書描述或舉例的方法。
全文摘要
一種用于細(xì)胞修復(fù)的藥物組合物，所述組合物含有重量體積百分比為0.0001％w/v到2.0％w/v、分子量為從250,000以上到1,000,000的藻酸或藻酸鹽，條件是如果所述組合物還含有分子量為20,000到250,000的藻酸或藻酸鹽，則其含量小于1％w/w。還提供了將該組合物用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的修復(fù)，尤其是粘膜細(xì)胞修復(fù)的應(yīng)用。
文檔編號A61K31/734GK1420780SQ01807488
公開日2003年5月28日 申請日期2001年3月9日 優(yōu)先權(quán)日2000年3月10日
發(fā)明者彼得·威廉姆·德埃忒瑪, 伊恩·G·喬利夫, 弗蘭克·C·漢普森, 彼得·愛德華·羅斯, 愛德爾·歐塞也恩, 保羅·墨里·麥克弗森, 馬西莫·皮尼亞泰利, 拉法埃萊·德爾博諾 申請人:雷克特本克斯?fàn)柋＝?英國)有限公司