專利名稱：2－取代的孕－1,3,5(10)－三烯和膽－1,3,5(10)－三烯衍生物及其生物活性的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及新的甾醇衍生物，更具體地涉及含有以甲醛基或被選擇性取代的羥基結(jié)尾的較短的17-位烴基側(cè)鏈的2-取代的環(huán)A芳香烴甾醇衍生物。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)這樣的化合物具有調(diào)控細(xì)胞的活性，可能具有有價(jià)值的抗增生和抗血管增生的作用。
WO-A-0068246公開(kāi)了一系列含有芳香烴A環(huán)和以氨基、酰胺基或與叔碳原子相連的羥基結(jié)尾的17-位側(cè)鏈的3-甾醇和O-保護(hù)的衍生物。這些化合物對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)和分化具有很強(qiáng)的調(diào)控作用，例如由它們?cè)隗w外和體內(nèi)抑制癌癥細(xì)胞生長(zhǎng)的能力，同時(shí)具有有利的治療比率而得到證明，有利的治療比率是由于其具有低水平的血鈣活性，例如通過(guò)其對(duì)大鼠的血清鈣和磷的水平的影響而測(cè)得的活性。在這個(gè)方面中，盡管這些化合物具有完整的四環(huán)核并且既缺乏維生素D類似物的二級(jí)甾三烯系統(tǒng)，也沒(méi)有模仿維生素D類似物的共軛的構(gòu)象異構(gòu)體的能力，但是它們的活性與各種維生素D的類似物相似。
還已知2-甲氧基雌二醇與2-甲氧基雌酮一樣，是雌二醇的一種天然代謝物，能預(yù)防體內(nèi)癌癥細(xì)胞的增生，促進(jìn)癌癥細(xì)胞的死亡。研究提示，這些作用與秋水仙堿所發(fā)揮的作用相似，至少部分地由微管蛋白聚合的抑制或誤導(dǎo)所介導(dǎo)，已經(jīng)觀察到代謝物能與微管蛋白的秋水仙堿的結(jié)合位點(diǎn)結(jié)合。
如Cushman等人在J.Med.Chem.38(12)，pp.2041-2049所述，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)2-甲氧基雌二醇能抑制血管增生(新血管的產(chǎn)生)，這在癌癥的治療中可能是一個(gè)極有價(jià)值的性能， 因?yàn)檠茉錾枪腆w腫瘤生長(zhǎng)所必需的。Cushman等人(op.cit.)和Lovely等人的J.Med.Chem.39(9)，pp.1917-1923都報(bào)道了各種2-甲氧基雌二醇類似物的合成以及對(duì)其細(xì)胞毒性的評(píng)估，所有研究的化合物都是17-酮或選擇性取代的17-醇。
Pribluda等人在Cancer and Metastatic Reviews19(1-2)，pp.173-179中討論了2-甲氧基雌二醇的抗增生和抗血管增生作用，在這篇文獻(xiàn)中聲明，它既能通過(guò)誘發(fā)快速增殖中的細(xì)胞的程序死亡和在血管增生的級(jí)聯(lián)反應(yīng)的幾個(gè)階段中抑制血管的形成靶向腫瘤細(xì)胞也能靶向內(nèi)皮細(xì)胞的隔室，這篇文獻(xiàn)還說(shuō)它能抑制幾種模式中的轉(zhuǎn)移性擴(kuò)散。
Dubey等人在Biochem.Biophys.Comm.278(1)，pp.27-33中報(bào)道了內(nèi)源性的甲氧基雌二醇通過(guò)雌激素受體依賴型機(jī)制而介導(dǎo)雌二醇對(duì)血管平滑肌細(xì)胞的抗有絲分裂作用。
WO-A-9933859公開(kāi)了多種在17-位帶有含雜原子的烴基側(cè)鏈的1，3，5-雌三烯。據(jù)說(shuō)這些化合物是雌激素的拮抗劑，并且沒(méi)有暗示它們可能具有抗增生或抗血管增生的作用或象秋水仙堿那樣對(duì)微管蛋白的聚合具有干擾作用。
WO-A-9933858公開(kāi)了在17-位帶有相對(duì)較短的烴基側(cè)鏈的3-氨基磺酰氧基-1，3，5-雌三烯，據(jù)說(shuō)這些化合物能作為甾族硫酸酯酶的抑制劑。也沒(méi)有暗示它們可能具有抗增生或抗血管增生的作用或象秋水仙堿那樣對(duì)微管蛋白的聚合具有干擾作用。
本發(fā)明基于這樣的出人意料的發(fā)現(xiàn)一系列在17-位帶有以甲醛基(-CHO)或選擇性地被O-和/或C-取代的羥甲基結(jié)尾的相對(duì)較短的烴基側(cè)鏈的2-取代的環(huán)A芳香烴甾醇衍生物具有很強(qiáng)的細(xì)胞調(diào)控活性。組織培養(yǎng)試驗(yàn)顯示這樣的化合物具有秋水仙堿的特征性的劑量反應(yīng)曲線，暗示它們的抗增生活性至少部分地源于象秋水仙堿那樣的對(duì)微管蛋白聚合的干擾作用。因此，本發(fā)明的化合物可能會(huì)以類似的方式抑制血管的增生，但是其作用方式比諸如2-甲氧基雌二醇這樣的化合物更強(qiáng)。本發(fā)明的化合物還顯示了減小的但仍然是顯著的與雌激素受體的結(jié)合，這暗示它們可能還有與其它的非子宮營(yíng)養(yǎng)性雌激素反應(yīng)調(diào)節(jié)劑類似的其它用途。
根據(jù)本發(fā)明的一種實(shí)施方式，提供了式(I)的化合物 其中R1代表H或O-保護(hù)基；R2代表羥基、低級(jí)烷氧基、甲醛基、低級(jí)鏈-1-烯基或者是羥基-或低級(jí)烷氧基-取代的低級(jí)烷基；R3代表具有α-或β構(gòu)型的甲基；X代表C1-3鏈烯基或一條價(jià)鍵；Y代表甲醛基或式-C(R4)(R5)OR1的基團(tuán)，其中R1如前面所定義，而R4和R5，可以相同或不同，各自選自H、烷基、鏈烯基和炔基，使得R4和R5的碳原子總數(shù)不超過(guò)三個(gè)，條件是當(dāng)R4和R5不是H時(shí)，X是一條價(jià)鍵；而點(diǎn)劃線表示在16(17)-位可以選擇性地存在一條雙鍵。
R1所代表的O-保護(hù)基可以例如包括本領(lǐng)域中已知的任何可以消去的合適的O-保護(hù)基。具有代表性的基團(tuán)包括(i)醚化基團(tuán)，例如甲硅烷基(例如三(低級(jí)烷基)甲硅烷基，例如三甲基甲硅烷基，三乙基甲硅烷基，三異丙基甲硅烷基或叔丁基二甲基甲硅烷基；三(芳基)甲硅烷基，例如三苯基甲硅烷基；和混合的烷基芳基甲硅烷基)、選擇性地被氧原子所間斷的低級(jí)(例如C1-6)烷基(例如甲基、乙基、甲氧基甲基或甲氧基乙氧基甲基)或被低級(jí)(例如C3-8)環(huán)烷基取代的低級(jí)烷基(例如環(huán)戊基甲基)或被酰氧基取代的(例如被低級(jí)烷酰氧基取代的)低級(jí)烷基(例如異戊酰基氧基甲基)，和環(huán)狀醚基(例如四氫吡喃基)和(ii)酯化基團(tuán)例如低級(jí)(例如C1-6)烷?；?例如乙酰基、丙酰基、異丁?；?、異戊?；虬腌牾；?、芳?；?例如含有7-15個(gè)碳原子，如苯甲?；?-苯基偶氮苯甲?；?、低級(jí)(例如C1-6)烷磺酰基(例如甲磺?；螓u代甲磺酰基)、芳烴磺?；?例如對(duì)甲苯磺?；?和氨基磺?；?，例如式(R6)(R7)N-SO2-的基團(tuán)，其中R6和R7各自獨(dú)立地選自H和低級(jí)(例如C1-6)烷基或者一起形成一個(gè)選擇性地被一個(gè)或多個(gè)選自O(shè)、N和S的雜原子間斷的低級(jí)(例如C3-10)亞烷基鏈。應(yīng)當(dāng)明白，3-位的R1可以與1 7-位側(cè)鏈中的Rl相同或不同。
當(dāng)R2代表低級(jí)烷氧基，其實(shí)例是一條直鏈或支鏈的C1-6烷氧基，如甲氧基、乙氧基或丙氧基。低級(jí)鏈-1-烯基例如可以包含2-6個(gè)碳原子，如乙烯基、丙-1-烯基和丁-1-烯基。具有代表性的羥基-和低級(jí)烷氧基-取代的低級(jí)烷基包括羥甲基、1-和2-羥基乙基、1-、2-和3-羥基丙基和相應(yīng)的甲氧基-和乙氧基-取代的基團(tuán)。低級(jí)烷氧基-取代的低級(jí)烷基優(yōu)選總共包含至多6個(gè)碳原子。
當(dāng)式(I)中的R3是α-構(gòu)型的甲基時(shí)，化合物具有天然甾醇例如膽固醇的特征性的20R構(gòu)型；當(dāng)式(I)中的R3是β-構(gòu)型時(shí)，化合物具有相應(yīng)的表位衍生物的20S構(gòu)型。應(yīng)當(dāng)明白，本發(fā)明還包括兩種異構(gòu)體的混合物。
當(dāng)X是亞烷基，其實(shí)例可以是亞甲基、亞乙基或三亞甲基。
當(dāng)Y代表式-C(R4)(R5)OR1的基團(tuán)，優(yōu)選為選擇性地被O-保護(hù)的羥甲基或取代的羥甲基，其中R4和R5中的一個(gè)是甲基、乙基、乙烯基、乙炔基或丙炔基，而另一個(gè)是H，或者其中R4和R5都是甲基。
下列定義的式(I)化合物可直接用于治療其中R1是H、一種代謝上不穩(wěn)定的O-保護(hù)基(例如低級(jí)烷?；?，如乙酰基或半琥珀?；货Ｑ趸谆?，如低級(jí)烷酰氧基甲基，例如異戊?；趸谆?；或磺?；缌蛩狨セ虬被撬狨セ?或低級(jí)烷基醚化的O-保護(hù)基，例如甲基、乙基或異丁基。使用其中R1為生物學(xué)上不穩(wěn)定的氨基磺?；幕衔锟赡苁怯欣?，因?yàn)檫@樣的基團(tuán)將傾向于抑制甾族硫酸酯酶，否則硫酸酯酶將會(huì)在除去這樣的3-位保護(hù)基后降解形成的甾-3-醇。含有非代謝不穩(wěn)定的O-保護(hù)基(例如體積較大的甲硅烷基醚基，如三異丙基甲硅烷基、叔丁基二甲基甲硅烷基或三苯基甲硅烷基)的化合物(I)主要是用作合成中間體。
本發(fā)明的活性化合物的細(xì)胞調(diào)控活性以及它們基本上沒(méi)有不利的副作用的特點(diǎn)使得它們有利于單獨(dú)使用或者用作助劑，用于控制與反常的細(xì)胞增殖有關(guān)的疾病，例如癌癥，特別是骨髓性白血病以及腦部、胸部、胃部、消化道、前列腺、胰腺、生殖泌尿道(男性和女性)腫瘤和肺癌。它們能促進(jìn)小鼠耳朵穿孔的閉合，暗示單獨(dú)使用它們或把它們用作助劑可促進(jìn)傷口愈合。
它們的細(xì)胞調(diào)控活性暗示，本發(fā)明的化合物與其它雌激素反應(yīng)調(diào)節(jié)劑一樣，還有其它用途，可單獨(dú)使用或作為助劑用于感染的化療和其它與單核巨噬細(xì)胞有關(guān)的治療模式中，例如用于骨病(特別是骨質(zhì)疏松、骨質(zhì)缺乏和骨營(yíng)養(yǎng)不良，例如佝僂病或腎性骨營(yíng)養(yǎng)不良)、自免疫疾病、主體移植反應(yīng)、移植排斥、炎癥(包括免疫性炎癥反應(yīng)的調(diào)控)、腫瘤和增生的治療。它們能抑制多種人類癌癥細(xì)胞的生長(zhǎng)，證明它們有可能用于治療腫瘤和增生。另外，它們可用于治療皮膚病(例如包括痤瘡、脫發(fā)、濕疹、搔癢、牛皮癬和皮膚老化，包括光衰老)、高血壓、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、牛皮癬性關(guān)節(jié)炎、哮喘、認(rèn)知障礙和老年性癡呆(包括早老性癡呆癥)，用于人和動(dòng)物主體的生育控制、降低高水平的血清膽固醇以及用于控制與凝血有關(guān)的疾病(例如通過(guò)溶解存在的血塊和/或預(yù)防凝血)。本發(fā)明包括這些化合物在治療或預(yù)防這些疾病和在生產(chǎn)用于這樣的治療或預(yù)防的藥物中的用途。
可以把本發(fā)明的活性化合物配制成適用于任何給藥方式例如口服(包括舌下給藥)、非腸胃給藥、直腸給藥或吸入給藥的制劑。這樣配制的藥物組合物包含了本發(fā)明的特征。
如果需要的話，口服用的藥物組合物可以包含一種或多種生理上可以相容的載體和/或賦形劑，并且可以是固體或液體。組合物可以以任何方便的劑型包括例如片劑、包衣的片劑、膠囊、錠劑、水性或油性懸浮液、溶液、乳液、糖漿、酏劑和適用于在使用前與水或另一種合適的液體載體重新組配的干燥產(chǎn)品?？梢詢?yōu)選地把組合物配制成單劑量形式。如果需要的話，本發(fā)明的片劑和膠囊可以包含常用的組份例如粘合劑如糖漿、阿拉伯膠、明膠、山梨糖醇、黃蓍膠或聚乙烯吡咯烷酮；填料例如乳糖、蔗糖、玉米淀粉、磷酸鈣、山梨糖醇或甘氨酸；潤(rùn)滑劑，例如硬脂酸鎂、滑石、聚乙二醇或二氧化硅；崩解劑，例如馬鈴薯淀粉；或可以接受的增濕劑，例如月桂基硫酸鈉?？梢园凑毡绢I(lǐng)域熟知的方法給片劑包衣。
液體組合物可以包含常用的添加劑，例如懸浮劑，如山梨糖醇糖漿、甲基纖維素、葡萄糖/蔗糖糖漿、明膠、羥甲基纖維素、羧甲基纖維素、硬脂酸鋁膠或氫化的可食用脂肪；乳化劑，例如卵磷脂、脫水山梨糖醇單油酸酯或阿拉伯膠；非水性載體，可以包括食用油，例如植物油，如花生油、杏仁油、經(jīng)過(guò)分餾的椰子油、魚(yú)肝油、油性酯例如聚山梨醇酯80、丙二醇或乙醇；和防腐劑，例如對(duì)羥基苯甲酸甲酯或丙酯或山梨酸?？梢苑奖愕匕岩后w制劑包裝在例如明膠中以得到單劑量形式的產(chǎn)品。
可以用一種注射用的液體載體例如不含熱原的無(wú)菌水、不含過(guò)氧化物的無(wú)菌的油酸乙酯、脫水的乙醇或丙二醇或脫水的乙醇/丙二醇的混合物來(lái)配制用于非腸胃給藥的組合物，并且這樣的組合物可以通過(guò)靜脈內(nèi)注射、腹膜內(nèi)注射或肌肉內(nèi)注射方式給藥。
可以使用常用的栓劑用基質(zhì)例如可可油或另一種甘油酯來(lái)配制直腸給藥用的組合物。
可以把通過(guò)吸入給藥的組合物方便地配制成自力推進(jìn)的給藥劑型，例如帶刻度的劑量形式，如在推進(jìn)劑中的懸浮液，例如填充在帶有刻度的分配閥的氣溶膠容器中的鹵代烴。
優(yōu)選在本發(fā)明的組合物中摻入一種抗氧化劑例如抗壞血酸、丁基化的羥基苯甲醚或氫醌以增加它們的儲(chǔ)藏壽命。
當(dāng)把上述組合物配制成劑量單元形式時(shí)，這些組合物例如可以包含2μg-100mg本發(fā)明的活性化合物/每個(gè)單元?jiǎng)┬停@樣的劑量單元例如可以每天服用1-4次。如果需要的話，還可以在組合物中摻入一種或多種其它的活性組份。
取決于諸如被治療的疾病的嚴(yán)重程度和主體的年齡、體重和身體狀況這樣的因素，本發(fā)明的活性化合物的合適的每日劑量例如可以在2μg-400mg/天的范圍內(nèi)。
本發(fā)明的化合物可以通過(guò)任何方便的方法制備，例如使一種在一個(gè)或多個(gè)步驟中包含所要的17-位側(cè)鏈的前體的化合物與一種或多種用于形成所要的17-位側(cè)鏈的反應(yīng)試劑反應(yīng)，然后如果必要和/或需要的話，除去任何O-保護(hù)基。
例如，本發(fā)明的化合物可以從合適的2-取代的，例如2-羥基化的或2-烷氧基化的雌酮的衍生物，例如按照Krubiner and Oliveto，J.Org.Chem.31，pp.24-26所述的方法，通過(guò)與一種亞乙基正膦進(jìn)行Wittig反應(yīng)，把17-酮轉(zhuǎn)變?yōu)橄鄳?yīng)的17(20)Z-亞乙基化合物。另外，相應(yīng)的E-異構(gòu)體可以按照Midland and Kwon，Tetrahedron Lett.23(20)，pp.2077-2080的方法制得。
可以使這樣得到的鏈烯發(fā)生常規(guī)的立體特異性硼氫化反應(yīng)，然后用堿-過(guò)氧化氫溶液進(jìn)行氧化性操作(Krubiner，op.cit.)，得到相應(yīng)的20-醇，可以用三氧化鉻把該醇氧化為20-酮(Krubiner，op.cit.)。用甲氧基亞甲基三苯基-正膦進(jìn)行Wittig反應(yīng)，然后用酸水溶液水解烯醇醚，得到一種非立體特異性的化合物(I)，其中X為一條價(jià)鍵，而Y是一個(gè)醛基。用硼氫化鈉還原，得到相應(yīng)的其中X是一條價(jià)鍵，而Y是一個(gè)羥甲基的式(I)化合物。
在16(17)-位含有一條雙鍵的本發(fā)明的化合物例如可以通過(guò)使按照上述方法制備的合適的E-或Z-17(20)亞乙基化合物發(fā)生立體特異性的烯反應(yīng)而以立體特異性方式制備。例如，這樣的烯反應(yīng)包括用甲醛、三氟化硼和選擇性使用的乙酸酐處理(Batcho et al.，Helv.Chim.Acta64，pp.1682-1687)，形成其中X為一條價(jià)鍵，而Y是一個(gè)羥甲基或乙酰氧基甲基的式(I)化合物。在另一種烯反應(yīng)中，用丙炔酸乙酯/二乙基氯化鋁處理(Dauben and Brookhart，J.Am.Chem.Soc.103，pp.237-238)，得到Δ16，17酸的乙酯，可以把該化合物還原，得到其中Y是羥甲基的化合物。如果合適的話，可以對(duì)上述的Δ16，17化合物進(jìn)行立體特異性的氫化，例如催化氫化，在16(17)-位形成一條單鍵。
可以通過(guò)水解，把其中Y是乙酰氧基甲基的化合物中的乙酰基除去，用一種離去基團(tuán)例如甲基苯磺酰氧基替換。然后可以進(jìn)行同系化反應(yīng)以增加X(jué)的大小，這樣的反應(yīng)包括(i)用一種金屬氰化物處理，水解氰基，得到一個(gè)羧基，或者還原氰基(例如用一種金屬氫化物還原劑如二異丁基氫化鋁)，得到一個(gè)甲醛基，并且如果合適的話，還原羧基或甲醛基(例如使用硼氫化鈉或氫化鋁鋰)，得到一個(gè)羥甲基，然后讓羥甲基發(fā)生甲苯磺?；?，并且如果需要的話，再進(jìn)行親核取代；和(ii)用乙酸的一種酯或硫代酯的一種金屬化的衍生物處理，用包含乙酸的另一種負(fù)碳離子等價(jià)物的一種衍生物(例如乙腈的一種金屬化衍生物)處理，或者用一種金屬化的丙二酸酯處理(其中在最后的那個(gè)例子中，反應(yīng)產(chǎn)物被部分地水解而得到一種單酯，通過(guò)加熱把后者脫羧，得到一種羧酸酯)，還原所得的酯或硫代酯產(chǎn)物為醇(例如使用氫化鋁鋰)，并且把所得的羥基轉(zhuǎn)化成一種離去基團(tuán)，例如對(duì)甲苯磺酸酯基或鹵素原子，如前面所述。另外，通過(guò)用甲氧基亞甲基三苯基-正膦進(jìn)行Wittig反應(yīng)，可以把其中Y是甲醛基的化合物發(fā)生同系化反應(yīng)，然后水解所得的烯醇醚，例如用酸水溶液進(jìn)行水解。
應(yīng)當(dāng)明白，可以根據(jù)需要來(lái)重復(fù)這樣的程序來(lái)制得其中X是所需要的亞烷基的化合物(I)。
其中Y是基團(tuán)-C(R4)(R5)OR1(其中R4和/或R5不是H)的化合物可以通過(guò)常規(guī)手段制備，例如通過(guò)與一種合適的有機(jī)金屬試劑例如一種格氏試劑、金屬的炔化物、烷基鋰或烷基硅烷反應(yīng)，從相應(yīng)的醛或酮制得。
本發(fā)明的化合物還可以從2-位未取代的雌激素出發(fā)，通過(guò)構(gòu)建所要的17-位側(cè)鏈，然后在最后一步中引入所要的2-位取代基而制得，例如按照Cushman等人(op.cit.)的方法制備。該方法中所用的關(guān)鍵的2-甲?；衔锸峭ㄟ^(guò)3-甲氧基甲基醚的形成而方便地制得的，按照Lovely等人(op.cit.)的方法，在2-位進(jìn)行選擇性的鋰化，用二甲基甲酰胺進(jìn)行甲?；?。
氨基磺?；鵕1基團(tuán)可以通過(guò)常規(guī)方法例如與合適的氨基磺酰氯在一種溫和的堿存在下，按照Schwartz等人在Steroids 61，pp.710-717中描述的方法或者按照WO-A-9933858中所述的方法引入。如果例如需要選擇性地在3-位引入一個(gè)氨基磺酰基，則在氨基磺酰化過(guò)程中可以把17-位側(cè)鏈上的任何羥基保護(hù)起來(lái)，例如保護(hù)成羧酸酯(例如乙酸酯)或甲硅烷基醚；然后可以通過(guò)水解來(lái)除去這樣的保護(hù)基而不會(huì)影響氨基磺?；?。
一般來(lái)說(shuō)，例如可以通過(guò)常規(guī)方法，例如詳細(xì)地記載在文獻(xiàn)中的方法來(lái)除去O-保護(hù)基。因此，酯化的?；梢酝ㄟ^(guò)堿水解，例如使用堿金屬烷氧化物在烷醇中進(jìn)行水解而除去。醚化基團(tuán)例如甲硅烷基可以通過(guò)酸水解或用一種氟化物鹽例如四烷基氟化銨處理而除去。考慮到這種反應(yīng)所用的強(qiáng)堿性條件，使用這種酸不穩(wěn)定的但是堿穩(wěn)定的保護(hù)基在用來(lái)構(gòu)筑所要的側(cè)鏈的同系化步驟中可以具有特別的優(yōu)勢(shì)。
在此通過(guò)參考文獻(xiàn)引入本說(shuō)明書(shū)中引用的所有文獻(xiàn)的內(nèi)容。
下列非限定性的實(shí)施例用于詳細(xì)說(shuō)明本發(fā)明。所有的溫度都用℃表示。制備12-甲氧基-3-三異丙基甲硅烷基氧基-19-去甲-孕-1，3，5(10)，17(20)Z-四烯在70℃下攪拌氫化鈉(294mg，50％)的二甲基亞砜(6ml)溶液1小時(shí)，然后冷卻到室溫。滴加碘化乙基三苯基膦鎓(2.75g)的二甲基亞砜(10ml)溶液，攪拌混合物30分鐘。滴加2-甲氧基-雌酮-3-三異丙基甲硅烷基醚(600mg，通過(guò)在室溫下，用三異丙基甲硅烷基氯和咪唑的二氯甲烷溶液過(guò)夜處理3-OH化合物，使其甲硅烷基化來(lái)制備)的二甲基亞砜(10ml)溶液。攪拌所得的溶液30分鐘，之后，把溫度升高到70℃，繼續(xù)攪拌過(guò)夜。然后冷卻反應(yīng)混合物，并且進(jìn)行分離。通過(guò)色譜分離和純化產(chǎn)物，得到標(biāo)題化合物(125mg，參見(jiàn)下面)和3-OH類似物(300mg)IR(CDCl3)νmax1590，3520cm-1；NMR(CDCl3)δ0.9(s，18-H’s)，1.67(d，＝CH-CH’s)，3.8(s，OCH’s)，4.7-5.2(q，＝CHMe)，6.5，6.7(s，1，4-H’s)。
把上述的3-OH化合物(300mg)甲硅烷基化，并且通過(guò)色譜純化產(chǎn)物，得到標(biāo)題化合物(370mg)IR(CDCl3)νmax1600cm-1；NMR(CDCl3)δ0.9(s，18-H’s)，1.68(d，＝CH-CH’s)，3.7(s，OCH’s)，4.7-5.3(q，＝CH-Me)，6.4，6.6(s，1，4-H’s)。實(shí)施例1a)2-甲氧基-3-三異丙基甲硅烷基氧基-19-去甲-膽-1，3，5(10)，16-四烯-24-甲酸甲酯[式(I)R1＝(異丙基)3Si，R2＝CH3O，R3＝α-CH3，X＝CH2)2，Y＝CO-OCH3，Δ16雙鍵]把乙基二氯化鋁(1.4ml，2.4mmol，甲苯溶液)滴加到含有丙烯酸甲酯(144μl)的上述制備1的產(chǎn)物(370mg)的二氯甲烷(4ml)溶液中，攪拌所得的混合物4小時(shí)，之后再加入丙烯酸甲酯(144μl)，繼續(xù)攪拌過(guò)夜。然后分離混合物，通過(guò)色譜純化產(chǎn)物，得到標(biāo)題化合物(345mg)IR(CDCl3)νmax1600，1720cm-1；NMR(CDCl3)δ0.8(s，18-H’s)，3.6(s，OCH’s)，5.1-5.4(bs，16-H’s)，6.4，6.58(s，1，4-H’s)。h)2-甲氧基-3-三異丙基甲硅烷基氧基-19-去甲-膽-1，3，5(10)，16-四烯-24-醇[式(I)R1＝(異丙基)3Si，R2＝CH3O，R3＝α-CH3，X＝(CH2)2，Y＝CH2OH，Δ16雙鍵]把氫化鋁鋰(1ml 1M的乙醚溶液)滴加到上述(a)的酯(265mg)的乙醚(5ml)溶液中，之后攪拌反應(yīng)混合物30分鐘，用乙醚稀釋，用濕的硫酸鈉淬滅，得到粗的標(biāo)題化合物(248mg)IR(CDCl3)νmax1600，3380-3660cm-1；NMR(CDCl3)δ0.8(s，18-H’s)，3.3-3.8(b，HOCH’s)，3.7(s，OCH’s)，5.1-5.4(bs，16-H’s)，6.4，6.6(s，1，4-H’s)。c)2-甲氧基-3-羥基-19-去甲-膽-1，3，5(10)，16-四烯-24-醇[式(I)R1＝H，R2＝CH3O，R3＝α-CH3，X＝(CH2)2，Y＝CH2OH，Δ16雙鍵]通過(guò)在室溫下用四丁基氟化銨的四氫呋喃溶液處理上述(b)產(chǎn)物來(lái)進(jìn)行去甲硅烷基化，制得標(biāo)題化合物IR(CDCl3)νmax1590，3200-3660cm-1；NMR(CDCl3)δ0.8(s，18-Me)，1.15(d，21-Me)，3.4-3.7(t，24-OH，OMe)，5.1-5.4(ea m，16-H)，6.5-6.63(m，1，4-H’s)。d)2-甲氧基-3-三異丙基甲硅烷基氧基-19-去甲-膽-1，3，5(10)，16-四烯-24-醇-24-氨基磺酸酯[式(I)R1＝(異丙基)3Si，R2＝CH3O，R3＝α-CH3，X＝(CH2)3，Y＝CH2O-SO2-NH2]把氨基磺酰氯(60mg)加入上述(b)的醇和二甲基氨基吡啶(62mg)的二氯甲烷(2ml)溶液中，攪拌所得的混合物2小時(shí)，通過(guò)制備性的薄層色譜分離和純化，得到標(biāo)題化合物(60mg)IR(CDCl3)νmax1600，3100-3600cm-1；NMR(CDCl3)δ0.8(s，18-Me)，3.7(s，OMe)，3.9-4.4(bt，24-H’s)，4.5-5.0(b，NH’s)，5.1-5.5(m，16-H)，6.43，6.63(ea s，1，4-H’s)。e)2-甲氧基-3-羥基-19-去甲-膽-1，3，5(10)，16-四烯-24-醇-24-氨基磺酸酯[式(I)R1＝H，R2＝CH3O，R3＝α-CH3，X＝(CH2)3，Y＝CH2OSO2NH2]按照上述(c)中的方法把上述(d)的產(chǎn)物去甲硅烷基化，得到標(biāo)題化合物(39mg)IR(CDCl3)νmax1590，3200-3600cm-1；NMR(CDCl3)δ0.8(s，18-Me)，1.08(d，21-H’s)，3.8(s，OMe)，3.9-4.4(bt，24-H’s)，4.5-4.9(b，NH’s)，4.9-5.5(m，16-H)，6.53，6.67(eas，1，4-H’s)。實(shí)施例2a)2-甲氧基-3-三異丙基甲硅烷基氧基-20α-乙酰氧基甲基-19-去甲-孕-1，3，5(10)，16-四烯[式(I)R1＝(異丙基)3Si，R2＝CH3O，R3＝α-CH3，X＝價(jià)鍵，Y＝CH2OCOCH3，Δ16雙鍵]把三氟化硼醚合物(6μl)和乙酸酐(0.66ml)于二氯甲烷(0.3ml)中的混合物滴加到含有乙酸酐(0.1ml)和多聚甲醛(13mg)的從制備1得到的2-甲氧基-3-三異丙基甲硅烷基氧基-19-去甲-孕-1，3，5(10)，17(20)Z-四烯(0.20g)的二氯甲烷(1ml)溶液中，攪拌混合物2小時(shí)，然后加入飽和的碳酸氫鈉，繼續(xù)攪拌3小時(shí)。通過(guò)把產(chǎn)物萃取到二氯甲烷中來(lái)分離產(chǎn)物，并且通過(guò)色譜純化，得到標(biāo)題化合物(205mg)IR(CDCl3)νmax1605，1725cm-1；NMR(CDCl3)δ0.73(s，18-H’s)，1.97(s，OCOCH’s)，3.6(s，OCH’s)，3.7-4.3(b，22-H’s)，5.2-5.5(bs，16-H’s)，6.4，6.57(s，1，4-H’s)。b)2-甲氧基-3-三異丙基甲硅烷基氧基-20α-乙酰氧基甲基-19-去甲-孕-1，3，5(10)-三烯[式(I)R1＝(異丙基)3Si，R2＝CH3O，R3＝α-CH3，X＝價(jià)鍵，Y＝CH2OCOCH3]在氫氣氣氛下，把含有5％鉑/炭(40mg)的上述(a)的產(chǎn)物(205mg)的乙醇(5ml)溶液攪拌18小時(shí)。過(guò)濾并且除去溶劑，得到混有未反應(yīng)的原料的標(biāo)題化合物(195mg)IR(CDCl3)νmax1600，1720cm-1；NMR(CDCl3)δ0.73(s，18-H’s[原料])，0.8(s，18-H’s[產(chǎn)物])，2.0(s，OCOCH’s)，3.6(s，OCH’s)，3.4-4.3(b，22-H’s)，5.1-5.5(bs，16H’s)，6.4，6.6(s，1，4-H’s)。c)2-甲氧基-3-三異丙基甲硅烷基氧基-20α-羥甲基-19-去甲-孕-1，3，5(10)-三烯[式(I)R1＝(異丙基)3Si，R2＝CH3O，R3＝α-CH3，X＝價(jià)鍵.Y＝CH2OH和2-甲氧基-3-三異丙基甲硅烷基氧基-20α-羥甲基-19-去甲-孕-1，3，5(10)，16-四烯[式(I)R1＝(異丙基)3Si，R2＝CH3O，R3＝α-CH3，X＝價(jià)鍵，Y＝CH2OH，Δ16雙鍵]把氫化鋁鋰(0.5ml 1M的乙醚溶液)滴加到上述(b)的產(chǎn)物(195mg)在乙醚(4ml)中的混合物，之后攪拌所得的混合物30分鐘，用濕的硫酸鈉處理，分離得到粗的標(biāo)題化合物(175mg)IR(CDCl3)νmax1600，3620cm-1；NMR(CDCl3)δ0.73(s，18-H’s[原料])，0.8[s，18-H’s[產(chǎn)物s，大約1∶1的混合物])，3.7(s，OCH’s)，3.2-3.7(b，22-H’s)，5.1-5.5(bs，16-H’s)，6.4，6.6(s，1，4-H’s)。d)2-甲氧基-3-羥基-20α-羥甲基-1 9-去甲-孕-1，3，5(10)-三烯[式(I)R1＝H，R2＝CH3O，R3＝α-CH3，X＝價(jià)鍵，Y＝CH2OH]和2-甲氧基-3-羥基-20α-羥甲基-19-去甲-孕-1，3，5(10)，16四烯[式(I)R1＝H，R2＝CH3O，R3＝α-CH3，X＝價(jià)鍵，Y＝CH2OH，Δ16雙鍵]在室溫下，通過(guò)用四丁基氟化銨的四氫呋喃(0.3ml)溶液處理上述(c)中得到的產(chǎn)物混合物(45mg)的四氫呋喃(0.3ml)溶液過(guò)夜來(lái)進(jìn)行去甲硅烷基化，得到標(biāo)題化合物(28mg，通過(guò)制備性的薄層色譜半純化的)IR(CDCl3)νmax1600，3400-3660cm-1；NMR(CDCl3)δ0.73(s，18-H’s[原料])，0.83(s，18-H’s[產(chǎn)物s，大約1∶1的混合物])，3.8(s，OCH’s)，3.2-3.7(b，22-H’s)，5.2-5.5(bs，16-H’s)，6.4，6.63(s，1，4-H’s)。實(shí)施例32-甲氧基-3-羥基-20α-羥甲基-19-去甲-孕-1，3，5(10)，16-四烯[式(I)R1＝H，R2＝CH3O，R3＝α-CH3，X＝價(jià)鍵，Y＝CH2OH，Δ16雙鍵]通過(guò)實(shí)施例2(c)和(d)的方法，從實(shí)施例2(a)的產(chǎn)物制得了標(biāo)題化合物IR(CDCl3)νmax1580，3420-3660cm-1；NMR(CDCl3)δ0.83(s，18-Me)，1.07(d，21-Me)，3.3-4.0(bm，22-H’s)，3.8(s，OMe)，5.1-5.6(bm，16-H，OH)，6.47，6.6(2xd，1，4H’s)。實(shí)施例42-甲氧基-3-羥基-20α-乙酰氧基甲基-19-去甲-孕-1，3.5(10)，16-四烯[式(I)R1＝H，R2＝CH3O，R3＝α-CH3，X＝價(jià)鍵，Y＝CH2O-CO-CH3，Δ16雙鍵]通過(guò)使用實(shí)施例2(d)的方法把實(shí)施例2(a)的產(chǎn)物去甲硅烷基化，制得標(biāo)題化合物IR(CDCl3)νmax1580，3420-3660cm-1；NMR(CDCl3)δ0.77(s，18-Me)，1.05(d，21-Me)，2.0(s，COMe)，3.2-4.3(bm，22-H’s)，3.8(s，OMe)，5.0-5.6(bm，16-H，OH)，6.47，6.6(2xd，1，4-H’s)。實(shí)施例52-甲氧基-3-羥基-20α-羥甲基-19-去甲-孕-1，3，5(10)-三烯[式(I)R1＝H，R2＝CH3O，R3＝α-CH3，X＝價(jià)鍵，Y＝CH2OH]在氫氣氣氛下，把含有5％鉑/炭(20mg)的實(shí)施例3的產(chǎn)物(60mg)的乙醇(6ml)溶液攪拌過(guò)夜，之后過(guò)濾除去催化劑，蒸去溶劑，得到粗產(chǎn)物，通過(guò)制備性的薄層色譜純化粗產(chǎn)物，得到標(biāo)題化合物(44mg)IR(CDCl3)νmax1580，3420-3640cm-1；NMR(CDCl3)δ0.73(s，18-Me)，1.07(d，21-Me)，3.3-3.7(bm，22-H’s)，3.83(s，OMe)，6.5，6.63(2xd，1，4-H’s)。實(shí)施例6a)2-甲氧基-3-羥基-20α-乙酰氧基甲基-19-去甲-孕-1，3，5(10)，16-四烯-3-O-氨基磺酸酯[式(I)R1＝NH2-SO2，R2＝CH3O，R3＝α-CH3，X＝價(jià)鍵，Y＝CH2O-CO-CH3，Δ16雙鍵]把氨基磺酰氯(130mg)加入實(shí)施例4的產(chǎn)物(84mg)和二叔丁基氨基吡啶(134mg)的二氯甲烷(5ml)溶液中，攪拌所得的混合物過(guò)夜。
然后用乙醚稀釋混合物，用水洗滌，然后用鹽水洗滌，干燥，之后除去溶劑，通過(guò)制備性的薄層色譜純化粗產(chǎn)物，得到未反應(yīng)的原料(14mg)和標(biāo)題化合物(61mg)IR(CDCl3)νmax1600，1715，3200-3500cm-1；NMR(CDCl3)δ0.8(s，18-Me)，2.0(s，COMe)，3.6-4.3(bm，22H’s，OMe)，5.1-5.4(bm，16-H，OH)，6.77，6.9(2xd，1，4H’s)。b)2-甲氧基-3-羥基-20α-乙酰氧基甲基-19-去甲-孕-1，3，5(10)-三烯-3-O-氨基磺酸酯[式(I)R1＝NH2-SO2，R2＝CH3O，R3＝α-CH3，X＝價(jià)鍵，Y＝CH2O-CO-CH3]按照實(shí)施例2(d)的方法，通過(guò)把實(shí)施例2(b)的產(chǎn)物去甲硅烷基化，并且按照上述(a)中的方法把這樣得到的3-羥基化合物氨基磺?；?，制得標(biāo)題化合物。另外可以按照實(shí)施例2(b)的方法，把上述(a)的產(chǎn)物氫化。實(shí)施例7a)2-甲氧基-3-羥基-20α-羥甲基-19-去甲-孕-1，3，5(10)，16-四烯-3-O-氨基磺酸酯[式(I)R1＝NH2-SO2，R2＝CH3O，R3＝α-CH3，X＝價(jià)鍵，Y＝CH2OH，Δ16雙鍵]把含有碳酸氫鈉(38mg)的實(shí)施例6(a)的產(chǎn)物(40mg)的甲醇(3ml)和水(1ml)的溶液攪拌過(guò)夜。通過(guò)制備性的薄層色譜分離和純化，得到標(biāo)題化合物(16mg)IR(CDCl3)νmax3200-3600cm-1；NMR(CDCl3)δ0.83(s，18-Me)，3.3-3.83(bm，22-H’s，OMe)，4.1-4.8(bm)，5.2-5.6(bm，16-H，OH)，6.4，7.1(2xd，1，4-H’s)。b)2-甲氧基-3-羥基-20α-羥甲基-19-去甲-孕-1，3，5(10)-三烯-3-O-氨基磺酸酯[式(I)R1＝NH2-SO2，R2＝CH3O，R3＝α-CH3，X＝價(jià)鍵，Y＝CH2OH]通過(guò)使用上述(a)的方法水解實(shí)施例6(b)的產(chǎn)物或者通過(guò)使用實(shí)施例2(b)的方法氫化上述(a)的產(chǎn)物，制得標(biāo)題化合物。實(shí)施例8a)3-羥基-20α-羥甲基-19-去甲-孕-1，3，5(10)三烯-3，22-雙-甲氧基甲基醚[式(I)R1＝CH3OCH2，R2＝H，R3＝α-CH3，X＝價(jià)鍵，Y＝CH2OCH2OCH3]把可以通過(guò)WO-A-0068246的制備3(b)的產(chǎn)物去甲硅烷基化而制備的相應(yīng)的3，22-二醇(850mg)溶于含有二異丙基乙胺(3.9ml)的四氫呋喃(23ml)中，在冷卻(0℃)下，滴加甲氧基甲基氯(1ml)進(jìn)行處理。把所得的混合物溫?zé)岬绞覝?，然后回流過(guò)夜。通過(guò)色譜分離和純化，得到標(biāo)題化合物(900mg)IR(CDCl3)νmax1600cm-1；NMR(CDCl3)δ0.7(s，18-Me)，1.08(d，21-Me)，3.27，3.37(ea s，OMe)，4.5，5.0(ea s，OCH20)，6.5-7.3(m，1，2，4-H’s)。b)2-甲?；?3-羥基-20α-羥甲基-19-去甲-孕-1，3，5(10)-三烯-3，22-雙-甲氧基甲基醚[式(I)R1＝CH3OCH2，R2＝H·CO，R3＝α-CH3，X＝價(jià)鍵，Y＝CH2OCH2OCH3]在-78℃下，把仲丁基鋰的四氫呋喃(3.3ml，4.3mM)溶液滴加到從上述(a)得到的醚(440mg)的四氫呋喃(6.6ml)溶液中，在-78℃下攪拌所得的溶液2小時(shí)。用無(wú)水二甲基甲酰胺(2ml)處理，然后溫?zé)岬绞覝剡^(guò)夜。通過(guò)色譜分離和純化，得到標(biāo)題化合物(323mg)IR(CDCl3)νmax1600，1730cm-1；NMR(CDCl3)δ0.7(s，18-Me)，1.08(d，21-Me)，3.3，3.43(ea s，OMe)，4.5，5.13(ea s，OCH2O)，6.73，7.57(ea s，1，4-H’s)，10.2(s，O＝CH)。c)2，3-二羥基-20α-羥甲基-19-去甲-孕-1，3，5(10)-三烯-3，22-雙-甲氧基甲基醚[式(I)R1＝CH3OCH2，R2＝HO，R3＝α-CH3，X＝價(jià)鍵，Y＝CH2OCH2OCH3]把間氯過(guò)苯甲酸(204mg)的二氯甲烷(2ml)溶液滴加到含有磷酸氫二鈉(245mg)的從上述(b)得到的甲?；衔?220mg)的二氯甲烷(4ml)溶液中。在室溫下攪拌混合物過(guò)夜，然后分離得到一種2-甲酸酯中間產(chǎn)物。把該中間產(chǎn)物溶于甲醇(4ml)中，用氬氣給溶液脫氧，加入氫氧化鈉水溶液(1ml，1M)，攪拌所得的溶液2小時(shí)，然后調(diào)節(jié)到pH7。通過(guò)制備性的薄層色譜進(jìn)行分離和純化，得到標(biāo)題化合物(152mg)IR(CDCl3)νmax1590，3200-3600cm-1；NMR(CDCl3)δ0.7(s，18-Me)，1.14(d，21-Me)，3.27，3.42(ea s，OMe)，4.5，5.0(eas，OCH)，5.5-5.7(bm，OH)，6.5，6.9(ea s，1，4H’s)。d)2-乙氧基-3-羥基-20α-羥甲基-19-去甲-孕-1，3，5(10)-三烯-3，22-雙-甲氧基甲基醚[式(I)R1＝CH3OCH2，R2＝C2H5O，R3＝α-CH3，X＝價(jià)鍵，Y＝CH2OCH2OCH3]把含有無(wú)水碳酸鉀(300mg)的從上述(c)得到的2-羥基化合物(90mg)的無(wú)水二甲基甲酰胺(2.5ml)溶液攪拌10分鐘，然后用碘代乙烷(378mg)處理，然后用四丁基碘化銨(4mg)處理，在攪拌所得的混合物5小時(shí)，之后再加入四丁基碘化銨(378mg)，攪拌混合物過(guò)夜。通過(guò)制備性的薄層色譜進(jìn)行分離和純化，得到標(biāo)題化合物(72mg)IR(CDCl3)νmax1590cm-1；NMR(CDCl3)δ0.73(s，18-Me)，1.1(d，21-Me)，1.4(t，Et)，3.35，3.5(ea s，OMe)，3.7-4.7(q，Et)，4.58，5.08(ea s，OCH)，5.5-5.7(bm，OH)，6.75(s，1，4-H’s)。e)2-乙氧基-3-羥基-20α-羥甲基-19-去甲-孕-1，3，5(10)-三烯[式(I)R1＝H，R2-C2H5O，R3＝α-CH3，X＝價(jià)鍵，Y＝CH2OH]在室溫下，把含有鹽酸(0.8ml，6N)的上述(d)中得到的雙醚(72mg)的四氫呋喃(1.6ml)溶液攪拌2天，之后，依然能觀察到原料的存在。通過(guò)制備性的薄層色譜分離和純化，得到未反應(yīng)的原料(25mg)和標(biāo)題化合物(20mg)NMR(CDCl3)δ0.72(s，18-Me)，3.2-3.7(bm，22-H’s)，3.7-4.3(q，Et)，5.2-5.5(bm，OH)，6.47，6.61(ea s，1-，4-H’s)。f)2-甲酰基-3-羥基-20α-羥甲基-19-去甲-孕-1，3，5(10)-三烯[式(I)R1＝H，R2＝H·CO，R3＝α-CH3X＝價(jià)鍵，Y＝CH2OH]用鹽酸(6ml，6N)處理上述(b)中得到的甲酰基化合物(100mg)的四氫呋喃(2ml)溶液，在室溫下儲(chǔ)藏混合物2天，之后，依然能觀察到原料的存在。通過(guò)制備性的薄層色譜分離和純化，得到標(biāo)題化合物(54mg)IR(CDCl3)νmax1600，1650，3100-3660cm-1；NMR(CDCl3)δ0.8(s，18-Me)，3.2-3.9(m，22-H’s)，6.6-7.2(ea s，1，4H’s)，9.63(s，O＝CH)。g)2-羥甲基-3-羥基-20α-羥甲基-19-去甲-孕-1，3，5(10)-三烯[式(I)R1＝H，R2＝HOCH2，R3＝α-CH3，X＝價(jià)鍵，Y＝CH2OH]在0℃下，把氫化鋁鋰(0.75ml，1M的四氫呋喃溶液)滴加到上述(f)的2-甲?；衔?32mg)的四氫呋喃(1.5ml)溶液中，把所得的溶液溫?zé)岬绞覝?，然后攪?小時(shí)。通過(guò)制備性的薄層色譜分離和純化，得到標(biāo)題化合物(10mg)IR(CDCl3)νmax3500-3660cm-1；NMR(CDCl3)δ0.73(s，18-Me)，3.2-3.8(m，22-H’s)，4.4-4.8(bm，2-CH2OH)，6.6-7.2(ea s，1，4-H’s)。h)2-丙烯基-3-羥基-20α-羥甲基-19-去甲-孕-1，3，5(10)-三烯[式(I)R＝H，R＝CH3-CH＝CH，R3＝α-CH3，X＝價(jià)鍵，Y＝CH2OH]通過(guò)把上述(f)中得到的2-甲?；衔锏乃臍溥秽芤杭尤氲酵ㄟ^(guò)使溴化乙基三苯基膦鎓的四氫呋喃溶液與雙三甲基甲硅烷基氨基鋰反應(yīng)而形成的內(nèi)鎓鹽溶液中，得到標(biāo)題化合物。另外可以使受到保護(hù)的上述(b)中的2-甲?；衔锱c同樣的內(nèi)鎓鹽反應(yīng)，然后按照上述(f)的方法除去甲氧基甲基保護(hù)基。實(shí)施例9a)2-甲氧基-3-三異丙基甲硅烷基氧基-20α-羥甲基-19-去甲-孕-1，3，5(10)-三烯[式(I)R1＝(異丙基)3Si，R2＝CH3O，R3＝α-CH3，X＝價(jià)鍵，Y＝CH2OH]首先通過(guò)用氫化鋁鋰(1.2ml，2.5當(dāng)量)的乙醚(7ml)溶液在室溫下處理實(shí)施例2(a)的20α-乙酰氧基甲基產(chǎn)物(360mg)30分鐘，使其脫乙?；?。然后通過(guò)5％鉑/炭(40mg)的乙醇(10ml)溶液來(lái)氫化這樣得到的粗20α-羥甲基化合物(200mg)。
過(guò)濾并且除去溶劑，得到標(biāo)題化合物(175mg)IR(CDCl3)νmax1600，3300-3640cm-1；NMR(CDCl3)δ0.73(s，18-Me)，3.1-3.5(m，22-H；s，OMe)，6.43，6.6(ea s，1，4-H’s)。b)2-甲氧基-3-三異丙基甲硅烷基氧基-19-去甲-孕-1，3，5，(10)-三烯-20α-甲醛基[式(I)R1＝(異丙基)3Si，R2＝CH3O，R3＝α-CH3，X＝價(jià)鍵，Y＝CHO]用吡啶鎓重鉻酸鹽(165mg)處理上述(a)中得到的醇(175mg)的二氯甲烷(4ml)溶液2.5小時(shí)。由于觀察到反應(yīng)不完全(50％，薄層色譜作對(duì)照)，再加入吡啶鎓重鉻酸鹽(165mg)，再攪拌反應(yīng)混合物2.5小時(shí)，這時(shí)觀察到原料已經(jīng)消耗完。通過(guò)制備性的薄層色譜分離和純化，得到標(biāo)題化合物(125mg)IR(CDCl3)νmax1600，1710cm-1；NMR(CDCl3)δ0.73(s，18-Me)，3.67(s，OMe)，6.4，6.6(ea s，1，4-H’s)，9.38(d，CH＝O)。c)2-甲氧基-3-三異丙基甲硅烷基氧基-20α-(1-羥乙基)-19-去甲-孕-1，3，5(10)-三烯[式(T)R1＝(異丙基)3Si，R2＝CH3O，R3＝α-CH3，X＝價(jià)鍵，Y＝CH(CH3)OH]在0℃下，把甲基溴化鎂(0.53ml，1.4M的四氫呋喃/甲苯溶液)滴加到上述(b)中得到的醛(125mg)的乙醚溶液中。在0℃反應(yīng)30分鐘，在室溫下反應(yīng)30分鐘，然后通過(guò)加入飽和的氯化銨溶液來(lái)結(jié)束反應(yīng)，分離產(chǎn)物，得到標(biāo)題化合物(125mg)IR(CDCl3)νmax1590，3500-3640cml；NMR(CDCl3)δ0.7(s，18-Me)，3.3-3.67(m，CHOH；s，OMe)，6.4，6.6(ea s，1，4H’s)。d)2-甲氧基-3-羥基-20α-(1-羥乙基)-19-去甲-孕-1，3，5(10)-三烯[式(I)R1＝H，R2＝CH3O，R3＝α-CH3，X＝價(jià)鍵，Y＝CH(CH3)OH通過(guò)用四丁基氟化銨(0.3ml)的四氫呋喃(0.3ml)溶液處理上述(c)中得到的產(chǎn)物(45mg)，使其去甲硅烷基化(薄層色譜對(duì)照，大約4小時(shí))。通過(guò)制備性的薄層色譜分離和純化，得到標(biāo)題化合物(24mg)IR(CDCl3)νmax1580，3460-3640cm-1；NMR(CDCl3)δ0.75(s，18-Me)，1.05(d，21-Me)，3.4-4.1(m，CHOH；s，OMe)，6.5，6.65(eas，1，4-H’s)。e)2-甲氧基-3-羥基-20α-(1-羥基丙-2-炔基)-19-去甲-孕-1，3，5(10)-三烯[式(I)R1＝H，R2＝CH3O，R3＝α-CH3，X＝價(jià)鍵，Y＝-CH(OH)C≡CH]通過(guò)用乙炔鈉處理上述(b)中得到的醛，然后按照上述(d)中的方法去甲硅烷基化，制得標(biāo)題化合物。f)2-甲氧基-3-羥基-20α-(1-羥基丁-3-炔基)-19-去甲-孕-1，3，5(10)-三烯[式(I)R1＝H，R2＝CH3O，R3＝α-CH3，X＝價(jià)鍵，Y＝CH(OH)CH2C≡CH]通過(guò)用WO-A-0068246的實(shí)施例3(b)中描述的方法制備的丙炔鋁試劑處理上述(b)中得到的醛，然后按照上述(d)中的方法進(jìn)行去甲硅烷基化，制得標(biāo)題化合物。g)2-甲氧基-3-羥基-20α-(2-羥基丙-2-基)-19-去甲-孕-1，3，5(10)-三烯[式(T)R1＝H，R2＝CH，R3＝α-CH3，X＝價(jià)鍵，Y＝-C(OH)(CH3)2]按照上述(b)的方法，通過(guò)使用吡啶鎓重鉻酸鹽氧化上述(c)中得到的20α-(1-羥乙基)化合物，然后按照上述(c)中的方法與甲基溴化鎂反應(yīng)，按照上述(d)中的方法進(jìn)行去甲硅烷基化，得到標(biāo)題化合物。h)2-甲氧基-3-三異丙基甲硅烷基氧基-19-去甲-孕-1，3，5(10)-三烯-20β-甲醛[式(T)，R’＝(異丙基)3Si，R2＝CH3O，R3＝β-CH3，X＝價(jià)鍵，Y＝CHO]按照與WO-A-9516672的制備5中所述相似的方式，通過(guò)用1，8-二氮雜雙環(huán)[5.4.0]十一碳-7-烯處理上述(b)中得到的醛，使其異構(gòu)化，然后通過(guò)色譜(硅膠G，甲苯/己烷，極性更大的異構(gòu)體)分離新形成的異構(gòu)體，得到標(biāo)題化合物。i)2-甲氧基-3-羥基-19-去甲-孕-1，3，5(10)-三烯20β-甲醛基[式(I)R1＝H，R2＝CH3O，R3＝β-CH3，X＝價(jià)鍵，Y＝CHO]按照上述(d)的方法把上述(h)中得到的表位醛去甲硅烷基化，生成標(biāo)題化合物。j)2-甲氧基-3-羥基-20β-羥甲基-19-去甲-孕-1，3，5(10)-三烯[式(I)R1＝H，R2＝CH3O，R3＝β-CH3，X＝價(jià)鍵，Y＝CH2OH通過(guò)用硼氫化鈉還原上述(h)中得到的表位醛，然后按照上述(d)的方法進(jìn)行去甲硅烷基化，得到標(biāo)題化合物。k)2-甲氧基-3-三異丙基甲硅烷基氧基-20α-(2-氧代乙基)-19-去甲-孕-1，3，5(10)-三烯[式(I)R1＝(異丙基)3Si，R2＝CH3O，R3＝-CH3，X＝CH2，Y＝CHO]按照與WO-A-9945024的制備1中所述相似的方式，通過(guò)使上述(b)的醛產(chǎn)物與甲氧基亞甲基三苯基正膦反應(yīng)，然后通過(guò)對(duì)中間體烯醇醚進(jìn)行酸水解，制得標(biāo)題化合物。l)2-甲氧基-3-羥基-20α-(2-氧代乙基)-19-去甲-孕-1，3，5(10)-三烯[式(I)R1＝H，R2＝CH3O，R3＝α-CH3，X＝CH2，Y＝CHO]按照上述(d)中所述的方法，通過(guò)把上述(k)的產(chǎn)物去甲硅烷基化而制得標(biāo)題化合物。m)2-甲氧基-3-羥基-20α-(2-羥乙基)-19-去甲-孕-1，3，5(10)-三烯[式(I)R1＝H，R2-CH3O，R3＝α-CH3，X＝CH2，Y＝CH2OH通過(guò)用硼氫化鈉還原上述(k)的醛產(chǎn)物，然后按照上述(d)中所述的方法進(jìn)行去甲硅烷基化，制得標(biāo)題化合物。實(shí)施例102-甲氧基-3-羥基-20α-羥甲基-19-去甲-孕-1，3，5(10)，16-四烯-3，22-雙-O-氨基磺酸酯[式(I)R1＝NH2-SO2，R2＝CH3O，R3＝α-CH3，X＝價(jià)鍵，Y＝CH2OSO2NH2，Δ16雙鍵]把氨基磺酰氯(62mg)加入實(shí)施例3的產(chǎn)物(16mg)和二甲基氨基吡啶(60mg的)的二氯甲烷(1ml)溶液中，攪拌所得的混合物過(guò)夜。然后用乙醚稀釋混合物，用水洗滌，然后用鹽水洗滌，干燥，然后除去溶劑，通過(guò)制備性的薄層色譜純化粗產(chǎn)物，得到標(biāo)題化合物(10mg)IR(CDCl3)νmax1620，3100-3600cm-1；NMR(CDCl3)δ0.8(s，18-Me)，1.12(d，21-Me)，3.77(OMe)，5.0-5.5(bm，16-H)，6.73，6.87(eas，1，4-H’s)。實(shí)施例11a)2-甲氧基-3-三異丙基甲硅烷基氧基-20α-羥甲基-19-去甲-孕-1，3，5(10)，16-四烯-22-O-氨基磺酸酯[式(I)R1＝(異丙基)2Si，R2＝CH3O，R3＝α-CH3，X＝價(jià)鍵，Y＝CH2OSO2NH2，Δ16雙鍵]把氨基磺酰氯(60 mg)加入2-甲氧基-3-三異丙基甲硅烷基氧基-20α-羥甲基-19-去甲-孕-1，3，5(10)，16-四烯[式(I)R1＝(異丙基)3Si，R2＝CH3O，R3＝α-CH3，X＝價(jià)鍵，Y＝CH2OH，Δ16雙鍵，從實(shí)施例9(a)的第一步得到](50 mg)和二甲基氨基吡啶(60mg)的二氯甲烷(2.5ml)溶液中，攪拌所得的混合物1小時(shí)。然后用乙醚稀釋混合物，用水洗滌，然后用鹽水洗滌，干燥，然后除去溶劑，通過(guò)制備性的薄層色譜純化粗產(chǎn)物，得到標(biāo)題化合物(55mg)IR(CDCl3)νmax1590，3200-3500cm-1；NMR(CDCl3)δ0.83(s，18-Me)，3.7(s，OMe)，4.4-4.8(bm，NH’s)，5.2-5.5(bm，16-H)，6.4，6.6(ea s，1，4-H’s)。b)2-甲氧基-3-羥基-20α-羥甲基-19-去甲-孕-1，3，5(10)，16-四烯-22-O-氨基磺酸酯[式(I)R1＝H，R2＝CH3O，R3＝α-CH3，X＝價(jià)鍵，Y＝CH2OSO2NH2，Δ16雙鍵]在室溫下，用四丁基氟化銨的四氫呋喃處理上述(a)中得到的甲硅烷基醚(55mg)3小時(shí)，使其去甲硅烷基化。通過(guò)制備性的薄層色譜分離和純化，得到標(biāo)題化合物(30mg)IR(CDCl3)νmax1590，3200-3600cm-1。
權(quán)利要求
1.式(I)的化合物 其中R1代表H或O-保護(hù)基；R2代表羥基、低級(jí)烷氧基、甲醛基、低級(jí)鏈烯基或者是羥基-或低級(jí)烷氧基-取代的低級(jí)烷基；R3代表具有α-或β構(gòu)型的甲基；X代表C1-3鏈烯基或一條價(jià)鍵；Y代表甲醛基或式-C(R4)(R5)OR1的基團(tuán)，其中R1如前面所定義，而R4和R5，可以相同或不同，各自選自H、烷基、鏈烯基和炔基，使得R4和R5的碳原子總數(shù)不超過(guò)三個(gè)，條件是當(dāng)R4和R5不是H時(shí)，X是一條價(jià)鍵；而點(diǎn)劃線表示在16(17)-位可以選擇性地存在一條雙鍵。
2.權(quán)利要求1的化合物，其中R2代表羥基或低級(jí)烷氧基，而Y是甲醛基或式-C(R4)(R5)OR1的基團(tuán)，其中R1如權(quán)利要求1中所定義，并且R4和R5都代表H。
3.權(quán)利要求1的化合物，其中Y是式-C(R4)(R5)OR1的基團(tuán)，其中R1如權(quán)利要求1中所定義，R4和R5中的一個(gè)是甲基、乙基、乙烯基、乙炔基或丙炔基，而另一個(gè)是H，或者R4和R5都代表甲基。
4.前面任意一項(xiàng)權(quán)利要求中所述的化合物，其中每個(gè)R1選自H、低級(jí)烷基和代謝上不穩(wěn)定的O-保護(hù)基。
5.權(quán)利要求4的化合物，其中所說(shuō)的代謝上不穩(wěn)定的O-保護(hù)基是氨基磺?；?br> 6.前面任意一項(xiàng)權(quán)利要求中所述的化合物，其中R2選自甲氧基、乙氧基、丙氧基、乙烯基、丙-1-烯基、丁-1-烯基、羥甲基、羥乙基、羥丙基、甲氧基甲基、甲氧基乙基、甲氧基丙基、乙氧基甲基、乙氧基乙基和乙氧基丙基。
7.下列化合物2-甲氧基-3-羥基-19-去甲-膽-1，3，5(10)，16-四烯-24-醇；2-甲氧基-3-羥基-19-去甲-膽-1，3，5(10)，16-四烯-24-醇-24-氨基磺酸酯；2-甲氧基-3-羥基-20α-羥甲基-19-去甲-孕-1，3，5(10)-三烯；2-甲氧基-3-羥基-20α-羥甲基-19-去甲-孕-1，3，5(10)，16-四烯；2-甲氧基-3-羥基-20α-乙酰氧基甲基-19-去甲-孕-1，3，5(10)，16-四烯；2-甲氧基-3-羥基-20α-乙酰氧基甲基-19-去甲-孕-1，3，5(10)，16-四烯-3-O-氨基磺酸酯；2-甲氧基-3-羥基-20α-乙酰氧基甲基-19-去甲-孕-1，3，5(10)-三烯-3-O-氨基磺酸酯；2-甲氧基-3-羥基-20α-羥甲基-19-去甲-孕-1，3，5(10)，16-四烯-3-O-氨基磺酸酯；2-甲氧基-3-羥基-20α-羥甲基-19-去甲-孕-1，3，5(10)-三烯-3-O-氨基磺酸酯；2-乙氧基-3-羥基-20α-羥甲基-19-去甲-孕-1，3，5(10)-三烯；2-羥甲基-3-羥基-20α-羥甲基-19-去甲-孕-1，3，5(10)-三烯；2-丙烯基-3-羥基-20α-羥甲基-19-去甲孕-1，3，5(10)-三烯；2-甲氧基-3-羥基-20α-(1-羥乙基)-19-去甲-孕-1，3，5(10)-三烯；2-甲氧基-3-羥基-20α-(1-羥基丙-2-炔基)-19-去甲-孕-1，3，5(10)-三烯；2-甲氧基-3-羥基-20α-(1-羥基丁-3-炔基)-19-去甲-孕-1，3，5(10)-三烯；2-甲氧基-3-羥基-20α-(2-羥基丙-2-基)-19-去甲-孕-1，3，5(10)-三烯 ；2-甲氧基-3-羥基-19-去甲-孕-1，3，5(10)-三烯-20β-甲醛基；2-甲氧基-3-羥基-20β-羥甲基-19-去甲-孕-1，3，5(10)-三烯；2-甲氧基-3-羥基-20α-(2-氧代乙基)-19-去甲-孕-1，3，5(10)-三烯；2-甲氧基-3-羥基-20α-(2-羥乙基)-19-去甲-孕-1，3，5(10)-三烯；2-甲氧基-3-羥基-20α-羥甲基-19-去甲-孕-1，3，5(10)，16-四烯-3，22-雙-O-氨基磺酸酯；和2-甲氧基-3-羥基-20α-羥甲基-19-去甲-孕-1，3，5(10)，16-四烯-22-O-氨基磺酸酯。
8.前面任意一項(xiàng)權(quán)利要求中所說(shuō)的式(I)的活性化合物用于控制癌癥；用作促進(jìn)傷口愈合；用于治療骨質(zhì)疾病、自免疫疾病、主體移植反應(yīng)、移植排斥、炎癥、腫瘤或增生、皮膚病、高血壓、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、牛皮癬性關(guān)節(jié)炎、哮喘、認(rèn)知障礙或老年性癡呆；用于人或動(dòng)物主體的生育控制；用于降低高水平的血清膽固醇或者用于控制與凝血有關(guān)的疾病。
9.權(quán)利要求1-7的任意一項(xiàng)權(quán)利要求所述的式(I)的活性化合物用作抗血管增生劑。
10.權(quán)利要求1-7的任意一項(xiàng)權(quán)利要求所述的式(I)的活性化合物在生產(chǎn)藥物中的用途，所述藥物用于控制癌癥；用作促進(jìn)傷口愈合；治療骨質(zhì)疾病、自免疫疾病、主體移植反應(yīng)、移植排斥、炎癥、腫瘤或增生、皮膚病、高血壓、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、牛皮癬性關(guān)節(jié)炎、哮喘、認(rèn)知障礙或老年性癡呆；用于人或動(dòng)物主體的生育控制、用于降低高水平的血清膽固醇或者用于控制與凝血有關(guān)的疾病。
11.包含權(quán)利要求1-7的任意一項(xiàng)權(quán)利要求所述的式(I)的活性化合物和一種或多種生理上可以接受的載體或賦形劑的藥物組合物。
12.一種治療人或非人動(dòng)物主體，控制癌癥；促進(jìn)傷口愈合；治療骨質(zhì)疾病、自免疫疾病、主體移植反應(yīng)、移植排斥、炎癥、腫瘤或增生、皮膚病、高血壓、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、牛皮癬性關(guān)節(jié)炎、哮喘、認(rèn)知障礙或老年性癡呆；控制生育；降低高水平的血清膽固醇或者控制與凝血有關(guān)的疾病的方法，包括給所說(shuō)的主體服用治療有效量的權(quán)利要求1-7的任意一項(xiàng)權(quán)利要求中所說(shuō)的一種式(I)的活性化合物。
13.一種制備權(quán)利要求1中所定義的式(I)化合物的方法，包括使在一個(gè)或多個(gè)步驟中包含所需要的17-位側(cè)鏈的前體的化合物與一種或多種用于形成所需要的17-位側(cè)鏈的反應(yīng)試劑反應(yīng)，然后如果必要和/或需要的話，通過(guò)反應(yīng)引入所需要的2-位取代基和/或除去任何O-保護(hù)基。
全文摘要
式(I)的化合物具有很強(qiáng)的細(xì)胞調(diào)控活性，包括抗增殖作用和抗血管增生作用，其中R
文檔編號(hào)A61P37/06GK1444597SQ0181244
公開(kāi)日2003年9月24日 申請(qǐng)日期2001年5月11日 優(yōu)先權(quán)日2000年5月11日
發(fā)明者R·H·海斯, S·K·S·賽蒂, M·M·派奇特, M·蓋爾 申請(qǐng)人:醫(yī)學(xué)與化學(xué)研究所