專利名稱：作為細(xì)胞增殖抑制劑的7－氧代吡啶并嘧啶的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及7-氧代-吡啶并嘧啶。具體地，本發(fā)明提供了2，6-二取代的7-氧代-吡啶并[2，3-d]嘧啶，其制備方法，含有它們的藥物制劑，以及應(yīng)用它們的方法。
促分裂原活化的蛋白激酶(MAP)屬于定向脯氨酸的絲氨酸/蘇氨酸激酶家族，它們通過(guò)雙磷酸化激活它們的底物。該激酶通過(guò)大量包括營(yíng)養(yǎng)和滲透壓應(yīng)力、UV光、生長(zhǎng)因子、內(nèi)毒素和炎性細(xì)胞因子在內(nèi)的信號(hào)激活。MAP激酶中有一組是包括多種同工型的p38激酶組(例如，p38α，p39β，p38γ和p38δ)。該p38激酶負(fù)責(zé)磷酸化和激活轉(zhuǎn)錄因子以及其它激酶，其被物理和化學(xué)應(yīng)力、促炎性細(xì)胞因子和細(xì)菌脂多糖激活。
更重要的是，已經(jīng)表明p38磷酸化的產(chǎn)物介導(dǎo)包括TNF和IL-1的炎性細(xì)胞因子的產(chǎn)生，以及環(huán)加氧酶-2的產(chǎn)生。這些細(xì)胞因子的每一種都涉及多種病癥。例如，TNF-a是一種主要由激活的單細(xì)胞和巨嗜細(xì)胞產(chǎn)生的細(xì)胞因子。其過(guò)量或無(wú)控制的產(chǎn)生在類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的病理學(xué)中發(fā)揮病因的作用。最近，已經(jīng)表明TNF產(chǎn)生的抑制在治療炎癥、炎性腸病、多發(fā)性硬化和哮喘方面有廣泛應(yīng)用。
TNF還涉及病毒感染，例如HIV，流感病毒，以及包括1型單純皰疹病毒(HSV-1)，2型單純皰疹病毒(HSV-2)，巨細(xì)胞病毒(CMV)，水痘-帶狀皰疹病毒(VZV)，Epstein-Barr病毒，人皰疹病毒-6(HHV-6)，人皰疹病毒-7(HHV-7)，人皰疹病毒-8(HHV-8)在內(nèi)的皰疹病毒，假狂犬病和鼻氣管炎，等。
同樣，IL-1也是由激活的單細(xì)胞和巨嗜細(xì)胞產(chǎn)生的，并且在許多包括類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、發(fā)熱、和骨重吸收的減弱在內(nèi)的病理生理反應(yīng)中起作用。
另外，p38的介入可能與中風(fēng)、阿爾茨海默氏病、骨關(guān)節(jié)炎、肺損傷、膿毒性休克、血管發(fā)生、皮炎、牛皮癬和特異性皮炎有關(guān)，參見(jiàn)，例如，J.Exp.Opin.Ther.Patents，(2000)10(1)。
WO 96/34867公開(kāi)了某些作為蛋白酪氨酸激酶介導(dǎo)的細(xì)胞增殖的抑制劑的吡啶并[2，3-d]嘧啶。
通過(guò)抑制p38激酶而對(duì)這些細(xì)胞因子進(jìn)行抑制有益于控制、減少和緩解許多這些疾病的病癥。
一方面，本發(fā)明提供了下式表示的化合物 其中R1為氫或烷基；R2為取代的環(huán)烷基，雜取代的環(huán)烷基，雜烷基取代的環(huán)烷基，雜取代的環(huán)烷基-烷基，雜環(huán)基，雜環(huán)基螺環(huán)烷基，芳烷氧基，烷氧基，烷基-S(O)n-亞烷基-(其中n為1或2)，或SO2Ar2；R3為氫，氨基，單烷基氨基，二烷基氨基，?；被?NRa-C(＝O)-Rb(其中Ra為氫或烷基和Rb為雜環(huán)基或雜烷基)，烷基，環(huán)烷基，芳基，芳烷基，鹵代烷基，雜烷基，氰基烷基，-亞烷基-C(O)-R(其中R為氫，烷基，羥基，烷氧基，氨基，單烷基氨基或二烷基氨基)?；?，或苯二甲酰亞氨基烷基；以及每個(gè)Ar1和Ar2獨(dú)立地為芳基；或其藥用鹽或前體藥物。
式I的化合物和其上述鹽是蛋白激酶的抑制劑，表現(xiàn)有效的體內(nèi)抗p38活性。因此，這類化合物可以用于治療促炎性細(xì)胞因子例如TNF和IL-1介導(dǎo)的疾病。
因此，本發(fā)明的另一個(gè)方面提供了用于治療p38介導(dǎo)的疾病或病癥的方法，其中對(duì)需要該治療的患者給藥治療有效量的式I化合物。
本發(fā)明的另一個(gè)方面提供了制備上述化合物的方法。
本發(fā)明的另一個(gè)方面提供了制備用于治療p38介導(dǎo)的疾病或病癥的藥物的方法。
除非另有說(shuō)明，用于說(shuō)明書(shū)和權(quán)利要求的下列術(shù)語(yǔ)含義如下″?；迨侵富鶊F(tuán)-C(O)R，其中R為氫，烷基，環(huán)烷基，環(huán)烷基烷基，苯基或苯基烷基，其中烷基，環(huán)烷基，環(huán)烷基烷基和苯基烷基如本文中所定義。代表性的例子包括但不限于甲?；?，乙?；?，環(huán)己基羰基，環(huán)己基甲基羰基，苯甲酰基，芐基羰基等等。
″?；被迨侵富鶊F(tuán)-NR′C(O)R，其中R′為氫或烷基，和R為氫，烷基，環(huán)烷基，環(huán)烷基烷基，苯基或苯基烷基，其中烷基，環(huán)烷基，環(huán)烷基烷基和苯基烷基如本文中所定義。代表性的例子包括但不限于甲?；被?，乙酰基氨基，環(huán)己基羰基氨基，環(huán)己基甲基-羰基氨基，苯甲酰基氨基，芐基羰基氨基等等。
″烷氧基″是指基團(tuán)-OR其中R為如本文中定義的烷基，例如甲氧基，乙氧基，丙氧基，丁氧基等等。
″烷基″是指1-6個(gè)碳原子的直鏈飽和一價(jià)烴基或3-6個(gè)碳原子的支鏈飽和一價(jià)烴基，例如甲基，乙基，丙基，2-丙基，n-丁基，異-丁基，叔-丁基，戊基等等。
″亞烷基″是指1-6個(gè)碳原子的直鏈飽和二價(jià)烴基或3-6個(gè)碳原子的支鏈飽和二價(jià)烴基，例如亞甲基，亞乙基，2，2-二甲基亞乙基，亞丙基，2-甲基亞丙基，亞丁基，亞戊基等等。
″烷基磺?；?烷基″是指基團(tuán)Ra-S(O)2-Rb-，其中Ra為烷基和Rb為亞烷基，如本文中所定義。
″烷硫基″是指基團(tuán)-SR，其中R為為如上定義的烷基，例如甲硫基，乙硫基，丙硫基，丁硫基等等。
″芳烷氧基″是指基團(tuán)-O-RaRb，其中Ra為如上定義的亞烷基，和Rb為如上定義的芳基。
″芳基″是指一價(jià)單環(huán)或雙環(huán)芳香烴基，其任選地獨(dú)立地被一個(gè)或多個(gè)取代基，優(yōu)選一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)取代基取代，取代基優(yōu)選地選自烷基，羥基，烷氧基，鹵代烷基，鹵代烷氧基，雜烷基，鹵素，硝基，氰基，氨基，單烷基氨基，二烷基氨基，亞甲基二氧基，亞乙基二氧基和?；?。更具體地，術(shù)語(yǔ)芳基包括但不限于苯基，氯苯基，甲氧基苯基，1-萘基，2-萘基及其衍生物。
″環(huán)烷基″是指3-7個(gè)環(huán)碳原子的飽和一價(jià)環(huán)烴基，例如環(huán)丙基，環(huán)丁基，環(huán)己基，4-甲基環(huán)己基等等。
″環(huán)烷基烷基″是指基團(tuán)-RaRb，其中Ra為如本文中所定義的亞烷基和Rb為如本文中所定義的環(huán)烷基，例如環(huán)己基甲基等等。
″取代的環(huán)烷基″是指如本文中所定義的環(huán)烷基，其中一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)(優(yōu)選一個(gè))環(huán)氫原子獨(dú)立地被氰基或-Y-C(O)R(其中Y不存在或?yàn)閬喭榛鶊F(tuán)，和R為氫，烷基，鹵代烷基，羥基，烷氧基，氨基，單烷基氨基，二烷基氨基，或任選取代的苯基)取代。
″二烷基氨基″是指基團(tuán)-NRR′，其中R和R′獨(dú)立地表示如本文中定義的烷基，羥基烷基，環(huán)烷基，或環(huán)烷基烷基基團(tuán)。有代表性的例子包括但不限于二甲基氨基，甲基乙基氨基，二(1-甲基乙基)氨基，(甲基)(羥基甲基)氨基，(環(huán)己基)(甲基)氨基，(環(huán)己基)(乙基)氨基，(環(huán)己基)(丙基)氨基，(環(huán)己基甲基)(甲基)氨基，(環(huán)己基甲基)(乙基)氨基等等。
″鹵素″是指氟，氯，溴，或碘，優(yōu)選氟和氯。
″鹵代烷基″是指被一個(gè)或多個(gè)相同或不同的鹵素原子取代的烷基，例如-CH2Cl，-CF3，-CH2CF3，-CH2CCl3等等。
″雜烷基″是指如本文中定義的烷基，其中一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)氫原子被獨(dú)立地選自-ORa，-NRbRc，和-S(O)nRd的取代基所取代(其中n為0-2的整數(shù))，可以理解雜烷基基團(tuán)的連接點(diǎn)是通過(guò)碳原子，其中Ra為氫，?；?，烷基，環(huán)烷基，或環(huán)烷基烷基；Rb和Rc相互獨(dú)立地為氫，?；?，烷基，環(huán)烷基，或環(huán)烷基烷基，和當(dāng)n為0時(shí)，Rd為氫，烷基，環(huán)烷基或環(huán)烷基烷基，和當(dāng)n為1或2時(shí)，Rd為烷基，環(huán)烷基，環(huán)烷基烷基，氨基，?；被瑔瓮榛被?，或二烷基氨基。有代表性的例子包括但不限于2-羥基乙基，3-羥基丙基，2-羥基-1-羥基甲基乙基，2，3-二羥基丙基，1-羥基甲基乙基，3-羥基丁基，2，3-二羥基丁基，2-羥基-1-甲基丙基，2-氨基乙基，3-氨基丙基，2-甲基磺酰基乙基，氨基磺?；谆?，氨基磺?；一?，氨基磺?；谆被酋；谆谆被酋；一?，甲基氨基磺?；鹊?。
″雜烷基取代的環(huán)烷基″是指如本文中定義的環(huán)烷基，其中環(huán)烷基中的一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)氫原子已經(jīng)被雜烷基基團(tuán)取代，可以理解雜烷基基團(tuán)通過(guò)碳碳鍵連接到環(huán)烷基基團(tuán)上。有代表性的例子包括但不限于1-羥基甲基環(huán)戊基，2-羥基甲基環(huán)己基等等。
″雜取代的環(huán)烷基″是指如本文中定義的環(huán)烷基，其中環(huán)烷基中的一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)氫原子已經(jīng)被獨(dú)立地選自下組的取代基所取代羥基，烷氧基，氨基，?；被瑔瓮榛被?，二烷基氨基，氧代(C＝O)，亞氨基，肟基(＝NOH)，NR′SO2Ra(其中R′為氫或烷基，和Rd為烷基，環(huán)烷基，氨基，單烷基氨基或二烷基氨基)，-X-C(O)R(其中X為O或NR′，R為氫，烷基，鹵代烷基，烷氧基，氨基，單烷基氨基，二烷基氨基，或任選取代的苯基，和R′為H或烷基)，或-S(O)nR(其中n為0-2的整數(shù))，其中當(dāng)n為0，R為氫，烷基，環(huán)烷基，或環(huán)烷基烷基，和當(dāng)n為1或2，R為烷基，環(huán)烷基，環(huán)烷基烷基，氨基，?；被瑔瓮榛被蚨榛被?。有代表性的例子包括但不限于2-，3-，或4-羥基環(huán)己基，2-，3-，或4-氨基環(huán)己基，2-，3-，或4-甲亞磺酰氨基(methanesulfonamido)-環(huán)己基等等，優(yōu)選4-羥基環(huán)己基，2-氨基環(huán)己基，或4-甲亞磺酰氨基-環(huán)己基。
″雜取代的環(huán)烷基-烷基″是指基團(tuán)RaRb-，其中Ra為雜取代的環(huán)烷基基團(tuán)，和Rb為亞烷基基團(tuán)。
″雜環(huán)基″是指3-8個(gè)環(huán)原子的飽和或不飽和的非芳香環(huán)基，其中一或兩個(gè)環(huán)原子為選自N、O或S(O)n(其中n為0-2的整數(shù))的雜原子，其余的環(huán)原子為碳，其中一個(gè)或兩個(gè)碳原子可以任選地被羰基基團(tuán)取代。該雜環(huán)基環(huán)可以任選地被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自下組的取代基獨(dú)立取代烷基，鹵代烷基，雜烷基，鹵素，硝基，氰基，氰基烷基，羥基，烷氧基，氨基，單烷基氨基，二烷基氨基，芳烷基，-(X)n-C(O)R(其中X為O或NR′，n為0或1，R為氫，烷基，鹵代烷基，羥基(當(dāng)n為0)，烷氧基，氨基，單烷基氨基，二烷基氨基或任選取代的苯基，和R′為H或烷基)，-亞烷基-C(O)R(其中R為OR或NR′R″，和R為氫，烷基或鹵代烷基，和R′和R″獨(dú)立地為氫或烷基，或R′和R″與它們相連的氮原子一起形成環(huán))，或-S(O)nR(其中n為0-2的整數(shù))，其中當(dāng)n為0時(shí)，R為氫，烷基，環(huán)烷基或環(huán)烷基烷基，和當(dāng)n為1或2時(shí)，R為烷基，環(huán)烷基，環(huán)烷基烷基，氨基，酰基氨基，單烷基氨基或二烷基氨基。更具體地，術(shù)語(yǔ)雜環(huán)基包括但不限于四氫吡喃基，哌啶子基，N-甲基哌啶-3-基，哌嗪子基，N-甲基吡咯烷-3-基，3-吡咯烷子基，嗎啉代，硫代嗎啉代，硫代嗎啉代-1-氧化物，硫代嗎啉代-1，1-二氧化物，吡咯啉基，咪唑啉基，N-甲磺?；?哌啶-4-基，及其衍生物。
在進(jìn)一步的定義中，術(shù)語(yǔ)″雜環(huán)基″具有與此前定義相同的含義，但是，此外該雜環(huán)基還可以被4個(gè)取代基取代，其中取代基如此前所定義。此外，取代基-亞烷基-C(O)R還可以具有含義R為NR′R″，這樣R′和R″與它們相連的氮原子一起形成環(huán)，在取代基-S(O)nR中，其中n為1或2，R還可以具有鹵代烷基的含義。更具體地，術(shù)語(yǔ)雜環(huán)基除了具有上述含義，還可以具有下列含義四氫硫代吡喃基，四氫硫代呋喃基和四氫呋喃基，甚至更具體地，哌啶-4-基，哌啶-1-基，四氫吡喃-4-基，吡咯烷-3-基，嗎啉代，哌嗪-1-基，四氫硫代吡喃-4-基，四氫硫代吡喃-3-基或四氫呋喃-3-基，優(yōu)選哌啶-4-基，其中上述每個(gè)具體命名的雜環(huán)基取代基本身也可以被如上定義的，優(yōu)選在表1和具體實(shí)施例中例舉的任何具體取代基所取代。
″雜環(huán)基烷基″是指基團(tuán)-RaRb，其中Ra為亞烷基基團(tuán)，Rb為上述定義的雜環(huán)基基團(tuán)，可以理解Rb通過(guò)雜環(huán)基環(huán)的碳原子連接到Ra上，例如四氫吡喃-2-基甲基，2-或3-哌啶基甲基等等。
″雜環(huán)基螺環(huán)烷基″是指由環(huán)烷基環(huán)和雜環(huán)組成的螺環(huán)基團(tuán)，其中每個(gè)環(huán)具有5-8個(gè)環(huán)原子，并且兩個(gè)環(huán)只具有一個(gè)共同的碳原子，可以理解雜環(huán)基螺環(huán)烷基的連接點(diǎn)是通過(guò)環(huán)烷基環(huán)。當(dāng)環(huán)烷基基團(tuán)的同一碳原子的兩個(gè)氫原子被本文中定義的雜環(huán)基基團(tuán)所取代時(shí)，形成螺環(huán)基團(tuán)，其可以任選地被烷基，羥基，羥基烷基，或氧取代。例如，它們的例子包括但不限于1，4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-基，1，3-二氮雜螺[4.5]癸烷-8-基，2，4-二酮(dione)-1，3-二氮雜螺[4.5]癸烷-8-基，1，5-二氧雜螺[5.5]十一烷-9-基，(3-羥基甲基-3-甲基)-1，5-二氧雜螺[5.5]十一烷-9-基等等，優(yōu)選1，4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-基和1，5-二氧雜螺[5.5]十一烷-9-基。
″羥基烷基″是指如本文定義的烷基基團(tuán)，被一個(gè)或多個(gè)、優(yōu)選一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)羥基基團(tuán)取代，條件是同一個(gè)碳原子不帶有多于一個(gè)的羥基基團(tuán)。有代表性的例子包括但不限于羥基甲基，2-羥基乙基，2-羥基丙基，3-羥基丙基，1-(羥基甲基)-2-甲基丙基，2-羥基丁基，3-羥基丁基，4-羥基丁基，2，3-二羥基丙基，2-羥基-1-羥基甲基乙基，2，3-二羥基丁基，3，4-二羥基丁基和2-(羥基甲基)-3-羥基丙基，優(yōu)選2-羥基乙基，2，3-二羥基丙基和1-(羥基甲基)-2-羥基乙基。因此，在本文中使用的術(shù)語(yǔ)″羥基烷基″用于限定雜烷基基團(tuán)的子集。
″離去基團(tuán)″具有合成有機(jī)化學(xué)中常規(guī)的定義，即能夠被親核體置換的原子或基團(tuán)，包括鹵素(如氯，溴，和碘)，鏈烷烴磺酰氧基，芳烴磺酰氧基，烷基羰基氧(例如乙酰氧基)，芳基羰基氧，甲磺酰氧基，甲苯磺酰氧基，三氟甲烷磺酰氧基，芳氧基(例如2，4-二硝基苯氧基)，甲氧基，N，O-二甲基羥基氨基等等。
″單烷基氨基″是指基團(tuán)-NHR，其中R為如上定義的烷基，羥基烷基，環(huán)烷基，或環(huán)烷基烷基基團(tuán)，例如甲基氨基，(1-甲基乙基)氨基，羥基甲基氨基，環(huán)己基氨基，環(huán)己基甲基氨基，環(huán)己基乙基氨基等等。
″任選取代的苯基″是指任選被一個(gè)或多個(gè)、優(yōu)選一個(gè)或兩個(gè)選自下組的取代基獨(dú)立地取代的苯環(huán)烷基，羥基，烷氧基，鹵代烷基，鹵代烷氧基，雜烷基，鹵素，硝基，氰基，氨基，亞甲基二氧基，亞乙基二氧基，和?；?。
″藥用賦形劑″是指用于制備藥學(xué)組合物的通常是安全、無(wú)毒并且既無(wú)生物學(xué)上的也無(wú)其它方面的不良作用的賦形劑，而且包括獸醫(yī)以及人類藥用可接受的賦形劑。說(shuō)明書(shū)和權(quán)利要求書(shū)中使用的″藥用賦形劑″包括一種或一種以上的賦形劑。
化合物的″藥用鹽″是指藥學(xué)可接受并具有母體化合物的預(yù)期藥理學(xué)活性的化合物。此類鹽包括(1)酸加成鹽，與無(wú)機(jī)酸形成的酸加成鹽，所述的無(wú)機(jī)酸例如鹽酸、氫溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等；或與有機(jī)酸形成的酸加成鹽，有機(jī)酸例如是乙酸、丙酸、己酸、環(huán)戊烷丙酸、羥基乙酸、丙酮酸、乳酸、丙二酸、琥珀酸、蘋(píng)果酸、馬來(lái)酸、富馬酸、酒石酸、檸檬酸、苯甲酸、3-(4-羥基苯甲?；?苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、甲磺酸、乙磺酸、1，2-乙烷-二磺酸、2-羥基乙磺酸、苯磺酸、4-氯代苯磺酸、2-萘磺酸、4-甲苯磺酸、樟腦磺酸、4-甲基雙環(huán)[2.2.2]-辛-2-烯-1-甲酸、葡庚糖酸、3-苯基丙酸、三甲基乙酸、叔丁基乙酸、十二烷基硫酸、葡糖酸、谷氨酸、羥基萘甲酸、水楊酸、硬脂酸、粘康酸等；或(2)當(dāng)母體化合物中存在的酸性質(zhì)子或被金屬離子代替時(shí)生成的鹽，所述的金屬離子例如是堿金屬離子、堿土金屬離子或鋁離子；或與有機(jī)堿配位時(shí)生成的鹽，所述的有機(jī)堿例如是乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、氨丁三醇、N-甲基葡糖胺等。
本文中使用的″前藥″和″前-藥″可以互換使用，并且是指任何當(dāng)將此類前藥施用給哺乳動(dòng)物對(duì)象時(shí)在體內(nèi)可以釋放出式(I)的活性母體藥物的任何化合物。式(I)的化合物的前藥是通過(guò)修飾式(I)的化合物中存在的一個(gè)或多個(gè)官能團(tuán)來(lái)制得，制備所采用的方式應(yīng)使該修飾可以體內(nèi)裂解釋放出母體化合物。前藥包括式(I)的化合物，其中式(I)的化合物中羥基、氨基、巰基、羧基或羰基分別與任何可以在體內(nèi)裂解再生出游離羥基、氨基或巰基的基團(tuán)結(jié)合。前藥的實(shí)例包括但不限于式(I)的化合物中的羥基官能團(tuán)的酯(例如醋酸酯，二烷基氨基乙酸酯，甲酸酯，磷酸酯，硫酸酯，和苯甲酸酯衍生物)和氨基甲酸酯(例如N，N-二甲基氨基羰基)，羧基官能團(tuán)基團(tuán)的酯基(例如乙基酯，嗎啉代乙醇酯)，氨基官能團(tuán)的N-?；苌?例如N-乙?；?N-曼尼希堿類，席夫堿類和烯胺(enaminones)，酮和醛官能團(tuán)的肟、縮醛、縮酮、烯醇酯，等等，參見(jiàn)Bundegaard，H.″前藥的設(shè)計(jì)(Design of Prodrugs)″p 1-92，Elesevier，NewYork-Oxford(1985)。
″保護(hù)基團(tuán)″是指當(dāng)連接到分子中的反應(yīng)性基團(tuán)上時(shí)掩蔽、減少或防止該反應(yīng)性的一組原子。保護(hù)基團(tuán)的例子可以參見(jiàn)T.W.Green和P.G.Futs，有機(jī)化學(xué)的保護(hù)基團(tuán)(Wiley，2nd ed.1991)，和Harrison和Harrison等，有機(jī)合成方法概要(Compendium of Synthetic Organic Methods)，1-8卷(JohnWiley和Sons，1971-1996)。有代表性的氨基保護(hù)基團(tuán)包括甲?；阴；阴；S基，芐氧基羰基(CBZ)，叔-丁氧基羰基(Boe)，三甲基甲硅烷基(TMS)，2-三甲基甲硅烷基-乙烷磺酰基(SES)，三苯甲基和取代的三苯甲基基團(tuán)，烯丙氧基羰基，9-芴基甲基氧基羰基(FMOC)，硝基-藜蘆基氧基羰基(NVOC)等等。有代表性的羥基保護(hù)基團(tuán)包括羥基或被?；虮煌榛幕鶊F(tuán)，如芐基和三苯甲基醚以及烷基醚，四氫吡喃基醚，三烷基甲硅烷基醚和烯丙基醚。
疾病的″治療″或″療法″包括(1)預(yù)防疾病，也就是使疾病的臨床癥狀不會(huì)在哺乳動(dòng)物中發(fā)展，所述的哺乳動(dòng)物可能與該疾病接觸或易患有該疾病但不曾經(jīng)歷或顯現(xiàn)出疾病的該癥狀，(2)抑制疾病，也就是阻止或減輕該疾病或其臨床癥狀的發(fā)展，或(3)緩解疾病，也就是引起疾病或其臨床癥狀的減退。
″治療有效量″是指當(dāng)施用給哺乳動(dòng)物治療疾病時(shí)，足以實(shí)現(xiàn)對(duì)該疾病的治療的化合物的量?！逯委熡行Я俊鍛?yīng)根據(jù)化合物、疾病及其嚴(yán)重性、被治療哺乳動(dòng)物的體重等來(lái)改變。
如果在本說(shuō)明書(shū)中的結(jié)構(gòu)式的圖中，″N″只顯示一個(gè)或兩個(gè)鍵連接到其余結(jié)構(gòu)上，或者″O″顯示一個(gè)鍵連接到其余結(jié)構(gòu)上，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員將會(huì)理解在式中，如果是″N″，分別存在兩個(gè)或一個(gè)″H″原子，如果是″O″，存在一個(gè)″H″原子，但是沒(méi)有被用于繪制結(jié)構(gòu)式的計(jì)算機(jī)程序顯示，例如ISIS圖。因此，″-N″表示″-NH2″，″-N-″表示″-NH-″，和″-O″表示″-OH″。
一方面，本發(fā)明提供了下式表示的化合物 其中R1為氫或烷基；R2為取代的環(huán)烷基，雜取代的環(huán)烷基，雜烷基取代的環(huán)烷基，雜取代的環(huán)烷基-烷基，雜環(huán)基，雜環(huán)基螺環(huán)烷基，芳烷氧基，烷氧基，烷基-S(O)n-亞烷基-(其中n為1或2)，或SO2Ar2；R3為氫，氨基，單烷基氨基，二烷基氨基，?；被?NRa-C(＝O)-Rb(其中Ra為氫或烷基和Rb為雜環(huán)基或雜烷基)，烷基，環(huán)烷基，芳基，芳烷基，鹵代烷基，雜烷基，氰基烷基，-亞烷基-C(O)-R(其中R為氫，烷基，羥基，烷氧基，氨基，單烷基氨基或二烷基氨基)，酰基，或苯二甲酰亞氨基烷基；以及每個(gè)Ar1和Ar2獨(dú)立地為芳基。
式I的特別優(yōu)選化合物，其中Ar1為任選取代的苯基，優(yōu)選為式II表示的化合物 其中n為1或2，優(yōu)選1，以及X為氫，烷基，鹵素，硝基，氰基或甲氧基，尤其是鹵素，烷基或甲氧基，優(yōu)選在2-位取代(氟，氯，甲基和甲氧基)。
式I的更優(yōu)選化合物為式III表示的化合物 關(guān)于式I、II或III化合物和/或其上述優(yōu)選化合物優(yōu)選R1為氫或烷基，例如甲基。更優(yōu)選R1為氫。
優(yōu)選地，R2為烷基磺?；?烷基，芳烷氧基，例如芐氧基，烷氧基，雜取代的環(huán)烷基，雜烷基取代的環(huán)烷基，雜取代的環(huán)烷基-烷基，或雜環(huán)基。更優(yōu)選R2為雜取代的環(huán)烷基，優(yōu)選4-雜取代的環(huán)己基，例如4-羥基環(huán)己基或雜環(huán)基，優(yōu)選取代的哌啶基，嗎啉代，任選取代的哌嗪基，四氫呋喃基，四氫硫代呋喃基，S-氧-四氫硫代呋喃基，S，S-二氧-四氫硫代呋喃基，四氫硫代吡喃基，S-氧-四氫硫代吡喃基，S，S-二氧-四氫硫代吡喃基或四氫吡喃基，更優(yōu)選取代的哌啶基，例如N-甲磺?；?哌啶-4-基，或4-四氫吡喃基，由此更特別優(yōu)選的取代基為在表和實(shí)施例中所示的用于具體實(shí)施例的那些取代基。更優(yōu)選地，R2還可以是烷基-磺?；榛?，例如(1，1-二甲基-2-甲基磺?；?乙基或(1，1-二甲基-3-甲基磺?；?丙基。
優(yōu)選地，R3為氫，氨基，單烷基氨基，二烷基氨基，?；被?NRa-C(＝O)-Rb(其中Ra為氫或烷基，和Rb為雜環(huán)基或雜烷基)，烷基，鹵代烷基，環(huán)烷基，氰基甲基，雜烷基，芳基，芳烷基或-亞烷基-C(O)-R(其中R為氫，烷基，羥基，烷氧基，氨基，單烷基氨基或二烷基氨基)。最優(yōu)選R3為氫，氨基，二甲基氨基，異丙基氨基，(嗎啉代甲?；?氨基(即-NRa-C(＝O)-Rb，其中Ra為氫和Rb為嗎啉代)，甲基，2，2，2-三氟乙基，環(huán)丙基，氰基甲基，2-羥基乙基，4-氟苯基，芐基，羧基甲基或甲氧基羰基甲基，乙基，2-氟乙基，2-羥基-2-甲基丙基，或2-苯二甲酰亞氨基丙基。更加優(yōu)選地，R3為氫或甲基。
應(yīng)該理解，每個(gè)取代基R1、R2和R3的優(yōu)選方案相互組合，與式I、II和III化合物及其上述優(yōu)選方案相組合，也是本發(fā)明的目的。
應(yīng)該理解，當(dāng)R3為氫時(shí)，該化合物可以存在下列的互變異構(gòu)型。 因此，除了上面和下面描述的化合物，本發(fā)明還包括所有的互變異構(gòu)體。并且，本發(fā)明還包括所有的這些化合物的藥用鹽，以及該化合物的前藥形式和所有的立體異構(gòu)體，無(wú)論是純的手性形式，還是外消旋混合物或其它形式的混合物。
另一方面，本發(fā)明提供了下式表示的化合物 其中R1為氫或烷基；R2為取代的環(huán)烷基，雜取代的環(huán)烷基，雜烷基取代的環(huán)烷基，雜取代的環(huán)烷基-烷基，雜環(huán)基，雜環(huán)螺環(huán)烷基或SO2Ar2；R3為氫，烷基，環(huán)烷基，芳基，芳烷基，鹵代烷基，雜烷基，氰基烷基，-亞烷基-C(O)-R(其中R為氫，烷基，羥基，烷氧基，氨基，單烷基氨基或二烷基氨基)，或酰基；以及每個(gè)Ar1和Ar2獨(dú)立地為芳基。
按照本發(fā)明的更深層面，特別優(yōu)選的式I化合物由下式II表示 其中n為1或2，和X為氫，烷基，鹵素，硝基，氰基或甲氧基，特別是鹵素，烷基或甲氧基，更優(yōu)選在2-位取代。
式I更優(yōu)選的化合物由下式III表示 按照本發(fā)明的更深層面，在式I化合物中優(yōu)選地，R1為氫或烷基。更優(yōu)選地，R1為氫。
優(yōu)選地，R2為雜取代的環(huán)烷基，雜烷基取代的環(huán)烷基，雜取代的環(huán)烷基-烷基或雜環(huán)基。更優(yōu)選地，R2為雜取代的環(huán)烷基或雜環(huán)基，例如4-取代的環(huán)己基，取代的哌啶基，或四氫吡喃基。
優(yōu)選地，式I化合物的R3為氫，烷基，鹵代烷基，環(huán)烷基，氰基甲基，雜烷基，芳基，芳烷基或-亞烷基-C(O)-R(其中R為氫，烷基，羥基，烷氧基，氨基，單烷基氨基或二烷基氨基)。最優(yōu)選R3為氫，甲基，2，2，2-三氟乙基，環(huán)丙基，氰基甲基，2-羥基乙基，4-氟苯基，芐基，羧基甲基，或甲氧基羰基甲基。甚至更優(yōu)選地，R3為氫或甲基。
在本發(fā)明的另一個(gè)方面，提供了如下定義的化合物(i).下式的化合物
或其藥用鹽，其中R1為氫或烷基；R2為取代的環(huán)烷基，雜取代的環(huán)烷基，雜烷基取代的環(huán)烷基，雜取代的環(huán)烷基-烷基，雜環(huán)基，雜環(huán)基螺環(huán)烷基，或-SO2Ar2；R3為氫，烷基，環(huán)烷基，芳基，芳烷基，鹵代烷基，雜烷基，氰基烷基，-亞烷基-C(O)-R(其中R為氫，烷基，羥基，烷氧基，氨基，單烷基氨基或二烷基氨基)或?；?；和每個(gè)Ar1和Ar2獨(dú)立為芳基。
(ii).如(i)定義的化合物，其中Ar1為任選取代的苯基。
(iii).如(ii)定義的化合物，其中Ar1為獨(dú)立地被一個(gè)或兩個(gè)鹵素、烷基或甲氧基基團(tuán)取代的苯基。
(iv).如(iii)定義的化合物，其中Ar1為2-氯苯基，2-甲基苯基或2-甲氧基苯基。
(v).如(v)定義的下式化合物 (vi).如(i)定義的化合物，其中R3為氫，烷基，鹵代烷基，環(huán)烷基，氰基甲基，雜烷基，芳基，芳烷基或-亞烷基-C(O)-R。
(vii).如(vi)定義的化合物，其中R3為氫，甲基，2，2，2-三氟乙基，環(huán)丙基，氰基甲基，2-羥基乙基，4-氟苯基，芐基，羧基甲基，或甲氧基羰基甲基。
(viii).如(vii)定義的化合物，其中R3為氫或甲基。
(ix).如(i)定義的化合物，其中R3為氫或甲基，和Ar1為獨(dú)立地被一個(gè)或兩個(gè)鹵素，烷基或甲氧基基團(tuán)取代的苯基。
(x).如(i)定義的化合物，其中R1為氫或甲基。
(xi).如(x)定義的化合物，其中R1為氫。
(xii).如(x)定義的化合物，其中R2為雜取代的環(huán)烷基，雜烷基取代的環(huán)烷基或雜環(huán)基。
(xiii).如(xii)定義的化合物，其中R2為雜取代的環(huán)烷基或雜環(huán)基。
(xiv).如(xiii)定義的化合物，其中R2為4-雜取代的環(huán)己基。
(xv).如(xiv)定義的化合物，其中R2為4-羥基環(huán)己基。
(xvi).如(xiii)定義的化合物，其中R2為雜環(huán)基。
(xvii).如(xvi)定義的化合物，其中R2為取代的哌啶基。
(xviii).如(xvi)定義的化合物，其中R2為N-甲磺?；?哌啶-4-基。
(xix).如(xvi)定義的化合物，其中R2為4-四氫吡喃基基團(tuán)。
(xx).如(i)定義的化合物，其中R2為雜取代的環(huán)烷基或雜環(huán)基，和Ar1為獨(dú)立地被一個(gè)或兩個(gè)鹵素，烷基或甲氧基基團(tuán)取代的苯基基團(tuán)。
(xxi).如(xx)定義的化合物，其中R3為氫。
(xxii).如(xx)定義的化合物，其中R3為甲基。
參照本發(fā)明最寬的范圍，一些有代表性的式I化合物如下表1所示表1.式I的有代表性的化合物 在體外p38檢測(cè)中，式I的IC50小于10μM，優(yōu)選小于5μM，更優(yōu)選小于3μM，最優(yōu)選小于1μM。具體地，在表I中式I化合物在體外p38檢測(cè)中的IC50在大約4.76μM至0.0003μM。
本發(fā)明的化合物可以以未溶劑化型以及溶劑化型(包括水合形式)形式存在。通常，溶劑化形式，包括水合形式等同于未溶劑化形式并且包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)。此外，如上所述，本發(fā)明還包括所有的這些化合物的藥用鹽，以及該化合物的前體藥物形式和所有的立體異構(gòu)體，無(wú)論是純的手性形式，還是外消旋混合物或其它形式的混合物。
本發(fā)明的化合物能夠進(jìn)一步形成藥用酸加成鹽。所有這些形式包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)。
式I化合物的藥用酸加成鹽包括從無(wú)機(jī)酸衍生的鹽，如鹽酸、硝酸、磷酸、硫酸、氫溴酸、氫碘酸、亞磷酸等；以及從有機(jī)酸衍生的鹽，如脂肪族單或二羧酸，苯基取代的鏈烷酸，羥基鏈烷酸，鏈烷二羧酸，芳香酸，脂肪族和芳香族磺酸等，這些鹽包括硫酸鹽，焦硫酸鹽，硫酸氫鹽，亞硫酸鹽，硝酸鹽，磷酸鹽，磷酸氫鹽，磷酸二氫鹽，偏磷酸鹽，焦磷酸鹽，鹽酸鹽，氫溴酸鹽，氫碘酸鹽，乙酸鹽，丙酸鹽，辛酸鹽，異丁酸鹽，草酸鹽，丙二酸鹽，琥珀酸鹽，辛二酸鹽，癸二酸鹽，富馬酸鹽，馬來(lái)酸鹽，扁桃酸鹽，苯甲酸鹽，氯代苯甲酸鹽，甲基苯甲酸鹽，二硝基苯甲酸鹽，鄰苯二甲酸鹽，苯磺酸鹽，甲苯磺酸鹽，苯基乙酸鹽，檸檬酸鹽，乳酸鹽，馬來(lái)酸鹽，酒石酸鹽，甲烷磺酸鹽，等等。還包括氨基酸的鹽如精氨酸鹽等，葡糖酸鹽，半乳糖醛酸(例如參見(jiàn)Berge等“藥物鹽”，藥物科學(xué)雜志(J.of Pharmaceutical Science)，1977，66，1-19)。
堿性化合物的酸加成鹽的制備可以通過(guò)以常規(guī)方式將游離堿與足夠量的所需的酸接觸，制備鹽。通過(guò)以常規(guī)方式將該鹽形式與堿接觸，分離游離堿，可以再生出游離堿的形式。該游離堿形式在某些物理性質(zhì)如在極性溶劑中的溶解度有些不同于其各自的鹽，但對(duì)于本發(fā)明的目的，這些鹽在其它方面等同于其各自的游離堿。
堿性藥用加成鹽可以與金屬離子或胺形成，如堿金屬和堿土金屬離子或有機(jī)胺。用作陽(yáng)離子的金屬離子的例子包括鈉、鉀、鎂、鈣等等。適合的胺的例子有N，N′-二芐基亞乙基二胺，氯普魯卡因，膽堿，二乙醇胺，亞乙基二胺，N-甲基葡糖胺，和普魯卡因(例如參見(jiàn)Berge等“藥物鹽”，藥物科學(xué)雜志(J.of Pharmaceutical Science)，1977，66，1-19)。
酸性化合物的堿加成鹽的制備可以通過(guò)以常規(guī)方式將游離酸與足夠量的所需的堿接觸，制備鹽。通過(guò)以常規(guī)方式將該鹽形式與酸接觸，分離游離酸，可以再生出游離酸的形式。該游離酸形式在某些物理性質(zhì)如在極性溶劑中的溶解度有些不同于其各自的鹽，但對(duì)于本發(fā)明的目的，這些鹽在其它方面等同于其各自的游離酸。
應(yīng)用本領(lǐng)普通技術(shù)人員的公知技術(shù)，可以通過(guò)多種方法制備本發(fā)明的化合物。在本發(fā)明的一個(gè)方面，用于制備式I化合物的方法如下述反應(yīng)路線1所示反應(yīng)路線1 用伯胺(R3-NH2)處理式Ia化合物(本領(lǐng)普通技術(shù)人員熟悉其制備方法和/或從他可以購(gòu)買的商業(yè)來(lái)源購(gòu)買)，得到式Ib化合物。該反應(yīng)通常于在反應(yīng)條件下惰性的溶劑中進(jìn)行，優(yōu)選鹵代脂肪族烴，尤其是二氯甲烷，任選鹵代的芳香族烴，開(kāi)鏈或環(huán)狀醚(例如四氫呋喃)，甲酰胺或低級(jí)烷醇。該反應(yīng)適宜在大約-20℃至大約120℃下進(jìn)行。
還原式Ib化合物，得到式Ic的醇。按照本領(lǐng)域普通技術(shù)人員已知的方法，通常用氫化鋁鋰進(jìn)行該還原(例如在在還原條件下是惰性的溶劑中，優(yōu)選開(kāi)鏈或環(huán)狀醚，尤其是四氫呋喃，在大約-20℃至大約70℃，優(yōu)選大約0℃至大約室溫)。
在下步中，氧化式Ic的醇得到式Id的甲醛(carboxaldehyde)。該氧化通常使用二氧化錳進(jìn)行，盡管也可以使用多種其它方法(例如參見(jiàn)“高級(jí)有機(jī)化學(xué)”(Advanced Organic Chemistry)，第4版，March，John Wiley & Sons，New York(1992))。根據(jù)使用的氧化劑，該反應(yīng)通常在在特定的氧化條件下是惰性的溶劑中進(jìn)行，優(yōu)選鹵代的脂肪族烴，尤其是二氯甲烷，或任選鹵代的芳香族烴。該反應(yīng)適宜在大約0℃至大約60℃下進(jìn)行。
式Id的甲醛(carboxaldehyde)與芳基取代的乙酸酯Ar1-CH2-CO2R(其中R為烷基基團(tuán))在堿存在下反應(yīng)得到式Ie的化合物。可以使用任何相對(duì)非親核性堿，包括碳酸鹽，如碳酸鉀、碳酸鋰、碳酸鈉；碳酸氫鹽，如碳酸氫鉀、碳酸氫鋰、碳酸氫鈉；胺，如仲胺和叔胺；和樹(shù)脂結(jié)合的胺，如1，3，4，6，7，8-六氫-2H嘧啶并[1，2-a]嘧啶。方便地，該反應(yīng)在相對(duì)極性、但在反應(yīng)條件下是惰性的溶劑中進(jìn)行，優(yōu)選酰胺，如二甲基甲酰胺，N-取代的吡咯烷酮，尤其是1-甲基-2-吡咯烷酮，反應(yīng)溫度在在大約70℃至大約150℃，特別是在或接近溶劑回流溫度下進(jìn)行，以利于進(jìn)行共沸除去水。
應(yīng)用氧化劑，例如過(guò)酸如3-氯過(guò)苯甲酸(即MCPBA)和過(guò)硫酸氫鉀制劑(Oxone)氧化Ie，可以提供砜(If)，其可以轉(zhuǎn)化成多種目標(biāo)化合物。Ie的氧化通常在氧化條件下是惰性的溶劑中進(jìn)行。例如，當(dāng)使用MCPBA作為氧化劑，溶劑優(yōu)選鹵代的脂肪族烴，尤其是氯仿。當(dāng)使用過(guò)硫酸氫鉀制劑(Oxone)作為氧化劑，溶劑可以是水、甲醇或有機(jī)溶劑(如甲醇，乙腈或四氫呋喃)和水的混合物。反應(yīng)溫度根據(jù)使用的溶劑而確定。對(duì)于有機(jī)溶劑，反應(yīng)溫度通常在大約-20℃至大約50℃，優(yōu)選大約0℃至大約室溫。當(dāng)水用作溶劑，反應(yīng)溫度通常在大約0℃至大約50℃，優(yōu)選大約0℃至大約室溫?；蛘?，氧化可以在應(yīng)用基于錸/過(guò)氧化物試劑在催化條件下進(jìn)行。例如參見(jiàn)“通過(guò)甲基三氧錸(VII)催化的應(yīng)用過(guò)氧化氫進(jìn)行的亞砜的氧化”，Lahti，David W.；Espenson，James H，無(wú)機(jī)化學(xué)2000，39(10)pp.2164-2167；“在催化氧化中的錸氧復(fù)合物”，Catal.Today，2000，55(4)，pp317-363；和“用于制備吡啶N-氧化物的簡(jiǎn)單和有效的方法”，Coperet，Christophe；Adolfsson，Hans；Khuong，Tinh-Alfredo V.；Yudin，Andrei K.；Sharpless，K.Barry，有機(jī)化學(xué)雜志(J.Org.Chem.)，1998，63(5)，pp1740-1741，這些文獻(xiàn)在本文引用作為參考。
If化合物與胺(R2-NH2)反應(yīng)提供式I’化合物(即化合物I，其中R1為氫)。然后I’進(jìn)一步烷基化提供式I化合物，其中R1不為氫。該反應(yīng)可以在溶劑存在或不存在的條件下進(jìn)行。便利地，反應(yīng)在大約0℃至大約200℃，優(yōu)選大約室溫至大約150℃的溫度下進(jìn)行。或者，在某些條件下不使用砜If，硫化物Ie或相應(yīng)的亞砜可以直接與胺(R1-NH2)反應(yīng)，提供式I’化合物。另外，還可以用胺R1R2NH2烷基化If直接提供式I化合物，其中R1和R2如上所描述。
因此，本發(fā)明提供了制備式I化合物的方法，它是通過(guò)用胺(R1-NH2)處理通式式Ie或If的化合物，并任選將得到的產(chǎn)物與R1-L反應(yīng)，其中R1如上所定義，但不包括氫，L為離去基團(tuán)。
或者，式Ie的甲醛化合物可以如下述反應(yīng)路線II所示制備，其不需要進(jìn)行反應(yīng)路線I的酯還原和醇氧化。反應(yīng)路線II 在堿存在下，用烷基甲酸酯(例如甲酸甲酯)處理式II-a化合物(其中每個(gè)Ra獨(dú)立為烷基；本領(lǐng)普通技術(shù)人員熟悉其制備方法和/或從他可以購(gòu)買的商業(yè)來(lái)源購(gòu)買)，得到式II-b化合物(其中M為金屬)。該反應(yīng)通常在大約0℃至大約100℃的溫度范圍內(nèi)進(jìn)行。通?？梢允褂妹眩鏣HF，和其它在反應(yīng)條件下為惰性的溶劑。適當(dāng)?shù)膲A包括醇鹽，如叔-丁醇金屬，和其它能夠使式II-a化合物脫質(zhì)子化的相對(duì)非-親核性的堿。
在堿存在下，用硫脲環(huán)化式II-b化合物，得到式II-c的嘧啶。典型地，應(yīng)用相應(yīng)的醇鹽作為堿，在回流條件下、醇溶劑中進(jìn)行該環(huán)化反應(yīng)。
在堿存在下，用烷基化劑R-X1(其中R為烷基基團(tuán)，X1為離去基團(tuán)，如鹵化物)進(jìn)行式II-c化合物的烷基化，得到式II-d化合物。適當(dāng)?shù)膲A包括相對(duì)非親核性堿，包括碳酸鹽，如碳酸鉀、碳酸鋰、和碳酸鈉；碳酸氫鹽，如碳酸氫鉀、碳酸氫鋰、和碳酸氫鈉。方便地，該反應(yīng)在在反應(yīng)條件下惰性的相對(duì)極性的溶劑下進(jìn)行，優(yōu)選丙酮，二甲基甲酰胺(DMF)或甲基吡咯烷酮(MP)。
在與上述反應(yīng)路線I制備式Ie化合物所描述的類似條件下，式II-d化合物與芳基取代的乙酸酯Ar1-CH2-CO2R(其中R為烷基基團(tuán))反應(yīng)，提供式II-e化合物。盡管式II-c化合物的烷基化通常在與芳基取代的乙酸酯反應(yīng)前進(jìn)行，但這兩個(gè)反應(yīng)的順序并不重要，可以顛倒。因此，式II-c化合物可以與芳基取代的乙酸酯Ar1-CH2-CO2R反應(yīng)，得到的產(chǎn)物可以應(yīng)用烷基化劑R-X1進(jìn)行烷基化，得到式II-e化合物。
然后應(yīng)用烷基化劑R3-X2(其中R3如上所定義，X2為離去基團(tuán)，如鹵化物)烷基化式II-e化合物的胺基，提供化合物Ie，其可以如反應(yīng)路線I所描述進(jìn)一步轉(zhuǎn)化為式I’化合物。
因此，本發(fā)明的另一個(gè)方面提供了制備式II-c的嘧啶化合物的方法，它是通過(guò)式IIa的縮醛與甲酸烷基酯反應(yīng)，然后得到的產(chǎn)物與硫脲反應(yīng)。
本發(fā)明的另一個(gè)方面提供了制備式II-e化合物的方法，它是通過(guò)式II-c化合物與烷基化劑或芳基取代的乙酸酯反應(yīng)，然后得到的產(chǎn)物分別與芳基取代的乙酸酯或烷基化劑反應(yīng)。
本領(lǐng)域普通技術(shù)人員可以理解對(duì)上述反應(yīng)路線可以做出某些改變，但也在本發(fā)明的范圍內(nèi)。例如，某些步驟涉及與特定反應(yīng)條件不相容的官能團(tuán)的保護(hù)基團(tuán)的使用。
木發(fā)明的式I化合物以及式I的堿性化合物與酸的藥用鹽可以用作藥物，例如以藥物制劑的形式。該藥物制劑可以通過(guò)腸內(nèi)給藥，例如以片劑，包衣的片劑，糖錠劑，硬或者軟明膠膠囊，溶液劑，乳劑或者混懸劑的形式口服給藥，例如以鼻腔噴霧劑的形式鼻腔內(nèi)給藥，例如以栓劑的形式直腸內(nèi)給藥。但是它們也可以胃腸外給藥，例如以注射溶液的形式。
式I化合物及其上述藥用鹽可以與用于制備藥物制劑的藥物惰性的有機(jī)或無(wú)機(jī)載體一起加工。例如，乳糖，玉米淀粉或其衍生物，滑石，或者硬脂酸或其鹽等可以用作片劑，包衣的片劑，糖錠劑，硬或者軟明膠膠囊的載體。軟明膠膠囊的合適的載體包括例如植物油，蠟，脂肪，半固體或者液體多元醇等；但是，根據(jù)該活性成分的性質(zhì)，可能有軟明膠膠囊根本不需要任何賦形劑的情況。制備溶液劑和糖漿劑的合適的載體包括例如水，多元醇，糖類，轉(zhuǎn)化糖和葡萄糖等。栓劑的合適的載體包括例如天然或者硬化油，蠟，脂肪，半固體或者液體多元醇等。
該藥物組合物還可以含有防腐劑，增溶劑，穩(wěn)定劑，潤(rùn)濕劑，乳化劑，甜味劑，著色劑，調(diào)味劑，改變滲透壓的鹽，緩沖劑，掩蔽劑或者抗氧化劑。除了式I化合物及其藥用鹽，它們也可以含有其它的治療上有價(jià)值的活性劑。
含有式I化合物以及式I的堿性化合物與酸的藥用鹽和相容的藥用載體材料的藥物也是本發(fā)明的一個(gè)目的，以及同樣地，還有制備該藥物的方法，其包括將一種或多種這些化合物或其鹽以及，必要時(shí)，一種或者多種其它的治療上有價(jià)值的物質(zhì)，與相容的藥用載體制成蓋侖(galenical)給藥劑型。
如前所述，按照本發(fā)明，式I化合物及其上述藥用鹽可以作為治療活性劑，尤其是作為抗炎劑或移植手術(shù)后防止移植排斥的藥物應(yīng)用。劑量在很寬的范圍內(nèi)變化，當(dāng)然會(huì)適合于每個(gè)具體病例的個(gè)體需要。通常，如果對(duì)成年人給藥，方便的每日劑量應(yīng)該在約0.1mg/kg至約100mg/kg，優(yōu)選約0.5mg/kg至約5mg/kg。每日劑量可以單劑量或分幾次劑量給藥，當(dāng)發(fā)現(xiàn)征兆時(shí)，可以超過(guò)上述的劑量上限。
最后，本發(fā)明的另一個(gè)目的在于式I化合物及其上述藥用鹽用于生產(chǎn)藥物的用途，所述藥物尤其用于治療或預(yù)防炎癥、免疫性疾病、腫瘤性疾病、支氣管肺病、皮膚病和心血管病，用于治療哮喘、中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病或糖尿病并發(fā)癥，或用于預(yù)防移植手術(shù)之后的移植排斥。
式I化合物將用于，但不限于，治療人或其它哺乳動(dòng)物由于該哺乳動(dòng)物過(guò)量或不受控制地產(chǎn)生TNF或p38激酶而加劇或?qū)е碌娜魏渭膊』虿“Y。因此，本發(fā)明提供一種治療細(xì)胞因子介導(dǎo)的疾病的方法，其包括施用有效干擾細(xì)胞因子量的式I化合物或其藥用鹽或互變異構(gòu)體。
式I化合物將用于，但不限于，治療受治者中的炎癥，和用作治療發(fā)熱的退熱劑。本發(fā)明的化合物將用于治療關(guān)節(jié)炎，包括但不限于，類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、脊椎關(guān)節(jié)病、痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡和青少年關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎、痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎、以及其它關(guān)節(jié)炎病癥。該化合物將用于治療肺病或肺炎癥，包括成人呼吸窘迫綜合癥、肺肉瘤病、哮喘、矽肺病、和慢性肺炎性疾病。該化合物還用于治療病毒和細(xì)菌感染，包括膿毒病、膿毒性休克、革蘭氏陰性膿毒病、瘧疾、腦膜炎、惡病質(zhì)繼發(fā)感染或惡性腫瘤、惡病質(zhì)繼發(fā)獲得性免疫缺陷綜合癥(AIDS)、AIDS、ARC(AIDS相關(guān)性復(fù)癥)、肺炎、和皰疹病毒。所述化合物還用于治療骨吸收疾病，例如骨質(zhì)疏松癥、內(nèi)毒素性休克、中毒性休克綜合癥、再灌注損傷、自身免疫性疾病，包括移植物對(duì)宿主的反應(yīng)和同種異體移植排斥、心血管病，包括動(dòng)脈粥樣硬化癥、血栓形成、充血性心力衰竭、和心臟再灌注損傷、腎再灌注損傷、肝病和腎炎，以及感染引起的肌痛。
該化合物還用于治療阿爾茨海默氏病，流感、多發(fā)性硬化、癌癥、糖尿病、系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)、皮膚相關(guān)性疾病例如牛皮癬、濕疹、燒傷、皮炎、瘢痕形成、和疤痕組織形成。本發(fā)明的化合物還將用于治療胃腸道疾病例如炎性腸病、局限性回腸炎、胃炎、過(guò)敏性腸綜合癥、潰瘍性結(jié)腸炎。該化合物還將用于治療眼病，例如視網(wǎng)膜炎、視網(wǎng)膜病、葡萄膜炎、恐光癥、和對(duì)眼組織的急性損傷。本發(fā)明的化合物還將用于治療血管生成，包括瘤形成、轉(zhuǎn)移、眼科疾病例如角膜移植排斥、眼新血管形成、視網(wǎng)膜新血管形成，包括損傷或感染后的新血管形成、糖尿病性視網(wǎng)膜病、晶狀體后纖維增生和新生血管性青光眼；潰瘍性疾病，例如胃潰瘍；病理性，但非惡性病癥，例如血管瘤，包括新生兒血管瘤、鼻咽血管纖維瘤和骨無(wú)血管形成性壞死；糖尿病性腎病和心肌病；以及婦女生殖系統(tǒng)疾病例如子宮內(nèi)膜異位。本發(fā)明的化合物還可以用于預(yù)防環(huán)加氧酶-2的產(chǎn)生。
除了可用于人類的治療，這些化合物還用于包括哺乳動(dòng)物、囁齒動(dòng)物等的寵物動(dòng)物(companion animals)、外來(lái)動(dòng)物和家畜的獸醫(yī)治療。更優(yōu)選的動(dòng)物包括馬、狗、和貓。
本發(fā)明的化合物還用于共同治療，部分或完全代替其它常規(guī)抗炎藥，例如與甾類、環(huán)加氧酶-2抑制劑、NSAIDs、DMARDS、免疫抑制劑、5-脂氧合酶抑制劑、LTB4拮抗劑和LTA4水解酶抑制劑共同給藥。
本文中使用的術(shù)語(yǔ)“TNF介導(dǎo)的疾病”指TNF通過(guò)TNF本身的控制，或者通過(guò)TNF導(dǎo)致另一種單核因子(例如但不限于IL-1，IL-6或IL-8)被釋放而發(fā)揮作用的任何和所有疾病和病癥。例如，這樣一種病癥，其中IL-1是一種主要成分，其產(chǎn)生或作用響應(yīng)于TNF而加劇或分泌，因此這種疾病被認(rèn)為是TNF介導(dǎo)的疾病。
本文中使用的術(shù)語(yǔ)“p38介導(dǎo)的疾病”指通過(guò)p38本身的控制，或者通過(guò)p38導(dǎo)致另一種因子(例如但不限于IL-1，IL-6或IL-8)被釋放，而發(fā)揮作用的任何和所有疾病和病癥。例如，這樣一種病癥，其中IL-1是一種主要成分，其產(chǎn)生或作用響應(yīng)于p38而加劇或分泌，因此這種疾病被認(rèn)為是p38介導(dǎo)的疾病。
因?yàn)門NF-β與TNF-α(也稱為惡液質(zhì)素)存在密切的結(jié)構(gòu)同源性，并且因?yàn)樗鼈兙T導(dǎo)類似的生物反應(yīng)，并結(jié)合同樣的細(xì)胞受體，所以，TNF-α和TNF-β的合成都被本發(fā)明的化合物所抑制，因此被本發(fā)明總體稱為“TNF”，除非另有具體說(shuō)明。
實(shí)施例除非另有說(shuō)明，所有溫度包括熔點(diǎn)(即，Mpts.)均為攝氏度(℃)。實(shí)施例1 砜1該實(shí)施例舉例說(shuō)明了從4-氯-2-甲硫基嘧啶-5-羧酸乙酯制備砜1的方法。步驟1 4-甲基氨基-2-甲硫基嘧啶-5-羧酸乙酯的制備 將20g(86mmol)4-氯-2-甲硫基嘧啶-5-羧酸乙酯(Aldrich Chemical Co.，Milwaukee，Wisconsin，USA)在250mL二氯甲烷中的溶液冷卻至0℃，緩慢加入35mL(281mmol)33％甲基胺在乙醇中的溶液。攪拌30分鐘后，加入150mL水，并進(jìn)行相分離。通過(guò)硫酸鎂干燥有機(jī)相并過(guò)濾。在減壓下蒸發(fā)濾液，得到19g(97％)4-甲基氨基-2-甲硫基嘧啶-5-羧酸乙酯，其為白色固體。步驟2制備4-甲基氨基-2-甲硫基嘧啶-5-甲醇 將氫化鋁鋰(8.2g，215mmol)混懸于300mL冰浴冷卻的無(wú)水四氫呋喃，向其中加入46g 4-甲基氨基-2-甲硫基-嘧啶-5-羧酸乙酯在450mL無(wú)水四氫呋喃中的溶液(215mmol)。將反應(yīng)混合液攪拌15分鐘，加入18mL水淬滅反應(yīng)。逐滴加入8.5mL 15％氫氧化鈉溶液，然后加入25.5mL水。得到的混懸液在室溫下攪拌7小時(shí)，然后過(guò)濾。濾渣用100mL四氫呋喃洗滌兩次。合并濾液，減壓濃縮。將殘留物混懸于200mL乙酸乙酯/己烷(1∶2)，過(guò)濾其中的固體，干燥得到32.7g(82％)4-甲基氨基-2-甲硫基嘧啶-5-甲醇，其為黃色固體。步驟3 4-甲基氨基-2-甲硫基嘧啶-5-甲醛的制備 向4-甲基氨基-2-甲硫基嘧啶-5-甲醇(20g，108mmol)在1L二氯甲烷中的溶液中加入87g(1mol)二氧化錳。將得到的混合液攪拌24小時(shí)，然后通過(guò)助濾劑過(guò)濾。濾渣用100mL二氯甲烷洗滌。合并濾液，減壓濃縮，得到15.8g(80％)4-甲基氨基-2甲硫基嘧啶-5-甲醛，其為白色固體。步驟4 向3.3g(18.1mmol)4-甲基氨基-2-甲硫基嘧啶-5-甲醛、4.0g(20.1mmol)2-氯苯基乙酸乙酯在30mL NMP中的混合液中加入1.5g樹(shù)脂，結(jié)合1，3，4，6，7，8-六氫-2H-嘧啶并[1，2-a]嘧啶的聚合物。將反應(yīng)混合物在120℃攪拌48小時(shí)，冷卻到室溫，過(guò)濾，用NMP和乙酸乙酯洗滌，混懸于水中。過(guò)濾分離產(chǎn)物。用乙酸乙酯萃取濾液另外得到一些產(chǎn)物。合并的產(chǎn)物用5％HCl水溶液和水洗滌，干燥得到4.0g硫化物(質(zhì)譜MH+＝318.Mpt.193.0-193.4℃)。步驟5 將13.5g(42.5mmol)硫化物在氯仿中的溶液在冰浴中冷卻，用20.5g(91mmol)3-氯過(guò)苯甲酸處理。將混合物在室溫下攪拌16小時(shí)，然后用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌，并進(jìn)行相分離。通過(guò)硫酸鎂干燥有機(jī)相，過(guò)濾，減壓濃縮。將產(chǎn)物置于乙醚中攪拌，過(guò)濾，干燥得到13.1g砜1(質(zhì)譜MH+＝350.MP＝232.6-232.8℃)。實(shí)施例2 砜2本實(shí)施例舉例說(shuō)明了從4-氯-2-甲硫基嘧啶-5-羧酸乙酯起始制備6-(2-氯苯基)-2-甲磺?；?吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-醇(砜2)的方法。步驟2.1 4-氨基-2-甲硫基嘧啶-5-羧酸乙酯的制備 用50mL三乙胺和40mL氫氧化銨水溶液處理4-氯-2-甲硫基嘧啶-5-羧酸乙酯(25.4g，106mmol，Aldrich Chemical Co.，Milwaukee，Wisconsin，USA)在300mL四氫呋喃中的溶液。攪拌4小時(shí)后，加入300mL水并進(jìn)行相分離。用300mL鹽水洗滌有機(jī)層，真空濃縮，溶解于二氯甲烷中，通過(guò)硫酸鈉干燥，過(guò)濾，真空濃縮，得到16.5g(95％)4-氨基-2-甲硫基嘧啶-5-羧酸乙酯，其為白色固體。步驟2.2 4-氨基-2-甲硫基嘧啶-5-甲醇的制備 在1.5小時(shí)內(nèi)，將4-氨基-2-甲硫基嘧啶-5-羧酸酯(34.7g，163mmol)在500mL無(wú)水四氫呋喃中的溶液加入氫化鋁鋰(175mmol)在175mL二乙醚中的0℃溶液。反應(yīng)混合液緩慢回溫到環(huán)境溫度，然后在用7mL水、7mL 2M氫氧化鈉溶液、隨后14mL水淬滅反應(yīng)之前，冷卻到0℃。過(guò)濾得到的混懸液，濾渣用2×300mL乙酸乙酯洗滌。合并濾液，濃縮得到23.0g(83％)4-氨基-2-甲硫基嘧啶-5-甲醇，其為白色固體。步驟2.3 4-氨基-2-甲硫基嘧啶-5-甲醛的制備 用活化的氧化錳粉末(63.0g，725mmol)處理4-氨基-2-甲硫基嘧啶-5-甲醇(21.8g，128mmol)在800mL二氯甲烷中的混懸液。將反應(yīng)混合液攪拌18小時(shí)，然后通過(guò)硅藻土過(guò)濾。濾渣用熱二氯甲烷和甲醇溶液反復(fù)洗滌。合并濾液，濃縮得到17.5g(81％)4-氨基-2-甲硫基嘧啶-5-甲醛，其為白色固體。步驟2.4 6-(2-氯苯基)-2-甲硫基-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-醇的制備 向4-氨基-2-甲硫基嘧啶-5-甲醛(21.7g，128mmol)和2-氯苯基乙酸乙酯(31.3g，158mmol)在250mL無(wú)水1-甲基-2-吡咯烷酮中的溶液中加入碳酸鉀(63.0g，491mmol)。將反應(yīng)混合液在95℃攪拌16小時(shí)，通過(guò)TLC(20∶80，乙酸乙酯/己烷)監(jiān)測(cè)。再加入12.0g(60mmol)2-氯苯基乙酸乙酯，將反應(yīng)混合液置于95℃下再攪拌16小時(shí)。過(guò)濾冷卻后的反應(yīng)混合液，過(guò)濾得到的固體用乙酸乙酯洗滌。合并濾液，用400mL水和300mL乙酸乙酯稀釋。分離有機(jī)相，用鹽水洗滌，通過(guò)硫酸鈉干燥，過(guò)濾，真空濃縮，直到形成黃色沉淀。得到的固體用乙酸乙酯洗滌，干燥產(chǎn)生少量產(chǎn)物。大多數(shù)產(chǎn)物保留在水層中，靜置后緩慢沉淀出來(lái)。過(guò)濾沉淀，用水和乙酸乙酯洗滌。該過(guò)程重復(fù)6次，共產(chǎn)生31.9g(82％)6-(2-氯苯基)-2-甲磺?；?吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-醇(質(zhì)譜M+＝303，mp＝234.5-235.3℃)。步驟2.5 6-(2-氯苯基)-2-甲基磺酰-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-醇的制備 向6-(2-氯苯基)-2-甲硫基-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-醇(25.2g，82.9mmol)在700mL四氫呋喃的溶液中加入過(guò)硫酸氫鉀制劑(105g，171mmol)在200mL水中的稀漿。將反應(yīng)混合物攪拌5小時(shí)，過(guò)濾，然后在真空下濃縮。過(guò)濾得到的稀漿，用水洗滌收集的固體，干燥得到23.2g(83％)6-(2-氯苯基)-2甲磺?；?吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-醇(砜2)，其為淡黃色固體。(質(zhì)譜MH+＝336，mp＝215.1-221.1℃)實(shí)施例3 步驟1在80℃下攪拌3.1g(8.9mmol)砜1和2.8g(17.7mmol)1，4二氧-螺[4，5]癸-8-基胺(參見(jiàn)WO 99/01452的制備方法)在15mL NMP中的混合液16小時(shí)，用水稀釋，攪拌，過(guò)濾，干燥，得到3.7g縮酮中間體，其為黃色固體。步驟2將3.8g(8.9mmol)縮酮在40mL 80％乙酸水溶液中的溶液在65℃下攪拌4小時(shí)，冷卻，倒入水中，用乙酸乙酯萃取。有機(jī)相用飽和碳酸氫鈉和鹽水洗滌，通過(guò)硫酸鈉干燥。減壓濃縮。殘留物在快速色譜上(梯度洗脫20-30％丙酮/己烷)純化，得到2.4g白色固體(質(zhì)譜MH+＝383)。實(shí)施例4 通過(guò)Dean-Stark收集器(trap)加熱回流0.4g(1.05mmol)化合物3、0.23ml(3.2mmol)1，3-丙二醇和0.25g(1.3mmol)pTsOH.H2O在15mL甲苯中的混合液。16小時(shí)后，反應(yīng)液冷卻到室溫，倒入碳酸氫鈉水溶液，用乙酸乙酯萃取。萃取液用鹽水洗滌，通過(guò)硫酸鈉干燥，減壓濃縮。殘留物經(jīng)快速色譜純化(梯度洗脫2-3％丙酮/己烷)，得到0.3g白色固體(質(zhì)譜MH+＝441.Mpt.196.1-196.5℃)。實(shí)施例5 將0.3g(0.78mmol)化合物3、0.29g(2.4mmol)1，1，1-三(羥基甲基)乙醇和0.19g(1mmol)p-TsOH·H2O在10mL甲苯中的混合液回流16小時(shí)，冷卻到室溫，倒入碳酸氫鈉水溶液，用乙酸乙酯萃取。萃取液用鹽水洗滌，通過(guò)硫酸鈉干燥，減壓濃縮。殘留物經(jīng)快速色譜純化(用乙酸乙酯洗脫)，產(chǎn)物應(yīng)用HCl/乙酸乙酯轉(zhuǎn)化為鹽酸鹽，得到0.2g白色固體(質(zhì)譜M+＝485.Mpt.180.3-181.2℃)。實(shí)施例6 將0.1g(0.26mmol)化合物3、0.09g(0.81mmol)2-(羥基甲基)-1，3-丙二醇和0.065g(0.34mmol)p-TsOH·H2O在5mL甲苯中的混合液回流16小時(shí)，冷卻到室溫，倒入碳酸氫鈉水溶液，用乙酸乙酯萃取。萃取液用鹽水洗滌，通過(guò)硫酸鈉干燥，減壓濃縮。殘留物經(jīng)快速色譜純化(用乙酸乙酯洗脫)，產(chǎn)物用HCl/乙醚轉(zhuǎn)化成HCl鹽，得到0.08g白色固體(質(zhì)譜M+＝471.Mpt.146-150℃)。實(shí)施例7 將0.2g(0.5mmol)化合物3和0.16g(2.4mmol)羥基胺鹽酸鹽在5mL吡啶中的混合液在65℃下加熱。2小時(shí)后，將反應(yīng)液冷卻到室溫，倒入水中。過(guò)濾產(chǎn)物，用水洗滌，干燥得到白色固體，0.21g(質(zhì)譜MH+＝398.Mpt.＞300℃)。實(shí)施例8 將0.26g(0.79mmol)化合物3、0.077g(1.2mmol)KCN和0.23g(2.4mmol)碳酸銨在10mL 50％乙醇水溶液中的混合液加熱至65℃。16小時(shí)后，將反應(yīng)混合液用10mL水稀釋，加熱至回流。15分鐘后，冷卻反應(yīng)，通過(guò)過(guò)濾分離產(chǎn)物。將產(chǎn)物混懸于甲醇中，加入過(guò)量的鹽酸/乙醚。在減壓下濃縮溶液，用乙醚攪拌殘?jiān)?，過(guò)濾，干燥得到0.24g產(chǎn)物，其為白色固體(質(zhì)譜MH+＝453.Mpt.＞300℃)。實(shí)施例9 步驟1在80℃下攪拌0.1g(0.3mmol)砜2和0.94g(0.6mmol)1，4-二氧雜-螺[4，5]癸-8-基胺(參見(jiàn)WO 99/01452的制備方法)在5mL NMP中的混合液16小時(shí)，冷卻至室溫，倒入用水稀釋，飽和碳酸氫鈉水溶液，用乙酸乙酯萃取。萃取液用水和鹽水洗滌，然后通過(guò)硫酸鈉干燥。減壓濃縮溶液，然后經(jīng)快速色譜純化(梯度洗脫40-80％乙酸乙酯/己烷)，得到0.1g縮酮中間體，其為白色固體。(質(zhì)譜MH+＝413)。步驟2將2.35g(5.7mmol)縮酮在40mL 80％乙酸水溶液中的溶液在65℃下攪拌3小時(shí)，冷卻，倒入水中，過(guò)濾，干燥得到0.8g酮(質(zhì)譜MH+＝369)，其為黃色固體。用HCl/乙醚將樣品轉(zhuǎn)化為HCl鹽(質(zhì)譜MH+＝369.Mpt.＝265.5-269.9℃)。實(shí)施例10 將0.2g(0.54mmol)化合物9、0.2g(1.7mmol)1，1，1-三(羥基甲基)乙醇和0.13g(0.7mmol)p-TsOH·H2O在30mL甲苯中的混合液回流16小時(shí)，冷卻到室溫，過(guò)濾。分離出的白色固體產(chǎn)物即為p-甲苯磺酸鹽(0.19g)(質(zhì)譜MH+＝470.Mpt.＝223-226.5℃)。實(shí)施例11 向砜2(0.5g，1.3mmol)在3mL 1-甲基-2-吡咯烷酮中的溶液中加入反式-4-氨基環(huán)己醇(0.54g，4.7mmol)。將反應(yīng)混合液在70℃攪拌2小時(shí)，冷卻，用乙酸乙酯稀釋，直到開(kāi)始形成沉淀。過(guò)濾得到的混懸液，用水和乙酸乙酯洗滌固體，干燥得到0.40g(78％)題述化合物，其為亮黃色固體(質(zhì)譜M+H+＝371，mp＝191.1-194.3℃)。將游離堿置于乙酸乙酯中，然后用1M HCl/Et2O溶液處理，形成2-(反式-4-羥基環(huán)己基氨基)-6-(2-氯苯基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-醇(11)的鹽酸鹽，其為白色粉末，熔點(diǎn)為263.2-264.0℃。實(shí)施例12 向砜2(1.27g，3.78mmol)在15mL 1-甲基-2-吡咯烷酮中的溶液中加入反式-1，4-二氨基環(huán)己烷(3.75g，32.8mmol)。將反應(yīng)混合液在65℃攪拌1.5小時(shí)，冷卻，用80mL乙酸乙酯稀釋。過(guò)濾得到的混懸液，用乙酸乙酯和甲醇洗滌幾次。干燥固體，得到1.31g(94％)2-(反式-4-氨基環(huán)己基氨基)-6-(2-氯苯基)-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-醇，其為灰白色粉末(質(zhì)譜M+H+＝370)。將游離堿置于乙酸乙酯中，然后用1M HCl/Et2O溶液處理，形成題述化合物的二鹽酸鹽，其為白色粉末，熔點(diǎn)＞300℃。實(shí)施例13 向砜1(0.36g，1.0mmol)在10mL 1-甲基-2-吡咯烷酮中的溶液中加入反式-1，4-二氨基環(huán)己烷(1.05g，9.20mmol)。將反應(yīng)混合液在80℃攪拌20分鐘，冷卻，用乙酸乙酯稀釋。形成少量沉淀，過(guò)濾混懸液。向有機(jī)層中加入水，用3×60mL乙酸乙酯萃取。合并的有機(jī)層用鹽水洗滌，通過(guò)硫酸鈉干燥，濃縮得到黃色液體。經(jīng)柱色譜(50∶50，甲醇/二氯甲烷)純化，得到0.25g(62％)2-(反式-4-氨基環(huán)己基氨基)-6-(2-氯苯基)-8-甲基-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮，其為黃色泡沫(質(zhì)譜M+H+＝384，mp＝190.3-191.4℃)。將游離堿置于乙酸乙酯中，然后用1M HCl/Et2O溶液處理，形成題述化合物的二鹽酸鹽，其為白色粉末，熔點(diǎn)為224.0-228.5℃。實(shí)施例14 向胺13(70mg，0.18mmol)在10mL二氯甲烷中的溶液中加入三乙胺(0.040mL，0.29mmol)和甲磺酸酐(50mg，0.29mmol)。攪拌反應(yīng)混合液1小時(shí)，真空濃縮。經(jīng)柱色譜(3∶97，甲醇/二氯甲烷)純化得到78mg(93％)2-(反式-4-甲磺?；被h(huán)己基氨基)-6-(2-氯苯基)-8-甲基-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮，其為白色固體(質(zhì)譜M+H+＝462，mp＝260.9-261.1℃)。將游離堿置于乙酸乙酯中，然后用1M HCl/Et2O溶液處理，形成題述化合物的鹽酸鹽，其為白色粉末，熔點(diǎn)為250.8-252.2℃。實(shí)施例15 向胺13(116mg，0.302mmol)在15mL二氯甲烷中的溶液中加入三乙胺(0.050mL，0.36mmol)和二甲基氨磺酰氯(0.075mL，0.696mmol)。將反應(yīng)混合液回流1小時(shí)。再加入0.075mL(0.696mmol)二甲基氨磺酰氯，在將反應(yīng)混合液回流16小時(shí)，冷卻，真空濃縮，經(jīng)柱色譜(3∶97，甲醇/二氯甲烷)純化，得到90mg(61％)2-(反式-4-N，N-2二甲基磺?；被h(huán)己基氨基)-6-(2-氯苯基)-8-甲基-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮，其為白色固體(質(zhì)譜M+H+＝491，mp＝226.5-229.0℃)。將游離堿溶解于二氯甲烷中，然后用1MHCl/Et2O溶液處理，形成題述化合物的鹽酸鹽，其為淡黃色粉末，熔點(diǎn)為160.0-168.0℃。實(shí)施例16本實(shí)施例舉例說(shuō)明了從6-(2氯苯基)-2-甲磺?；?吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-醇起始，合成2-(反式-4-甲磺?；０被h(huán)己基氨基)-6-(2-氯苯基)-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮。
向砜2(1.84g，5.48mmol)在18mL無(wú)水1-甲基-2-吡咯烷酮的溶液中加入氫化鈉(0.31g，7.75mmol，在礦物油中60％的分散液)。將反應(yīng)混合物攪拌10分鐘，直到?jīng)]有氣體冒出，然后在5分鐘內(nèi)逐滴加入2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基甲基氯(0.10mL，5.7mmol)。將反應(yīng)混合物攪拌1.5小時(shí)，其后向該反應(yīng)混合物中加入反式-1，4-二氨基環(huán)己烷(6.24g，54.6mmol)在20mL無(wú)水1-甲基-2-吡咯烷酮中的溶液。將得到的反應(yīng)混合物攪拌30分鐘，倒入60mL水中。將得到的混濁混合物用2×100mL乙酸乙酯萃取。用2×150mL鹽水洗滌合并的有機(jī)層，通過(guò)硫酸鈉干燥，真空濃縮，得到粗制的棕色液體。通過(guò)柱色譜純化(5-50∶95-50，甲醇/-二氯甲烷)得到1.66g(61％)產(chǎn)物16A，其為黃色泡沫(質(zhì)譜M+H+＝500，mp＝96.5-105.0℃) 向胺16A(0.46g，0.91mmol)在20mL二氯甲烷中的溶液中加入三乙胺(0.15mL，1.1mmol)和甲磺酸酐(0.18g，1.1mmol)。將反應(yīng)混合物攪拌19小時(shí)，然后在真空下濃縮。通過(guò)柱色譜純化(3∶97，甲醇/二氯甲烷)得到0.34g(65％)產(chǎn)物16B，其為白色固體(質(zhì)譜M+H+＝578，mp＝231-232.5℃)。 將SEM-保護(hù)的吡啶酮16B(320mg，0.553mmol)混懸于20mL甲醇中，用10mL 10％鹽酸處理。將反應(yīng)混合物回流26小時(shí)，冷卻，然后在真空下濃縮，直到開(kāi)始形成沉淀。過(guò)濾得到的混懸液，用水和乙酸乙酯洗滌，然后干燥得到白色固體。通過(guò)再濃縮母液，得到另一部分固體，過(guò)濾得到總共221mg(85％)2-(反式-4-甲磺?；被h(huán)己基氨基)-6-(2-氯苯基)-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮的鹽酸鹽(16)，其為白色固體(質(zhì)譜M+H+＝448，mp＞300℃)。實(shí)施例17該實(shí)施例舉例說(shuō)明了從SEM-保護(hù)的吡啶酮合成2-(反式-4-N，N-二甲基磺?；?氨基環(huán)己基氨基)-6-(2-氯苯基)-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮。 向胺16A(448mg，0.889mmol)在20mL二氯甲烷的溶液中，加入三乙胺(0.15mL，1.1mmol)和二甲基氨磺酰氯(0.22mL，2.1mmol)。將該反應(yīng)混合物回流17小時(shí)。在真空下濃縮冷卻的反應(yīng)混合物，通過(guò)柱色譜純化(3∶97，甲醇/二氯甲烷)得到290mg(54％)產(chǎn)物17A，其為白色固體(質(zhì)譜M+H+＝607，mp＝104.3-114.4℃)。 將SEM-保護(hù)的化合物17A(270mg，0.445mmol)混懸于30mL甲醇中，用20mL 10％鹽酸處理。將反應(yīng)混合物回流2天，冷卻，然后在真空下濃縮，直到開(kāi)始形成沉淀。過(guò)濾得到的混懸液，用水和乙酸乙酯洗滌，然后干燥得到205mg(90％)2-(反式-4-二甲基磺?；０被h(huán)己基-氨基)-6-(2-氯苯基)-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮的鹽酸鹽(17)，其為白色固體(質(zhì)譜M+H+＝477，mp＝262.2-262.5℃)實(shí)施例18 將化合物11(300mg，0.8mmol)和96％甲酸(3mL)的混合物在60℃攪拌3小時(shí)，然后在25℃過(guò)夜。將反應(yīng)混合液在減壓下濃縮，用乙醚研制，過(guò)濾，干燥得到320mg 6-(2-氯苯基)-2-(4-反式-甲?；趸?環(huán)己基氨基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮(質(zhì)譜MH+＝399，mpt.＞300℃)。實(shí)施例19 將化合物11(300mg，0.8mmol)，乙酸酐(0.23mL，2.4mmol)和吡啶(0.26mL，3.2mmol)在二氯甲烷(3mL)中的混懸液回流3天。過(guò)濾反應(yīng)液，沉淀通過(guò)柱色譜在硅膠上用97∶3 CH2Cl2/MeOH純化，得到158mg純化的產(chǎn)物。加入鹽酸(1.0M/Et2O，2.0當(dāng)量)得到鹽，其通過(guò)過(guò)濾和干燥，得到155mg 6-(2-氯苯基)-2-(4-反式-乙?；趸h(huán)己基氨基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮(19)。(質(zhì)譜MH+＝413，mmpt.＞300℃)。實(shí)施例20
將化合物11(250mg，0.68mmol)和4-(二甲基氨基)吡啶(DMAP)(6.8mg，0.06mmol)在THF(5mL)中的混懸液在冰浴中冷卻，加入焦碳酸二甲酯(0.7mL，6.8mmol)，在25℃下攪拌混合液18小時(shí)。過(guò)濾反應(yīng)液，沉淀通過(guò)用98∶2 CH2Cl2/MeOH洗脫的硅膠柱色譜純化，產(chǎn)生33mg純化的產(chǎn)物。加入鹽酸(1.0M/Et2O，2.0當(dāng)量)得到鹽，其通過(guò)過(guò)濾和干燥，得到34mg6-(2-氯苯基)-2-(4-反式甲氧基羰基氧基-環(huán)己基氨基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮(20)。(質(zhì)譜MH+＝429)。實(shí)施例21 將化合物11(308mg，0.83mmol)在二氯甲烷(5mL)中的混懸液于冰浴中冷卻，加入氯磺酰基異氰酸鹽(0.08mL，0.87mmol)。將混合液在25℃攪拌18小時(shí)，然后用水(0.5mL)處理。將兩相混合液攪拌8小時(shí)，過(guò)濾，沉淀通過(guò)柱色譜在硅膠上用97∶3 CH2Cl2/MeOH純化，得到108mg純化的產(chǎn)物。加入鹽酸(1.0M/Et2O，2.0當(dāng)量)得到鹽，其通過(guò)過(guò)濾和干燥，得到94mg 6-(2-氯苯基)-2-(4-氨基甲?；醐h(huán)己基氨基)-8-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮(21)。(質(zhì)譜MH+＝414，mpt.291.0-293.5℃)。實(shí)施例22 將化合物38，參見(jiàn)實(shí)施例38，(190mg，0.49mmol)在二氯甲烷(5mL)中的混懸液在冰浴中冷卻，加入氯磺?；惽杷狨?0.05mL，1.01mmol)。將混合液在25℃攪拌18小時(shí)，然后用水(0.5mL)處理。將兩相混合液攪拌8小時(shí)，過(guò)濾，沉淀通過(guò)應(yīng)用97∶3 CH2Cl2/MeOH洗脫的硅膠柱色譜純化，得到108mg純化的產(chǎn)物。加入鹽酸(1.0M/Et2O，2.0當(dāng)量)得到鹽，其通過(guò)過(guò)濾和干燥，得到94mg產(chǎn)物22。(質(zhì)譜MH+＝428，mpt.234.7-235.4℃)。實(shí)施例23 將砜2(500mg，1.5mmol)與1-羥基甲基環(huán)戊基氨基(686mg，5.96mmol)和1-甲基-2-吡咯烷酮(1mL)合并。將混合液加熱到100℃保持3小時(shí)，然后冷卻到室溫。加入甲醇(3mL)。將混懸液攪拌10分鐘，過(guò)濾，沉淀用甲醇徹底洗滌，干燥，懸浮于乙酸乙酯中。加入鹽酸(1.0M/Et2O，2.0當(dāng)量)得到鹽，其通過(guò)過(guò)濾和干燥，得到235mg產(chǎn)物23。(質(zhì)譜MH+＝371，mpt.290-293℃)。實(shí)施例24 將砜2(250mg，0.71mmol)與4-氨基甲基環(huán)己醇(630mg，3.4mmol)和1-甲基-2-吡咯烷酮(0.5mL)混合。將混合液加熱到95℃保持3小時(shí)，然后冷卻到室溫?；旌弦和ㄟ^(guò)硅膠柱色譜在用96∶4 CH2Cl2洗脫純化。合并含有產(chǎn)物的柱級(jí)分，濃縮成固體，將其懸浮于乙酸乙酯中。加入鹽酸(1.0M/Et2O，2.0當(dāng)量)得到鹽，其通過(guò)過(guò)濾和干燥，得到85mg產(chǎn)物24。(質(zhì)譜MH+＝385，mpt.205-213℃)。實(shí)施例25 將砜1(500mg，1.42mmol)與4-氨基甲基環(huán)己醇(630mg，3.4mmol)和1-甲基-2-吡咯烷酮(0.5mL)混合。將混合液加熱到95℃保持3小時(shí)，然后冷卻到室溫。混合液通過(guò)硅膠柱色譜用96∶4 CH2Cl2洗脫純化。合并含有產(chǎn)物的柱級(jí)分，濃縮成固體，將其懸浮于乙酸乙酯中。加入鹽酸(1.0M/Et2O，2.0當(dāng)量)得到鹽，其通過(guò)過(guò)濾和干燥，得到79mg產(chǎn)物25。(質(zhì)譜MH+＝399，mpt.148-151.5℃)。實(shí)施例26 將化合物38(350mg，0.9mmol)和4-(二甲基氨基)吡啶(DMAP)(55.5mg，0.45mmol)在THF(5mL)中的混懸液在冰浴中冷卻，加入焦碳酸二甲酯(0.3mL，2.8mmol)，在25℃下攪拌得到的混合液18小時(shí)。過(guò)濾，沉淀通過(guò)硅膠柱色譜用99∶1 CH2Cl2/MeOH洗脫純化，得到205mg純化的產(chǎn)物。加入鹽酸(1.0M/Et2O，2.0當(dāng)量)得到鹽，其通過(guò)過(guò)濾和干燥，得到200mg產(chǎn)物26.(質(zhì)譜MH+＝443mpt 213.9-214.4℃)。實(shí)施例27 在室溫下向化合物38(0.36g，0.94mmol)在10mL二氯甲烷中的溶液中依次加入吡啶(0.60g，7.6mmol)和乙酸酐(0.58g，5.6mmol)。將得到的混合液在室溫下攪拌3天，然后減壓濃縮。得到的殘留物通過(guò)柱色譜純化，產(chǎn)生250mg灰色固體，其為純產(chǎn)物(質(zhì)譜MH+＝427，mpt.200.9-201.2℃)。實(shí)施例28 將化合物38(0.34g，0.89mmol)在6mL甲酸中的溶液在60℃攪拌3天。將得到的混合液在減壓下濃縮。得到的泡沫用己烷稀釋，濃縮產(chǎn)生固體。通過(guò)柱色譜純化，得到340mg產(chǎn)物28，其為粉末狀、棕色固體。(質(zhì)譜MH+＝413，mpt.196.1-196.6℃)。實(shí)施例29
將1，4-二氧雜-螺[4，5]癸-8-基胺(參見(jiàn)WO 99/01452的制備方法)(0.157g，1.00mmole)、N-甲基吡咯烷酮(1mL)和砜1(0.350g，1.00mmole)的混合物在100℃下攪拌2小時(shí)。將反應(yīng)混合液冷卻，倒入水中，用乙酸乙酯萃取，用飽和鹽水洗滌，用硫酸鎂干燥，真空蒸發(fā)。粗產(chǎn)物經(jīng)硅膠快速色譜(0-3％甲醇/二氯甲烷)純化。合并含有產(chǎn)物的柱級(jí)分，真空濃縮。將濃縮部分(0.100g)置于甲醇中，用鹽酸(1.0M/Et2O，1.0當(dāng)量)處理，再蒸發(fā)至干燥，然后用乙醚洗滌，過(guò)濾，干燥得到0.070g化合物29的鹽酸鹽(M+＝427)。
向在5mL THF中的剩余的游離堿(0.167g，3.56mmole)中加入2N鹽酸水溶液(1mL)。6小時(shí)后，將反應(yīng)混合液倒入飽和碳酸氫鈉溶液中，并用乙酸乙酯萃取。合并有機(jī)層，用飽和鹽水洗滌，用硫酸鎂干燥，真空蒸發(fā)。殘留物經(jīng)硅膠快速色譜(20-30％丙酮/己烷)純化。合并含有產(chǎn)物的柱級(jí)分，真空濃縮。將產(chǎn)物溶解于甲醇中，用鹽酸(1.0M/Et2O，1.0當(dāng)量)處理，再蒸發(fā)至干燥，然后用乙醚洗滌，過(guò)濾，干燥得到0.102g化合物的鹽酸鹽(M+＝382)。實(shí)施例30 將砜1(0.500g，1.43mmole)在4-氨基-1-哌啶羧酸乙酯(1.0mL，5.83mmole)中的溶液在120℃下攪拌3小時(shí)。將反應(yīng)混合液倒入水中，用二氯甲烷萃取。合并有機(jī)層，用硫酸鎂干燥，真空蒸發(fā)。殘留物經(jīng)硅膠快速色譜(20-30％丙酮/己烷)純化。合并含有產(chǎn)物的柱級(jí)分，真空濃縮。
將純化的氨基甲酸乙酯(0.617g，1.40mmole)加入氫氧化鉀的熱乙醇溶液(6.58g，117mmole；37mL EtOH)，并在80℃下攪拌3小時(shí)。然后將反應(yīng)混合液在冰浴中冷卻，用檸檬酸的水溶液(6.6g，31.4mmole；37mLH2O)淬滅。將得到的溶液在真空下濃縮，得到一種粘稠的水溶液，將它用乙酸乙酯萃取。合并有機(jī)層，用碳酸鈉干燥，真空濃縮。殘留物經(jīng)快速色譜在硅膠柱上(10-30％甲醇/二氯甲烷)純化。合并含有產(chǎn)物的柱級(jí)分，真空濃縮，得到30B。
將哌啶產(chǎn)物的一部分溶解于甲醇中，用1eq 1N HCl/乙醚處理。將溶液在真空下濃縮。干燥的殘留物用乙醚洗滌，干燥后得到化合物30B的鹽酸鹽(mp＞300.0℃)。
將化合物30B(0.100g，0.270mmole)和溴乙酰胺(0.100g，0.724mmole)在2mL DMF中的溶液加熱到120℃維持幾小時(shí)。將反應(yīng)混合液冷卻，經(jīng)硅膠快速色譜(3-5，10％[1∶9氫氧化銨/甲醇]/二氯甲烷)純化。合并含有產(chǎn)物的柱級(jí)分，真空濃縮，溶解于甲醇中，用鹽酸(1.0M/Et2O，1.0當(dāng)量)處理。濃縮溶液，用乙醚洗滌，過(guò)濾，干燥得到0.117g化合物30A的鹽酸鹽(mp76.3-136.5；M+.427)。實(shí)施例31 將化合物30B(0.100g，0.270mmole)、溴乙腈(0.091mL，1.35mmole)和碳酸鈉(0.114g，1.35mmole)在1mL DMF中的混合物在室溫下攪拌。然后將該混合物經(jīng)硅膠快速色譜(2-5[1∶9氫氧化銨/甲醇]/二氯甲烷)純化。合并含有產(chǎn)物的柱級(jí)分，真空濃縮，得到0.086g所需產(chǎn)物。將該游離堿的部分(0.016g)溶解于甲醇中，用鹽酸(1.0 M/Et2O，1.0當(dāng)量)處理。濃縮該溶液，用乙醚洗滌，過(guò)濾，干燥得到0.012g化合物31的鹽酸鹽(mp228.3-228.9；M+.409)。實(shí)施例32 將化合物30B(0.050g，0.135mmole)和溴乙酸甲酯(0.030mL，0.317mmole)在1mL DMF中的混合物在室溫下攪拌。通過(guò)硅膠快速色譜(10-40％甲醇/二氯甲烷+1％氫氧化銨)純化該混合物。合并含有產(chǎn)物的柱級(jí)分，真空濃縮。將殘?jiān)芙庥诩状贾?，用鹽酸(1.0M/Et2O，1.0當(dāng)量)處理。濃縮該混合物，用乙醚洗滌，過(guò)濾，干燥得到0.013g化合物32的鹽酸鹽(mp150-168；M+.442)。實(shí)施例33 將化合物30B(0.050g，0.135mmole)置于具有異氰酸三甲基甲硅烷基酯(0.021mL，0.149mmole)的1mL THF中，在室溫下攪拌3小時(shí)，然后在真空下蒸發(fā)。將殘?jiān)ㄟ^(guò)硅膠快速色譜純化(10％[1∶9氫氧化銨/甲醇]/二氯甲烷)。合并含有產(chǎn)物的柱級(jí)分，真空濃縮。將終產(chǎn)物置于甲醇中，用鹽酸(1.0M/Et2O，1.0當(dāng)量)處理，再蒸發(fā)至干燥，用乙醚洗滌，過(guò)濾，干燥得到0.057g化合物33的鹽酸鹽(mp192.0-202.0；M+.413)。實(shí)施例34 將咪唑(0.28g，4.06mmole)和碳酸鈉(0.43g，4.06mmole)與DMF(0.63mL，8.11mmole)合并，向其滴加氯代三甲基硅烷(0.63mL，4.06mmole)。在加入干粉末狀的化合物30B(0.50g，1.35mmole)前，在室溫下攪拌稀漿20分鐘。在室溫下攪拌2小時(shí)，然后倒入水中，用二氯甲烷和乙酸乙酯萃取。用飽和鹽水洗滌合并的有機(jī)萃取液，用硫酸鎂干燥，并在真空下蒸發(fā)。將殘?jiān)ㄟ^(guò)快速色譜(2-3％甲醇/二氯甲烷)純化，合并含有產(chǎn)物的柱級(jí)分，真空濃縮。將終產(chǎn)物置于甲醇中，用鹽酸(1.0M/Et2O，1.0當(dāng)量)處理，再蒸發(fā)至干燥，然后用乙醚洗滌，過(guò)濾，干燥得到0.259g化合物34的鹽酸鹽(mp105.0-115.0C，M+.427)。實(shí)施例35 按照己描述的方法，從相應(yīng)的芐基砜制備氨基甲酸乙酯，用碘代三甲基硅烷裂解得到哌啶中間體35A(mp＞300.0)。
將化合物35A(0.030g，0.084mmole)的游離堿的一部分置于具有溴乙腈(0.009mL，0.126mmole)和碳酸鈉(0.015g，0.141mmole)的1mL DMF中，在室溫下攪拌3小時(shí)，然后通過(guò)硅膠快速色譜純化(1-10％[1∶9氫氧化銨/甲醇]/二氯甲烷)。合并含有產(chǎn)物的柱級(jí)分，真空濃縮。將終產(chǎn)物置于甲醇中，用鹽酸(1.0M/Et2O，1.0當(dāng)量)處理，再蒸發(fā)至干燥，然后用乙醚洗滌，過(guò)濾，干燥得到0.006g化合物35B的鹽酸鹽(M+.395)。實(shí)施例36 將化合物35A(0.050g，0.141mmole)的游離堿的一部分置于具有2-氯-，N-二甲基乙酰胺(0.026g，0.211mmole)和N，N-二異丙基乙基胺(0.037mL，0.211mmole)的1mL DMF中，在60℃下攪拌3小時(shí)，在120℃下攪拌2小時(shí)，然后通過(guò)硅膠快速色譜純化(3-20％[1∶9氫氧化銨/甲醇]/二氯甲烷)。合并含有產(chǎn)物的柱級(jí)分，真空濃縮。將終產(chǎn)物置于甲醇中，用鹽酸(1.0M/Et2O，1.0當(dāng)量)處理，再蒸發(fā)至干燥，然后用乙醚洗滌，過(guò)濾，干燥得到0.006g化合物36的鹽酸鹽(mp103.0-120.0℃)。實(shí)施例37 將化合物11置于具有叔丁醇鉀(0.95g，8.42mmole)和甲基碘化物(0.11mL，1.68mmole)的5mL四氫呋喃中。在室溫(rt)下攪拌4小時(shí)后，將反應(yīng)混合物通過(guò)快速色譜純化(1-3％甲醇/二氯甲烷；25-35％丙酮/己烷)，得到上述兩種產(chǎn)物(即化合物37A和37B)。將它們單獨(dú)置于甲醇中，用鹽酸(1.0M/Et2O，1.0當(dāng)量)處理，再蒸發(fā)至干燥，然后用乙醚洗滌，過(guò)濾，干燥得到0.157g二-甲基化產(chǎn)物(化合物37A)(mp182.3-183.1℃)和0.069g一-甲基化產(chǎn)物(化合物37B)(mp218.2-218.5℃)。實(shí)施例38 將硫化物1a(317mg，1.0mmole)溶解于NMP(0.3mL)中，向該溶液中加入反式4-氨基環(huán)己醇(570mg，5毫摩爾)。將該反應(yīng)在120℃下加熱12小時(shí)。將反應(yīng)冷卻至室溫，加入水(50mL)，用乙酸乙酯萃取。合并有機(jī)層，用水洗滌2次，真空濃縮。將殘?jiān)ㄟ^(guò)應(yīng)用10∶90 MeOH/CH2Cl2的硅膠柱色普純化。合并含有所需產(chǎn)物的柱級(jí)分，濃縮產(chǎn)生泡沫。將泡沫混懸于MeOH，然后加入鹽酸(1.0M/Et2O，1.0當(dāng)量)，得到化合物38的鹽。蒸發(fā)溶劑。將得到的固體用Et2O/MeOH的混合液稀釋，過(guò)濾，干燥。產(chǎn)率282mg.Mp 163.4-171.1℃.MS(M+H)+385。實(shí)施例39 將砜1(350mg，1.0mmole)與1-氨基-1-環(huán)戊烷甲醇(345mg，3.0毫摩爾)和NMP(0.3mL)混合，在120℃下攪拌1小時(shí)。將反應(yīng)混合液加入水中，用乙酸乙酯萃取。合并有機(jī)層，用水洗滌兩次，真空濃縮得到粗產(chǎn)物。殘留物通過(guò)用10∶90MeOH/CH2Cl2洗脫的硅膠柱色譜純化。合并含所需產(chǎn)物的級(jí)分，真空蒸發(fā)，得到泡沫狀所需產(chǎn)物。將殘留物懸浮于MeOH中，加入鹽酸(1.0M/Et2O，1當(dāng)量)，攪拌20分鐘，減壓濃縮。將殘留物與MeOH/Et2O的混合液一起攪拌1小時(shí)，過(guò)濾，得到產(chǎn)物39，其為白色固體。產(chǎn)率263mg.Mp 213.7-214.6℃，MS(M+H)+385。實(shí)施例40 將砜1(350mg，1.0mmole)與1-氨基-1-環(huán)戊烷甲醇(387mg，3.0毫摩爾)和NMP(0.3mL)混合，在120℃下攪拌90分鐘。將反應(yīng)混合液冷卻到室溫，加入水中，用乙酸乙酯萃取。合并有機(jī)層，通過(guò)硫酸鎂干燥，減壓濃縮。殘留物通過(guò)用10∶90 MeOH/CH2Cl2洗脫的硅膠柱色譜純化。合并含所需產(chǎn)物的級(jí)分，減壓蒸發(fā)，得到泡沫狀所需產(chǎn)物。將泡沫懸浮于MeOH中，加入鹽酸(1.0M/Et2O，1當(dāng)量)。將混合液攪拌20分鐘，真空蒸發(fā)，與MeOH/Et2O的混合液一起攪拌2小時(shí)，過(guò)濾，干燥得到產(chǎn)物40，其為白色固體。產(chǎn)率242mg.Mp185-188.6℃，MS(M+H)+399。實(shí)施例41 將砜1(350mg，1.0mmole)與順式/反式氨基環(huán)己烷羧酸乙酯(520mg，3毫摩爾)混合，在100℃下攪拌30分鐘。將得到的溶液冷卻到室溫，用65∶35己烷/丙酮通過(guò)硅膠柱色譜純化。合并含所需產(chǎn)物的級(jí)分，濃縮產(chǎn)生泡沫。將殘留物懸浮于MeOH，加入鹽酸溶液(1.0M/Et2O，1當(dāng)量)。將得到的混合液攪拌30分鐘，蒸發(fā)溶液。將得到的殘留物與MeOH/Et2O的混合液一起攪拌1小時(shí)，過(guò)濾，得到產(chǎn)物41，其為白色固體。產(chǎn)率414mg。Mp192.1-198.3℃，MS(M+H)+441。實(shí)施例42 向化合物41(300mg，0.67mmole)在EtOH中的溶液中加入濃鹽酸水溶液(3.0mL)。將得到的溶液回流24小時(shí)。在加入鹽酸(1.0mL)，將溶液再回流24小時(shí)。將反應(yīng)混合液在減壓下蒸發(fā)至干，在高真空度下干燥得到化合物42的鹽酸鹽，其為白色固體。產(chǎn)率225mg。Mp263.6-264.2℃，MS(M+H)+413。實(shí)施例43 將砜1(350mg，1.0mmole)與4-氨基環(huán)己基甲醇(1∶1順式/反式)(Chem.Ber96；1963；2377-2386)(400mg，3.3毫摩爾)和NMP(0.4ml)混合，在100℃下攪拌1小時(shí)。將反應(yīng)混合液冷卻到室溫，加入水，用乙酸乙酯萃取。合并有機(jī)層，用水洗滌5次，通過(guò)硫酸鎂干燥，濃縮得到粗產(chǎn)物，其為油狀物。殘留物通過(guò)用70∶30己烷/丙酮洗脫的硅膠柱色譜純化。合并含所需產(chǎn)物的級(jí)分，減壓下濃縮產(chǎn)生泡沫狀產(chǎn)物。將該物質(zhì)混懸于MeOH中，加入鹽酸(1.0M/Et2O，1當(dāng)量)酸化，在室溫下攪拌30分鐘，減壓濃縮。將得到的殘留物與MeOH/Et2O的混合液一起攪拌2小時(shí)，過(guò)濾，得到化合物43的鹽酸鹽，其為白色固體。產(chǎn)率335mg。Mp153.6-157℃，MS(M+H)+339。實(shí)施例44 步驟1向化合物11(3.0g，8.1毫摩爾)在NMP(35mL)中的混懸液中加入叔-丁基二甲基甲硅烷基氯(1.7g，11.3毫摩爾)和咪唑(1.2g，17.6毫摩爾)。將反應(yīng)混合物在50℃下攪拌12小時(shí)，冷卻至室溫，加入水(150-200mL)。將混合物攪拌1小時(shí)，過(guò)濾得到化合物44A，其為白色固體。產(chǎn)率3.71。Mp289.9-291.4℃ MS(M+H)+485。步驟2烷基化 向甲硅烷基保護(hù)的醇44A(483mg，1.0mmole)在NMP中的混懸液中加入氫化鈉(44mg，1.1mmole(60％油混懸液)。將反應(yīng)混合物攪拌25分鐘，其后加入2-(碘乙氧基)三-異丙基硅烷(328mg，1.0mmole)，在室溫下攪拌得到的混合物4小時(shí)。將該反應(yīng)混合物加入到水中，用乙酸乙酯萃取。合并有機(jī)層，用水洗滌5次，通過(guò)硫酸鎂干燥，濃縮得到甲硅烷基保護(hù)的中間體44B，其為油狀物。將殘?jiān)ㄟ^(guò)應(yīng)用25∶75丙酮/己烷作為洗脫劑的硅膠柱色譜純化，得到產(chǎn)物44B，其為油狀物。產(chǎn)率650mg。MS(M+H)+685。步驟3去保護(hù) 向化合物44B(650mg，0.94mmole)在THF(15mL)中的溶液中加入四丁基銨氟化物(1.0M在THF中，1.1當(dāng)量)。將得到的溶液在室溫下攪拌12小時(shí)，加入水，用乙酸乙酯萃取。合并有機(jī)層，通過(guò)硫酸鎂干燥，濃縮得到產(chǎn)物，其為油狀物。將殘留物用90∶10 CH2Cl2/MeOH通過(guò)硅膠柱色譜純化，得到產(chǎn)物44，其為油狀物。將其混懸于MeOH，用鹽酸(1.0M/Et2O，1當(dāng)量)酸化，攪拌20分鐘，濃縮，再次用Et2O/MeOH的混合液稀釋，并攪拌2小時(shí)。過(guò)濾溶液，得到化合物44的鹽酸鹽，其為白色固體。產(chǎn)率270mg。MP210.5-212.0℃.MS(M+H)+415。實(shí)施例45 步驟1烷基化向甲硅烷基保護(hù)的醇44A(483mg，1.0mmole)在NMP中的混懸液中加入氫化鈉(44mg，1.1mmole(60％油分散液)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌25分鐘。向該溶液中加入碘乙腈(0.167mg，1.0mmole)，將得到的溶液在室溫下攪拌4小時(shí)。將該反應(yīng)混合物加入到水中，用乙酸乙酯萃取。合并有機(jī)層，用水洗滌5次，通過(guò)硫酸鎂干燥，濃縮得到油。該殘留物通過(guò)應(yīng)用25∶75丙酮/己烷作為洗脫劑的硅膠柱色譜純化，得到產(chǎn)物，其為白色固體。產(chǎn)率480mg。MS(M+H)+524。步驟2去保護(hù)向上述步驟1的得到的產(chǎn)物(480mg，0.92mmole)在THF中的溶液中加入四丁基銨氟化物(1.0M/THF，1.1當(dāng)量)，并在室溫下攪拌12小時(shí)。將反應(yīng)混合液加入水，用乙酸乙酯萃取。合并有機(jī)層，通過(guò)硫酸鎂干燥，濃縮得到產(chǎn)物，其為油狀物。將殘留物用90∶10 CH2Cl2/MeOH作為洗脫液通過(guò)硅膠柱色譜純化，得到產(chǎn)物45，其為白色固體。產(chǎn)率260mg.MP245.8-246.8℃.MS(M+H)+410。
將產(chǎn)物45混懸于MeOH中，加入鹽酸溶液(1.0M/Et2O，1當(dāng)量)。將混合液在室溫下攪拌30分鐘并濃縮。將殘留物置于Et2O/MeOH的混合液中攪拌2小時(shí)，過(guò)濾得到化合物45的鹽酸鹽，其為白色固體。產(chǎn)率255mg.Mp 232.1-233.4℃.MS(M+H)+410。實(shí)施例46 步驟1烷基化向甲硅烷基保護(hù)的醇44A(483mg，1.0mmole)在NMP中的混懸液中加入氫化鈉(44mg，1.1mmole(60％油分散液)。將得到的溶液在室溫下攪拌30分鐘。向該反應(yīng)混合物中加入芐基溴(0.12ml，1.0mmole)，將得到的溶液在室溫下攪拌12小時(shí)，其后向該反應(yīng)混合物加入水，用乙酸乙酯萃取。合并有機(jī)層，用水洗滌5次，通過(guò)硫酸鎂干燥，濃縮，并通過(guò)應(yīng)用25∶75丙酮/己烷作為洗脫劑的硅膠柱色譜純化，得到產(chǎn)物，其為白色固體。產(chǎn)率502mg。Mp188.8-191.0℃ MS(M+H)+575步驟2去保護(hù)向上述步驟1的得到的產(chǎn)物(480mg，0.84mmole)在THF中的溶液中加入四丁基銨氟化物(1.0M/THF，1.1當(dāng)量)。將得到的反應(yīng)混合物在室溫下攪拌12小時(shí)，加入到水中，用乙酸乙酯萃取。合并有機(jī)層，通過(guò)硫酸鎂干燥，濃縮，并通過(guò)應(yīng)用10∶90 MeOH/CH2Cl2作為洗脫液通過(guò)硅膠柱色譜純化，得到產(chǎn)物46，其為白色固體。產(chǎn)率320mg。Mp119-131℃.MS(M+H)+461。
將上述產(chǎn)物在MeOH中的溶液加入到鹽酸溶液(1.0M/Et2O，1當(dāng)量)。將得到的溶液在室溫下攪拌20分鐘，濃縮至得到泡沫狀物。將該泡沫狀物溶解于Et2O/MeOH的混合液中，并攪拌2小時(shí)，過(guò)濾得到化合物46的鹽酸鹽，其為白色固體。產(chǎn)率305mg。Mp202-206℃.MS(M+H)+461。實(shí)施例47 步驟1烷基化向甲硅烷基保護(hù)的醇44A在NMP中的混懸液中加入氫化鈉(44mg，1.1mmole(60％油分散液)。將得到的溶液在室溫下攪拌25分鐘。向該反應(yīng)混合物中加入溴乙酸甲酯(0.095ml，1.0mmole)，在室溫下攪拌12小時(shí)。將該反應(yīng)混合物加入到水中，用乙酸乙酯萃取。合并有機(jī)層，用水洗滌5次，通過(guò)硫酸鎂干燥，濃縮，并通過(guò)應(yīng)用25∶75丙酮/己烷作為洗脫劑的硅膠柱色譜純化，得到產(chǎn)物，其為白色固體。產(chǎn)率480mg。Mp182-187℃.MS(M+H)+＝557。步驟2去保護(hù)向上述步驟1的得到的產(chǎn)物(480mg，0.86mmole)在四氫呋喃(15mL)中的溶液中加入四丁基銨氟化物(1.0M/THF，1.1當(dāng)量)。將得到的反應(yīng)混合物在室溫下攪拌12小時(shí)，加入到水中，用乙酸乙酯萃取。合并有機(jī)層，通過(guò)硫酸鎂干燥，濃縮得到產(chǎn)物47，其為泡沫狀物。產(chǎn)率225mg.Mp118-130℃.MS(M+H)+443。實(shí)施例48 向化合物47(210mg，0.475mmole)在MeOH(4.0mL)的混懸液中加入氫氧化鈉水溶液(0.477mL 1.0N NaOH)。在室溫下攪拌得到的混懸液5天，蒸發(fā)至干燥。將殘?jiān)肊t2O稀釋，攪拌2小時(shí)，過(guò)濾并干燥，得到產(chǎn)物48，其為淡黃色固體。產(chǎn)率205mg.Mp260-265℃.MS(M+H)+429。實(shí)施例49 在室溫下，向4-甲氧基苯磺酰胺(0.417g，2.23mmol)在3mL N-甲基吡咯烷酮的溶液中加入60％氫化鈉(107mg，2.68mmol)。將該混合物攪拌10分鐘。然后加入砜1(189mg)，將得到的混合物在130℃下攪拌6小時(shí)。將該反應(yīng)混合物冷卻至室溫，加入水(50mL)。過(guò)濾得到的固體，連續(xù)用水、乙酸乙酯和甲醇洗滌，真空下干燥，得到產(chǎn)物49(190mg)，mp＞300℃；ms457(M+H)+。實(shí)施例50 6-(2-氯苯基)-2-(N-2-氰基乙基哌啶基-4-氨基)-吡啶并[2，3-d]-嘧啶-7-醇步驟1制備4-三氟乙酰氨基-1-芐基哌啶 在30-45分鐘內(nèi)，向25g(131mmol)4-氨基-1-芐基哌啶和15.36g(152mmol)三乙胺在130mL二氯甲烷中的冷(5℃)溶液中逐滴加入28g(18.8mL，133mmol)三氟乙酸酐，調(diào)整速率以將反應(yīng)溫度保持在5-10℃之間。加入完成后，將該反應(yīng)混合物再攪拌15分鐘。在減壓下除去溶劑和揮發(fā)物。將殘?jiān)芙庥?00mL乙酸乙酯中，然后用100mL己烷稀釋。通過(guò)硅膠墊(50g)過(guò)濾溶液，用1L50％乙酸乙酯/己烷洗滌。減壓下濃縮濾液，得到37g(定量產(chǎn)率)所需的4-三氟乙酰氨基-1-芐基哌啶，(淡黃色固體)。步驟2制備4-三氟乙酰氨基哌啶 在氮?dú)夥障?，?00mL、三頸圓底燒瓶中加入4g10％碳上鈀(Palladium on Carbon)和100mL甲醇。將該混懸液冷卻至5℃，一次性加入10g甲酸銨(觀察到有氣體冒出)。然后逐漸滴加10g(35mmol)4-三氟乙酰氨基-1-芐基哌啶在100mL甲醇中的溶液。將得到的反應(yīng)混合物回流2.5hr.，然后在室溫下過(guò)夜。在氮?dú)飧綦x下，通過(guò)硅藻土過(guò)濾掉催化劑，用乙醇洗滌。在減壓下濃縮濾液，得到6.9g(定量產(chǎn)率)淡黃色固體狀的題述化合物。步驟3制備N-(2-氰基乙基)-4-氨基哌啶 在室溫下，攪拌3g(15.3mmol)4-三氟乙酰氨基哌啶、3g(4.25mL，30.6mmol)三乙胺、3mL(45.9mmol)丙烯腈在10mL THF中的混合物17小時(shí)。在減壓下除去溶劑和揮發(fā)物。將殘?jiān)芙庥?0mL甲醇和4mL 30％NH4OH中，將該溶液回流5小時(shí)。在減壓下蒸發(fā)溶劑，殘?jiān)ㄟ^(guò)硅膠柱色譜純化，開(kāi)始用500mL二氯甲烷，然后用500mL 0.5％甲醇/二氯甲烷，隨后用1000mL 9∶1∶0.1二氯甲烷/甲醇/氫氧化銨洗脫，得到0.7g(30％產(chǎn)率)N-(2-氰基乙基)4-氨基哌啶。步驟4制備6-(2-氯苯基)-2-(N-2-氰基乙基哌啶基-4-氨基)-吡啶并[2，3-d]-嘧啶-7-醇. 將0.2g(0.58mmol)砜2，6-(2-氯苯基)-2-甲磺?；?吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-醇、0.18g(1.16mmol)N-(2-氰基乙基)-4-氨基哌啶在0.5mL NMP中的混合物在60℃油浴中加熱2.5hr.，冷卻，用5mL二氯甲烷稀釋。將該溶液通過(guò)40g硅膠的柱色譜純化，應(yīng)用200mL二氯甲烷洗脫出NMP，隨后用5％甲醇/二氯甲烷洗脫出產(chǎn)物。合并含有產(chǎn)物的級(jí)分，并濃縮。向產(chǎn)物中加入乙醚，研制后，過(guò)濾固體，用乙醚洗滌，干燥，得到165mg(70％產(chǎn)率)所需產(chǎn)物。將大約50mg該固體溶解于3mL二氯甲烷中。加入1mL 1M HCl/乙醚溶液，將混合物在室溫下攪拌1小時(shí)。在減壓下蒸發(fā)溶劑，得到54mg化合物50。(質(zhì)譜MH+＝408，mpt.217.5-219.5℃)。實(shí)施例51 將2g(5.8mmol)6-(2-氯苯基)-2-甲磺?；拎げ2，3-d]嘧啶-7-醇、1.97g(11.4mmol)4-氨基-1-哌啶羧酸乙酯在2mL NMP中的混合物在60℃油浴中加熱1.5hr.。該混懸液迅速變?yōu)橥该鞯淖厣芤?。將混合物?50mL水和150mL乙酸乙酯中分配。用150mL乙酸乙酯萃取水層一次或多次。用水，2×150mL，然后用鹽水洗滌合并的乙酸乙酯溶液，干燥，過(guò)濾，并在減壓下濃縮濾液。在乙醚中研制后，在減壓下除去溶劑，分離出2.5g(定量產(chǎn)率)化合物51。將大約0.13g該物質(zhì)溶解于1.5mL乙酸乙酯中，加入1mL 1M HCl(在乙醚中)。在室溫下攪拌該混懸液1小時(shí)，用乙醚稀釋，過(guò)濾，用乙醚洗滌得到0.12g化合物51的鹽酸鹽。(質(zhì)譜M+＝441.9，mpt.190-191℃)實(shí)施例52 將0.3g(0.8mmol)6-(2-氯苯基)-2-(哌啶基-4-氨基)-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-醇、0.3g(2.4mmol)2-溴乙醇、0.22mL(1.6mmol)三乙胺、1.5mL NMP和10mL甲苯的混合物在100℃油浴中加熱2.5hr。將混合物用75mL乙酸乙酯和100mL水稀釋。進(jìn)行相分離，水層再用乙酸乙酯(2×75mL)萃取。然后用鹽水洗滌合并的有機(jī)萃取液，過(guò)濾并在減壓下濃縮。將殘?jiān)芙庥谏倭考状贾校ㄟ^(guò)應(yīng)用8.5∶1.5∶0.2乙酸乙酯/甲醇/氫氧化銨作為洗脫液的40g硅膠柱色譜純化，得到0.115g白色固體(35％產(chǎn)率)。將其溶解于2mL EtOAc中，加入2mL 1M HCl (在乙醚中)。將該混懸液在室溫下攪拌30分鐘。過(guò)濾并干燥，得到0.13g化合物52。(質(zhì)譜MH+＝414，mpt.265.9-266.6℃)。實(shí)施例53 將0.2g(0.54mmol)6-(2-氯苯基)-2-(哌啶基-4-氨基)-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-醇、0.11g(1.6mmol)甲基乙烯基砜、0.5mL三乙胺在5mL THF中的混合物在室溫下攪拌17小時(shí)。在減壓下蒸發(fā)三乙胺和THF。殘?jiān)?5mL水和100mL乙酸乙酯中分配。相分離后，水層再次用75mL乙酸乙酯萃取。用水、鹽水洗滌合并的有機(jī)溶液，干燥并過(guò)濾。在減壓下濃縮濾液。粗產(chǎn)物通過(guò)應(yīng)用90∶10∶5二氯甲烷/乙酸乙酯/氫氧化銨作為洗脫液的40g硅膠柱色譜純化。將回收的產(chǎn)物溶解于1.5mL乙酸乙酯中，加入2mL 1M HCl(在乙醚中)。將該混懸液攪拌1小時(shí)，過(guò)濾，并用乙醚洗滌，得到165mg化合物53的鹽酸鹽(鹽酸鹽)。(質(zhì)譜MH+＝476，mpt.204.6-205.6℃)。實(shí)施例54 制備4-氨基-1-(2，2，2，-三氟乙基)哌啶，54A
將4-N-BOC-氨基哌啶(商業(yè)購(gòu)買)(5g，24.96mmol)、三氯甲烷磺酸2，2，2-三氟乙基酯(7.03g，1eq)和碳酸鉀(4.1g，1.2eq)在丙酮(80mL)中的溶液加熱回流17小時(shí)。在40℃、減壓下除去溶劑，向殘?jiān)屑尤胍宜嵋阴?250mL)和水(150mL)。分離有機(jī)層，連續(xù)用水(1×150mL)和鹽水(1×200mL)洗滌，通過(guò)硫酸鎂干燥，過(guò)濾，濃縮得到暗色固體。通過(guò)應(yīng)用15％乙酸乙酯/己烷作為洗脫劑的硅膠色譜純化，得到4-NBOC-氨基-1-(2，2，2-三氟乙基)-哌啶(4.45g)，其為灰白色粉末，M.P99.2-99.8℃，(M+H)+＝283。然后將該胺置于二噁烷(80mL)中，向溶液中鼓入HCl氣體10分鐘(馬上形成沉淀)。將反應(yīng)容器的蓋擰緊，攪拌1.5小時(shí)，濃縮得到白色粉末。將該鹽酸鹽溶解于42mL 0.5M甲醇鈉/甲醇溶液中，在室溫下攪拌3小時(shí)。通過(guò)中等玻璃料過(guò)濾溶液，并濃縮濾液。將殘?jiān)芙庥谝宜嵋阴?100mL)中，碾碎固體，過(guò)濾混合物。濃縮濾液得到4-氨基-1-(2，2，2-三氟乙基)-哌啶，54A，其為暗色油(1.0g)，(M+H)+＝183。
將砜2(200mg，0.614mmol)、化合物54A(224mg，2eq)和N-甲基吡咯烷酮(0.3mL)在10mL燒瓶中混合，在110℃下攪拌10分鐘。冷卻反應(yīng)，然后加入甲醇(10mL)，碾碎固體，過(guò)濾并收集得到灰白色粉末。在高真空、56℃下干燥游離的胺2小時(shí)，m.p.＝267.4-267.6℃，(M+H)+＝438。在室溫下將該游離的胺置于二噁烷(20mL)中，攪拌下加入1M HCl在二乙醚中的溶液(0.5mL，1.3eq)。在室溫下攪拌得到的混合物1小時(shí)，過(guò)濾，并在高真空、56℃下干燥8小時(shí)，得到化合物54，其為灰白色粉末.M.p.＝260.0-265.0℃，(M+H)+＝438(游離胺)。實(shí)施例55 制備55B 向砜2(1.485g，4.56mmol)在二甲基甲酰胺(25mL)的0℃溶液中，加入60％氫化鈉溶液(200mg，1.1eq)。在0℃下將得到的混合物劇烈攪拌15分鐘，其后加入2，2，2-三氟乙基三氯甲烷磺酸酯55A(4.2g，3.3eq)(在二甲基甲酰胺(15mL)中)。將得到的混合物在0℃至室溫下攪拌4天。將反應(yīng)混合物用乙酸乙酯(300mL)和水(100mL)稀釋。分離有機(jī)層，用水(100mL)和鹽水(2×100mL)洗滌，通過(guò)硫酸鎂干燥，過(guò)濾并濃縮。將殘?jiān)靡颐?己烷洗滌幾次，每次潷析上清液。在高真空下濃縮并干燥殘?jiān)?，得到化合?5B，其為定量產(chǎn)率的半固體。制備55 將化合物55B(0.9g，2.15mmol)、化合物55C(743mg，3eq)和N-甲基吡咯烷酮加入到10mL燒瓶中，在110℃下攪拌25分鐘。冷卻反應(yīng)混合物，用10mL甲醇稀釋，并濃縮。將殘?jiān)芙庥谝宜嵋阴?35mL)中，用水(7×25mL)和鹽水(1×25mL)洗滌。通過(guò)硫酸鎂干燥有機(jī)層，過(guò)濾并濃縮。通過(guò)應(yīng)用5％甲醇/二氯甲烷作為洗脫劑的制備薄層色譜3(20×40cm，1000μM)plate純化，得到55，其為灰白色粉末，m.p.＝227.2-230.4，(M+H)+＝453。實(shí)施例56 將化合物3(0.13g，0.34mmol)溶解于無(wú)水四氫呋喃中，在冰浴中攪拌。逐滴加入甲基氯化鎂(3M，在THF中溶液，0.25mL，0.75mmol)。將反應(yīng)在室溫下攪拌1小時(shí)。將反應(yīng)在冰浴中冷卻，加入氯化銨的飽和溶液(2mL)，隨后加入水。將反應(yīng)混合物用乙酸乙酯萃取兩次，通過(guò)硫酸鈉干燥合并的乙酸乙酯層。濃縮后，純化反應(yīng)混合物，通過(guò)應(yīng)用5％甲醇/二氯甲烷的硅膠色譜分離異構(gòu)體。極性更小的產(chǎn)物級(jí)分被指定為反式-異構(gòu)體(即化合物56A)，通過(guò)反相HPLC檢測(cè)發(fā)現(xiàn)該級(jí)分是純的。極性更大的產(chǎn)物級(jí)分被指定為順式-異構(gòu)體(即化合物56B)，通過(guò)反相HPLC檢測(cè)發(fā)現(xiàn)該級(jí)分是順式反式98∶2。將每個(gè)產(chǎn)物級(jí)分分別溶解于二氯甲烷中，用1當(dāng)量1M HCl/乙醚處理，蒸發(fā)至泡沫狀殘?jiān)?。得?3mg反式異構(gòu)體化合物56A的鹽酸鹽(質(zhì)譜MH+＝399，熔點(diǎn)＝155-168℃)，和26mg順式異構(gòu)體，化合物56B的鹽酸鹽(質(zhì)譜MH+＝399，熔點(diǎn)＝156-169℃)。實(shí)施例57 該實(shí)施例舉例說(shuō)明了從4-氯-2-甲硫基嘧啶制備6-(2-氯苯基)-8-環(huán)丙基-2-(4-反式-羥基-環(huán)己基氨基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮。步驟1制備4-氟-2-甲硫基嘧啶
通過(guò)Ple等，J.Het.Chem.，31，1311(1994)的方法制備該化合物。應(yīng)用該方法，從11.5g4-氯-2-甲硫基嘧啶(71.7mmol)制備7.6g產(chǎn)物4-氟-2-甲硫基嘧啶。步驟2制備4-環(huán)丙基氨基-5-甲?；?2-甲硫基嘧啶 在-30℃下，將丁基鋰(10.2mL，2.5M，在己烷中的溶液)加入到55mLTHF(從鈉/二苯甲酮蒸餾)中。從冰浴中取出該丁基鋰溶液，逐滴加入二異丙基胺(4mL，28.9mmol)。將該反應(yīng)攪拌30分鐘，然后在干冰/乙醚浴中冷卻至大約-80℃。逐滴加入4-氟-2-甲硫基嘧啶(1.6g，11.1mmol)在4mLTHF中的溶液，將得到的混合物攪拌2小時(shí)。然后逐滴加入甲酸乙酯(2.1mL，22.2mmol，用K2CO3處理，并從P2O5蒸餾)，并將得到的反應(yīng)混合物再攪拌1小時(shí)。加入0.1eq甲酸乙酯，將反應(yīng)混合物再攪拌1小時(shí)。加入環(huán)丙胺(1.5mL，22.2mmol，Aldrich Chemical)和水，將反應(yīng)攪拌90分鐘。加入大約50mL 1M HCl/乙醚，將反應(yīng)混合物攪拌至室溫。加入更多的水，通過(guò)蒸發(fā)除去THF。用二氯甲烷萃取該殘留物兩次。通過(guò)硫酸鈉干燥合并的二氯甲烷層，并蒸發(fā)至漿狀。將殘?jiān)ㄟ^(guò)應(yīng)用7％甲醇/二氯甲烷作為洗脫劑的硅膠色譜純化。
合并含有亞胺的級(jí)分，濃縮，用10當(dāng)量3M鹽酸水溶液(在THF中)處理3小時(shí)，用碳酸氫鈉溶液中和，濃縮，用二氯甲烷萃取。用水和碳酸氫溶液洗滌該二氯甲烷溶液，通過(guò)硫酸鈉干燥并濃縮。將得到的物質(zhì)與先前得到的純物質(zhì)合并，得到1.8g4-環(huán)丙基氨基-5-甲酰基-2-甲硫基嘧啶。步驟3
將4-環(huán)丙基氨基-5-甲?；?2-甲硫基嘧啶(1.8g，8.6mmol)溶解于17mL 1-甲基-2-吡咯烷酮中，加入2-氯苯基乙酸乙酯(2.1g，10.75mmol)和碳酸鉀，將該混合物在95℃下攪拌過(guò)夜。加入總共多于0.8g的酯，再次將反應(yīng)攪拌過(guò)夜。將反應(yīng)在120mL乙酸乙酯和100mL水中分配。分離后，用乙酸乙酯萃取水層一次以上。用鹽水洗滌合并的乙酸乙酯層，通過(guò)硫酸鈉干燥，濃縮，并通過(guò)應(yīng)用20-25％乙酸乙酯/己烷作為洗脫劑的硅膠60色譜純化，得到1.78g產(chǎn)物。步驟4 將步驟3的產(chǎn)物(1.66g，4.82mmol)溶解于20mL THF中，在冰浴中冷卻。逐滴加入過(guò)硫酸氫鉀制劑(5.9g，9.64mmol)在水中的溶液。除去冰浴，將反應(yīng)攪拌過(guò)夜。過(guò)濾反應(yīng)，加入大約40mL水，將該混合物攪拌30分鐘。過(guò)濾固體，再混懸于水中，再攪拌60分鐘。過(guò)濾混合物，用水和20％乙醚/己烷漂洗，干燥得到1.08g產(chǎn)物。步驟5 合并步驟4的產(chǎn)物(0.35g，0.93mmol)、反式-4-氨基環(huán)己醇(0.322g，2.79mmol，TCI America)和0.5mL 1-甲基-2-吡咯烷酮，加熱至90℃。1小時(shí)后，將反應(yīng)冷卻至室溫，加入乙酸乙酯和水。進(jìn)行相分離，再次用乙酸乙酯萃取水層。用鹽水洗滌合并的有機(jī)層，通過(guò)硫酸鈉干燥，濃縮，應(yīng)用5％甲醇/二氯甲烷作為洗脫劑通過(guò)硅膠60純化。蒸發(fā)產(chǎn)物級(jí)分后，將殘?jiān)偃芙庥诩状?二氯甲烷中，用1當(dāng)量1M HCl/乙醚處理。蒸發(fā)該溶液，將殘?jiān)?0％乙醚/己烷中研制，干燥得到366mg產(chǎn)物(化合物57的鹽酸鹽).質(zhì)譜MH+＝411，熔點(diǎn)＝241.7-242.3℃。實(shí)施例58 將化合物30B(0.300g，0.811mmole)、乙酰氯(0.061mL，0.852mmole)和碳酸鈉(0.090g，0.852mmole)置于5mL二氯甲烷中，在室溫下攪拌過(guò)夜。18小時(shí)后，通過(guò)快速色譜純化反應(yīng)(3-5％(1∶9氫氧化銨/甲醇)/二氯甲烷)，合并含有產(chǎn)物58的柱級(jí)分，并在真空下濃縮。將終產(chǎn)物置于甲醇中，用鹽酸(1.0M/Et2O，1.0當(dāng)量)處理，再蒸發(fā)至干燥，然后用乙醚洗滌，過(guò)濾，干燥得到0.288g化合物58的鹽酸鹽(mp215.3-218.6℃，M+.427)。實(shí)施例59 將化合物30B(0.300g，0.811mmole)、甲磺酰酰氯(0.066mL，0.852mmole)和碳酸鈉(0.090g，0.852mmole)置于5mL二氯甲烷中，在室溫下攪拌過(guò)夜。18小時(shí)后，通過(guò)快速色譜純化反應(yīng)(3-5％(1∶9氫氧化銨/甲醇)/二氯甲烷)，合并含有產(chǎn)物59的柱級(jí)分，并在真空下濃縮。將終產(chǎn)物置于甲醇中，用鹽酸(1.0M/Et2O，1.0當(dāng)量)處理，再蒸發(fā)至干燥，然后用乙醚洗滌，過(guò)濾，干燥得到0.326g化合物59的鹽酸鹽(mp185.0-194.0℃，M+.427)。實(shí)施例60 將化合物35A(0.086g，0.242mmole)、碳酸鈉(0.026g，0.242mmole)和溴乙腈(0.016mL，0.242mmole)置于2mL DMF中。在室溫下30分鐘后，消耗最初的起始原料。加入氫化鈉(60％在油中，0.011g，0.266mmole)，再攪拌30分鐘，然后再加入另外的1eq溴乙腈(0.016mL，0.242mmole)，在室溫下攪拌過(guò)夜。將反應(yīng)通過(guò)快速色譜純化(1-5％(1∶9氫氧化銨/甲醇)/二氯甲烷)，合并含有產(chǎn)物60的柱級(jí)分，并在真空下濃縮。將終產(chǎn)物置于甲醇中，用鹽酸(1.0M/Et2O，1.0當(dāng)量)處理，再蒸發(fā)至干燥，然后用乙醚洗滌，過(guò)濾，干燥得到0.054g化合物60的鹽酸鹽(mp143.0-158.5℃)。實(shí)施例61 將化合物30B(0.709g，1.92mmole)、氯甲酸甲酯(0.16mL，2.01mmole)和碳酸鈉(0.213g，2.01mmole)置于5mL二氯甲烷中，在室溫下攪拌過(guò)夜。18小時(shí)后，通過(guò)快速色譜純化反應(yīng)(2-10％(1∶9氫氧化銨/甲醇)/二氯甲烷)，合并含有產(chǎn)物61的柱級(jí)分，并在真空下濃縮。將終產(chǎn)物置于甲醇中，用鹽酸(1.0M/Et2O，1.0當(dāng)量)處理，再蒸發(fā)至干燥，然后用乙醚洗滌，過(guò)濾，干燥得到0.063g化合物61的鹽酸鹽(mp133.5-136.5℃)。實(shí)施例62 將化合物30B(1.0g，2.81mmole)、碳酸鈉(0.447g，4.22mmole)和2-氯-N-甲基乙酰胺(0.453g，4.22mmole)置于5mL DMF中，在室溫下攪拌過(guò)夜。20小時(shí)后，通過(guò)快速色譜純化反應(yīng)(3-5％(1∶9氫氧化銨/甲醇)/二氯甲烷)，合并含有產(chǎn)物62的柱級(jí)分，并在真空下濃縮。將終產(chǎn)物置于甲醇中，用鹽酸(1.0M/Et2O，1.0當(dāng)量)處理，再蒸發(fā)至干燥，然后用乙醚洗滌，過(guò)濾，干燥得到0.708g化合物62的鹽酸鹽(mp64.0-102.6℃)。實(shí)施例63該實(shí)施例舉例說(shuō)明了合成化合物30B的備選的方法。 將該甲基硫化物(15g，49.4mmole)置于70mL NMP中，在室溫下攪拌；向該溶液中加入N-氯琥珀酰亞胺(7.6g，56.8mmole)在6mL NMP中的溶液，并加入水(0.87mL，48.1mmole)。將開(kāi)始的稀漿迅速溶解成澄清黃色溶液。在室溫下20分鐘后，然后用4-氨基-1-哌啶羧酸乙酯(12.7mL，74.1mmole)處理亞砜30C。反應(yīng)迅速變暗，升溫至接觸溫度，在室溫下攪拌4天。結(jié)束時(shí)，將該不透明黃色混懸液轉(zhuǎn)移至裝有250mL水的大錐形瓶中，在冰浴中攪拌4小時(shí)。然后過(guò)濾該混懸液，收集黃色濾餅，將其用水和己烷漂洗，真空下干燥。顯示該氨基甲酸乙酯中間體重量過(guò)多，盡管延長(zhǎng)干燥，仍沒(méi)有減少至低于31.6g。
將氫氧化鉀(111g，1.98mol)置于400mL乙醇中，加熱直到溶解，然后慢慢冷卻，之后加入上述氨基甲酸酯中間體(理論上49.4mmole)。將該溶液回流下攪拌3小時(shí)，然后冷卻至室溫，之后將其置于冰浴中，用檸檬酸水溶液(111g，577mmole，溶解于400mL水中)中和。將該溶液攪拌30分鐘，然后在真空下蒸發(fā)至漿狀水溶液。將該漿狀物用二氯甲烷(x3)萃??；飽和鹽水洗滌合并的萃取液，碳酸鈉干燥，真空下蒸發(fā)，得到12g黃色泡沫狀物(32.4mmole)。
將該泡沫狀物的一部分(500mg)通過(guò)快速色譜(5-20％甲醇/二氯甲烷+1％氫氧化銨)純化，合并含有產(chǎn)物的柱級(jí)分，并在真空下濃縮。將純化的產(chǎn)物置于甲醇中，用2當(dāng)量1N HCl/Et2O處理，真空下蒸發(fā)；用乙醚洗滌得到的固體，收集得到520mg化合物30B的二鹽酸鹽(mp＞300℃，(M+H)+370)。 將該甲基硫化物(15g，49.4mmole)置于70mL NMP中，在室溫下攪拌；向該溶液中加入N-氯琥珀酰亞胺(7.6g，56.8mmole)在6mL NMP和水(0.87mL，48.1mmole)中的溶液。將初始的稀漿迅速溶解至澄清黃色溶液。在室溫下20分鐘后，向該溶液中加入4-氨基-1-哌啶羧酸乙酯(12.7mL，74.1mmole)，在室溫下攪拌4天。將該不透明黃色混懸液轉(zhuǎn)移至裝有250mL水的大錐形瓶中，在冰浴中攪拌4小時(shí)。然后過(guò)濾該混懸液，收集黃色濾餅，將其用水和己烷漂洗，真空下干燥。顯示該氨基甲酸乙酯中間體重量過(guò)多，盡管延長(zhǎng)干燥，仍沒(méi)有減少至低于31.6g。
將氫氧化鉀(111g，1.98mol)置于400mL乙醇中，加熱直到溶解，然后慢慢冷卻，之后加入上述氨基甲酸酯中間體(理論上49.4mmole)。將該溶液回流下攪拌3小時(shí)，然后冷卻至室溫，之后將其置于冰浴中，用檸檬酸水溶液(111g，577mmole，溶解于400mL水中)中和。將該溶液攪拌30分鐘，然后在真空下蒸發(fā)至漿狀水溶液。將該漿狀物用二氯甲烷(x3)萃??；飽和鹽水洗滌合并的萃取液，碳酸鈉干燥，真空下蒸發(fā)，得到12g黃色泡沫狀物(32.4mmole)。
將該泡沫狀物的一部分(500mg)通過(guò)快速色譜(5-20％甲醇/二氯甲烷+1％氫氧化銨)純化，合并含有產(chǎn)物的柱級(jí)分，并在真空下濃縮。將純化的產(chǎn)物置于甲醇中，用2當(dāng)量1N HCl/Et2O處理，真空下蒸發(fā)；用乙醚洗滌得到的固體，收集得到520mg化合物30B的二鹽酸鹽(mp＞300℃，(M+H)+370)。實(shí)施例64 向0.25g(0.68mmol)化合物30B和0.11g(0.74mmol)二甲基氨磺酰氯在20mL二氯甲烷的溶液中加入0.11mL(0.81mmol)三乙胺。將該混合物加熱回流6hr，在減壓下除去溶劑，將殘?jiān)ㄟ^(guò)應(yīng)用5％甲醇/乙酸乙酯作為洗脫劑的40g硅膠柱色譜純化，得到200mg白色粉末。將其溶解于2mL乙酸乙酯中，加入0.75mL 1M HCl/乙醚。將其攪拌1小時(shí)，減壓下蒸發(fā)得到化合物64的鹽酸鹽(200mg).質(zhì)譜MH+＝477，mp207.2-208℃)。實(shí)施例65 在30分鐘內(nèi)，將0.914g(2.7mmol)6-(氯苯基)2-甲磺?；?吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-醇、1.041g(5.4mmol)N-(2-羥基乙基)-苯鄰二甲酰亞胺，1.43g(5.4mmol)三苯膦在15mL 1，4-二噁烷中的冷(5℃)混懸液逐滴加入到0.95g(0.86mL，5.4mmol)二乙基偶氮基二羧酸酯在5mL 1，4-二噁烷中的溶液中。加入完成后，除去冰-水冷卻浴。該混懸液迅速變?yōu)槌吻宓厣芤?。在室溫下使其攪拌過(guò)夜。在減壓下濃縮該反應(yīng)混合物，通過(guò)應(yīng)用90∶10∶0.5乙酸乙酯/二氯甲烷/氫氧化銨作為洗脫劑的120g硅膠柱色譜純化，得到0.38g N-乙基苯鄰二甲酰亞胺中間體。將0.18g(0.35mmol)該中間體和0.05g(0.42mmol)反式-4-氨基環(huán)己醇在1mL NMP中的混合物在120℃下加熱30分鐘。冷卻反應(yīng)混合物，用75mL水稀釋，乙酸乙酯(3×75mL)萃取。用水(3×75mL)、鹽水洗滌合并的乙酸乙酯溶液，干燥，過(guò)濾并濃縮。該物質(zhì)通過(guò)應(yīng)用5％甲醇/二氯甲烷作為洗脫劑的40g硅膠柱色譜純化，得到45mg化合物65。(質(zhì)譜MH+＝544，mp208-210℃)。實(shí)施例66 在室溫、氮?dú)夥障?，?.179g(0.4mmol)6-(2-氯苯基)-2-(N-乙酯基哌啶基-4-氨基)吡啶并[2，3-d]-嘧啶-7-醇在1mL DMF的混懸液中，一次性全部加入0.012g(0.46mmol)氫化鈉(95％)。5分鐘后，觀察有氣體冒出。該混懸液變?yōu)槌吻妩S色溶液。將其在室溫下攪拌30分鐘，然后通過(guò)注射器加入0.068g(0.05mL，0.4mmol)芐基溴。將該反應(yīng)混合物攪拌過(guò)夜，用濃的氯化銨水溶液淬滅，乙酸乙酯(3×60mL)萃取。用水(3×60mL)、鹽水洗滌合并的乙酸乙酯溶液，干燥，過(guò)濾并濃縮。該物質(zhì)通過(guò)應(yīng)用20％乙酸乙酯/二氯甲烷作為洗脫劑的40g硅膠柱色譜純化，得到75.6mg化合物66。將其溶解于2mL乙酸乙酯中，加入1mL 1M HCl/乙醚。將該混懸液攪拌1小時(shí)，濃縮得到74mg化合物66的鹽酸鹽。(質(zhì)譜MH+＝518，mp.162-173℃)。實(shí)施例67 將0.350g(1.0mmol)砜和0.303g(3.0mmol)4-氨基-四氫吡喃在0.7mL NMP中的混合物在100℃下加熱。1小時(shí)后，冷卻該反應(yīng)，倒入水中，用乙酸乙酯萃取。將有機(jī)級(jí)分用水洗滌5次，鹽水洗滌1次，通過(guò)硫酸鎂干燥，并在減壓下濃縮。將殘?jiān)ㄟ^(guò)柱色譜純化(5％甲醇/二氯甲烷)，得到化合物67，其為泡沫狀物。將殘?jiān)鞈矣贛eOH中，加入鹽酸(1.0M/Et2O，1當(dāng)量)。將得到的混合物攪拌20分鐘，并在減壓下濃縮。將殘?jiān)cMeOH/Et2O的混合物攪拌1小時(shí)，過(guò)濾出化合物67的鹽酸鹽，其為白色固體。產(chǎn)率330mg.Mp217.2-218.9℃.MS(M+H)+371。實(shí)施例68 將砜(350mg，1.04mmol)與4-氨基四氫吡喃(303mg，3.0mmol)和0.7mLNMP合并，在100℃下加熱30分鐘。冷卻至室溫，加入水，過(guò)濾得到化合物68，其為棕色固體。將該溶液溶解于MeOH中，用鹽酸(1.0M/Et2O)調(diào)成酸性，并蒸發(fā)。將該殘?jiān)ㄟ^(guò)應(yīng)用10∶90 MeOH/CH2Cl2作為洗脫劑的硅膠純化。合并含有化合物68鹽酸鹽的級(jí)分，在減壓下蒸發(fā)，得到化合物68的鹽酸鹽，其為白色泡沫狀物。將殘?jiān)鞈矣贛eOH中，加入鹽酸(1.0M/Et2O，1當(dāng)量)，攪拌20分鐘，并在減壓下濃縮。將殘?jiān)cMeOH/Et2O的混合物攪拌1小時(shí)，過(guò)濾出產(chǎn)物，其為白色固體。產(chǎn)率228mg.Mp＞300℃.MS(M+H)+357。實(shí)施例69該實(shí)施例舉例說(shuō)明了從SEM-保護(hù)的吡啶酮合成2-(反式-4-甲氧基酰胺基-環(huán)己基氨基)-6-(2-氯苯基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮步驟1 向胺(218mg，0.436mmol)在10mL無(wú)水四氫呋喃的0℃溶液中，加入焦碳酸二甲基酯(0.080mL，0.746mmol)、二甲基氨基吡啶(2mg，0.016mmol)。將反應(yīng)混合物在0℃下攪拌15分鐘，然后緩慢升溫至室溫過(guò)夜。在真空下濃縮粗制的反應(yīng)混合物，通過(guò)柱色譜純化(5∶95，甲醇/二氯甲烷)，得到230mg(95％)產(chǎn)物，其為白色固體(質(zhì)譜M+H+＝558，mp＝110.0-112.0℃)。步驟2 將步驟1得到的SEM-保護(hù)的吡啶酮(320mg，0.553mmol)混懸于10mL甲醇中，用10mL 10％鹽酸處理。將反應(yīng)混合物回流24小時(shí)，冷卻，然后在真空下濃縮，直到開(kāi)始形成沉淀。過(guò)濾得到的混懸液，用水和乙酸乙酯洗滌，然后干燥得到95mg(53％)2-(反式-4-甲氧基酰胺基-環(huán)己基氨基)-6-(2-氯苯基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮69，其為白色固體(質(zhì)譜M+H+＝428，mp＝294.6-296.8℃)。實(shí)施例70 將胺(0.49mg，1.3mmol)混懸于6mL乙酸酐中，在環(huán)境溫度下攪拌16小時(shí)。用乙酸乙酯稀釋反應(yīng)混合物，并過(guò)濾。用水和乙酸乙酯洗滌收集的固體，然后干燥得到2-(反式-4-甲基酰胺基環(huán)己基氨基)-6-(2-氯苯基)-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮，其為白色固體。將該游離的堿混懸于乙酸乙酯中，用1M HCl/乙醚溶液處理，形成0.51g(87％)化合物70的鹽酸鹽，其為白色粉術(shù)(質(zhì)譜M+H+＝412，mp＞300℃)。實(shí)施例71該實(shí)施例舉例說(shuō)明了從SEM-保護(hù)的吡啶酮起始合成2-(反式-4-酰氨基酰胺基環(huán)己基氨基)-6-(2-氯苯基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮。步驟1 向胺(0.20g，0.39mmol)在15 mL二氯甲烷中的溶液中加入三甲基甲硅烷基異氰酸鹽(0.12mL，0.73mmol)，在室溫下攪拌5小時(shí)。用5mL甲醇淬滅反應(yīng)混合液，在真空下濃縮，通過(guò)柱色譜純化(5∶95，甲醇/二氯甲烷)，得到0.14g(66％)產(chǎn)物，其為白色固體(質(zhì)譜M+H+＝543，mp＝182.2-188.9℃)。步驟2 將步驟1得到的SEM-保護(hù)的化合物(130mg，0.245mmol)混懸于5mL甲醇，用5mL 10％鹽酸處理。將反應(yīng)混合液回流18小時(shí)。過(guò)濾得到的混懇液，用水、乙酸乙酯洗滌收集到的固體，干燥得到68mg(62％)2-(反式-4-酰氨基酰胺基環(huán)己基氨基)-6-(2-氯苯基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮(71)的鹽酸鹽，其為白色固體(質(zhì)譜M+H+＝413，mp＞300℃)。實(shí)施例72該實(shí)施例舉例說(shuō)明了從6-(2-氯苯基)-2-甲磺酰基-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-醇起始，合成2-(順式-4-甲磺?；０被h(huán)己基氨基)-6-(2-氯苯基)-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮。步驟1 向砜(1.93g，5.75mmol)在15mL無(wú)水1-甲基-2-吡咯烷酮中的0℃溶液中加入氫化鈉(0.160g，6.33mmol，95％干燥粉末)。將反應(yīng)混合液攪拌10分鐘，直到?jīng)]有氣體蒸發(fā)為止，然后在5分鐘內(nèi)滴加2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基甲基氯化物(1.10mL，6.22mmol)。將反應(yīng)混合液攪拌30分鐘，然后加入含有順式-1，4-二氨基環(huán)己烷(6.27g，54.9mmol，TCI America，Portland，OR，順式和反式異構(gòu)體的混合物)經(jīng)0℃冷卻的搖瓶。將反應(yīng)混合液在室溫下攪拌3小時(shí)。加入100mL水和100mL乙酸乙酯，相分離，再用100mL乙酸乙酯萃取水層。用4×200mL鹽水洗滌合并的有機(jī)層，通過(guò)硫酸鈉干燥，真空濃縮，得到粗黃色液體。通過(guò)柱色譜純化(30-40∶70-60，甲醇/二氯甲烷和氫氧化銨)，得到1.62g(56％)亮黃色泡沫狀產(chǎn)物(質(zhì)譜M+H+＝500，mp＝79.0-81.5℃。步驟2 向步驟1中得到的胺(0.26g，0.53mmol)在12mL二氯甲烷中的溶液中加入三乙胺(0.11mL，0.79mmol)和甲磺酸酐(0.18g，1.0mmol)。將反應(yīng)混合液攪拌3小時(shí)，然后在真空下濃縮。通過(guò)柱色譜純化(3∶97，甲醇/二氯甲烷)，得到0.30g(98％)白色泡沫狀產(chǎn)物(質(zhì)譜M+H+＝578，mp＝117.0-144.0℃)。通過(guò)1H NMR色譜測(cè)定，分離的產(chǎn)物為順式和反式立體異構(gòu)體按照82∶18的比率混合形成的混合物。步驟3 將步驟2得到的SEM-保護(hù)的吡啶酮(0.29g，0.50mmol)混懸于10mL甲醇，用10mL 10％鹽酸處理。將反應(yīng)混合液回流5小時(shí)，冷卻，然后在真空下濃縮，直到開(kāi)始形成沉淀。過(guò)濾得到的混懸液，用水和乙酸乙酯洗滌，然后干燥得到0.17g(70％)2-(順式-4-甲磺酰基氨基-環(huán)己基氨基)-6-(2-氯苯基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮(72)的鹽酸鹽，其為白色固體(mp＞300℃)。通過(guò)1H NMR色譜測(cè)定，分離的產(chǎn)物為順式和反式立體異構(gòu)體按照82∶18的比率混合形成的混合物。實(shí)施例73 向砜(0.20g，0.57mmol)和三乙胺(0.24mL，1.7mmol)在25mL四氫呋喃的溶液中加入順式-4-氨基環(huán)己醇(Aust.J.Chem.，1961，14,610)。將反應(yīng)混合物在80℃下攪拌48小時(shí)，冷卻，然后加入1N HCl。用氯仿萃取，碳酸氫鈉溶液和鹽水洗滌，通過(guò)硫酸鎂干燥.過(guò)濾并濃縮，得到0.398g粗制固體，將其通過(guò)柱色譜純化(4％甲醇/二氯甲烷)，得到0.118g(54％)2-(順式-4-羥基環(huán)己基氨基)-6-(2-氯苯基)-8-甲基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮(73)，其為白色固體(質(zhì)譜M+H+＝385，mp＝209.5-216.5℃)。實(shí)施例74 制備74B 將化合物74A(800mg，1.91mmol)、1，4-二氧雜-螺[4，5]癸-8-基胺(制備參見(jiàn)WO 99/001452)和N-甲基吡咯烷酮(0.5mL)一起混合，在攪拌下加熱至110℃。35分鐘后，將反應(yīng)冷卻至室溫，用乙酸乙酯(25mL)/水(25mL)稀釋，分配，進(jìn)行相分離，合并有機(jī)層，用水(2×25mL)和鹽水(1×25mL)洗滌，通過(guò)硫酸鎂干燥，過(guò)濾并濃縮，得到化合物74B，其為灰白色粉末(990mg，(M+H)+＝495，M.P.＝200.0-206.5℃)。制備化合物74 將化合物74B(990mg)置于10mL 80％乙酸(aq)中，在攪拌下加熱至65℃4小時(shí)。用乙酸乙酯(1×70mL)萃取反應(yīng)混合物。用飽和碳酸氫鈉(4×50mL)洗滌有機(jī)層，直到pH＝8，并用鹽水(1×50mL)洗滌，通過(guò)硫酸鎂干燥，過(guò)濾并濃縮，得到800mg粗產(chǎn)物。通過(guò)應(yīng)用70％乙酸乙酯/己烷作為洗脫劑的制備TLC純化，得到349mg化合物74，(M+H)+＝451，M.P.＝251.2-252℃)。實(shí)施例75 將化合物74A(2g，4.79mmol)、4-氨基-1-哌啶羧酸乙酯(Aldrich，2.5g，3eq)和N-甲基吡咯烷酮(1.5mL)一起混合，在110℃下攪拌3.5小時(shí)。將反應(yīng)冷卻至室溫，用乙酸乙酯(80mL)和水(20mL)稀釋。分離有機(jī)層，用水(2×25mL)和鹽水(1×25mL)洗滌，通過(guò)硫酸鎂干燥，過(guò)濾并濃縮。粗產(chǎn)物在硅膠上用25％到50％的乙酸乙酯在己烷中的溶液作為洗脫液進(jìn)行梯度洗脫純化，得到1.023g游離胺((M+H)+＝510，M.P.＝194.2-221.4℃)。將200mg游離胺溶解于乙酸乙酯(15mL)，然后加入1.0M HCl(在二乙醚中)(0.5mL，1.25eq)，并攪拌1小時(shí)。然后在50℃減壓下除去溶劑。向殘留物中加入20ml二乙醚，碾碎固體。將得到的懸漿攪拌30分鐘，過(guò)濾，在56℃高真空度下干燥灰白色粉末2小時(shí)，得到65mg化合物75((M+H)+＝510，M.P.＝107.0-110.0℃)。實(shí)施例76 將化合物74A(365mg，0.87mmol)，4-氨基四氫吡喃，76A，(265mg，3eq)和N-甲基吡咯烷酮(0.3mL)混合起來(lái)，在110℃加熱30分鐘。將反應(yīng)液冷卻到室溫，用乙酸乙酯(30mL)和水(25mL)稀釋。分離有機(jī)層，用水(2×25mL)和鹽水(1×25mL)洗滌，通過(guò)硫酸鎂干燥，過(guò)濾并濃縮，得到440mg粗產(chǎn)物。通過(guò)用70％乙酸乙酯(在己烷中)作洗脫液通過(guò)制備性TLC純化，得到游離胺(405mg)，其為灰白色粉末((M+H)+＝439，M.P.＝200.9-202.1℃)。將游離胺溶解于乙酸乙酯(25mL)，然后加入1.0M HCI(在二乙醚中)(1.4mL，1.5eq)，將得到的混合液攪拌1小時(shí)。然后在50℃減壓下除去溶劑，將得到的殘留物在56℃高真空度下干燥，得到339mg化合物76的鹽酸鹽((M+H)+＝439，M.P.＝198.2-201℃)。實(shí)施例77制備化合物77B
將化合物77A(TCI Chemicals，5g，26mmol)和氰酸鉀(10.1g，5eq)溶解于甲醇(60mL)和水(60mL)。將得到的混合液在攪拌下加熱到80℃保持4小時(shí)，然后在室溫下攪拌24小時(shí)。用乙酸乙酯(350mL)稀釋反應(yīng)混合液。分離有機(jī)層，用鹽水(5×150mL)和稀釋的HCl/鹽水(1×150mL)洗滌，濃縮到約50mL，直到開(kāi)始出現(xiàn)固體。過(guò)濾這些固體，干燥得到化合物77B(2g，(M+H)+＝230，M.P.＝170.4-173.5℃)。制備化合物77C 將化合物77B(2g)置于二噁烷(125mL)中，將HCl(g)鼓入該非均勻混合液15分鐘，然后嚴(yán)密封緊容器，并攪拌5小時(shí)。在50℃減壓下除去溶劑。將粗產(chǎn)物置于甲醇(250mL)中，加入2.5mL甲醇鈉(在甲醇中)(25wt％，1eq)。將得到的混合液攪拌1小時(shí)，然后濃縮到約75mL，通過(guò)中等玻璃料過(guò)濾。濃縮濾液，干燥得到化合物77C(1.76g，(M+H)+＝130)。制備化合物77 將化合物74A(500mg，1.2mmol)，化合物77C(660mg，3eq)4-氨基四氫吡喃，76A，(265mg，3eq)和N-甲基吡咯烷酮(0.8mL)一起混合，在110℃攪拌下加熱30分鐘。將反應(yīng)液冷卻到室溫，用乙酸乙酯(80mL)和水(40mL)稀釋。分離有機(jī)層，用水(2×40mL)和鹽水(1×40mL)洗滌，通過(guò)硫酸鎂干燥，過(guò)濾并濃縮，得到粗產(chǎn)物。用純乙酸乙酯作洗脫液通過(guò)制備性TLC純化，得到游離胺型的化合物77(120mg)。然后將游離胺溶解于乙酸乙酯(25mL)，然后加入1.0M HCI(在二乙醚中)(0.4mL，1.5eq)，將得到的混合液攪拌1小時(shí)。然后在50℃減壓下除去溶劑，將得到的殘留物在56℃高真空度下干燥，得到化合物77的鹽酸鹽，其為灰白色粉末(126mg，(M+H)+＝467，M.P.＝164.5-168.0℃)。實(shí)施例78 2-(4-四氫硫代吡喃基氨基)-6-(2-氯苯基)-8-甲基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮步驟1 將5g(43mmol)四氫硫吡喃-4-酮、29.26g(215mmol)醋酸鈉三水合物和14.94g(215mmol)羥基胺鹽酸鹽在200mL乙醇中的混合物回流6小時(shí)。將該混合物用400mL冰-水混合物稀釋，用乙酸乙酯(2×150mL)萃取。用鹽水洗滌萃取液，干燥，在減壓下過(guò)濾并濃縮，得到5.6g(定量產(chǎn)率)肟(白色固體)。在室溫下將2g(15mmol)上述肟(在30mL THF中)滴加到76mL(76mmol)1M LAH/THF溶液中。滴加完后，將混合物回流7小時(shí)，然后冷卻到5℃。小心地向反應(yīng)混合液中滴加2.9mL水，然后滴加入2.9mL 15％NaOH水溶液和8.7mL水。將混懸液攪拌30分鐘，通過(guò)硅藻土過(guò)濾，用300mL乙酸乙酯洗滌。減壓下除去濾液(＜50℃)，得到1.62g 4-氨基四氫硫代吡喃，(92.3％產(chǎn)率)。步驟2
將1g(2.9mmol)砜1和0.67g(5.7mmol)4-氨基四氫硫吡喃在1.5mLNMP中的混合液在85℃的油浴中加熱1.5小時(shí)，直到完成反應(yīng)。冷卻反應(yīng)混合液，用100mL水稀釋，用乙酸乙酯(2×75mL)萃取。用水(2×75mL)和鹽水再次洗滌合并的乙酸乙酯溶液，干燥，過(guò)濾，減壓濃縮。用5％甲醇(在二氯甲烷中)作洗脫液在硅膠(100g)上通過(guò)柱色譜純化，得到0.77g(77％產(chǎn)率)。將0.2g上述硫化物(在2mL二氯甲烷中)與0.62mL(1.2eq)1M HCI/乙醚一起攪拌30分鐘。蒸發(fā)掉溶劑，得到206mg所需的2-(4-四氫硫代吡喃基氨基)-6-(2-氯苯基)-8-甲基-8H-吡啶并[2，3-d嘧啶-7-酮的HCl鹽，(質(zhì)譜MH+＝387，mp232.1-233.1℃)。實(shí)施例792-(S-氧-4-四氫硫代吡喃基氨基)-6-(2-氯苯基)-8-甲基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮2-(S，S-二氧-4-四氫硫代吡喃基氨基)-6-(2-氯苯基)-8-甲基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮 向0.2g(0.5mmol)該硫化物在50mL二氯甲烷的冷卻溶液(5℃)中加入0.13g(0.57mmol)77％3-氯過(guò)苯甲酸。15分鐘后，反應(yīng)的一部分進(jìn)行TLC分析，顯示該硫化物完全轉(zhuǎn)化為亞砜(n＝1)和痕量的砜(n＝2)。加入另外量的0.04g 77％3-氯過(guò)苯甲酸，將反應(yīng)物再攪拌30分鐘，更多的亞砜轉(zhuǎn)化為砜。將混合物倒入10％亞硫酸氫鈉水溶液中，用二氯甲烷萃取。用10％碳酸氫鈉水溶液，然后用鹽水洗滌有機(jī)層，干燥，過(guò)濾并濃縮。在20×40cm制備性TLC SiO2板進(jìn)行亞砜和砜的純化和分離三次，其中使用5％甲醇(在二氯甲烷中)洗脫?；厥盏?8mg亞砜(外消旋物)，溶解于3mL二氯甲烷中。加入0.25mL 1M HCI/乙醚，將混懸液攪拌30分鐘。在減壓下蒸發(fā)溶劑，得到70mg所需的亞砜的鹽酸鹽(質(zhì)譜MH+＝403，m.p.205.6-207.3℃)。
從制備性TLC板還回收到0.15g砜(更高Rf)。將其溶解于3mL二氯甲烷中，加入0.54mL 1M HCl/乙醚。將該混懸液攪拌30分鐘，過(guò)濾，用乙醚洗滌，得到122mg所需的砜的鹽酸鹽(質(zhì)譜MH+＝419，m.p)。實(shí)施例80該實(shí)施例舉例說(shuō)明了制備6-(2-氯苯基)-8-甲基-2-甲硫基-8-氫吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮(VI)的備選的方法 制備3，3-二乙氧基-2-甲?；驸淃}(11)向3，3-二乙氧基丙腈(I，283.80g，1.98摩爾)和甲酸甲酯(148.80g，2.48摩爾)在無(wú)水THF(1.1L)的10℃、攪拌溶液中，加入1.0M叔-丁醇鉀(在THF中)(2.2L，2.2摩爾)。在整個(gè)45分鐘的加入期間，將溫度維持在10-15℃。加入后，在環(huán)境溫度下攪拌得到的稀漿2小時(shí)。然后加入己烷(400mL)，再繼續(xù)攪拌20分鐘。過(guò)濾稀漿，用1/1己烷/THF洗滌濾餅，在60℃、真空烘箱中干燥過(guò)夜?；液稚勰┑漠a(chǎn)率為302.5g(73.0％)。1H-NMR(CD3OD)顯示與所需結(jié)構(gòu)II一致。制備4-氨基-2-硫烷基嘧啶-5-甲醛(III)在回流下加熱硫脲(92.8g，1.22摩爾)在乙醇(90mL)中的稀漿，劇烈攪拌。在10分鐘內(nèi)，分5次向該稀漿中加入3，3-二乙氧基-2-甲?；驸淃}II(222.20g，1.06摩爾)在25％甲醇鈉/甲醇(85.5mL，0.37mole)和乙醇(285mL)中的混懸液，同時(shí)維持回流條件(或者為了加入，可以將該稀漿加熱至50℃以得到均一溶液)。加入另一部分乙醇(150mL)以利于攪拌。加入后，粘稠的稀漿變?yōu)榱咙S色，在回流下保持另外1小時(shí)。然后冷卻混合物，在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上蒸發(fā)至接近干燥。將殘?jiān)芙庥谒?940mL)中。通過(guò)加入30％乙酸(280mL)從溶液中沉淀粗產(chǎn)物，然后通過(guò)應(yīng)用燒結(jié)玻璃過(guò)濾漏斗進(jìn)行過(guò)濾分離。用水(800mL)洗滌濾餅。通過(guò)在熱水(1L)中研制30分鐘進(jìn)行純化，隨后冷卻并過(guò)濾，在真空爐中60℃下干燥過(guò)夜后，得到118.9g(72.3％)產(chǎn)物，其為亮黃色固體(后面的制備顯示該研制是非必須的)。HPLC得到純度為98.67％。1H-NMR(DMSO-d6)顯示與所需結(jié)構(gòu)III一致。制備4-氨基-2-甲硫基嘧啶-5-甲醛(IV)在20分鐘內(nèi)、溫和冷卻下，向4-氨基-2-硫烷基-嘧啶-5-甲醛III(100.00g，644.4毫摩爾)和過(guò)325目篩的碳酸鉀(178.10g，1.29摩爾)在丙酮(1.5L)中的溶液中，逐滴加入碘甲烷(128.10g，902.2毫摩爾)。將該混合物在環(huán)境溫度下攪拌過(guò)周末。TLC顯示仍殘留有III，加入另一部分碘甲烷(8mL)，連續(xù)攪拌過(guò)夜。TLC仍顯示仍殘留有一些III，加入另一部分碘甲烷(8mL)，再連續(xù)攪拌24小時(shí)。HPLC顯示為95.9％S-烷基化產(chǎn)物和3.7％化合物III。將反應(yīng)混合物通過(guò)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀氣提至接近干燥狀態(tài)。向殘?jiān)屑尤胨?1L)，通過(guò)過(guò)濾器收集產(chǎn)物，用水(200mL)洗滌。將產(chǎn)物在真空爐中60℃下干燥過(guò)夜。產(chǎn)率為103.37g(94.8％)，HPLC顯示為95.8％IV和4.2％III。制備6-(2-氯苯基)-2-甲硫基-8-氫吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮(V)將IV(10.00g，59.1毫摩爾)、2-(2-氯苯基)乙酸乙酯(14.40g，71.8毫摩爾)、NMP(115mL)和過(guò)325目篩的碳酸鉀(29.00g，209.8毫摩爾)在90℃下加熱過(guò)夜。冷卻反應(yīng)混合物，用水(800mL)稀釋。將得到的稀漿攪拌過(guò)夜，過(guò)濾分離產(chǎn)物(V)。用水洗滌濾餅，在真空爐中60℃下干燥過(guò)夜。分離產(chǎn)率為14.9g(83.0％)，其為暗棕色固體。HPLC分析顯示為98.3％純度。制備6-(2-氯苯基)-8-甲基-2-甲硫基-8-氫吡啶并[2，3d]嘧啶-7-酮(VI)將V(0.25g，0.82mmole)、NMP(5mL)、碳酸鉀(0.11g，0.82mmole)和碘甲烷(0.14g，0.96mmole)的混合物在氮?dú)夥?、環(huán)境溫度下攪拌過(guò)夜。加入水(15mL)，連續(xù)攪拌24小時(shí)。過(guò)濾稀漿，用水(10mL)洗滌濾餅。HPLC分析顯示為97.8％純度。實(shí)施例81 向吡啶酮68(1.6g，4.5mmol)在NMP(10mL)中加入氫化鈉(188mg，4.7mmol)，將混合液攪拌45分鐘，然后加入(2-碘乙氧基)三異丙基硅烷(1.62g，5mmol)。12小時(shí)后，將混合液倒入水中，用乙酸乙酯萃取，通過(guò)硫酸鈉干燥，真空濃縮，殘留物用95∶5二氯甲烷/甲醇作為洗脫液在硅膠上通過(guò)柱色譜純化。合并含有產(chǎn)物的柱級(jí)分，真空濃縮成固體，將其混懸于乙酸乙酯。加入鹽酸(1.0M/Et2O，1.2當(dāng)量)得到鹽，將其過(guò)濾，干燥，得到262mg所需產(chǎn)物。質(zhì)譜MH+＝401，mpt.217-220℃。實(shí)施例82 向吡啶酮68(500mg，1.4mmol)在NMP(5mL)中加入氫化鈉(56mg，1.4mmol)，將混合液攪拌45分鐘，然后加入碘乙腈(0.11mL，1.54mmol)。12小時(shí)后，將混合液倒入水中，用乙酸乙酯萃取，通過(guò)硫酸鈉干燥，真空濃縮，殘留物用97∶3二氯甲烷/甲醇作為洗脫液在硅膠上通過(guò)柱色譜純化。合并含有產(chǎn)物的柱級(jí)分，真空濃縮成固體，將其混懸于乙酸乙酯。加入鹽酸(1.0M/Et2O，1.2當(dāng)量)得到鹽，將其過(guò)濾，干燥，得到62mg所需產(chǎn)物。質(zhì)譜MH+＝395，mpt.230.2-230.4℃。實(shí)施例83 向砜1(0.4g，1.2mmol)在NMP(1mL)中加入4-氨基-2，2，6，6-四甲基哌啶(0.74mg，4.7mmol)，將混合液在75℃下攪拌20分鐘。用水(30mL)稀釋混合液，將混懸液攪拌30分鐘。過(guò)濾固體，用100mL水和50mL乙醚洗滌。空氣干燥30分鐘后，得到0.376g所需產(chǎn)物。向0.27g該固體在2mL二氯甲烷中加入鹽酸(1.0M/Et2O，1.2當(dāng)量)，過(guò)濾得到的鹽，干燥，得到264mg所需產(chǎn)物。質(zhì)譜MH+＝426，mpt.＞300℃。實(shí)施例84 向砜1(0.16g，0.47mmol)在NMP(1mL)中加入四氧-3-噻吩胺1，1-二氧化物(0.19g，1.4mmol)，將混合液在70℃下攪拌30分鐘。用水稀釋混合液，過(guò)濾固體，用水和乙醚洗滌。粗制的固體用5∶95∶0.01甲醇/二氯甲烷/NH4OH作為洗脫液通過(guò)硅膠柱色譜純化。將得到的固體混懸于二氯甲烷中，加入鹽酸(1.0M/Et2O，1.2當(dāng)量)。過(guò)濾得到的鹽，干燥，得到150mg所需產(chǎn)物。質(zhì)譜MH+＝405，mpt.256-260℃。實(shí)施例85 將砜1(105mg，0.3毫摩爾)和4-氨基嗎啉(0.3mL，3.0毫摩爾)的混合物在60℃下攪拌過(guò)夜。將反應(yīng)混合物冷卻，然后通過(guò)用二氯甲烷洗脫的硅膠色譜純化，得到白色粉末(91mg，(M+H)+＝372，M.P.＝243.3-244.0℃)。實(shí)施例86 步驟1將S-3-(N-三苯甲基氨基)四氫呋喃(按照文獻(xiàn)報(bào)道的方法制備，Barlos，Kleomenis；Papaioannou，Dionysios；Patrianakou，Stella；Sanida，Chariklia；Tsegenidis，Theodoros；J.Chem.Soc.Chem.Commun.；EN；6；1987；474-475)(5.12g，0.0155mol)和濃鹽酸(5mL)的混合液在乙醇(60mL)中加熱回流15分鐘，濃縮。將殘留物置于熱乙醚(100mL)中攪拌，過(guò)濾，用乙醚洗滌，真空干燥，得到(S)-3-氨基四氫呋喃鹽酸鹽。步驟2將砜1(1.877g)，(S)-3-氨基四氫呋喃鹽酸鹽(0.66g)和二-異丙基胺(3.73mL)的混合物在無(wú)水乙腈(20mL)中回流，直到TLC顯示砜已反應(yīng)完全。除去溶劑，將殘留物在乙酸乙酯和鹽水之間進(jìn)行相分離。分離有機(jī)層，干燥，濃縮。粗產(chǎn)物在硅膠上(1％MeOH/CH2Cl2)通過(guò)柱色譜純化，得到所需產(chǎn)物(0.6g)。將產(chǎn)物溶于MeOH/CH2Cl2，用2mL 1N HCl(在乙醚中)處理，蒸發(fā)，干燥得到鹽酸鹽，MP171.9-173℃，MS357(M+H)。實(shí)施例87 步驟1將上述硫化物2.4(8.2g)在無(wú)水DMF中的溶液與K2CO3(4.1g)和乙基碘化物(5mL)在室溫下攪拌過(guò)夜。將混合液在EtOAc(300mL)和鹽水(200mL)中攪拌。分離有機(jī)層，用鹽水洗滌，干燥，濃縮得到粗產(chǎn)物。步驟2在0-5℃向上述產(chǎn)物在THF(170mL)中的溶液中加入過(guò)硫酸氫鉀制劑(41g)(在水(170mL)中)。在室溫下攪拌混合液4小時(shí)，用EtOAc(600mL)和水(200mL)稀釋。分離有機(jī)層，用鹽水(3X)洗滌，干燥，濃縮得到砜。步驟3在120℃下將上述砜(2.23g)和4-氨基-四氫吡喃(1.17g)在NMP(0.4mL)中的混合液攪拌1小時(shí)，然后冷卻到室溫。加入甲醇(5mL)，將混合液攪拌10分鐘。過(guò)濾固體，用冰甲醇洗滌。將得到的固體溶解于CH2Cl2，用5mL 1-2 N HCl(在甲醇中)處理。蒸發(fā)掉溶劑后，將殘留物從異丙醇/乙酸乙酯中重結(jié)晶，得到終產(chǎn)物(1.45g)。MP185.3-190.1℃。實(shí)施例88 步驟1將該硫化物(5.0g)、環(huán)氧異丁烷(isobutyren oxide)(3mL)和碳酸鉀(2.6g)在DMF(20mL)中的混合物在80℃下攪拌過(guò)夜。加入另外量的環(huán)氧異丁烷(1.0mL)，將該混合物再攪拌8小時(shí)。用EtOAc和鹽水進(jìn)行水相加工，得到5.8g粗產(chǎn)物。步驟2向上述硫化物(5.8g)在THF(150mL)中的0-5℃溶液中，加入過(guò)硫酸氫鉀制劑(3.5g)在水(150mL)中的溶液。將該混合物升溫至室溫，攪拌4小時(shí)。加入EtOAC(400mL)，進(jìn)行相分離。用鹽水(3×200mL)洗滌有機(jī)層，通過(guò)硫酸鈉干燥，過(guò)濾并濃縮，得到所需的砜(6.0g)，其不經(jīng)過(guò)純化用于下一步。步驟3將砜(5.0g)和4-氨基四氫硫代吡喃(2.4g)在NMP(4mL)中的混合物在100℃下加熱1小時(shí)。用EtOAc和鹽水進(jìn)行水相加工，得到粗產(chǎn)物，將其通過(guò)柱色譜純化(硅膠，30-35％EtOAc/己烷)，得到2.3g固體。MP105-108.5℃，MS445(M+H)。步驟4向上述化合物(2.3g)在90mL二氯甲烷中的0-5℃溶液中，加入MCPBA(2.6g)在70mL二氯甲烷中的溶液。將該混合物在室溫下攪拌過(guò)夜，并濃縮。將殘?jiān)贓tOAc和鹽水之間分配。分離有機(jī)層，用飽和NaHCO3(5x)洗滌，干燥，濃縮，并通過(guò)柱色譜純化(硅膠，2-3％MeOH/二氯甲烷)。將產(chǎn)物(1.3g)溶解于二氯甲烷/EtOAc中，用3mL 1M HCl(在乙醚中)處理。過(guò)濾得到的固體，用乙醚洗滌，從MeOH/EtOH中重結(jié)晶，得到鹽酸鹽(0.65g)，MP223.72-230.2℃，MS477(M+H)。實(shí)施例89 砜89 步驟1在室溫下，向4-氯-2-甲硫基嘧啶-5-羧酸乙酯(Aldrich，24g，103mmol)在250mL乙腈的溶液中，加入4-氟苯胺(22.75g，205mmol)。攪拌2天后，將混合物在60℃下加熱4小時(shí)。過(guò)濾得到的固體，用EtOAc萃取。濃縮過(guò)濾液，用EtOAc(300L)稀釋，鹽水洗滌，干燥(硫酸鎂)，過(guò)濾并濃縮，得到粗產(chǎn)物。將粗產(chǎn)物用己烷(400mL)攪拌，過(guò)濾得到23g 4-(4-氟苯基)氨基-2-甲硫基嘧啶-5-羧酸乙酯，其為白色固體。步驟2在5℃下，將氫化鋁鋰(3.0g)在無(wú)水四氫呋喃(300mL)中攪拌，逐滴加入4-(4-氟苯基)氨基-2-甲硫基-嘧啶-5-羧酸乙酯(22.5g)在無(wú)水四氫呋喃(250mL)中的溶液進(jìn)行處理。將該反應(yīng)混合物在室溫下攪拌過(guò)夜。在5℃下再加入氫化鋁鋰在THF(55mL)中的1.0M溶液，將混合物在室溫下攪拌3小時(shí)。逐滴加入水，將得到的混合物攪拌30分鐘，其后加入氫氧化鈉(2M，9mL)水溶液，隨后加入水(12mL)。將得到的混懸液在室溫下攪拌17小時(shí)，然后過(guò)濾。用四氫呋喃(2X，100mL)洗滌過(guò)濾的殘?jiān)?，濃縮合并的濾液和洗滌液。將殘?jiān)鞈矣谝宜嵋阴?己烷-1/2(200mL)中，過(guò)濾固體，干燥得到14g 4-(4-氟苯基)氨基-2-甲硫基嘧啶-5-甲醇，其為黃色固體。步驟3用二氧化錳(58g)處理4-(4-氟苯基)氨基-2-甲硫基嘧啶-5-甲醇(14.5g)在260mL二氯甲烷中的溶液。將得到的混懸液攪拌5小時(shí)，通過(guò)硅藻土過(guò)濾。用二氯甲烷(100mL)洗滌過(guò)濾的殘?jiān)?，濃縮合并的濾液和洗滌液，得到固體。用乙醚(100mL)攪拌固體，得到8.6g 4-(4-氟苯基)氨基-2-甲硫基嘧啶-5-甲醛，其為白色固體。步驟4將該醛(8.6g，0.033mol)、o-氯苯基乙酸乙酯(8g)和1，3，4，6，7，8-六氫-2H-嘧啶并[1，2a]嘧啶結(jié)合的聚合物(來(lái)自Aldrich的堿，2.5g)在NMP(60mL)混合，在120℃下攪拌4天。加入另外的1.4g堿，將該混合物在120℃下再攪拌3天。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，通過(guò)硅藻土墊過(guò)濾，用NMP(10mL)洗滌。將濾液倒入水(600mL)中，用EtOAc(3x500mL)萃取。合并有機(jī)層，用鹽水(3x)洗滌，通過(guò)硫酸鈉干燥，過(guò)濾并濃縮。將得到的固體用熱乙醚研制，得到產(chǎn)物(6.5g)。步驟5在0-5℃下，向上述硫化物(6.4g)在THF(70mL)中的溶液中，加入過(guò)硫酸氫鉀制劑(27.3g)在水(90mL)中的溶液。將該混合物在室溫下攪拌5小時(shí)，用EtOAC(600mL)和水(250mL)稀釋。分離有機(jī)層，用鹽水(3x)洗滌，通過(guò)硫酸鈉干燥，過(guò)濾并濃縮，得到砜89(5.5g)，MP 115.5-117℃，MS430(M+H)。實(shí)施例90 步驟1在攪拌下向2-氟乙醇(13.85g，216.2mmol，Aldrich Chemicals)和吡啶(50mL)在二氯甲烷(50mL)中的溶液中加入甲苯磺酰氯(61.9g，1.5當(dāng)量)。將得到的混合物在0℃下攪拌5小時(shí)，然后置于冰箱中過(guò)夜。第二天加入150mL冰水淬滅反應(yīng)，在0℃減壓下除去二氯甲烷和吡啶，用乙酸乙酯(600mL)稀釋。分離有機(jī)層，用乙酸乙酯(1×200mL)萃取。合并有機(jī)層，用0.5N HCl(3×200mL)洗滌，直到pH＝2，用飽和碳酸氫鈉(2×200mL)和鹽水(1×200mL)洗滌，通過(guò)硫酸鎂干燥，過(guò)濾并濃縮，得到無(wú)色油，將其靜置結(jié)晶，得到甲苯磺酸酯(46.5g，M＝218)，其為白色粉末。步驟2向硫化物2.4(4.06g，13.4mmol)在DMF(200mL)的0℃溶液中，加入60％NaH在油中的混懸液(0.59g，1.1當(dāng)量)。將得到的混合物在0℃下攪拌30分鐘，逐滴加入上述甲苯磺酸酯(3.8g，1.3當(dāng)量)在DMF(25mL)中的溶液。將得到的混合物在0℃至室溫下攪拌過(guò)夜，然后用乙酸乙酯(600mL)和水(200mL)稀釋。分離有機(jī)層，用水(3×200mL)、飽和碳酸氫鈉(1×200ml)和鹽水(2×200mL)洗滌，通過(guò)硫酸鎂干燥，過(guò)濾并濃縮，得到半固體物質(zhì)(9.16g)。將己烷(400mL)加入到粗產(chǎn)物中，攪拌15分鐘。潷析溶劑，濃縮殘?jiān)?，得到N-單氟乙基化合物(4.92g，(M+H)+＝350，M.P.＝114.7-118.1℃)，其為棕褐色粉末。步驟3向上述N-單氟乙基化合物(4.8g，13.4mmol)在四氫呋喃(75mL)中的0℃溶液中，逐滴加入過(guò)硫酸氫鉀制劑(20.6g，2.5當(dāng)量)在水(75mL)中的溶液。加入完成后，除去冰浴，將得到的混合物在室溫下攪拌7小時(shí)，在0℃下保持過(guò)夜。將反應(yīng)在室溫下再攪拌5小時(shí)，然后用乙酸乙酯(600mL)和水(250mL)稀釋。分離有機(jī)層，用水(3×250mL)和鹽水(1×250mL)洗滌，通過(guò)硫酸鎂干燥，過(guò)濾并濃縮，得到所需的砜(5.4g，(M+H)+＝382，M.P.＝156.0-168.0℃)，其為褐色-微黃色粉末。步驟4將上述砜(2.7g，7.07mmol)、4-氨基四氫吡喃(2.15g，3當(dāng)量)和NMP(2.7mL)的混合物在110℃下攪拌3.5小時(shí)。然后停止加熱和攪拌，將混合物放置過(guò)夜。下一天，加入乙酸乙酯(180mL)和水(65ml)，在各層中分配，然后分離。用水(2×65mL)和鹽水(1×65mL)洗滌有機(jī)層，通過(guò)硫酸鎂干燥，過(guò)濾并濃縮，得到2.6g粗產(chǎn)物。通過(guò)應(yīng)用25％乙酸乙酯/己烷作為洗脫劑的硅膠柱色譜純化，得到游離胺(1.267g，(M+H)+＝403)。將該游離胺置于二氯甲烷(50mL)，攪拌下加入1M HCl(在二乙醚中)(4.5mL，1.5當(dāng)量)。將得到的混合物攪拌5分鐘，然后在減壓、55℃下除去溶劑。在高真空、56℃下干燥24小時(shí)，得到所需化合物(1.247g，(M+H)+＝403)，其為鹽酸鹽。實(shí)施例91硫化物酰肼91 向硫化物2.4(2.10g，6.59mmol)在DMF(60mL)的0℃溶液中，加入氫化鈉在油中的60％混懸液(266mg，1.0當(dāng)量)。將得到混合物在0℃下攪拌30分鐘，然后一次性加入二苯基氧膦基-O-羥基胺(Tetrahedron Let.，vol23，No.37，3835-3836，1982)(1.854g，1.26當(dāng)量)。1分鐘后，出現(xiàn)大量沉淀，在攪拌下加入另外的100mL DMF。攪拌1小時(shí)，將反應(yīng)倒入乙酸乙酯(700mL)和水(200mL)的混合物中。分離水相，用乙酸乙酯(125mL)萃取。用水(5×150mL)和鹽水(1×150mL)洗滌合并的乙酸乙酯層，通過(guò)硫酸鎂干燥，過(guò)濾并濃縮，得到硫化物酰肼(2.3g，M.P.＝183.4-184.2℃，(M+H)+＝319)，其為灰白色粉末。實(shí)施例92 將該硫化物酰肼91(250mg，0.78mmol)和4-氨基四氫吡喃(397mg，5當(dāng)量)合并，在150℃下攪拌10小時(shí)。將該反應(yīng)混合物冷卻至室溫，用乙酸乙酯(35mL)和水(25mL)稀釋。分離有機(jī)層，用水(2×25mL)和鹽水(1×25mL)洗滌，通過(guò)硫酸鎂干燥，過(guò)濾并濃縮，得到粗產(chǎn)物(300mg)。通過(guò)應(yīng)用5％甲醇/二氯甲烷洗脫的制備性TLC純化，得到胺(209mg，M.P.＝117.4-1213℃，(M+H)+＝372.1)。將游離的胺(200mg，0.538mmol)置于二氯甲烷(5mL)和乙酸乙酯(20mL)中。向該溶液中加入1M HCl/二乙醚(0.8mL，1.5當(dāng)量)，攪拌2小時(shí)。在減壓、55℃下除去溶劑，在真空、56℃下干燥24小時(shí)，得到所需化合物(171mg，M.P.＝207.1-215.9℃，(M+H)+＝372)，其為灰白色粉末。實(shí)施例93 步驟A制備1-芐基哌啶-4-基氨基甲酸芐基酯 在30-45分鐘內(nèi)，將4-氨基-1-芐基哌啶(41.2g，216.5mmol)和三乙胺(51.3mL，369mmol)在600mL四氫呋喃中的0℃溶液逐滴加入到氯甲酸芐基酯(31mL，217mmol)中，調(diào)整速率以將反應(yīng)溫度保持在5-10℃之間。加入完成后，將該反應(yīng)混合物升溫至室溫，攪拌12小時(shí)。在減壓下除去溶劑和揮發(fā)物。然后加入水(500mL)和乙酸乙酯(1.2L)，并進(jìn)行相分離。用飽和碳酸氫鈉水溶液(2X，150mL)和鹽水洗滌有機(jī)層，通過(guò)硫酸鎂干燥，過(guò)濾并濃縮，得到棕褐色液體，將其通過(guò)柱色譜純化(二氧化硅，EtOAc/己烷-30/70至EtOAc-100)，得到27.8g胺，其為白色固體(質(zhì)譜M+＝324，MP＝79.1-79.6℃)。步驟B制備哌啶-4-基氨基甲酸芐基酯 在室溫下，向芐基胺(27.8g，85.7mmol)在400mL二氯甲烷的溶液中，通過(guò)加液漏斗逐滴加入1-氯乙基氯甲酸酯(25.4g，178mmol)在50mL二氯甲烷中的溶液。加入完成后，將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌3小時(shí)。在減壓下除去溶劑和揮發(fā)物，加入甲醇(500mL)。將反應(yīng)混合物在攪拌下加熱回流1小時(shí)，冷卻至室溫，濃縮得到26.3g哌啶，其為灰白色固體(質(zhì)譜M+1＝235，MP＝190.7-192.2℃)。步驟C制備1-(甲基磺?；?哌啶-4-基氨基甲酸芐基酯 在室溫下將保護(hù)的哌啶(10g，42.7mmol)和三乙胺(12mL，86.7mmol)溶解于500mL二氯甲烷中。通過(guò)加液漏斗逐滴加入在20mL二氯甲烷中的甲磺酰氯(4.3mL，55.5mmol)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌3小時(shí)。在減壓下除去溶劑和揮發(fā)物，向反應(yīng)混合物中加入乙酸乙酯(500mL)和鹽酸水溶液(0.5M，350mL)，分離兩相。有機(jī)層用鹽酸水溶液(0.5M，2×100mL)、飽和碳酸氫鈉水溶液(3×100mL)和鹽水洗滌，通過(guò)硫酸鎂干燥，過(guò)濾并濃縮，得到甲磺酰胺(MP＝148.6-152.8℃)。步驟D制備1-(甲基磺酰基)哌啶-4-胺 在室溫、氮?dú)夥障孪拢?00mL圓底燒瓶中的甲磺酰胺(9.2g，29.5mmol)在200mL四氫呋喃中的溶液中加入碳上鈀(10％，2-3g)。將反應(yīng)容器用氫氣(3X)沖洗，通過(guò)氫氣球向反應(yīng)燒瓶中充氫氣，將溶液攪拌15小時(shí)(如果需要，加入更多的催化劑和氫氣球充請(qǐng)氣)。向反應(yīng)中加入二氯甲烷(100mL)，通過(guò)硅藻土墊過(guò)濾。濃縮濾液得到4.63g所需的胺(質(zhì)譜M+1＝179，MP＝65.3-65.7℃)。步驟E
將硫化物酰肼91(255mg，0.8mmol)、4-氨基-1-甲磺?；哙?200mg，1.4eq)和NMP(0.3mL)的混合物在150℃下攪拌2天。將得到的混合物用甲醇(8mL)、乙酸乙酯(180mL)和水(65mL)稀釋。分離有機(jī)層，用水(2×60mL)和鹽水(1×60mL)洗滌，濃縮得到640mg粗產(chǎn)物。通過(guò)應(yīng)用8％甲醇/二氯甲烷洗脫的制備性TLC純化，得到游離的胺(180mg，M.P.＝180.0-194.0℃，(M+H)+＝449)。
向游離的胺(180mg，0.40mmol)在乙酸乙酯(150mL)、二氯甲烷(20mL)和甲醇(3mL)的溶液中加入1M HCl(在二乙醚中)(0.6mL，1.5當(dāng)量)。將得到的混合物攪拌2小時(shí)，然后在減壓下除去溶劑。在56℃、高真空下干燥殘?jiān)?8小時(shí)，得到所需化合物(168mg，M.P.＝180.7-213.2℃，(M+H)+＝449)，其為灰白色粉末。實(shí)施例94 1，1-二氧-4-氨基硫吡喃 步驟1向1.0N NaOH(25mL，25mmol)和4-氨基四氫硫代吡喃(2.34g，20mmol)的0℃混合物中，逐滴加入芐基氯甲酸酯，3.14mL(22mmol)。將該反應(yīng)混合物在室溫下攪拌1小時(shí)，過(guò)濾，用水洗滌兩次，己烷攪拌，過(guò)濾，真空爐中干燥，得到4.4g氨基甲酸酯，其為白色固體。(M+H)+252。步驟2在1小時(shí)內(nèi)，向氨基甲酸酯(40g，159mmol)在二氯甲烷的溶液中一次性加入3-氯過(guò)苯甲酸(75％，75g，320mmol)。將該反應(yīng)混合物攪拌12小時(shí)，過(guò)濾，用10％亞硫酸鈉溶液洗滌兩次，10％碳酸氫鈉溶液洗滌三次，用硫酸鎂干燥，減壓下濃縮，得到砜(37.5g)。M+＝283。步驟3向砜(3.0g，10.6mmol)在50mL乙醇的混合物中加入5％碳上鈀(300mg)。應(yīng)用Paar氫化器在40psi下氫化反應(yīng)混合物8小時(shí)。通過(guò)硅藻土過(guò)濾得到的溶液，濃縮濾液，得到1.5g胺。(M+H)+＝150。實(shí)施例95 將硫化物酰肼91(660mg，2.07mmol)、氨基砜(500mg，2當(dāng)量)，和NMP(0.5mL)的混合物在150℃下攪拌3天。TLC顯示仍有大量的起始原料存在，因此加入另外量的氨基-砜(200mg，1.34mmol)，再將混合物攪拌1天。通過(guò)TLC分析，已沒(méi)有起始原料殘留。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，用甲醇(230mL)和二氯甲烷(150mL)稀釋，加入10g硅膠。濃縮混合物，將殘留物裝載到快速柱(硅膠，20g)上，用1％甲醇/二氯甲烷洗脫，得到623mg不純的產(chǎn)物。將該混合物進(jìn)一步在制備性TLC上純化，用純的乙酸乙酯洗脫，得到游離的胺(70mg，(M+H)+＝420)。將該游離的胺(70mg，0.17mmol)置于二氯甲烷(10mL)和甲醇(10mL)中，然后加入1M HCl(在二乙醚中)(0.3mL，1.5當(dāng)量)。將得到的混合物攪拌5分鐘，濃縮，在高真空、56℃下干燥，得到所需的產(chǎn)物(62mg，M.P.＝240.0-243.0℃)。實(shí)施例96 步驟1向硫化物酰肼91(291mg，0.913mmol)在甲醇(30mL)和乙酸(10mL)的溶液中，加入異丁醛(0.11mL，1.3當(dāng)量)，隨后加入氰基氫化硼鈉(58mg，1當(dāng)量)。將得到的混合物在室溫下攪拌40分鐘，然后用乙酸乙酯(175mL)稀釋。分離有機(jī)層，用飽和碳酸氫鈉溶液(4×60mL)洗滌直到堿性，用鹽水(1×60mL)洗滌，通過(guò)硫酸鎂干燥，過(guò)濾并濃縮，得到400mg粗產(chǎn)物。通過(guò)應(yīng)用20％乙酸乙酯/己烷洗脫的制備性TLC純化，得到N-烷基化的硫化物酰肼(319mg，(M+H)+＝375)，其為灰白色泡沫狀粉末。步驟2向N-烷基化的硫化物酰肼(319mg，0.85mmol)在四氫呋喃(15mL)的0℃溶液中，逐滴加入在水(15mL)中的過(guò)硫酸氫鉀制劑(523mg，1當(dāng)量)。在4小時(shí)內(nèi)，將得到的混合物逐漸升溫至室溫，然后用乙酸乙酯(300mL)稀釋。分離有機(jī)層，用水(4×150mL)和鹽水(1×150mL)洗滌，通過(guò)硫酸鎂干燥，過(guò)濾并濃縮，得到灰白色泡沫狀的所需化合物(308mg，(M+H)+＝391)。步驟3將N-烷基化的亞砜酰肼(300mg，0.768mmol)、4-氨基-四氫吡喃(233mg，3當(dāng)量)和NMP的混合物在80℃下攪拌35分鐘。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，用乙酸乙酯(90mL)稀釋。分離有機(jī)層，用水(3×25mL)和鹽水(1×25mL)洗滌，通過(guò)硫酸鎂干燥，過(guò)濾并濃縮，得到327mg粗產(chǎn)物。通過(guò)應(yīng)用5％甲醇/二氯甲烷洗脫的制備性TLC純化，得到游離的胺。然后將游離的堿溶解于二氯甲烷(20mL)中，在室溫下加入1M HCl(在二乙醚中)(1.15mL，1.5當(dāng)量)。將得到的混合物攪拌2分鐘，然后在減壓下除去溶劑。在高真空、56℃下干燥24小時(shí)，得到所需的產(chǎn)物(239mg，M.P.＝111.3-117.5℃，(M+H)+＝428)，其為灰白色粉末。實(shí)施例97 步驟1將硫化物酰肼91(500mg，1.57mmol)和4-嗎啉羰基氯(0.5mL，2.6當(dāng)量)在吡啶(40mL)中的混合物在90C下攪拌7小時(shí)。在減壓、50℃下除去吡啶，將殘?jiān)靡宜嵋阴?175mL)稀釋。用HCl/鹽水(3×75mL)和鹽水(75mL)洗滌有機(jī)層，通過(guò)硫酸鎂干燥，過(guò)濾并濃縮，以定量產(chǎn)率得到N-?；牧蚧秕ｋ?(M+H)+＝432)。步驟2向N-酰基化的硫化物酰肼(0.785mmol)在四氫呋喃(15mL)的0℃溶液中，逐滴加入在水(15mL)中的過(guò)硫酸氫鉀制劑(483mg，1當(dāng)量)。在4小時(shí)內(nèi)，將得到的溶液逐漸升溫至室溫，然后用乙酸乙酯(175mL)和水(50mL)稀釋。分離有機(jī)層，用水(3×50mL)和鹽水(1×50mL)洗滌，通過(guò)硫酸鎂干燥，過(guò)濾并濃縮，得到泡沫狀的N-?；膩嗧旷ｋ?209mg，(M+H)+＝448)。步驟3將N-酰基化的亞砜酰肼(209mg，0.0468mmol)、4-氨基-四氫吡喃(142mg，3當(dāng)量)和NMP的混合物在90℃下攪拌1小時(shí)，冷卻至室溫，用乙酸乙酯(35mL)和水(25mL)稀釋。分離有機(jī)層，用水(2×25mL)和鹽水(1×25mL)洗滌，通過(guò)硫酸鎂干燥，過(guò)濾并濃縮，得到293mg粗產(chǎn)物。通過(guò)應(yīng)用5％甲醇/二氯甲烷洗脫的制備性TLC純化，得到游離的胺(36mg，(M+H)+＝485)。然后將游離的堿溶解于二氯甲烷中，然后加入1.0M HCl(在二乙醚中)(0.11mL，1.5當(dāng)量)，將得到的混合物攪拌2小時(shí)。在減壓、55℃下除去溶劑，然后在高真空、56℃下干燥24小時(shí)，得到所需的化合物(38mg，(M+H)+＝485)，其為灰白色粉末。實(shí)施例98 步驟1向硫化物酰肼91(500mg，1.57mmol)在乙腈(10mL)的溶液中，加入37％甲醛(水溶液)(0.65mL，5當(dāng)量)，隨后加入氰基硼鈉化氫(155mg，1.6當(dāng)量)。將得到的混合物攪拌15分鐘，然后加入乙酸以維持中性pH值。將得到的混合物攪拌2小時(shí)，偶爾加入乙酸以維持中性pH值。用乙酸乙酯(300mL)和水(150mL)稀釋反應(yīng)混合物。分離有機(jī)層，用飽和碳酸氫鈉(3×150mL)和鹽水(1×150mL)洗滌，通過(guò)硫酸鎂干燥，過(guò)濾并濃縮，得到651mg粗產(chǎn)物。通過(guò)應(yīng)用15％乙酸乙酯/己烷洗脫的快速柱色譜純化，得到N，N-二烷基化的硫化物酰肼(37mg，(M+H)+＝347)。步驟2向N，N-二烷基化的硫化物酰肼(37mg，0.107mmol)在四氫呋喃(3mL)的0℃溶液中，逐滴加入在水(3mL)中的過(guò)硫酸氫鉀制劑(66mg，1當(dāng)量)。在4小時(shí)內(nèi)，將得到的混合物逐漸升溫至室溫，在0℃下儲(chǔ)存過(guò)夜，用乙酸乙酯(35mL)和水(20mL)稀釋。分離有機(jī)層，用水(2×20mL)和鹽水(1×20mL)洗滌，通過(guò)硫酸鎂干燥，過(guò)濾并濃縮，得到N，N-二烷基化的亞砜酰肼(35mg，(M+H)+＝363)。步驟3將N，N-二烷基化的亞砜酰肼(35mg，0.0965mmol)、4-氨基-四氫吡喃(39mg，4當(dāng)量)和NMP的混合物在80℃下攪拌35分鐘。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，用乙酸乙酯(35mL)和水(25mL)稀釋。分離有機(jī)層，用水(2×25mL)和鹽水(1×25mL)洗滌，通過(guò)硫酸鎂干燥，過(guò)濾并濃縮，得到39mg粗產(chǎn)物。通過(guò)應(yīng)用5％甲醇/二氯甲烷洗脫的制備性TLC純化，得到游離的胺(29mg)。然后將游離的堿溶解于二氯甲烷(5mL)中，加入1M HCl(在二乙醚中)(0.1mL，1.5當(dāng)量)。將得到的混合物攪拌2分鐘，然后在減壓下除去溶劑。在高真空、56℃下干燥24小時(shí)，得到所需的產(chǎn)物(29mg，(M+H)+＝400)，其為灰白色粉末。實(shí)施例99 將砜89(354mg，0.823mmol)、4-氨基-四氫吡喃(250mg，3當(dāng)量)和NMP(0.3mL)的混合物在110℃下攪拌35分鐘。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，用乙酸乙酯(170mL)和水(70mL)稀釋。分離有機(jī)層，用水(2×70mL)和鹽水(1×70mL)洗滌，通過(guò)硫酸鎂干燥，過(guò)濾并濃縮，得到393mg粗產(chǎn)物。通過(guò)應(yīng)用65％乙酸乙酯/己烷洗脫的制備性TLC純化，得到游離的胺(261mg，(M+H)+＝451，M.P.＝281.7-283.4℃)。將該胺溶解于二氯甲烷(15mL)和甲醇(2mL)中，加入1M HCl(在二乙醚中)(0.8mL，1.5eq)。將得到的混合物攪拌1小時(shí)，然后在減壓下除去溶劑。在高真空、56℃下干燥該物質(zhì)，得到所需的產(chǎn)物(252mg，(M+H)+＝451，M.P.＝150.0-154.0℃)。實(shí)施例100 步驟1向芐基硫化物(5g，12.1mmol)在DMF(50mL)的溶液中加入碳酸鉀(1.05當(dāng)量，1.76g)，隨后加入2-碘乙醇(1.42mL，1.5當(dāng)量)，將得到的混合物在室溫下攪拌過(guò)夜。將反應(yīng)混合物用乙酸乙酯(300mL)和水(150mL)稀釋。分離有機(jī)層，在不加熱下濃縮至體積大約150mL。通過(guò)真空過(guò)濾收集白色固體，在玻璃料上空氣干燥2小時(shí)。在真空下進(jìn)一步干燥固體，得到N-烷基化羥基乙基硫化物(4.139g，M.P.＝155.6-156.2℃，(M+H)+＝424)。步驟2向N-烷基化羥基乙基硫化物(4.13g，9.06mmol)在四氫呋喃(200mL)的0℃溶液中，逐滴加入過(guò)硫酸氫鉀制劑(11.13g，2當(dāng)量)在水(200mL)中的溶液。加入完成后，除去冰浴，將得到的混合物在室溫下攪拌過(guò)夜。將該反應(yīng)混合物倒入乙酸乙酯(700mL)和水(400mL)的混合物中。分離有機(jī)層，用水(7×500mL)和鹽水(5×500mL)洗滌，通過(guò)硫酸鎂干燥，過(guò)濾并濃縮，得到2.2gN-烷基化羥基乙基砜。當(dāng)通過(guò)硫酸鎂干燥和在分液漏斗中時(shí)，該化合物的一些已經(jīng)被結(jié)晶。合并水層，進(jìn)一步用二氯甲烷(3×300mL)萃取，加入來(lái)自第一有機(jī)相的硫酸鎂干燥的粉末，將該稀漿攪拌過(guò)夜。過(guò)濾并濃縮混合物，得到另外2g所需產(chǎn)物(M.P.＝197.1-198.7℃，(M+H)+＝456)。步驟3將N-烷基化的羥基乙基砜(1g，2.19mmol)、4氨基-四氫硫代吡喃(385mg，1.5當(dāng)量)和NMP(0.5mL)的混合物在100℃下攪拌2.5小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，用乙酸乙酯(50mL)和水(40mL)稀釋，攪拌20分鐘。分離有機(jī)層，用水(2×45mL)和鹽水(1×45mL)洗滌，通過(guò)硫酸鎂干燥，過(guò)濾并濃縮，得到1g粗產(chǎn)物。通過(guò)應(yīng)用20％乙酸乙酯/二氯甲烷洗脫的硅膠快速柱色譜純化，得到所需化合物(519mg，M.P.＝195.1-195.4C，(M+H)+＝417)，其為灰白色粉末。步驟4向該硫化物游離胺(500mg，1.2mmol)在二氯甲烷(50mL)的0℃溶液中，加入MCPBA(724mg，3.5eq)在二氯甲烷(50mL)中的溶液。將得到的混合物逐漸升溫至室溫。將該反應(yīng)混合物在減壓、55℃下濃縮，得到的殘留物用乙酸乙酯(180mL)和飽和碳酸氫鈉溶液(60mL)稀釋。分離有機(jī)層，用飽和碳酸氫鈉溶液(3×60mL)和鹽水(1×60mL)洗滌，通過(guò)硫酸鎂干燥，過(guò)濾并濃縮，得到528mg粗制的砜游離胺。通過(guò)應(yīng)用1％甲醇/二氯甲烷至2％甲醇/二氯甲烷梯度洗脫的硅膠快速柱色譜洗脫，得到砜游離胺(279mg，M.P.＝155.0-155.9℃，(M+H)+＝449)，其為灰白色粉末。將該游離胺(278mg，0.62mmol)置于乙酸乙酯(50mL)中，然后加入1M HCl(在二乙醚中)(1mL，1.5eq)。將得到的混合物攪拌1小時(shí)，然后在減壓下除去溶劑。在高真空、56℃下干燥殘?jiān)?，得到所需的產(chǎn)物(242mg，M.P.＝182.0-186.0℃，(M+H)+＝449)，其為灰白色粉末。實(shí)施例101 在室溫下，將硝酸銀(1.10g，6.50mmole)和氫氧化鈉(0.52g，13.0mmole)在5mL水中的混合物攪拌15分鐘。真空過(guò)濾收集合成的銀氧化物，用水洗滌，真空干燥，然后加入反式-氨基環(huán)己醇加成物38(0.500g，1.30mmole)在2mL四氫呋喃中的溶液，再向其中加入甲基碘化物(0.16mL，2.60mmole)。將反應(yīng)混合液在40℃攪拌過(guò)夜，然后升溫到60℃保持5天，在60℃的第一天后再加入甲基碘化物(1.30mmole，0.08mL)。
通過(guò)快速色譜(10-50％丙酮/己烷)純化，產(chǎn)生前面所示的所需產(chǎn)物，以及N-甲基化的異構(gòu)體。將每種產(chǎn)物分別置于甲醇中，用鹽酸(1.0M/Et2O，1.0當(dāng)量)處理，重蒸發(fā)至干燥，然后用乙醚洗滌，過(guò)濾，干燥得到0.157g所需O-甲基化產(chǎn)物(mp189.0-192.0℃)和0.069g N-甲基化產(chǎn)物(mp130.3-130.5℃)。實(shí)施例102步驟A制備4-乙硫烷基-丁-2-酮 向5℃的乙硫醇(6.2g，7.4mL，0.1mol)溶液、3滴DBU(在50mL THF中)中滴加入甲基乙烯基酮(7.3g，8.45mL，0.105mol)。將混合液在環(huán)境溫度下攪拌過(guò)夜。然后在真空下濃縮混合物，得到13.6g所需的酮。步驟B4-乙硫烷基-丁-2-酮肟的制備 將4-乙硫烷基-丁-2-酮(13.6g，0.1mol)，醋酸鈉三水合物(68g，0.5mol)和羥基胺鹽酸鹽(34.7g，0.5mol)在500mL乙醇中的混合液加熱回流3小時(shí)。將混合液冷卻，真空濃縮。殘留物用水稀釋，用乙酸乙酯(2×200mol)萃取。合并有機(jī)層，用鹽水洗滌，干燥，過(guò)濾，真空濃縮，得到14.7g肟。步驟C2-氨基-4-乙硫烷基-丁烷的制備 向氫化鋁鋰(1M，120mL，0.12mol)在四氫呋喃中的溶液中滴加入4-乙硫烷基-丁-2-酮肟(6g，0.04mol)(在30mL四氫呋喃中)。全部滴加完后，將混合液在回流下攪拌4小時(shí)。將混懸液用冰水浴冷卻，滴加入水(4.6mL)和20mL四氫呋喃，然后加入氫氧化鈉水溶液(15％，4.6mL)。然后再加入水(13.8mL)，將反應(yīng)混合液攪拌30分鐘，通過(guò)硅藻土墊過(guò)濾，用乙酸乙酯(300mL)漂洗。干燥濾液(鹽水，硫酸鎂)，在減壓下蒸發(fā)，得到3.43g 2-氨基-4-乙硫烷基-丁烷(質(zhì)譜M+1＝134)。步驟D 將砜1(0.55g，1.6mmol)和2-氨基-4-乙硫烷基-丁烷(0.63g，4.8mmol)在10mL四氫呋喃中的溶液回流1小時(shí)。將溶液冷卻，真空濃縮，產(chǎn)物用硅膠經(jīng)5％乙酸乙酯(在二氯甲烷中)洗脫通過(guò)柱色譜純化，得到421mg102A的外消旋混合物(質(zhì)譜M+1＝403)，和31mg氮丙啶化合物102B(質(zhì)譜M+1＝401，MP＝160-167℃)。實(shí)施例103本實(shí)施例描述了測(cè)定體外抑制p-38(MAP)激酶的分析方案。
本發(fā)明的化合物在體外抑制p-38 MAP激酶的活性，通過(guò)測(cè)定p-38激酶將γ-33p-ATP中的γ-磷酸轉(zhuǎn)移給髓鞘堿性蛋白(MBP)而確定，使用對(duì)Ahn，N.G.；等J.Biol.Chem.Vol.266(7)，4220-4227，(1991)中介紹的方法進(jìn)行微小改進(jìn)的方法。
重組p38 MAP激酶的磷酸化型用SEK-1和MEKK在大腸桿菌中表達(dá)，然后用鎳柱通過(guò)親合色譜純化。
磷酸化的p38 MAP激酶在激酶緩沖液(20mM 3-(N-嗎啉代)丙磺酸，pH7.2，25mM β-磷酸甘油，5mM乙二醇-雙(β-氨基乙醚)-N，N，N′，N′-四乙酸，1mM釩酸鈉，1mM二硫蘇糖醇，40mM氯化鎂)中稀釋。加入溶解于DMSO的實(shí)驗(yàn)化合物或僅DMSO(對(duì)照)，樣品在30℃保溫10分鐘。通過(guò)加入含有MBP和γ-33p-ATP的底物混合物引發(fā)激酶反應(yīng)。在30℃下繼續(xù)培養(yǎng)20分鐘后，加入0.75％磷酸終止該反應(yīng)。利用磷酸纖維素膜(Millipore，Bedford，MA)從殘余γ-33p-ATP分離出磷酸化MBP，并且利用閃爍計(jì)數(shù)器定量測(cè)定(Packard，Meriden，CT)。
本發(fā)明的化合物在本試驗(yàn)中具有活性。一些木發(fā)明化合物的p-38抑制活性(表示為IC50，導(dǎo)致被檢測(cè)的p-38酶50％抑制時(shí)的濃度)為
實(shí)施例104本實(shí)施例描述了評(píng)價(jià)在THP1細(xì)胞中對(duì)LPS誘導(dǎo)的TNF-α的產(chǎn)生的抑制作用的體外分析實(shí)驗(yàn)。
利用Blifeld，等Transplantation，51(2)，498-503(1991)所述方法的小改進(jìn)方法，測(cè)定本發(fā)明的化合物抑制TNF-α釋放的能力。
(a)TNF生物合成的誘導(dǎo)使THP-1細(xì)胞混懸于培養(yǎng)基[RPMI(Gibco-BRL，Gailthersburg，MD)含有15％胎牛血清，0.02mM 2-巰基乙醇]，達(dá)到2.5×106細(xì)胞/ml的濃度，隨后鋪板在96孔平板中(各孔中含0.2ml等份試樣)。將試驗(yàn)化合物溶于DMSO，此后用培養(yǎng)基稀釋，使DMSO的終濃度為5％。向各孔中加入25μl等份的試驗(yàn)溶液或只含有DMSO(對(duì)照)的培養(yǎng)基。細(xì)胞在37℃下培養(yǎng)30分鐘。向孔中加入LPS(Sigma，St.Louis，MO)達(dá)到終濃度為0.5μg/ml，并且令細(xì)胞繼續(xù)培養(yǎng)2小時(shí)。培養(yǎng)期結(jié)束后，收集培養(yǎng)上清液，利用下面所述的ELISA試驗(yàn)測(cè)定TNF-α存在的量。
(b)ELISA試驗(yàn)通過(guò)Reimund，J.M.等GUT.Vol.39(5)，684-689(1996)所述的特異性捕捉ELISA試驗(yàn)、利用兩種抗TNF-α抗體(2TNF-H12和2TNF-H34)測(cè)定人TNF-α存在的量。
聚苯乙烯96孔平板用50μl/孔的存在于PBS中的抗體2TNF-H12(10μg/ml)包被，并且在4℃的潮濕培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)過(guò)夜。平板用PBS洗滌，進(jìn)而用存在于PBS中的5％脫脂奶粉室溫下封被1小時(shí)，后用存在于PBS中的0.1％BSA(牛血清白蛋白)洗滌。
TNF標(biāo)準(zhǔn)品是由人重組TNF-α(R & D Systems，Minneapolis，MN)的儲(chǔ)備溶液制備。標(biāo)準(zhǔn)品在該試驗(yàn)中的濃度從10ng/ml開(kāi)始，隨后進(jìn)行6次半對(duì)數(shù)連續(xù)稀釋。
25μl等份的上述培養(yǎng)上清液或TNF標(biāo)準(zhǔn)品或僅僅是培養(yǎng)基(對(duì)照)與25μl等份的生物素化單克隆抗體2TNF-H34(2μg/ml，存在于含0.1％BSA的PBS中)混合，此后加入到各孔中。室溫下培養(yǎng)樣本2小時(shí)同時(shí)輕輕振搖，隨后用含0.1％BSA的PBS洗滌3次。向各孔中加入50μl的過(guò)氧化酶-鏈霉抗生物素(Zymed，S.San Francisco，CA)溶液，其中含有在PBS中的0.416μg/ml的過(guò)氧化物酶-鏈霉抗生物素和0.1％BSA。室溫下樣本繼續(xù)培養(yǎng)1小時(shí)，隨后用含0.1％BSA的PBS洗滌4次。向各孔中加入50μl的O-苯二胺溶液(1ug/ml O-苯二胺和0.03％過(guò)氧化氫，存在于0.2M檸檬酸鹽緩沖液pH4.5中)，并且室溫下將樣本在黑暗條件下培養(yǎng)30分鐘。分別讀取樣品和參照物在450nm和650nm下的光密度。利用在450nm下的光密度對(duì)所用濃度的圖測(cè)定TNF-α的水平。
IC50值被定義為對(duì)應(yīng)于在450nm的吸光度的半-最大值降低的試驗(yàn)化合物的濃度。實(shí)施例105該實(shí)施例描述了評(píng)價(jià)小鼠(或大鼠)中LPS-誘導(dǎo)的TNF-α產(chǎn)生的抑制作用的體內(nèi)分析試驗(yàn)。
利用Zanetti.等J.Immunol.，148，1890，(1992)和Sekut等J.Lab.Clin.Med.，124，813，(1994)所述方法的微小改進(jìn)方法，測(cè)定本發(fā)明的化合物體內(nèi)抑制TNF-α釋放的能力。
體重18-21g的雌性BALB/c小鼠(ChaRles River，Hollister，CA)適應(yīng)環(huán)境1周。包括8只小鼠的各組口服施用混懸于或溶解于含有0.9％氯化鈉、0.5％羧甲基纖維素鈉、0.4％吐溫80、0.9％芐醇(CMC載體)的水性載體中的實(shí)驗(yàn)化合物或者只施用載體(對(duì)照組)。30分鐘后，給小鼠腹膜內(nèi)注射20μg LPS(Sigma，St.Louis，MO)。1.5小時(shí)后，通過(guò)吸入CO2處死小鼠，并通過(guò)心穿刺術(shù)采集血液。在15,600Xg下離心5分鐘使血液沉降，把血清轉(zhuǎn)移到干凈的試管中且在-20℃下冷凍，直至通過(guò)ELISA試驗(yàn)按照制造商的方案測(cè)定TNF-αα(Biosource International，Camarillo，CA，USA)。
權(quán)利要求
1.下式的化合物 或其藥用鹽或前藥，其中R1為氫或烷基；R2為取代的環(huán)烷基，雜取代的環(huán)烷基，雜烷基取代的環(huán)烷基，雜取代的環(huán)烷基-烷基，雜環(huán)基，雜環(huán)基螺環(huán)烷基，芳烷氧基，烷氧基，亞烷基-S(O)n-烷基(其中n為1或2)，或SO2Ar2；R3為氫，氨基，單烷基氨基，二烷基氨基，?；被?，-NRa-C(＝O)-Rb(其中Ra為氫或烷基，Rb為雜環(huán)基或雜烷基)，烷基，環(huán)烷基，芳基，芳烷基，鹵代烷基，雜烷基，氰基烷基，-亞烷基-C(O)-R(其中R為氫，烷基，羥基，烷氧基，氨基，單烷基氨基或二烷基氨基)酰基，或苯二甲酰亞氨基烷基；以及每個(gè)Ar1和Ar2獨(dú)立地為芳基。
2.按照權(quán)利要求1的化合物，其中Ar1為任選取代的苯基。
3.按照權(quán)利要求2的化合物，其中Ar1為獨(dú)立地被一個(gè)或兩個(gè)，優(yōu)選一個(gè)鹵素、烷基或甲氧基基團(tuán)取代的苯基基團(tuán)。
4.按照權(quán)利要求3的化合物，其中Ar1為2-氯苯基，2-氟苯基，2-甲基苯基，或2-甲氧基苯基。
5.按照權(quán)利要求4的下式化合物
6.按照權(quán)利要求1-5中任何一項(xiàng)的化合物，其中R3為氫，氨基，單烷基氨基，二烷基氨基，酰基氨基，-NRa-C(＝O)-Rb(其中Ra為氫或烷基，和Rb為雜環(huán)基或雜烷基)，烷基，鹵代烷基，環(huán)烷基，氰基甲基，雜烷基，芳基，芳烷基，或-亞烷基-C(O)-R(如權(quán)利要求1所定義)。
7.按照權(quán)利要求6的化合物，其中R3為氫，氨基，二甲基氨基，異丙基氨基，(嗎啉代甲?；?氨基，甲基，2，2，2-三氟乙基，環(huán)丙基，氰基甲基，2-羥基乙基，4-氟苯基，芐基，羧基甲基或甲氧基羰基甲基，乙基，2-氟乙基，2-羥基-2-甲基丙基，或2-苯二甲酰亞氨基丙基。
8.按照權(quán)利要求7的化合物，其中R3為氫。
9.按照權(quán)利要求7的化合物，其中R3為甲基。
10.按照權(quán)利要求1-9中任何一項(xiàng)的化合物，其中R1為氫。
11.按照權(quán)利要求1-9中任何一項(xiàng)的化合物，其中R1為甲基。
12.按照權(quán)利要求1-11中任何一項(xiàng)的化合物，其中R2為雜取代的環(huán)烷基，雜烷基取代的環(huán)烷基，芳烷氧基，烷氧基，烷基磺?；?烷基，雜環(huán)基，或雜取代的環(huán)烷基-烷基。
13.按照權(quán)利要求12的化合物，其中R2為雜取代的環(huán)烷基或雜環(huán)基。
14.按照權(quán)利要求13的化合物，其中R2為4-雜取代的環(huán)己基。
15.按照權(quán)利要求14的化合物，其中R2為4-羥基環(huán)己基。
16.按照權(quán)利要求13的化合物，其中R2為雜環(huán)基。
17.按照權(quán)利要求16的化合物，其中R2為取代的哌啶基基團(tuán)。
18.按照權(quán)利要求17的化合物，其中R2為N-甲磺酰基-哌啶-4-基。
19.按照權(quán)利要求16的化合物，其中R2為4-四氫吡喃基基團(tuán)。
20.按照權(quán)利要求12的化合物，其中R2為烷基磺?；榛?。
21.按照權(quán)利要求20的化合物，其中R2為選自(1，1-二甲基-2-甲基磺酰基)乙基和(1，1-二甲基-3-甲基磺?；?丙基的基團(tuán)。
22.一種藥物組合物，其含有藥用賦型劑和權(quán)利要求1-20中任何一項(xiàng)要求的化合物。
23.一種制備權(quán)利要求1的化合物的方法，包括下列步驟在足以制備式I化合物的條件下， 將式Ig化合物 與式R1R2NH的胺接觸，其中R1，R2，R3和Ar1如權(quán)利要求1所定義；n為0-2的整數(shù)，優(yōu)選1或2；和R6為烷基基團(tuán)。
24.按照權(quán)利要求23的方法制備的化合物。
25.作為治療活性劑的權(quán)利要求1-21任何一項(xiàng)所要求保護(hù)的化合物。
26.一種治療p38介導(dǎo)的疾病的方法，包括給需要該治療的患者施用有效量的權(quán)利要求1的化合物。
27.一種用于制備治療p38介導(dǎo)的疾病的藥物的方法。
28.按照權(quán)利要求26或27的方法，其中所述p38介導(dǎo)的疾病選自關(guān)節(jié)炎、局限性回腸炎、阿爾茨海默氏病、過(guò)敏性腸綜合癥、成人呼吸窘迫綜合癥或慢性阻塞性肺病。
29.前面所述的本發(fā)明。
全文摘要
本發(fā)明提供了式(I)的化合物，其中R
文檔編號(hào)A61P25/28GK1451005SQ01815030
公開(kāi)日2003年10月22日 申請(qǐng)日期2001年8月22日 優(yōu)先權(quán)日2000年8月31日
發(fā)明者吉弗瑞·陳健, 詹姆斯·帕特里克·杜恩, 大衛(wèi)·邁克爾·戈?duì)柎奶? 朱莉·安妮·利姆 申請(qǐng)人:霍夫曼-拉羅奇有限公司