專利名稱：脫乙酰酶抑制劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及作為組蛋白脫乙酰酶抑制劑的異羥肟酸化合物。本發(fā)明的化合物可用作用于治療增殖性疾病的藥物。
背景技術(shù)：
組蛋白的可逆性乙?；磻峭ㄟ^改變轉(zhuǎn)錄因子對DNA的可及性而發(fā)生作用的基因表達的主要調(diào)節(jié)器。在正常細胞中，組蛋白脫乙酰酶(HDA)和組蛋白乙?；D(zhuǎn)移酶一起控制組蛋白的乙?；潭纫员３制胶?。對HAD的抑制會導致高度乙酰化的組蛋白的積聚，從而導致各種細胞應答。
已對HDA抑制劑對癌細胞的治療作用進行了研究。例如，據(jù)報導，丁酸和其衍生物(包括苯基丁酸鈉)可在體外誘導人體結(jié)腸癌、白血病和成視網(wǎng)膜細胞瘤細胞系的細胞凋亡。但是，丁酸和其衍生物并不能用作藥物，這是因為它們代謝迅速，體內(nèi)的半衰期非常短。其它對其抗癌活性進行了廣泛研究的HDA抑制劑是制滴菌素A和trapoxin。制滴菌素A是一種抗真菌劑和抗生素，它是哺乳動物HDA的可逆抑制劑。Trapoxin是一種環(huán)狀的四肽，它是哺乳動物HDA的不可逆抑制劑。雖然對制滴菌素A和trapoxin的抗癌活性已有研究，但這些化合物的體內(nèi)不穩(wěn)定性使其不太適宜作為抗癌藥物。因此，仍然存在著對高效且穩(wěn)定的、適于治療腫瘤，包括癌性腫瘤的活性化合物的需要。
發(fā)明概述本發(fā)明提供可用作藥物的有效的脫乙酰酶抑制劑化合物或其可藥用鹽，其具有下式I 其中R1為H、鹵素或直鏈C1-C6烷基(特別是甲基、乙基或正丙基，該甲基、乙基和正丙基取代基是未取代的或被一個或多個如下對烷基取代基所描述的取代基取代；R2選自H、C1-C10烷基(例如甲基、乙基或-CH2CH2-OH)、C4-C9環(huán)烷基、C4-C9雜環(huán)烷基、C4-C9雜環(huán)烷基烷基、環(huán)烷基烷基(例如，環(huán)丙基甲基)、芳基、雜芳基、芳基烷基(例如芐基)、雜芳基烷基(例如吡啶基甲基)、-(CH2)nC(O)R6、-(CH2)nOC(O)R6、氨基酰基、HON-C(O)-CH＝C(R1)-芳基-烷基-和-(CH2)nR7；R3和R4相同或不同并且彼此獨立地為H、C1-C6烷基、酰基或?；被蛘逺3和R4與和其相連的碳一起表示C＝O、C＝S或C＝NR8，或者R2與和其相連的氮一起以及R3與和其相連的碳一起可形成C4-C9雜環(huán)烷基、雜芳基、多環(huán)雜芳基、非芳族多環(huán)雜環(huán)，或者混合的芳基和非芳基多環(huán)雜環(huán)；R5選自H、C1-C6烷基、C4-C9環(huán)烷基、C4-C9雜環(huán)烷基、?；?、芳基、雜芳基、芳基烷基(例如芐基)、雜芳基烷基(例如吡啶基甲基)、芳族多環(huán)、非芳族多環(huán)、混合的芳基和非芳基多環(huán)、多環(huán)雜芳基、非芳族多環(huán)雜環(huán)和混合的芳基和非芳基多環(huán)雜環(huán)；n、n1、n2和n3相同或不同并且彼此獨立地選自0-6，當n1為1-6時，每一個碳原子可選擇性地且彼此獨立地被R3和/或R4取代；X和Y相同或不同并且彼此獨立地選自H、鹵素、C1-C4烷基，例如CH3和CF3、NO2、C(O)R1、OR9、SR9、CN和NR10R11；R6選自H、C1-C6烷基、C4-C9環(huán)烷基、C4-C9雜環(huán)烷基、環(huán)烷基烷基(例如，環(huán)丙基甲基)、芳基、雜芳基、芳基烷基(例如，芐基、2-苯基乙烯基)、雜芳基烷基(例如，吡啶基甲基)、OR12和NR13R14；R7選自OR15、SR15、S(O)R16、SO2R17、NR13R14和NR12SO2R6；R8選自H、OR15、NR13R14、C1-C6烷基、C4-C9環(huán)烷基、C4-C9雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳基烷基(例如，芐基)和雜芳基烷基(例如，吡啶基甲基)；R9選自C1-C4烷基，例如，CH3和CF3，C(O)-烷基，例如，C(O)CH3和C(O)CF3；R10和R11相同或不同并且彼此獨立地選自H、C1-C4烷基和-C(O)-烷基；R12選自H、C1-C6烷基、C4-C9環(huán)烷基、C4-C9雜環(huán)烷基、C4-C9雜環(huán)烷基烷基、芳基、混合的芳基和非芳基多環(huán)、雜芳基、芳基烷基(例如，芐基)和雜芳基烷基(例如，吡啶基甲基)；R13和R14相同或不同并且彼此獨立地選自H、C1-C6烷基、C4-C9環(huán)烷基、C4-C9雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳基烷基(例如，芐基)、雜芳基烷基(例如，吡啶基甲基)、氨基酰基，或者R13和R14與和其相連的氮合在一起為C4-C9雜環(huán)烷基、雜芳基、多環(huán)雜芳基、非芳族多環(huán)雜環(huán)或混合的芳基和非芳基多雜環(huán)；R15選自H、C1-C6烷基、C4-C9環(huán)烷基、C4-C9雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基和(CH2)mZR12；R16選自C1-C6烷基、C4-C9環(huán)烷基、C4-C9雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、多環(huán)雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基和(CH2)mZR12；R17選自C1-C6烷基、C4-C9環(huán)烷基、C4-C9雜環(huán)烷基、芳基、芳族多環(huán)、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、多環(huán)雜芳基和NR13R14；m為選自0-6的整數(shù)；且Z選自O、NR13、S和S(O)。
本發(fā)明的化合物適于在藥物組合物中用作活性成分，該藥物組合物對于治療細胞增殖性疾病特別有效。所述藥物組合物含有藥物有效量的本發(fā)明的活性成分，以及其它可藥用的賦形劑、載體、填料、稀釋劑等。本文中所用的術(shù)語“藥物有效量”是指為了達到治療效果、特別是抗腫瘤效果(例如抑制惡性癌細胞、良性腫瘤細胞或其它增殖性細胞的增殖)而需要給予患者的量。發(fā)明詳述本發(fā)明提供了異羥肟酸化合物(例如異羥肟酸)，該化合物是脫乙酰酶的抑制劑，優(yōu)選組蛋白脫乙酰酶的抑制劑。該異羥肟酸化合物特別適宜用來治療腫瘤，包括癌性腫瘤。本發(fā)明的異羥肟酸化合物具有以下結(jié)構(gòu)式I 其中R1為H、鹵素或直鏈C1-C6烷基(特別是甲基、乙基或正丙基，該甲基、乙基和正丙基取代基是未取代的或被一個或多個如下對烷基取代基所描述的取代基取代)；R2選自H、C1-C10烷基(優(yōu)選C1-C6烷基，例如甲基、乙基或-CH2CH2-OH)、C4-C9環(huán)烷基、C4-C9雜環(huán)烷基、C4-C9雜環(huán)烷基烷基、環(huán)烷基烷基(例如，環(huán)丙基甲基)、芳基、雜芳基、芳基烷基(例如芐基)、雜芳基烷基(例如吡啶基甲基)、-(CH2)nC(O)R6、-(CH2)nOC(O)R6、氨基?；?、HON-C(O)-CH＝C(R1)-芳基-烷基-和-(CH2)nR7；R3和R4相同或不同并且彼此獨立地為H、C1-C6烷基、?；蝓；被?，或者R3和R4與和其相連的碳一起表示C＝O、C＝S或C＝NR8，或者R2與和其相連的氮一起以及R3與和其相連的碳一起可形成C4-C9雜環(huán)烷基、雜芳基、多環(huán)雜芳基、非芳族多環(huán)雜環(huán)或混合的芳基和非芳基多環(huán)雜環(huán)；R5選自H、C1-C6烷基、C4-C9環(huán)烷基、C4-C9雜環(huán)烷基、?；?、芳基、雜芳基、芳基烷基(例如芐基)、雜芳基烷基(例如吡啶基甲基)、芳族多環(huán)、非芳族多環(huán)、混合的芳基和非芳基多環(huán)、多環(huán)雜芳基、非芳族多環(huán)雜環(huán)和混合的芳基和非芳基多環(huán)雜環(huán)；n、n1、n2和n3相同或不同并且彼此獨立地選自0-6時，當n1為1-6，每一個碳原子可選擇性地且彼此獨立地被R3和/或R4取代；X和Y相同或不同并且彼此獨立地選自H、鹵素、C1-C4烷基，例如CH3和CF3、NO2、C(O)R1、OR9、SR9、CN和NR10R11；R6選自H、C1-C6烷基、C4-C9環(huán)烷基、C4-C9雜環(huán)烷基、環(huán)烷基烷基(例如，環(huán)丙基甲基)、芳基、雜芳基、芳基烷基(例如，芐基、2-苯基乙烯基)、雜芳基烷基(例如，吡啶基甲基)、OR12和NR13R14；R7選自OR15、SR15、S(O)R16、SO2R17、NR13R14和NR12SO2R6；R8選自H、OR15、NR13R14、C1-C6烷基、C4-C9環(huán)烷基、C4-C9雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳基烷基(例如，芐基)和雜芳基烷基(例如，吡啶基甲基)；R9選自C1-C4烷基，例如，CH3和CF3，C(O)-烷基，例如C(O)CH3和C(O)CF3；R10和R11相同或不同并且彼此獨立地選自H、C1-C4烷基和-C(O)-烷基；R12選自H、C1-C6烷基、C4-C9環(huán)烷基、C4-C9雜環(huán)烷基、C4-C9雜環(huán)烷基烷基、芳基、混合的芳基和非芳基多環(huán)、雜芳基、芳基烷基(例如，芐基)和雜芳基烷基(例如，吡啶基甲基)；R13和R14相同或不同并且彼此獨立地選自H、C1-C6烷基、C4-C9環(huán)烷基、C4-C9雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳基烷基(例如，芐基)、雜芳基烷基(例如，吡啶基甲基)、氨基?；蛘逺13和R14與和其相連的氮一起為C4-C9雜環(huán)烷基、雜芳基、多環(huán)雜芳基、非芳族多環(huán)雜環(huán)或混合的芳基和非芳基多環(huán)雜環(huán)；R15選自H、C1-C6烷基、C4-C9環(huán)烷基、C4-C9雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基和(CH2)mZR12；R16選自C1-C6烷基、C4-C9環(huán)烷基、C4-C9雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、
多環(huán)雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基和(CH2)mZR12；R17選自C1-C6烷基、C4-C9環(huán)烷基、C4-C9雜環(huán)烷基、芳基、芳族多環(huán)、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、多環(huán)雜芳基和NR13R14；m為選自0-6的數(shù)；且Z選自O、NR13、S和S(O)，或其可藥用鹽。
可以理解，未取代的含義是指不存在取代基，或者取代基僅為氫。
鹵素取代基選自氟、氯、溴和碘，優(yōu)選氟或氯。
烷基取代基包括直鏈和支鏈的C1-C6烷基，除非另有說明。適宜的直鏈和支鏈的C1-C6烷基取代基的例子包括甲基、乙基、正丙基、2-丙基、正丁基、仲丁基、叔丁基等。除非另有說明，烷基取代基包括未取代的烷基和被一個或多個適宜的取代基取代的烷基，所述的取代基包括不飽和鍵(即存在一個或多個C-C雙鍵或叁鍵)、酰基、環(huán)烷基、鹵素、氧基烷基、烷基氨基、氨基烷基、酰基氨基和OR15，例如烷氧基。優(yōu)選的烷基的取代基包括鹵素、羥基、烷氧基、氧基烷基、烷基氨基和氨基烷基。
環(huán)烷基取代基包括C3-C9環(huán)烷基，例如環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基等，除非另有說明。除非另有說明，環(huán)烷基取代基包括未取代的環(huán)烷基和被一個或多個適宜的取代基取代的環(huán)烷基，所述取代基包括C1-C6烷基、鹵素、羥基、氨基烷基、氧基烷基、烷基氨基和OR15，例如烷氧基。優(yōu)選的環(huán)烷基的取代基包括鹵素、羥基、烷氧基、氧基烷基、烷基氨基和氨基烷基。
上述對烷基和環(huán)烷基取代基的討論也適用于其它取代基的烷基部分，例如(但不僅限于)，烷氧基、烷基胺、烷基酮、芳基烷基、雜芳基烷基、烷基磺?；屯榛ト〈?。
雜環(huán)烷基取代基包括包含1至3個選自氮、硫和氧的雜原子的3-9元脂族環(huán)，例如4-7元脂族環(huán)。適宜的雜環(huán)烷基取代基的實例包括吡咯烷基、四氫呋喃基、四氫噻吩基、哌啶基、哌嗪基、四氫吡喃基、嗎啉基、1，3-二氮雜環(huán)庚烷、1，4-二氮雜環(huán)庚烷、1，4-氧氮雜環(huán)庚烷和1，4-氧硫雜環(huán)庚烷。除非另有說明，該環(huán)是未取代的或在碳原子上被一個或多個適宜的取代基取代，所述取代基包括C1-C6烷基、C4-C9環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳基烷基(例如，芐基)和雜芳基烷基(例如，吡啶基甲基)、鹵素、氨基、烷基氨基和OR15，例如烷氧基。除非另有說明，氮雜原子為未取代的或被下述基團取代H、C1-C4烷基、芳基烷基(例如，芐基)和雜芳基烷基(例如，吡啶基甲基)、?；被；?、烷基磺酰基和芳基磺?；?。
環(huán)烷基烷基取代基包括式-(CH2)n5-環(huán)烷基的化合物，其中，n5為1-6。適宜的環(huán)烷基烷基取代基包括環(huán)戊基甲基、環(huán)戊基乙基、環(huán)己基甲基等。該取代基為未取代的或在烷基部分或環(huán)烷基部分被適宜的取代基取代，所述取代基包括以上關(guān)于烷基和環(huán)烷基所列的取代基。
芳基取代基包括未取代的苯基和被一個或多個適宜的取代基取代的苯基，所述取代基包括C1-C6烷基、環(huán)烷基烷基(例如，環(huán)丙基甲基)、O(CO)烷基、氧基烷基、鹵素、硝基、氨基、烷基氨基、氨基烷基、烷基酮、腈、羧基烷基、烷基磺?；?、氨基磺?；⒎蓟酋；蚈R15，例如烷氧基。優(yōu)選的取代基包括C1-C6烷基、環(huán)烷基烷基(例如，環(huán)丙基甲基)、烷氧基、氧基烷基、鹵素、硝基、氨基、烷基氨基、氨基烷基、烷基酮、腈、羧基烷基、烷基磺?；?、芳基磺?；桶被酋；?。適宜的芳基的實例包括C1-C4烷基苯基、C1-C4烷氧基苯基、三氟甲基苯基、甲氧基苯基、羥基乙基苯基、二甲基氨基苯基、氨基丙基苯基、乙氧羰基苯基、甲磺?；交图妆交酋；交?br> 芳族多環(huán)包括萘基和被一個或多個適宜的取代基取代的萘基，所述取代基包括C1-C6烷基、環(huán)烷基烷基(例如，環(huán)丙基甲基)、氧基烷基、鹵素、硝基、氨基、烷基氨基、氨基烷基、烷基酮、腈、羧基烷基、烷基磺?；⒎蓟酋；被酋；蚈R15，例如烷氧基。
雜芳基取代基包括具有含一個或多個雜原子、例如1-4個選自N、O和S的雜原子的5-7元芳環(huán)的化合物。典型的雜芳基取代基包括呋喃基、噻吩基、吡咯基、吡唑基、三唑基、噻唑基、噁唑基、吡啶基、嘧啶基、異噁唑基、吡嗪基等。除非另有說明，雜芳基取代基是未取代的或在碳原子上被一個或多個適宜的取代基取代，所述取代基包括烷基、如上所述的烷基取代基和另一個雜芳基取代基。氮原子是未取代的或例如被R13取代；特別有用的N取代基包括H、C1-C4烷基、?；?、氨基?；突酋；?。
芳基烷基取代基包括下式的基團-(CH2)n5-芳基、-(CH2)n5-1-(CH芳基)-(CH2)n5-芳基或-(CH2)n5-1CH(芳基)(芳基)，其中，芳基和n5如前所定義。這種芳基烷基取代基包括芐基、2-苯基乙基、1-苯基乙基、甲苯基-3-丙基、2-苯基丙基、二苯基甲基、2-二苯基乙基、5，5-二甲基-3-苯基戊基等。芳基烷基取代基是未取代的或如前對烷基和芳基取代基所述在烷基部分或芳基部分或同時在兩個部分被取代。
雜芳基烷基取代基包括式-(CH2)n5-雜芳基的基團，其中，雜芳基和n5如前所定義，并且橋連基團連接在雜芳基部分的碳或氮上，例如2-、3-或4-吡啶基甲基、咪唑基甲基、喹啉基乙基和吡咯基丁基。雜芳基烷基取代基是未取代的或如前對雜芳基和烷基取代基所述被取代。
氨基?；〈ㄊ?C(O)-(CH2)n-C(H)(NR13R14)-(CH2)n-R5的基團，其中，n、R13、R14和R5如前所定義。適宜的氨基?；〈ㄌ烊缓头翘烊话被崂绺拾滨；-色氨?；?、L-賴氨?；?、D-或L-高絲氨酰基、4-氨基丁酰基、±-3-氨基-4-己烯?；?br> 非芳族多環(huán)取代基包括雙環(huán)和三環(huán)稠合環(huán)系，其中，每一個環(huán)可為4-9元環(huán)，并且每個環(huán)可包含0、1或多個雙鍵和/或叁鍵。適宜的非芳族多環(huán)的實例包括十氫萘、八氫茚、全氫苯并環(huán)庚烯、全氫苯并-[f]-薁。該取代基是未取代的或如前對環(huán)烷基所述被取代。
混合的芳基和非芳基多環(huán)取代基包括雙環(huán)和三環(huán)稠合環(huán)系，其中，每一個環(huán)可為4-9元環(huán)，并且至少一個環(huán)是芳環(huán)。適宜的混合的芳基和非芳基多環(huán)的實例包括亞甲二氧基苯基、二-亞甲二氧基苯基、1，2，3，4-四氫萘、二苯并環(huán)庚烷、二氫蒽、9H-芴。該取代基是未取代的或如前對環(huán)烷基所述被取代。
多環(huán)雜芳基取代基包括雙環(huán)和三環(huán)稠合環(huán)系，其中，每一個環(huán)可以彼此獨立地為5或6元環(huán)并且包含一個或多個，例如1、2、3或4個選自O、N或S的雜原子，并且該稠合的環(huán)系為芳香族的。適宜的多環(huán)雜芳基環(huán)系的實例包括喹啉、異喹啉、吡啶并吡嗪、吡咯并吡啶、呋喃并吡啶、吲哚、苯并呋喃、苯并噻吩、苯并吲哚、苯并噁唑、吡咯并喹啉等。除非另有說明，多環(huán)雜芳基取代基是未取代的或在碳原子上被一個或多個適宜的取代基取代，所述取代基包括烷基、如前所述的烷基取代基和式-O-(CH2CH＝CH(CH3)(CH2))1-3H的取代基。氮原子是未取代的或例如被R13取代；特別有用的N取代基包括H、C1-C4烷基、?；?、氨基酰基和磺?；?br> 非芳族多環(huán)雜環(huán)取代基包括雙環(huán)和三環(huán)稠合環(huán)系，其中，每一個環(huán)可為4-9元環(huán)，包含一個或多個雜原子，例如1、2、3或4個選自O、N或S的雜原子，并且包含0個或一個或多個C-C雙鍵或叁鍵。適宜的非芳族多環(huán)雜環(huán)的實例包括己糖醇、順-全氫-環(huán)庚三烯并[b]吡啶基、十氫-苯并[f][1，4]氧氮雜環(huán)庚三烯基、2，8-二氧雜二環(huán)[3.3.0]辛烷、六氫-噻吩并[3，2-b]噻吩、全氫吡咯并[3，2-b]吡咯、全氫萘啶、全氫-1H-二環(huán)戊二烯并[b，e]吡喃。除非另有說明，非芳族多環(huán)雜環(huán)取代基是未取代的或在碳原子上被一個或多個取代基取代，所述取代基包括如前所述的烷基和烷基取代基。氮原子是未取代的或例如被R13取代；特別有用的N取代基包括H、C1-C4烷基、?；被；突酋；?。
混合的芳基和非芳基多環(huán)雜環(huán)取代基包括雙環(huán)和三環(huán)稠合環(huán)系，其中，每一個環(huán)可為4-9元環(huán)，包含一個或多個選自O、N或S的雜原子，并且這些環(huán)中至少有一個必須為芳環(huán)。適宜的混合的芳基和非芳基多環(huán)雜環(huán)的實例包括2，3-二氫吲哚、1，2，3，4-四氫喹啉、5，11-二氫-10H-二苯并[b，e][1，4]二氮雜環(huán)庚三烯、5H-二苯并[b，e][1，4]二氮雜環(huán)庚三烯、1，2-二氫吡咯并[3，4-b][1，5]苯并二氮雜環(huán)庚三烯、1，5-二氫-吡啶并[2，3-b][1，4]二氮雜環(huán)庚三烯-4-酮、1，2，3，4，6，11-六氫-苯并[b]吡啶并[2，3-e][1，4]二氮雜環(huán)庚三烯-5-酮。除非另有說明，混合的芳基和非芳基多環(huán)雜環(huán)取代基是未取代的或在碳原子上被一個或多個適宜的取代基取代，所述的取代基包括-N-OH、＝N-OH、烷基和如前所述的烷基取代基。氮原子是未取代的或例如被R13取代；特別有用的N取代基包括H、C1-C4烷基、?；?、氨基?；突酋；?。
氨基取代基包括伯、仲和叔胺和其鹽形式，季胺。氨基取代基的實例包括單和二烷基氨基、單和二芳基氨基、單和二芳基烷基氨基、芳基-芳基烷基氨基、烷基-芳基氨基、烷基-芳基烷基氨基等。
磺?；〈ㄍ榛酋；头蓟酋；?，例如甲磺酰基、苯磺?；⒓妆交酋；取?br> ?；〈ㄏ率降幕鶊F-C(O)-W、-OC(O)-W、-C(O)-O-W和-C(O)NR13R14，其中，W為R16、H或環(huán)烷基烷基。
酰基氨基取代基包括下式的基團-N(R12)C(O)-W、-N(R12)C(O)-O-W和-N(R12)C(O)-NHOH，其中R12和W如前所定義。
R2取代基HON-C(O)-CH＝C(R1)-芳基-烷基-為下式的基團 其中n4為0-3且X和Y如前所定義。
各取代基的優(yōu)選值如下R1為H、鹵素或直鏈C1-C4烷基；R2選自H、C1-C6烷基、C4-C9環(huán)烷基、C4-C9雜環(huán)烷基、環(huán)烷基烷基、芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、-(CH2)nC(O)R6、氨基?；?(CH2)nR7；R3和R4相同或不同并且彼此獨立地選自H和C1-C6烷基，或者R3和R4與和其相連的碳一起表示C＝O、C＝S或C＝NR8；R5選自H、C1-C6烷基、C4-C9環(huán)烷基、C4-C9雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、芳族多環(huán)、非芳族多環(huán)、混合的芳基和非芳基多環(huán)、多環(huán)雜芳基、非芳族多環(huán)雜環(huán)和混合的芳基和非芳基多環(huán)雜環(huán)；n、n1、n2和n3相同或不同并且彼此獨立地選自0-6，當n1為1-6時，每一個碳原子為未取代的或彼此獨立地被R3和/或R4取代；X和Y相同或不同并且彼此獨立地選自H、鹵素、C1-C4烷基、CF3、NO2、C(O)R1、OR9、SR9、CN和NR10R11；R6選自H、C1-C6烷基、C4-C9環(huán)烷基、C4-C9雜環(huán)烷基、環(huán)烷基烷基、芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、OR12和NR13R14；R7選自OR15、SR15、S(O)R16、SO2R17、NR13R14和NR12SO2R6；R8選自H、OR15、NR13R14、C1-C6烷基、C4-C9環(huán)烷基、C4-C9雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳基烷基和雜芳基烷基；R9選自C1-C4烷基和C(O)-烷基；R10和R11相同或不同并且彼此獨立地選自H、C1-C4烷基和-C(O)-烷基；R12選自H、C1-C6烷基、C4-C9環(huán)烷基、C4-C9雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳基烷基和雜芳基烷基；R13和R14相同或不同并且彼此獨立地選自H、C1-C6烷基、C4-C9環(huán)烷基、C4-C9雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基和氨基?；籖15選自H、C1-C6烷基、C4-C9環(huán)烷基、C4-C9雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基和(CH2)mZR12；R16選自C1-C6烷基、C4-C9環(huán)烷基、C4-C9雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基和(CH2)mZR12；R17選自C1-C6烷基、C4-C9環(huán)烷基、C4-C9雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基和NR13R14；m為選自0-6的整數(shù)；和Z選自O、NR13、S、S(O)。
有用的式I化合物包括以下的化合物，其中，R1、X、Y、R3和R4中的每一個均為H，包括那些n2和n3之一為0而另一個為1的化合物，特別是其中R2為H或-CH2-CH2-OH的化合物。
一種適宜的異羥肟酸類化合物為式Ia的化合物或其可藥用鹽 其中n4為0-3，R2選自H、C1-C6烷基、C4-C9環(huán)烷基、C4-C9雜環(huán)烷基、環(huán)烷基烷基、芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、-(CH2)nC(O)R6、氨基?；?(CH2)nR7；R5’為雜芳基、雜芳基烷基(例如，吡啶基甲基)、芳族多環(huán)、非芳族多環(huán)、混合的芳基和非芳基多環(huán)、多環(huán)雜芳基或混合的芳基和非芳基多環(huán)雜環(huán)。
另一種適宜的異羥肟酸類化合物為下式Ia的化合物或其可藥用鹽 其中n4為0-3，R2選自H、C1-C6烷基、C4-C9環(huán)烷基、C4-C9雜環(huán)烷基、環(huán)烷基烷基、芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、-(CH2)nC(O)R6、氨基?；?(CH2)nR7；R5’為芳基、芳基烷基、芳族多環(huán)、非芳族多環(huán)和混合的芳基和非芳基多環(huán)；特別是芳基，例如對氟苯基、對氯苯基、對-O-C1-C4-烷基苯基，例如對甲氧基苯基和對-C1-C4-烷基苯基；和芳基烷基，例如芐基、鄰、間或?qū)ΨS基、鄰、間或?qū)β绕S基、鄰、間或?qū)?單、二或三-O-C1-C4-烷基芐基，例如鄰、間或?qū)?甲氧基芐基、間，對二乙氧基芐基、鄰、間、對三甲氧基芐基和鄰、間或?qū)?單、二或三C1-C4-烷基苯基，例如對-甲基，間間-二乙基苯基。另一類令人感興趣的是式Ib的化合物或其可藥用鹽 其中R2’選自H、C1-C6烷基、C4-C6環(huán)烷基、環(huán)烷基烷基(例如，環(huán)丙基甲基)、-(CH2)2-4OR21，其中，R21為H、甲基、乙基、丙基和異丙基，且R5”為未取代的1H-吲哚-3-基、苯并呋喃-3-基或喹啉-3-基或取代的1H-吲哚-3-基，例如5-氟-1H-吲哚-3-基或5-甲氧基-1H-吲哚-3-基、苯并呋喃-3-基或喹啉-3-基。
另一類令人感興趣的異羥肟酸類化合物為下式Ic的化合物或其可藥用鹽 其中含Z1的環(huán)為芳族或非芳族環(huán)，所述非芳族環(huán)為飽和或不飽和的，Z1為O、S或N-R20，R18為H、鹵素、C1-C6烷基(甲基、乙基、叔丁基)、C3-C7環(huán)烷基、芳基，例如未取代的苯基或被4-OCH3或4-CF3取代的苯基，或雜芳基，例如2-呋喃基、2-噻吩基或2-、3-或4-吡啶基；R20為H、C1-C6烷基、C1-C6烷基-C3-C9環(huán)烷基(例如，環(huán)丙基甲基)、芳基、雜芳基、芳基烷基(例如，芐基)、雜芳基烷基(例如，吡啶基甲基)、?；?乙酰基、丙?；?、苯甲酰基)或磺?；?甲磺酰基、乙磺?；⒈交酋；⒓妆交酋；?；A1為1、2或3個取代基，其彼此獨立地為H、C1-C6烷基、-OR19、鹵素、烷基氨基、氨基烷基、鹵素或雜芳基烷基(例如，吡啶基甲基)，R19選自H、C1-C6烷基、C4-C9環(huán)烷基、C4-C9雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳基烷基(例如，芐基)、雜芳基烷基(例如，吡啶基甲基)和-(CH2CH＝CH(CH3)(CH2))1-3H；R2選自H、C1-C6烷基、C4-C9環(huán)烷基、C4-C9雜環(huán)烷基、環(huán)烷基烷基、芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、-(CH2)nC(O)R6、氨基酰基和-(CH2)nR7；v為0、1或2，p為0-3，并且q為1-5且r為0或者q為0且r為1-5，其它可變?nèi)〈缜八x。
特別有用的式Ic化合物為以下的化合物，其中，R2為H或-(CH2)pCH2OH，其中p為1-3，特別是其中R1為H的化合物；例如其中R1為H且X和Y均為H的化合物，和其中q為1-3且r為0的化合物，或其中q為0且r為1-3的化合物，特別是其中Z1為N-R20的化合物。在這些化合物中，優(yōu)選R2為H或-CH2-CH2-OH，并且q和r之和優(yōu)選為1。另一類令人感興趣的異羥肟酸化合物為式Id的化合物或其可藥用鹽 其中Z1為O、S或N-R20，R18為H、鹵素、C1-C6烷基(甲基、乙基、叔丁基)、C3-C7環(huán)烷基、芳基，例如，未取代的苯基或被4-OCH3或4-CF3取代的苯基，或雜芳基，R20為H、C1-C6烷基、C1-C6烷基-C3-C9環(huán)烷基(例如，環(huán)丙基甲基)、芳基、雜芳基、芳基烷基(例如，芐基)、雜芳基烷基(例如，吡啶基甲基)、酰基(乙?；⒈；⒈郊柞；?或磺酰基(甲磺?；?、乙磺?；⒈交酋；?、甲苯磺酰基)；A1為1、2或3個取代基，其彼此獨立地為H、C1-C6烷基、-OR19或鹵素，R19選自H、C1-C6烷基、C4-C9環(huán)烷基、C4-C9雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳基烷基(例如，芐基)和雜芳基烷基(例如，吡啶基甲基)；p為0-3，并且q為1-5且r為0或者q為0且r為1-5，其它可變?nèi)〈缜八x。
特別有用的式Id化合物為以下的化合物，其中，R2為H或-(CH2)pCH2OH，其中p為1-3，特別是其中R1為H的化合物；例如其中R1為H且X和Y均為H的化合物，和其中q為1-3且r為0的化合物，或其中q為0且r為1-3的化合物。在這些化合物中，R2優(yōu)選為H或-CH2-CH2-OH且q和r之和優(yōu)選為1。本發(fā)明進一步涉及式Ie的化合物或其可藥用鹽 可變化的取代基如前所定義。
特別有用的式Ie化合物為以下的化合物，其中，R18為H、氟、氯、溴、C1-C4烷基、取代的C1-C4烷基、C3-C7環(huán)烷基、未取代的苯基、在對位上取代的苯基或雜芳基(例如，吡啶基)環(huán)。
另一組有用的式Ie化合物為以下的化合物，其中，R2為H或-(CH2)pCH2OH，其中p為1-3，特別是其中R1為H的化合物；例如其中R1為H且X和Y均為H的化合物和其中q為1-3且r為0的化合物，或者其中q為0且r為1-3的化合物。在這些化合物中，R2優(yōu)選為H或-CH2-CH2-OH且q和r之和優(yōu)選為1。
另一組有用的式Ie化合物為以下的化合物，其中，R18為H、甲基、乙基、叔丁基、三氟甲基、環(huán)己基、苯基、4-甲氧基苯基、4-三氟甲基苯基、2-呋喃基、2-噻吩基或2-、3-或4-吡啶基，其中2-呋喃基、2-噻吩基和2-、3-或4-吡啶基取代基是未取代的或如前對雜芳基環(huán)所述被取代；R2為H或-(CH2)pCH2OH，其中，p為1-3；特別是其中R1為H且X和Y均為H的化合物，和其中q為1-3且r為0的化合物或其中q為0且r為1-3的化合物。在這些化合物中，R2優(yōu)選為H或-CH2-CH2-OH和q且r之和優(yōu)選為1。
其中R20為H或C1-C6烷基、特別是H的式Ie化合物是上述式Ie化合物各亞族中的重要化合物。
以下的化合物或其可藥用鹽是重要的式Ie化合物
N-羥基-3-[4-[[(2-羥基乙基)[2-(1H-吲哚-3-基)乙基]-氨基]甲基]苯基]-2E-2-丙烯酰胺，N-羥基-3-[4-[[[2-(1H-吲哚-3-基)乙基]-氨基]甲基]苯基]-2E-2-丙烯酰胺，和N-羥基-3-[4-[[[2-(2-甲基-1H-吲哚-3-基)-乙基]-氨基]甲基]苯基]-2E-2-丙烯酰胺。
本發(fā)明進一步涉及式If的化合物或其可藥用鹽 可變?nèi)〈缜八x。
有用的式If化合物為以下的化合物，其中，R2為H或-(CH2)pCH2OH，其中p為1-3，特別是其中R1為H的化合物；例如其中R1為H且X和Y均為H的化合物，和其中q為1-3且r為0的化合物，或者其中q為0且r為1-3的化合物。在這些化合物中，R2優(yōu)選為H或-CH2-CH2-OH且q和r之和優(yōu)選為1。
以下的化合物或其可藥用鹽是重要的式If化合物N-羥基-3-[4-[[[2-(苯并呋喃-3-基)-乙基]-氨基]甲基]苯基]-2E-2-丙烯酰胺。
上述化合物通常以其可藥用鹽的形式使用?？伤幱名}包括其可藥用堿加成鹽和酸加成鹽，例如，金屬鹽，例如堿金屬和堿土金屬鹽、銨鹽、有機胺加成鹽以及氨基酸加成鹽和磺酸鹽。酸加成鹽包括無機酸加成鹽，如鹽酸鹽、硫酸鹽和磷酸鹽；有機酸加成鹽，如烷基磺酸鹽、芳基磺酸鹽、乙酸鹽、馬來酸鹽、富馬酸鹽、酒石酸鹽、檸檬酸鹽和乳酸鹽。金屬鹽的實例為堿金屬鹽，如鋰鹽、鈉鹽和鉀鹽；堿土金屬鹽，如鎂鹽和鈣鹽；鋁鹽和鋅鹽。銨鹽的實例為銨鹽和四甲基銨鹽。有機胺加成鹽的實例為與嗎啉和哌啶的鹽。氨基酸加成鹽的實例為與甘氨酸、苯丙氨酸、谷氨酸和賴氨酸的鹽?；撬猁}包括甲磺酸鹽、甲苯磺酸鹽和苯磺酸鹽。
正如本領(lǐng)域技術(shù)人員顯而易見的，本發(fā)明的許多脫乙酰酶抑制劑化合物均包含不對稱碳原子。因此，應當理解，本發(fā)明的范圍包括這些單獨的立體異構(gòu)體。
本發(fā)明的異羥肟酸化合物可通過已知的有機合成方法制備。例如，異羥肟酸化合物可通過如下方法制備使4-甲?；夤鹚峒柞ヅc色胺反應，然后將反應物轉(zhuǎn)化成異羥肟酸化合物。舉例來說，4-甲?；夤鹚峒柞?是通過使4-甲?；夤鹚?進行酸催化的酯化反應制備的(Bull.Chem.Soc.Jpn.1995；682355-2362)。4-甲酰基肉桂酸甲酯2的另一種制備方法是使丙烯酸甲酯4與4-溴苯甲醛5進行Pd催化的偶聯(lián)反應。 其它原料可由4-羰基苯甲醛6制備，制備醛9的例舉性方法如下所示。4-羰基苯甲醛6中的羧酸可通過用甲硅烷基氯(例如，叔丁基二甲基氯硅烷)和堿(例如三乙胺)在適宜的溶劑(例如，二氯甲烷)中處理以甲硅烷基酯(例如，叔丁基二甲基甲硅烷基酯)的形式進行保護。將形成的甲硅烷基酯7在堿(例如，氫化鈉)的存在下，在適宜的溶劑(例如，四氫呋喃(THF))中，用膦酸酯(例如，2-膦?；崛阴?進行烯化反應(例如，Horner-Emmons烯化反應)。將形成的二酯用酸(例如，鹽酸水溶液)處理，使甲硅烷基酯水解而得到酸8。在溶劑(例如，THF)中用例如硼烷-二甲基硫配合物選擇性地還原羧酸8，得到中間體醇。可通過各種公知的方法將中間體醇氧化成醛9，所述方法包括但不限于Swern氧化、Dess-Martin periodinane氧化、Moffatt氧化等。 可將醛原料2或9還原胺化而得到仲胺或叔胺。例如，使4-甲?；夤鹚峒柞?與色胺10反應，用三乙酰氧基硼氫化鈉(NaBH(OAc)3)作為還原劑，反應在作為溶劑的二氯乙烷(DCE)中進行，得到胺11?？刹捎闷渌€原劑，如硼氫化鈉(NaBH4)和氰基硼氫化鈉(NaBH3CN)，在其它溶劑或溶劑混合物中、在存在或不存在酸催化劑(例如，乙酸和三氟乙酸)的條件下進行。胺11可以通過用50％羥基胺水溶液在適宜的溶劑(例如，THF，在堿如NaOH的存在下)中進行處理直接轉(zhuǎn)化成異羥肟酸12。其它形成異羥肟酸酯的方法是公知的，包括使酯與羥基胺鹽酸鹽及一種堿(例如，氫氧化鈉或甲醇鈉)在適宜的溶劑或溶劑混合物(例如，甲醇、乙醇或甲醇/THF)中進行反應。 醛2可用各種胺進行還原胺化，例如但不限于表1所示的那些。形成的酯可通過列出的方法轉(zhuǎn)化成目的物異羥肟酸化合物。表1 本發(fā)明化合物的另一種合成方法是將4-甲?；夤鹚?進行還原胺化，例如，按照以下所示用3-苯基丙基胺13進行還原胺化，采用例如NaBH3CN作為還原劑在MeOH中進行，用HOAc作為催化劑。形成的氨基酸14的堿性氮可通過例如與二碳酸二叔丁基酯反應以叔丁氧基氨基甲酸酯(BOC)的形式保護而得到15。
可將羧酸與保護的羥基胺(例如，O-三苯甲基羥基胺)進行偶聯(lián)反應得到16，反應采用脫水劑(例如，1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(EDCD)和催化劑(例如，1-羥基苯并三唑水合物(HOBT))在適宜的溶劑(例如DMF)中進行。用強酸(例如，三氟乙酸(TFA))處理16得到本發(fā)明的異羥肟酸17。可通過該方法制備的化合物的其它實例是 叔胺化合物可通過許多方法制備。將30用煙醛32還原胺化得到酯34，反應采用NaBH3CN作為還原劑在二氯乙烷中進行，用HOAc作為催化劑。也可采用其它還原劑(例如NaBH4和NaBH(OAc)3)在其它溶劑或溶劑混合物中、在存在或不存在酸性催化劑(例如，乙酸、三氟乙酸等)的條件下進行反應。將酯34與HONH2·HCl、NaOH在甲醇中反應得到異羥肟酸36。 由該方法制備的叔胺化合物的例子包括但不限于表2所列的那些。表2 制備叔胺的另一種方法是在適宜的溶劑中，在堿的存在下，使仲胺與烷基化試劑反應。例如，在(i-Pr)2NEt的存在下加熱胺11和溴化物40的二甲亞砜(DMSO)溶液得到叔胺42。將叔胺42與HONH2·HCl、NaOH在MeOH中反應得到異羥肟酸43。可通過本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的方法除去甲硅烷基。例如，可將異羥肟酸43用酸如三氟乙酸或氟化物處理，生成羥基乙基化合物44。 異羥肟酸化合物或其鹽適用于制備藥物組合物，特別是具有脫乙酰酶、尤其是組蛋白脫乙酰酶抑制特性的藥物組合物。采用無胸腺小鼠進行的研究表明，異羥肟酸化合物會造成HDA抑制作用并增加體內(nèi)的組蛋白乙?；饔?，其可觸發(fā)與腫瘤生長抑制相關(guān)的基因表達的變化。
本發(fā)明進一步包括含有藥理學有效量的一種或多種上述化合物作為活性成分的藥物組合物。本發(fā)明的藥物組合物適于通過腸內(nèi)(如口服或直腸)和非腸道給藥的方式給藥于包括人在內(nèi)的哺乳動物，以用于治療腫瘤，其可單獨給藥或與一種或多種可藥用載體組合使用。
異羥肟酸化合物可用于與適于經(jīng)腸給藥或非腸道給藥的賦形劑或載體組合或混合而生產(chǎn)具有有效量化合物的藥物組合物。優(yōu)選片劑和明膠膠囊，其包含活性成分和(a)稀釋劑；(b)潤滑劑，(c)粘合劑(片劑)；如果需要的話，(d)崩解劑；和/或(e)吸附劑、著色劑、矯味劑和甜味劑?？勺⑸涞慕M合物優(yōu)選為等滲水溶液或水混懸液，栓劑優(yōu)選由脂肪乳液或懸浮液制備。組合物可進行滅菌和/或包含輔劑，例如防腐劑、穩(wěn)定劑、潤濕劑或乳化劑、溶解促進劑、調(diào)節(jié)滲透壓的鹽和/或緩沖劑。此外，組合物也可包含其它治療上有價值的物質(zhì)。組合物可分別按照常規(guī)的混合、制?；虬路椒▉碇苽?，并包含優(yōu)選約1-50％的活性成分。
適宜的制劑還包括非腸道給藥制劑，包括含水和非水無菌注射溶液，其可包含抗氧化劑、緩沖劑、抑菌劑和使制劑與目的接受者的血液等滲的溶質(zhì)；和含水和非水無菌混懸液，其可包含助懸劑和增稠劑。該制劑可以存在于單劑量或多劑量容器中，例如，密封的安瓿和小瓶，并可貯存于冷凍干燥(凍干)條件下，在臨使用前，僅需要加入無菌液體載體，例如注射用水?，F(xiàn)場制備的注射溶液和混懸液可由前面描述的無菌粉末、顆粒和片劑制備。
如前所述，本發(fā)明的化合物可用于治療增殖性疾病。增殖性疾病主要是腫瘤疾病(或癌)(和/或各種轉(zhuǎn)移瘤)。本發(fā)明的化合物特別適用于治療如下腫瘤乳癌、泌尿生殖器癌、肺癌、胃腸癌、表皮樣癌、黑素瘤、卵巢癌、胰腺癌、成神經(jīng)細胞瘤、頭和/或頸部的癌癥或膀胱癌或，或更廣義的腎、腦或胃癌；特別是(i)乳腺腫瘤；表皮樣腫瘤，例如表皮樣頭和/或頸部腫瘤或口腔腫瘤；肺腫瘤，例如小細胞或非小細胞肺腫瘤；胃腸腫瘤，例如，結(jié)腸直腸腫瘤；或泌尿生殖器腫瘤，例如，前列腺腫瘤(特別是激素-頑固性前列腺腫瘤)；或(ii)采用其它化學治療劑難以治療的增殖性疾??；或(iii)由于多藥耐受性造成的用其它化學治療劑難以治療的腫瘤。
本發(fā)明從廣義上說，增殖性疾病還可以是過度增殖性疾病，例如，白血病、增生、纖維變性(特別是肺纖維變性，但也可以是其它類型的纖維變性，例如腎纖維變性)、血管生成、牛皮癬、動脈粥樣硬化和血管內(nèi)平滑肌增殖，例如狹窄或血管成形術(shù)后的再狹窄。
在提及腫瘤、腫瘤性疾病、癌或惡性腫瘤時，也暗指在原始器官或組織和/或在任何其它位置的轉(zhuǎn)移瘤，而不論腫瘤和/或轉(zhuǎn)移瘤的位置。
本發(fā)明的化合物對增殖性細胞比起對正常細胞來具有選擇性的毒性或更大的毒性，特別是對人體的癌細胞如癌性腫瘤，該化合物具有顯著的抗增殖作用并能促進分化，例如細胞周期的停滯和細胞凋亡。此外，異羥肟酸化合物還可誘導p21，細胞周期蛋白-CDK相互作用蛋白，其可在各種細胞系中誘導細胞凋亡或G1的停滯。
下述實施例用于說明本發(fā)明，不應看作是對本發(fā)明的限制。實施例P1N-羥基-3-[4-[[[2-(1H-吲哚-3-基)-乙基]-氨基]甲基]苯基]-2E-2-丙烯酰胺的制備通過添加4-甲?；夤鹚?25g，0.143mol)的MeOH溶液和HCl(6.7g，0.18mol)生成4-甲?；夤鹚峒柞?。將形成的懸浮液加熱回流3小時，冷卻然后蒸發(fā)至干。將得到的黃色固體溶解于EtOAc中，溶液用飽和NaHCO3洗滌，干燥(MgSO4)并蒸發(fā)得到一種淺黃色固體，其不經(jīng)純化直接使用(25.0g，92％)。向色胺(16.3g，100mmol)和4-甲?；夤鹚峒柞?19g，100mmol)的二氯乙烷溶液中加入NaBH(OAc)3(21g，100mmol)。4小時后，將混合物用10％K2CO3溶液稀釋，分離出有機相，用CH2Cl2萃取水溶液。將合并后的有機萃取液干燥(Na2SO4)，蒸發(fā)，將殘余物進行快速色譜純化，得到3-(4-{[2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基]-甲基}-苯基)-(2E)-2-丙烯酸甲酯(29g)。將KOH(12.9g 87％，0.2m0l)的MeOH溶液(100mL)加至HONH2·HCl(13.9g，0.2mol)的MeOH溶液(200mL)中，有沉淀生成。15分鐘后，將混合物過濾，濾餅用MeOH洗滌，將濾液真空蒸發(fā)至大約75mL。將混合物過濾，用MeOH將體積調(diào)節(jié)至100mL。將形成的2M HONH2溶液在N2氣氛下于-20℃貯藏2周。然后將3-(4-{[2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基]-甲基}-苯基)-(2E)-2-丙烯酸甲酯(2.20g，6.50mmol)加至2M HONH2的MeOH溶液(30mL，60mmol)中，然后加入KOH(420mg，6.5mmol)的MeOH溶液(5mL)。2小時后，向反應液中加入干冰，然后將混合物蒸發(fā)至干。將殘余物溶解于熱MeOH(20mL)中，冷卻并在-20℃下貯藏過夜。將形成的懸浮液過濾，將固體用冰冷的MeOH洗滌然后真空干燥，得到N-羥基-3-[4-[[[2-(1H-吲哚-3-基)-乙基]-氨基]甲基]苯基]-2E-2-丙烯酰胺(m/z 336[MH+])。實施例P2N-羥基-3-[4-[[(2-羥基乙基)[2-(1H-吲哚-3-基)-乙基]-氨基]甲基]苯基]-2E-2-丙烯酰胺的制備將3-(4-{[2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基]-甲基}-苯基)-(2E)-2-丙烯酸甲酯(12.6g，37.7mmol)、(2-溴乙氧基)-叔丁基二甲基硅烷(12.8g，53.6mmol)、(i-Pr)2NEt(7.42g，57.4mmol)的DMSO(100mL)溶液加熱至50℃。8小時后，將混合物在CH2Cl2/H2O間分配。將有機層干燥(Na2SO4)并蒸發(fā)。將殘余物進行硅膠色譜處理，得到3-[4-({[2-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-乙基]-[2-(1H-吲哚-3-基)-乙基]-氨基}-甲基)-苯基]-(2E)-2-丙烯酸甲酯(13.1g)。隨后進行實施例P1中制備異羥肟酸化合物所描述的過程，將3-[4-({[2-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-乙基]-[2-(1H-吲哚-3-基)-乙基]-氨基}-甲基)-苯基]-(2E)-2-丙烯酸甲酯(5.4g，11mmol)轉(zhuǎn)化成N-羥基-3-[4-({[2-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-乙基]-[2-(1H-吲哚-3-基)-乙基]-氨基}-甲基)-苯基]-(2E)-2-丙烯酰胺(5.1g)并將其不經(jīng)純化直接使用。然后，將異羥肟酸(5.0g，13.3mmol)溶解于95％TFA/H2O(59mL)中，加熱至40-50℃加熱4小時。將混合物蒸發(fā)，將殘余物用反相HPLC進行純化，得到三氟乙酸鹽形式的N-羥基-3-[4-[[(2-羥基乙基)[2-(1H-吲哚-3-基)-乙基]-氨基]甲基]苯基]-2E-2-丙烯酰胺(m/z 380[MH+])。實施例P3N-羥基-3-[4-[[[2-(2-甲基-1H-吲哚-3-基)-乙基]-氨基]甲基]苯基]-2E-2-丙烯酰胺的制備將LiAlH4(17g，445mmol)在無水THF(1000mL)中的懸浮液冷卻至0℃，在30分鐘內(nèi)，分批加入2-甲基吲哚-3-乙醛酰胺(30g，148mmol)。將混合物在室溫下攪拌30分鐘，然后保持在回流下3小時。將反應混合物冷卻至0℃，并用H2O(17ml)、15％NaOH(水溶液，17ml)和H2O(51ml)處理。將混合物用MgSO4處理，過濾，將濾液蒸發(fā)得到2-甲基色胺，將其溶解于MeOH中。向溶液中加入4-甲酰基肉桂酸甲酯(16.9g，88.8mmol)，然后加入NaBH3CN(8.4g)和AcOH(1當量)。1小時后，將反應混合物用NaHCO3(水溶液)稀釋并用EtOAc萃取。將有機萃取液干燥(MgSO4)，過濾和蒸發(fā)。將殘余物用色譜法純化，得到3-(4-{[2-(2-甲基-1H-吲哚-3-基)-乙基氨基]-甲基}-苯基)-(2E)-2-丙烯酸甲酯。將該酯溶解于MeOH中，加入1.0M HCl/二噁烷(1-1.5當量)，然后加入Et2O。將形成的沉淀過濾，固體用Et2O洗滌，充分干燥后得到3-(4-{[2-(2-甲基-1H-吲哚-3-基)-乙基氨基]-甲基}-苯基)-(2E)-2-丙烯酸甲酯鹽酸鹽。將1.0M NaOH(水溶液，85mL)加至冰冷的甲酯鹽酸鹽(14.9g，38.6mmol)和HONH2(50％水溶液，24.0mL，約391.2mmol)的溶液中。6小時后，將冰冷的溶液用H2O和NH4Cl(水溶液，0.86M，100mL)稀釋。將形成的沉淀過濾，用H2O洗滌并干燥得到N-羥基-3-[4-[[[2-(2-甲基-1H-吲哚-3-基)-乙基]-氨基]甲基]苯基]-2E-2-丙烯酰胺(m/z 350[MH+])。實施例1-265下述化合物可按照與實施例P1、P2和P3所述類似的方法制備。 實施例1-265的化合物顯示出HDA酶IC50值為約0.005-約0.5μM。實施例B1細胞系H1299(人肺癌細胞)和HCT116(結(jié)腸腫瘤細胞)從美國典型培養(yǎng)物保藏中心(American Type Culture Collection)，Rockville，MD獲得。該細胞系不受支原體污染(Gen-Probe，Inc.的快速檢測系統(tǒng)，San Diego，CA)和病毒污染(MA BioServices，Inc.的MAP檢測，Rockville，MD)。使細胞系在含有10％熱失活的FBS(Life Technologies，Grand Island，NY)的RPMI1640培養(yǎng)基中繁殖和擴展。在細胞工廠(NUNC，購自Fisher Scientific，Springfield，NJ)進行用于移植的細胞擴展。在50-90％匯合時收獲細胞，用含10％FBS的HBSS(Hank’s平衡鹽溶液)洗滌一次，然后懸浮在100％HBSS中。
采用市售的MTS試劑盒(Promega，Madision，Wis.)試驗來測量細胞增殖，該試驗使用公開方法的改變形式來進行，所述方法記載于例如下述文獻中采用微量培養(yǎng)四氮唑試驗用一系列人腫瘤細胞系進行藥物篩選的可行性(Feasibility of drug screening with panels of human tumor cell linesusing a microculture tetrazolium assay)，Alley MC，等，Cancer Res.1988；48589-601。將細胞鋪在96-孔組織培養(yǎng)皿中，空出頂排和底排。將H1299和HCT116細胞懸浮于完全培養(yǎng)基中，密度分別為5.3×103和3.6×103細胞/mL，每孔加入190μl。將每種細胞系加入平板的一半中。將完全培養(yǎng)基(200μL)加至頂排和底排。24小時后，將10μl MTS溶液加至其中的一個平板中以測定在化合物加入時(T0)的活性。將板在37℃下保溫4小時，然后用Softmax程序于490nm下在Molecular Devices Thermomax上測量OD490值。T0板用作在實驗開始時的初始活性的參照值。
在96-孔深孔平板中制備各化合物的五個系列稀釋液(1∶4)，最高濃度在板的邊緣。在每個平板上用兩種化合物對兩個細胞系進行試驗。將五種稀釋液各10μL一式三份地加入，并將單獨的完全培養(yǎng)基加至第6列和7列。將平板在37℃下保溫72小時。加入MTS溶液(與T0板一樣)，4個小時后讀取讀數(shù)。
為了分析數(shù)據(jù)，從各實驗孔中減去平均本底值(只含培養(yǎng)基)；對于各化合物稀釋液，將其三份數(shù)值平均。用下式計算生長百分率。
如果X＞T0，％生長＝((X-T0)/(GC-T0))×100如果X＜T0，％生長＝((X-T0)/T0)×100其中，T0＝(在時間0時細胞活力的平均值)-本底GC＝未處理的細胞的平均值(一式三份)-本底X＝用化合物處理的細胞的平均值(一式三份)-本底用“％生長”對化合物的濃度作圖，并利用數(shù)據(jù)點間的線性回歸技術(shù)預測50％抑制時的化合物濃度，由此計算出IC50值。
將純度高于95％的下述化合物的乳酸鹽溶解于純凈的二甲亞砜(DMSO)中得到儲備液N-羥基-3-[4-[[[2-(1H-吲哚-3-基)-乙基]-氨基]甲基]苯基]-2E-2-丙烯酰胺(CMD1)、N-羥基-3-[4-[[(2-羥基乙基)[2-(1H-吲哚-3-基)-乙基]-氨基]甲基]苯基]-2E-2-丙烯酰胺(CMD2)、N-羥基-3-[4-[[[2-(5-甲氧基-1H-吲哚-3-基)-乙基]-氨基]甲基]苯基]-2E-2-丙烯酰胺(CMD3)、N-羥基-3-[4-[[[2-(5-氟-1H-吲哚-3-基)-乙基]-氨基]甲基]苯基]-2E-2-丙烯酰胺(CMD4)、N-羥基-3-[4-[[[2-(苯并呋喃-3-基)-乙基]-氨基]甲基]苯基]-2E-2-丙烯酰胺(CMD5)。在臨給藥之前，將儲備液用5％葡萄糖注射液(USP)稀釋。此外，按照EP 0847992的實施例48合成N-(2-氨基苯基)-4-[N-(吡啶-3-基)甲氧基羰基氨基甲基]苯甲酰胺并用作對照化合物(CMDC)。通過MTS試驗在一式三份的實驗中測量在用化合物處理72小時的單層中細胞生長的抑制并用其推導出IC50值。結(jié)果示于表B1。表B1單層生長IC50(μM)化合物H1299HCT116CMD1 0.40 0.03CMD2 0.15 0.01CMD3 0.58 0.03CMD4 0.28 0.03CMD5 0.18 0.03CMDC 6.8 0.67結(jié)果表明，本發(fā)明的異羥肟酸化合物在抑制腫瘤細胞生長中具有很高的活性。除上述結(jié)果外，還觀察到本發(fā)明的化合物可選擇性地抑制腫瘤細胞并對非腫瘤細胞顯示出最低的抑制活性。
對用異羥肟酸化合物處理的細胞還進行了誘導p21啟動子的實驗，該啟動子是G1停滯和分化的關(guān)鍵介質(zhì)。在H1299中，在單層細胞生長抑制IC50值的兩倍濃度范圍內(nèi)，異羥肟酸化合物可以激活p21啟動子至易于檢測的程度。不受任何具體理論的限制，該相互關(guān)系表明HDA抑制導致了抑制腫瘤細胞增殖的基因的轉(zhuǎn)錄激活。實施例B2HAD部分純化自H1299--人非小細胞肺癌細胞(獲自美國典型培養(yǎng)物保藏中心(American Type Culture Collection)，12301 Parklawn Drive，Rockville，MD 20852，USA)。在10％FCS存在下，使細胞于RPMI培養(yǎng)基中生長至70-80％匯合，收獲細胞并通過超聲處理溶解。將溶解產(chǎn)物在23,420g下離心10-15分鐘，將上清液上樣到Hiload 26/10高效Q-瓊脂糖柱(Amersham Pharmacia Biotech)上，并用含有20mM Tris pH 8.0、1mMEDTA、10mM NH4Cl2、1mM β-巰基乙醇、5％甘油、2μg/mL抑肽酶、1μg/mL亮抑蛋白酶肽和400mM PMSF的緩沖液平衡。將蛋白質(zhì)用在上述緩沖液中的0-500mM NaCl的線性梯度以2.5mL/分鐘的流速洗脫，以每份4mL收集洗脫液。用每一種部分純化的HDA酶的制劑進行滴定以測定獲得至少為5比1的信噪比所需的最佳量。通常，將20-30μl部分純化的HDA(5-10mg蛋白質(zhì)/mL)與2μL化合物的DMSO溶液在深孔滴定管板(Beckman)中混合。將化合物在DMSO中系列稀釋以產(chǎn)生20倍實驗濃度的儲備液。試驗中化合物的最后濃度為10μM、2μM、400nM、80nM和16nM，DMSO在各酶反應中的最終百分比等于0.1％。每種濃度的化合物一式兩份地進行試驗。用于反應中的底物是如下氨基酸序列的肽SGRGKGGKGLGKGGAKRHRKVLRD，相應于人組蛋白H4的24個N-末端氨基酸，在N末端生物素化并在每一賴氨酸殘基處用3H-乙酸酯五乙?；榱碎_始反應，將底物在10μL緩沖液A(100mM Tris pH 8.0，2mMEDTA)中稀釋，加至酶混合物中，通過在1500rpm下離心5分鐘在深孔板的底部收集。離心后，將混合物在37℃下保溫1.5小時。加入20μL停止緩沖液(0.5N HCl，0.08M乙酸)停止反應。此時，將試驗進行自動提取階段，或者在-80℃下冷凍數(shù)天。
用Tomtec Quadra 96工作站采用溶劑TBME(叔丁基甲基醚)完成從反應混合物中提取酶裂解的3H-乙酸酯基團。編寫程序以將200μL TBME加至96孔“深孔”板中。將工作站編程以抽吸50μL空氣，隨后抽吸200μLTBME，最后是另外25μL空氣，其分配于平板的各孔中。通過用吸移管吸取160μL上下10次使深孔內(nèi)的物質(zhì)充分混合。在向反應混合物中加入TBME之前，需要先用TBME“預濕潤”吸移管尖端，以防止溶劑在轉(zhuǎn)移至深孔板期間滴下。通過在1500rpm下離心5分鐘分離出深孔中的有機相和水相。將Opti-Phase Supermix液體閃爍合劑(200μL)(Wallac)加至96-孔Trilux板(Wallac)的各孔中。將深孔板和Trilux板放回至編程的工作站上，以抽吸25μL空氣進入吸移管尖端，隨后是100μL的上層TBME相，并將其轉(zhuǎn)移至Trilux板中。在相同的孔中，通過吸取和排出50μL五次將溶液混合。將Trilux板用透明的膜覆蓋，并用彩色/化學猝滅和dpm校正法在1450 MicroBeta Trilux液體閃爍和發(fā)光計數(shù)器(Wallac)上計數(shù)。
為了測定IC50值，在電子表格上對數(shù)據(jù)進行分析。分析需要校正本底發(fā)光，即從實驗孔中減去無3H底物的孔的dpm值。采用用戶定義的樣條函數(shù)，用校正的dpm值連同化合物的濃度計算IC50值。該函數(shù)利用數(shù)據(jù)點間的線性回歸技術(shù)計算產(chǎn)生50％抑制時的化合物濃度。結(jié)果示于表B2中。表B2化合物HDA酶活性IC50(μM)CMD1 0.032CMD2 0.063CMD3 0.014CMD4 0.014CMD5 0.016CMDC ＞10實施例B3A549人體非小細胞肺腫瘤細胞系購自美國典型培養(yǎng)物保藏中心(American Type Culture Collection)，Rockville，MD。該細胞系不受支原體污染(Gen-Probe，Inc.的快速檢測系統(tǒng)，San Diego，CA)和病毒污染(MABioServices，Inc.的MAP檢測，Rockville，MD)。使細胞系在含有10％熱失活的FBS(Life Technologies，Grand Island，NY)的RPMI 1640培養(yǎng)基中繁殖和擴展。在細胞工廠(NUNC，購自Fisher Scientific，Springfield，NJ)進行用于移植的細胞擴展。在50-90％匯合時收獲細胞，用含10％FBS的HBSS洗滌一次，然后懸浮在100％HBSS中。
將雜交繁殖的無胸腺(nu/nu)雌性小鼠(來自Harlan Sprague Dawley的“Hsd無胞腺裸鼠-nu”，Indianapolis，IN)用甲氧氟氯乙烷(MallinckrodtVeterinary，Inc.，Mundelein，IL)麻醉，將100μL包含1×107細胞的細胞懸浮液皮下注射到各小鼠的右腋窩(側(cè)部)區(qū)域。使腫瘤生長約20天，直至其體積達到約100mm3。此時，將長有可接受的形態(tài)和大小的腫瘤的小鼠分組進行研究，每組8只小鼠。分組方法產(chǎn)生具有平衡的腫瘤大小均值和范圍的各個組?？鼓[瘤活性以％T/C表示，比較治療組(T)與載體對照組(C)在腫瘤體積方面的差異。采用下式計算腫瘤的消退(1-T/T0)×100％，其中，T為實驗結(jié)束時治療組的腫瘤體積，T0為實驗開始時的腫瘤體積。
CMD1經(jīng)靜脈內(nèi)給藥，一天一次，一周五次，共三周，劑量為10、25、50或100mg/kg。最終的DMSO濃度為10％。每一實驗組有八只小鼠。測量腫瘤并記錄各個小鼠的體重。表B3示出了在第41天時的結(jié)果。表B3Δ平均Δ％劑量 腫瘤體積*1體重*2化合物(mg/kg)(mm3±SEM*3)％T/C(％±SEM*3)10％DMSO/D5W*4-376±55 -+11.9±0.2CMD1 10 121±27 32 +1.3±0.3CMD1 25 77±3220 -0.9±0.3CMD1 50 57±1015 -0.4±0.3CMD1 100 28±257+0.4±0.3注釋*1.一組小鼠在實驗結(jié)束時的平均腫瘤體積減去在開始時的平均腫瘤體積的差值。
*2.一組小鼠在實驗結(jié)束時的平均體重減去在開始時的平均體重的差值。
*3.平均值的標準誤差。
*4.5％葡萄糖注射液，USP。實施例B4重復實施例B3，所不同的是采用CMD2。結(jié)果如表4所示。表B4Δ平均Δ％劑量 腫瘤體積 體重化合物(mg/kg)(mm3±SEM)％T/C(％±SEM)10％DMSO/D5W - 135±43 - +6.7±1.1CMD2 25 37±1627 -4.2±2.5CMD2 50 29±1521 -2.9±1.5實施例B5重復實施例B3，所不同的是采用HCT116結(jié)腸腫瘤細胞系代替A549細胞系。HCT116細胞系也來自美國典型培養(yǎng)物保藏中心(American TypeCulture Collection)，Rockville，MD，該細胞系不受支原體污染和病毒污染。記錄在第34天時的結(jié)果，并示于表B5中。
表B5Δ平均 Δ％劑量 腫瘤體積體重化合物(mg/kg)(mm3±SEM)％T/C(％±SEM)10％DMSO/D5W -759±108 - -0.4±0.4CMD1 50*10 186±40 25 -7.4±0.8CMD1 100 140±38 18 -3.2±0.4注釋*10.在組中用七只小鼠進行實驗。實施例B6重復實施例B4，所不同的是采用HCT116結(jié)腸腫瘤細胞系代替A549細胞系。HCT116也來自美國典型培養(yǎng)物保藏中心(American Type CultureCollection)，Rockvlle，MD，該細胞系不受支原體污染和病毒污染。記錄在第34天時的結(jié)果，并示于表B6中。表B6Δ平均 Δ％劑量腫瘤體積 體重化合物(mg/kg)(mm3±SEM)％T/C(％±SEM)10％DMSO/D5W - 759±108- -0.4±0.4CMD2 10 422±75 56 -10.2±0.5CMD2 25 305±47 40 -7.0±0.2CMD2 50 97±30 13 -7.3±0.3CMD2 100 132±30 17 -9.4±0.4實施例B7用膜連蛋白V結(jié)合作為細胞凋亡早期的標志物。將A549、HCT116和正常人體皮膚成纖維細胞(NDHF)分別用四種化合物(CMD1、CMD2、CMD3和CMD4)處理24或48小時，用膜連蛋白V染色，并與用賦形劑(DMSO)進行類似處理的細胞進行比較。采用熒光顯微鏡對細胞進行檢驗。那些正經(jīng)歷細胞凋亡的細胞顯示出綠色熒光膜染色。通過復染劑碘化丙錠評價生存力。通過紅色熒光檢測到的細胞是沒有活力的。在接觸四種化合物24小時后，低百分比的A549和大部分的HCT116細胞顯示出細胞表面被膜連蛋白V染色。處理48小時后，大部分的A549和HCT116被膜連蛋白V和/或碘化丙錠染色，表明化合物誘導了凋亡性的細胞死亡。與此相反，接觸24小時后，NDHF細胞并未顯示出明顯的膜連蛋白V染色，在48小時后，CMD3顯示出有限的膜連蛋白V染色。這些數(shù)據(jù)表明，在化學處理后，NDHF細胞主要經(jīng)歷非致死性的生長停滯，這與細胞周期分布是一致的。
染色結(jié)果表明，本發(fā)明的異羥肟酸化合物可以通過凋亡而使腫瘤細胞死亡，而正常的成纖維細胞主要經(jīng)歷細胞周期停滯，這清楚地表明了本發(fā)明化合物有選擇性的有效性。
權(quán)利要求
1.式I化合物或其可藥用鹽 其中R1為H、鹵素或直鏈C1-C6烷基；R2選自H、C1-C10烷基、C4-C9環(huán)烷基、C4-C9雜環(huán)烷基、C4-C9雜環(huán)烷基烷基、環(huán)烷基烷基、芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、-(CH2)nC(O)R6、-(CH2)nOC(O)R6、氨基酰基、HON-C(O)-CH＝C(R1)-芳基-烷基-和-(CH2)nR7；R3和R4相同或不同并且彼此獨立地為H、C1-C6烷基、?；蝓；被?，或者R3和R4與和其相連的碳一起表示C＝O、C＝S或C＝NR8，或者R2與和其相連的氮一起以及R3與和其相連的碳一起可形成C4-C9雜環(huán)烷基、雜芳基、多環(huán)雜芳基、非芳族多環(huán)雜環(huán)或混合的芳基和非芳基多環(huán)雜環(huán)；R5選自H、C1-C6烷基、C4-C9環(huán)烷基、C4-C9雜環(huán)烷基、?；?、芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、芳族多環(huán)、非芳族多環(huán)、混合的芳基和非芳基多環(huán)、多環(huán)雜芳基、非芳族多環(huán)雜環(huán)和混合的芳基和非芳基多環(huán)雜環(huán)；n、n1、n2和n3相同或不同并且彼此獨立地選自0-6，當n1為1-6時，每一個碳原子可選擇性地且彼此獨立地被R3和/或R4取代；X和Y相同或不同并且彼此獨立地選自H、鹵素、C1-C4烷基、NO2、C(O)R1、OR9、SR9、CN和NR10R11；R6選自H、C1-C6烷基、C4-C9環(huán)烷基、C4-C9雜環(huán)烷基、環(huán)烷基烷基、芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、OR12和NR13R14；R7選自OR15、SR15、S(O)R16、SO2R17、NR13R14和NR12SO2R6；R8選自H、OR15、NR13R14、C1-C6烷基、C4-C9環(huán)烷基、C4-C9雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳基烷基和雜芳基烷基；R9選自C1-C4烷基和C(O)-烷基；R10和R11相同或不同并且彼此獨立地選自H、C1-C4烷基和-C(O)-烷基；R12選自H、C1-C6烷基、C4-C9環(huán)烷基、C4-C9雜環(huán)烷基、C4-C9雜環(huán)烷基烷基、芳基、混合的芳基和非芳基多環(huán)、雜芳基、芳基烷基和雜芳基烷基；R13和R14相同或不同并且彼此獨立地選自H、C1-C6烷基、C4-C9環(huán)烷基、C4-C9雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、氨基?；?，或者R13和R14與和其相連的氮合在一起為C4-C9雜環(huán)烷基、雜芳基、多環(huán)雜芳基、非芳族多環(huán)雜環(huán)或混合的芳基和非芳基多環(huán)雜環(huán)；R15選自H、C1-C6烷基、C4-C9環(huán)烷基、C4-C9雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基和(CH2)mZR12；R16選自C1-C6烷基、C4-C9環(huán)烷基、C4-C9雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、多環(huán)雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基和(CH2)mZR12；R17選自C1-C6烷基、C4-C9環(huán)烷基、C4-C9雜環(huán)烷基、芳基、芳族多環(huán)、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、多環(huán)雜芳基和NR13R14；m為選自0-6的整數(shù)；且Z選自O、NR13、S和S(O)。
2.權(quán)利要求1的化合物，其中，R1、X、Y、R3和R4均為H。
3.權(quán)利要求2的化合物，其中n2和n3之一為0，另一個為1。
4.權(quán)利要求3的化合物，其中，R2為H或-CH2-CH2-OH。
5.權(quán)利要求1的式Ia化合物或其可藥用鹽 其中n4為0-3，R2選自H、C1-C6烷基、C4-C9環(huán)烷基、C4-C9雜環(huán)烷基、環(huán)烷基烷基、芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、-(CH2)nC(O)R6、氨基酰基和-(CH2)nR7；R5’為雜芳基、雜芳基烷基、芳族多環(huán)、非芳族多環(huán)、混合的芳基和非芳基多環(huán)、多環(huán)雜芳基或混合的芳基和非芳基多環(huán)雜環(huán)。
6.權(quán)利要求1的式Ia化合物或其可藥用鹽 其中n4為0-3，R2選自H、C1-C6烷基、C4-C9環(huán)烷基、C4-C9雜環(huán)烷基、環(huán)烷基烷基、芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、-(CH2)nC(O)R6、氨基?；?(CH2)nR7；R5’是芳基、芳基烷基、芳族多環(huán)、非芳族多環(huán)或混合的芳基和非芳基多環(huán)。
7.權(quán)利要求6的化合物，其中，R5’為芳基或芳基烷基。
8.權(quán)利要求7的化合物，其中，R5’為對氟苯基、對氯苯基、對-O-C1-C4-烷基苯基、對-C1-C4-烷基苯基、芐基、鄰、間或?qū)ΨS基、鄰、間或?qū)β绕S基或鄰、間或?qū)?單、二或三-O-C1-C4-烷基芐基。
9.權(quán)利要求1的式Ib化合物或其可藥用鹽 其中R2’選自H、C1-C6烷基、C4-C6環(huán)烷基、環(huán)烷基烷基、-(CH2)2-4OR21，其中R21為H、甲基、乙基、丙基或異丙基，且R5”為未取代的或取代的1H-吲哚-3-基、苯并呋喃-3-基或喹啉-3-基。
10.權(quán)利要求9的化合物，其中，R5”為取代的1H-吲哚-3-基或取代的苯并呋喃-3-基。
11.權(quán)利要求1的式Ic化合物或其可藥用鹽 其中含Z1的環(huán)為芳族或非芳族環(huán)，所述非芳族環(huán)為飽和或不飽和的，Z1為O、S或N-R20；R18為H、鹵素、C1-C6烷基、C3-C7環(huán)烷基、芳基或雜芳基；R20為H、C1-C6烷基、C1-C6烷基-C3-C9環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、?；蚧酋；?；A1為1、2或3個取代基，該取代基彼此獨立地為H、C1-C6烷基、-OR19、鹵素、烷基氨基、氨基烷基、鹵素或雜芳基烷基；R2選自H、C1-C6烷基、C4-C9環(huán)烷基、C4-C9雜環(huán)烷基、環(huán)烷基烷基、芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、-(CH2)nC(O)R6、氨基?；?(CH2)nR7；R19選自H、C1-C6烷基、C4-C9環(huán)烷基、C4-C9雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳基烷基和雜芳基烷基；v為0、1或2，p為0-3，并且q為1-5且r為0，或者q為0且r為1-5。
12.權(quán)利要求11的化合物，其中，Z1為N-R20。
13.權(quán)利要求11的化合物，其中，R2為H或-CH2-CH2-OH且q和r之和為1。
14.權(quán)利要求1的式Id化合物或其可藥用鹽 其中Z1為O、S或N-R20，R18為H、鹵素、C1-C6烷基、C3-C7環(huán)烷基、未取代的苯基、取代的苯基、或雜芳基，R20為H、C1-C6烷基、C1-C6烷基-C3-C9環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、?；蚧酋；?；A1為1、2或3個取代基，其彼此獨立地為H、C1-C6烷基、-OR19或鹵素，R19選自H、C1-C6烷基、C4-C9環(huán)烷基、C4-C9雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基和-(CH2CH＝CH(CH3)(CH2))1-3H；p為0-3，并且q為1-5且r為0，或者q為0且r為1-5。
15.權(quán)利要求14的化合物，其中，R2為H或-CH2-CH2-OH且q和r之和為1。
16.權(quán)利要求11的式Ie化合物 或其可藥用鹽。
17.權(quán)利要求16的化合物，其中，R18為H、氟、氯、溴、C1-C4烷基、C3-C7環(huán)烷基、苯基或雜芳基。
18.權(quán)利要求16的化合物，其中，R2為H或-(CH2)pCH2OH且其中的p為1-3。
19.權(quán)利要求18的化合物，其中，R1為H，X和Y均為H，并且其中的q為1-3且r為0，或者其中的q為0且r為1-3。
20.權(quán)利要求16的化合物，其中，R18為H、甲基、乙基、叔丁基、三氟甲基、環(huán)己基、苯基、4-甲氧基苯基、4-三氟甲基苯基、2-呋喃基、2-噻吩基或2-、3-或4-吡啶基。
21.權(quán)利要求20的化合物，其中，R2為H或-(CH2)pCH2OH。
22.權(quán)利要求21的化合物，其中，p為1-3。
23.權(quán)利要求22的化合物，其中，R1為H，X和Y均為H，并且其中的q為1-3且r為0，或者其中的q為0且r為1-3。
24.權(quán)利要求23的化合物，其中，R2為H或-CH2-CH2-OH且q和r之和為1。
25.權(quán)利要求16的化合物，其中，R20為H或C1-C6烷基。
26.權(quán)利要求16的化合物，其選自N-羥基-3-[4-[[(2-羥基乙基)[2-(1H-吲哚-3-基)乙基]-氨基]甲基]苯基]-2E-2-丙烯酰胺，N-羥基-3-[4-[[[2-(1H-吲哚-3-基)乙基]-氨基]甲基]苯基]-2E-2-丙烯酰胺，和N-羥基-3-[4-[[[2-(2-甲基-1H-吲哚-3-基)-乙基]-氨基]甲基]苯基]-2E-2-丙烯酰胺或其可藥用鹽。
27.權(quán)利要求26的化合物，該化合物為N-羥基-3-[4-[[(2-羥基乙基)[2-(1H-吲哚-3-基)乙基]-氨基]甲基]苯基]-2E-2-丙烯酰胺或其可藥用鹽。
28.權(quán)利要求1的式If化合物 或其可藥用鹽。
29.權(quán)利要求28的化合物，其中，R2為H或-(CH2)pCH2OH且p為1-3。
30.權(quán)利要求29的化合物，其中，R1為H，X和Y均為H，并且其中的q為1-3且r為0，或者其中的q為0且r為1-3。
31.權(quán)利要求30的化合物，其中，R2為H或-CH2-CH2-OH且q和r之和為1。
32.權(quán)利要求28的化合物，該化合物為N-羥基-3-[4-[[[2-(苯并呋喃-3-基)-乙基]-氨基]甲基]苯基]-2E-2-丙烯酰胺或其可藥用鹽。
33.一種藥物組合物，其包含藥物有效量的式I化合物或其可藥用鹽 其中R1為H、鹵素或直鏈C1-C6烷基；R2選自H、C1-C10烷基、C4-C9環(huán)烷基、C4-C9雜環(huán)烷基、C4-C9雜環(huán)烷基烷基、環(huán)烷基烷基、芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、-(CH2)nC(O)R6、-(CH2)nOC(O)R6、氨基?；?、HON-C(O)-CH＝C(R1)-芳基-烷基-和-(CH2)nR7；R3和R4相同或不同并且彼此獨立地為H、C1-C6烷基、酰基或?；被?，或者R3和R4與和其相連的碳一起表示C＝O、C＝S或C＝NR8，或者R2與和其相連的氮一起以及R3與和其相連的碳一起可形成C4-C9雜環(huán)烷基、雜芳基、多環(huán)雜芳基、非芳族多環(huán)雜環(huán)或混合的芳基和非芳基多環(huán)雜環(huán)；R5選自H、C1-C6烷基、C4-C9環(huán)烷基、C4-C9雜環(huán)烷基、?；⒎蓟?、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、芳族多環(huán)、非芳族多環(huán)、混合的芳基和非芳基多環(huán)、多環(huán)雜芳基、非芳族多環(huán)雜環(huán)和混合的芳基和非芳基多環(huán)雜環(huán)；n、n1、n2和n3相同或不同并且彼此獨立地選自0-6，當n1為1-6時，每一個碳原子可選擇性地且彼此獨立地被R3和/或R4取代；X和Y相同或不同并且彼此獨立地選自H、鹵素、C1-C4烷基、NO2、C(O)R1、OR9、SR9、CN和NR10R11；R6選自H、C1-C6烷基、C4-C9環(huán)烷基、C4-C9雜環(huán)烷基、環(huán)烷基烷基、芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、OR12和NR13R14；R7選自OR15、SR15、S(O)R16、SO2R17、NR13R14和NR12SO2R6；R8選自H、OR15、NR13R14、C1-C6烷基、C4-C9環(huán)烷基、C4-C9雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳基烷基和雜芳基烷基；R9選自C1-C4烷基和C(O)-烷基；R10和R11相同或不同并且彼此獨立地選自H、C1-C4烷基和-C(O)-烷基；R12選自H、C1-C6烷基、C4-C9環(huán)烷基、C4-C9雜環(huán)烷基、C4-C9雜環(huán)烷基烷基、芳基、混合的芳基和非芳基多環(huán)、雜芳基、芳基烷基和雜芳基烷基；R13和R14相同或不同并且彼此獨立地選自H、C1-C6烷基、C4-C9環(huán)烷基、C4-C9雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、氨基?；?，或者R13和R14與和其相連的氮合在一起為C4-C9雜環(huán)烷基、雜芳基、多環(huán)雜芳基、非芳族多環(huán)雜環(huán)或混合的芳基和非芳基多環(huán)雜環(huán)；R15選自H、C1-C6烷基、C4-C9環(huán)烷基、C4-C9雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基和(CH2)mZR12；R16選自C1-C6烷基、C4-C9環(huán)烷基、C4-C9雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、多環(huán)雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基和(CH2)mZR12；R17選自C1-C6烷基、C4-C9環(huán)烷基、C4-C9雜環(huán)烷基、芳基、芳族多環(huán)、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、多環(huán)雜芳基和NR13R14；m為選自0-6的整數(shù)；且Z選自O、NR13、S和S(O)。
34.權(quán)利要求33的藥物組合物，其中的式I化合物選自N-羥基-3-[4-[[(2-羥基乙基)[2-(1H-吲哚-3-基)乙基]-氨基]甲基]苯基]-2E-2-丙烯酰胺，N-羥基-3-[4-[[[2-(1H-吲哚-3-基)乙基]-氨基]甲基]苯基]-2E-2-丙烯酰胺，和N-羥基-3-[4-[[[2-(2-甲基-1H-吲哚-3-基)-乙基]-氨基]甲基]苯基]-2E-2-丙烯酰胺或其可藥用鹽。
35.權(quán)利要求34的藥物組合物，其中的式I化合物為N-羥基-3-[4-[[(2-羥基乙基)[2-(1H-吲哚-3-基)乙基]-氨基]甲基]苯基]-2E-2-丙烯酰胺或其可藥用鹽。
36.權(quán)利要求33的藥物組合物，其中的式I化合物為N-羥基-3-[4-[[[2-(苯并呋喃-3-基)-乙基]-氨基]甲基]苯基]-2E-2-丙烯酰胺或其可藥用鹽。
37.一種治療哺乳動物增殖性疾病的方法，該方法包括向所述哺乳動物施用式I的化合物或其可藥用鹽 其中R1為H、鹵素或直鏈C1-C6烷基；R2選自H、C1-C10烷基、C4-C9環(huán)烷基、C4-C9雜環(huán)烷基、C4-C9雜環(huán)烷基烷基、環(huán)烷基烷基、芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、-(CH2)nC(O)R6、-(CH2)nOC(O)R6、氨基?；?、HON-C(O)-CH＝C(R1)-芳基-烷基-和-(CH2)nR7；R3和R4相同或不同并且彼此獨立地為H、C1-C6烷基、?；蝓；被?，或者R3和R4與和其相連的碳一起表示C＝O、C＝S或C＝NR8，或者R2與和其相連的氮一起以及R3與和其相連的碳一起可形成C4-C9雜環(huán)烷基、雜芳基、多環(huán)雜芳基、非芳族多環(huán)雜環(huán)或混合的芳基和非芳基多環(huán)雜環(huán)；R5選自H、C1-C6烷基、C4-C9環(huán)烷基、C4-C9雜環(huán)烷基、酰基、芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、芳族多環(huán)、非芳族多環(huán)、混合的芳基和非芳基多環(huán)、多環(huán)雜芳基、非芳族多環(huán)雜環(huán)和混合的芳基和非芳基多環(huán)雜環(huán)；n、n1、n2和n3相同或不同并且彼此獨立地選自0-6，當n1為1-6時，每一個碳原子可選擇性地且彼此獨立地被R3和/或R4取代；X和Y相同或不同并且彼此獨立地選自H、鹵素、C1-C4烷基、NO2、C(O)R1、OR9、SR9、CN和NR10R11；R6選自H、C1-C6烷基、C4-C9環(huán)烷基、C4-C9雜環(huán)烷基、環(huán)烷基烷基、芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、OR12和NR13R14；R7選自OR15、SR15、S(O)R16、SO2R17、NR13R14和NR12SO2R6；R8選自H、OR15、NR13R14、C1-C6烷基、C4-C9環(huán)烷基、C4-C9雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳基烷基和雜芳基烷基；R9選自C1-C4烷基和C(O)-烷基；R10和R11相同或不同并且彼此獨立地選自H、C1-C4烷基和-C(O)-烷基；R12選自H、C1-C6烷基、C4-C9環(huán)烷基、C4-C9雜環(huán)烷基、C4-C9雜環(huán)烷基烷基、芳基、混合的芳基和非芳基多環(huán)、雜芳基、芳基烷基和雜芳基烷基；R13和R14相同或不同并且彼此獨立地選自H、C1-C6烷基、C4-C9環(huán)烷基、C4-C9雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、氨基酰基，或者R13和R14與和其相連的氮合在一起為C4-C9雜環(huán)烷基、雜芳基、多環(huán)雜芳基、非芳族多環(huán)雜環(huán)或混合的芳基和非芳基多環(huán)雜環(huán)；R15選自H、C1-C6烷基、C4-C9環(huán)烷基、C4-C9雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基和(CH2)mZR12；R16選自C1-C6烷基、C4-C9環(huán)烷基、C4-C9雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、多環(huán)雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基和(CH2)mZR12；R17選自C1-C6烷基、C4-C9環(huán)烷基、C4-C9雜環(huán)烷基、芳基、芳族多環(huán)、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、多環(huán)雜芳基和NR13R14；m為選自0-6的整數(shù)；且Z選自O、NR13、S和S(O)。
38.權(quán)利要求37的方法，其中的式I化合物選自N-羥基-3-[4-[[(2-羥基乙基)[2-(1H-吲哚-3-基)乙基]-氨基]甲基]苯基]-2E-2-丙烯酰胺，N-羥基-3-[4-[[[2-(1H-吲哚-3-基)乙基]-氨基]甲基]苯基]-2E-2-丙烯酰胺，和N-羥基-3-[4-[[[2-(2-甲基-1H-吲哚-3-基)-乙基]-氨基]甲基]苯基]-2E-2-丙烯酰胺或其可藥用鹽。
39.一種調(diào)節(jié)p21啟動子的方法，該方法包括向哺乳動物的細胞環(huán)境中引入式I化合物或其可藥用鹽 其中R1為H、鹵素或直鏈C1-C6烷基；R2選自H、C1-C10烷基、C4-C9環(huán)烷基、C4-C9雜環(huán)烷基、C4-C9雜環(huán)烷基烷基、環(huán)烷基烷基、芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、-(CH2)nC(O)R6、-(CH2)nOC(O)R6、氨基?；?、HON-C(O)-CH＝C(R1)-芳基-烷基-和-(CH2)nR7；R3和R4相同或不同并且彼此獨立地為H、C1-C6烷基、?；蝓；被?，或者R3和R4與和其相連的碳一起表示C＝O、C＝S或C＝NR8，或者R2與和其相連的氮一起以及R3與和其相連的碳一起可形成C4-C9雜環(huán)烷基、雜芳基、多環(huán)雜芳基、非芳族多環(huán)雜環(huán)或混合的芳基和非芳基多環(huán)雜環(huán)；R5選自H、C1-C6烷基、C4-C9環(huán)烷基、C4-C9雜環(huán)烷基、?；?、芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、芳族多環(huán)、非芳族多環(huán)、混合的芳基和非芳基多環(huán)、多環(huán)雜芳基、非芳族多環(huán)雜環(huán)和混合的芳基和非芳基多環(huán)雜環(huán)；n、n1、n2和n3相同或不同并且彼此獨立地選自0-6，當n1為1-6時，每一個碳原子可選擇性地且彼此獨立地被R3和/或R4取代；X和Y相同或不同并且彼此獨立地選自H、鹵素、C1-C4烷基、NO2、C(O)R1、OR9、SR9、CN和NR10R11；R6選自H、C1-C6烷基、C4-C9環(huán)烷基、C4-C9雜環(huán)烷基、環(huán)烷基烷基、芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、OR12和NR13R14；R7選自OR15、SR15、S(O)R16、SO2R17、NR13R14和NR12SO2R6；R8選自H、OR15、NR13R14、C1-C6烷基、C4-C9環(huán)烷基、C4-C9雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳基烷基和雜芳基烷基；R9選自C1-C4烷基和C(O)-烷基；R10和R11相同或不同并且彼此獨立地選自H、C1-C4烷基和-C(O)-烷基；R12選自H、C1-C6烷基、C4-C9環(huán)烷基、C4-C9雜環(huán)烷基、C4-C9雜環(huán)烷基烷基、芳基、混合的芳基和非芳基多環(huán)、雜芳基、芳基烷基和雜芳基烷基；R13和R14相同或不同并且彼此獨立地選自H、C1-C6烷基、C4-C9環(huán)烷基、C4-C9雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、氨基酰基，或者R13和R14與和其相連的氮合在一起為C4-C9雜環(huán)烷基、雜芳基、多環(huán)雜芳基、非芳族多環(huán)雜環(huán)或混合的芳基和非芳基多環(huán)雜環(huán)；R15選自H、C1-C6烷基、C4-C9環(huán)烷基、C4-C9雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基和(CH2)mZR12；R16選自C1-C6烷基、C4-C9環(huán)烷基、C4-C9雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、多環(huán)雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基和(CH2)mZR12；R17選自C1-C6烷基、C4-C9環(huán)烷基、C4-C9雜環(huán)烷基、芳基、芳族多環(huán)、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、多環(huán)雜芳基和NR13R14；m為選自0-6的整數(shù)；且Z選自O、NR13、S和S(O)。
40.權(quán)利要求39的方法，其中的式I化合物選自N-羥基-3-[4-[[(2-羥基乙基)[2-(1H-吲哚-3-基)乙基]-氨基]甲基]苯基]-2E-2-丙烯酰胺，N-羥基-3-[4-[[[2-(1H-吲哚-3-基)乙基]-氨基]甲基]苯基]-2E-2-丙烯酰胺，和N-羥基-3-[4-[[[2-(2-甲基-1H-吲哚-3-基)-乙基]-氨基]甲基]苯基]-2E-2-丙烯酰胺或其可藥用鹽。
全文摘要
本發(fā)明提供了式(I)的異羥肟酸化合物，該化合物是脫乙酰酶抑制劑。該化合物適用于具有抗增殖特性的藥物組合物。
文檔編號A61K31/496GK1450991SQ01815067
公開日2003年10月22日 申請日期2001年8月30日 優(yōu)先權(quán)日2000年9月1日
發(fā)明者K·W·貝爾, M·A·格林, L·B·佩雷斯, S·W·雷米斯未斯基, L·桑布切蒂, R·W·弗塞斯, S·K·夏爾馬 申請人:諾瓦提斯公司