專利名稱：含有法呢基乙酸作為活性成分的角膜結膜疾病治療藥物的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種含有法呢基乙酸或其鹽作為活性成分的角膜結膜疾病治療藥物。
干眼病是一種具有眼干癥狀并由于淚液異常造成角膜上皮障礙的疾病。干眼病癥狀的例子有眼干、角膜充血、癢、異物感等。當干眼病嚴重時，有時會造成失明。淚液分泌的降少、淚液層的不穩(wěn)定等被認為是造成干眼病發(fā)病的原因，但這些病因還未得到確認。
因此，如果有一種物質能夠促進粘蛋白分泌到淚液中，這種物質可望用于治療角膜結膜上皮上有問題的角膜結膜疾病，例如干眼病、角膜炎、結膜炎、角膜上皮脫落和角膜潰瘍。
日本公開的專利申請194363/1997號公開了元白菜素，它是法呢基乙酸與香葉醇的一種酯，它具有促進眼組織中粘蛋白產生和分泌的作用，對治療角膜結膜疾病如干眼病有效。
但是，沒有關于元白菜素游離羧酸法呢基乙酸應用于眼科領域的報道，根本不知道法呢基乙酸如何作用于角膜結膜疾病。
因此，發(fā)現(xiàn)法呢基乙酸對角膜結膜疾病的藥理作用是一項很有意義的課題。

發(fā)明內容
本發(fā)明人研究了法呢基乙酸對粘蛋白產生和分泌的促進作用，以發(fā)現(xiàn)其新的藥理作用，結果發(fā)現(xiàn)，法呢基乙酸對粘蛋白的產生和分泌具有顯著的促進作用。證明法呢基乙酸甚至在比元白菜素低得多的濃度下也具有與元白菜素同等的效果。
本發(fā)明涉及含有下式代表的法呢基乙酸或其鹽作為活性成分的角膜結膜疾病治療藥物，所述角膜結膜疾病例如為干眼病、角膜炎、結膜炎、角膜上皮脫落和角膜潰瘍。它們的效果將在藥理試驗部分詳細描述。 本發(fā)明化合物的鹽可以是任何藥物可接受的鹽，例如與堿金屬或堿土金屬的鹽，如鈉鹽、鉀鹽或鈣鹽，銨鹽，和與有機胺如二乙胺或三乙醇胺的鹽。
法呢基乙酸或其鹽的劑型的例子有眼科制劑如滴眼液和眼膏，以及注射液。法呢基乙酸或其鹽可以利用廣泛使用的方法配制成這種制劑。例如，滴眼液可以用下列物質制備任選的等滲劑如氯化鈉和濃甘油；緩沖劑如磷酸鈉和乙酸鈉；表面活性劑如聚山梨酯80、聚氧乙烯氫化蓖麻油60和聚乙二醇4000；穩(wěn)定劑如檸檬酸鈉和乙二胺四乙酸二鈉；防腐劑如苯扎氯銨和對羥基苯甲酸酯類；pH調節(jié)劑如氫氧化鈉和鹽酸。最好將pH調節(jié)到中性左右，最好將滲透壓調節(jié)到約1.0。
本發(fā)明還涉及一種治療角膜結膜疾病的方法，其包括給予患者有效量的法呢基乙酸或其鹽；還涉及一種促進粘蛋白產生的方法或一種治療涉及粘蛋白產生的疾病的方法，其包括給予患者有效量的法呢基乙酸或其鹽。
可以根據癥狀、年齡、劑型等適當?shù)剡x擇劑量。對于滴眼液，0.0001％到3(w/v)、優(yōu)選0.001％到1％(w/v)的溶液，每天可以滴1次到數(shù)次。
本發(fā)明的最佳實施方式藥理試驗利用淚腺-瞬眼膜-副淚腺摘除的兔干眼病模型研究了法呢基乙酸對干眼病的作用。
兔干眼病模型的制備參照Girbard等(Invest.Ophthalmol.Vis.Sci.，28225-228(1987))的方法制備了淚腺-瞬眼膜-副淚腺摘除的兔干眼病模型。即，給兔子以1ml/kg的量注射5％鹽酸氯胺酮注射液和2％鹽酸賽拉嗪注射液的7∶1混合物，系統(tǒng)麻醉兔子。給兔子滴注0.4％的鹽酸奧布卡因滴眼液，沿眶骨將下眼瞼皮膚切開約5毫米，然后從結膜袋的外側摘除淚腺。將切開位置的皮膚用4-0縫線縫合，在切口位置施用氧氟沙星眼膏。然后，摘除副淚腺，將其與瞬眼膜一起拉出。最后，在摘除位置施用氧氟沙星眼膏。
滴眼液的制備通過用下述載體稀釋法呢基乙酸達到0.75、7.5和75μM的濃度，來制備法呢基乙酸滴眼液。通過用同樣的載體稀釋元白菜素到7.5mM的濃度，制備元白菜素滴眼液。所有獲得的滴眼液的pH為7.4，滲透壓為1.0。
載體(100毫升中)聚氧乙烯氫化蓖麻油40 0.3gNaH2PO4·2HO21.0g乙二胺四乙酸二鈉 0.05gNaCl 0.4g無菌純化水 足量給藥將每種法呢基乙酸滴眼液(50μl)滴注給淚腺-瞬眼膜-副淚腺摘除的兔子，每天6次，共2周(每組4只兔子，8只眼)。在對照組和比較組中，分別類似地滴注載體和元白菜素。評價方法通過測定四氯四碘熒光素的吸收評價對干眼病的效果。給兔子以1ml/kg的量注射5％鹽酸氯胺酮注射液和2％鹽酸賽拉嗪注射液的7∶1混合物，系統(tǒng)麻醉兔子，然后用開瞼器切開眼瞼，并在結膜袋中注滿含1％四氯四碘熒光素的生理鹽水。將這樣處理的眼睛保持10秒鐘，然后用生理鹽水洗滌。給兔子注射5％戊巴比妥注射液進行安樂死，摘下眼球。使用8毫米內徑的環(huán)鉆制備角膜片，將它們放置在1毫升2M氫氧化鈉溶液中，然后避光靜置一天，以將角膜組織完全溶解。用分光光度計測定所得組織溶解溶液在560納米波長處的吸光度。
四氯四碘熒光素對角膜結膜中無粘蛋白層的部分染色。如果粘蛋白層存在，四氯四碘熒光素將被阻止不能透入角膜結膜組織，但如果粘蛋白層不存在，四氯四碘熒光素容易到達角膜結膜組織。因此，當粘蛋白層由于干眼病而減少時，角膜組織的四氯四碘熒光素吸收增加，從而所述組織溶解溶液的吸光度增加。結果吸光度的測定結果顯示在表1中。法呢基乙酸給藥組中的四氯四碘熒光素吸收顯著少于載體對照組，在各法呢基乙酸給藥組中，四氯四碘熒光素的吸收大致呈濃度依賴性降低。另外，結果證明，甚至在元白菜素濃度的約1/100的濃度下，法呢基乙酸(75μM給藥組)顯示與元白菜素(7.5mM給藥組)同等的效果。從上述結果可知，因為法呢基乙酸促進粘蛋白的產生和分泌，法呢基乙酸可望用于防治角膜結膜疾病，如干眼病。

工業(yè)實用性上述藥理試驗的結果明確顯示，法呢基乙酸對粘蛋白的產生和分泌具有促進作用，可用作角膜結膜疾病的治療藥物，例如對干眼病、角膜炎、結膜炎、角膜上皮脫落和角膜潰瘍。
權利要求
1.角膜結膜疾病治療藥物，其含有法呢基乙酸或其鹽作為活性成分。
2.如權利要求1所述的角膜結膜疾病治療藥物，其中角膜結膜疾病為干眼病、角膜炎、結膜炎、角膜上皮脫落或角膜潰瘍。
3.如權利要求1或2所述的角膜結膜疾病治療藥物，其中劑型為眼科制劑。
4.如權利要求3所述的角膜結膜疾病治療藥物，其中法呢基乙酸或其鹽的濃度為0.001％到1％(w/v)。
5.一種促進粘蛋白產生的促進劑，其含有法呢基乙酸或其鹽作為活性成分。
6.一種治療角膜結膜疾病的方法，包括給予患者有效量的法呢基乙酸或其鹽。
7.如權利要求6所述的治療角膜結膜疾病的方法，其中角膜結膜疾病為干眼病、角膜炎、結膜炎、角膜上皮脫落或角膜潰瘍。
8.一種治療角膜結膜疾病的方法，包括給患者滴注有效量的法呢基乙酸或其鹽。
9.如權利要求8所述的治療角膜結膜疾病的方法，其中法呢基乙酸或其鹽以0.001％到1％(w/v)的濃度滴注。
10.一種促進粘蛋白產生的方法，包括給予患者有效量的法呢基乙酸或其鹽。
11.法呢基乙酸或其鹽在制造角膜結膜疾病治療藥物中的應用。
12.如權利要求11所述的法呢基乙酸或其鹽的應用，其中角膜結膜疾病為干眼病、角膜炎、結膜炎、角膜上皮脫落或角膜潰瘍。
13.如權利要求11或12所述的法呢基乙酸或其鹽的應用，其中劑型為眼科制劑。
14.如權利要求13所述的法呢基乙酸或其鹽的應用，其中法呢基乙酸或其鹽的濃度為0.001％到1％(w/v)。
15.法呢基乙酸或其鹽在制造粘蛋白產生促進劑中的應用。
全文摘要
本發(fā)明提供了能促進眼組織中粘蛋白產生和分泌的新物質。本發(fā)明的角膜結膜疾病治療藥物含有法呢基乙酸或其鹽作為活性成分。這些角膜結膜疾病治療藥物可用于干眼病、角膜炎、結膜炎、角膜上皮脫落、角膜潰瘍等。
文檔編號A61P27/02GK1473039SQ01818559
公開日2004年2月4日 申請日期2001年11月8日 優(yōu)先權日2000年11月8日
發(fā)明者中田勝彥, 中村雅胤, 遠藤健一, 桑野光明, 伊吹肇, 一, 明, 胤 申請人:參天制藥株式會社