專利名稱：取代脲,神經(jīng)肽yy5受體拮抗劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及用于肥胖及進(jìn)食障礙疾患治療的神經(jīng)肽YY5受體拮抗劑，含有該化合物的藥物組合物，及使用該化合物的治療方法。
背景技術(shù)：
神經(jīng)肽Y(NPY)是一種36氨基酸的神經(jīng)肽，其廣泛分布于中樞及周圍神經(jīng)系統(tǒng)中。NPY是胰多肽家族的一員，該家族還包括肽YY和胰多肽(Wahlestedt，C.，和Reis，D.，Ann.Rev.Toxicol.，32，309，1993)。NPY通過激活至少6個(gè)稱為Y1，Y2，Y3，Y4，Y5和Y6的受體亞類引發(fā)其生理效果(Gehlert，D.，Proc.Soc.Exp.Biol.Med.，218，7，1998；Michel，M.等人，Pharmacol.Rev.，50，143，1998)。將NPY對動(dòng)物進(jìn)行中樞給藥明顯使其食物攝入增加且能量消耗減少(Stanley，B.和Leibowitz，S.，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 823940，1985；Billington等人.，Am J.Physiol.，260，R321，1991)。相信這些效果至少部分間接通過NPY Y5受體亞類的激活而引發(fā)。NPY Y5受體亞類的分離和表征已見于報(bào)道(Gerald，C.等人.，Nature，1996，382，168；Gerald，C.等人.WO96/19542)。另外，已有報(bào)告稱通過給大鼠服用Y5-選擇性激動(dòng)劑[D-Trp32]NPY將NPY Y5受體激活刺激了其進(jìn)食并減少了其能量消耗(Gerald，C.等人.，Nature，1996，382，168；Hwa，J.et al.，Am.J.Physiol.，277(46)，R1482，1999)。因此，可阻斷NPY與NPY Y5受體亞類的聯(lián)接的化合物應(yīng)該可以用于肥胖及進(jìn)食障礙疾患，如神經(jīng)性易餓癥，神經(jīng)性厭食癥的治療，及與過度肥胖相關(guān)的疾病，如II型糖尿病，胰島素耐藥，高血脂，和高血壓的治療。
公開的PCT專利申請WO 00/27845描述了一類化合物，其特征在于其為螺旋-二氫吲哚，據(jù)稱為選擇性神經(jīng)肽Y Y5受體拮抗劑且可用于肥胖及其相關(guān)并發(fā)癥的治療。具有治療活性的已知脲衍生物描述于美國專利4,623,662(抗動(dòng)脈粥樣硬化劑)和4,405,662(治療脂肪代謝)。臨時(shí)申請美國系列號No.60/232,255描述了一類取代的脲神經(jīng)肽Y Y5受體拮抗劑。
發(fā)明簡述本發(fā)明涉及由以下結(jié)構(gòu)式I表示的化合物 包括其N-氧化物，其中Y為 或 R1為H或(C1-C6)烷基；R2為H，(C1-C6)烷基，(C3-C9)環(huán)烷基或(C3-C7)環(huán)烷基(C1-C6)烷基；R3 或 Z為OR10，-N(R9)(R10)或-NH2；j為0，1或2；k為1或2；l為0，1或2；m為0，1或2；R4為1-3個(gè)取代基，其獨(dú)立地選自H，-OH，鹵素，(C1-C6)烷基，(C3-C7)環(huán)烷基，(C3-C7)環(huán)烷基(C1-C6)烷基，-CN，-O(C1-C6)烷基，-O(C3-C7)環(huán)烷基，-O(C1-C6)烷基(C3-C7)環(huán)烷基，-S(C1-C6)烷基，-S(C3-C7)環(huán)烷基，-S(C1-C6)烷基(C3-C7)環(huán)烷基，-NH2，-N(R9)(R10)，-NO2，-CONH2，-CONR9R10和NR2COR10；
R5為1-3個(gè)取代基，獨(dú)立地選自H，鹵素，-OH，鹵代烷基，鹵代烷氧基，-CN，-NO2，(C1-C6)烷基，(C3-C7)環(huán)烷基，(C3-C7)環(huán)烷基(C1-C6)烷基，-O(C1-C6)烷基，-O(C3-C7)環(huán)烷基，-O(C1-C6)烷基(C3-C7)環(huán)烷基，-CONH2和-CONR9R10；R6為-SO2(C1-C6)烷基，-SO2(C3-C7)環(huán)烷基，-SO2(C1-C6)烷基(C3-C7)環(huán)烷基，-SO2(C1-C6)鹵代烷基，-SO2(羥基(C2-C6)烷基)，-SO2(氨基(C2-C6)烷基)，-SO2(烷氧基(C2-C6)烷基)，-SO2(烷基氨基(C2-C6)烷基)，-SO2(二烷基氨基(C2-C6)烷基)，-SO2(芳基)，-SO2(雜芳基)，-SO2(芳基(C2-C6)烷基)，-SO2NH2，-SO2NR9R10，-C(O)(C1-C6)烷基，-C(O)(C3-C7)環(huán)烷基，-C(O)(C3-C7)環(huán)烷基(C1-C6)烷基，-C(O)芳基，-C(O)雜芳基，-C(O)NR9R10，-C(O)NH2，-C(S)NR9R10，C(S)NH2，芳基，雜芳基，-(CH2)nC(O)NH2，-(CH2)nC(O)NR9R10，-C(＝NCN)烷硫基，-C(＝NCN)NR9R10，(C1-C6)烷基，(C3-C7)環(huán)烷基，(C3-C7)環(huán)烷基(C1-C6)烷基，芳基(C1-C6)烷基，雜芳基(C1-C6)烷基或-C(O)OR9，n＝1至6；R7＝H或烷基；R8為H，(C1-C6)烷基，(C3-C7)環(huán)烷基，(C3-C7)環(huán)烷基(C1-C6)烷基，芳基，雜芳基，-SO2(C1-C6)烷基，-SO2(C3-C7)環(huán)烷基，-SO2(C1-C6)烷基(C3-C7)環(huán)烷基，-SO2(C1-C6)鹵代烷基或-SO2(芳基)；R9為(C1-C6)烷基，(C3-C7)環(huán)烷基，(C3-C7)環(huán)烷基(C1-C6)烷基，芳基(C1-C6)烷基，芳基或雜芳基；及，R10為氫，(C1-C6)烷基，(C3-C7)環(huán)烷基，(C3-C7)環(huán)烷基(C1-C6)烷基，芳基(C1-C6)烷基，芳基或雜芳基；或R9和R10相聯(lián)形成含有1至2個(gè)雜原子的4-7元環(huán)；或一個(gè)其藥學(xué)可接受的加合鹽和/或水合物，或其前體藥物，或其可使用的幾何或光學(xué)異構(gòu)體或外消旋混合物。
本發(fā)明還涉及治療肥胖癥和進(jìn)食障礙疾患，如食欲過盛，和糖尿病的方法，其包括給需要此治療的哺乳動(dòng)物服用有效量的式I化合物。
本發(fā)明的另一方面涉及一種用于治療肥胖癥，進(jìn)食障礙疾患和糖尿病的藥學(xué)組合物，其包括與藥學(xué)可接受的載體相結(jié)合的式I化合物。發(fā)明詳述除非另行說明，以下定義適用于本說明書及權(quán)利要求的全文。這些定義無論在術(shù)語單獨(dú)使用時(shí)還是在其與其他術(shù)語結(jié)合使用時(shí)均有效。因此，名詞“烷基”的定義可適用于“烷基”及“烷氧基”等中的“烷基”部分。
烷基指直鏈或支鏈飽和烴鏈，其含有指定數(shù)量的碳原子。當(dāng)碳原子數(shù)未作限定時(shí)，指1至6個(gè)碳。
鹵素指氟，氯，溴或碘。
鹵代烷基指被鹵素取代的烷基，其中鹵素取代基的數(shù)目為從一到完全取代烷基取代基所需的那么多鹵素取代基。
芳基指具有至少一個(gè)芳香環(huán)的單或雙環(huán)體系，包括但不局限于苯基，萘基，四氫萘基，茚滿基等。芳基可以是未取代的或被一個(gè)，兩個(gè)或三個(gè)各自獨(dú)立選自低級烷基，鹵素，氰基，硝基，鹵代烷基，羥基，烷氧基，羧基，羧酰胺基，巰基，硫氫基，氨基，烷基氨基和雙烷基氨基的取代基取代。
雜芳基指5到10元單或苯并芳香環(huán)，其含有1至3個(gè)各自獨(dú)立地選自-O-，-S-，和-N＝的雜原子，前提是環(huán)不具有相鄰的氧和硫原子。雜芳基可以是未取代的或被一個(gè)，兩個(gè)或三個(gè)各自獨(dú)立選自低級烷基，鹵素，氰基，硝基，鹵代烷基，羥基，烷氧基，羧基，羧酰胺基，巰基，硫氫基，氨基和雙烷基氨基的取代基取代。
若一個(gè)變量在結(jié)構(gòu)式中出現(xiàn)多次，如R9，每一個(gè)出現(xiàn)多次的變量的具體含義可各自獨(dú)立地選自該變量的定義。
N-氧化物可在R取代基中的叔氮上，或雜芳烴取代基的＝N-上形成，且其包括在式I化合物中。
對于本發(fā)明含有至少一個(gè)不對稱碳原子的化合物，所有異構(gòu)體，包括非對映異構(gòu)體，對映異構(gòu)體和內(nèi)旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體均被認(rèn)為是本發(fā)明的一部分。本發(fā)明包括d和l異構(gòu)體的純物質(zhì)形式或混合物，包括外消旋混合物形式在內(nèi)。異構(gòu)體可通過通用方法，或者通過分離式I化合物的異構(gòu)體或者通過合成式I化合物的單種異構(gòu)體制備。
式I化合物可以以未溶解的或溶解的形式存在，包括水合形式。通常，溶解的形式含有藥學(xué)可接受的溶劑如水，乙醇等，其對于本發(fā)明目的來說與未溶解的形式是等價(jià)的。
式I化合物可與有機(jī)或無機(jī)酸形成藥學(xué)可接受的鹽。適合于成鹽的酸的例子為鹽酸，硫酸，磷酸，乙酸，檸檬酸，丙二酸，水楊酸，蘋果酸，富馬酸，丁二酸，抗壞血酸，馬來酸，甲烷磺酸及其他本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的無機(jī)酸及羧酸。鹽通過將游離堿形式與足夠量的以傳統(tǒng)方式制備鹽所需的酸接觸而制備。游離堿形式可通過用適當(dāng)?shù)南A水溶液，如稀氫氧化鈉，碳酸鉀，氨水或碳酸氫鈉水溶液處理鹽得到再生。游離堿形式在某些物理性質(zhì)方面有別于其各自的鹽形式，如在極性溶劑中的可溶性，但對于本發(fā)明目的而言，鹽在其他方面與各自的游離堿形式是等價(jià)的。
在一類優(yōu)選的式I化合物中，Y為 且R3 特別是包括其中R5為1-3個(gè)各自獨(dú)立地選自H，鹵素，鹵代烷基和鹵代烷氧基的取代基，且j和k之和為1，2或3的化合物。
在另一類優(yōu)選的式I化合物中，Y為 且R3為 特別是包括其中R5和R6各自獨(dú)立地為1-3個(gè)各自獨(dú)立地選自H，鹵素，鹵代烷基和鹵代烷氧基的取代基，且j和k之和為1，2或3的化合物。
式I化合物可用本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的方法制備，其示于以下反應(yīng)方案圖及以下制備和實(shí)施例中。
方案1 在方案1中，4-鹵代苯基異氰酸酯與氨基取代的環(huán)胺衍生物縮合得到4-鹵代苯基脲衍生物。通過本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的方法進(jìn)行環(huán)胺保護(hù)基團(tuán)的裂分可提供可衍生，如通過烷基化(路徑1)衍生的環(huán)胺衍生物。將產(chǎn)品與，例如芳基硼酸，在鈀催化下進(jìn)行偶合(Suzuki偶合)生成二芳基脲衍生物?；蛘?，縮合產(chǎn)物可被芳基化，例如通過Suzuki偶合反應(yīng)(路徑2)。若A為保護(hù)基團(tuán)，去保護(hù)產(chǎn)生胺，其可被如磺?；?，?；蛲榛苌?。
方案2 在方案2中，芳基鋰，如5-噻吩基鋰與硼酸三甲酯的反應(yīng)，所得硼酸酯與4-鹵代苯胺在鈀催化劑的存在下進(jìn)行偶合會(huì)得到二芳基胺衍生物。用例如三氟乙酸酐對胺進(jìn)行保護(hù)得到三氟乙酰胺衍生物，它可以被適合的鹵化劑，如N-氯代丁二酰亞胺鹵化。可以除去保護(hù)基且所得到的胺可以與，例如N，N’-二丁二酰亞基碳酸酯和氨基取代的環(huán)胺衍生物，如氨基哌啶衍生物反應(yīng)得到取代的脲。哌啶氮保護(hù)基的脫除得到胺，它可以通過例如磺?；蝓；苌?br> 方案3 在方案3中，4-鹵代苯胺或4-鹵代硝基苯衍生物通過利用，如Suzuki偶合反應(yīng)被?；?。當(dāng)X為硝基時(shí)，硝基隨后被還原為胺。二芳基胺衍生物可以被轉(zhuǎn)化為異氰酸酯衍生物，它可以與氨基取代的環(huán)胺衍生物縮合(路線3)。或者，與氨基取代的環(huán)烷基衍生物縮合得到環(huán)烷基脲衍生物(路線4和5)。適當(dāng)官能化的環(huán)烷基脲衍生物可以如示于，例如路線5中那樣被進(jìn)一步官能化。
式I化合物表現(xiàn)出對神經(jīng)肽Y Y5受體選擇性的拮抗活性，其已經(jīng)與治療肥胖癥，進(jìn)食障礙疾患，如食欲過盛和糖尿病的藥物活性關(guān)聯(lián)起來。
本發(fā)明另一方面涉及治療患有由神經(jīng)肽Y Y5受體中介的疾病或病癥的哺乳動(dòng)物(如，人類)的方法，其通過給該哺乳動(dòng)物服用治療有效量的式I化合物，其前體藥物，或所述化合物或所述前體藥物的藥學(xué)上可接受的鹽而實(shí)現(xiàn)。
本發(fā)明的另一方面涉及治療肥胖癥的方法，包括給需要該治療的哺乳動(dòng)物服用治療有效量的式I化合物或其前體藥物，或所述化合物或所述前體藥物的藥學(xué)可接受的鹽。
本發(fā)明的另一方面涉及治療代謝和進(jìn)食障礙疾患，如易餓病和厭食癥的方法，其包括給該哺乳動(dòng)物服用治療有效量的式I化合物，其前體藥物，或所述化合物或所述前體藥物的藥學(xué)可接受的鹽。
本發(fā)明的另一方面涉及治療高血脂的方法，其包括給該哺乳動(dòng)物服用治療有效量的式I化合物，其前體藥物，或所述化合物或所述前體藥物的藥學(xué)可接受的鹽。
本發(fā)明的另一方面涉及治療脂肪團(tuán)和脂肪堆積的方法，其包括給該哺乳動(dòng)物服用治療有效量的式I化合物，其前體藥物，或所述化合物或所述前體藥物的藥學(xué)可接受的鹽。
本發(fā)明的另一方面涉及治療II型糖尿病的方法，其包括給該哺乳動(dòng)物服用治療有效量的式I化合物，其前體藥物，或所述化合物或所述前體藥物的藥學(xué)可接受的鹽。
除了本發(fā)明化合物對神經(jīng)肽Y Y5受體亞類的直接效果外，還有另外一些疾病和病癥可受益于體重減輕，如胰島素耐藥，葡萄糖耐量損害，II型糖尿病，高血壓，高血脂，心血管病，膽結(jié)石，某些癌癥，和睡眠呼吸暫停。
本發(fā)明還涉及藥物組合物，其含有一定量式I化合物，其前體藥物，或所述化合物或所述前體藥物的藥學(xué)可接受的鹽及其所用的藥學(xué)接受的載體。
本發(fā)明還涉及用于治療肥胖癥的藥物組合物，其含有治療肥胖用量的式I化合物，其前體藥物，或所述化合物或所述前體藥物的藥學(xué)可接受的鹽及其所用的藥學(xué)接受的載體。
式I化合物可通過本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的方法，通過液相或固相合成制備，其示于以下制備和實(shí)施例的反應(yīng)方案中。
式I化合物在用于證明神經(jīng)肽Y Y5受體拮抗活性的測試中顯示出藥理學(xué)活性。該化合物以藥物治療量給藥時(shí)為無毒。以下為測試過程的描述。
cAMP測定HEK-293細(xì)胞表達(dá)的Y5受體亞類保持在Dulbecco’s改性的Eagles’介質(zhì)中(Gico-BRL)并補(bǔ)充了10％FCS(ICN)，1％青霉素-鏈霉素和200μg/ml Geneticin_(GibcoBRL #11811-031)，氣氛為加濕的5％CO2。測試前兩天，使用細(xì)胞分離溶液(1X；無酶[Sigma #C-5914])將細(xì)胞從T-175組織培養(yǎng)瓶中釋放出來并植入96池平底組織培養(yǎng)皿中，密度為每池15,000至20,000個(gè)細(xì)胞。約48小時(shí)后，細(xì)胞單層用Hank’s平衡鹽溶液(HBSS)淋洗，然后在37℃，在加入或不加入所研究的拮抗劑化合物情況下，用約150μl/池含有1mM 3-異丁基-1-甲基黃嘌呤([IBMX]，Sigma #1-587)的測試緩沖液(HBSS中補(bǔ)充了4mMMgCl2，10mM HEPES，0.2％BSA[HH])預(yù)培養(yǎng)。20分鐘后除去1mM IBMX-HH測試緩沖液(土拮抗劑化合物)并代之以含有1.5μM(CHO細(xì)胞)或5μM(HEK-293細(xì)胞)forskolin(Sigma #F-6886)和不同濃度NPY的測試緩沖液，其中有或沒有所研究的拮抗劑化合物。10分鐘后，除去介質(zhì)并用75μl乙醇處理細(xì)胞單層。組織培養(yǎng)皿在平板振蕩器上攪拌15分鐘，其后培養(yǎng)皿轉(zhuǎn)移到熱浴中以蒸去乙醇。干燥所有池后，細(xì)胞殘留物用250μl FlashPlate_測試緩沖液再溶解。每池中cAMP量用[125I]-cAMP FlashPlate_試劑盒(NEN#SMP-001)進(jìn)行定量，其操作按照生產(chǎn)商提供的規(guī)程進(jìn)行。數(shù)據(jù)以pmol cAMP/ml或控制量百分比的形式表述。所有數(shù)據(jù)點(diǎn)測定三次并用非線性(S形曲線)回歸議程(GraphPad PrismTM)計(jì)算EC50(nM)。拮抗劑化合物的KB合用下式進(jìn)行估算KB＝[B]/(1-{[A’]/[A]})其中[A]為不存在拮抗劑時(shí)激動(dòng)劑(NPY)的EC50，[A’]為存在拮抗劑時(shí)激動(dòng)劑(NPY)的EC50，而[B]為拮抗劑的濃度。NPY受體結(jié)合測試人類NPY Y5受體在CHO細(xì)胞中表達(dá)。結(jié)合測試在50mM HEPES，PH7.2，2.5mM CaCl2，1mMMgCl2和總體積200μl含有5-10μg膜蛋白質(zhì)和0.1nM125L-肽YY的0.1％BSA中進(jìn)行。非特殊結(jié)合在存在1μM NPY條件下測定。反應(yīng)混合物室溫下培養(yǎng)90分鐘后用0.5％聚乙烯亞胺預(yù)浸泡過的Millipore MAFC玻璃纖維濾盤濾過。過濾器用磷酸緩沖鹽水溶液清洗，并用Packard TopCount閃爍計(jì)數(shù)器測量放射性。
對于本發(fā)明化合物，觀察到神經(jīng)肽Y5受體的結(jié)合活性范圍為約0.2nM至約250nM。本發(fā)明化合物優(yōu)選具有的結(jié)合活性在約0.2nM至約250nM范圍內(nèi)，更優(yōu)選約0.2至100nM，最優(yōu)選約0.2至10nm。
本發(fā)明另一方面為式I化合物，其前體藥物，或所述化合物或所述前體藥物的藥學(xué)可接受的鹽與其他下述化合物的結(jié)合。
由此，本發(fā)明另一方面為治療肥胖癥的方法，包括向一哺乳動(dòng)物(如，女人或男人)給以以下藥物a.一定量的第一化合物，所述第一化合物為式I化合物，其前體藥物，或所述化合物或所述前體藥物的藥學(xué)可接受的鹽；和b.一定量的第二化合物，所述第二化合物為抗肥胖和/或厭食試劑如β3激動(dòng)劑，類甲狀腺試劑，厭食試劑，或NPY拮抗劑，其中第一和第二化合物的量產(chǎn)生治療效果。
本發(fā)明還涉及藥物組合物，其包含一種治療有效量的組合物，其含有第一化合物，所述第一化合物為式I化合物，其前體藥物，或所述化合物或所述前體藥物的藥學(xué)可接受的鹽。
第二化合物，所述第二化合物為抗肥胖和/或厭食試劑如β3激動(dòng)劑，類甲狀腺試劑，厭食試劑，或NPY拮抗劑；和/或任選的藥學(xué)載體，賦形劑或稀釋劑。
本發(fā)明的另一方面為一種試劑盒，其含有a.一定量的式I化合物，其前體藥物，或所述化合物或所述前體藥物的藥學(xué)可接受的鹽和藥學(xué)可接受的載體，賦形劑或稀釋劑，其為第一單位劑量形式；b.一定量抗肥胖和/或厭食試劑如β3激動(dòng)劑，類甲狀腺試劑，厭食試劑，或NPY拮抗劑；和藥學(xué)可接受的載體，賦形劑或稀釋劑，其為第二單位劑量形式；和c.用于容納所述第一和第二劑量形式的裝置，其中第一和第二化合物的量產(chǎn)生治療效果。
在上述結(jié)合方法，結(jié)合組合物和結(jié)合試劑盒中，優(yōu)選的抗肥胖和/或厭食試劑(單獨(dú)使用或其任意組合)為苯丙醇胺，麻黃堿，假麻黃堿，苯丁胺，縮膽囊素A(以下稱之為CCK-A)激動(dòng)劑，一元胺再吸收抑制劑(如sibutramine)，類交感神經(jīng)劑，血清素激活劑(如dex-氟苯丙胺或氟苯丙胺)，多巴胺激動(dòng)劑(如溴麥角環(huán)肽)，黑素細(xì)胞-刺激激素受體激動(dòng)劑或類似的，黑素細(xì)胞-刺激激素類似物，大麻受體拮抗劑，黑色素濃縮激素拮抗劑，OB蛋白質(zhì)(以下稱作“l(fā)eptin”)，leptin類似物，leptin受體激動(dòng)劑，galanin拮抗劑或GL脂肪酶抑制劑或減少劑(如orlistat)。其他厭食劑包括韓蛙皮素激動(dòng)劑，脫水表雄酮或其類似物，糖腎上腺皮質(zhì)激素受體激動(dòng)劑和拮抗劑，阿立新受體拮抗劑，脲腎上腺皮質(zhì)激素結(jié)合蛋白質(zhì)拮抗劑，類胰高血糖素肽-1受體如Exendin和纖毛神經(jīng)因子如Axokine的激動(dòng)劑。
本發(fā)明的另一個(gè)方面是治療糖尿病的方法，其包括給哺乳動(dòng)物(如女性或男性人類)服用下列藥物a.一定量的第一化合物，所述第一化合物為式I化合物，其前體藥物，或所述化合物或所述前體藥物的藥學(xué)可接受的鹽；b.一定量的第二化合物，所述第二化合物為醛糖還原酶抑制劑，肝糖磷酸化酶抑制劑，山梨醇脫氫酶抑制劑，蛋白質(zhì)酪氨酸磷酸酶1B抑制劑，二肽蛋白酶抑制劑，胰島素(包括口服有生物活性的胰島素制劑)，胰島素類似物，麥撒西丁，阿卡波糖，PPAR-伽馬配體如曲格列酮，rosaglitazone，吡格列酮或GW-1929，磺酰脲，格列吡嗪，優(yōu)糖，或氯磺丙脲，其中第一和第二化合物的量可產(chǎn)生治療效果。
本發(fā)明還涉及藥物結(jié)合組合物，其包含治療有效量含有以下成分的組合物第一化合物，所述第一化合物為式I化合物，其前體藥物，或所述化合物或所述前體藥物的藥學(xué)可接受的鹽；第二化合物，所述第二化合物為醛糖還原酶抑制劑，肝糖磷酸化酶抑制劑，山梨醇脫氫酶抑制劑，蛋白質(zhì)酪氨酸磷酸酶1B抑制劑，二肽蛋白酶抑制劑，胰島素(包括口服有生物活性的胰島素制劑)，胰島素類似物，麥撒西丁，阿卡波糖，PPAR-伽馬配體如曲格列酮，rosaglitazone，吡格列酮或GW-1929，磺酰脲，格列吡嗪，優(yōu)糖，或氯磺丙脲；及任選的藥學(xué)載體，賦形劑或稀釋劑。
本發(fā)明的另一個(gè)方面為一種試劑盒，其含有a.一定量的式I化合物，其前體藥物，或所述化合物或所述前體藥物的藥學(xué)可接受的鹽和藥學(xué)可接受的載體，賦形劑或稀釋劑，其為第一單位劑量形式；b.一定量的醛糖還原酶抑制劑，肝糖磷酸化酶抑制劑，山梨醇脫氫酶抑制劑，蛋白質(zhì)酪氨酸磷酸酶1B抑制劑，二肽蛋白酶抑制劑，胰島素(包括口服有生物活性的胰島素制劑)，胰島素類似物，麥撒西丁，阿卡波糖，PPAR-伽馬配體如曲格列酮，rosaglitazone，吡格列酮或GW-1929，磺酰脲，格列吡嗪，優(yōu)糖，或氯磺丙脲和藥學(xué)可接受的載體，賦形劑或稀釋劑，其為第二單位劑量形式。
c.用于容納所述第一和第二劑量形式的裝置，其中第一和第二化合物的量產(chǎn)生治療效果。
為從本發(fā)明所述化合物制備藥物組合物，惰性且藥學(xué)可接受的載體可為固體或液體。固體形式的制劑包括粉末，片劑，可分散顆粒，膠囊，面囊劑和栓劑。粉末和片可含有約5％至約95％的活性成分。適合的固體載體是本領(lǐng)域內(nèi)公知的，如碳酸鎂，硬脂酸鎂，滑石，糖或乳糖。片，粉末，面囊劑和膠囊可以適于口服給藥的固體劑型使用。藥學(xué)可接受載體的例子和不同組合物的生產(chǎn)方法可在A.Gennaro(編輯)的Remington’s Pharmaceutical Sciences，第18版，(1990)，MackPublishing Co.，Easton，Pennsylvania中找到。
液體形式制劑包括溶液，懸浮液和乳液。例如，用于不經(jīng)腸的注射用水或水-丙二醇溶液或向口服溶液、懸浮液和乳液中添加甜味劑和遮光劑。液體形式的制劑還可包括用于鼻內(nèi)給藥的溶液。
適于吸入使用的氣溶膠制劑可包含溶液和粉未形式的固體；其可與藥學(xué)可接受的載體，如惰性壓縮氣體如氮?dú)庀嘟Y(jié)合。
還有固體形式的制劑，其傾向于在即將使用前轉(zhuǎn)化為液體形式制劑用于經(jīng)口或非腸道給藥。這樣的液體形式包括溶液，懸浮液和乳液。
本發(fā)明化合物還可以是可經(jīng)皮傳遞的。經(jīng)皮組合物可采用霜，洗液，氣霧劑和/或乳液的形式并可被包括在經(jīng)皮的貼片中，該貼片是本技術(shù)領(lǐng)域內(nèi)為實(shí)現(xiàn)本目的而傳統(tǒng)使用的基質(zhì)或儲(chǔ)存形式。
優(yōu)選該化合物口服給藥。
優(yōu)選，藥物制劑采用一種單位劑量形式。采用這樣的形式，制劑被分為適當(dāng)大小的單元?jiǎng)┝?，其含有適當(dāng)量，如為達(dá)到希望效果的有效量的活性組份。
單位劑量制劑中的活性化合物的量根據(jù)特定的用途可不同或在約0.01mg至約1000mg，優(yōu)選約0.01mg至約750mg，更優(yōu)選約0.01mg至約500mg，最優(yōu)選約0.01mg至約250mg范圍內(nèi)進(jìn)行調(diào)節(jié)。
實(shí)際使用的劑量可根據(jù)患者的需要和所治療癥狀的嚴(yán)重程度而不同。特定情況下確定適當(dāng)?shù)膭┝糠梅秶鸀楸绢I(lǐng)域技術(shù)人員公知。為方便起見，總劑量可進(jìn)行分割并在一天中按要求逐份給藥。
本發(fā)明化合物和/或其藥學(xué)可接受的鹽的給藥量和頻率根據(jù)對患者如年齡，癥狀和患者體態(tài)及所治療癥狀的嚴(yán)重程度等因素的判定來調(diào)節(jié)?？诜o藥典型的推薦日攝入量范圍為約0.04mg/天至約4000mg/天，分為兩到四個(gè)劑量。
此處公開的發(fā)明以以下制備和實(shí)施例舉例說明，其不應(yīng)解釋為對本公開的限制?？晒┻x擇的機(jī)械路徑和類似結(jié)構(gòu)對于本領(lǐng)域技術(shù)人員是顯而易見的。
在制備和實(shí)施例中，使用以下縮寫室溫(R.T.)，苯基(Ph)，叔丁基氧羰基(Boc)，甲胺(MeNH2)，三乙酰氧基硼氫化鈉(NaBH(Oac)3)，乙酸乙酯(EtOAc)，甲醇(MeOH)，三乙胺(Et3N)，乙醚(Et2O)，四氫呋喃(THF)，二異丙基乙胺(iPr2NEt)，1，2-二-甲氧基乙烷(DME)，乙醇(EtOH)和制備薄層色譜(PTLC)。
制備1 向N-叔丁氧基羰基-4-哌啶酮(10.0g，50mmol)和含水甲胺(40％w/w，10ml)的1，2-二氯乙烷(125ml)混合液中加入NaBH(OAc)3(16.0g，75mmol)。反應(yīng)混合物攪拌過夜，然后加入1MNaOH(250ml)，用乙醚(700ml)萃取全部混合物。用飽和NaCl洗滌有機(jī)層，干燥(MgSO4)，過濾和濃縮得到油狀產(chǎn)物(10.5g，97％)。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ4.09(2H，m)，2.86(2H，m)，2.55(1H，m)，2.50(3H，s)，1.90(2H，m)，1.51(9H，s)，1.30(2H，m).
制備2 第一步 在室溫下，向N-芐氧基羰基-4-哌啶酮(10.70g，43.1mmol)和含水的40％MeNH2(6.67g，85.8mmol)的CH2Cl2(200ml)混合物中加入NaBH(OAc)3(27.25g，128.6mmol)。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌3小時(shí)，然后傾入到飽和NaHCO3中并用CH2Cl2(3×200ml)萃取，將合并的有機(jī)層干燥(Na2SO4)，過濾和濃縮得到產(chǎn)物(10.63g，100％)，不進(jìn)行進(jìn)一步純化即可使用。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ7.34(5H，m)，5.12(2H，s)，4.19(2H，b)，2.87(2H，b)，2.72(1H，m)，2.49(3H，s)，1.92(2H，b)，1.42(2H，m).MS m/e 249(M+H).
第二步 在室溫下，向第一步的產(chǎn)物(10.63g，42.9mmol)的無水CH2Cl2(200ml)溶液中逐份加入二叔丁基二碳酸酯(11.30g，51.8mmol)。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌5小時(shí)，然后傾入到1NNaOH(50ml)/CH3OH(10ml)中。混合物攪拌15分鐘并用CH2Cl2(3×200ml)萃取。將合并的有機(jī)層干燥(Na2SO4)，過濾和濃縮。殘余物進(jìn)行柱層析(梯度洗脫液為1∶10-1∶4的EtOAc/己烷)，得到產(chǎn)物(13.00g，87％)。
1HNMR(CDCl3，400MHz)δ7.33(5H，m)，5.10(2H，s)，4.19(3H，m)，2.87(2H，b)，2.68(3H，s)，1.60(4H，m)，1.44(9H，s).MS m/e 349(M+H).
第三步將第二步的產(chǎn)物(12.90g，37.0mmol)和10％Pd/C在MeOH中的混合物在H2氣氛下攪拌。16小時(shí)后將反應(yīng)混合物通過硅藻土過濾，濾墊用MeOH洗滌。將合并的濾液和洗滌液進(jìn)行濃縮得到產(chǎn)物(7.80g，98.3％)。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ4.19(1H，b)，3.15(2H，b)，2.74(3H，s)，2.66(2H，m)，1.63(4H，m)，1.46(9H，s).MS m/e 215(M+H).
制備3 向攪拌著的制備1(21.0g，83.7mmol)和Et3N(35ml，252mmol)的CH2Cl2(300ml)溶液中逐滴加入氯甲酸芐酯(18ml，126mmol)。5小時(shí)后，加入飽和的NH4Cl(200ml)，用H2O(150ml)和飽和NaCl(150ml)洗滌有機(jī)層，干燥(MgSO4)，過濾和濃縮。向殘余物(32g)中加入4N HCl的1，4-二噁烷(300ml)溶液，混合物攪拌4小時(shí)。濃縮反應(yīng)混合物，加入丙酮，并將反應(yīng)混合物再次濃縮。將固體殘?jiān)苡贛eOH(40ml)中并加入Et2O。收集所得沉淀，用Et2O洗滌，干燥得到白色固體(20.2g，85％)產(chǎn)物。MS m/e為249(M+H，游離堿)實(shí)施例1 第一步 向制備1(7.0g，33mmol)的CH2Cl2(200ml)溶液中加入4-溴苯基異氰酸酯(6.8g，35mmol)。反應(yīng)混合物攪拌16小時(shí)，然后加入H2O(200ml)，有機(jī)層干燥(MgSO4)，過濾并蒸干。殘余物用己烷研磨得到白色固體(11.0g，81％)。
MS(FAB)m/e 411(M+H)+。
第二步 向第一步的產(chǎn)物(400mg，0.97mmol)和Pd(dppf)Cl2·CH2Cl2(200g，0.24mmol)的甲苯(10ml)溶液中加入2-氟苯基硼酸(250mg，1.43mmol)，Cs2CO3(350mg，1.1mmol)和H2O(0.3ml)。反應(yīng)混合物在90℃油浴和N2下加熱1小時(shí)，然后冷卻。將反應(yīng)混合物在EtOAc(100ml)和H2O(50ml)中進(jìn)行分配。有機(jī)層干燥(MgSO4)，過濾和蒸干。殘余物進(jìn)行閃蒸層析(3∶7的丙酮/己烷)，得到產(chǎn)物(400mg，97％)。
對于C24H31FN3O3的HRMS計(jì)算值(M+H)428.2349，測量值428.2343通過基本上相同的方法將第一步的產(chǎn)物與適當(dāng)?shù)呐鹚崤己系玫?對于C25H31FN3O3的HRMS計(jì)算值(M+H)478.2318，測量值478.2313 對于C25H31F3N3O3的HRMS計(jì)算值(M+H)478.2318，測量值478.2313 對于C25H31FN3O4的HRMS計(jì)算值(M+H)494.2260，測量值494.2267 對于C24H31FN3O3的HRMS計(jì)算值(M+H)428.2343，測量值428.2349 MS(FAB)m/e 478(M+H)+ MS(FAB)m/e 446(M+H)+第三步 向第二步產(chǎn)物(100mg，0.23mmol)的CH2Cl2(5ml)溶液中加入4M HCl的1，4-二噁烷(3ml)溶液。16小時(shí)后，將反應(yīng)混合物濃縮。殘余物用乙醚研磨，收集固體，用乙醚洗滌，空氣干燥得到產(chǎn)物(80mg，96％)。
對于C19H23FN3O的HRMS計(jì)算值(M+H)328.1825，測量值328.1823。
通過用基本上相同的方法處理其他的第二步的產(chǎn)物得到 MS(FAB)m/e 378(M+H)+ MS(FAB)m/e 378(M+H)+ 對于C20H23F3N3O2的HRMS計(jì)算值(M+H)394.1742，測量值394.1747 對于C19H23FN3O的HRMS計(jì)算值(M+H)328.1825，測量值328.1823 MS(ES)m/e 378(M+H)+ 對于C19H22F2N3O的HRMS計(jì)算值(M+H)346.1731，測量值346.1725第四步向攪拌著的第三步產(chǎn)物(20mg，0.055mmol)和三乙胺(0.1ml，0.7mmol)的CH2Cl2(10ml)溶液中加入甲磺酰氯(0.1ml，0.1mmol)。16小時(shí)后，將反應(yīng)混合物濃縮并將殘余物進(jìn)行PTLC(1∶2的丙酮/己烷)，得到白色固體(15mg，67％)。
對于C20H25FN3O3S的HRMS計(jì)算值(M+H)406.1601，測量值406.1599。
以下實(shí)施例是從適合的起始胺和磺酰氯制備的 實(shí)施例2
第一步 在N2氣氛下將攪拌著的1M 1-噻吩基鋰的THF溶液(40ml，40mmol)在干冰/丙酮浴中冷卻。加入硼酸三乙酯(8.5ml，50mmol)，并使反應(yīng)混合物升溫到室溫。20分鐘后，加入4-碘苯胺(6.6g，30mmol)、Na2CO3(4.5g)、H2O(20ml)和Pd(dppf)Cl2·CH2Cl2(750mg，0.9mmol)。將反應(yīng)混合物在N2下攪拌直到放熱結(jié)束，然后在Et2O和H2O中進(jìn)行分配。用1N NaOH洗滌Et2O層，干燥(Na2CO3)，并通過硅膠墊過濾，用Et2O洗脫。將所得棕色固體溶于CH2Cl2(100ml)中并在攪拌下逐份加入三氟乙酸酐(8ml，57mmol)的CH2Cl2(100ml)溶液。向所得懸浮液中加入CH2Cl2(450ml)，并將反應(yīng)混合物攪拌20分鐘。加入水(200ml)，之后逐份加入NaHCO3(7g)直到CO2逸出停止。有機(jī)層與MgSO4和DARCO一起攪拌，然后過濾、濃縮得到固體。將固體溶于CH2Cl2(50ml)中，并向攪拌著的溶液中加入己烷(100ml)。收集固體，用己烷洗滌并干燥得到產(chǎn)物(6.12g，75％)。
熔點(diǎn)213-216℃，對于C12H8F3NOS的計(jì)算值C53.14；H2.58；N5.17。測定值C53.06；H2.85；N4.90％。
第二步 向第一步的產(chǎn)物(19.0g，70mmol)的DMF(150ml)溶液中加入N-氯代丁二酰亞胺(10.1g，76mmol)和三氟乙酸(1.5ml)，將反應(yīng)混合物在N2下攪拌2天。加入水(500ml)，收集所得固體，用水洗滌并干燥得到產(chǎn)物(20.6g，96％)。
熔點(diǎn)198-200℃，對于C12H7ClF3NOS的計(jì)算值C47.12；H2.29；N4.58。測定值C47.19；H2.15；N4.47％。
第三步 在室溫下將第二步的產(chǎn)物(15.0g，49.1mmol)和氫氧化鈉(19.6g，490mmol)在MeOH(400ml)和水(150ml)中的混合物攪拌過夜。混合物真空濃縮，并將殘余物在EtOAc和水中分配。有機(jī)層用水、鹽水洗滌，干燥和濃縮。殘余物用閃蒸柱純化(1∶3丙酮/己烷)，得到產(chǎn)物(10.14g，98％)。
1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ7.32(2H，m)，6.90(1H，d，J＝4.8Hz)，6.83(1H，d，J＝4.8Hz)，6.67(2H，m)，3.76(2H，b).
第四步 向攪拌著的、冰冷卻的第三步產(chǎn)物(2.0g，9.5mmol)的THF(100ml)溶液中加入吡啶(2.3ml，28mmol)和N，N’-二丁二亞胺基碳酸酯(2.44g，9.5mmol)。將反應(yīng)混合物在冰浴下攪拌1.5小時(shí)，然后加入制備1(2.04g，9.5mmol)，并使反應(yīng)混合物升溫到室溫。16小時(shí)后，濃縮反應(yīng)混合物，將殘余物溶于EtOAc(200ml)中，并用2N HCl、飽和NaHCO3和飽和NaCl洗滌。將有機(jī)層干燥(Na2SO4)、過濾、蒸干得到產(chǎn)物(4.21g，98％)，它直接用于第五步。對于C22H29ClFN3O3S的HRMS計(jì)算值(M+H)450.1618。測量值450.1623。
第五步 通過實(shí)施例1第3步的方法令第4步的產(chǎn)物(4.11g，9.13mmol)與HCl反應(yīng)得到產(chǎn)物(3.17g)，直接用于第6步。對于C17H21ClFN3OS的HRMS計(jì)算值(M+H)350.1094。測量值350.1100。
第六步向第5步的產(chǎn)物(50mg，0.13mmol)的CH2Cl2(3ml)懸浮液中加入Et3N(39mg，0.39mmol)，之后加入正丙基磺酰氯(20mg，0.14mmol)，反應(yīng)混合物攪拌16小時(shí)。加入EtOAc(10ml)，并用2N HCl、飽和NaHCO3和飽和NaCl洗滌混合物，干燥(MgSO4)、過濾、濃縮。殘余物進(jìn)行PTLC(3∶97MeOH/CH2Cl2)，得到產(chǎn)物(37mg，62％)。對于C20H27ClN3O3S2的HRMS計(jì)算值(M+H)456.1182。測量值456.1179。
在Et3N的存在下令第5步的產(chǎn)物，2-5-1，與適當(dāng)?shù)幕酋Ｂ确磻?yīng)得到以下實(shí)施例
實(shí)施例3
第一步
使用實(shí)施例1第1步的方法，令制備1的產(chǎn)物1(2.3g，107mmol)與4-碘苯基異氰酸酯(2.6g，107mmol)反應(yīng)。通過閃蒸色譜(2∶98MeOH/CH2Cl2)純化得到白色固體。
第二步 在室溫下令第一步的產(chǎn)物(3.0g，6.7mmol)、4M的HCl在1，4-二噁烷(15ml)和DMF中形成的混合物攪拌5小時(shí)。將反應(yīng)混合物濃縮至干，向殘余物中加入H2O(100ml)和3M的NaOH(20ml)。用CH2Cl2(3×100ml)萃取全部溶液。將合并的有機(jī)層干燥(MgSO4)，過濾和蒸發(fā)。然后進(jìn)行閃蒸色譜(2∶98MeOH/CH2Cl2，然后是10∶90(2M NH3的MeOH溶液)/CH2Cl2)，得到白色固體(2.4g，100％)。對于C13H19IN3O的HRMS計(jì)算值(M+H)360.0573。測定值360.0576。
第三步 向攪拌著的、冰冷卻的第二步產(chǎn)物(2.4g，6.7mmol)和環(huán)丙烷醛(0.8ml，11mmol)的CH2Cl2(20ml)溶液中加入NaBH(OAc)3(1.83g，10.8mmol)。使反應(yīng)混合物升溫到室溫并攪拌過夜。反應(yīng)混合物在冰浴中冷卻并加入3M NaOH(5ml)。0.5小時(shí)后，用CH2Cl2(3×200ml)萃取混合物，干燥(MgSO4)、過濾、蒸發(fā)。殘余物用CH2Cl2/己烷(1∶10)研磨，得到白色產(chǎn)物(2.4g，87％)。對于C17H25IN3O的HRMS計(jì)算值(M+H)414.1038。測量值414.1042。
第四步將一個(gè)裝有第3步產(chǎn)物(200mg，0.48mmol)、4-三氟甲氧基苯硼酸(250mg，1.21mmol)、三(二苯亞甲基丙酮)二鈀(O)(50mg，0.05mmol)、CsCO3(0.8g，2.5mmol)和甲苯(10ml)的容器在N2下回流3小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻，然后加入EtOAc(50ml)和H2O(25ml)。通過過濾除去固體，將EtOAc層干燥(Na2SO4)，過濾和蒸發(fā)。殘余物進(jìn)行PTLC(3∶7丙酮/己烷，然后10∶90(2M NH3的MeOH溶液)/CH2Cl2)，得到淺黃色固體(50mg，23％)。對于C24H29F3N3O2的HRMS計(jì)算值(M+H)448.2212。測量值448.2215。
使用適當(dāng)?shù)脑虾突旧舷嗤姆椒?，可以制備以下化合?實(shí)施例4 第1步 向N2吹掃的4-溴代硝基苯(20.0g，99.0mmol)、3，5-二氟苯基硼酸(23.4g，148mmol)和CsCO3(38.7g，119mmol)在甲苯(600ml)和水(30ml)中形成的混合物中加入Pd(dppf)Cl2·CH2Cl2(4.04g，4.95mmol)。反應(yīng)混合物在90℃下加熱2小時(shí)，之后冷卻到室溫，然后經(jīng)硅藻土過濾。用EtOAC(3×100ml)萃取全部混合物。將合并的有機(jī)層干燥(Na2SO4)，過濾和濃縮得到固體。逐份向劇烈攪拌著的冰冷卻的該固體在CH3OH(1L)和NiCl2·6H2O(61.0g，257mmol)中形成的混合物中加入NaBH4(14g，370mmol)。加料結(jié)束后，將反應(yīng)混合物傾入到H2O(100ml)中，然后經(jīng)硅藻土過濾并用EtOAC(3×500ml)萃取。將合并的有機(jī)層干燥(Na2SO4)，過濾和濃縮。殘余物溶于EtOAC中，加入1NHCl/Et2O(300ml)。用己烷洗滌沉淀，空氣干燥并溶于水中。溶液通過加入1N NaOH中和，然后用CH2Cl2(3×1L)萃取。將合并的有機(jī)層干燥(Na2SO4)，過濾和濃縮，得到產(chǎn)物(19.0g，94％)。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ7.38(2H，m)，7.06(2H，m)，6.75(2H，m)，6.72(1H，m)，3.81(s，2H).MS m/e206(M+H).
使用適當(dāng)?shù)娜〈交鹚嵩虾突旧舷嗤姆椒ǎ频靡韵禄衔?1H NMR(CDCl3，400MHz)δ7.41-7.21(5H，m)，7.33(1H，m)，6.76(2H，m)， 3.76(2H，b). 1H NMR(CDCl3，400MHz)δ7.39(2H，m)，7.24(3H，m)，6.76(2H，m)，3.80(2H，b).
根據(jù)以下方法，從4-碘苯胺制備另外的芳基胺 用N2將4-碘苯胺(1.00g，4.57mmol)、3-三氟甲基苯基硼酸(1.30g，6.85mmol)和CsCO3(1.64g，5.02mmol)在甲苯(50ml)和水(3ml)中形成的混合物吹掃5分鐘。向反應(yīng)混合物中加入Pd(dppf)Cl2·CH2Cl2(746mg，0.91mmol)。反應(yīng)混合物在90℃下加熱5小時(shí)，之后冷卻到室溫，并傾入到冷水中。用CH2Cl2(3×100ml)萃取全部混合物。合并的有機(jī)層干燥(Na2SO4)，過濾和蒸干。殘余物通過PTLC(EtOAC/己烷，1∶2)純化得到產(chǎn)物(216mg，20％)。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ7.77(1H，m)，7.70(1H，m)，7.51(2H，m)，7.42(2H，m)，6.78(2H，m)，3.65(2H，b).
使用適當(dāng)?shù)娜〈交鹚嵩虾突旧舷嗤姆椒?，制得以下化合?1H NMR(CDCl3，400MHz)δ7.54(1H，m)，7.34(3H，m)，7.15(1H，t，J＝8.8Hz)，6.75(2H，m)，3.76(2H，b). 1H NMR(CDCl3，400MHz)δ7.48(2H，m)，7.35(2H，d，J＝6.4Hz)，7.08(2H，t，J＝6.4Hz)，6.78(2H，d，J＝6.4Hz)，3.73(2H，b).MS m/e 188(M+H). 1H NMR(CDCl3，400MHz)δ7.51(1H，m)，7.41(3H，m)，7.32(1H，m)，7.23(1H，m)，6.75(2H，m)，3.78(2H，b).MS m/e 204(M+H).
第2步 將N2氣流通過制備2的產(chǎn)物(2.00g，9.33mmol)、3-溴代吡啶(2.95g，18.7mmol)和2-(二叔丁基膦)聯(lián)苯(0.139g，0.467mmol)以及NaOt-Bu(1.80g，18.7mmol)在無水甲苯(10ml)中形成的混合物。加入Pd(Oac)2(0.105g，0.467mmol)并將反應(yīng)混合物在110℃下攪拌24小時(shí)。使反應(yīng)混合物冷卻到室溫并傾入到冷水中。用CH2Cl2(3×50ml)萃取全部混合物，將合并的有機(jī)層干燥(Na2SO4)，過濾和濃縮。通過PTLC(1∶20 CH3OH/CH2Cl2)純化殘余物，得到產(chǎn)物(1.47g，54％)。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ8.29(1H，s)，8.07(1H，b)，7.17(2H，m)，4.2(1H，b)，3.74(2H，m)，2.82(2H，m)，2.74(3H，s)，1.70(4H，m)，1.45(9H，s).MS m/e 292(M+H).
第3步 向第2步的產(chǎn)物(1.47g，5.05mmol)中加入4M HCl/1，4-二噁烷(20ml)，將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌1.5小時(shí)，之后濃縮以定量收率得到產(chǎn)物。
1H NMR(CD3OD，400MHz)δ8.46(1H，s)，8.14(2H，m)，7.86(1H，s)，4.13(2H，m)，3.40(1H，b)，3.16(2H，b)，2.75(3H，s)，2.26(2H，m)，1.76(2H，m).MS m/e 192(M+H).
第4步向第1步的產(chǎn)物(4-1-1)(0.100g，0.487mmol)和/Pr2NEt(0.43ml，2.44mmol)在無水甲苯(10ml)中形成的混合物中加入三光氣(0.051g，0.171mmol)?；旌衔镌?20℃下攪拌2小時(shí)，然后冷卻到室溫并加入第3步的產(chǎn)物(4-3-1)(0.133g，0.585mmol)。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌16小時(shí)，然后傾入到冷水中并用CH2Cl2(3×20ml)萃取。將合并的有機(jī)層干燥(Na2SO4)，過濾和濃縮。通過PTLC(1∶20CH3OH/CH2Cl2)純化殘余物，得到產(chǎn)物(0.114g，56％)。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ8.33(1H，d，J＝2.4Hz)，8.09(1H，m)，7.49(4H，m)，7.17(2H，m)，7.06(2H，m)，6.74(1H，m)，6.51(1H，s)，4.49(1H，m)，3.77(2H，m)，2.93(3H，s)，2.91(2H，m)，1.85(4H，m).MS m/e 423(M+H).
實(shí)施例5
第1步 經(jīng)由實(shí)施例4第2步的方法從2-溴吡啶和制備2的產(chǎn)物制備產(chǎn)物5-1-1，收率57％，除了用1，3-雙(二苯基膦基)丙烷代替2-(二叔丁基膦)聯(lián)苯，和反應(yīng)溫度為80℃而不是110℃。
MS m/e292(M+H)。
第2步 經(jīng)由實(shí)施例4第3步的方法，用4N HCl/二噁烷處理第1步的產(chǎn)物得到產(chǎn)物。
MS m/e192(M+H)。
第3步向攪拌著的冰冷卻的4-1-2(0.063g，0.339mmol)和吡啶(0.14ml，1.69mmol)在無水THF(10ml)中形成的混合物中加入N，N’-二丁二酰亞胺基碳酸酯(0.087g，0.339mmol)。反應(yīng)物在冰浴中攪拌25分鐘。然后加入第2步的產(chǎn)物，5-2-1(0.100g，0.508mmol)。使反應(yīng)升溫到室溫，攪拌16小時(shí)，然后傾入到冷水(20ml)中。用CH2Cl2(3×20ml)萃取全部混合物，將合并的有機(jī)層干燥(Na2SO4)，過濾和濃縮。通過PTLC(1∶20CH3OH/CH2Cl2)純化殘余物，得到產(chǎn)物(0.080g，58％)。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ8.19(1H，m)，7.52(5H，m)，7.37(2H，m)，7.27(1H，m)，6.99(1H，m)，6.69(1H，d)，6.62(1H，m)，6.45(1H，s)，4.56(1H，m)，4.42(2H，m)，2，92(2H，m)，2.88(3H，s)，1.78(4H，m).MS m/e 405(M+H).
實(shí)施例6
經(jīng)由實(shí)施例5第3步的方法，由4-1-4，N，N’-二丁二酰亞胺基碳酸酯和5-2-1反應(yīng)得到產(chǎn)物。
MS m/e 455(M+H)。
實(shí)施例7 經(jīng)由實(shí)施例5第3步的方法，由4-1-5，N，N’-二丁二酰亞胺基碳酸酯和5-2-1反應(yīng)得到產(chǎn)物。
MS m/e 473(M+H)。
實(shí)施例8 經(jīng)由實(shí)施例5第3步的方法，由4-1-6，N，N’-二丁二酰亞胺基碳酸酯和5-2-1反應(yīng)得到產(chǎn)物。
MS m/e 405(M+H)。
實(shí)施例9 經(jīng)由實(shí)施例5第3步的方法，由4-1-1，N，N’-二丁二酰亞胺基碳酸酯和5-2-1反應(yīng)得到產(chǎn)物。MS m/e 423(M+H)。
實(shí)施例10 經(jīng)由實(shí)施例4第4步的方法，由4-1-3，三光氣和5-2-1反應(yīng)得到產(chǎn)物。
MS m/e 455(M+H)。
實(shí)施例11 經(jīng)由實(shí)施例4第4步的方法，由4-1-2，三光氣和4-3-1反應(yīng)得到產(chǎn)物。
MS m/e 405(M+H)。
實(shí)施例12 經(jīng)由實(shí)施例4第4步的方法，由4-1-7，三光氣和4-3-1反應(yīng)得到產(chǎn)物。
MS m/e 421(M+H)。
實(shí)施例13
第1步 將制備3的產(chǎn)物(2.75g，9.7mmol)、2-溴噻唑(1.98g，12.1mmol)和K2CO3(3.5g，25mmol)在DMF(40ml)中形成的混合物在160℃下加熱20小時(shí)。將反應(yīng)混合物濃縮并在CH2Cl2和水中進(jìn)行分配。有機(jī)層用飽和NaCl洗滌，干燥(MaSO4)，過濾和濃縮。閃蒸色譜(梯度CH2Cl2到2∶98MeOH/CH2Cl2)給出產(chǎn)物(2.0g，62％)。
MS m/e 332.1(M+H)。
第2步 將第1步的產(chǎn)物(2.0g，6.0mmol)和33％的HBr的AcOH溶液在室溫下攪拌2小時(shí)。將反應(yīng)混合物蒸干，并將殘余物分配在1N NaOH和CH2Cl2中。有機(jī)層用飽和NaCl洗滌，干燥(MaSO4)，過濾和蒸干。閃蒸色譜(梯度2∶98的(2M NH3的MeOH溶液)/CH2Cl2到15∶85的(2M NH3的MeOH溶液)/CH2Cl2)給出產(chǎn)物(0.94g，79％)，黃色固體。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ7.04(1H，d，J＝4Hz)，6.52(1H，d，J＝4Hz)，3.96(2H，m)，3.17(1H，m)，2.99(2H，m)，2.59(3H，s)，2.16(2H，m)，1.68(2H，m).MS m/e 198(M+H).
第3步經(jīng)由實(shí)施例4第4步的方法，由4-1-2，三光氣與13-2-1反應(yīng)得到產(chǎn)物。
MS m/e 411(M+H)。
實(shí)施例14
經(jīng)由實(shí)施例4第4步的方法，由4-1-1，三光氣與13-2-1反應(yīng)得到產(chǎn)物。
MS m/e 429(M+H)。
實(shí)施例15 第1步 將N2吹掃的2-溴代嘧啶(400mg，2.52mmol)、制劑3的產(chǎn)物(510mg，1.79mmol)、Pd(OAc)2(18mg，0.08mmol)、叔丁醇鈉(516mg，5.37mmol)、和(1，3-雙(二苯基膦)丙烷)(29mg，0.07mmol)在甲苯(6ml)中形成的混合物在70℃下于密封的容器中攪拌16小時(shí)。使反應(yīng)混合物冷卻到室溫并加入1N NaOH(20ml)。用CH2Cl2(3×20ml)萃取全部混合物，并干燥合并的CH2Cl2萃取液(MgSO4)，過濾并蒸發(fā)。殘余物進(jìn)行PTLC(2∶98的MeOH/CH2Cl2)，得到產(chǎn)物(464mg，79％)。
MS m/e 327(M+H)。
第2步 將第1步的產(chǎn)物(464mg，1.43mmol)和Pd/C(59mg)在EtOH(20ml)中形成的10％的溶液在1大氣壓的H2下攪拌16小時(shí)。通過硅藻土過濾除去催化劑，濾餅用EtOH洗滌。將合并的濾液和洗滌液蒸發(fā)。殘余物進(jìn)行PTLC(5∶95的(2M NH3的MeOH溶液)/CH2Cl2)，得到產(chǎn)物(464mg，79％)。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ8.28(2H，m)，6.44(1H，m)，4.66(2H，m)，2.99(2H，m)，2.65(1H，m)，2.47(3H，s)，1.96(2H，m)，1.33(2H，m).MS m/e 193(M+H).
第3步經(jīng)由實(shí)施例4第4步的方法，由第2步的產(chǎn)物(15-2-1)與4-1-2及三光氣反應(yīng)得到產(chǎn)物。
MS m/e 406(M+H)。
實(shí)施例16 經(jīng)由實(shí)施例4第4步的方法，由實(shí)施例15第2步的產(chǎn)物(15-2-1)與4-1-1及三光氣反應(yīng)得到產(chǎn)物。
MS m/e 424(M+H)。
實(shí)施例17 第1步 經(jīng)由實(shí)施例1第1步的方法，由實(shí)施例5第2步的產(chǎn)物與4-溴-2-氟苯基異氰酸酯反應(yīng)得到產(chǎn)物。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ8.18(1H，m)，7.47(1H，m)，7.38(2H，m)，7.30(2H，m)，6.68(1H，m)，6.61(1H，m)，4.49(1H，m)，4.43(2H，m)，2.91(2H，m)，2.85(3H，s)，1.71(4H，m).MS m/e 391(M+H).
第2步經(jīng)由實(shí)施例4第1步的方法，由第1步的產(chǎn)物與3-氟苯基硼酸反應(yīng)得到產(chǎn)物。
MS m/e 423(M+H)。
實(shí)施例18 第1步 將4-聯(lián)苯基異氰酸酯(3.00g，15.4mmol)和制劑1的產(chǎn)物(5.33g，25.0mmol)在CH2Cl2(100ml)中形成的混合物在室溫下攪拌16小時(shí)。混合物用水(25ml)、3N HCl(25ml)和鹽水(50ml)洗滌。將有機(jī)部分干燥(MgSO4)，過濾，濃縮并通過柱色譜(梯度CH2Cl2到1∶99的CH3OH/CH2Cl2)純化，得到產(chǎn)物(6.11g，97％)。
MS(ES)m/e 410(M+H)。
第2步 將第1步的產(chǎn)物(6.11g，14.9mmol)和4N HCl/二噁烷(100ml)的混合物在室溫下攪拌5小時(shí)。蒸發(fā)除去揮發(fā)物，殘余物與乙醚一起研磨。收集沉淀，溶于水中(200ml)，堿化到pH為14，并用CH2Cl2(300ml)萃取，將有機(jī)部分干燥并濃縮得到產(chǎn)物(4.39g，92％)。
MS(ES) m/e 310(M+H)。
第3步將第2步的產(chǎn)物(80mg，0.26mmol)、煙堿酰氯鹽酸鹽(54mg，0.30mmol)、和三乙胺(90μl，0.64mmol)在CH2Cl2(2ml)中形成的溶液在室溫下攪拌16小時(shí)?；旌衔镉肅H2Cl2(50ml)稀釋并用3N NaOH(5ml)萃取。有機(jī)層用水(15ml)洗滌、干燥(MgSO4)、過濾和濃縮。殘余物進(jìn)行PTLC(4∶96的CH3OH/CH2Cl2)，得到產(chǎn)物(90mg，84％)。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ8.68(2H，m)，7.76(1H，m)，7.2-7.6(10H，m)，6.48(1H，s)，4.85(1H，m)，4.60(1H，m)，3.80(1H，m)，3.20(1H，m)，2.91(3H，s)，2.86(1H，m)，1.4-2.0(4H，m).MS(ES)m/e 415(M+H)+.
使用適當(dāng)?shù)孽Ｂ群突旧舷嗤姆椒ㄖ苽淙缦碌幕衔?實(shí)施例19將實(shí)施例1的1-3-5與適當(dāng)?shù)孽Ｂ确磻?yīng)得到以下化合物 實(shí)施例20將實(shí)施例1的產(chǎn)物1-3-7與適當(dāng)?shù)孽Ｂ确磻?yīng)得到以下化合物 實(shí)施例21將實(shí)施例2第5步的產(chǎn)物2-5-1與適當(dāng)?shù)孽Ｂ确磻?yīng)得到以下化合物 實(shí)施例22 將實(shí)施例18的化合物(45mg，0.11mmol)和3-氯過氧苯甲酸(40mg)在CH2Cl2(5ml)中形成的混合物在室溫下攪拌16小時(shí)?；旌衔镉肅H2Cl2(50ml)稀釋，然后用3N NaOH(2×5ml)和水(10ml)洗滌。將有機(jī)層干燥(Na2SO4)、過濾和濃縮。殘余物進(jìn)行PTLC(1∶9的CH3OH/CH2Cl2)，得到產(chǎn)物(34mg，73％)。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ8.20(2H，m)，7.2-7.6(11H，m)，6.56(1H，s)，4.76(1H，m)，4.59(1H，m)，3.78(1H，m)，3.22(1H，m)，2.7-3.0(4H，m)，1.4.-2.0(4H，m).MS(ES)m/e 431(M+H)+.
實(shí)施例23 第1步 將4-哌啶酮乙烯縮酮(0.64ml，5.0mmol)和硫酰胺(0.53g，5.5mmol)在DME(20ml)中形成的混合物回流16小時(shí)。把混合物濃縮到約3ml，溶于EtOAc(175ml)中，用飽和NH4Cl(2×25ml)、水(2×25ml)和鹽水(25ml)洗滌。將有機(jī)部分干燥、過濾和蒸發(fā)得到產(chǎn)物(0.58g，52％)。
MS(ES)m/e 223(M+H)+。
第2步 將第1步的產(chǎn)物(560mg，2.52mmol)和4-甲苯磺酸吡啶鹽(190mg，0.756mmol)在丙酮(25ml)和水(25ml)中形成的混合物回流64小時(shí)。把混合物蒸發(fā)至干，并將殘余物分配在CH2Cl2(75ml)和NaHCO3水溶液(2×20ml)中。用CH2Cl2和EtOAc順序萃取水層。將EtOAc蒸發(fā)得到產(chǎn)物(140mg)。
1H NMR(CD3OD，400MHz)δ3.47(1H，t，J＝6.4Hz)，3.15(3H，m)，2.54(1H，t，J＝6.4Hz)，1.81(3H，m).
第3步 將第2步的產(chǎn)物(135mg，0.757mmol)、40％的甲胺水溶液(300μl，2.42mmol)、和三乙酰硼氫化鈉(375mg，1.77mmol)在二氯乙烷(5ml)中形成的混合物在室溫下攪拌19小時(shí)。混合物在3N NaOH(5ml)和EtOAc(3×50ml)中分配。把有機(jī)層濃縮，得到粗產(chǎn)物(40mg)。水層在真空下蒸發(fā)至干，殘余物懸浮于EtOAc中。將懸浮物過濾并把濾液濃縮得到另一批產(chǎn)物(70mg)。
MS(FAB)m/e 194(M+H)+。
第4步向冰冷卻的4-1-2(40mg，0.21mmol)的無水THF(3ml)溶液中加入N，N’-二丁二酰亞胺基碳酸酯(55mg，0.21mmol)和吡啶(52μl，0.65mmol)，混合物在0℃下攪拌2小時(shí)，并加入第3步的產(chǎn)物(70mg，0.36mmol)。在室溫下攪拌2小時(shí)后，將反應(yīng)混合物提取到CH2Cl2(50ml)中，用1N HCl(10ml)洗滌，干燥(Na2SO4)，過濾和濃縮。殘余物進(jìn)行PTLC(5∶95的CH3OH/CH2Cl2)，得到產(chǎn)物(62mg，71％)。
1H NMR(CD3OD，400MHz)δ7.56(2H，m)，7.48(2H，m)，7.40(2H，m)，7.32(1H，m)，7.02(1H，m)，4.23(1H，m)，3.75(2H，m)，2.94(3H，s)，2.72(2H，m)，1.7-2.0(4H，m).MS(ES)m/e 407(M+H)+.
使用適當(dāng)?shù)脑虾突旧舷嗤姆椒ǖ玫揭韵禄衔?實(shí)施例24 將1-3-5(71mg，0.20mmol)、2-溴乙酰胺(32mg，0.23mmol)、和無水碳酸鉀(170mg，1.20mmol)在CH3CN(2ml)中形成的混合物在密封的管中加熱到45℃，加熱時(shí)間為3小時(shí)。將混合物用CH2Cl2(75ml)稀釋，用水(50ml)洗滌，干燥并濃縮。殘余物進(jìn)行PTLC(5∶95的CH3OH/CH2Cl2)，得到產(chǎn)物(37mg，49％)。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ7.48(4H，m)，7.35(2H，m)，7.23(1H，m)，6.98(2H，m)，6.56(1H，s)，5.97(1H，bs)，4.25(1H，m)，2.8-3.0(7H，m)，2.31(2H，m)，1.6-1.8(4H，m).MS(ES)m/e 385(M+H)+.
實(shí)施例25 第1步 在0℃下，向4-氧代環(huán)己烷羧酸乙酯(10g，59mmol)在MeOH(75ml)和水(50ml)中形成的溶液中加入氫氧化鋰一水合物(4.2g，100mmol)?；旌衔锷郎氐绞覝夭嚢?小時(shí)。用3N HCl將混合物酸化到pH為2。蒸發(fā)除去揮發(fā)物，殘余物用EtOAc(300ml)萃取。將有機(jī)部分干燥并濃縮得到產(chǎn)物(8.01g，96％)。
MS(Cl)m/e 143(M+H)+。
第2步 在5分鐘內(nèi)將2M草酰氯的CH2Cl2溶液(20ml，40mmol)加入到第1步產(chǎn)物(3.0g，21mmol)的無水THF(50ml)溶液中。將溶液加熱到80℃，加熱時(shí)間為6小時(shí)，然后蒸發(fā)至干。在0℃下將殘余物溶于THF(50ml)中，并加入NH4OH水溶液(6.0ml，89mmol)。在室溫下攪拌16小時(shí)后，將混合物濃縮，并通過柱色譜純化殘余物(梯度CH2Cl2到2∶98的CH3OH/CH2Cl2)，得到產(chǎn)物(762mg，26％)。
MS(Cl)m/e 142(M+H)+。
第3步 將第2步的產(chǎn)物(800mg，5.71mmol)、40％的甲胺水溶液(4.0ml，52mmol)、和三乙酰硼氫化鈉(1.7g，8.0mmol)在二氯乙烷(20ml)中形成的混合物在室溫下攪拌16小時(shí)。用3N NaOH猝滅反應(yīng)并在鹽水和1∶1的CH3CN/CH2Cl2中分配。把有機(jī)部分濃縮，殘余物通過柱色譜純化(梯度CH2Cl2到1∶4的(2M NH3的CH3OH溶液/CH2Cl2)，得到產(chǎn)物(450mg，51％)。
MS(Cl)m/e 157(M+H)+。
第4步苯胺4-1-2(100mg，0.534mmol)、N，N’-二丁二酰亞胺基碳酸酯(137mg，0.535mmol)和吡啶(0.13ml，1.6mmol)在THF(3ml)中形成的混合物在0℃下攪拌2小時(shí)。向該混合物中加入第3步的產(chǎn)物(125mg，0.811mmol)，并將反應(yīng)物在室溫下攪拌2小時(shí)。將混合物用CH2Cl2(100ml)稀釋，用1N HCl(2×25ml)、水(2×25ml)、鹽水(2×25ml)洗滌，干燥并濃縮。殘余物進(jìn)行PTLC(3∶97的CH3OH/CH2Cl2)，得到順式產(chǎn)物(14mg)和反式產(chǎn)物(15mg)。
順式產(chǎn)物25A1H NMR(CD3OD，400MHz)δ7.4-7.6(4H，m)，7.33(2H，m)，7.22(1H，m)，6.95(1H，m)，4.13(1H，m)，2.86(3H，s)，2.53(1H，m)，2.13(2H，m)，1.82(2H，m)，1.5-1.75(4H，m).MS(ES)m/e 370(M+H)+.
反式產(chǎn)物25B1H NMR(CD3OD，400MHz)δ7.4-7.5(4H，m)，7.34(2H，m)，7.23(1H，m)，6.96(1H，m)，4.07(1H，m)，2.88(3H，s)，2.14(1H，m)，1.98(2H，m)，1.81(2H，m)，1.5-1.7(4H，m).MS(ES)m/e 370(M+H)+.
通過基本上相同的方法，令步驟3的產(chǎn)物25-3-1與苯胺4-1-1反應(yīng)得到25C和25D 實(shí)施例26
第1步 向攪拌著的1，4-環(huán)己烷二酮單乙烯縮酮(4.68g，30mmol)和40％w/w甲胺水溶液(6.0ml)在1，2-二氯乙烷(75ml)中形成的混合物中逐份加入Na(OAc)3BH(9.6g，45mmol)。將反應(yīng)混合物劇烈攪拌16小時(shí)，然后加入1N NaOH(75ml)。有機(jī)層用飽和NaCl洗滌，干燥(MgSO4)，過濾和蒸發(fā)，得到油狀物(4.60g，90％)，不進(jìn)一步純化即可使用。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ3.97(4H，s)，2.47(1H，m)，2.46(3H，s)，1.91(2H，m)，1.80(2H，m)，1.59(2H，m)，1.45(2H，m).
第2步 向攪拌著的冰冷卻的苯胺4-1-1(1.00g，4.87mmol)和吡啶(1.97ml，4.87mmol)在無水THF(50ml)中形成的混合物中加入二丁二酰亞胺基碳酸酯(1.25g，4.87mmol)。反應(yīng)混合物在0℃下攪拌1小時(shí)，并加入第1步的產(chǎn)物(1.25g，7.31mmol)。將反應(yīng)混合物升溫到室溫，攪拌16小時(shí)，然后傾入到冷水(100ml)中。用CH2Cl2(3×100ml)萃取全部混合物。將合并的有機(jī)層干燥(Na2SO4)、過濾和蒸發(fā)。殘余物通過柱色譜純化(1∶20的CH3OH/CH2Cl2)，得到產(chǎn)物(1.40g，71％)。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ7.49(4H，m)，7.10(2H，m)，6.70(1H，m)，6.60(1H，s)，4.30(1H，m)，3.90(4H，s)，2.90(3H，s)，1.75(8H，m).MS m/e 403(M+H).
第3步 向第2步的產(chǎn)物(1.30g，3.23mmol)的THF溶液中加入5NHCl(20ml)。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌4.5小時(shí)，然后用CH2Cl2(3×100ml)萃取。合并的有機(jī)層萃取液用飽和的NaHCO3洗滌，干燥(Na2SO4)、過濾和蒸發(fā)。殘余物通過PTLC純化(1∶20的CH3OH/CH2Cl2)，得到產(chǎn)物(0.80g，69％)。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ7.50(4H，m)，7.10(2H，m)，6.80(1H，m)，6.50(1H，s)，4.80(1H，m)，2.90(3H，s)，2.48(4H，m)，2.10(2H，m)，1.90(2H，m).MS m/e 359(M+H).
第4步 向第3步的產(chǎn)物(0.43g，1.20mmol)和芐基胺(0.257g，2.40mmol)在1，2-二氯乙烷(10ml)中形成的混合物中逐份加入NaBH(OAc)3(0.762g，3.60mmol)。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌4.5小時(shí)，然后傾入到飽和的NaHCO3中并用CH2Cl2(3×20ml)萃取。將合并的有機(jī)層干燥(Na2SO4)、過濾和蒸發(fā)。殘余物通過PTLC純化(1∶20的(2MNH3/CH3OH)∶CH2Cl2)，得到順式異構(gòu)體26-4-1(0.240g，44.5％)和反式異構(gòu)體26-4-2(0.200g，37.0％)。順式異構(gòu)體1H NMR(CDCl3，400MHz)δ7.48(4H，m)，7.30(5H，m)，7.05(2H，m)，6.70(1H，m)，6.40(1H，s)，4.20(1H，m)，3.78(2H，s)，2.90(4H，m)，1.90(4H，m)，1.55(4H，m).MS m/e 450(M+H).反式異構(gòu)體1H NMR(CDCl3，400MHz)δ7.48(4H，m)，7.33(5H，m)，7.05(2H，m)，6.70(1H，m)，6.37(1H s)，4.20(1H，m)，3.82(2H，s)，2.88(3H，m)，2.50(1H，m)，2.10(2H，m)，1.80(2H，m)，1.20-1.70(4H，m).MS m/e 450(M+H).
第5步 向順式異構(gòu)體26-4-1(0.600g，1.33mmol)在4.4％HCOOH/CH3OH(50ml)中形成的溶液中加入10％的Pd/C(0.600g)。反應(yīng)混合物在氬氣保護(hù)下、于室溫下攪拌16小時(shí)，然后經(jīng)硅藻土過濾并濃縮。殘余物通過PTLC純化(1∶10的(2M NH3/CH3OH)∶CH2Cl2)，得到產(chǎn)物(0.230g，85％)。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ7.50(4H，s)，7.06(2H，m)，6.70(1H，m)，6.40(1H，s)，4.20(1H，m)，3.30(1H)，3.00(3H，s)，1.50-2.30(10H，m).MS m/e 360(M+H).
第6步向第5步的產(chǎn)物(0.140g，0.390mmol)和1M K2CO3(1.2ml，1.2mmol)在THF(5ml)中形成的混合物中加入MeSO2Cl(0.178g，1.55mmol)。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌16小時(shí)，然后進(jìn)行PTLC(1∶10的CH3OH/CH2Cl2)，得到產(chǎn)物(0.135g，79％)。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ7.53(4H，m)，7.20(2H，m)，6.90(1H，m)，4.10(1H，m)，3.60(1H，m)，2.90(6H，s)，1.50-2.10(8H，m).MS m/e 438(M+H).
實(shí)施例27
將26-3-1(0.21g，0.59mmol)、鹽酸羥胺(0.82g，12mmol)、和乙酸鈉(0.97g，12mmol)在無水乙醇(10ml)中形成的混合物在室溫下攪拌64小時(shí)。把反應(yīng)混合物分配在CH2Cl2(100ml)和水(75ml)中。用CH2Cl2(50ml)再次萃取水層。將合并的有機(jī)層干燥(Na2SO4)、過濾和濃縮。殘余物進(jìn)行PTLC(1∶19的CH3OH/CH2Cl2)，得到產(chǎn)物(210mg，95％)。
1H NMR(CD3OD，400MHz)δ7.4-7.6(4H，m)，7.20(2H，m)，8.85(1H，m)，4.39(1H，m)，3.45(1H，m)，2.90(3H，s)，2.45(1H，m)，2.28(1H，m)，1.6-2.0(5H，m).MS(ES)m/e 374(M+H).
使用適當(dāng)?shù)脑虾突旧舷嗤姆椒ǖ玫揭韵禄衔?MS(ES)m/e 388(M+H)實(shí)施例28 第1步 向1-3-5(100mg，0.31mmol)、1M NaOH(0.5ml)、和1M Na2CO3(0.5ml)在CH2Cl2(5ml)中形成的混合物中加入2-氯乙基磺酰氯(100mg，0.61mmol)，并將反應(yīng)混合物攪拌16小時(shí)。將反應(yīng)混合物分配在水(25ml)和CH2Cl2(25ml)中。將有機(jī)層干燥(MgSO4)、過濾和濃縮。殘余物進(jìn)行PTLC(1∶4丙酮/CH2Cl2)，得到產(chǎn)物(40mg，31％)。
MS(ES)m/e 418(M+H)第2步向攪拌著的第1步產(chǎn)物(28-1-1)(50mg，0.12mmol)的THF(10ml)溶液中加入氫氧化四丁基銨(0.5g)的水(2ml)溶液。16小時(shí)后，將反應(yīng)混合物分配在水(25ml)和CH2Cl2(100ml)中。將有機(jī)層干燥(MgSO4)、過濾和濃縮。殘余物進(jìn)行PTLC(5∶95的MeOH/CH2Cl2)，得到產(chǎn)物(24mg，46％)。
對于C21H27FN3O4S的HRMS計(jì)算值(M+H)436.1706，測量值436.1711。
實(shí)施例29 向1-3-1(400mg，1.22mmol)的DMF(5ml)溶液中加入EDCl(25mg，1.30mmol)和1-氰基-3-甲基異硫脲鈉鹽(175mg，1.27mmol)。將反應(yīng)混合物攪拌16小時(shí)，然后用EtOAc(50ml)稀釋?；旌衔镉盟?10ml)、飽和NaHCO3(20ml)和水(10ml)洗滌。將有機(jī)層干燥(MgSO4)、過濾和濃縮。殘余物進(jìn)行閃蒸色譜層析(梯度3∶97-7∶93的MeOH/CH2Cl2)，得到產(chǎn)物(250mg，50％)。
對于C22H26N6OF的HRMS計(jì)算值(M+H)409.2152，測量值409.2155。
實(shí)施例30 向1-3-1(500mg，1.53mmol)的乙腈(10ml)溶液中加入二甲基-N-氰基二硫咪唑基碳酸酯(0.8g，5.50mmol)，反應(yīng)混合物回流16小時(shí)。將反應(yīng)混合物傾入到水(50ml)中并用EtOAc(50ml)萃取。將有機(jī)層干燥(MgSO4)、過濾和濃縮。殘余物進(jìn)行閃蒸色譜層析(梯度1∶2的丙酮/己烷)，得到產(chǎn)物(150mg，24％)。
MS m/e 426.1(M+H)活體內(nèi)篩選實(shí)施例14的化合物14對于Y5拮抗劑活性的方法將成年雄性Long-Evans或Sprague-Dawley大鼠(200-250克，Charles River，MA)放在單獨(dú)的籠中，籠中溫度為22℃，從4:00開始照明，12小時(shí)光照，12小時(shí)黑暗。大鼠自由進(jìn)食(Teklad Lab RodentChow，Bartonville，IL)、自由飲水。所有的研究均在一個(gè)AAALAC接受的設(shè)備中根據(jù)Schering-Plough Research Institute的動(dòng)物保護(hù)和使用委員會(huì)認(rèn)可的方案進(jìn)行。實(shí)驗(yàn)是根據(jù)用于實(shí)驗(yàn)室動(dòng)物保護(hù)和使用的NIH所制定的原則和方針進(jìn)行的。
通過肌肉注射開他敏和甲苯噻嗪(分別為100和10mg/kg)麻醉大鼠。使用以下程序?qū)⒁桓?2規(guī)的不銹鋼套管立體定位(stereotaxicahlly)植入到側(cè)腦室中在前囪后1mm，中間線橫側(cè)1.5mm，離硬腦膜腹側(cè)3.6mm。在三周愈合期后，通過人體NPY(0.3nmol)的大腦內(nèi)心室(icv)灌輸檢測所有動(dòng)物的套管位置。只有在60分鐘的灌輸內(nèi)表現(xiàn)出優(yōu)良進(jìn)給效應(yīng)(＞2g)的動(dòng)物才能保留用于研究。在每一次研究中使用4組12只動(dòng)物。每組動(dòng)物均進(jìn)行平衡以使各組的平均基線和NPY-誘導(dǎo)的食物攝食值相似。在ivc給以D-Trp34-NPY之前一小時(shí)，一組給以口服劑量的介質(zhì)，而其他三組則給以口服劑量的Y5拮抗劑14。將D-Trp34-NPY溶于0.9％的無菌鹽水(Sigma，St.Louis，MO)中并用Hamilton灌輸泵和注射器(Hamilton，Reno，NV)以5μl/min的速率灌輸ivc。將引導(dǎo)套管保留插入另外的幾分鐘以防止擴(kuò)散到針眼外面。在灌輸期間稱重充滿食物的進(jìn)食器，然后將其送回到圈有隨后立即進(jìn)行處理的動(dòng)物的籠中。在肽ivc灌輸后監(jiān)測在60、120和240分鐘時(shí)的食物消耗。通過分析隨后進(jìn)行的Dunnett多重比較實(shí)驗(yàn)的差異測定各組之間食物攝食的差異。化合物14(0.1，0.3，1和3mg/kg)劑量分別抑制ID50為0.5mg/kg的受D-Trp34-NPY刺激的食物攝食。
應(yīng)當(dāng)認(rèn)識(shí)到，通過適當(dāng)?shù)馗淖儗?shí)施例1-30中所述方法或采用本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的方法可以制備出以下實(shí)施例
權(quán)利要求
1.一種具有以下結(jié)構(gòu)式I的化合物 包括其N-氧化物，其中Y為 R1為H或(C1-C6)烷基；R2為H，(C1-C6)烷基，(C3-C9)環(huán)烷基或(C3-C7)環(huán)烷基(C1-C6)烷基；R3 或 Z為OR10，-N(R9)(R10)或-NH2；j為0，1或2；k為1或2；l為0，1或2；m為0，1或2；R4為1-3個(gè)取代基，其獨(dú)立地選自H，-OH，鹵素，鹵代烷基，(C1-C6)烷基，(C3-C7)環(huán)烷基，(C3-C7)環(huán)烷基(C1-C6)烷基，-CN，-O(C1-C6)烷基，-O(C3-C7)環(huán)烷基，-O(C1-C6)烷基(C3-C7)環(huán)烷基，-S(C1-C6)烷基，-S(C3-C7)環(huán)烷基，-S(C1-C6)烷基(C3-C7)環(huán)烷基，-NH2，-N(R9)(R10)，-NO2，-CONH2，-CONR9R10和NR2COR10；R5為1-3個(gè)取代基，其獨(dú)立地選自H，鹵素，-OH，鹵代烷基，鹵代烷氧基，-CN，-NO2，(C1-C6)烷基，(C3-C7)環(huán)烷基，(C3-C7)環(huán)烷基(C1-C6)烷基，-O(C1-C6)烷基，-O(C3-C7)環(huán)烷基，-O(C1-C6)烷基(C3-C7)環(huán)烷基，-CONH2和-CONR9R10；R6為-SO2(C1-C6)烷基，-SO2(C3-C7)環(huán)烷基，-SO2(C1-C6)烷基(C3-C7)環(huán)烷基，-SO2(C1-C6)鹵代烷基，-SO2(羥基(C2-C6)烷基)，-SO2(氨基(C2-C6)烷基)，-SO2(烷氧基(C2-C6)烷基)，-SO2(烷基氨基(C2-C6)烷基)，-SO2(二烷基氨基(C2-C6)烷基)，-SO2(芳基)，-SO2(雜芳基)，-SO2(芳基(C2-C6)烷基)，-SO2NH2，-SO2NR9R10，-C(O)(C1-C6)烷基，-C(O)(C3-C7)環(huán)烷基，-C(O)(C3-C7)環(huán)烷基(C1-C6)烷基，-C(O)芳基，-C(O)雜芳基，-C(O)NR9R10，-C(O)NH2，-C(S)NR9R10，C(S)NH2，芳基，雜芳基，-(CH2)nC(O)NH2，-(CH2)nC(O)NR9R10，-C(＝NCN)烷硫基，-C(＝NCN)NR9R10，(C1-C6)烷基，(C3-C7)環(huán)烷基，(C3-C7)環(huán)烷基(C1-C6)烷基，芳基(C1-C6)烷基，雜芳基(C1-C6)烷基或-C(O)OR9，n＝1至6；R7＝H或烷基；R8為H，(C1-C6)烷基，(C3-C7)環(huán)烷基，(C3-C7)環(huán)烷基(C1-C6)烷基，芳基，雜芳基，-SO2(C1-C6)烷基，-SO2(C3-C7)環(huán)烷基，-SO2(C1-C6)烷基(C3-C7)環(huán)烷基，-SO2(C1-C6)鹵代烷基或-SO2(芳基)；R9為(C1-C6)烷基，(C3-C7)環(huán)烷基，(C3-C7)環(huán)烷基(C1-C6)烷基，芳基(C1-C6)烷基，芳基或雜芳基；及，R10為氫，(C1-C6)烷基，(C3-C7)環(huán)烷基，(C3-C7)環(huán)烷基(C1-C6)烷基，芳基(C1-C6)烷基，芳基或雜芳基；或R9和R10相聯(lián)形成含有1至2個(gè)雜原子的4-7元環(huán)；或其藥學(xué)可接受的加合鹽和/或水合物，或其前體藥物，或可使用的幾何或光學(xué)異構(gòu)體或其外消旋混合物。
2.權(quán)利要求1的化合物，其中Y是 和R3 或
3.權(quán)利要求2的化合物，其中R5為1-3個(gè)獨(dú)立地選自H、鹵素、鹵代烷基、烷氧基和鹵代烷氧基的取代基，j和k的總和為1、2或3。
4.權(quán)利要求2的化合物，其中R6為SO2(C1-C6)烷基，SO2羥基(C2-C6)烷基，SO2(C3-C7)環(huán)烷基，SO2NR9R10或SO2NH2。
5.權(quán)利要求1的化合物，其選自 和其藥學(xué)可接受的加合鹽和/或水合物，或其前體藥物，或可使用的幾何或光學(xué)異構(gòu)體或其外消旋混合物。
6.權(quán)利要求1的化合物，其中化合物為 或其藥學(xué)可接受的加合鹽和/或水合物，或其前體藥物，或可使用的幾何或光學(xué)異構(gòu)體或其外消旋混合物。
7.權(quán)利要求2的化合物，其中R6為C(O)雜芳基，C(O)(C1-C6)烷基，或C(O)(C3-C7)環(huán)烷基。
8.權(quán)利要求1的化合物，其選自 和其藥學(xué)可接受的加合鹽和/或水合物，或其前體藥物，或可使用的幾何或光學(xué)異構(gòu)體或其外消旋混合物。
9.權(quán)利要求2的化合物，其中R6為雜芳基。
10.權(quán)利要求1的化合物，其選自 和其藥學(xué)可接受的加合鹽和/或水合物，或其前體藥物，或可使用的幾何或光學(xué)異構(gòu)體或其外消旋混合物。
11.權(quán)利要求1的化合物，其中Y是 并且R3是
12.權(quán)利要求11的化合物，其中R5為1-3個(gè)獨(dú)立地選自H、鹵素、鹵代烷基和鹵代烷氧基的取代基，j和k的總和為1、2或3。
13.權(quán)利要求11的化合物，其中R6為SO2(C1-C6)烷基，SO2(C3-C7)環(huán)烷基，SO2NR9R10或SO2NH2。
14.具有如下式的化合物 或其藥學(xué)可接受的加合鹽和/或水合物，或其前體藥物，或可使用的幾何或光學(xué)異構(gòu)體或其外消旋混合物。
15.權(quán)利要求11的化合物，其中R6為C(O)雜芳基，C(O)(C1-C6)烷基，或C(O)(C3-C7)環(huán)烷基。
16權(quán)利要求1的化合物，其選自 和其藥學(xué)可接受的加合鹽和/或水合物，或其前體藥物，或可使用的幾何或光學(xué)異構(gòu)體或其外消旋混合物。
17.權(quán)利要求11的化合物，其中R6為雜芳基。
18.權(quán)利要求1的化合物，選自具有如下表所示結(jié)構(gòu)式的化合物和其藥學(xué)可接受的加合鹽和/或水合物，或其前體藥物，或可使用的幾何或光學(xué)異構(gòu)體或其外消旋混合物
19.權(quán)利要求1的化合物，選自實(shí)施例29-59、61-90、95-216、218-219、221-262、265、267、269-294、296-297、299-326、328-337、340-342的化合物，和其藥學(xué)可接受的加合鹽和/或水合物，或其前體藥物，或可使用的幾何或光學(xué)異構(gòu)體或其外消旋混合物。
20.一種藥物組合物，其包括權(quán)利要求1定義的式1的化合物與藥學(xué)可接受的載體相結(jié)合。
21.一種治療肥胖、進(jìn)食障礙疾患或糖尿病的方法，包括給需要該治療的哺乳動(dòng)物以治療有效量的權(quán)利要求1中定義的式I化合物。一種藥物組合物，其包括有效量的權(quán)利要求1中定義的式I化合物和其藥學(xué)可接受的載體。
22.一種治療代謝和進(jìn)食障礙疾患的方法，包括給需要該治療的哺乳動(dòng)物以治療有效量的權(quán)利要求1化合物，或其前體藥物，或所述化合物或所述前體藥物的藥學(xué)可接受的鹽。
23.權(quán)利要求22的方法，其中所述代謝疾病是肥胖癥。
24.權(quán)利要求22的方法，其中所述進(jìn)食障礙疾患是食欲過盛。
25.一種治療與肥胖有關(guān)的疾病的方法，包括給需要該治療的哺乳動(dòng)物以治療有效量的權(quán)利要求1化合物，或其前體藥物，或所述化合物或所述前體藥物的藥學(xué)可接受的鹽。
26.權(quán)利要求25的方法，其中所述與肥胖有關(guān)的疾病是II型糖尿病，胰島素耐藥癥，高血脂和高血壓。
27.一種藥學(xué)組合物，其包括治療有效量的一種含有以下成分的組合物第一化合物，所述第一化合物為權(quán)利要求1的化合物，其前體藥物，或所述化合物或所述前體藥物的藥學(xué)可接受的鹽；第二化合物，所述第二化合物為抗肥胖和/或厭食試劑如β3激動(dòng)劑，類甲狀腺素試劑，厭食試劑，或NPY拮抗劑；和其藥學(xué)可接受的載體。
28.一種治療代謝或進(jìn)食障礙疾患的方法，其包括給需要這種治療的哺乳動(dòng)物以一定量的第一化合物，所述第一化合物為權(quán)利要求1的化合物，其前體藥物，或所述化合物或所述前體藥物的藥學(xué)可接受的鹽；第二化合物，所述第二化合物為抗肥胖和/或厭食試劑如β3激動(dòng)劑，類甲狀腺試劑，厭食試劑，或NPY拮抗劑；其中第一和第二化合物的量產(chǎn)生治療效果。
29.一種藥物組合物，其包含治療有效量的一種組合物，其含有第一化合物，所述第一化合物為權(quán)利要求1的化合物，其前體藥物，或所述化合物或所述前體藥物的藥學(xué)可接受的鹽；第二化合物，所述第二化合物為醛糖還原酶抑制劑，肝糖磷酸化酶抑制劑，山梨醇脫氫酶抑制劑，蛋白質(zhì)酪氨酸磷酸酶1B抑制劑，二肽蛋白酶抑制劑，胰島素(包括口服有生物活性的胰島素制劑)，胰島素類似物，麥撒西丁，阿卡波糖，PPAR-伽馬配體如曲格列酮，rosaglitazone，吡格列酮或GW-1929，磺酰脲，格列吡嗪，優(yōu)糖，或氯磺丙脲；和其藥學(xué)可接受的載體。
30.一種通過結(jié)合權(quán)利要求1的化合物與其所用的藥學(xué)可接受的載體而制備的藥物組合物。
31.用于制備藥物組合物的方法，包括將權(quán)利要求1的化合物與藥學(xué)可接受的載體結(jié)合起來。
全文摘要
要求保護(hù)結(jié)構(gòu)式(I)表示的化合物，包括其N－氧化物，其中Y為(I’)；R
文檔編號A61P3/10GK1474810SQ01818782
公開日2004年2月11日 申請日期2001年9月12日 優(yōu)先權(quán)日2000年9月14日
發(fā)明者W·J·格林李, 黃穎, J·M·凱利, S·W·麥克坎比, A·W·斯塔姆福德, 吳豫生, W J 格林李, 凱利, 斯塔姆福德, 麥克坎比 申請人:先靈公司