專利名稱：提高細胞中谷胱苷肽的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及通過給需要的哺乳動物施用飲食或者藥物組合物來提高細胞中谷胱苷肽包括治療或者預(yù)防損傷的肝功的方法，本發(fā)明還涉及相應(yīng)的飲食(dietetic)或者藥物組合物。
背景技術(shù)：
肝臟是參與蛋白，碳水化合物以及脂肪代謝的主要器官，而且還是解毒的主要器官?？赡艿亩拘曰衔锿ㄟ^第I階段代謝酶被轉(zhuǎn)化為失活的代謝物并排出?；蛘?，代謝物被被II階段代謝酶進一步連接并最終排出。
很多藥物和毒素可通過與谷胱苷肽連接被解毒。然而當這些藥物或者毒素的水平在肝中超過還原的谷胱苷肽濃度時；這些組分成為急性肝毒素。引人注目的是，在很多肝失調(diào)的情況下，谷胱苷肽的水平下降，例如在肝炎感染的情況下，其中肝病的活性等級與急性肝中毒，例如乙酰氨基苯酚中毒，和患有肝衰竭的嗜酒者中的GSH的還原相關(guān)。
丙型肝炎和暴露于肝毒素都會導(dǎo)致肝癌，可能通過肝無力針對毒素，無論是內(nèi)毒素還是外毒素應(yīng)答的相同機制進行的。
還原的谷胱苷肽(GSH)是谷胱苷肽過氧化物酶(GPX)的底物并且同樣有助于抗氧化的防御機制。
主要在NADPH存在的條件下，谷胱苷肽還原酶還原GSSG到GSH，所述NADPH由例如氧化性戊糖磷酸途徑提供。谷胱苷肽系統(tǒng)處理肝中H2O2的能力依賴于GPX和谷胱苷肽還原酶的活性，NADPH的供應(yīng)速度以及GSH的含量。除了其對過氧化氫的作用，GSH也可體外與，例如OHO，HOCl，過氧亞硝酸根，ROO，和RO2O反應(yīng)。通過與自由基反應(yīng)，生成產(chǎn)生超氧化物的含硫游離基(GS)。此外，超氧化物也可在不存在GSH的條件下使GPX失活。因此，超氧化物歧化酶(SOD)或者抗氧化劑可與GSH合作去除體內(nèi)的自由基。
很多提供給生物體的異生素通過與GSH結(jié)合進行代謝。這個過程由谷胱苷肽S-轉(zhuǎn)移酶(GST)催化。
GSH分兩步合成，由兩種不同的酶催化。在第一步中，γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(GCS)催化從谷氨酸和半胱氨酸形成L-γ-谷氨酰-L-半胱氨酸。第二步在谷胱苷肽合成酶的作用下結(jié)合甘氨酸產(chǎn)生GSH。
能夠降低肝中還原的谷胱苷肽濃度的藥物的一個例子為通常使用的鎮(zhèn)靜劑乙酰氨基苯酚(撲熱息痛)。當大量攝入時，乙酰氨基苯酚引起嚴重的肝壞死，例如在試圖自殺的情況下或兒童偶然誤服的情況下。乙酰氨基苯酚的肝毒性是由從母體化合物形成的毒性反應(yīng)代謝物通過肝細胞的細胞色素P450混合功能的氧化酶系統(tǒng)介導(dǎo)的。然后，通過與谷胱苷肽結(jié)合將代謝物解毒。如果過量形成，肝的谷胱苷肽的儲備被耗盡，然后醌亞胺與肝細胞的組分反應(yīng)引起壞死。肝損傷可通過使用酒精或者其它藥物而加重，而且饑餓和惡病質(zhì)的狀態(tài)，其中肝谷胱苷肽較低也可能加重影響。
乳薊(Milk thistle)或者水飛薊(Silybum marianum(L.)Gaertn.(菊科))在西方國家因為其護肝活性而廣為公知。其主要成分為flavanolignans，合稱為水飛薊素。用于保護，治療和修復(fù)肝組織的含有乳薊的組合物例如描述在WO99/43336中。
大鼠腹膜內(nèi)施用水飛薊素(200mg/kg)提高了總的谷胱苷肽的含量并且提高了肝中，腸內(nèi)，和胃內(nèi)還原的谷胱苷肽/氧化的谷胱苷肽的比例，同時腎，肺和脾的水平?jīng)]有受到影響(Valenzuela等人，水飛薊素對提高大鼠不同組織中谷胱苷肽的含量的選擇性，Planta Medica 55，420-2(1989))。水飛薊素，水飛薊賓的主要成分對人嗜中性粒細胞中超氧化物和過氧化氫的產(chǎn)生具有抑制作用并且提高人紅血球中超氧化物歧化酶以及谷胱苷肽過氧化物酶的活性。水飛薊素體外防止肝母細胞瘤Hep G2細胞中乙酰氨基苯酚誘導(dǎo)的GSH缺失以及細胞毒性。水飛薊素和水飛薊賓體內(nèi)保護大鼠抗由乙醇和撲熱息痛誘導(dǎo)的肝谷胱苷肽缺失。顯示在分離的大鼠肝細胞中，水飛薊素降低由乙酰氨基苯酚誘導(dǎo)的GSH的缺失，但是不影響由丁基硫堇硫氧酰胺(buthioninesulfoximide)誘導(dǎo)的GSH的缺失。這就意味著所述水飛薊素加強了GSH的氧化或者連接，沒有影響谷氨酰半胱氨酸合成酶或者GSH合成酶(Garrido等人，Pharmacology and Toxicology 69，9-12(1991))。
此外，水飛薊素據(jù)發(fā)現(xiàn)是一種高效無毒的谷胱苷肽-S-轉(zhuǎn)移酶的抑制劑(Bartholomeus等人，Xenobiotica 24，17-24，(1994))。這種觀察得出結(jié)論，雖然水飛薊素可作為有效的護肝劑，但是當由GSH轉(zhuǎn)移酶催化時通過連接到GSH二次解毒受到抑制。
在雙盲安慰劑對照的試驗中，患慢性酒精肝的患者用水飛薊素處理(Legalon，420mg，6個月)提高了-SH自由基的血清水平和GSH過氧化物酶的活性。其它臨床試驗證實了標準化水飛薊提取物的護肝效果。
RO 102689(Intr.Medicamente Biofarm)公開了從armurariu果提取水飛薊素。上述提取物可被用于治療慢性活動型肝炎，肝硬化以及在施用肝毒性劑時保護肝細胞。
印度庫洛胡黃連(Picrorhiza Kurrooa Royle)(玄參科)已經(jīng)被用于印度草藥學(xué)主要治療肝失調(diào)。環(huán)烯醚萜苷被認為是其活性成分，但是如乙酰苯的其它化合物也可能起作用。
多種環(huán)烯醚萜苷已經(jīng)從庫洛胡黃連(P.Kurrooa)中分離出來，其中大多數(shù)連接帶有苯甲?；?或者肉桂?；?來源的側(cè)鏈的梓醇。
Picroliv是庫洛胡黃連的標準部分，含有環(huán)烯醚萜苷胡黃連苦苷I和胡黃連甙，比例為1∶1.5到1∶2(50-70％)以及葫蘆素苷(4-5％)的混合物(US-A 5145955)。胡黃連苦苷II也從庫洛胡黃連中分離到并且用CCl4處理的小鼠以50mg/kg(p.o.)口服給藥表現(xiàn)出護肝活性(DE-A2203884)。
Picroliv已經(jīng)在多種肝損傷模型中進行了體內(nèi)和體外試驗。這些研究證實了其抗肝毒，肝再生，利膽和降血脂(hypolipidemic)的活性(由Dhawan綜述，Medicinal Chemistry Research 5，595-605，(1995))。Picroliv-處理的大鼠經(jīng)肝部分切除或者四氯化碳誘導(dǎo)肝損傷后，肝再生效果與肝抗氧化系統(tǒng)增強的恢復(fù)相關(guān)。此外，在給大鼠口服給藥(6和12mg/kg)7天后，Picroliv顯著逆轉(zhuǎn)了撲熱息痛誘導(dǎo)的多種肝細胞標記的生化改變。大鼠注射四氯化碳誘導(dǎo)肝混合功能的氧化系統(tǒng)的劇烈損傷，如由多種藥物代謝酶諸如谷胱苷肽-S-轉(zhuǎn)移酶和還原的谷胱苷肽所顯示的。Picroliv給藥(6mg/kg)7天顯著阻止了肝損傷(Rastogi等，DrugDevelopment Research 41，44-47，(1997))。在45天暴露于酒精的最后15天對大鼠施用Picroliv(12mg/kg/天，口服)阻止了超氧化物歧化酶，過氧化氫酶，谷胱苷肽-S-轉(zhuǎn)移酶以及還原的谷胱苷肽水平的降低(Rastogi等，1196)。Picroliv(6mg/kg/天，口服)恢復(fù)了感染伯氏瘧原蟲(Plasmodiumberghei)的小鼠肝中還原的谷胱苷肽水平的缺失以及谷胱苷肽-S-轉(zhuǎn)移酶，谷胱苷肽還原酶和谷胱苷肽過氧化物酶活性的抑制。(另外，通過抑制感染伯氏瘧原蟲(Plasmodium berghei)的小鼠γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶增強的活性，Picroliv恢復(fù)了降低的半胱氨酸，巰基和谷胱苷肽合成酶的水平。對半乳糖胺誘導(dǎo)的肝損傷的大鼠用庫洛胡黃連的乙醇提取物進行預(yù)處理(50mg/kg/天，口服)阻止了谷胱苷肽過氧化物酶和谷胱苷肽轉(zhuǎn)移酶活性的降低，以及還原的谷胱苷肽的降低。
羅布麻寧為一種分離自庫洛胡黃連的乙酰苯，其通過激活轉(zhuǎn)錄因子AP-1由提高表達的γ-GCS mRNA和增加的酶活性介導(dǎo)，增強細胞內(nèi)GSH的合成(Lapperre等人，F(xiàn)ebs Letters 443，235-9，(1999))。
五味子(Schisandra chinensis(Turcz.)Baill)(五味子科)是一種在遠東地區(qū)發(fā)現(xiàn)的彎曲草本植物。在世界的這個地方五味子的果實長期以來被用于傳統(tǒng)醫(yī)藥。主要的活性成分為木酚素，例如，五味子素(五味子酯)。這些化合物表現(xiàn)出有效的護肝藥物(Hancke等人，F(xiàn)itoferapia 70，451-471，(1999))。它們能夠提高GSH/GSSG的比例以及GSH還原酶的活性，提高肝細胞線粒體的GSH水平。另外，它們通過增強肝毒素的細胞色素P450-介導(dǎo)的代謝，然后通過誘導(dǎo)GSH-S-轉(zhuǎn)移酶-介導(dǎo)的結(jié)合而能夠增強解毒。
用富含木酚素的五味子提取物預(yù)處理(1.6g/kg口服)提高了肝谷胱苷肽的水平并且保護大鼠免遭體育運動帶來的肌肉損傷(Ko等人，Phytotherapy Research 10，450-452，(1996))。用來自五味子的提取物處理大鼠(1.6g/kg/天，口服)提高了肝GSH的水平以及GSH還原酶，G6PDH的活性，并且降低了肝組織勻漿物對于過氧化物誘導(dǎo)的GSH缺失的敏感性；用這些提取物預(yù)處理大鼠(0.2-3.2g/kg口服)劑量-依賴性地防止CC14-誘導(dǎo)的GSH-缺失以及氧化的肝細胞損傷。這些數(shù)據(jù)通過其它的試驗得到證實，顯示五味子提取物(1.6g/kg/天，口服)提高了肝GSH的水平，GSH還原酶以及GSH轉(zhuǎn)移酶的活性并且預(yù)防大鼠由黃曲霉毒素和鎘誘導(dǎo)的肝損傷。用五味子酚和五味子酯B(200mg/kg)對酒精誘導(dǎo)的肝過氧化的小鼠進行預(yù)處理提高了歧化酶和過氧化氫酶的活性，而GSH過氧化物酶的活性未受影響。五味子酯B的處理(3mmol/kg/天，口服)提高了線粒體GSH的水平并且相反降低了GSSG的水平，提高了GSH/GSSG的比例，以及提高了線粒體GSH還原酶的活性。這些影響在CC14-中毒的小鼠中更顯著，提供了抗肝損傷的保護性。然而，GSH還原酶的特異性抑制劑BCNU不影響保護性活性，雖然它抑制GSH還原酶的活性，顯示由五味子酯B提高的GSH還原酶的活性并非肝保護的主要因素。
直接抗氧化劑通過其化學(xué)組成或者干擾氧自由基的形成作為自由基的清除劑。具有這個功能的最常用抗氧化劑為維生素C，維生素E和類黃酮。來自綠茶的兒茶素以及姜黃素具有類似的效果并且增強抗氧化劑的活性。
硒是紅血球和其它組織中谷胱苷肽過氧化物酶的一種組分。谷胱苷肽過氧化物酶還原過氧化氫到水。無論作為無機硒鹽還是有機硒化合物，硒都被認為可充分吸收?；加芯凭愿斡不娜蔽∪搜a充硒200μg/天共2個月顯著提高了血漿中硒的水平以及谷胱苷肽過氧化物酶的水平，但是對于過氧化參數(shù)沒有影響。
鋅作為細胞質(zhì)超氧化物歧化酶的重要組分在抗氧自由基的損傷中起作用。鋅離子也結(jié)合到蛋白的巰基，保護蛋白抗氧化。大多數(shù)(80-85％)血漿鋅結(jié)合到血清白蛋白，15％結(jié)合到α2-巨球蛋白以及＜2％結(jié)合到RBP。血漿鋅的水平通過感染和其它應(yīng)激子的作用而降低，可能是由于由金屬硫蛋白介導(dǎo)的全身性重新分配，并且可能是因為在應(yīng)激中血漿白蛋白水平的降低。
銅是很多酶的主要部分，參與防止自由基的損傷，例如細胞色素氧化酶，賴氨酰氧化酶，Zn/Cu超氧化物歧化酶。飲食中大約有30％的銅被吸收，并且有證據(jù)顯示這增加了缺乏。飲食缺乏及其罕見。超過80％的血漿銅結(jié)合到血漿銅藍蛋白(在炎癥狀態(tài)下增加的陽性急性期蛋白)。游離的銅離子(在正常條件下不可能出現(xiàn)，但是可能出現(xiàn)在銅過量的條件下)是氧自由基的主要來源。
錳是多種金屬酶的一部分，包括線粒體丙酮酸羧化酶，超氧化物歧化酶和乙酰CoA羧化酶。
發(fā)明概述本發(fā)明的主要目的就是提供通過施用特定組合的成分給哺乳動物提高細胞中谷胱苷肽包括預(yù)防或者治療損傷的肝功的方法。
本發(fā)明的另一個目的是提供用于提高細胞中谷胱苷肽包括預(yù)防或者治療損傷的肝功的改良的組合物。
令人驚訝的發(fā)現(xiàn)成分的組合物對于給肝損傷提供最佳保護是必須的。據(jù)發(fā)現(xiàn)，為了這個目的，需要對提高細胞中谷胱苷肽水平的成分加以組合。為了實現(xiàn)這個目的，施用用于內(nèi)源性谷胱苷肽產(chǎn)生的前體的組分。與之一起施用的是提高谷胱苷肽生物合成和提高氧化的谷胱苷肽再生和/或增強谷胱苷肽-介導(dǎo)的連接的組分。
發(fā)明詳述本發(fā)明提供了提高細胞中谷胱苷肽包括預(yù)防或者治療損傷的肝功的方法，本發(fā)明還提供了用于上述目的的新的飲食或者藥物組合物，包括組合至少a)一種谷胱苷肽的前體，選自半胱氨酸和含有上述氨基酸的功能性等同物，b)谷胱苷肽生物合成的一種增強劑，和c)第三種組分，選自木酚素或者是c1)谷胱苷肽再生的增強劑和c2)谷胱苷肽-介導(dǎo)的連接的增強劑的組合物。
據(jù)發(fā)現(xiàn)，解毒的能力通常對肝健康是很關(guān)鍵的。如果解毒功能降低，肝本身將被所有的通常會中和的內(nèi)或者外毒素毒化。
如上所述，很多藥物和毒素可通過與谷胱苷肽結(jié)合而解毒。如果超出了通過身體(肝)的GSH的解毒能力，可以更大范圍的使用其它解毒途徑。但是完全清除是很慢的，因此暴露過度的身體部分將受到損傷。上述部分可以例如為肝臟，呼吸道，胃腸道和皮膚。這可導(dǎo)致呼吸疾病，例如COPD，肺氣腫，CARA和癌癥，以及肝病，例如脂肪肝，肝硬化，肝炎和肝癌。
此外，很多人暴露于需要充分谷胱苷肽代謝的毒性化合物。這種情況適合于，例如生活在污染區(qū)(輻射，大量鹵化，硝化化合物)的人們，與危險化合物工作在一起(有機磷殺蟲劑或者鹵化溶劑)的人們以及吸煙的人們。而且在組織的慢性炎癥期間，可能發(fā)生在關(guān)節(jié)炎或者炎性腸疾病的情況下，在炎性組織，谷胱苷肽的水平常常降低。而且在這種情況下，進一步刺激內(nèi)源谷胱苷肽的產(chǎn)生是有利的。
本發(fā)明的方法和組合物可以治療和/或預(yù)防上述提及的疾病。根據(jù)本發(fā)明，細胞中谷胱苷肽的存在或者谷胱苷肽的水平分別得以提高或者改善。這尤其適于治療和/或預(yù)防損傷的肝功。
本發(fā)明適用于哺乳動物，包括人和動物，例如鳥類。這里描述的若干疾病可發(fā)生在集中的動物飼養(yǎng)期間，由于不平衡的飼料消耗。肝問題的發(fā)生是由于過量的次質(zhì)量的脂肪或者消耗人類食品工業(yè)的廢品，而這些廢品由于某種原因已經(jīng)被污染或者含有太高水平的抗營養(yǎng)因子。這種情況主要發(fā)生在豬和禽類的飼養(yǎng)中。
根據(jù)本發(fā)明，以特定的最小量施用谷胱苷肽前體a)。所述前體a)為半胱氨酸或者一種或者多種功能類似物，包括所述氨基酸半胱氨酸或者二者的組合物。所述功能類似物為，例如半胱氨酸的鹽或者通用酯，特別是L-同分異構(gòu)體，半胱氨酸的N-乙?；苌铮T如N-乙酰半胱氨酸(NAC)，富含半胱氨酸的蛋白和肽，諸如來自乳清或者卵的一些蛋白，以及還原或者氧化形式的胱硫醚。還原或者氧化形式的谷胱苷肽自身也可提高谷胱苷肽的組織水平。當甲硫氨酸或者S-腺苷甲硫氨酸(SAM)用作半胱氨酸類似物時，提高半胱氨酸水平的風(fēng)險性在包括人的動物中是很高的，所述動物肝功受到了損傷。如果所述化合物被用作半胱氨酸的類似物，此外至少應(yīng)該存在葉酸，維生素B6和/或鋅。優(yōu)選的所有三種化合物都存在，其量超過日常推薦的用量。
根據(jù)本發(fā)明使用的谷胱苷肽前體可以分別是單獨的種類或者不同的組分和種類的混合物。每天前體a)的最低給藥量為至少100mg的半胱氨酸，以游離氨基酸計算。最少量優(yōu)選為至少200mg每天。半胱氨酸的最大量應(yīng)不超過2000mg。通過利用上述氨基酸的摩爾量可以很容易計算當量的絕對量。
谷胱苷肽的前體a)與下述的谷胱苷肽合成的增強劑b)連同第三種組分c)一起給藥。在本發(fā)明的一個簡單的實施方案中，上述組分a)，b)和c)以本發(fā)明的組合物進行給藥或者包含在本發(fā)明的組分中一起給藥。
給藥的第三種組分c)為一種或者多種木酚素或者谷胱苷肽的再生增強劑c1)和谷胱苷肽介導(dǎo)的連接增強劑c2)的組合。在本發(fā)明中，應(yīng)該注意到木酚素可作為谷胱苷肽再生的增強劑c1)以及谷胱苷肽介導(dǎo)的連接的增強劑c2)。因此，根據(jù)本發(fā)明的第一個實施方案，第三種組分c)可只由一種木酚素組成或者由多種不同木酚素的混合物組成。根據(jù)本發(fā)明的第二個實施方案，第三種組分c)可以是一種或者多種木酚素與一種或者多種不同于木酚素的谷胱苷肽生物合成的增強劑c1)的組合物，或者與一種或者多種不同于木酚素的谷胱苷肽介導(dǎo)的連接的增強劑c2)的組合物。根據(jù)本發(fā)明的第三個實施方案，第三種組分c)可以是一種或者多種不同于木酚素的谷胱苷肽生物合成的增強劑c1)，與一種或者多種不同于木酚素的谷胱苷肽介導(dǎo)的連接的增強劑c2)的組合物。根據(jù)本發(fā)明的第四個實施方案，第三個組分c)可以是下列成分的組合物i)一種或者多種不同于木酚素的谷胱苷肽生物合成的增強劑c1)，ii)一種或者多種不同于木酚素的谷胱苷肽介導(dǎo)的連接的增強劑c2)和，iii)一種木酚素或者多種木酚素。
根據(jù)優(yōu)選的實施方案，谷胱苷肽生物合成的增強劑b)含有羅布麻寧或者類似物。
羅布麻寧可以分離自諸如鳶尾種(鳶尾科)的植物或者來自Apocynam cannabinum或者其它夾竹桃科植物的根莖。
更優(yōu)選的谷胱苷肽生物合成的增強劑b)是獲自胡黃連種的制備物；更優(yōu)選的谷胱苷肽生物合成的增強劑b)選自庫洛胡黃連的提取物和Picrorhiza schrophulariiflora的提取物，因此所述提取物最優(yōu)選含有0.01到100mg/天的羅布麻寧或者類似物。
谷胱苷肽再生的增強劑c1)優(yōu)選自富含水飛薊素的制備物，諸如來自水飛薊或者armurariu果的制備物，以及富含五味子素的制備物，諸如來自五味子種的提取物；并且谷胱苷肽介導(dǎo)的解毒過程的增強劑c2)優(yōu)選自富含環(huán)烯醚萜甙的制備物，尤其是來自胡黃連種的提取物，和富含五味子素的制備物，諸如來自五味子種的提取物。
胡黃連種的制備物優(yōu)選為來自庫洛胡黃連(Picrorhiza kurrooa)或者Picrorhiza scrophulariiflora(也稱作Neopicrorhiza Scrophulariiflora)的提取物，優(yōu)選含有1-100mg的總環(huán)烯醚萜甙，尤其是1到100mg的胡黃連苦甙，更優(yōu)選1到50mg的胡黃連苦甙II，例如大約6mg的胡黃連苦甙II，以及0.01-100mg的羅布麻寧。
根據(jù)本發(fā)明，羅布麻寧的類似物可代替羅布麻寧或者除羅布麻寧以外應(yīng)用。這種類似物尤其是指那些其中4-羥基被醚化，尤其是用糖基醚化的類似物。其中糖基為β-D-葡萄糖的類似物通常稱作雄素。
水飛薊的制備物優(yōu)選為含有10-1000mg水飛薊素的提取物，更優(yōu)選含有140mg水飛薊素的175mg提取物。
水飛薊種的制備物優(yōu)選為含有0.1-100mg木酚素，尤其是含有0.1到100mg五味子素，更優(yōu)選11到70mg五味子素，例如大約5mg五味子素的來自五味子(Schisandra chinensis)或者華中五味子(Schisandra sphenanthera)的提取物。
a)，b)，c)，c1)和c2)的不同組分是公知的并且描述如上。幾種傳統(tǒng)草藥，例如乳薊，胡黃連和五味子可被使用，它們已知表現(xiàn)出護肝活性，并且誘導(dǎo)或者增強內(nèi)源性谷胱苷肽的產(chǎn)生。這種內(nèi)源性抗氧化劑在毒素代謝和去除的過程中具有重要作用。根據(jù)本發(fā)明，在肝中GSH的水平提高了，此外負責(zé)GSH合成的γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶也提高了。
因此本發(fā)明包括對于谷胱苷肽合成很重要的前體和輔因子，加強谷胱苷肽再生的化合物，以及誘導(dǎo)谷胱苷肽-介導(dǎo)的解毒過程的化合物。
優(yōu)選的，增強肝抗氧化劑活性的例如維生素C，E，和類黃酮的直接抗氧化劑，以及例如硒，鋅，銅和錳的酶抗氧化劑可根據(jù)本發(fā)明另外存在。因為幾種毒素由于形成氧自由基能夠表現(xiàn)出氧化損傷，因此是優(yōu)選的。
酶抗氧化劑尤其是指那些提高谷胱苷肽過氧化物酶或者超氧化物歧化酶活性的組分。硒可以硒鹽并且優(yōu)選以每日提供10-200mcg劑量硒的硒酵母的形式使用。鋅可以無機或者有機鋅鹽的形式存在，諸如ZnO優(yōu)選提供每日0.1-30mg劑量的鋅。銅可以銅鹽的形式存在，優(yōu)選提供每日0.1-8mg劑量的銅。錳可以錳鹽的形式存在，優(yōu)選提供每日0.1-20mg劑量的錳。
另外，組合物可以含有至少一種進一步增強肝谷胱苷肽水平的化合物作為谷胱苷肽前體生物合成的輔因子。這樣的化合物選自核黃素，優(yōu)選0.1-200mg的核黃素，維生素B6，優(yōu)選0.1-200mg的維生素B6，維生素B12，優(yōu)選0.1-3000mcg的維生素B12，和葉酸或者葉酸酯，優(yōu)選10-1000mcg的葉酸。維生素B6和維生素B12的優(yōu)選來源分別為吡哆醇和氰鈷胺素。
此外，組合物至少含有一種組分，通過直接清除活性氧物種或者通過干擾其形成而加強抗氧化劑的功能。這樣的組分選自維生素C，優(yōu)選10-1000mg的維生素C，維生素E，優(yōu)選1-800mgα-TE，類黃酮，優(yōu)選含有1-100mg芹菜甙元的西洋甘菊(Matricaria recutia)提取物，兒茶酚，優(yōu)選含有1-500mg兒茶酚的山茶(Camellia Sinensis)提取物，和curcuminoid，優(yōu)選含有1-1000mg姜黃素的姜黃(Curcuma longa)提取物。
如上所述本發(fā)明也可應(yīng)用于動物，尤其是豬和禽類飼養(yǎng)中。在這種情況下，根據(jù)本發(fā)明使用的組分可存在于優(yōu)選用于動物飼養(yǎng)的植物提取物中。所述組分也可包括在用于和常規(guī)動物飼料混合的預(yù)混合物中。預(yù)混合物優(yōu)選基于乳清蛋白作為谷胱苷肽前體a)的原料。
本發(fā)明的組合物可以是通常用于食品或者食品添加物給藥的形式。它們可以例如，粉末，液體，乳劑，條狀，片劑以及膠囊的形式存在，可以包裝在硬紙盒，鐵罐，小袋，瓶子，包裝袋(茶包)中并且可根據(jù)本領(lǐng)域公知的方法進行制備。
根據(jù)本發(fā)明，片劑形式的組合物含有，例如300mg的谷胱苷肽，20mg的羅布麻寧和5mg的五味子素。
本發(fā)明進一步表述在下列非限制性的實施例中。
實施例1下列組分混合并制備成丸劑
三個片劑每日優(yōu)選與其它復(fù)合維生素一起給藥治療喪失的肝功。
實施例2
實施例3
實施例4
實施例5
實施例權(quán)利要求
1.通過給需要的哺乳動物施用組合物提高細胞中谷胱苷肽包括治療或者預(yù)防損傷的肝功的方法，所述組合物含有至少一種下列組分a)一種谷胱苷肽的前體，選自半胱氨酸和含有上述氨基酸的功能性等同物，以游離氨基酸計算，每天的用量為至少100mg的半胱氨酸；b)一種谷胱苷肽生物合成的增強劑；和c)第三種組分，其或者選自木酚素或者是下列成分的組合c1)谷胱苷肽再生的增強劑和c2)谷胱苷肽-介導(dǎo)的連接的增強劑。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的通過施用組合物提高細胞中谷胱苷肽的方法，其中谷胱苷肽生物合成的增強劑b)含有羅布麻寧或者類似物；谷胱苷肽再生的增強劑c1)含有選自水飛薊素和木酚素的活性成分；和谷胱苷肽介導(dǎo)的連接的增強劑c2)含有選自環(huán)烯醚萜甙和木酚素的活性成分。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或者2的通過施用組合物提高細胞中谷胱苷肽的方法，其中谷胱苷肽生物合成的增強劑b)是獲自胡黃連種的制備物；谷胱苷肽再生的增強劑c1)選自水飛薊的制備物和五味子種的制備物；和谷胱苷肽介導(dǎo)的連接的增強劑c2)選自胡黃連種的制備物和五味子種的制備物。
4.根據(jù)權(quán)利要求1的通過施用組合物提高細胞中谷胱苷肽的方法，其中谷胱苷肽的前體a)包括每天用量為100到2000mg的半胱氨酸；谷胱苷肽生物合成的增強劑b)選自庫洛胡黃連的提取物和Picrorhiza schrophulariiflora的提取物，因此所述提取物含有每天0.01到100mg的羅布麻寧或者類似物；谷胱苷肽再生的增強劑c1)選自含有每天10-1000mg水飛薊素的水飛薊的提取物，以及含有每天0.1-100mg五味子素的五味子或者華中五味子的提取物；和谷胱苷肽介導(dǎo)的連接的增強劑c2)選自含有每天1到100mg的胡黃連苦甙的提取物，其獲自庫洛胡黃連或者獲自Picrorhizaschrophulariiflora或者這兩種胡黃連，以及含有每天0.1到100mg的五味子素的提取物，其獲自五味子或者華中五味子或者這兩種五味子。
5.根據(jù)權(quán)利要求1或者4的提高細胞中谷胱苷肽的方法，其中施用的組合物另含有進一步的活性成分d)，其選自甲硫氨酸和含有上述氨基酸的功能性等同物，葉酸，維生素B12，維生素B6，硒酵母，鋅鹽，銅鹽和錳鹽。
6.根據(jù)權(quán)利要求5的提高細胞中谷胱苷肽的方法，其中活性成分d)選自以游離氨基酸計算每天100到1000mg的甲硫氨酸，每天10到200mcg的硒酵母，每天0.1到30mg的氧化鋅，每天0.1到8mg的氧化銅和每天0.1到20mg的葡萄糖酸錳。
7.提高細胞中谷胱苷肽包括預(yù)防或者治療損傷的肝功的飲食或者藥物組合物，其特征在于組合物含有至少一種下列成分的組合a)一種谷胱苷肽的前體，其選自半胱氨酸和含有上述氨基酸的功能性等同物；b)一種谷胱苷肽生物合成的增強劑；和c)第三種組分，其或者選自木酚素或者是下列成分的組合c1)谷胱苷肽再生的增強劑和c2)谷胱苷肽-介導(dǎo)的連接的增強劑；以及作為谷胱苷肽前體a)的半胱氨酸以游離氨基酸計算每100g組合物的固體物質(zhì)占有至少1.5g。
8.根據(jù)權(quán)利要求7的飲食或者藥物組合物，其特征在于谷胱苷肽生物合成的增強劑b)含有羅布麻寧或者類似物；谷胱苷肽再生的增強劑c1)含有選自水飛薊素和木酚素的活性成分；和谷胱苷肽介導(dǎo)的連接的增強劑c2)含有選自環(huán)烯醚萜甙和木酚素的活性成分。
9.根據(jù)權(quán)利要求7或者8的飲食或者藥物組合物，其特征在于谷胱苷肽生物合成的增強劑b)是獲自胡黃連種的制備物；谷胱苷肽再生的增強劑c1)選自水飛薊的制備物和五味子種的制備物；和谷胱苷肽介導(dǎo)的連接的增強劑c2)選自胡黃連種的制備物和五味子種的制備物。
10.根據(jù)權(quán)利要求7的飲食或者藥物組合物，其特征在于谷胱苷肽生物合成的增強劑b)選自庫洛胡黃連的提取物和Picrorhiza schrophulariiflora的提取物，因此所述提取物在每100g組合物的固體物質(zhì)中含有至少5mg的羅布麻寧或者類似物；谷胱苷肽再生的增強劑c1)選自在每100g組合物的固體物質(zhì)中含有至少150mg水飛薊素的水飛薊的提取物，以及在每100g組合物的固體物質(zhì)中含有至少1.5mg五味子素的五味子或者華中五味子的提取物；和谷胱苷肽介導(dǎo)的連接的增強劑c2)選自在每100g組合物的固體物質(zhì)中含有至少15mg胡黃連苦甙的提取物，其獲自庫洛胡黃連或者獲自Picrorhiza schrophulariflora或者這兩種胡黃連，以及在每100g組合物的固體物質(zhì)中含有至少1.5mg五味子素的提取物，其獲自五味子或者華中五味子或者這兩種五味子。
11.根據(jù)權(quán)利要求7或者10的飲食或者藥物組合物，其特征在于組合物另含有進一步的活性成分d)，其選自甲硫氨酸和含有上述氨基酸的功能性等同物，硒酵母，鋅鹽，銅鹽，葉酸，維生素B12，維生素B6和錳鹽。
12.根據(jù)權(quán)利要求11的飲食或者藥物組合物，其特征在于成分d)選自以游離氨基酸計算每100g組合物的固體物質(zhì)中所含的1.5g到15g甲硫氨酸，每100g組合物的固體物質(zhì)中所含的150到3000mcg硒酵母；每100g組合物的固體物質(zhì)中所含的1.5到450mg氧化鋅；每100g組合物的固體物質(zhì)中所含的1.5到120mg氧化銅；以及每100g組合物的固體物質(zhì)中所含的1.5到300mg葡萄糖酸錳。
13.根據(jù)權(quán)利要求7或者10的飲食或者藥物組合物，其特征在于作為谷胱苷肽前體a)的半胱氨酸以游離氨基酸計算每100g組合物的固體物質(zhì)占有至少3.0g。
14.用于提高細胞中谷胱苷肽包括治療或者預(yù)防損傷的肝功的飲食或者藥物組合物，其特征在于組合物含有至少一種下列成分的組合a)一種谷胱苷肽的前體，其選自半胱氨酸和含有上述氨基酸的功能性等同物，以游離氨基酸計算每天至少0.1g半胱氨酸的量；b)一種谷胱苷肽生物合成的增強劑；和c)第三種組分，其或者選自木酚素或者是下列成分的組合c1)谷胱苷肽再生的增強劑和c2)谷胱苷肽-介導(dǎo)的連接的增強劑。
15.根據(jù)權(quán)利要求14的飲食或者藥物組合物，其特征在于谷胱苷肽生物合成的增強劑b)含有羅布麻寧或者類似物；谷胱苷肽再生的增強劑c1)含有選自水飛薊素和木酚素的活性成分；和谷胱苷肽介導(dǎo)的連接的增強劑c2)含有選自環(huán)烯醚萜甙和木酚素的活性成分。
16.根據(jù)權(quán)利要求14或者15的飲食或者藥物組合物，其特征在于谷胱苷肽生物合成的增強劑b)是獲自胡黃連種的制備物；谷胱苷肽再生的增強劑c1)選自水飛薊的制備物和五味子種的制備物；和谷胱苷肽介導(dǎo)的連接的增強劑c2)選自胡黃連種的制備物和五味子種的制備物。
17.根據(jù)權(quán)利要求14的飲食或者藥物組合物，其特征在于谷胱苷肽生物合成的增強劑b)選自庫洛胡黃連的提取物和Picrorhiza schrophulariiflora的提取物，因此所述提取物含有每天0.01到100mg的羅布麻寧或者類似物；谷胱苷肽再生的增強劑c1)選自含有每天10到1000mg水飛薊素的水飛薊的提取物，以及含有每天0.1-100mg五味子素的五味子或者華中五味子的提取物；和谷胱苷肽介導(dǎo)的連接的增強劑c2)選自含有每天1到100mg胡黃連苦甙的提取物，其獲自庫洛胡黃連或者獲自Picrorhizaschrophulariiflora或者這兩種胡黃連，以及含有每天0.1到100mg五味子素的提取物，其獲自五味子或者華中五味子或者這兩種五味子。
18.根據(jù)權(quán)利要求14或17的飲食或者藥物組合物，其特征在于組合物另含有進一步的活性成分d)，其選自甲硫氨酸和含有上述氨基酸的功能性等同物，葉酸，維生素B12，維生素B6，硒酵母，鋅鹽，銅鹽和錳鹽。
19.根據(jù)權(quán)利要求18的飲食或者藥物組合物，其特征在于成分d)選自以游離氨基酸計算每天100到1000mg的甲硫氨酸，每天10到200mcg的硒酵母，每天0.1到30mg的氧化鋅，每天0.1到8mg的氧化銅和每天0.1到20mg的葡萄糖酸錳。
20.提高細胞中谷胱苷肽包括預(yù)防或者治療損傷的肝功的飲食或者藥物組合物，其特征在于組合物代表一種單位劑型；并且在于組合物含有至少一種下列成分的組合a)一種谷胱苷肽的前體，其選自半胱氨酸和含有上述氨基酸的功能性等同物；b)一種谷胱苷肽生物合成的增強劑；和c)第三種組分，其或者選自木酚素或者是下列成分的組合c1)谷胱苷肽再生的增強劑和c2)谷胱苷肽-介導(dǎo)的連接的增強劑；以及作為谷胱苷肽前體a)的半胱氨酸以游離氨基酸計算每單位劑型存在的量至少30mg。
21.根據(jù)權(quán)利要求20的飲食或藥物組合物，其特征在于谷胱苷肽生物合成的增強劑b)含有羅布麻寧或者類似物；谷胱苷肽再生的增強劑c1)含有選自水飛薊素和木酚素的活性成分；和谷胱苷肽介導(dǎo)的連接的增強劑c2)含有選自環(huán)烯醚萜甙和木酚素的活性成分。
22.根據(jù)權(quán)利要求20或者21的飲食或者藥物組合物，其特征在于谷胱苷肽生物合成的增強劑b)是獲自胡黃連種的制備物；谷胱苷肽再生的增強劑c1)選自水飛薊的制備物和五味子種的制備物；和谷胱苷肽介導(dǎo)的連接的增強劑c2)選自胡黃連種的制備物和五味子種的制備物。
23.根據(jù)權(quán)利要求20的飲食或者藥物組合物，其特征在于谷胱苷肽的前體a)含有30到333mg量的半胱氨酸；谷胱苷肽生物合成的增強劑b)選自庫洛胡黃連的提取物和Picrorhiza schrophulariiflora的提取物，因此所述提取物含有0.0033到33mg的羅布麻寧或者類似物；谷胱苷肽再生的增強劑c1)選自含有3.3到333mg水飛薊素的水飛薊的提取物，以及含有0.033到33mg五味子素的五味子或者華中五味子的提取物；和谷胱苷肽介導(dǎo)的連接的增強劑c2)選自含有0.33到33mg胡黃連苦甙的提取物，其獲自庫洛胡黃連或者獲自Picrorhiza schrophulariiflora或者這兩種胡黃連，以及含有0.033到33mg五味子素的提取物，其獲自五味子或者華中五味子或者這兩種五味子。
24.根據(jù)權(quán)利要求20或23的飲食或者藥物組合物，其特征在于組合物另含有進一步的活性成分d)，其選自甲硫氨酸和含有上述氨基酸的功能性等同物，硒酵母，鋅鹽，銅鹽，葉酸，維生素B12，維生素B6和錳鹽。
25.根據(jù)權(quán)利要求24的飲食或者藥物組合物，其特征在于成分d)選自以游離氨基酸計算33到333mg的甲硫氨酸，3.3到66mcg的硒酵母；0.033到10mg的氧化鋅；0.033到2.4mg的氧化銅以及0.033到6.6mg的葡萄糖酸錳。
26.提高細胞中谷胱苷肽包括預(yù)防或者治療損傷的肝功的飲食或者藥物組合物，其特征在于組合物含有至少一種下列成分的組合a)一種谷胱苷肽的前體，其選自半胱氨酸和含有上述氨基酸的功能性等同物；b)一種谷胱苷肽生物合成的增強劑；和c)第三種組分，其或者選自木酚素或者是下列成分的組合c1)谷胱苷肽再生的增強劑和c2)谷胱苷肽-介導(dǎo)的連接的增強劑；以及作為谷胱苷肽前體a)的半胱氨酸以游離氨基酸計算每100g總的活性成分a)到c2)的固體物質(zhì)占有至少25g。
27.根據(jù)權(quán)利要求26的飲食或者藥物組合物，其特征在于谷胱苷肽生物合成的增強劑b)含有羅布麻寧或者類似物；谷胱苷肽再生的增強劑c1)含有選自水飛薊素和木酚素的活性成分；和谷胱苷肽介導(dǎo)的連接的增強劑c2)含有選自環(huán)烯醚萜甙和木酚素的活性成分。
28.根據(jù)權(quán)利要求26或者27的飲食或者藥物組合物，其特征在于谷胱苷肽生物合成的增強劑b)是獲自胡黃連種的制備物；谷胱苷肽再生的增強劑c1)選自水飛薊的制備物和五味子種的制備物；和谷胱苷肽介導(dǎo)的連接的增強劑c2)選自胡黃連種的制備物和五味子種的制備物。
29.根據(jù)權(quán)利要求26的飲食或者藥物組合物，其特征在于谷胱苷肽生物合成的增強劑b)選自庫洛胡黃連的提取物和Picrorhiza schrophulariiflora的提取物，因此所述提取物在每100g總的活性成分a)到c2)的固體物質(zhì)中含有70mg到40g的羅布麻寧或者類似物；谷胱苷肽再生的增強劑c1)選自每100g總的活性成分a)到c2)的固體物質(zhì)含有至少150mg水飛薊素的水飛薊的提取物，以及每100g總的活性成分a)到c2)的固體物質(zhì)含有至少1.5mg五味子素的五味子或者華中五味子的提取物；和谷胱苷肽介導(dǎo)的連接的增強劑c2)選自每100g總的活性成分a)到c2)的固體物質(zhì)含有至少15mg胡黃連苦甙的提取物，其獲自庫洛胡黃連或者獲自Picrorhiza schrophulariiflora或者這兩種胡黃連，以及每100g總的活性成分a)到c2)的固體物質(zhì)含有至少1.5mg五味子素的提取物，其獲自五味子或者華中五味子或者這兩種五味子。
30.根據(jù)權(quán)利要求26或者29的飲食或者藥物組合物，其特征在于組合物另含有進一步的活性成分d)，其選自甲硫氨酸和含有上述氨基酸的功能性等同物，硒酵母，鋅鹽，銅鹽，葉酸，維生素B12，維生素B6和錳鹽。
31.根據(jù)權(quán)利要求30的飲食或者藥物組合物，其特征在于成分d)選自以游離氨基酸計算每100g總的活性成分a)到c2)的固體物質(zhì)中所含的1.5g到15g甲硫氨酸，每100g總的活性成分a)到c2)的固體物質(zhì)中所含的150到3000mcg硒酵母；每100g總的活性成分a)到c2)的固體物質(zhì)中所含的1.5到450mg氧化鋅；每100g總的活性成分a)到c2)的固體物質(zhì)中所含的1.5到120mg氧化銅；以及每100g總的活性成分a)到c2)的固體物質(zhì)中所含的1.5到300mg葡萄糖酸錳。
32.根據(jù)權(quán)利要求7或者10的飲食或者藥物組合物，其特征在于作為谷胱苷肽前體a)的半胱氨酸以游離氨基酸計算每100g總的活性成分a)到c2)的固體物質(zhì)占有至少30g。
全文摘要
本發(fā)明提供了通過給需要的哺乳動物施用飲食或者藥物組合物提高細胞中谷胱苷肽包括治療或者預(yù)防損傷的肝功的方法，本發(fā)明還涉及相應(yīng)的飲食或者藥物組合物。上述組合物含有至少一種下列組分a)一種谷胱苷肽的前體，選自半胱氨酸和含有上述氨基酸的功能等同物；b)一種谷胱苷肽生物合成的增強劑；和c)第三種組分，其或者選自木酚素或者是下列成分的組合c1)谷胱苷肽再生的增強劑和c2)谷胱苷肽－介導(dǎo)的連接的增強劑。
文檔編號A61K36/28GK1545418SQ01823625
公開日2004年11月10日 申請日期2001年9月14日 優(yōu)先權(quán)日2001年9月14日
發(fā)明者霍布·弗里索·斯米特, 克拉斯克·范諾爾潤, 羅伯特·約翰·約瑟夫·哈格曼, 約翰 約瑟夫 哈格曼, 克 范諾爾潤, 霍布 弗里索 斯米特 申請人:N·V·努特里西阿, N V 努特里西阿