專利名稱：用于干眼癥治療的方法和組合物的制作方法
背景技術(shù)：
發(fā)明領(lǐng)域本發(fā)明總的來說涉及干眼癥的治療，特別涉及一種做為此目的在眼睛表面上形成人工淚膜以抑制自其上蒸發(fā)及遞送有效的藥物至眼睛表面以治療眼睛疾病的方法與組合物。
現(xiàn)有技術(shù)本發(fā)明主要涉及一種藉由潤滑眼睛及減少流體自角膜表面蒸發(fā)的方法與組合物治療干眼癥。角膜功能正常時可以維持此表面于濕潤的狀態(tài)，但在眼睛有干眼癥時此功能即受損。
眼睛的水分損失產(chǎn)生各種不適，如眼睛干澀以及燒灼與擦傷感覺。但干眼癥更嚴重的后果是喪失視敏度，若持續(xù)喪失視敏度及未予矯正，會導致永久傷害。干眼癥會使曝露的眼睛表面惡化及可能引起角膜組織完全失去功用。在極端例子中，此也許需要角膜移植。
當眼睛覆蓋隱形眼鏡時，伴隨著干眼癥的癥狀會惡化。隱形眼鏡加速液體自眼睛蒸發(fā)的速率，隱形眼鏡的存在導致彎月面形成，其促進蒸發(fā)，即使當眼睛具有充足天然淚膜亦然。
通常干眼癥所用的治療是藉由局部施加淚膜替代品來緩和其癥狀，淚膜替代品使眼睛前表面的液體體積顯著增加。一種典型的用作淚膜替代品的組合物包括可溶性聚合物溶液。與此有關(guān)的現(xiàn)有技術(shù)為頒給Trager的美國專利第4,421,740號，揭示一種藉由卵磷脂、磷脂、及粘度調(diào)節(jié)劑的水性低滲溶液所形成的人工淚液組合物。
其中特別有關(guān)的現(xiàn)有技術(shù)為下列美國專利，在各專利中，Korb為共同發(fā)明人。因此在下文中將稱此等專利為Korb專利。
I.4,914,088(1990)II.5,278,151(1994)
III.5,371,108(1994)IV.5,294,607(1994)Korb專利指出正常眼睛的眼睛表面覆蓋著包括下列組成的淚膜(a)與眼睛表面接觸的粘液內(nèi)層(b)濕潤源的水性中間層，及(c)減少濕氣自膜蒸發(fā)的脂外層。
當淚膜的外層(c)有缺陷時，則產(chǎn)生“干眼”。專利I至IV所揭示及主張的干眼治療涉及到在眼睛局部施加磷脂，其在眼睛上形成人工淚膜，復制一正常脂質(zhì)外層從而維持眼睛在濕潤狀態(tài)。
專利I針對有下列組成的人工淚膜“具有凈正電荷或負電荷的復合磷脂層”。
根據(jù)此Korb專利，凈正電荷或負電荷的意義是在任一情況下，眼睛表面膜涂層中的帶電分子“彼此相斥”，及在彼此相斥時，維持“其內(nèi)磷脂的整體性”，從而作為“減輕蒸發(fā)的屏障”。因此發(fā)明人認為此專利的關(guān)鍵在于負或正電相斥。
專利I未能考慮到被治療的眼睛表面是陰離子性及因此將與帶電涂層有依電荷極性而定的靜電相互作用。根據(jù)專利I，電荷極性無關(guān)要緊，因為任一極性，膜中的帶電分子均能彼此相斥。
本發(fā)明的重要方面不僅在于它具有正凈電荷，而且電荷的強度與分布亦會引起膜靜電性粘著至整個帶陰離子電荷的眼睛表面以提供有效的濕氣屏障。弱的正電荷無法達到此結(jié)果。因為如本發(fā)明中，覆蓋眼睛表面的膜中帶正電荷分子靜電性吸引此表面上的帶負電荷分子，所得的靜電配對為中性且該配對不會彼此相斥。
Korb專利II揭示包含下列的眼睛治療組合物“一層具有凈電荷的復合磷脂”及“一層在該磷脂層上的基本上非極性的油”，該磷脂與油層量為“在能夠?qū)е嘛@著延長的視覺模糊的量以下”。
根據(jù)專利II，優(yōu)選的磷脂為那些“帶凈負電荷者，因為帶負電荷分子將被帶負電荷眼睛表面所排斥，因而允許維持相對厚度的水性層”。
相反的，屬于帶正電荷的組合物的本發(fā)明利用眼睛表面帶負電荷(陰離子性)的事實，所以組合物被靜電吸引至此表面以產(chǎn)生在延長的時間內(nèi)防止?jié)駳庾匝劬Ρ砻嬲舭l(fā)的涂層。
Korb專利III亦揭示一種組合物，其中磷脂具有凈負電荷或正電荷，導致涂覆眼睛表面的淚膜中的分子彼此排斥從而維持膜的整體性。在Korb專利IV中，眼睛治療組合物為帶電磷脂與非極性油于亞穩(wěn)性水乳劑中的混合物。
本發(fā)明的要點為涂覆在眼睛表面以在其上形成膜的乳劑帶有均勻分散在整個膜中的凈正電荷，所以其靜電吸引至整個陰離子性眼睛表面，由此，膜表面上的分子不會彼此相斥，而是吸引至眼睛表面。
還有特別有關(guān)的現(xiàn)有技術(shù)為Allergan公司的PCT專利公告WO95/31211(1995年11月25日)。此公告揭示局部用藥至眼睛組織的乳劑，它包含與蓖麻油混合的環(huán)孢菌素。如在此公告中所提到的，環(huán)孢菌素包含一組環(huán)狀寡肽，其主要成分為環(huán)孢菌素A(C62H111N11O12)，已發(fā)現(xiàn)環(huán)孢菌素可有效治療干眼癥。
發(fā)明概要鑒于前述，本發(fā)明的主要目的是提供一種改進的治療干眼癥的方法與組合物，藉由將乳劑局部用藥至眼睛表面，該乳劑形成淚膜靜電性粘著至眼睛整個表面并潤滑眼睛和抑制濕氣自其蒸發(fā)。
根據(jù)本發(fā)明的方法與組合物的顯著優(yōu)點如下A.自乳劑衍生的淚膜帶有強烈的凈正電荷，均勻分散在整個膜表面，由此，膜被靜電吸引至帶負電荷的眼睛表面的整個區(qū)域，沒有未涂覆區(qū)。
B.在人工淚膜與眼睛表面間的靜電吸引維持彼此間粘著性接觸達一段延長的駐留時間且淚膜無法輕易被洗除。
C.涂覆眼睛表面的淚膜沒有不良效應，因為膜不含有毒或其他有害劑。
本發(fā)明又一目的是提供一種摻入有治療眼疾的治療劑的上述類型的組合物，例如“環(huán)孢菌素A，當將組合物局部用藥時則遞送此藥劑至眼睛。使藥劑自涂覆膜釋放至眼睛表面維持一段延長的時間，其中膜是靜電性與眼睛表面接觸。
簡而言之，一種治療干眼癥的方法與組合物，通過將乳劑局部用藥至眼睛表面，該乳劑形成淚膜潤滑眼睛及抑制自其蒸發(fā)水分，而達到此等目的。該乳劑由水構(gòu)成，其中分散著包括磷脂、非極性油、及賦予膜遍布整個膜的凈正電荷的混合物，導致膜被靜電吸引至眼睛的陰離子表面，膜籍此粘著至眼睛且無法洗除?；旌衔镏锌砂ú蝗苄灾委焺?，如“環(huán)孢菌素，可有效對抗眼部疾病及藉由膜遞送至眼睛。
發(fā)明詳細說明環(huán)孢菌素A(CsA)，是脂溶性環(huán)狀十一肽(endecapeptide)，是一種主要供口服使用的有效及使用良好的免疫調(diào)節(jié)藥物。以口服配方使用時，CsA的生物可利用率有限，因為藥物不溶于水及其在與水接觸后易于立刻分離成為固體。再者，生物可利用率高度依賴于配方與內(nèi)臟生理環(huán)境之間發(fā)生的復雜相互作用。
已發(fā)現(xiàn)CsA藉由加強或恢復有此干眼癥狀病人的淚腺分泌淚液而能有效治療免疫介導的干性角膜結(jié)膜炎(KCS或干眼癥)。干眼癥特征為結(jié)膜與角膜長期干燥，以及淚液分泌減少及淚膜組成改變。為了增強CsA治療的效果，必須增加藥物在淚腺以及結(jié)膜與角膜靶組織的吸收，為此，使用適合的藥物劑量來抑制眼睛發(fā)炎而不會顯著使全身曝露于CsA中。
因為CsA的水性溶解度在約20至30μm/ml的間，所以無足夠的水性配方可供此藥物眼部給藥。再者，若將環(huán)孢菌素口服給藥以治療KCS，由于全身循環(huán)的伴隨副作用可導致不利反應如多毛癥或腎功能障礙。此外，由于藥物的疏水性本質(zhì)，所以存在于口服配方中的CsA濃度有限。
使用以橄欖油及玉米油為主的CsA配方進行動物眼睛CsA滲透度的研究。發(fā)現(xiàn)因局部性CsA配方或原來固有的溶劑對于角膜的局部毒性效應。在使用CsA于橄欖油中時，在牛角膜的活體外檢查時，組織學上的研究顯示角膜上皮角化，其上有若干壞死細胞及稀少的固縮核角化。再者，許多研究者確認可能的毒性效應是由于將CsA溶解在橄欖油中局部給藥。所達到的結(jié)論是橄欖油(而非CsA)是角膜產(chǎn)生表面上皮細胞缺陷的原因。因此，因為其高度疏水性，需要將CsA與可相容的載體調(diào)配。對于眼科給藥并不總是有生物相容性，可能存在穩(wěn)定性的若干問題，如橄欖的油的腐臭。玉米油濃縮軟膏配方的缺點為其可使干眼癥的癥狀(早期燒灼感、發(fā)紅、及癢)加劇。
可藉由減少油含量及將油相分散于水相中使產(chǎn)生乳劑而減小與不悅的感覺及癥狀惡化有關(guān)的問題。我們發(fā)現(xiàn)當使用蓖麻油配制乳劑劑型時，因為乳劑載體延長的眼睛駐留時間，而對干眼癥病人有額外的好處。當乳劑留在病人眼睛上時，乳劑中的蓖麻油小滴形成脂層覆于淚膜上，減少所產(chǎn)生的有限天然淚液的蒸發(fā)。
我們對具有ξ電位值在34至45mV范圍及平均小滴尺寸在約150至250nm的含有磷脂的帶正電荷亞微米乳劑的研究，支持了當乳劑載體攜帶凈正電荷而非負電荷或中性電荷時所獲得的顯著優(yōu)點。
乳劑中帶正電荷亞微米油小滴及帶負電荷的眼睛角膜表面之間所得的靜電吸引力，導致更長的停駐或駐留時間，有益于局部藥物流的加強。
因此，CsA的帶正電荷亞微米乳劑加強此藥劑在結(jié)膜與角膜(其為靶眼睛組織)的局部濃度。因此根據(jù)本發(fā)明的帶正電荷乳劑比具有類似組成的帶負電荷乳劑有更好的療效。
組合物下列為根據(jù)本發(fā)明的用于治療干眼癥及其他眼病的組合物的代表配方。
配方(1)為被局部施用于眼睛表面以在表面上產(chǎn)生人工淚膜的正空白乳劑。配方(2)為CsA正乳劑，具有與配方(1)相同的成份，添加有環(huán)孢菌素。所得的膜用作載體，以遞送藥物至眼睛表面。
環(huán)孢菌素A 0.000.20蓖麻油2.502.50Lipoid E-80 0.500.50硬脂胺0.120.12維生素E 0.010.01Pluronic F-68 0.420.42甘油 2.252.25芐扎氯銨 0.010.01
添加蒸餾水至100.00100.00脂質(zhì)E-8是非極性磷脂，硬脂胺為陽離子性脂質(zhì)，因此賦予乳劑(其亦包括非極性蓖麻油)凈正電荷。Pluronic F-68為泊洛沙姆188的商標，是一種自聚丙二醇衍生的polyoxyalkyline。泊洛沙姆188為一種乳化劑，配方中的甘油作為滲透劑。苯扎氯銨為陽離子性表面活性劑防腐劑，用作乳劑的保存劑及強化陽離子性脂質(zhì)所賦予乳劑的正電荷。維生素E用作親脂性抗氧化劑及眼睛潤滑劑。
在實踐中，組合物可包括陽離子性脂質(zhì)油胺，而非陽離子性脂質(zhì)硬脂胺。組合物中所包括的成份的相對百分比不限于上述。因此，蓖麻油的相對百分比可在0.5至10％的范圍，磷脂(Lipoid E-80)在0.1至2.0％的范圍，陽離子性脂質(zhì)在0.1至0.5％的范圍，及乳化劑(Pluronic F-68)在0.5至2.0％的范圍。
然而重要的是不論這些成份的相對范圍如何，乳劑攜帶足夠強度的凈正電荷，當在眼睛的陰離子性表面上形成膜時引起乳劑靜電吸引至表面，所以粘著至表面無法輕易被洗除。
Lipoid E80、Pluronic F-68、及硬脂胺共同作用，藉由加強小滴周圍所形成的界面膜的機械強度以改進乳劑小滴的穩(wěn)定性，小滴優(yōu)選在亞微米范圍。
需要記住的是將被局部給藥至眼睛的陰離子性表面的根據(jù)本發(fā)明的組合物，其配方中所包括的磷脂與蓖麻油未帶電，及所賦予亞微米小滴的聚集凈正電荷是由陰離子表面活性劑加上陰離子防腐劑所衍生的。
此配方優(yōu)于其中所賦予小滴的電荷僅衍生自磷脂(如Korb專利)的干眼癥治療組合物的地方在于使用本發(fā)明的配方時，乳劑的正電荷是均勻分散在當乳劑涂覆在眼睛陰離子性表面時所產(chǎn)生的人工淚膜的整個區(qū)域。
此導致眼睛表面的整個區(qū)域的靜電吸引，所以沒有未涂覆及未治療的部分。因此，本發(fā)明提供一種干眼癥的治療，其中在整個眼睛表面抑制濕氣蒸發(fā)及不允許濕氣自其逸散。
組合物的制備將泊洛沙姆188(Pluronic F-68)滲透劑(甘油)、及苯扎氯銨溶解于水相中。首先將脂質(zhì)E-80溶解于乙醇(1∶5)中，然后分散于水相。在水相的加熱程序期間，使乙醇蒸發(fā)。將抗氧化劑(α-生育酚)、陽離子性脂質(zhì)硬脂胺(或油胺)、及CsA溶解在蓖麻油相中。將二相分開加熱至70℃。將水相緩慢摻入油相中，并用磁攪拌器混合。將所得的混合物進一步加熱至85℃的溫度。
將所得的粗乳劑乳化5分鐘，使用高剪力Polytron混合器然后快速冷卻至20℃以下。在冰浴中冷卻后，使用二階段均質(zhì)機閥組件將乳劑均質(zhì)化5分鐘。進一步快速冷卻至20℃以下后，使用0.1N鹽酸將pH調(diào)整至7.0。然后將乳劑經(jīng)由孔徑0.45μm的TE膜濾紙(德國Dassel的Schleicher & Schuell公司)過濾。最后，在氮氣下包裝乳劑于硅化玻璃瓶中，然后藉由121℃的高壓釜滅菌達15分鐘。理想的是乳劑的小滴為亞微米的范圍，另外還重要的是要被局部性施用至眼睛表面的乳劑須無菌。
藥劑根據(jù)本發(fā)明的局部性施用至眼睛表面以治療干眼癥的乳劑，亦可作為載體以遞送治療劑至眼睛以治療眼睛疾病。
治療眼睛感染的一般操作是將抗生素劑滴在眼睛中，施用在任何病癥中的滴數(shù)要由醫(yī)師處方?jīng)Q定。因為此數(shù)目定義藥物施用至眼睛的劑量，施用者必須小心滴加有限量的藥劑于眼睛及不要使施用的液體自眼睛逸出。但實踐中，難以將液體滴至眼睛而不讓液體流至眼睛界線的外，因為眼睛表面只能容納少量液體。
使用根據(jù)本發(fā)明的乳劑做為載體遞送治療劑至眼睛的優(yōu)點為，覆蓋眼睛的整個表面及將治療劑分布在其陰離子性表面上的乳劑，靜電性粘著至此表面，所以預定劑量的全部治療劑均被遞送至眼睛。并因為該涂層靜電性粘著至眼睛表面且無法洗除，治療的駐留時間延長，因此治療劑更有效。
根據(jù)本發(fā)明的帶電乳劑中的小滴為亞微米尺寸的事實是有含意的。與小滴尺寸為微米范圍時所能產(chǎn)生的電荷密度相比時，此亞微米尺寸導致乳劑膜每單位面積高很多的電荷密度，因此產(chǎn)生更有力的凈電力。
前述中我們已揭示環(huán)孢菌素A為摻入乳劑的優(yōu)選藥劑。但是只要其他水不溶性藥劑擁有類似于環(huán)孢菌素的干眼癥治療的性質(zhì)及非極性，亦可使用。若藥劑攜帶負電荷，那么乳劑中所包括的陽離子性成份的量必須為能夠提供凈正電荷的量。
因此，適合的能夠被摻入根據(jù)本發(fā)明的乳劑中的藥劑，有那些包括藤霉素的化合物一族(公開于美國專利第4,894,366號中)者。還有適合的是揭示于美國專利第3,993,749號中的西羅莫司(雷帕霉素)。
雖然已揭示本發(fā)明的優(yōu)選實施方案，但應了解其可有許多改變而不會脫離本發(fā)明的精神。
權(quán)利要求
1.一種乳劑，其被局部性用藥至眼睛的陰離子表面以形成淚膜，并潤滑眼睛以抑制流體自其蒸發(fā)，該乳劑包含A.水，及B.分散于水中的包括非極性磷脂、非極性油、非毒性乳化劑、及賦予淚膜凈正電荷的陽離子性脂質(zhì)的混合物，其導致淚膜被靜電吸引至陰離子性眼睛表面并粘著在其上以抑制所述蒸發(fā)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的乳劑，以亞微米范圍的小滴限定乳劑，以治療干眼癥。
3.根據(jù)權(quán)利要求1的乳劑，其中油為蓖麻油。
4.根據(jù)權(quán)利要求1的乳劑，其中磷脂為Lipoid E-80。
5.根據(jù)權(quán)利要求1的乳劑，其中陽離子性脂質(zhì)為硬脂胺。
6.根據(jù)權(quán)利要求1的乳劑，其中陽離子性脂質(zhì)為油胺。
7.根據(jù)權(quán)利要求4的乳劑，其中乳劑中磷脂的相對百分比在0.1至0.5百分比的范圍內(nèi)。
8.根據(jù)權(quán)利要求1的乳劑，其中混合物包括維生素E。
9.根據(jù)權(quán)利要求1的乳劑，其中混合物進一步包括乳化劑。
10.根據(jù)權(quán)利要求9的乳劑，其中乳化劑為泊洛沙姆。
11.根據(jù)權(quán)利要求10的乳劑，其中乳劑中乳化劑的相對百分比在0.5至2.0百分比的范圍內(nèi)。
12.根據(jù)權(quán)利要求1的乳劑，其中混合物進一步包括甘油。
13.根據(jù)權(quán)利要求1的乳劑，進一步包括陽離子性防腐劑。
14.根據(jù)權(quán)利要求1的乳劑，其中防腐劑為苯扎氯銨。
15.根據(jù)權(quán)利要求1的乳劑，其中混合物進一步包括水不溶性藥物以治療眼病。
16.根據(jù)權(quán)利要求15的乳劑，其中藥物為環(huán)孢菌素。
17.根據(jù)權(quán)利要求15的乳劑，其中藥物為藤霉素。
18.根據(jù)權(quán)利要求15的乳劑，其中藥物為西羅莫司。
19.一種治療干眼癥的方法，包括如下步驟A.制備一乳劑，其中水已將包括非極性磷脂、非極性油、非毒性乳化劑、及使乳劑帶凈正電荷的陽離子性脂質(zhì)的混合物分散于該乳劑中；B.將乳劑局部性用藥至眼睛表面以形成淚膜，該淚膜經(jīng)靜電吸引至眼睛的陰離子性表面從而使膜粘著在表面上。
20.根據(jù)權(quán)利要求19的方法，其中該乳劑被制成可產(chǎn)生亞微米小滴。
21.根據(jù)權(quán)利要求19的方法，其中混合物包括水不溶性藥物。
全文摘要
一種用于干眼癥治療的方法及組合物。通過將乳劑局部用藥至眼睛表面以形成淚膜而潤滑眼睛及抑制自其蒸發(fā)水分。該乳劑由水構(gòu)成，其中分散著包括磷酯、非極性油、非毒性乳化劑及賦于遍布于整個膜的凈正電荷的極性脂類混合物。該乳劑導致膜被靜電吸引至眼睛的陰離子表面，由此將膜粘著在眼睛表面無法洗除?；旌衔镏锌砂ú蝗苄灾委焺绛h(huán)孢菌素，其由膜輸送至眼睛，可有效對抗眼部疾病。
文檔編號A61K47/10GK1558751SQ01823757
公開日2004年12月29日 申請日期2001年11月1日 優(yōu)先權(quán)日2001年11月1日
發(fā)明者S·貝妮塔, G·朗貝爾, S 貝妮塔, 炊 申請人:耶路撒冷希伯來語大學依蘇姆研究開發(fā)公司, 諾沃加里制藥股份有限公司, 耶路撒冷希伯來語大學依蘇姆研究開發(fā)