專利名稱：新穎的n－芐基哌嗪化合物、它們的制備方法和含有它們的藥物組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及新穎的N-芐基哌嗪化合物、它們的制備方法和含有它們的藥物組合物。
現(xiàn)有技術(shù)例如闡述如下-法國專利說明書1 302 958和805 M分別涉及N-三烷氧基芐基哌嗪的制備和2，3，4-三甲氧基芐基哌嗪作為具有血管舒張活性的藥物的用途，-Hiroshi Ohtaka等，Chem.Pharm.Bull.(化學與藥學通報)，35，2774-3275(1987)和Chem.Pharm.Bull.(化學與藥學通報)，37，11，2124-3122(1989)的文章提到具有血管舒張活性的曲美他嗪化合物和1-[雙(4-氟苯基)甲基]-4-(2-羥基-3，4-二甲氧基芐基)哌嗪的合成，-Tsuneo Kawashima等，J.Pharmacobio-Dyn，14，449-459(1991)的文章涉及KB-2796的新代謝產(chǎn)物的分離和鑒別，包括1-[雙(4-氟苯基)甲基]-4-(2-羥基-3，4-二甲氧基芐基)哌嗪，-歐洲專利說明書EP 533 579描述N-芐基哌嗪化合物具有抗缺氧和抗缺血活性，-最后，歐洲專利說明書EP 617 027描述N-芐基哌嗪化合物用于治療由氧化代謝機能障礙引起的神經(jīng)元疾病。
除了是新穎的以外，本發(fā)明化合物還具有尤其創(chuàng)新的藥理活性和尤其創(chuàng)新的治療性質(zhì)。
它們尤其能夠保護線粒體免受低氧的應激反應，維持缺氧的器官內(nèi)的ATP合成，例如保護置于缺血情形下的離體心臟。最后，有些能夠穿過血腦屏障。這些性質(zhì)因此使它們可用于在任意需要局部或全身(止血帶、鉗)地臨時中斷血液循環(huán)的手術(shù)干預之前，預防或治療急性與慢性細胞缺血、急性或慢性腦、心或外周缺血意外，無論隨后發(fā)生再灌注與否；用于治療慢性神經(jīng)變性疾病(例如老年性癡呆、潛伏或既定的阿爾茨海默氏病、腦老化、肌萎縮性側(cè)索硬化、多發(fā)性硬化或帕金森氏病)；和用于改善待移植器官的貯藏和再灌注后移植物的功能恢復。
本發(fā)明化合物還具有顯著高于已經(jīng)描述過的相似結(jié)構(gòu)化合物的代謝穩(wěn)定性，因而提供更好的生物利用度。
本發(fā)明尤其涉及式(I)化合物 其中R1代表直鏈或支鏈(C1-C6)烷基，R2代表羥基、直鏈或支鏈(C1-C6)烷氧基或氨基(可選地被一個或兩個直鏈或支鏈(C1-C6)烷基取代)，n代表1至12的整數(shù)，含1和12，R3代表-氫原子，-直鏈或支鏈(C1-C12)烷基，可選地被苯基(本身可選地被一個或多個相同或不同的取代基取代，取代基選自鹵原子和直鏈或支鏈(C1-C6)烷基、直鏈或支鏈(C1-C6)烷氧基、羥基和三鹵代甲基)、(C3-C7)環(huán)烷基、羧基或(C1-C6)烷氧基-羰基取代，-(C3-C7)環(huán)烷基，-嘧啶基，可選地被一個或兩個吡咯烷基取代，或-苯基，可選地被一個或多個相同或不同的取代基取代，取代基選自鹵原子和直鏈或支鏈(C1-C6)烷基、直鏈或支鏈(C1-C6)烷氧基、羥基和三鹵代甲基，其旋光異構(gòu)體及其與可藥用酸或堿的加成鹽。
在可藥用酸中，可以作為非限制性實例提到鹽酸、氫溴酸、硫酸、膦酸、乙酸、三氟乙酸、乳酸、丙酮酸、丙二酸、琥珀酸、戊二酸、富馬酸、酒石酸、馬來酸、檸檬酸、抗壞血酸、草酸、甲磺酸、樟腦酸等。
在可藥用堿中，可以作為非限制性實例提到氫氧化鈉、氫氧化鉀、三乙胺、叔丁胺等。
本發(fā)明還涉及式(I)化合物的制備方法，其特征在于使用式(II)化合物作為原料 其中R1是如式(I)所定義的，使式(II)化合物在甲醛的存在下與式(III)的取代哌嗪反應 其中R’3是如R3所定義的，被羧基取代的烷基除外，得到式(IV)化合物 其中R1和R’3是如上所定義的，使式(IV)化合物與式(V)化合物反應X-(CH2)n-COR’2(V)其中X代表鹵原子，R’2代表直鏈或支鏈(C1-C6)烷氧基，得到式(I/a)化合物-式(I)化合物的特例 其中R1、R’2、R’3和n是如上所定義的，如果需要的話，將該式(I/a)化合物轉(zhuǎn)化為-對應的式(I/b)一元或二元酸-式(I)化合物的特例 -或?qū)氖?I/c)酰胺 其中R1、R3和n是如式(I)所定義的，R”2代表可選被一個或兩個直鏈或支鏈(C1-C6)烷基取代的氨基，將該式(I/a)、(I/b)和(I/c)化合物如果必要的話，按照常規(guī)的純化工藝純化，合適的話分離成它們的異構(gòu)體，且如果需要的話，轉(zhuǎn)化為與可藥用酸或堿的加成鹽。
優(yōu)選的本發(fā)明化合物是其中R1代表甲基，R2代表羥基，R3代表芐基、嘧啶基、優(yōu)選被甲氧基取代的苯基或氫原子的那些。
n值優(yōu)選為1至7。n尤其是6。
優(yōu)選的本發(fā)明化合物是-7-{6-[(4-芐基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}庚酸及其加成鹽，-7-{6-{[4-(嘧啶-2-基)-1-哌嗪基]甲基}-2，3-二甲氧基苯氧基}庚酸及其加成鹽，-4-{6-[(哌嗪-1-基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}丁酸及其加成鹽，-7-{6-[(4-(2-甲氧基苯基)-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}庚酸及其加成鹽，-4-{6-[(4-(2-甲氧基苯基)-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}丁酸及其加成鹽。
本發(fā)明還涉及藥物組合物，包含作為活性成分的至少一種式(I)化合物，單獨或者與一種或多種惰性無毒賦形劑或載體組合。
在根據(jù)本發(fā)明的藥物組合物中，尤其可以提到適合于口服、腸胃外、鼻、皮膚給藥的片劑或糖錠劑、舌下片、明膠膠囊劑、錠劑、栓劑、霜劑、軟膏劑、皮膚凝膠劑等。
有用的劑量因患者的年齡與體重、障礙的性質(zhì)與嚴重性和給藥的途徑而異，并且可以是口服、鼻、直腸或腸胃外給藥。一般地，用于治療的單位劑量為0.1至500mg/24小時，分1至3次給藥。
下列實施例闡述本發(fā)明但決不限制發(fā)明。
所用原料是已知產(chǎn)物，或者按照已知工藝制備。
實施例所述化合物的結(jié)構(gòu)是按照常用的分光光度技術(shù)(紅外、NMR、質(zhì)譜等)測定的。
實施例17-{6-[(4-芐基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}-庚酸乙酯二鹽酸鹽在冷卻至0℃的反應釜內(nèi)，將2.2g 60％氫化鈉懸浮在250ml無水四氫呋喃中。在室溫下向前述混合物中滴加17.1g 6-[(4-芐基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯酚的150ml無水THF溶液，然后是14.6ml 7-溴庚酸乙酯的50ml無水THF溶液。將反應混合物在回流下加熱15天，然后在部分真空下濃縮至干。將粗殘余物溶于二乙醚，濾出在0℃下冷卻12小時后所得沉淀，然后用冷二乙醚(4℃)洗滌。將醚溶液在部分真空下濃縮至干，得到粗殘余物，經(jīng)過二氧化硅柱色譜法純化，用二氯甲烷/甲醇(98/2至90/10)梯度洗脫，得到預期產(chǎn)物的堿形式，轉(zhuǎn)化為對應的二鹽酸鹽。
熔點180℃元素微分析C％ H％ N％計算值60.947.764.90實測值60.687.725.00實施例27-{6-[(4-芐基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}-庚酸二鹽酸鹽將10g實施例1所得化合物加入到含有4g氫氧化鈉的250ml乙醇溶液中。使全部混合物維持6小時，不攪拌。蒸發(fā)除去溶劑后，殘余物經(jīng)過二氧化硅柱色譜法純化，用二氯甲烷/甲醇(95/5至0/100)梯度洗脫。得到預期產(chǎn)物的堿形式，轉(zhuǎn)化為對應的二鹽酸鹽。
熔點190℃元素微分析C％ H％ N％計算值59.667.425.15實測值59.067.675.26
實施例3{6-[(4-芐基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}乙酸乙酯二鹽酸鹽用氯乙酸乙酯代替7-溴庚酸乙酯，按照實施例1所述方法得到預期產(chǎn)物。
熔點162℃元素微分析C％ H％ N％計算值57.496.835.59實測值57.626.875.62實施例4{6-[(4-芐基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}乙酸二鹽酸鹽從實施例3所述化合物開始，按照實施例2所述方法得到預期產(chǎn)物。
熔點175℃元素微分析C％ H％ N％計算值55.826.395.92實測值55.316.375.86實施例54-{6-[(4-芐基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}丁酸乙酯二鹽酸鹽用4-溴丁酸乙酯代替7-溴庚酸乙酯，按照實施例1所述方法得到預期產(chǎn)物。
熔點164℃元素微分析C％ H％ N％計算值58.987.235.29實測值59.327.185.06實施例64-{6-[(4-芐基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}丁酸二鹽酸鹽從實施例5所述化合物開始，按照實施例2所述方法得到預期產(chǎn)物。
熔點200℃元素微分析C％ H％ N％計算值57.496.835.59實測值57.487.005.61實施例78-{6-[(4-芐基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}辛酸乙酯二鹽酸鹽用8-溴辛酸乙酯代替7-溴庚酸乙酯，按照實施例1所述方法得到預期產(chǎn)物。
熔點177℃元素微分析C％ H％ N％計算值61.537.92 4.78實測值61.407.92 4.79實施例88-{6-[(4-芐基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}辛酸二鹽酸鹽從實施例7所述化合物開始，按照實施例2所述方法得到預期產(chǎn)物。
熔點180℃元素微分析C％ H％N％計算值60.327.595.02實測值60.127.585.04實施例910-{6-[(4-芐基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}癸酸甲酯二鹽酸鹽用10-溴癸酸甲酯代替7-溴庚酸乙酯，按照實施例1所述方法得到預期產(chǎn)物。
熔點145℃元素微分析C％H％ N％
計算值 62.098.07 4.67實測值 62.158.17 4.67實施例1010-{6-[(4-芐基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}癸酸二鹽酸鹽從實施例9所述化合物開始，按照實施例2所述方法得到預期產(chǎn)物。
熔點156℃元素微分析C％H％N％計算值 61.53 7.92 4.78實測值 61.32 8.06 4.90實施例1111-{6-[(4-芐基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}十一烷酸甲酯二鹽酸鹽用11-溴十一烷酸甲酯代替7-溴庚酸乙酯，按照實施例1所述方法得到預期產(chǎn)物。
熔點177℃元素微分析C％H％ N％計算值 62.63 8.21 4.57實測值 61.97 8.27 4.81實施例1211-{6-[(4-芐基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}十一烷酸二鹽酸鹽從實施例11所述化合物開始，按照實施例2所述方法得到預期產(chǎn)物。
熔點185℃元素微分析C％ H％ N％計算值62.09 8.07 4.67實測值61.97 8.06 4.71實施例137-{6-{[4-(嘧啶-2-基)-1-哌嗪基]甲基}-2，3-二甲氧基苯氧基}庚酸乙酯二鹽酸鹽用6-{[4-(嘧啶-2-基)-1-哌嗪基]甲基}-2，3-二甲氧基苯酚代替6-[(4-芐基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯酚，按照實施例1所述方法得到預期產(chǎn)物。
熔點128℃元素微分析C％ H％ N％計算值55.81 7.2110.01實測值56.11 7.409.96實施例147-{6-{[4-(嘧啶-2-基)-1-哌嗪基]甲基}-2，3-二甲氧基苯氧基}庚酸二鹽酸鹽從實施例13所述化合物開始，按照實施例2所述方法得到預期產(chǎn)物。
熔點115℃元素微分析C％H％N％計算值54.246.8310.54實測值54.336.9010.63實施例157-{6-[(哌嗪-1-基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}庚酸乙酯二鹽酸鹽用6-[(4-叔丁氧羰基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯酚代替6-[(4-芐基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯酚，按照實施例1所述方法得到預期產(chǎn)物。
實施例167-{6-[(哌嗪-1-基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}庚酸二鹽酸鹽從實施例15所述化合物開始，按照實施例2所述方法得到預期產(chǎn)物。
熔點160℃元素微分析C％H％ N％計算值52.987.566.18實測值53.067.496.28實施例177-{6-[(4-苯基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}庚酸乙酯二鹽酸鹽用6-{[(4-苯基)-1-哌嗪基]甲基}-2，3-二甲氧基苯酚代替6-[(4-芐基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯酚，按照實施例1所述方法得到預期產(chǎn)物。
實施例187-{6-[(4-苯基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}庚酸二鹽酸鹽從實施例17所述化合物開始，按照實施例2所述方法得到預期產(chǎn)物。
熔點132℃元素微分析C％H％N％計算值58.987.23 5.29實測值58.967.32 5.25實施例197-{6-[(4-環(huán)己基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}庚酸乙酯二鹽酸鹽用6-[(4-環(huán)己基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯酚代替6-[(4-芐基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯酚，按照實施例1所述方法得到預期產(chǎn)物。
實施例207-{6-[(4-環(huán)己基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}庚酸二鹽酸鹽從實施例19所述化合物開始，按照實施例2所述方法得到預期產(chǎn)物。
熔點182℃元素微分析C％ H％N％計算值58.318.28 5.23實測值57.928.41 5.24實施例217-{6-[(4-正庚基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}庚酸乙酯二鹽酸鹽用6-[(4-正庚基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯酚代替6-[(4-芐基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯酚，按照實施例1所述方法得到預期產(chǎn)物。
實施例227-{6-[(4-正庚基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}庚酸二鹽酸鹽從實施例21所述化合物開始，按照實施例2所述方法得到預期產(chǎn)物。
熔點152℃
元素微分析C％ H％ N％計算值58.79 8.775.08實測值58.84 8.804.87實施例237-{6-[(4-環(huán)丙基甲基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二-甲氧基苯氧基}庚酸乙酯二鹽酸鹽用6-[(4-環(huán)丙基甲基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯酚代替6-[(4-芐基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯酚，按照實施例1所述方法得到預期產(chǎn)物。
實施例247-{6-[(4-環(huán)丙基甲基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}庚酸二鹽酸鹽從實施例23所述化合物開始，按照實施例2所述方法得到預期產(chǎn)物。
熔點170℃元素微分析C％ H％ N％計算值58.48 8.105.68實測值58.20 8.115.53實施例255-{6-[(4-芐基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}戊酸乙酯二鹽酸鹽用5-溴戊酸乙酯代替7-溴庚酸乙酯，按照實施例1所述方法得到預期產(chǎn)物。
實施例265-{6-[(4-芐基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}戊酸二鹽酸鹽從實施例25所述化合物開始，按照實施例2所述方法得到預期產(chǎn)物。
熔點181℃元素微分析C％ H％ N％計算值58.257.045.43實測值58.287.075.47實施例276-{6-[(4-芐基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}己酸乙酯二鹽酸鹽用6-溴己酸乙酯代替7-溴庚酸乙酯，按照實施例1所述方法得到預期產(chǎn)物。
實施例286-{6-[(4-芐基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}己酸二鹽酸鹽從實施例27所述化合物開始，按照實施例2所述方法得到預期產(chǎn)物。
熔點173℃元素微分析C％ H％ N％計算值58.987.235.29實測值59.057.335.36實施例294-{6-[(哌嗪-1-基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}丁酸乙酯二鹽酸鹽用6-[(4-叔丁氧羰基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯酚代替6-[(4-芐基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯酚，用4-溴丁酸乙酯代替7-溴庚酸乙酯，按照實施例1所述方法得到預期產(chǎn)物。
實施例304-{6-[(哌嗪-1-基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}丁酸二鹽酸鹽從實施例29所述化合物開始，按照實施例2所述方法得到預期產(chǎn)物。
熔點141℃元素微分析C％ H％ N％計算值49.646.866.81實測值49.246.915.81實施例314-{6-[(4-苯基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}丁酸乙酯二鹽酸鹽用6-[(4-苯基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯酚代替6-[(4-芐基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯酚，用4-溴丁酸乙酯代替7-溴庚酸乙酯，按照實施例1所述方法得到預期產(chǎn)物。
實施例324-{6-[(4-苯基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}丁酸二鹽酸鹽從實施例31所述化合物開始，按照實施例2所述方法得到預期產(chǎn)物。
熔點129℃元素微分析C％ H％ N％計算值56.686.625.75實測值56.686.755.81實施例337-{6-[(4-(2-甲氧基苯基)-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}庚酸乙酯二鹽酸鹽用6-{[4-(2-甲氧基苯基)-1-哌嗪基]甲基}-2，3-二甲氧基苯酚代替6-[(4-芐基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯酚，按照實施例1所述方法得到預期產(chǎn)物。
實施例347-{6-[(4-(2-甲氧基苯基)-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}庚酸二鹽酸鹽從實施例33所述化合物開始，按照實施例2所述方法得到預期產(chǎn)物。
熔點141℃元素微分析C％ H％ N％計算值57.967.215.01實測值57.707.225.02實施例354-{6-[(4-(2-甲氧基苯基)-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}丁酸乙酯二鹽酸鹽用6-[(4-(2-甲氧基苯基)-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯酚代替6-[(4-芐基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯酚，用4-溴丁酸乙酯代替7-溴庚酸乙酯，按照實施例1所述方法得到預期產(chǎn)物。
實施例364-{6-[(4-(2-甲氧基苯基)-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}丁酸二鹽酸鹽從實施例35所述化合物開始，按照實施例2所述方法得到預期產(chǎn)物。
熔點153℃元素微分析C％ H％ N％計算值55.716.625.41實測值55.836.625.37實施例374-{6-[(4-(嘧啶-2-基)-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}丁酸乙酯二鹽酸鹽用6-[(4-(嘧啶-2-基)-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯酚代替6-[(4-芐基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯酚，用4-溴丁酸乙酯代替7-溴庚酸乙酯，按照實施例1所述方法得到預期產(chǎn)物。
實施例384-{6-[(4-(2-嘧啶-2-基)-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}丁酸二鹽酸鹽從實施例37所述化合物開始，按照實施例2所述方法得到預期產(chǎn)物。
熔點174℃元素微分析C％ H％ N％計算值51.546.1811.45實測值51.955.8811.41實施例397-{6-[(4-(4-氯芐基)-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}庚酸乙酯二鹽酸鹽用6-{[4-(4-氯芐基)-1-哌嗪基]甲基}-2，3-二甲氧基苯酚代替6-[(4-芐基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯酚，按照實施例1所述方法得到預期產(chǎn)物。
實施例407-{6-[(4-(4-氯苯基)-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}庚酸二鹽酸鹽從實施例39所述化合物開始，按照實施例2所述方法得到預期產(chǎn)物。
熔點187℃元素微分析C％ H％ N％計算值56.116.80 4.85實測值55.986.86 5.03
實施例414-{6-[(4-(4-氯苯基)-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}丁酸乙酯二鹽酸鹽用6-[(4-(4-氯芐基)-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯酚代替6-[(4-芐基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯酚，用4-溴丁酸乙酯代替7-溴庚酸乙酯，按照實施例1所述方法得到預期產(chǎn)物。
實施例424-{6-[(4-(4-氯苯基)-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}丁酸二鹽酸鹽從實施例41所述化合物開始，按照實施例2所述方法得到預期產(chǎn)物。
實施例434-{6-[(4-環(huán)己基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}丁酸乙酯二鹽酸鹽用6-[(4-環(huán)己基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯酚代替6-[(4-芐基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯酚，用4-溴丁酸乙酯代替7-溴庚酸乙酯，按照實施例1所述方法得到預期產(chǎn)物。
實施例444-{6-[(4-環(huán)己基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}丁酸二鹽酸鹽從實施例43所述化合物開始，按照實施例2所述方法得到預期產(chǎn)物。
熔點211℃元素微分析C％ H％ N％計算值55.987.765.68實測值55.747.705.70實施例454-{6-[(4-正庚基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}丁酸乙酯二鹽酸鹽用6-[(4-正庚基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯酚代替6-[(4-芐基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯酚，用4-溴丁酸乙酯代替7-溴庚酸乙酯，按照實施例1所述方法得到預期產(chǎn)物。
實施例464-{6-[(4-正庚基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}丁酸二鹽酸鹽從實施例45所述化合物開始，按照實施例2所述方法得到預期產(chǎn)物。
實施例474-{6-[(4-環(huán)丙基甲基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}丁酸乙酯二鹽酸鹽用6-[(4-環(huán)丙基甲基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯酚代替6-[(4-芐基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯酚，用4-溴丁酸乙酯代替7-溴庚酸乙酯，按照實施例1所述方法得到預期產(chǎn)物。
實施例484-{6-[(4-環(huán)丙基甲基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}丁酸二鹽酸鹽從實施例47所述化合物開始，按照實施例2所述方法得到預期產(chǎn)物。
實施例493-{6-[(4-芐基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}丙酸乙酯二鹽酸鹽用3-溴丙酸乙酯代替7-溴庚酸乙酯，按照實施例1所述方法得到預期產(chǎn)物。
實施例503-{6-[(4-芐基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}丙酸二鹽酸鹽從實施例49所述化合物開始，按照實施例2所述方法得到預期產(chǎn)物。
實施例517-{6-[(4-(2，6-二吡咯烷基-嘧啶-4-基)-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}庚酸乙酯四鹽酸鹽用6-{[4-(2，6-二吡咯烷基-嘧啶-4-基)-1-哌嗪基]甲基}-2，3-二甲氧基苯酚代替6-[(4-芐基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯酚，按照實施例1所述方法得到預期產(chǎn)物。
實施例527-{6-[(4-(2，6-二吡咯烷基-嘧啶-4-基)-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}庚酸四鹽酸鹽從實施例51所述化合物開始，按照實施例2所述方法得到預期產(chǎn)物。
實施例534-{6-[(4-(2，6-二吡咯烷基-嘧啶-4-基)-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}丁酸乙酯四鹽酸鹽用6-{[4-(2，6-二吡咯烷基-嘧啶-4-基)-1-哌嗪基]甲基}-2，3-二甲氧基苯酚代替6-[(4-芐基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯酚，用4-溴丁酸乙酯代替7-溴庚酸乙酯，按照實施例1所述方法得到預期產(chǎn)物。
實施例544-{6-[(4-(2，6-二吡咯烷基-嘧啶-4-基)-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}丁酸四鹽酸鹽從實施例53所述化合物開始，按照實施例2所述方法得到預期產(chǎn)物。
實施例557-{6-[(4-正-(6-乙氧羰基)己基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}庚酸乙酯二鹽酸鹽用6-{[4-正-(6-乙氧羰基)己基-1-哌嗪基]甲基}-2，3-二甲氧基苯酚代替6-[(4-芐基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯酚，按照實施例1所述方法得到預期產(chǎn)物。
實施例567-{6-[(4-正-(6-羧基)己基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}庚酸二鹽酸鹽從實施例55所述化合物開始，按照實施例2所述方法得到預期產(chǎn)物。
實施例574-{6-[(4-(3-乙氧羰基)丙基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}丁酸乙酯二鹽酸鹽用6-{[4-(3-乙氧羰基)丙基-1-哌嗪基]甲基}-2，3-二甲氧基苯酚代替6-[(4-芐基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯酚，用4-溴丁酸乙酯代替7-溴庚酸乙酯，按照實施例1所述方法得到預期產(chǎn)物。
實施例584-{6-[(4-(3-羧基)丙基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}丁酸二鹽酸鹽從實施例57所述化合物開始，按照實施例2所述方法得到預期產(chǎn)物。
實施例597-{6-[(4-(3-乙氧羰基)丙基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}庚酸乙酯二鹽酸鹽用6-{[4-(3-乙氧羰基)丙基-1-哌嗪基]甲基}-2，3-二甲氧基苯酚代替6-[(4-芐基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯酚，按照實施例1所述方法得到預期產(chǎn)物。
實施例607-{6-[(4-(3-羧基)丙基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}庚酸二鹽酸鹽從實施例59所述化合物開始，按照實施例2所述方法得到預期產(chǎn)物。
實施例614-{6-[(4-正-(6-乙氧羰基)己基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}丁酸乙酯二鹽酸鹽用6-{[4-正-(6-乙氧羰基)己基-1-哌嗪基]甲基}-2，3-二甲氧基苯酚代替6-[(4-芐基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯酚，用4-溴丁酸乙酯代替7-溴庚酸乙酯，按照實施例1所述方法得到預期產(chǎn)物。
實施例624-{6-[(4-正-(6-羧基)己基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}丁酸二鹽酸鹽從實施例61所述化合物開始，按照實施例2所述方法得到預期產(chǎn)物。
實施例637-{6-[(4-芐基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}-N，N-二乙基庚酰胺二鹽酸鹽將4.95g實施例2所述化合物溶于100ml二氯甲烷。加入2.17g二環(huán)己基碳二亞胺，然后是2.1ml N，N-二乙胺和1.28g N，N-二甲氨基吡啶。攪拌24小時后，將溶液過濾，然后濃縮至干，所得粗殘余物經(jīng)過二氧化硅柱色譜法純化，用乙酸乙酯/甲醇(100/0至80/20)梯度洗脫，得到預期產(chǎn)物的堿形式，轉(zhuǎn)化為對應的二鹽酸鹽。
實施例644-{6-[(4-芐基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}-N，N-二乙基丁酰胺二鹽酸鹽從實施例6所述化合物開始，按照實施例63所述方法得到預期產(chǎn)物。
熔點198℃元素微分析C％ H％ N％計算值60.417.797.55實測值60.177.797.50實施例653-{6-[(4-芐基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}丙酰胺二鹽酸鹽從實施例50所述化合物得到預期產(chǎn)物，是在含氨介質(zhì)中反應的。
本發(fā)明化合物的藥理學研究A本發(fā)明化合物抗缺血活性的研究所用模型是由管腔內(nèi)閉合產(chǎn)生的暫時病灶性腦缺血模型，它模擬人類栓子性腦血管意外。梗塞的位置是皮質(zhì)和皮質(zhì)下(R.Bordet等，J CerebBlood Flow Metab.(腦血流與代謝雜志)，20，2000，1190-1196和1999，19，1309-1345)。該模型是這樣構(gòu)建的，在成年雄性Wistar大鼠中，單側(cè)閉合中頸動脈1小時，然后再灌注23小時。本試驗的目的是研究本發(fā)明化合物的抗缺血作用。
為了手術(shù)，用300mg/kg水合氯醛麻醉動物。在手術(shù)期間監(jiān)測體溫，利用溫控式加熱毯維持在37℃。
主要程序是通過動脈口的管腔內(nèi)閉合，中斷向右中腦動脈(MCA)的血液循環(huán)。60分鐘后，停止閉合，將動物放回籠中。24小時后，在麻醉下處死動物。迅速取出它們的腦，冷凍，通過三維立體定位局部解剖，在低溫恒溫器內(nèi)得到12片50μm厚的切片，間隔1μm。切片用速甲酚紫(rapidcresyl violet)染色。腦切片的未染色區(qū)被定義為梗塞區(qū)。利用圖象分析程序分別計算每片切片的未經(jīng)校正的梗塞區(qū)和總半球區(qū)。為了補償腦水腫的后果，計算經(jīng)過校正的總梗塞體積。
在閉合前3分鐘將產(chǎn)物靜脈內(nèi)給藥，劑量為1mg/kg。
該模型中，本發(fā)明化合物、尤其是實施例2化合物顯著減少皮質(zhì)和紋狀體的梗塞尺寸，說明具有神經(jīng)保護作用。B星形膠質(zhì)細胞培養(yǎng)物缺氧實驗方案按照Booher和Sensenbrenner所述技術(shù)(Neurobiology(神經(jīng)生物學)，1972，2，97-105)從新生大鼠獲得星形膠質(zhì)細胞培養(yǎng)物。
按照Plateel等所述缺氧模型(J.Neurochem.(神經(jīng)化學雜志)，1995，65，2138-2145)，培養(yǎng)三至六周后使用。為了重新組成ATP儲備，在缺氧開始前24小時改變培養(yǎng)基。加入已經(jīng)脫除O2并且含有給定濃度供試分子的培養(yǎng)基后，在厭氧培養(yǎng)室內(nèi)缺氧生存24小時。利用冷光測定ATP濃度，以皮摩爾ATP/毫克蛋白質(zhì)表示。
該模型中，對于從27％至79％的缺氧程度，實施例2化合物能夠恢復ATP從35％至87％，而曲美他嗪對該參數(shù)沒有作用。在1μM下觀察到最大作用。C本發(fā)明化合物對皮質(zhì)和白質(zhì)的神經(jīng)保護作用所用模型是影響皮質(zhì)神經(jīng)元和在下白質(zhì)的小鼠神經(jīng)變性模型(S.L.Tahraoui等，Brain Pathol.(腦病理學)，2001，11，56-71)。該模型基于新生小鼠腦內(nèi)注射S-溴-尿嘧啶丙氨酸或鵝膏蕈氨酸鹽，前者是一種作用于AMPA-紅藻氨酸鹽受體的谷氨酸能激動劑，后者是一種NMDA-型受體激動劑。
所有注射都是在上午10.00與13.00之間進行的。預先麻醉動物，在操作期間保持在加熱燈下。每個實驗組包含5至12只雌雄瑞士小鼠，來自至少2只不同的母鼠。出生后第5天(P5)，利用安裝在50μl注射器上的25G計量針頭腦內(nèi)注射10μg鵝膏蕈氨酸鹽或15μg S-溴-尿嘧啶丙氨酸，注射器連接于校準的裝置，每撳釋放1μl藥團。將針頭插入右半球額頂區(qū)皮膚平面下2mm(人字縫前2mm和中線外2mm)。給以兩個1μl藥團(1μl進入室周白質(zhì)，1μl進入皮質(zhì))。兩次間隔30秒鐘，其間針頭保持固定，目的是使產(chǎn)物擴散。該興奮毒性侵襲后立即腹膜內(nèi)給以供試化合物(3、10或30mg/kg)或載體(注射體積＝5μl)。5天后(P10)通過斷頭術(shù)處死動物，立即取出它們的腦，固定在福爾馬林中，然后封裝在石蠟中。對所有的腦制備系列15μm冠狀切片，用甲酚紫染色，從而可以精確和可再現(xiàn)的方式確定皮質(zhì)與白質(zhì)組織學損傷的前-后軸。由兩名對實驗組不了解的獨立觀察人員測定組織學損傷的尺寸。結(jié)果以平均數(shù)表示。
該模型中，實施例2的化合物尤其減少白質(zhì)和皮質(zhì)中的損傷尺寸，說明具有重要的神經(jīng)保護作用。作為對比的曲美他嗪(TMZ)具有非常低的神經(jīng)保護作用。
D代謝穩(wěn)定性用于估計代謝穩(wěn)定性的模型是在離體大鼠和人微粒體中開發(fā)和驗證的(M.Bertrand等，European Journal of Pharmaceutical Sciences(歐洲藥物科學雜志)，2000，Vol 11，Suppl.2，S61-S72)。
代謝生物利用度(MF％)的預測基于代謝穩(wěn)定性的體外測量，利用肝微粒體并假定完全吸收。簡言之，在大鼠與人肝微粒體(0.33mg蛋白質(zhì)/ml)的存在下，將10-7M產(chǎn)物溫育0、5、15、30和60分鐘。在每個時間點，通過LC-MS-MS測量未改變的產(chǎn)物的量。體外固有廓清率(Clint)相當于未改變的產(chǎn)物殘留濃度對溫育時間的曲線(LN線性化之后)。然后利用因數(shù)0.045mg蛋白質(zhì)/kg肝和大鼠肝重11g和人肝重1.2kg，將該體外固有廓清率折算為全生物體內(nèi)固有廓清率(vivoClint)。利用靜脈平衡模型實現(xiàn)體內(nèi)固有廓清率向肝廓清率(HepCl)的轉(zhuǎn)化(HepCl＝vivoClint*HBF/(vivoClint+HBF)，其中HBF(肝血流)對大鼠相當于22ml/min，對人相當于1500ml/min。然后利用下式從肝萃取系數(shù)推導MF％MF％＝1-HepCl/HBF該方法在體外與體內(nèi)數(shù)據(jù)之間獲得良好的相關(guān)性。
該模型中，本發(fā)明化合物證明具有非常好的代謝穩(wěn)定性。E抗編程性細胞死亡作用通過加入過氧化氫(H2O2)誘發(fā)編程性細胞死亡而進行對心肌細胞原代培養(yǎng)物的抗編程性細胞死亡作用的體外研究。所產(chǎn)生的自由基誘發(fā)編程性細胞死亡。這類似于在缺血-再灌注中所觀察到的情形(R.Von Harsdorf，Circulation(循環(huán))，99，2934-2941)。
從新生大鼠心臟中分離心肌細胞，按35000個細胞/cm2的密度鋪開。加入H2O2(0.075mmol/升)達30分鐘誘發(fā)編程性細胞死亡過程。然后將心肌細胞置于培養(yǎng)基中達24小時。通過各種技術(shù)使編程性細胞死亡的細胞可見，例如發(fā)生在編程性細胞死亡過程中的基因組DNA的片段化。如下兩種技術(shù)所示(見上參考文獻)1 TUNEL試驗能夠標記表現(xiàn)其DNA片段化的細胞核。
2 通過“DNA梯形化”技術(shù)證明DNA的片段化。通過瓊脂糖凝膠電泳檢測基因組DNA的180bp特征性片段。
磷脂酰絲氨酸(PS)從細胞核膜內(nèi)部遷移到外部(外表化)是編程性細胞死亡的早期癥狀。利用膜聯(lián)蛋白-V-FITC(異硫氰酸熒光素)通過熒光標記使其可見，通過與細胞總數(shù)對比進行量化。
該體外模型中，實施例2化合物保護心肌細胞免受編程性細胞死亡。該作用自身表現(xiàn)在經(jīng)歷編程性細胞死亡的細胞百分率減少和細胞存活率增加。所以，該產(chǎn)物是一種心保護產(chǎn)物。F對海馬CA1與CA3區(qū)的神經(jīng)保護作用紅藻氨酸是現(xiàn)有最有力的外源性興奮毒素之一，它誘發(fā)急性或亞急性癲癇樣障礙的能力證明了這一點。所觀察到的與紅藻氨酸給藥有關(guān)的組織病理學改變不同于由損傷導致的腦缺血，該損傷首先從海馬的CA1區(qū)發(fā)展到CA3區(qū)(C.Montecot等，Neuroscience(神經(jīng)科學)84，791-800)。目的是研究對主要在海馬CA3區(qū)誘發(fā)的損傷的保護作用，而血液循環(huán)沒有減少。
將紅藻氨酸對清醒大鼠腹膜內(nèi)給藥，劑量為12mg/kg。然后觀察動物約2小時，在此期間，在一段潛伏期后出現(xiàn)癲癇樣驚厥。在2小時結(jié)束時，給以10mg/kg地西泮終止驚厥。7天后處死動物，分離它們的腦，制備8片15μm厚的橫切片，間隔150μm。由兩名對實驗組不了解的獨立觀察人員通過對比顯微鏡檢查分析這些切片。根據(jù)神經(jīng)元損傷的嚴重性給出0至3的評分。每個半球的評分相加，得到損傷評分。
在紅藻氨酸給藥前3分鐘，將產(chǎn)物通過腹膜內(nèi)途徑給藥，劑量為20mg/kg。
該模型中，實施例2化合物的單一注射保護海馬CA1與CA3區(qū)神經(jīng)元免受由紅藻氨酸誘發(fā)的損傷，因而證明具有強大的神經(jīng)保護作用。藥物組合物制備1000片片劑的配方，每片含有10mg劑量實施例2化合物................................................10g羥丙基纖維素..................................................2g小麥淀粉.....................................................10g乳糖........................................................100g硬脂酸鎂......................................................3g滑石..........................................................3g
權(quán)利要求
1.式(I)化合物 其中R1代表直鏈或支鏈(C1-C6)烷基，R2代表羥基、直鏈或支鏈(C1-C6)烷氧基或氨基(可選地被一個或兩個直鏈或支鏈(C1-C6)烷基取代)，n代表1至12的整數(shù)，含1和12，R3代表-氫原子，-直鏈或支鏈(C1-C12)烷基，可選地被苯基(本身可選地被一個或多個相同或不同的取代基取代，取代基選自鹵原子和直鏈或支鏈(C1-C6)烷基、直鏈或支鏈(C1-C6)烷氧基、羥基和三鹵代甲基)、(C3-C7)環(huán)烷基、羧基或(C1-C6)烷氧基-羰基取代，-(C3-C7)環(huán)烷基，-嘧啶基，可選地被一個或兩個吡咯烷基取代，或-苯基，可選地被一個或多個相同或不同的取代基取代，取代基選自鹵原子和直鏈或支鏈(C1-C6)烷基、直鏈或支鏈(C1-C6)烷氧基、羥基和三鹵代甲基，其旋光異構(gòu)體及其與可藥用酸或堿的加成鹽。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的式(I)化合物，其中R1代表甲基。
3.根據(jù)權(quán)利要求1的式(I)化合物，其中R3是被苯基取代的烷基，優(yōu)選芐基，嘧啶基、優(yōu)選被甲氧基取代的苯基或氫原子。
4.根據(jù)權(quán)利要求1的式(I)化合物，其中n是1至7的整數(shù)。
5.根據(jù)權(quán)利要求4的式(I)化合物，其中n是6。
6.根據(jù)權(quán)利要求1的式(I)化合物，其中R2代表羥基。
7.根據(jù)權(quán)利要求1的式(I)化合物，它是7-{6-[(4-芐基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}庚酸及其加成鹽。
8.根據(jù)權(quán)利要求1的式(I)化合物，它是7-{6-{[4-(嘧啶-2-基)-1-哌嗪基]甲基}-2，3-二甲氧基苯氧基}庚酸、4-{6-[(哌嗪-1-基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}丁酸、7-{6-[(4-(2-甲氧基苯基)-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}庚酸、4-{6-[(4-(2-甲氧基苯基)-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}丁酸及其加成鹽。
9.制備根據(jù)權(quán)利要求1的式(I)化合物的方法，其特征在于使用式(II)化合物作為原料 其中R1是如式(I)所定義的，使式(II)化合物在甲醛的存在下與式(III)的取代哌嗪反應 其中R’3是如R3所定義的，被羧基取代的烷基除外，得到式(IV)化合物 其中R1和R’3是如上所定義的，使式(IV)化合物與式(V)化合物反應X-(CH2)n-COR’2(V)其中X代表鹵原子，R’2代表直鏈或支鏈(C1-C6)烷氧基，得到式(I/a)化合物一式(I)化合物的特例 其中R1、R’2、R’3和n是如上所定義的，如果需要的話，將該式(I/a)化合物轉(zhuǎn)化為-對應的式(I/b)一元或二元酸-式(I)化合物的特例 -或?qū)氖?I/c)酰胺 其中R1、R3和n是如式(I)所定義的，R”2代表可選被一個或兩個直鏈或支鏈(C1-C6)烷基取代的氨基，將該式(I/a)、(I/b)和(I/c)化合物如果必要的話，按照常規(guī)的純化工藝純化，合適的話分離成它們的異構(gòu)體，且如果需要的話，轉(zhuǎn)化為與可藥用酸或堿的加成鹽。
10.藥物組合物，包含根據(jù)權(quán)利要求1至8中任一項的化合物作為活性成分以及一種或多種惰性無毒的可藥用賦形劑或載體。
11.根據(jù)權(quán)利要求10的組合物，包含一種根據(jù)權(quán)利要求1至8中任一項的活性成分，用于在任意需要臨時中斷血液循環(huán)的手術(shù)干預之前，預防或治療急性與慢性細胞缺血、急性或慢性腦、心或外周缺血意外，無論隨后發(fā)生再灌注與否；用于治療慢性神經(jīng)變性疾??；和用于改善待移植器官的貯藏和再灌注后移植物的功能恢復。
全文摘要
本發(fā)明涉及式(I)化合物其中R
文檔編號A61P25/28GK1397554SQ0212418
公開日2003年2月19日 申請日期2002年7月16日 優(yōu)先權(quán)日2001年7月16日
發(fā)明者S·拉比達勒, J－P·蒂耶芒, B·特斯塔, R·切凱利, A·勒里丹, C·阿爾佩, M·斯佩丁, E·申克爾 申請人:瑟維爾實驗室