專利名稱：一種具有泌乳功能的藥物組合物及其制備方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種藥物及其制備方法，特別是涉及一種具有泌乳功能的藥物及其制備方法本發(fā)明目的是通過如下技術方案實現(xiàn)的王不留行100-150重量份通草100-150重量份熟地黃125-190重量份 當歸50-75重量份白芍80-125重量份 川芎36-56重量份益母草100-150重量份 天花粉100-150重量份以上八味，熟地黃，當歸，川芎用70-80％乙醇作溶劑，進行滲漉，滲漉液回收乙醇，濃縮備用；通草加水浸泡1-3小時，煎煮1-3小時，濾過，濾液加入王不留行、白芍、益母草中煎煮1-3次，每次1-2小時，濾過，濾液備用，天花粉用熱水溫浸1-3小時，濾過，濾液與上述各提取液合并，濃縮，靜置過夜，取上清液濃縮至清膏。加入制劑上可接受的輔料或賦型劑，制成臨床可接受的劑型，如片劑、膠囊、口服液體制劑、顆粒劑、煎膏劑等。
本發(fā)明藥物組合物制備的煎膏劑的質量控制方法包括鑒別和/或含量測定方法。其中鑒別方法可以選自下列鑒別方法中的一種或幾種1、取本發(fā)明煎膏劑50ml，加無水乙醇70ml，邊加邊攪拌，再攪拌8-12分鐘，靜置，傾取上層液蒸干，殘渣加飽和氯化鈉溶液20ml使溶解并轉移至分液漏斗中，用水飽和正丁醇提取2-4次，每次10-30ml，合并正丁醇液，用3-5％氨水溶液洗滌1-3次，每次10-30ml，再用飽和氯化鈉溶液洗滌2-4次，每次10-30ml，取正丁醇液蒸干，殘渣加甲醇15ml，超聲處理10-20分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取王不留行對照藥材5重量份，加60-90℃石油醚10-30ml，加熱回流1-1.5小時，濾過，濾渣揮干，加乙醇20-30ml，加熱回流20-35分鐘，放冷；濾過，濾液蒸干，殘渣加飽和氯化鈉溶液20-30ml使溶解并轉移至分液漏斗中，同法制成對照藥材溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5ul分別點于同一硅膠重量份薄層板上，以14-16∶38-41∶20-24∶8-11氯仿-醋酸乙酯--甲醇--水5～10℃以下放置10-12小時的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，在100-110℃加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；2、取本發(fā)明煎膏劑50ml，加無水乙醇70ml邊加邊攪拌，再攪拌8-12分鐘，靜置，傾取上層液，加乙醚25-35ml，靜置過夜，傾取上層液，蒸至近干，加無水乙醇7ml，乙醚3ml，超聲處理10-20分鐘，取上層液，蒸干殘渣加乙醇1ml溶解，作為供試品溶液；另取熟地黃對照藥材5重量份，切片，加乙醇18-22ml，加熱回流0.5-1小時，放冷，濾過濾液蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為對照藥材溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5ul，分別點于同一硅膠重量份薄層板上，以1-2∶1-2的60-90℃石油醚-醋酸乙醇為展開劑，展開，取出，晾干；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同的黃色斑點；3、取本發(fā)明煎膏劑8g，精密稱定，加水18-22ml充分攪拌使溶解，通過大孔吸附樹脂柱，濕法裝柱，內徑12-16mm，用水150-250ml洗脫，棄去水液，再用乙醇60-80ml洗脫，收集乙醇液，蒸干，殘渣加甲醇13-16ml，超聲處理11-20分鐘，濾過，濾液轉移至25ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，取上述溶液15ml，蒸干，殘渣加甲醇1-2ml使溶解，作為供試品溶液；另取芍藥苷對照品，加甲醇制成每1ml含2mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各4ul，分別點于同一硅膠重量份薄層板上，以38-42∶3-6∶8-12∶0.1-0.3氯仿-醋酸乙酯-甲醇-甲酸為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，熱風吹至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
4、取本發(fā)明煎膏劑50ml，加無水乙醇70ml邊加邊攪拌，再攪拌8-12分鐘，靜置，傾取上層液，加乙醚25-35ml，靜置過夜，傾取上層液，蒸至近干，加無水乙醇7ml，乙醚3ml，超聲處理8-12分鐘，取上層液，蒸干殘渣加乙醇1ml溶解，作為供試品溶液；另取瓜氨酸對照品，加稀乙醇制成每1ml含1m重量份的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液15μl，對照品溶液1μl，分別點于同一硅膠重量份薄層板上，以6-10∶1-2∶1-2∶2-4正丁醇-無水乙醇-冰醋酸-水為展開劑，展開，取出，晾干，噴以茚三酮試液，在100-110℃加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
本發(fā)明方法制備的煎膏劑的質量控制方法中含量測定方法為照高效液相色譜法測定，色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗，用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；24-26∶70-80甲醇--水為流動相；檢測波長為230nm；理論板數(shù)按芍藥苷計算應不低于3000；對照品溶液的制備，精密稱取芍藥苷對照品10mg，置50ml量瓶中、加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻；精密吸取5ml，置10ml量瓶中加甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得，每1ml含芍藥苷0.1mg。供試品溶液的制備，取本發(fā)明煎膏劑8g，精密稱定，加水20ml充分攪拌使溶解，通過大孔吸附樹脂柱，濕法裝柱，內徑12-16mm，用水150-250ml洗脫，棄去水液，再用乙醇60-80ml洗脫，收集乙醇液，蒸干，殘渣加甲醇12-16ml，超聲處理12-16分鐘，濾過，濾液轉移至25ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得；測定法，分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各10ul，注入液相色譜儀，測定，即得；本發(fā)明煎膏劑每1g含芍藥苷(C23H28O11)不得少于0.25mg。
本發(fā)明藥物組合物制備的煎膏劑(增乳膏)對實驗性泌乳不足的SD純系大鼠，給予增乳膏14-28g/kg灌胃3日，可使仔鼠吸奶量明顯增多，仔鼠體。重增長加速、小鼠灌胃10，20以及40g/kg增乳膏后，無論是實驗性泌乳不足或正常泌乳母鼠，血清催乳素分泌水平均有所提高，乳腺中高柱狀細胞增多，仔鼠生長速度加快，耐力提高。電子顯微鏡觀察結果表明，在實驗性缺奶母鼠，大劑量組增乳膏使腺垂體催乳素細胞體積增大，粗面內質網(wǎng)數(shù)量和芽現(xiàn)象增多。運輸小體較豐富。
下列實驗材料均適用于本說明書的動物實驗例。
1、受試藥物增乳膏(即增乳膏)，4g生藥/ml，由漳州市藥物研究所研制并提供，批號940202。滅吐靈(鹽酸甲氧氯普胺)，20mg/1ml，天津氨基酸公司人民制藥廠生產(chǎn)，批號930507。
2、動物SD純系大鼠，250-280g，購自上海田Sippr-BK實驗動物供應有限公司，清潔級合格證滬醫(yī)實動單項準字第65號；昆明種小鼠，26-30g，購自福建省衛(wèi)生防疫站實驗動物場。普通級合格證閩醫(yī)動單項準92001號。動物實驗室普通級合格證閩醫(yī)動條94007。實驗例1對實驗性泌乳泌不足大鼠仔鼠吸奶量及體重的影響取同日分娩且仔鼠數(shù)有少于8只/窩的SD純系大鼠30窩，剔棄多余仔鼠，使每窩哺育的仔鼠數(shù)均為8只供實驗，并隨機分為5組，每組6窩(仔鼠48只)。將母鼠與仔鼠分居6小時，用TG927C型單盤電光分析天平稱取各仔鼠做為基礎體重。接著將母鼠放歸原窩授乳1小時，同上法稱仔鼠體重。以二次體重之差值做為各仔鼠的吸乳量指標求給藥前組內均值及標準差。然后給各組母鼠腹腔注射(ip)己烯雌酚8mg/kg，隔日一次(q.o.d)共2次，并分別灌胃(ig)給予增乳膏7，14，28g/kg，陽性對照組ig滅吐靈10mg/kg，陰性對照組ig水11.21/kg，qd，連續(xù)3日，末次給藥后24小時，再測各仔鼠的體重和吸奶量，分別與給藥的比較，進行t檢驗，詳見表1和表2。
表1增乳膏對泌乳不足大鼠的仔鼠吸奶量的影響母鼠給藥情況 仔鼠吸奶量(mg/h，xSD)組別 母仔數(shù) 仔鼠數(shù)(ig，qd×3)給藥前給藥后1、 水11.2ml/kg 6 480.327±0.144 0.293±0.0982、 滅吐靈10mg/kg6 480.335±0.095 0.363±0.10**3、 增乳膏28g/kg 6 480.302±0.064 0.409±0.092***4、 增乳膏7g/kg 6 480.330±0.083 0.375±0.119**5、 增乳膏 6 480.321±0.075 0.331±0.088*P＜0.05，**P＜001，***P＜0.001與組1比較(下同)從表1可見，給藥前各組仔鼠每小時(h)吸奶量均值相近(P＞0.05)，注射己烯雌酚造成泌乳不足模型并給于不同的藥物處理后，各組仔鼠每小時吸奶量均值則不同，吸奶量從組1至組5分別變值是-10.4％，8.8％，35.43％，13.64％以及3.12％，結果表明，對泌乳不足SD系母鼠ig增乳膏14和28g/kg可顯著增加其泌乳量，大劑量組的療效超過陽性對照藥滅吐靈組(P2.3＜0.05)。
表2增乳膏對實驗性泌乳不足大鼠的仔鼠生長速度的影響母鼠給藥情況 仔鼠吸奶量(mg/h，x±SD)組別 仔鼠數(shù)(ig，qd×3)給藥前給藥后1、 水11.2ml/kg 488.026±0.938 3.48±0.7532、 滅吐靈10mg/kg487.994±1.24 3.861±0.381**3、 增乳膏28g/kg 488.218±0.722 3.886±0.713*4、 增乳膏14g/kg 488.103±0.883 3.61±0.6115、 增乳膏7g/kg 488.117±0.927 3.416±0.703表2提示，增乳膏對己烯雌酚誘發(fā)的泌乳不足SD大鼠哺育的幼鼠有促進生長作用，大劑量組仔鼠的增重率(11.64％)與陰性對照組比較差異有顯著意義(P＜0.05)。實驗例2對正常泌乳小鼠及其仔鼠的影響昆明種小鼠50窩，于產(chǎn)后第5日保留仔鼠數(shù)均為9只/窩，隨機取40窩分為5組，每組8窩，仔鼠72只。與母仔鼠分離6小時用扭力天稱取各仔鼠體重，分別給母鼠ig滅吐靈7mg/kg，增乳膏10，20，40g/kg，或者水20ml/kg，qd×7日。次日同法再稱仔鼠體重并測定各仔鼠游泳耐久性(表3)。采用放射免疫法測定(催乳素藥盒購自北方免疫試劑研究所)母鼠血清催乳素(PRL)水平(表4)并取乳腺活檢表3增乳膏對仔鼠生長速度及游泳耐久力的影響母乳給藥情況仔鼠體重(g，x±SD) 仔鼠游泳時間組別 仔鼠數(shù)(ig，pd×7) 基礎體重7日增重值 (秒，x±SD)1、 水20ml/kg 72 3.314±0.4372.60±0.2565.6±19.72、 滅吐靈7mg/kg72 3.151±0.41 2.768±0.39** 67.3±19.93、 增乳膏40g/kg72 3.153±0.5592.954±0.267*** 113.1±53.1***4、 增乳膏20g/kg72 3.117±0.3872.762±0.573 82.8±27.7***5、 增乳膏10/kg 72 3.131±0.5212.631±0.61 64.3±23.5從表3可以看出，對正常泌乳的昆明種母鼠所哺育的仔鼠，給母鼠由的增乳膏有一定的促進仔鼠生長、增強游泳耐力的作用，大劑量組與陰性對照組比較，上述二個指標的p值均小于0.001。
表4增乳膏對正常泌乳母鼠血清PR1水平的影響給藥情況 血清PRL水平 PRL組別 鼠數(shù)(ig，qd×7)(mg/ml，x±SD) 升高率(％) P值1、水20ml/kg 8 6.35±2.242、滅吐靈7mg/kg 8 7.82±2.41 23.15 ＞0.053、增乳膏40g/kg 8 11.36±2.58 78.90 ＜0.014、增乳膏20g/kg 8 9.25±3.30 45.67 ＜0.055、增乳膏10g/kg 8 7.31±3.41 15.12 ＞0.05表4提示，大、中量增乳膏能促進哺乳期母鼠分泌催乳素，其作用超過陽性對照藥滅吐靈(P2，3＜0.05)。
乳腺片(H.E染色)光鏡檢查結果，所有被檢小鼠的乳腺組織均呈哺乳期變化，小葉間纖維組織層菲??；甚至見不到纖維組織分隔。以分泌旺盛的乳腺高柱狀上皮細胞為指標，陰性對照組不超過40％，而增乳膏大劑量組乳腺的高柱狀上皮細胞占明顯多數(shù)，提示其乳汁分泌活動更活躍。實驗例3對實驗性泌乳不足小鼠及其仔鼠的影p向昆明種小鼠40窩，于分娩后第4日保留仔鼠數(shù)8只/窩，隨機分為5組，每組8窩。母鼠分別ip己烯雌酚11mg/kg，gd×3日，同時按表5所示ig增乳膏或對照藥，連續(xù)5日。末次給藥后次日，同前法測仔鼠體重增值，游泳耐力。母鼠血清PRL水平，乳腺活檢，同時觀察腺垂體催乳素細胞超微結構。結果見表5，6。
表5增乳膏對實驗性泌乳不足小鼠的仔鼠體重及耐力的影響母鼠給藥情況 仔鼠體重(g，x±SD) 仔鼠耐力(秒，組別 仔鼠數(shù)(ig，qd×5) 基礎值 5日增重值 x±SD)1、 水20ml/kg 642.792±0.572 1.412±0.452 74.8±17.02、 滅吐靈7mg/kg642.822±0.442 1.669±0.403** 84.0±17.5**3、 增乳膏40g/kg642.794±0.334 1.819±0.442***96.1±7.0***4、 增乳膏20g/kg642.851±0.542 1.650±0.222** 86.3±21.5**5、 增乳膏10g/kg642.796±0.611 1.420±0.344 79.8±18.1表5提示，增乳膏口服可使實驗性泌乳，不足母鼠哺育的仔鼠生長有較明顯加速，并增強其游泳耐久力。
表6增乳膏對實驗性泌乳不足小鼠血清PR1水平的影響給藥情況 血清PRL水平 PRL組別 鼠數(shù)(ig，qd×7) (mg/ml，x±SD)升高率(％)P值1、 水20ml/kg8 7.52±1.002、 滅吐靈7mg/kg 8 9.60±1.0727.66 ＜0.0013、 增乳膏40g/kg 8 9.41±1.9025.13 ＜0.054、 增乳膏20g/kg 8 8.55±2.2813.70 ＞0.055、 增乳膏10g/kg 8 7.76±1.963.19 ＞0.05從表6可見，增乳，保育膏對乙烯雌酚誘發(fā)的泌乳，不足母鼠有促進PRL釋放作用，大劑量組與陰性對照組比較，差異有顯著意義(P＜0.05)。
乳腺切片(H.E染色)光鏡檢查結果表明，大劑量組增乳膏明顯增加高柱狀細胞所占比例。腺垂體PR1細胞(醋酸鈉、構椽酸鉛染色)超薄切片電子顯微鏡觀察發(fā)現(xiàn)，與陰性對照組(G)比較，大劑量增乳膏組腺垂體PR1細胞體積較大，粗面內質網(wǎng)數(shù)量及芽生現(xiàn)象較多，運輸小泡較豐富，提示PRL細胞的機能較旺盛。實驗例4增乳膏對初產(chǎn)婦及缺乳初產(chǎn)婦催乳作用的臨床試驗診斷標準缺乳診斷標準產(chǎn)婦乳汁分泌減少成全無，無奶脹，檢查乳房不充盈，擠壓時無乳汁分泌或二少許；缺乳程度(1)輕度每日需補授1/3～＜1/2量的代乳品(或庫乳)；(2)中度每日需補授1/2～2/3量的代乳品(或庫乳)；(3)重度每日需補授2/3以上的代乳品(或庫乳)。
觀測指標催乳作用觀測指標，間接測量乳汁分泌量每日從上午8時至下午8時逐次測量喂乳前后嬰兒體重(用精確磅秤測量)，間接計算產(chǎn)婦12小時泌乳量。并按1g＝1ml換算；逐日計算補授乳量；檢測產(chǎn)后2小時內和出院時血清泌乳素，上午空腹抽血。
治療方法試驗組(包括擴大組) 增乳膏每次25ml，每日3次；飯后開水沖服。療程于產(chǎn)后當天開始服藥，連服3-5天，并于產(chǎn)后第二天開始觀測上述各項指標，連續(xù)觀測3天(催乳素檢測按規(guī)定時間)。缺乳初產(chǎn)婦就診時開始服藥，連服6天。對照組四物湯(膏)每次25ml，每日3次，飯后開水沖服。療程同試驗組；試驗組與對照組按1∶1隨機分配，肓法投藥。試驗期間停用一切具有催乳作用的中西藥物。
結果1、試驗組與對照組兩組一般情況對比(見表7)表7試驗組與對照組兩組一般情況對比例年齡 分娩過程 嬰兒情況 療程 缺乳程度數(shù)(歲)足月非足月非良好不良(天)輕中 重順產(chǎn)順產(chǎn)試驗組 26.63±2.79 50 0 50 0 4.70±0.51 \\\初產(chǎn)婦50對照組 26.84±2.50 50 0 50 0 4.98±0.62 \\\試驗組 27.80±3.02 9 6 15 0 5.2±0.9 861缺乳 15初產(chǎn)婦對照組 27.06±2.73 7 8 15 0 5.8±1.2 933
表7兩組資料經(jīng)統(tǒng)計學處理，P值均＞0.1提示兩組在年齡、分娩過程、嬰兒健康情況，療程和缺乳程度等方面基本相同或相似，有較好的可比性。
2、初產(chǎn)婦催乳作用的觀察(一)初產(chǎn)婦治療前后泌乳量和對嬰兒補授乳量的影響(見表8)表8初產(chǎn)婦治療前后泌乳量和對嬰兒補授乳量的影響(X±SD)例數(shù) 泌乳量(m1/12h) 例數(shù) 補授乳量(ml/2h)治前 122.01±52.04 21.00±33.21試驗組 5050治后 228.94±122.74**ΔΔ12.90±32.76治前 89.60±37.67 23.50±29.26對照組 5050治后 132.56±57.67**17.80±27.07*治前 94.41±69.35擴大 46治后 197.82±62.21**治療前后對比*P＜0.01試驗組與對照紐比ΔP＞0.05**P＜0.001 ΔΔP＜0.001表8所示，通過測量12小時(h)嬰兒喂乳前后增重的情況，間接測量產(chǎn)婦的泌乳量(1g＝1ml換算)，結果表明，試驗組、對照組和擴大組均能明顯增加產(chǎn)婦的泌乳量，分別由122.01ml/12h上升至288.94ml/12h，89.6ml/12h上升至132.56ml/12h和94.4ml/12h上升至197.82ml/12h。治療前后對比，差異非常顯著，P值均＜0.001。而且試驗組的泌乳量明顯優(yōu)于對照組，P＜0.001。在增加產(chǎn)婦泌乳的同時，還能減少嬰兒的補授乳量，試驗組與對照組治療前后對比，差異非常顯著，P＜0.01。但試驗組末見優(yōu)于對照組，P＞0.05。
3、初產(chǎn)婦治療前后對泌乳素分泌的影響(見表9)
表9、初產(chǎn)婦治療前后對泌乳素分泌的影響例數(shù) 泌乳素(ug/l)治前 164.32±119.29試驗組 50治后 207.46±129.58**治前 169.32±132.61對照組 50治后 169.01±97.28治療前后對比**P＜0.05*P＞0.05表9所示，試驗組治療后能明顯促進初產(chǎn)婦泌，與治療前比，差異顯著，P＜0.05，而對照組未見有此作用。
4、缺乳初產(chǎn)婦催乳作用的觀察缺乳初產(chǎn)婦治療前后對嬰兒補授乳量的影響(見表10)表10缺乳初產(chǎn)婦治療前后對嬰兒補授乳量的影響(X±SD)例數(shù) 補授乳量(ml/日)治前74.66±25.03試驗組 15治后2.00±7.74*Δ治前78.00±46.08對照組 15治后22.00±26.77*治前159.16±103.76擴大組 15治后46.68±80.63*Δ治療前后*P＜0.001試驗組、擴大組與對照組比ΔP＜0.01。
表10所示，試驗組、對照組、擴大組三組均能明顯減少缺乳初產(chǎn)婦對嬰兒的補授乳量，分別由74.66ml/日下降至2ml/日E，78ml/日下降至22ml/日，159.16ml/日下降至46.68ml/日。其中試驗組、擴大組均優(yōu)于對照組。
5、缺乳初產(chǎn)婦治療前后對泌乳素分泌的影響(見表11)
表11缺乳初產(chǎn)婦治療前后對泌乳素分泌的影響(x±SD)例數(shù)泌乳素(ug/L)治前 60.66±15.9515治后 100.80±27.95*P＜0.001表11所示，增乳膏治療后能明顯促進缺乳初產(chǎn)婦泌乳素的分泌，與治療前對比，差異非常顯著，P＜0.001。
6、不良反應的觀察增乳膏治療前后共檢測血、尿帶規(guī)146例。ALT、BUN、心電圖各65例。其中治前Hb＜100g/L29例(生理性貧血)，治后4例恢復正常，其它未見加重；WBC治前＞10×109/L＞10例，治后均恢復正常外，其它檢測項目均末見異常改變，對服用增乳膏146例的臨床觀察，均未見不良反應，有個別產(chǎn)婦反映本品口感稍差，提示本品的臨床用量是安全的。
通過對146例初產(chǎn)婦和66例缺乳初產(chǎn)婦的臨床試驗結果表明，增乳膏能明顯增加產(chǎn)婦的泌乳量、減少嬰兒的補授乳量，促進產(chǎn)婦泌乳素分泌，臨床觀察未見不良反應，是一種有效安全的純天然催乳劑，為響應世界衛(wèi)生組織的號召，提倡、推廣母乳喂養(yǎng)提供條件。實施例1王不留行133g 通草133g熟地黃167g 當歸67g白芍111g 川芎50g益母草133g 天花粉133g以上八味，熟地黃，當歸，川芎用70％乙醇作溶劑，進行滲漉，滲漉液回收乙醇，濃縮備用；通草加水浸泡2小時，煎煮1小時，濾過，濾液加入王不留行、白芍、益母草中煎煮2次，每次1.5小時，濾過，濾液備用，天花粉用熱水溫浸2小時，濾過，濾液與上述各提取液合并，濃縮，靜置過夜，取上清液濃縮至清膏，制成煎膏劑1000g。實施例2王不留行133g 通草133g 熟地黃167g當歸67g 白芍111g 川芎50g益母草133g天花粉133g以上八味，熟地黃用80％乙醇，當歸，川芎用70％乙醇作溶劑，進行滲漉，滲漉液回收乙醇，濃縮備用；通草加水浸泡1小時，煎煮2小時，濾過，濾液加入王不留行、白芍、益母草中煎煮1次，1.5小時，濾過，濾液備用，天花粉用熱水溫浸2小時，濾過，濾液與上述各提取液合并，濃縮，靜置過夜，取上清液濃縮至清膏，加糊精制成300g顆粒劑。實施例3本發(fā)明藥物組合物制備的煎膏劑的質量控制方法取本發(fā)明煎膏劑50ml，加無水乙醇70ml，邊加邊攪拌，再攪拌10分鐘，靜置，傾取上層液蒸干，殘渣加飽和氯化鈉溶液20ml使溶解并轉移至分液漏斗中，用水飽和正丁醇提取3次，每次20ml，合并正丁醇液，用5％氨水溶液洗滌2次，每次20ml，再用飽和氯化鈉溶液洗滌3次，每次20ml，取正丁醇液蒸干，殘渣加甲醇15ml，超聲處 15分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取王不留行對照藥材5重量份，加60-90℃石油醚20ml，加熱回流1小時，濾過，濾渣揮干，加乙醇25ml，加熱回流30分鐘，放冷；濾過，濾液蒸干，殘渣加飽和氯化鈉溶液20ml使溶解并轉移至分液漏斗中，同法制成對照藥材溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5ul分別點于同一硅膠重量份薄層板上，以15∶40∶22∶10氯仿-醋酸乙酯--甲醇---水5～10℃以下放置12小時的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；取本發(fā)明煎膏劑50ml，加無水乙醇70ml邊加邊攪拌，再攪拌10分鐘，靜置，傾取上層液，加乙醚30ml，靜置過夜，傾取上層液，蒸至近干，加無水乙醇7ml，乙醚3ml，超聲處理10分鐘，取上層液，蒸干殘渣加乙醇1ml溶解，作為供試品溶液；另取熟地黃對照藥材5重量份，切片，加乙醇20ml，加熱回流0.5小時，放冷，濾過濾液蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為對照藥材溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5ul，分別點于同一硅膠重量份薄層板上，以2∶1的60-90℃石油醚-醋酸乙醇為展開劑，展開，取出，晾干；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同的黃色斑點；取本發(fā)明煎膏劑8g，精密稱定，加水20ml充分攪拌使溶解，通過D101大孔吸附樹脂柱，濕法裝柱，內徑15mm，用水200ml洗脫，棄去水液，再用乙醇70ml洗脫，收集乙醇液，蒸干，殘渣加甲醇15ml，超聲處理15分鐘，濾過，濾液轉移至25ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，取上述溶液15ml，蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取芍藥苷對照品，加甲醇制成每1ml含2mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各4ul，分別點于同一硅膠重量份薄層板上，以40∶5∶10∶0.2氯仿-醋酸乙酯-甲醇-甲酸為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，熱風吹至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
取本發(fā)明煎膏劑50ml，加無水乙醇70ml邊加邊攪拌，再攪拌10分鐘，靜置，傾取上層液，加乙醚30ml，靜置過夜，傾取上層液，蒸至近干，加無水乙醇7ml，乙醚3ml，超聲處理10分鐘，取上層液，蒸干殘渣加乙醇1ml溶解，作為供試品溶液；另取瓜氨酸對照品，加稀乙醇制成每1ml含1m重量份的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液15μl，對照品溶液1μl，分別點于同一硅膠重量份薄層板上，以8∶2∶2∶3正丁醇-無水乙醇-冰醋酸-水為展開劑，展開，取出，晾干，噴以茚三酮試液，在105℃加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；含量測定照高效液相色譜法測定，色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗，用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；25∶75甲醇--水為流動相；檢測波長為230nm；理論板數(shù)按芍藥苷計算應不低于3000；對照品溶液的制備，精密稱取芍藥苷對照品10mg，置50ml量瓶中、加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻；精密吸取5ml，置10ml量瓶中加甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得，每1ml含芍藥苷0.1mg。供試品溶液的制備，取本發(fā)明煎膏劑8g，精密稱定，加水20ml充分攪拌使溶解，通過D101大孔吸附樹脂柱，濕法裝柱，內徑15mm，用水200ml洗脫，棄去水液，再用乙醇70ml洗脫，收集乙醇液，蒸干，殘渣加甲醇15ml，超聲處理15分鐘，濾過，濾液轉移至25ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得；測定法，分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各10ul，注入液相色譜儀，測定，即得；本發(fā)明煎膏劑每1g含芍藥苷(C23H28O11)不得少于0.25mg。
權利要求
1.一種具有泌乳功能的藥物組合物，其特征在于該藥物組合物是由如下原料藥制成的王不留行100-150重量份通草100-150重量份熟地黃125-190重量份 當歸50-75重量份白芍80-125重量份 川芎36-56重量份益母草100-150重量份 天花粉100-150重量份
2.如權利要求1所述的藥物組合物，其特征在于該藥物組合物是由如下原料藥制成的王不留行133重量份通草133重量份熟地黃167重量份 當歸67重量份白芍111重量份川芎50重量份益母草133重量份 天花粉133重量份
3.如權利要求1或2所述的藥物組合物的制備方法，其特征在于該方法為熟地黃，當歸，川芎用70-80％乙醇作溶劑，進行滲漉，滲漉液回收乙醇，濃縮備用；通草加水浸泡1-3小時，煎煮1-3小時，濾過，濾液加入王不留行、白芍、益母草中煎煮1-3次，每次1-2小時，濾過，濾液備用，天花粉用熱水溫浸1-3小時，濾過，濾液與上述各提取液合并，濃縮，靜置過夜，取上清液濃縮至清膏。加入制劑上可接受的輔料或賦型劑，制成臨床可接受的劑型。
4.如權利要求3所述的藥物組合物的制備方法，其特征在于該方法為熟地黃，當歸，川芎用70％乙醇作溶劑，進行滲漉，滲漉液回收乙醇，濃縮備用；通草加水浸泡2小時，煎煮1小時，濾過，濾液加入王不留行、白芍、益母草中煎煮2次，每次1.5小時，濾過，濾液備用，天花粉用熱水溫浸2小時，濾過，濾液與上述各提取液合并，濃縮，靜置過夜，取上清液濃縮至清膏，制成煎膏劑。
5.如權利要求3所述的藥物組合物的制備方法，其特征在于該方法為熟地黃用80％乙醇，當歸，川芎用70％乙醇作溶劑，進行滲漉，滲漉液回收乙醇，濃縮備用；通草加水浸泡1小時，煎煮2小時，濾過，濾液加入王不留行、白芍、益母草中煎煮1次，1.5小時，濾過，濾液備用，天花粉用熱水溫浸2小時，濾過，濾液與上述各提取液合并，濃縮，靜置過夜，取上清液濃縮至清膏，加糊精制成顆粒劑。
6.如權利要求1或2所述藥物組合物的質量控制方法，其特征在于該方法中的鑒別方法可以選自下列鑒別方法中的一種或幾種a、取本發(fā)明煎膏劑50ml，加無水乙醇70ml，邊加邊攪拌，再攪拌8-12分鐘，靜置，傾取上層液蒸干，殘渣加飽和氯化鈉溶液20ml使溶解并轉移至分液漏斗中，用水飽和正丁醇提取2-4次，每次10-30ml，合并正丁醇液，用3-5％氨水溶液洗滌1-3次，每次10-30ml，再用飽和氯化鈉溶液洗滌2-4次，每次10-30ml，取正丁醇液蒸干，殘渣加甲醇15ml，超聲處理10-20分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取王不留行對照藥材5重量份，加60-90℃石油醚10-30ml，加熱回流1-1.5小時，濾過，濾渣揮干，加乙醇20-30ml，加熱回流20-35分鐘，放冷；濾過，濾液蒸干，殘渣加飽和氯化鈉溶液20-30ml使溶解并轉移至分液漏斗中，同法制成對照藥材溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5ul分別點于同一硅膠重量份薄層板上，以14-16∶38-41-∶20-24∶8-11氯仿-醋酸乙酯--甲醇---水5～10℃以下放置10-12小時的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，在100-110℃加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；b、取本發(fā)明煎膏劑50ml，加無水乙醇70ml邊加邊攪拌，再攪拌8-12分鐘，靜置，傾取上層液，加乙醚25-35ml，靜置過夜，傾取上層液，蒸至近干，加無水乙醇7ml，乙醚3ml，超聲處理10-20分鐘，取上層液，蒸干殘渣加乙醇1ml溶解，作為供試品溶液；另取熟地黃對照藥材5重量份，切片，加乙醇18-22ml，加熱回流0.5-1小時，放冷，濾過濾液蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為對照藥材溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5ul，分別點于同一硅膠重量份薄層板上，以1-2∶1-2的60-90℃石油醚-醋酸乙醇為展開劑，展開，取出，晾干；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同的黃色斑點；c、取本發(fā)明煎膏劑8g，精密稱定，加水18-22ml充分攪拌使溶解，通過大孔吸附樹脂柱，濕法裝柱，內徑12-16mm，用水150-250ml洗脫，棄去水液，再用乙醇60-80ml洗脫，收集乙醇液，蒸干，殘渣加甲醇13-16ml，超聲處理11-20分鐘，濾過，濾液轉移至25ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，取上述溶液15ml，蒸干，殘渣加甲醇1-2ml使溶解，作為供試品溶液；另取芍藥苷對照品，加甲醇制成每1ml含2mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各4ul，分別點于同一硅膠重量份薄層板上，以38-42∶3-6∶8-12∶0.1-0.3氯仿-醋酸乙酯-甲醇-甲酸為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，熱風吹至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。d、取本發(fā)明煎膏劑50ml，加無水乙醇70ml邊加邊攪拌，再攪拌8-12分鐘，靜置，傾取上層液，加乙醚25-35ml，靜置過夜，傾取上層液，蒸至近干，加無水乙醇7ml，乙醚3ml，超聲處理8-12分鐘，取上層液，蒸干殘渣加乙醇1ml溶解，作為供試品溶液；另取瓜氨酸對照品，加稀乙醇制成每1ml含1m重量份的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液15μl，對照品溶液1μl，分別點于同-硅膠重量份薄層板上，以6-10∶1-2∶1-2∶2-4正丁醇-無水乙醇-冰醋酸-水為展開劑，展開，取出，晾干，噴以茚三酮試液，在100-110℃加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
7.如權利要求6所述的質量控制方法，其特征在于該方法中的鑒別方法可以選自下列鑒別方法中的一種或幾種a.取本發(fā)明煎膏劑50ml，加無水乙醇70ml，邊加邊攪拌，再攪拌10分鐘，靜置，傾取上層液蒸干，殘渣加飽和氯化鈉溶液20ml使溶解并轉移至分液漏斗中，用水飽和正丁醇提取3次，每次20ml，合并正丁醇液，用5％氨水溶液洗滌2次，每次20ml，再用飽和氯化鈉溶液洗滌3次，每次20ml，取正丁醇液蒸干，殘渣加甲醇15ml，超聲處理15分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取王不留行對照藥材5重量份，加60-90℃石油醚20ml，加熱回流1小時，濾過，濾渣揮干，加乙醇25ml，加熱回流30分鐘，放冷；濾過，濾液蒸干，殘渣加飽和氯化鈉溶液20ml使溶解并轉移至分液漏斗中，同法制成對照藥材溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5ul分別點于同一硅膠重量份薄層板上，以15∶40∶22∶10氯仿-醋酸乙酯--甲醇---水5～10℃以下放置12小時的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；b.取本發(fā)明煎膏劑50ml，加無水乙醇70ml邊加邊攪拌，再攪拌10分鐘，靜置，傾取上層液，加乙醚30ml，靜置過夜，傾取上層液，蒸至近干，加無水乙醇7ml，乙醚3ml，超聲處理10分鐘，取上層液，蒸干殘渣加乙醇1ml溶解，作為供試品溶液；另取熟地黃對照藥材5重量份，切片，加乙醇20ml，加熱回流0.5小時，放冷，濾過濾液蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為對照藥材溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5ul，分別點于同一硅膠重量份薄層板上，以2∶1的60-90℃石油醚-醋酸乙醇為展開劑，展開，取出，晾干；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同的黃色斑點；c.取本發(fā)明煎膏劑8g，精密稱定，加水20ml充分攪拌使溶解，通過D101大孔吸附樹脂柱，濕法裝柱，內徑15mm，用水200ml洗脫，棄去水液，再用乙醇70ml洗脫，收集乙醇液，蒸干，殘渣加甲醇15ml，超聲處理15分鐘，濾過，濾液轉移至25ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，取上述溶液15ml，蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取芍藥苷對照品，加甲醇制成每1ml含2mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各4ul，分別點于同一硅膠重量份薄層板上，以40∶5∶10∶0.2氯仿-醋酸乙酯-甲醇-甲酸為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，熱風吹至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。d.取本發(fā)明煎膏劑50ml，加無水乙醇70ml邊加邊攪拌，再攪拌10分鐘，靜置，傾取上層液，加乙醚30ml，靜置過夜，傾取上層液，蒸至近干，加無水乙醇7ml，乙醚3ml，超聲處理10分鐘，取上層液，蒸干殘渣加乙醇1ml溶解，作為供試品溶液；另取瓜氨酸對照品，加稀乙醇制成每1ml含1m重量份的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液15μl，對照品溶液1μl，分別點于同-硅膠重量份薄層板上，以8∶2∶2∶3正丁醇-無水乙醇-冰醋酸-水為展開劑，展開，取出，晾干，噴以茚三酮試液，在105℃加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；
8.如權利要求1或2所述藥物組合物的質量控制方法，其特征在于該方法中的含量測定方法為照高效液相色譜法測定，色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗，用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；24-26∶70-80甲醇--水為流動相；檢測波長為230nm；理論板數(shù)按芍藥苷計算應不低于3000；對照品溶液的制備，精密稱取芍藥苷對照品10mg，置50ml量瓶中、加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻；精密吸取5ml，置10ml量瓶中加甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得，每1ml含芍藥苷0.1mg。供試品溶液的制備，取本發(fā)明煎膏劑8g，精密稱定，加水20ml充分攪拌使溶解，通過大孔吸附樹脂柱，濕法裝柱，內徑12-16mm，用水150-250ml洗脫，棄去水液，再用乙醇60-80ml洗脫，收集乙醇液，蒸干，殘渣加甲醇12-16ml，超聲處理12-16分鐘，濾過，濾液轉移至25ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得；測定法，分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各10ul，注入液相色譜儀，測定，即得；本發(fā)明煎膏劑每1g含芍藥苷(C23H28O11)不得少于0.25mg。
9.如權利要求8所述的質量控制方法，其特征在于該方法中的含量測定方法為照高效液相色譜法測定，色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗，用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；25∶75甲醇--水為流動相；檢測波長為230nm；理論板數(shù)按芍藥苷計算應不低于3000；對照品溶液的制備，精密稱取芍藥苷對照品10mg，置50ml量瓶中、加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻；精密吸取5ml，置10ml量瓶中加甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得，每1ml含芍藥苷0.1mg。供試品溶液的制備，取本發(fā)明煎膏劑8g，精密稱定，加水20ml充分攪拌使溶解，通過D101大孔吸附樹脂柱，濕法裝柱，內徑15mm，用水200ml洗脫，棄去水液，再用乙醇70ml洗脫，收集乙醇液，蒸干，殘渣加甲醇15ml，超聲處理15分鐘，濾過，濾液轉移至25ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得；測定法，分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各10ul，注入液相色譜儀，測定，即得；本發(fā)明煎膏劑每1g含芍藥苷(C23H28O11)不得少于0.25mg。
10.如權利要求1或2所述的藥物組合物在制備具有增強泌乳量或者提高血清催乳素分泌水平的藥物中的應用。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種具有泌乳功能的藥物組合組合物，其特征在于該藥物組合物是由如下原料藥制成的王不留行100－150重量份、通草100－150重量份、熟地黃125－190重量份、當歸50－75重量份、白芍80－125重量份、川芎36－56重量份、益母草100－150重量份、天花粉100－150重量份，本發(fā)明藥物具有增強泌乳量或者提高血清催乳素分泌水平的作用。
文檔編號A61P15/14GK1416861SQ0214671
公開日2003年5月14日 申請日期2002年11月4日 優(yōu)先權日2002年11月4日
發(fā)明者何建文, 潘杰, 陳紀鵬, 唐志杰, 趙水連 申請人:漳洲片仔癀藥業(yè)股份有限公司