專利名稱：一種治療急性肺部感染疾病的藥物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種治療急性肺部感染疾病的藥物，具體涉及一種以中草藥為原料制備的中成藥，本發(fā)明還涉及該藥物的制備方法。
肺部感染在呼吸系統(tǒng)疾病或感染性疾病中占有很大比重，而且由于醫(yī)院內(nèi)獲得肺部感染的嚴(yán)重性日趨突出，臨床各科都會遇到肺部感染問題。近二三十年來，盡管抗生素和其它抗微生物藥的迅速發(fā)展，重癥護(hù)理水平不斷提高，但肺炎總體死亡率并無降低，無論發(fā)展國家還是發(fā)達(dá)國家皆然。據(jù)調(diào)查，細(xì)菌性肺炎在美國占總?cè)丝诔Ｒ娝酪虻牡?位，在60歲以上老年常見死因中占第4位。我國每年約有250萬例肺炎發(fā)生，12.5萬人死于肺炎，在各種致死病因中占第5位。雖然傳統(tǒng)的生物醫(yī)學(xué)模式在改變，某些傳染疾病的病原體已經(jīng)或正在被控制和消滅，但人與內(nèi)外環(huán)境微生物都是生態(tài)鏈上的重要環(huán)節(jié)，既共存又對立的關(guān)系不會改變，人類與病原微生物的斗爭預(yù)計不會有終極。肺部感染作為最常見最重要的感染之一，尤其是它所面臨的困難和挑戰(zhàn)，諸如病原體變遷、細(xì)菌耐藥率上升、人口老化，免疫損害宿主增多與積累，部分人群相對貧困化加劇等問題，正在受到越來越多的關(guān)注。
目前西醫(yī)對急性肺部感染疾病的治療仍以單純的解熱、抗炎、抑菌、抗病毒為主，治療藥物以磺胺類藥和抗生素為主，治療時間長，易帶來副作用。中醫(yī)有外敷劑、口服劑，口服中藥固體制劑存在吸收慢、起效不快的缺陷，不利于急性疾病的治療。
本發(fā)明的另一目的在于提供該藥物的制備方法。
本發(fā)明提供的一種治療急性肺部感染疾病的藥物，是由下述重量配比的原料制成的藥劑金盞銀盤1～3、黃芩0.3～1.5。
上述用于治療急性肺部感染疾病的藥物，可以制成藥劑學(xué)上所說的多種劑型，如注射液、膠囊或片劑。
將上述重量配比的原料制成本發(fā)明藥物的方法，包括以下步驟(1)金盞銀盤用5～12倍量60～90％乙醇回流提取2～4次，每次1～3小時，過濾，合并濾液，回收盡乙醇，減壓濃縮至相對密度為1.10～1.15，冷藏，過濾，濾液加2～5％明膠溶液沉淀至沉淀結(jié)束，冷藏，過濾，濾液加乙醇沉淀，使含醇量達(dá)75～90％，冷藏，取上清液，回收盡乙醇，濃縮至相對密度為1.20～1.32，即得金盞銀盤浸膏；(2)黃芩粉碎成粗粉，加8～12倍量水煎煮2～4次，每次煎煮1～2小時，合并煎煮液，減壓濃縮至1.02～1.06，調(diào)pH至1～2，80℃保溫1小時，靜置，過濾，沉淀加適量的水溶解，調(diào)pH至7～8，過濾，濾液調(diào)pH至1～2，80℃保溫1小時，靜置，過濾，得沉淀；(3)取上述沉淀與金盞銀盤浸膏混合，減壓干燥，粉碎，制得半成品；(4)取半成品和抗氧劑，加注射用水使溶解，調(diào)pH至6～8，用超濾膜超濾，濾液補加注射用水，再調(diào)pH至6～8，加入表面活性劑，用微孔膜濾過，灌封于處理好的10ml安瓿中，流通蒸氣滅菌，制得注射液。
其中步驟(4)所述的抗氧劑為亞硫酸氫鈉，使用濃度為0.05％～0.3％；所述的表面活性劑為吐溫80，使用濃度為0.1％～0.5％。
本發(fā)明藥物主治風(fēng)溫肺熱引起的發(fā)熱、微惡風(fēng)寒，咳嗽，咯痰，口渴、頭痛、鼻塞、舌邊尖紅，苔薄黃或黃白相兼，脈浮數(shù)等癥，及急性肺炎，支氣管周圍炎等急性肺部感染疾病見上述癥狀者。經(jīng)藥效學(xué)試驗表明，本發(fā)明藥物具有顯著的的鎮(zhèn)痛，解熱，抗菌和抗病毒作用，對肺炎特別對急性肺炎，支氣管周圍炎等急性肺部感染有良好的治療作用。
下面結(jié)合實施例及主要藥效學(xué)試驗對本發(fā)明作進(jìn)一步的說明。
(1)稱取金盞銀盤550g，用8倍量65％乙醇回流提取2次，每次煎煮2小時，過濾，合并濾液，回收盡乙醇，減壓濃縮至相對密度為1.12(50℃)，冷藏，過濾，濾液加4.5％明膠溶液沉淀至沉淀結(jié)束，冷藏，過濾，濾液加乙醇沉淀，使含醇量達(dá)85％，冷藏，取上清液，回收盡乙醇，濃縮至相對密度為1.26(50℃)，備用；(2)稱取黃芩230g，粉碎成粗粉，加8倍量水煎煮2次，每次煎煮1小時，合并煎煮液，減壓濃縮至1.03(50℃)，用稀鹽酸調(diào)pH至1～2，80℃保溫1小時，靜置，過濾，沉淀加適量的水溶解，用40％NaOH調(diào)pH至7～8，過濾，濾液加稀鹽酸調(diào)pH至1～2，80℃保溫1小時，靜置，過濾，沉淀與金盞銀盤浸膏混合，減壓干燥，粉碎，制得半成品，備用；(3)取半成品和亞硫酸氫鈉3g，加注射用水700ml使溶解，用40％氫氧化鈉調(diào)pH至6～8，用超濾膜超濾，濾液補加注射用水至1000ml，再調(diào)pH至6～8，加入3g表面活性劑吐溫80，用0.22μm微孔膜濾過，灌封于處理好的10ml安瓿中，流通蒸氣滅菌45min，制得本發(fā)明注射液。
1.小鼠扭體試驗①材料藥品本發(fā)明注射劑，含量0.75g/ml，10ml/支，由廣東歐華醫(yī)藥生物技術(shù)有限公司提供。
動物昆明小鼠，由沈陽藥科大學(xué)實驗動物中心提供，雄性合格證號，遼實質(zhì)合遼402號。
②方法取小鼠，雄性，體重18-22g，隨機分組，分別靜脈注射，不同劑量本發(fā)明和雙黃連注射劑。體積為0.4ml/20g，對照組給予等量生理鹽水，1小時后，腹腔注射0.7％冰醋酸，0.1ml/10g，觀察記錄注射致痛劑后，15分鐘內(nèi)小鼠扭體次數(shù)，計量鎮(zhèn)痛百分率，進(jìn)行t-檢驗。 2.小鼠熱板實驗①材料藥品本發(fā)明注射劑，含量0.75g/ml，10ml/支，由廣東歐華醫(yī)藥生物技術(shù)有限公司提供。
動物昆明種小鼠雌性，體重18-22g，由沈陽藥科大學(xué)動物中心提供，合格證號，遼實質(zhì)合字第402號。
②方法取昆明種小鼠，隨機分組，分別尾靜脈注射不同劑量本發(fā)明和雙黃連，體積為0.4ml/20g，分別于給藥前和給藥后30分鐘，用YLS-6A智能熱板儀測定痛閾值，以小鼠舔后足為疼痛指標(biāo)，以痛反應(yīng)潛伏期為痛閾值體積標(biāo)。如痛閾值指標(biāo)起過60秒，未舔后足，以60秒為計。對照組尾靜脈注射同體積生理鹽水，測定指標(biāo)同給藥組相同。計算各組痛閾值提高百分率，進(jìn)行t-檢驗。 (二)鎮(zhèn)痛試驗結(jié)果1.小鼠扭體實驗結(jié)果本發(fā)明對小鼠扭體試驗結(jié)果見表1
表1 本發(fā)明對小鼠扭體實驗結(jié)果 x±SD藥物 劑量(g/kg) 動物數(shù)(只) 扭體數(shù)(次) 鎮(zhèn)痛百分率(％)對照組 10 24.6±3.66本發(fā)明 1.5 10 1.8±2.62***92.70.5 10 4.4±3.6***82.10.17 10 15.9±2.13***35.37雙黃連ml/kg20 10 9.7±3.50***60.60***P＜0.01與對照組相比表1結(jié)果表明，本發(fā)明注射劑在1.5～0.17g/kg劑量范圍內(nèi)對醋酸引起小鼠扭體，與對照組相比，有明顯的鎮(zhèn)痛作用(P＜0.01)，隨劑量增加鎮(zhèn)痛作用加強，呈明顯的量效關(guān)系，鎮(zhèn)痛百分率，本發(fā)明1、5、0.5、0.17g/kg劑量組，分別為92.7％，82.1％，35.3％。對照藥雙黃連，有明顯的鎮(zhèn)痛作用，鎮(zhèn)痛百分率為60.6％。
2.小熱板鎮(zhèn)痛實驗結(jié)果熱可要對小鼠熱板鎮(zhèn)痛實驗結(jié)果見表2。
表2 本發(fā)明對小鼠熱板鎮(zhèn)痛實驗結(jié)果 x±SD藥物 劑量(g/kg)動物數(shù)(只)扭體數(shù)(次)鎮(zhèn)痛百分率(％)對照組 1017.83±2.79 10.17本發(fā)明 3.0 1050.89±7.61***189.641.5 1039.17±7.17***105.290.751021.22±3.82 23.59雙黃連ml/kg 40ml/kg 1034.18±6.19***89.98***P＜0.01(與對照組相比)表2結(jié)果表明，本發(fā)明在1.5，3.0g/kg劑量下，對熱板引起的小鼠痛疼有明顯的鎮(zhèn)痛作用，與對照組相比差別非常顯著(P＜0.01)0.75g/kg組，無鎮(zhèn)痛作用，本發(fā)明熱板鎮(zhèn)痛有明顯劑量效應(yīng)關(guān)系，本發(fā)明3.0，15g/kg組痛閾提高百分率分別為189.64％、105.29％雙黃連有明顯鎮(zhèn)痛作用，40ml/kg組，痛閾提高百分率為89.98％。
(三)鎮(zhèn)痛試驗結(jié)論本發(fā)明注射對小鼠扭本，小鼠熱板引起的痛疼均有明顯的鎮(zhèn)痛作用，呈劑量—效應(yīng)關(guān)系。表明本發(fā)明有鎮(zhèn)痛作用。
二、解熱試驗(一)材料與方法1.傷寒苗菌致家兔發(fā)熱實驗①材料藥品，本發(fā)明注射劑，含量0.75g/ml，10ml/支，由廣東歐華醫(yī)藥生物技術(shù)有限公司提供雙黃連注射劑，市售黑龍江珍寶島制藥有限公司提供，批號200220402，規(guī)格20ml/支。
菌株傷寒沙門氏菌50096遼寧省疾病控制中心提供。
②方法取體溫合格家兔，體重1.5-2.5kg，標(biāo)記稱重，隨機合成6組，即空白對照組，模型組，本發(fā)明7.5，3.725，1.26g/kg雙黃連10ml/kg組，每組8只動物，各組動物分別用數(shù)字顯示測溫計于給藥前，分別測肛溫兩次，以均值為正常體溫?？瞻讓φ战M(正常組)耳靜脈注射生理鹽水1ml/kg，其他各組的動物分別耳靜脈注射(1ml/kg)傷寒菌液108/mL，注射1小時后，分別靜脈注射不同劑量本發(fā)明和雙黃連，給藥后分別于給藥30′，60′，90′，120分鐘，測量各組動物體溫，與對照組進(jìn)行比較，用t-檢驗進(jìn)行統(tǒng)計處理。
2.2，4-二硝基酚所致大鼠發(fā)熱的解熱作用取大鼠(雄性)6只，隨機分成6組，生組10只，即正常對照組，模型對照，本發(fā)明高、中、低組雙黃加對照藥組，本發(fā)明各劑量大鼠腹腔注射不同劑量本發(fā)明，雙黃加腹腔注射雙黃連，給藥體積為2ml/100g。給藥1小時后，每只大鼠背部皮下注射2，4-二硝基苯酚1ml/100g(15mg/kg)，然后每半小時體溫一次，連續(xù)測定2小時，給藥組與對照組進(jìn)行統(tǒng)計處理。
(二)解熱試驗的結(jié)果1.傷寒菌苗致家兔發(fā)熱實驗結(jié)果本發(fā)明對傷寒菌致家兔發(fā)熱的解熱作用結(jié)果見表3表3 本發(fā)明對傷寒菌致家兔體溫的影響 x±SD n＝10
劑量 體溫(℃)組別g/kg 正常 致熱后 給藥后30′ 60′ 90′ 120′對照組 38.79±0.238.8±0.238.78±0.22 38.81±0.24 38.78±0.23 38.88±0.18模型組 38.86±0.21 40.3±0.440.11±0.14 40.11±0.29 40.25±0.19 40.23±0.24熱可7.5 38.76±0.240.0±0.28 39.14±0.14***39.14±0.14***39.21±0.14***39.34±0.09***寧3.725 38.72±0.26 40.25±0.5 39.53±0.21**39.56±0.26**39.59±0.32**39.8±0.28**1.7638.8±0.3 39.98±39.5 39.5±0.29 39.63±0.14 39.64±0.13 39.9±0.17雙黃連 10ml/kg 38.81±0.25 40.04±0.17 39.33±0.25**39.41±0.20**39.39±0.19**39.49±0.13****P＜0.05***P＜0.01與模型組相比表3 結(jié)果表明，本發(fā)明各劑量組均有降低傷寒菌引起家兔發(fā)熱作用，其中本發(fā)明7.5g/kg組與模型組相比，差別非常顯著(P＜0.01)3.725g/kg組與模型組相比差別顯著(P＜0.05)，降低作用呈劑量反應(yīng)關(guān)系。
(二)本發(fā)明對2，4-二硝基苯酚所致大鼠發(fā)熱的解熱作用結(jié)果大鼠解熱作用見表4表4 本發(fā)明對2，4-二硝苯苯酚大鼠發(fā)熱作用結(jié)果x±SDn＝10劑量體溫(℃)組別g/kg 正常 致熱后 給藥后30′ 60′ 90′120′對照組 37.77±0.3637.73±0.33 37.72±0.31 37.69±0.38 37.69±0.38 37.73±0.41模型組 37.91±0.4239.05±0.26***39.04±0.35***39.06±0.39***39.06±0.39***39.21±0.30***本發(fā)明 37.5 37.52±0.4037.68±0.46**37.65±0.51**37.65±0.47**37.65±0.47**37.66±0.55**18.7537.71±0.4138.26±0.39**38.09±0.47**38.13±0.51**38.13±0.51**38.25±0.35**9.37537.47±0.2838.28±0.33**38.33±0.33**38.13±0.34**38.13±0.34**38.14±0.32**雙黃連 25ml/kg 37.44±0.3137.86±0.31***37.82±0.34***37.70±0.41***37.70±0.41***37.61±0.37*****P＜0.05***P＜0.01與模型組相比結(jié)果表明，本發(fā)明各劑量均能明顯抑制2，4-二硝基酚所致大鼠的發(fā)熱作用，并呈明顯的量效關(guān)系。其中37.5g/kg組解作用，差異非常顯著(p＜0.01)，18.75，9.375g/kg組解熱作用差異顯著(P＜0.05)。
(三)解熱和用結(jié)論本發(fā)明對傷寒菌，2，4-二硝基苯酚所致大鼠家兔，大鼠發(fā)熱具有顯明的解熱作用。
三、本發(fā)明體內(nèi)抗菌試驗
(一)材料動物昆明種小鼠體重18-22g，由沈陽藥科大學(xué)動物中心提供合格證號，遼實質(zhì)合字402號。
藥物本發(fā)明注射劑，廣東歐華醫(yī)藥生物技術(shù)有限公司提供，含量0.75g/ml，10ml/支。
菌種，金黃色葡萄球菌17，表皮葡萄球菌13，由中國醫(yī)科大學(xué)第二臨床學(xué)醫(yī)院，分離的臨床菌株。
(二)方法1.菌株的MLD的測定將臨床分離菌株在試驗前一天培養(yǎng)于肉湯培養(yǎng)基上，用5％酵母溶液配制成一定濃度菌懸液，用取小鼠若干，腹腔注射5％酵母，不同濃度的金黃色葡萄球和表皮葡萄球菌，注射體積為0.5ml/只，記錄一周的動物死亡數(shù)，找出上起動物死亡的MLD。
其測定結(jié)果為金黃色葡萄球菌為106個/mL表皮葡萄球菌為104個/mL2.抗菌實驗取220只小鼠，體重18-22g，雌雄各半，隨機分組，每組10只，其中金黃色葡萄菌為11組，表皮葡萄球菌11組。本發(fā)明各劑量和雙黃連組，在感染前四天皮下注射不同濃度藥物，每天給藥一次，共四天，然后，分別腹腔注射下，感染菌金黃色葡萄球菌(感染量106個/ml)表皮葡萄球菌(感染量104個/ml，感染的體積為0.5ml/只，感染后，觀察1周，記錄動物存活情況，計算ED50及95％可信限)(三)體內(nèi)抗菌試驗結(jié)果本發(fā)明對表皮葡萄球菌13感染小鼠的體內(nèi)抗菌結(jié)果見表5。
表5 對表皮葡萄菌13感染小鼠的體內(nèi)抗菌作用劑量對數(shù)劑量動物數(shù)存活數(shù)存活率ED50及95％可信藥物g/kg x 只只％ 限g/kg50 1.7001010 10040 1.60210 990 24.93±1.13本發(fā)明 32 1.50510 770 (22.59～25.75)25.6 1.40810 44020.5 1.31110 220雙黃連 40 1.6021010 100 23.93±1.99ml/kg 32 1.505 10 8 80 (21.94～25.92)25.6 1.408 10 7 7020.48 1.311 10 2 216.38 1.214 10 1 1表皮葡萄球10410 0 0菌表5結(jié)果表明，本發(fā)明具有體內(nèi)抗表皮葡萄球菌感染的作用，ED50為24.62±1.13g/kg，雙黃連為23.93±1.99ml/kg。
本發(fā)明對金黃色葡萄球菌17感染小鼠的體內(nèi)抗菌作用見表6表6 本發(fā)明對金球葡萄菌17感染小鼠的體內(nèi)抗菌作用劑量對數(shù)劑量動物數(shù)存活數(shù)存活率ED50及95％可信藥物g/kg x 只只％ 限g/kg50 1.700101010040 1.602108 8024.16±1.02本發(fā)明 32 1.505106 60 (28.14～30.28)25.6 1.408103 3020.5 1.311102 2040 1.602101010032 1.5051010100 24.14±1.02雙黃邊 25.6 1.408108 80 (23.72～25.76)ml/kg20.481.311103 3016.381.214101 10表皮葡萄球106100 0菌表6 結(jié)果表明，本發(fā)明具有體內(nèi)抗金黃色葡萄球菌感染作用，ED50為29.16g/kg，雙黃連ED50為24.74mg/kg。
(四)體內(nèi)抗菌作用結(jié)論本發(fā)明對小鼠致死性金黃色葡萄球菌和表皮葡萄球菌感染具有保護(hù)作用。
四、本發(fā)明體外抗流感病毒實驗(一)材料本發(fā)明注射劑含量0.75g/ml，由廣東歐華醫(yī)藥生物技術(shù)有限公司提供，用1640培養(yǎng)液配成含生藥量200mg/ml備用。
細(xì)胞株，狗腎傳代細(xì)胞(MDCK)由中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院醫(yī)藥生物技術(shù)研究所提供病毒株流感甲型病毒，濟(jì)防90-15株，流感乙型病毒濟(jì)防97-13株，由中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院醫(yī)藥生物技術(shù)研究所提供。
(二)方法
1.本發(fā)明對MDCK細(xì)胞毒性MDCK細(xì)胞用EDTA分散，1∶3傳代，稀釋成40萬細(xì)胞/ml，接種于96孔培養(yǎng)板，100ul/孔，37℃ 5％CO2培養(yǎng)24小時，加熱不同濃度本發(fā)明，本發(fā)明量為200，100，50，25，12.5，6.25，3.125mg/ml，分別加入細(xì)胞培養(yǎng)板中，每孔200ul，37℃5％CO2培養(yǎng)，每天觀察細(xì)胞病變異共一周，取0.4％中性紅溶液100ul，加入每孔中染色2小時，在顯微鏡下觀察細(xì)胞病變。用Read-muench法計半數(shù)中毒濃度TC50和無毒劑量TC0。
2.病毒毒力測定MDCK細(xì)胞作單層培養(yǎng)，分別加入流感甲型和乙型病毒范圍為10-1～10-6，37℃5％CO2培養(yǎng)3天觀察細(xì)胞病變，測定流感甲型和乙型抗病毒的半數(shù)致細(xì)胞病變劑量TCID50。
3.本發(fā)明抗病毒實驗方法MDCK細(xì)胞100ul加96孔板中，加入100TCID50病毒液37℃5％CO2的附3小時，吸去病毒，加入最大無毒濃度本發(fā)明藥效2倍稀釋液7個濃度，37℃5％CO2培養(yǎng)3天，觀察細(xì)胞病變記錄病變程度，第7天傾去培養(yǎng)液，加入中性紅染色，酶標(biāo)儀測定OD值。同時設(shè)病素毒對照藥物對照(病毒唑)與實驗組同時觀察細(xì)胞病變(CPE)和中性紅染色OD值，計算50％抑制病毒病變濃度IC50，和治療指數(shù)。
(三)本發(fā)明抗病毒試驗結(jié)果1.對MDCK細(xì)胞毒性結(jié)果 見表7表7 本發(fā)明對細(xì)胞毒性的結(jié)果不同藥物濃度(mg/ml)細(xì)胞病變TC50TC0藥物20010050256.253.125CCmg/ml mg/ml本發(fā)明100100100 250 00 31.49812.5破壞％10 5 2.5 1.25 0.625 0.3130.156 CCTC50TC0病毒唑1001000 0 0 00 0 3.79 2.5破壞％本發(fā)明半數(shù)有毒劑量TC5031.98mg/ml，無毒劑量TC012.5mg/ml。病毒唑半數(shù)有毒劑量TC503.79mg/ml無毒劑量TC02.5mg/ml2.病毒毒力測定結(jié)果流感甲型病毒對MDCK半數(shù)致細(xì)胞病變劑量TCID5010-5，流感乙型病毒對MDCK的半數(shù)致細(xì)胞病變劑量TCID50，10-43.本發(fā)明抗病毒實驗結(jié)果本發(fā)明對流感甲型病毒實驗結(jié)果見表8表8 本發(fā)明對流感甲型病毒實驗結(jié)果實驗 不同藥物濃度的細(xì)胞病變(mg/ml) IC50藥物方法 12.56.253.131.560.78VCCC mg/ml本發(fā)明 CPE 0 2 3 3 3 3 0 7.430 2 3 3 3 3 0 TI＝4.240 2 3 3 3 3 C抑制％ 100 33.30 0不同藥物濃度的細(xì)胞病變(mg/ml) IC501 0.5 0.25 0.125 0.0625 0.0313 VC CC mg/ml病毒唑0 0 0 0 1 2 30 0.0440 0 0 0 1 2 30 TI＝86.10 0 0 0 1 2 30抑制％ 10010-110-210-310-410-510-6CCTCID50TCID504 4 4 3 2 1 0測定 4 4 4 3 2 1 0 10-54 4 4 3 2 1 0表8結(jié)果表明，本發(fā)明半數(shù)有效量TC50為7.43mg/ml，治療指數(shù)4.24，對照菌病毒唑IC50為0.044mg/ml，治療指數(shù)86.1本發(fā)明對流感乙型病毒作用結(jié)果見表9表9 本發(fā)明對流感乙型病毒作用結(jié)果實驗 不同藥物濃度的細(xì)胞病變(mg/ml) IC50藥物方法 12.56.253.131.560.78VCCC mg/ml本發(fā)明 CPE 1 3 4 4 4 4 08.841 3 4 4 4 4 0TI＝3.561 3 4 4 4 4抑制％ 75 25 0 0 0 0不同藥物濃度的細(xì)胞病變(mg/ml) IC501 0.5 0.25 0.125 0.0625 0.0313 VC CC病毒唑 CPE 0 0 0 0 2 4 4 00.0625對照藥 0 0 0 0 2 4 4 0TI＝60.60 0 0 0 2 4 4 0抑制％ 100 100 10010050 010-110-210-310-410-510-6CCTCID50TCID5044 4 2 0 0 0測定44 4 2 0 0 0 10-444 4 2 0 0 0表9結(jié)果表明本發(fā)明半數(shù)有效量TC50為8.84mg/ml治療指數(shù)3.56病毒唑半數(shù)有效量為0.0625mg/ml治療指數(shù)60.6。(四)本發(fā)明抗病毒實驗結(jié)論本發(fā)明注射液對流感甲型和乙型病毒體外有抗毒作用。五、本發(fā)明注射液體外抗菌作用的研究(一)材料與方法1.藥物被試藥本發(fā)明注射液，由廣東歐華醫(yī)藥生物技術(shù)有限公司提供，含量4.2g/ml。陽性對照藥黑龍江真寶島制藥有限公司的雙黃連注射液，批號2002040，20ml/支。2.試驗菌株近期臨床分離菌株205株，由中國醫(yī)科大學(xué)第二臨床學(xué)院臨床微生物室提供，為近兩年臨床分離的菌株，菌株鑒定采用API試劑方法，質(zhì)控菌由中國藥品生物制品檢定所提供。金黃色葡萄球菌(38株)大腸桿菌(21株)腸球菌(28株)變形桿菌(33株)表皮葡萄球菌(31株)肺炎鏈球菌(13株)綠膿桿菌(10株)A群鏈球菌(13株)B群鏈球菌(11株)10)伯肺炎桿菌(27株)質(zhì)控菌金黃色葡萄球菌ATCC 25925，大腸桿菌ATCC 25922，綠膿桿菌ATCC 278533.方法最小抑菌濃度(MIC)的測定采用試管雙倍稀釋法測定。將試驗菌株接種于2mlMH液體培養(yǎng)基中，鏈球菌加入10％的無菌兔血清，37℃培養(yǎng)6h，鏈球菌置于5％CO2恒溫箱中培養(yǎng)。取0.1ml接種于10mlMH液體培養(yǎng)基中，37℃培養(yǎng)18h，用無菌MH液體培養(yǎng)基稀釋為105CUF/ml備用。
將被試藥和陽性對照藥雙黃連注射液用MH液體培養(yǎng)基配制成一定濃度溶液，雙倍稀釋一定管數(shù)后，與備用菌液混合均勻。置37℃培養(yǎng)24h，以能抑制細(xì)菌生長的最低藥物濃度為最小抑菌濃度(MIC)。(二)試驗結(jié)果1.本發(fā)明注射液和雙黃連注射液對臨床分離菌株MIC值測定表1 本發(fā)明注射液和雙黃連注射液對臨床分離菌株MIC值測定結(jié)果本發(fā)明注射液(g/ml) 雙黃連注射液(未知)菌株 MIC50MIC90MIC范圍 MIC50MIC90MIC范圍金黃色葡萄球菌(38)0.07 0.13 0.07-2.10⑤/2 ④/2 ⑤/2-①/2大腸桿菌(21) 無作用 無作用腸球菌(28)) 0.13 0.26 0.07-2.10③/2 ②/2 ④/2-①/2變形桿菌(33) 0.02 0.03 0.02-2.10③/2 ②/2 ④/2-①/2表皮葡萄球菌(31) 0.03 0.07 0.02-2.10⑤/2 ④/2 ⑥/2-①/2肺炎鏈球菌(13)0.26 0.26 0.26-2.10②/2 ②/2 ②/2-①/2綠膿桿菌(10) 無作用 無作用A群鏈球菌(13) 2.10 2.10 1.05-2.10 無作用B群鏈球菌(11) 1.05 1.05 0.52-2.10①/2 ①/2 ②/2-①/2克雷伯肺炎桿菌(27)1.05 2.10 1.05-2.10①/2 無 ②/2-①/2注⑤/2表示原藥雙倍稀釋到第五個梯度的一半濃度。
對本發(fā)明注射液和雙黃連注射液敏感的金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、腸球菌、變形桿菌、肺炎鏈球菌有較強的抗菌作用。對克氏肺炎桿菌、A群鏈球菌、B群鏈球菌抗菌作用較雙黃連注射液強，而對大腸桿菌、綠膿桿菌抗菌作用較差(三)試驗結(jié)論本發(fā)明注射液對金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、肺炎鏈球菌、變形桿菌有明顯的抗菌作用，對A群鏈球菌、B群鏈球菌、克雷伯肺炎桿菌有一定的抗菌作用，而對綠膿桿菌、大腸桿菌的作用較差，被試藥本發(fā)明注射液與陽性對照藥雙黃連注射液的體外抗菌作用基本相近。
權(quán)利要求
1.一種治療急性肺部感染疾病的藥物，其特征在于它是由下述重量配比的原料制成的藥劑金盞銀盤1～3 黃芩0.3～1.5
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的治療急性肺部感染疾病的藥物，其特征在于所述的藥劑是任何一種藥劑學(xué)上所說的劑型。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的治療急性肺部感染疾病的藥物，其特征在于所述的藥劑是注射液。
4.權(quán)利要求3所述的治療急性肺部感染疾病的藥物的制備方法，包括以下步驟(1)金盞銀盤用5～12倍量60～90％乙醇回流提取2～4次，每次1～3小時，過濾，合并濾液，回收盡乙醇，減壓濃縮至相對密度為1.10～1.15，冷藏，過濾，濾液加2～5％明膠溶液沉淀至沉淀結(jié)束，冷藏，過濾，濾液加乙醇沉淀，使含醇量達(dá)75～90％，冷藏，取上清液，回收盡乙醇，濃縮至相對密度為1.20～1.32，即得金盞銀盤浸膏；(2)黃芩粉碎成粗粉，加8～12倍量水煎煮2～4次，每次煎煮1～2小時，合并煎煮液，減壓濃縮至1.02～1.06，調(diào)pH至1～2，80℃保溫1小時，靜置，過濾，沉淀加適量的水溶解，調(diào)pH至7～8，過濾，濾液調(diào)pH至1～2，80℃保溫1小時，靜置，過濾，得沉淀；(3)取上述沉淀與金盞銀盤浸膏混合，減壓干燥，粉碎，制得半成品；(4)取半成品和抗氧劑，加注射用水使溶解，調(diào)pH至6～8，用超濾膜超濾，濾液補加注射用水，再調(diào)pH至6～8，加入表面活性劑，用微孔膜濾過，灌封于處理好的10ml安瓿中，流通蒸氣滅菌，制得注射液。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的治療急性肺部感染疾病的藥物的制備方法，其特征在于步驟(4)中所述的抗氧劑為亞硫酸氫鈉，使用濃度為0.05％～0.3％；所述的表面活性劑為吐溫80，使用濃度為0.1％～0.5％。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種用于治療急性肺部感染疾病的藥物，它以中草藥金盞銀盤和黃芩為原料經(jīng)提取、配制成中藥注射液。本發(fā)明藥物主治風(fēng)溫肺熱引起的發(fā)熱、微惡風(fēng)寒，咳嗽，咯痰，口渴、頭痛、鼻塞、舌邊尖紅，苔薄黃或黃白相兼，脈浮數(shù)等癥，及急性肺炎，支氣管周圍炎等急性肺部感染疾病見上述癥狀者。經(jīng)藥效學(xué)試驗表明，本發(fā)明藥物具有顯著的的鎮(zhèn)痛，解熱，抗菌和抗病毒作用，對肺炎特別對急性肺炎，支氣管周圍炎等急性肺部感染有良好的治療作用。
文檔編號A61P31/00GK1424078SQ02149690
公開日2003年6月18日 申請日期2002年12月20日 優(yōu)先權(quán)日2002年12月20日
發(fā)明者張晴龍 申請人:張晴龍