專利名稱：一種脂肪酸合成酶抑制劑及其制造方法與應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及酶的抑制劑及其制造方法與應(yīng)用，特別是涉及一種脂肪酸合成酶抑制劑及其制造方法與應(yīng)用。
此外，還有研究表明脂肪酸合成酶和癌癥的發(fā)生有著密切的關(guān)系，許多癌細(xì)胞中都有異乎尋常的高表達(dá)脂肪酸合成酶，如人類乳腺癌中便呈現(xiàn)出脂肪酸合成酶的高水平表達(dá)和高活性(Kuhajda FP，Jenner K，Wood FD，et a1.Fatty acid synthesisa potential selective target for antineoplastic therapy.Proc Natl Acad SciUSA，1994，916379-6383)。對(duì)乳腺癌、前列腺癌、子宮癌和甲狀腺癌等的研究表明這些癌的惡性種類中存在脂肪酸合成酶的優(yōu)先表達(dá)。脂肪酸合成酶的表達(dá)和惡性腫瘤之間存在的關(guān)系還顯示脂肪酸合成的活性在腫瘤維持它的惡性表型的過(guò)程中起著重要作用。事實(shí)上，除了乳房和子宮內(nèi)膜外，脂肪酸合成酶在絕大多數(shù)正常組織中均受到飲食中脂肪的負(fù)調(diào)節(jié)，而相反，脂肪酸合成酶在癌細(xì)胞中卻通常是高表達(dá)，這種的組織分布特異性使得脂肪酸合成酶成為治療癌癥的一個(gè)引人注目的新靶點(diǎn)。而且已有實(shí)驗(yàn)證明在體內(nèi)抑制脂肪酸合成酶的活性對(duì)人類癌細(xì)胞確實(shí)表現(xiàn)出了選擇性的殺傷毒力(Francis P.Kuhajda，MD，2000.Fatty-Acid Synthase and humancancernew perspectives on its role in tumor bology.Nutrion 16202-208)。
脂肪酸合成酶抑制劑是人類癌細(xì)胞的選擇性細(xì)胞毒素，惡性腫瘤和FAS表達(dá)之間的關(guān)系顯示，脂肪酸合成酶的表達(dá)和其自身的活性可能對(duì)人類癌細(xì)胞的生存和生長(zhǎng)均至關(guān)重要。體外實(shí)驗(yàn)證明FAS抑制劑淺藍(lán)菌素(Cerulenin)是人類癌細(xì)胞的選擇性細(xì)胞毒素，5g/ml的淺藍(lán)菌素對(duì)人類NIHOVCAR-3卵巢癌的生長(zhǎng)抑制在72小時(shí)內(nèi)達(dá)到ID50，但對(duì)正常皮膚纖維母細(xì)胞沒(méi)有生長(zhǎng)抑制(Pizer ES，Wood FD，Heine HS，et al.Inhibition of fatty acid synthesis delays disease progression in a xenograftmodel of ovarian cancer.Cancer Res 1996；561189)。它對(duì)許多人類癌細(xì)胞系有廣譜抗性，包括乳腺(MCF-7，ZR-75-1，SKBR3，MDA435)(Kuhajda FP，Jenner K，wood FD，et al.Fatty acid synthesisa potential selective target forantineoplastic therapy.Proc Natl Acad Sci USA，1994；916379)，卵巢(OVCAR-3)(Pizer ES，Wood FD，Heine HS，et al.Inhibition of fatty acid synthesisdelays disease progression in a xenograft model of ovarian cancer.Cancer Res1996；561189)，結(jié)腸(HCT116，RKO)，白血球(HL60)(Pizer ES，Wood FD，PasternackGR，et al.Fatty acid synthase(FAS)a target for cytotoxic antimetabolitiesin HL60 promyelocytic leukemia cells.Cancer Res 1996，56(4)745-751)，前列腺(TSU-prl)。E.Pizer等發(fā)現(xiàn)淺藍(lán)菌素對(duì)癌細(xì)胞的毒性和脂肪酸合成有關(guān)(RashidA，Pizer ES，Moga M，et al.Elevated expression of fatty acid synthase andfatty acid synthetic activity in colorectal neoplasia.Am J Pathol，1997，150(1)201-208)。對(duì)脂肪酸合成酶的抑制導(dǎo)致細(xì)胞凋亡顯示癌細(xì)胞的存活是依賴于脂肪酸合成途徑的。
體內(nèi)試驗(yàn)也得到類似結(jié)果，將人類OVCAR-3移植到裸鼠體內(nèi)，24小時(shí)后用淺藍(lán)菌素處理，會(huì)提高存活率并阻止其向惡性發(fā)展(Pizer ES，Wood FD，Heine HS，et al.Inhibition of fatty acid synthesis delays disease progression in a xenograftmodel of ovarian cancer.Cancer Res 1996，56(6)1189-1193)。這種處理對(duì)腹水瘤影響最大，惡性發(fā)展從對(duì)照的65％降低到21％，對(duì)實(shí)體瘤的生長(zhǎng)代謝影響相對(duì)小一些。Pizer等的研究表明，人體內(nèi)成長(zhǎng)最快的組織子宮內(nèi)膜在增生期可在其上皮細(xì)胞表達(dá)大量脂肪酸合成酶(Pizer ES，Kurman RJ，Pasternack GR，et al.Expressionof fatty acid synthase is closely linked to proliferation and stromaldecidualization in cycling endometrium.Int J Gynecol Pathol 1996，1645-50)。用流式細(xì)胞儀對(duì)HL-60細(xì)胞進(jìn)行分析顯示，當(dāng)抑制了脂肪酸合成時(shí)細(xì)胞聚集在G1期而不能通過(guò)細(xì)胞周期。在人類結(jié)腸癌細(xì)胞系中還發(fā)現(xiàn)，抑制FAS后90分鐘內(nèi)DNA合成受到抑制，6小時(shí)后凋亡開(kāi)始。這些發(fā)現(xiàn)都表明脂肪酸合成與人體組織的增生存在某種聯(lián)系。
另一類抑制劑——乙酰輔酶A羧化酶(ACC)抑制劑，如TOFA(Halvorson DL.Inhibition of fatty acid synthesis in isolated adipocytes by 5-(tetradecyloxy)-2-furoic acid.Lipids，1981，19851-856)，也可以抑制細(xì)胞中脂肪酸的合成，但它卻不能引發(fā)癌細(xì)胞的凋亡，并且ACC抑制劑還能使癌細(xì)胞免受FAS抑制劑的毒害。ACC催化的反應(yīng)位于FAS催化的反應(yīng)的上游，前者使乙酰輔酶A羧化成丙二酰輔酶A，后者則繼續(xù)將乙酰輔酶A和丙二酰輔酶A縮合成脂肪酸。
進(jìn)一步研究?jī)煞N抑制劑對(duì)癌細(xì)胞毒性的差異，發(fā)現(xiàn)兩種抑制劑處理細(xì)胞后，細(xì)胞內(nèi)丙二酰輔酶A的含量水平發(fā)生不同變化。利用HPLC檢測(cè)用上述兩種酶抑制劑處理過(guò)的細(xì)胞中丙二酰輔酶A的含量，發(fā)現(xiàn)用20μg/ml的TOFA處理后，丙二酰輔酶A的含量比對(duì)照低60％，而在分別用10μg/ml的淺藍(lán)菌素和另一個(gè)化學(xué)合成的脂肪酸合成酶抑制劑C75處理的細(xì)胞中，丙二酰輔酶A的含量分別升高930％和370％(PizerES，Thupari J，Han WF，et al.Malonyl-coenzyme-A is a potential mediatorof cytotoxicity induced by fatty-acid synthase inhibition in human breastcancer cells and xenografts.Cancer Res，2000，60(2)213-218)。顯然，高水平的丙二酰輔酶A積累是僅由脂肪酸合成酶抑制劑帶來(lái)的一個(gè)顯著特點(diǎn)。脂肪酸合成酶抑制劑引發(fā)癌細(xì)胞凋亡可能是由丙二酰輔酶A介導(dǎo)產(chǎn)生。丙二酰輔酶A是細(xì)胞能量代謝中一個(gè)十分重要的調(diào)控分子，它可以抑制線粒體外膜上肉堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶I(CPT I)的活性。CPT I可結(jié)合到另一種細(xì)胞因子Bcl-2上并使之進(jìn)一步阻斷細(xì)胞凋亡。如果抑制了CPT I，Bcl-2可能就不發(fā)生作用，細(xì)胞隨之發(fā)生凋亡。
由于脂肪酸合成酶極有可能成為肥胖癥和癌癥的靶點(diǎn)，其抑制劑極有可能開(kāi)發(fā)出全新的癌癥和肥胖癥的藥物，因此，研制和開(kāi)發(fā)脂肪酸合成酶的抑制劑將具有重大的現(xiàn)實(shí)意義及開(kāi)發(fā)潛力。
本發(fā)明的脂肪酸合成酶抑制劑是用有機(jī)溶劑或/和水的混合物，從祁門紅茶中萃取出的物質(zhì)。
所述有機(jī)溶劑效果較好的為極性有機(jī)溶劑，其中，優(yōu)選的是乙醇，最優(yōu)選的是30％-70％的乙醇，更優(yōu)選的是40-50％的乙醇。
本發(fā)明的另一目的是提供一種制造上述脂肪酸合成酶抑制劑的方法。
生產(chǎn)上述脂肪酸合成酶抑制劑的方法，包括以下步驟(1)將粉碎后的祁門紅茶置于容器中，加入有機(jī)溶劑或/和水的混合物；(2)在20℃-40℃條件下萃取1-5小時(shí)；(3)離心或過(guò)濾，收集上清液。
在上述生產(chǎn)方法中，所述加入的有機(jī)溶劑或/和水的混合物的重量可以為所述祁門紅茶重量的5-50倍，其中優(yōu)選的為10-20倍；所述有機(jī)溶劑為極性有機(jī)溶劑，其中，優(yōu)選乙醇，最優(yōu)選的是濃度為30％-70％的乙醇，更優(yōu)選的是濃度為40％-50％的乙醇。
如果萃取在攪拌、常溫條件下進(jìn)行，則萃取2小時(shí)即可；如果離心是在8000轉(zhuǎn)/分鐘的條件下進(jìn)行，則進(jìn)行15分鐘。
以本發(fā)明的脂肪酸合成酶抑制劑為活性成分生產(chǎn)的藥物，特別是用于減肥和用于治療癌癥的藥物，是本發(fā)明脂肪酸合成酶抑制劑的主要應(yīng)用領(lǐng)域。需要的時(shí)候，在這些藥物中還可以加入一種或多種藥學(xué)上可接受的載體。所述載體包括藥學(xué)領(lǐng)域常規(guī)的稀釋劑、賦形劑、填充劑、粘合劑、濕潤(rùn)劑、崩解劑、吸收促進(jìn)劑、表面活性劑、吸附載體、潤(rùn)滑劑等，必要時(shí)還可以加入香味劑、甜味劑等。
本發(fā)明的藥物可以制成注射液、片劑、粉劑、粒劑、膠囊、口服液、膏劑、霜?jiǎng)┑榷喾N形式。各種劑型的藥物均可以按照藥學(xué)領(lǐng)域的常規(guī)方法制備。
本發(fā)明的脂肪酸合成酶抑制劑還可以作為食品添加劑、日用化學(xué)品(特別是化妝品)添加劑及保健品添加劑等而得到廣泛應(yīng)用。
祁門紅茶簡(jiǎn)稱“祁紅”，常常列入我國(guó)十大名茶之一。主要產(chǎn)地為安徽省祁門、東至、貴池、石臺(tái)、黟縣等。茶的名稱得名于祁門縣。祁門紅茶葉條索緊細(xì)秀長(zhǎng)，湯色紅艷明亮，特別是其香氣酷似果香，又帶蘭花香，清鮮而且持久。既可單獨(dú)泡飲，也可加入牛奶調(diào)飲。
本發(fā)明巧妙地將祁門紅茶碎末用有機(jī)溶劑或/和水的混合物，特別是乙醇和水的混合物進(jìn)行萃取，創(chuàng)造性地揭示出，所萃取出的物質(zhì)是有效的脂肪酸合成酶抑制劑。由于祁門紅茶作為飲品已有一百多年歷史，沒(méi)有毒性，因而為該脂肪酸合成酶抑制劑的進(jìn)一步開(kāi)發(fā)利用提供了廣闊的前景。實(shí)驗(yàn)表明脂肪酸合成酶抑制劑可以有效抑制脂肪酸合成酶的活性，而脂肪酸合成酶活性的強(qiáng)弱直接影響到生物細(xì)胞內(nèi)合成脂肪的多少。也就是說(shuō)，抑制了脂肪酸合成酶的活性，生物細(xì)胞內(nèi)合成脂肪的過(guò)程會(huì)弱化，脂肪含量即會(huì)得到控制，甚至減少，更重要的是脂肪酸合成酶抑制劑還可以通過(guò)抑制腦中前噬信號(hào)肽Y的表達(dá)以控制動(dòng)物的食欲，因此本發(fā)明的脂肪酸合成酶抑制劑可以作為減肥藥物的活性成分，生產(chǎn)口服液、沖劑、膠囊、片劑、針劑等各種劑型的減肥藥物。脂肪酸合成酶抑制劑具有對(duì)癌細(xì)胞的選擇性殺傷作用，因此以本發(fā)明的脂肪酸合成酶抑制劑為活性成分的各種劑型的治療癌癥的藥物，由于沒(méi)有副作用，將會(huì)得到非常廣泛的應(yīng)用。本發(fā)明的脂肪酸合成酶抑制劑還可以作為保健品、食品的添加劑，比如，可作為高熱量食品的添加劑，使喜食高熱量食品的人既滿足了口福，又不用擔(dān)心會(huì)增胖。本發(fā)明的脂肪酸合成酶抑制劑還可以作為美容日用化學(xué)品的添加劑，如可以制成減肥霜，對(duì)需要減肥的部位進(jìn)行定點(diǎn)涂抹。同時(shí)，由于祁門紅茶產(chǎn)量很大來(lái)源廣泛，技術(shù)成熟，為脂肪酸合成酶抑制劑的工業(yè)化生產(chǎn)提供了保證。
下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說(shuō)明。
脂肪酸合成酶活性采用乙酰輔酶A、丙二酰輔酶A、NADPH為底物的標(biāo)準(zhǔn)測(cè)活方法測(cè)定(W.X.Tian et al.，1985.J.Biol.Chem.，260(20)11375-11387；田維熙等，1996.不同生長(zhǎng)期蛋雞的體脂水平和肝臟脂肪酸合成酶活性的關(guān)系.生物化學(xué)雜志，12(2)234-236)。
脂肪酸合成酶(FAS)活性被抑制的程度用I％(抑制程度)來(lái)表示，其計(jì)算方法為底物中加入脂肪酸合成酶抑制劑提取液的為實(shí)驗(yàn)組，測(cè)得其脂肪酸合成酶活性的數(shù)值為A。以底物中只加入相應(yīng)提取溶劑的為對(duì)照，測(cè)定其脂肪酸合成酶活性值，該值用A0表示，并設(shè)定其為100％；RA％(剩余活性)＝A/A0×100％I％(抑制程度)＝100％-RA％實(shí)施例1用乙醇從祁門紅茶中萃取脂肪酸合成酶抑制劑(1)取祁門紅茶，粉碎后置于容器中，加入10倍重量的50％乙醇，充分?jǐn)嚢韬竺芊猓?2)在室溫、攪拌的條件下萃取2小時(shí)；(3)將上述萃取液在8000轉(zhuǎn)/分鐘的條件下離心15分鐘，取上清液，即為含脂肪酸合成酶抑制劑的提取液，以備下面的實(shí)驗(yàn)使用。
可以用與該實(shí)施例相同的方法，用不同濃度梯度的乙醇(如10％，30％，50％，70％，90％，100％)、水來(lái)萃取脂肪酸合成酶抑制劑。如果是在非攪拌條件下進(jìn)行萃取，則至少應(yīng)半小時(shí)攪拌一次，萃取3-4小時(shí)。另外，還可以用弱極性的丁醇、丙酮等來(lái)萃取，但實(shí)驗(yàn)證明溶解性不高，在非極性溶劑中不溶。用該實(shí)施例的方法自祁-門紅茶中萃取脂肪酸合成酶抑制劑，攪拌條件下，萃取時(shí)間只要不低于1小時(shí)，溫度在20-100℃之間均能萃取出有效成分。在實(shí)際生產(chǎn)中，萃取后一般采用壓濾機(jī)來(lái)收取上清液。
1克祁門紅茶用10ml 50％乙醇溶液萃取后，將萃取液中的乙醇揮發(fā)去掉，120℃烘干2小時(shí)，可得到221mg的干物質(zhì)(標(biāo)準(zhǔn)偏差(SD)為8.8mg)。
實(shí)施例2相同的實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)溶液中加入不同數(shù)量的脂肪酸合成酶抑制劑對(duì)FAS活性的影響(測(cè)活的酶加入量為每毫升實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)溶液2.72微克)。
表1中列出了在相同的實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)溶液中加入不同數(shù)量的脂肪酸合成酶抑制劑的處理劑量及實(shí)驗(yàn)結(jié)果

由以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以看出，隨著加入提取液量的增加，F(xiàn)AS酶活性被抑制程度I％升高，當(dāng)每毫升實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)溶液中加入0.15微升的提取液時(shí)，I％已高達(dá)80％。
實(shí)施例3萃取溶劑對(duì)脂肪酸合成酶活性的影響取與實(shí)施例2相同的實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)溶液，分別向每毫升溶液中加0.10、0.2、0.3、0.4、0.5微升50％的乙醇，加入的酶量也與實(shí)例2相同，檢測(cè)計(jì)算FAS酶活性被抑制的程度I％，結(jié)果是I％均為0，表明所加量的萃取溶劑乙醇不會(huì)抑制脂肪酸合成酶的活性，抑制脂肪酸合成酶活性的是從祁門紅茶中萃取出的物質(zhì)。
實(shí)施例4脂肪酸合成酶抑制劑的半抑制濃度用實(shí)施例1所得的提取液進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，結(jié)果表明，要達(dá)到I％＝50％，每毫升溶液中需加入0.081微升的提取液，折算成加入祁門紅茶的毫克數(shù)為0.016，折算成抑制每毫克酶的活性需加入祁門紅茶的毫克數(shù)為5.9，半抑制濃度很低，說(shuō)明本發(fā)明的脂肪酸合成酶抑制劑對(duì)脂肪酸合成酶的活性有強(qiáng)烈的抑制作用，并且所需有效劑量很低。
實(shí)施例5不同萃取劑對(duì)萃取出的脂肪酸合成酶抑制劑活性的影響分別用溶劑水，50％乙醇，乙醇，丙酮，丁醇，乙醚，石油醚按照實(shí)例1的方法來(lái)萃取脂肪酸合成酶抑制劑，然后各取1微升在相同的實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)溶液中對(duì)相同量的酶進(jìn)行抑制活性檢測(cè)，結(jié)果如表2所示表2

從以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以看出，本發(fā)明的脂肪酸合成酶抑制劑可以溶于水，水和乙醇的混合物等極性偏高的溶劑中，而在極性低的溶劑和非極性溶劑中溶解性不高。
實(shí)施例6不同比例的水和乙醇的混合物對(duì)萃取脂肪酸合成酶抑制劑活性的影響分別用水，10％，30％，50％，70％，90％的乙醇為溶劑按照實(shí)施例1的方法來(lái)萃取脂肪酸合成酶抑制劑，然后檢測(cè)它們對(duì)FAS活性的影響.(每毫升實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)溶液中含酶10微克)，結(jié)果如表3所示表3

從以上結(jié)果可以看出，乙醇的濃度對(duì)萃取液中有效成份的含量具有顯著的影響，比較優(yōu)選的是濃度為30％-70％的乙醇，最優(yōu)選的是濃度為40-50％的乙醇。
實(shí)施例7萃取液對(duì)脂肪酸合成酶不可逆抑制性的判斷把一定量實(shí)施例1所得的萃取液與酶混合，使酶的剩余活性接近0％，放置80分鐘，然后過(guò)Sephadex G25離心柱。如果其中的抑制劑和酶是可逆結(jié)合的話，過(guò)柱后，小分子會(huì)留在柱上，酶的活性就會(huì)恢復(fù)，若是不可逆結(jié)合，就會(huì)和酶一起通過(guò)凝膠柱，酶的活性不能恢復(fù)。為防止過(guò)柱本身對(duì)酶造成失活而產(chǎn)生不可逆的假像，同時(shí)用不加萃取液的酶做一對(duì)照。實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，對(duì)照組的酶過(guò)柱后活性尚剩70％，而與萃取液混合的酶的活性沒(méi)有恢復(fù)，說(shuō)明萃取液除對(duì)脂肪酸合成酶有很強(qiáng)的快結(jié)合外對(duì)脂肪酸合成酶有不可逆抑制。
實(shí)施例8、萃取液對(duì)大鼠的減肥作用(1)處理萃取液，去除有機(jī)溶劑的影響將實(shí)施例1中的提取液在常溫下干燥，再用同劑量的水溶解，去除沉淀；
(2)將30只標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)大鼠隨機(jī)分為3組，10只一組，分別為陰性對(duì)照組、陽(yáng)性對(duì)照組、給藥組。陰性對(duì)照組大鼠每只每日灌喂2ml水；陽(yáng)性對(duì)照組大鼠每只每日灌喂2ml 0.1mg/ml芬氟拉明、給藥組大鼠每只每日灌喂2ml步驟(1)處理水液。
(3)每隔一日測(cè)定每只大鼠的體重、攝食量，實(shí)驗(yàn)持續(xù)20天，分為實(shí)驗(yàn)中期、全期計(jì)算3組大鼠的體重、攝食量平均值并進(jìn)行t校驗(yàn)分析。實(shí)驗(yàn)最后一天斷頸椎處死大鼠按標(biāo)準(zhǔn)方法取血清測(cè)定血糖，甘油三酯，膽固醇和低密度脂蛋白，取出每組大鼠的肝分別勻漿，離心后測(cè)定其上清液脂肪酸合成酶活性，結(jié)果分別如表4、表5、表6所示表4、大鼠體重變化表

表5、大鼠攝食量變化表

表6、大鼠血清和肝脂肪酸合成酶數(shù)據(jù)

t校驗(yàn)結(jié)果表明本發(fā)明的脂肪酸合成酶抑制劑通過(guò)口服能起到比陽(yáng)性對(duì)照更顯著的減輕體重和抑制食欲的效果，通過(guò)測(cè)定血清中的各項(xiàng)指標(biāo)發(fā)現(xiàn)該抑制劑還能顯著地降低甘油三酯的含量，并能顯著降低肝中脂肪酸合成酶的活性。在實(shí)驗(yàn)劑量下，給藥組大鼠未表現(xiàn)出任何不良反應(yīng)，活動(dòng)正常，沒(méi)有觀察到明顯毒性。
實(shí)施例9、萃取液對(duì)癌細(xì)胞的作用(1)處理萃取液，去除有機(jī)溶劑的影響將實(shí)施例1中的提取液在常溫下干燥，再用同劑量的水溶解，去除沉淀；(2)在標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)條件下，把人體乳腺癌細(xì)胞MCF-7和成纖維細(xì)胞培養(yǎng)在RPMI培養(yǎng)基1640(含10％FBS)中，細(xì)胞分裝在96孔板中，每孔8000個(gè)細(xì)胞，培養(yǎng)過(guò)夜，然后分別加入不同量的處理后的提取液(從5μl-50μl)，同時(shí)用同劑量的溶劑(水)做陰性對(duì)照，分別用5氟尿嘧啶和順鉑做陽(yáng)性對(duì)照。加完樣后，將細(xì)胞在37℃度下保溫72小時(shí)，然后用MTT染色，37℃度下保溫4小時(shí)，加DMSO終止反應(yīng)，在570nm下測(cè)定吸收值，通過(guò)線性回歸求出其半抑制濃度(IC50)。
結(jié)果表明，加入抑制劑的MCF-7細(xì)胞的生長(zhǎng)受明顯抑制；加入溶劑(水)的對(duì)照組無(wú)生長(zhǎng)抑制現(xiàn)象。上述結(jié)果表明，本發(fā)明的脂肪酸合成酶抑制劑對(duì)癌細(xì)胞確實(shí)有選擇性殺傷作用，IC50為0.698±0.624mg茶葉/ml。陽(yáng)性對(duì)照5氟尿嘧啶、順鉑的IC50分別為9.43±4.88×10-3mg/ml和4.295±1.415×10-3mg/ml。
權(quán)利要求
1.脂肪酸合成酶抑制劑，它是用有機(jī)溶劑或/和水從祁門紅茶中萃取出的物質(zhì)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的脂肪酸合成酶抑制劑，其特征在于所述有機(jī)溶劑為極性有機(jī)溶劑。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的脂肪酸合成酶抑制劑，其特征在于所述極性有機(jī)溶劑為乙醇水溶液，乙醇的優(yōu)選濃度為30％-70％，更優(yōu)選的濃度為40％-50％。
4.一種生產(chǎn)權(quán)利要求1所述脂肪酸合成酶抑制劑的方法，包括以下步驟(1)將粉碎后的祁門紅茶置于容器中，加入有機(jī)溶劑或/和水的混合物；(2)在20℃-40℃條件下萃取1-5小時(shí)；(3)離心或過(guò)濾，收集上清液。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的生產(chǎn)脂肪酸合成酶抑制劑的方法，其特征在于所述加入的有機(jī)溶劑或/和水的混合物的重量為所述祁門紅茶重量的5-50倍；其中優(yōu)選的為10-20倍；所述有機(jī)溶劑為極性有機(jī)溶劑，其中，優(yōu)選乙醇水溶液，最優(yōu)選的是濃度為30％-70％的乙醇，更優(yōu)選的是濃度為40-50％的乙醇。
6.以權(quán)利要求1所述的脂肪酸合成酶抑制劑為活性成分的減肥藥。
7.以權(quán)利要求1所述的脂肪酸合成酶抑制劑為活性成分的預(yù)防和治療癌癥的藥物。
8.權(quán)利要求1所述的脂肪酸合成酶抑制劑作為食品添加劑的應(yīng)用。
9.權(quán)利要求1所述的脂肪酸合成酶抑制劑作為日用化學(xué)品添加劑的應(yīng)用。
10.權(quán)利要求1所述的脂肪酸合成酶抑制劑作為保健品添加劑的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種脂肪酸合成酶抑制劑及其制造方法與應(yīng)用，涉及酶的抑制劑及其制造方法與應(yīng)用。本發(fā)明的目的是提供一種能有效抑制脂肪酸合成酶活性的脂肪酸合成酶抑制劑。本發(fā)明的脂肪酸合成酶抑制劑是用有機(jī)溶劑或/和水從祁門紅茶中萃取出的物質(zhì)。所述有機(jī)溶劑效果較好的為極性有機(jī)溶劑，其中，優(yōu)選的是乙醇水溶液。生產(chǎn)脂肪酸合成酶抑制劑的方法，包括以下步驟(1)將粉碎后的祁門紅茶置于容器中，加入有機(jī)溶劑或水或有機(jī)溶劑與水的混合物；(2)在20℃－40℃條件下萃取1－5小時(shí)；(3)離心或過(guò)濾，收集上清液。以本發(fā)明的脂肪酸合成酶抑制劑為活性成分的藥物及添加劑將會(huì)得到非常廣泛的應(yīng)用。
文檔編號(hào)A61P3/04GK1475249SQ0215528
公開(kāi)日2004年2月18日 申請(qǐng)日期2002年12月12日 優(yōu)先權(quán)日2002年8月13日
發(fā)明者田維熙, 王玄, 吳曉東 申請(qǐng)人:田維熙