專利名稱：用于調(diào)節(jié)腸動力和食物攝入的新型多環(huán)有機化合物的制作方法
發(fā)明的一般領域本發(fā)明涉及肥胖治療和食物攝入調(diào)節(jié)領域，更具體地說，本發(fā)明涉及利用新型多環(huán)有機化合物調(diào)節(jié)腸動力以及治療肥胖的組合物及其方法。
背景技術：
過量飲食造成的肥胖是危害健康的一個主要因素。肥胖可以增加患糖尿病，心臟病，腫瘤和其他慢性疾病的風險，另外也會增加對肢體生理功能或機械功能的限制。盡管肥胖所具有的這些有害健康的效應已被科學研究所證明，并且也被公眾所熟知，但是對于很多人來說，有效控制個體的食欲和飲食過量依然是一個難以達到的目標。在北美地區(qū)，大約有25％的兒童被認為體重超標或肥胖。單是北美地區(qū)每年花費在減肥上的費用大約就有400億美元，并且這一數(shù)字還在不斷上升。最近的研究表明在加拿大每年治療肥胖的花費據(jù)保守估計也有18億美元，約占治療各種疾病總醫(yī)療支出的2.4％(見“肥胖的代價18億美元”，加拿大藥業(yè)聯(lián)合會，1999年3月，11頁)。
當前市場上所銷售的減肥藥物大部分都是通過作用于中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)通路以誘導食欲降低而發(fā)揮作用的。但是，此類藥物具有很多中樞神經(jīng)系統(tǒng)相關副作用，如焦慮，并且具有造成慢性健康損傷的潛在效應，如高血壓，心血管疾病和糖尿病。當前另外一種治療肥胖的方法是通過攝入“發(fā)泡”產(chǎn)品而不是正常食物來控制食欲。這些發(fā)泡產(chǎn)品會導致改變營養(yǎng)狀況的問題，因為在這些發(fā)泡產(chǎn)品中含有的必須營養(yǎng)物質的范圍不夠寬。而且，食用了發(fā)泡產(chǎn)品的人可能會拒絕攝入任何食品，即使是必須營養(yǎng)物質。
抑制食欲藥物治療肥胖的方式是很不理想的，因為一旦停止服用藥物體重通常都會反彈。而且其嚴重的副作用包括增加疾病如初級肺高血壓的風險也限制了這類藥物的應用。例如，食欲抑制藥物芬氟拉明和右芬氟拉明最近被其制造商撤出市場就是因為它們對于肺臟和心臟具有潛在的嚴重副作用。
最近出現(xiàn)的一種肥胖治療方法是利用藥物干擾脂肪在小腸內(nèi)的吸收。例如，這類藥物可以抑制消化脂肪的胰腺酶的分泌。未消化的脂肪通過腸道而被排出體外。脂肪吸收的減少會導致油性便，內(nèi)衣有油性污點，腸道排氣，頻繁排便以及脂溶性營養(yǎng)物質如維生素A，D，E的吸收減少。
到目前為止，還沒有一種醫(yī)療措施可以使體重下降而無任何有損健康的副作用或增加疾病的風險。因此還需要開發(fā)更有效的組分和方法來控制人類以及其他動物食物攝入和治療持續(xù)的體重增加即肥胖，而不產(chǎn)生有害健康的營養(yǎng)及醫(yī)療副作用。
發(fā)明概述本發(fā)明提供了控制人及其他動物食物攝入的組合物和方法。更具體地說，本發(fā)明提供了非天然的組合物，該組合物包括此前所未知的多環(huán)有機化合物，該化合物在結構上與一組有機化合物已知的如能調(diào)節(jié)人和其他動物腸動力的單端孢霉烯相類似。本發(fā)明所描述的某些化合物能誘導一種腸動力活動(進食模式)，使人和動物產(chǎn)生飽脹感，從而可用于減少個體的食物攝入量。另外一些化合物可以增強一種腸動力活動(禁食模式)，這類活動的特征是使人和其他動物處于未喂養(yǎng)或禁食狀態(tài)，從而可用于刺激個體的食物攝入或者用于對抗或調(diào)和其他誘導進食模式化合物的效應。
最近的一些發(fā)現(xiàn)使我們開始了解某些天然的單端孢霉烯霉菌毒素(在被某些種類霉菌污染的谷物，飼料和食品中含有)是如何誘導人和其他脊椎動物有飽脹感和拒食的，以及如何誘導能調(diào)節(jié)腸動力活動(腸道動力)模式的神經(jīng)元環(huán)路的，該腸動力活動可以推動食物通過腸道(見美國臨時申請60/143,054號，1999年7月6日提出申請；和國際PCT申請PCT/CA00/00790號，2000年7月6日提出申請；本文已納入作為參考)。本發(fā)明的方法包括給予本文所描述的化合物，改變腸動力模式，即腸道平滑肌組織的收縮，舒張和靜息模式，從而調(diào)節(jié)食物攝入量。刺激腸動力活動的進食模式產(chǎn)生飽脹感信號，即飽滿的感覺，可以縮短個體進食或喂養(yǎng)的時間。因此，刺激腸動力模式的化合物可用于本發(fā)明的治療方法，如治療肥胖的方法，其目的在于限制食物攝入量。另外一方面，能增強禁食模式或干擾腸動力進食模式的化合物一般用于增加進食或喂養(yǎng)時間，因為身體不會產(chǎn)生飽脹感信號。
在一個實施方式中，本發(fā)明的化合物含有化學式I所示的腸動力調(diào)節(jié)化合物“8-氧-取代的-7α，15-碳酸鹽化合物”，該化合物結構如下(包括有選擇地對化學結構中的各種原子和基團進行單端孢霉烯類型的編號)
其中，x代表9位碳原子和10位碳原子之間的單鍵或雙鍵；R1和R2分別代表氫原子；C1-C6的烷基；C1-C6的芳烷基；或?；鵆(O)R5，其中R5選自C1-C6的烷基；C2-C6的烯基；C2-C6的炔基；苯基；被選自鹵素、烷基(如甲基)、烷氧基(如甲氧基)、硫代甲基、亞硫酰甲基、硫酰甲基及其組合的取代基取代的苯基；五元或六元雜芳環(huán)；或被選自鹵素、烷基(如甲基)、烷氧基(如甲氧基)、硫代甲基、亞硫酰甲基、硫酰甲基及其組合的取代基取代的五元或六元雜芳環(huán)。
結構式I的優(yōu)選代表例子包括3α-乙酰氧基-12，13-環(huán)氧-8α-羥基單端孢霉-9-烯-7α，15-碳酸鹽(標示為EN139499)；3α，8α-二乙酰氧基-12，13-環(huán)氧單端孢霉-9-烯-7α，15-碳酸鹽(標示為EN139500)；和3α，8α-二乙酰氧基-12，13-環(huán)氧-9α-甲基單端孢霉(trichothecan)-7α，15-碳酸鹽(標示為EN139507)。
在另一個實施方式中，本發(fā)明的組合物含有一個如下面結構式II所示的腸動力調(diào)節(jié)“乙縮醛化合物”(包括有選擇地對化學結構中的各種原子和基團進行單端孢霉烯類型的編號) 其中，x代表9位碳原子和10位碳原子之間的單鍵或雙鍵；R1和R2分別代表氫原子；C1-C6的烷基；C1-C6的芳烷基；或?；鵆(O)R5，其中R5選自
C1-C6的烷基；C2-C6的烯基；C2-C6的炔基；苯基；被選自鹵素、烷基(如甲基)、烷氧基(如甲氧基)、硫代甲基、亞硫酰甲基、硫酰甲基及其組合的取代基取代的苯基；五元或六元雜芳環(huán)；或被選自鹵素、烷基(如甲基)、烷氧基(如甲氧基)、硫代甲基、亞硫酰甲基、硫酰甲基及其組合的取代基取代的五元或六元雜芳環(huán)。
R3和R4分別代表氫原子；C1-C6的烷基；苯基；被選自鹵素、烷基(如甲基)、烷氧基(如甲氧基)、硫代甲基、亞硫酰甲基、硫酰甲基及其組合的取代基取代的苯基；五元或六元雜芳環(huán)；或R3和R4和乙縮醛的碳原子一起形成具有5、6或7個碳原子的碳環(huán)。
結構式II的優(yōu)選代表例子包括3α-乙酰氧基-7α，15-苯亞甲基-12，13-環(huán)氧-9α-甲基單端孢霉-8α-醇(標示為EN139501)和7α，15-苯亞甲基-3α，8α-二乙酰氧基-12，13-環(huán)氧-9α-甲基單端孢霉(trichothecane)(標示為EN139505)。
在另一個實施方式中，本發(fā)明的組合物含有一個如下面結構式III所示的腸動力調(diào)節(jié)“7α，15-二醇”化合物(包括有選擇地對化學結構中的各種原子和基團進行單端孢霉烯類型的編號) 其中，x代表9位碳原子和10位碳原子之間的單鍵或雙鍵；R1和R2分別代表氫原子；C1-C6的烷基；C1-C6的芳烷基；或酰基C(O)R5，其中R5選自C1-C6的烷基；C2-C6的烯基；C2-C6的炔基；苯基；被選自鹵素、烷基(如甲基)、烷氧基(如甲氧基)、硫代甲基、亞硫酰甲基、硫酰甲基及其組合的取代基取代的苯基；五元或六元雜芳環(huán)；被選自鹵素、烷基(如甲基)、烷氧基(如甲氧基)、硫代甲基、亞硫酰甲基、硫酰甲基及其組合的取代基取代的五元或六元雜芳環(huán)。
結構式III的優(yōu)選代表例子包括3α-乙酰氧基-12，13-環(huán)氧-9α-甲基單端孢霉-7α，8α，15-三醇(標示為EN139503)和3α，8α-二乙酰氧基-12，13-環(huán)氧-9α-甲基單端孢霉-7α，15-二醇(標示為EN139506)。
在另一個實施方式中，本發(fā)明的組合物含有一個如下面結構式IV所示的腸動力調(diào)節(jié)8-酮-7α，15-碳酸鹽化合物(包括有選擇地對化學結構中的各種原子和基團進行單端孢霉烯類型的編號) 其中，x代表9位碳原子和10位碳原子之間的單鍵；R2代表氫原子；C1-C6的烷基；C1-C6的芳烷基；或?；鵆(O)R5，其中R5選自C1-C6的烷基；C2-C6的烯基；C2-C6的炔基；苯基；被選自鹵素、烷基(如甲基)、烷氧基(如甲氧基)、硫代甲基、亞硫酰甲基、硫酰甲基及其組合的取代基取代的苯基；
五元或六元雜芳環(huán)；和被選自鹵素、烷基(如甲基)、烷氧基(如甲氧基)、硫代甲基、亞硫酰甲基、硫酰甲基及其組合的取代基取代的五元或六元雜芳環(huán)。
結構式IV的優(yōu)選代表例子包括3α-乙酰氧基-12，13-環(huán)氧-9α-甲基單端孢霉-8-酮-7α，15-碳酸鹽(標示為EN139511)和3α-苯甲酸基-12，13-環(huán)氧單端孢霉-9-烯-8-on-7α，15碳酸鹽(標示為EN139514)。
在另一個實施方式中，本發(fā)明的組合物含有一個如下面結構式V所示的腸動力調(diào)節(jié)8-酮-12，13-環(huán)氧-化合物 其中，R2代表氫原子；C1-C6的烷基；C1-C6的芳烷基；或酰基C(O)R5，其中R5選自C1-C6的烷基；C2-C6的烯基；C2-C6的炔基；苯基；被選自鹵素、烷基(如甲基)、烷氧基(如甲氧基)、硫代甲基、亞硫酰甲基、硫酰甲基及其組合的取代基取代的苯基；五元或六元雜芳環(huán)；和被選自鹵素、烷基(如甲基)、烷氧基(如甲氧基)、硫代甲基、亞硫酰甲基、硫酰甲基及其組合的取代基取代的五元或六元雜芳環(huán)；以及R3和R4分別代表氫原子；C1-C6的烷基；苯基；被選自鹵素、烷基(如甲基)、烷氧基(如甲氧基)、硫代甲基、亞硫酰甲基、硫酰甲基及其組合的取代基取代的苯基；
五元或六元雜芳環(huán)；或R3和R4和乙縮醛的碳原子一起形成具有5、6或7個碳原子的碳環(huán)。
結構式V的優(yōu)選代表例子包括而不限于3α-乙酰氧基-7α，15-苯亞甲基-12，13-環(huán)氧單端孢霉-8-酮(標示為EN139519)和7α，15-苯亞甲基-12，13-環(huán)氧-9β-羥基單端孢霉-8-酮(標示為EN139520)。
在另一個實施方式中，本發(fā)明的組合物含有一個如下面結構式VI所示的腸動力調(diào)節(jié)8-酮-12α-羥基化合物 其中，R2代表氫原子；C1-C6的烷基；C1-C6的芳烷基；或酰基C(O)R5，其中R5選自C1-C6的烷基；C2-C6的烯基；C2-C6的炔基；苯基；被選自鹵素、烷基(如甲基)、烷氧基(如甲氧基)、硫代甲基、亞硫酰甲基、硫酰甲基及其組合的取代基取代的苯基；五元或六元雜芳環(huán)；和被選自鹵素、烷基(如甲基)、烷氧基(如甲氧基)、硫代甲基、亞硫酰甲基、硫酰甲基及其組合的取代基取代的五元或六元雜芳環(huán)；以及R3和R4分別代表氫原子；C1-C6的烷基；苯基；被選自鹵素、烷基(如甲基)、烷氧基(如甲氧基)、硫代甲基、亞硫酰甲基、硫酰甲基及其組合的取代基取代的苯基；
五元或六元雜芳環(huán)；或R3和R4和乙縮醛的碳原子一起形成具有5、6或7個碳原子的碳環(huán)。
結構式VI的優(yōu)選代表例子包括而不限于7α，15-苯亞甲基-9α，12β-二甲基-3α，12α-二羥基單端孢霉-8-酮(標示為EN139522)。
用于本發(fā)明組合物和方法的另一個化合物示12，13-環(huán)氧單端孢霉-9-烯-3α，7α，8α，15-四醇(標示為EN139518)。
本發(fā)明的另一方面涉及含有本文所描述的任何腸動力調(diào)節(jié)化合物和藥學上可接受的載體的藥用組合物。
本發(fā)明還涉及調(diào)節(jié)個體食物攝入和治療肥胖的方法，包括給予個體本文所描述的組合物，組合物的劑量足以誘導個體產(chǎn)生飽脹感或拒食。在這些方法中，本發(fā)明的組合物可以通過任一途徑給藥。優(yōu)選的是口服給藥。
附圖簡述

圖1A-1G所示為本發(fā)明某些有代表性的化合物的分子結構和標示EN139499，EN139500，EN139501，EN139502，EN139503，EN139504，EN139505，EN139506，EN139507，EN139508，EN139511，EN139514，EN139518，EN139519，EN139520和EN139522。為了使圖形清晰，只有出現(xiàn)在分子中的某些氫原子(H)被標記在圖示的結構中。Ph＝苯基。
圖2所示為一段腸動力活動進食模式的誘導記錄，共記錄了根據(jù)Krantis等人的方法(1996)用EN139499處理的麻醉Sprague-Dawley雄性大鼠十二指腸上的兩個位點(D1和D2)和胃上的一個位點(S1)。圖2也顯示了特征性的腸動力活動禁食模式，記錄的前一部分(t＝8分鐘到t＝40分鐘之間)顯示在給予化合物EN139499之前十二指腸(D1和D2)交替出現(xiàn)組群活動和組群間活動。給予EN139499(垂直箭頭)后，在十二指腸(D1和D2)由于活動過度緊密模式(intense pattern)的誘導出現(xiàn)典型的腸動力活動的進食模式，同時在胃中(S1)出現(xiàn)組織動力活動的抑制或降低。
圖3以柱形圖表示化合物EN139499處理(每公斤體重10mg，靜脈注射)對麻醉大鼠十二指腸上的位點D1出現(xiàn)的腸動力活動舒張幅度的影響。舒張的幅度以所占對照“組群活動”的百分數(shù)來表示。柱的高度代表動力活動的舒張幅度分別占在注射EN139499之前“組群活動”的相對值(斜紋柱為100％)；在注射EN139499之前“組群間活動”的相對值(實心柱)；以及在注射EN139499之后活動刺激的相對值(空心柱)。
圖4以柱形圖表示化合物EN139499處理(每公斤體重10mg，靜脈注射)對麻醉大鼠十二指腸上的位點D1出現(xiàn)的腸動力活動舒張頻率的影響。舒張的頻率以所占對照“組群活動”的百分數(shù)來表示。柱的高度代表動力活動的舒張頻率分別占在注射EN139499之前“組群活動”的相對值(斜紋柱為100％)；在注射EN139499之前“組群間活動”的相對值(實心柱)；以及在注射EN139499之后活動刺激的相對值(空心柱)。
圖5以柱形圖表示化合物EN139499處理(每公斤體重10mg，靜脈注射)對麻醉大鼠十二指腸上的位點D1出現(xiàn)的腸動力活動收縮幅度的影響。收縮的幅度以所占對照“組群活動”的百分數(shù)來表示。柱的高度代表動力活動的收縮幅度分別占在注射EN139499之前“組群活動”的相對值(斜紋柱為100％)；在注射EN139499之前“組群間活動”的相對值(實心柱)；以及在注射EN139499之后活動刺激的相對值(空心柱)。
圖6以柱形圖表示化合物EN139499處理(每公斤體重10mg，靜脈注射)對麻醉大鼠十二指腸上的位點D1出現(xiàn)的腸動力活動收縮頻率的影響。收縮的頻率以所占對照“組群活動”的百分數(shù)來表示。柱的高度代表動力活動的收縮頻率分別占在注射EN139499之前“組群活動”的相對值(斜紋柱為100％)；在注射EN139499之前“組群間活動”的相對值(實心柱)；以及在注射EN139499之后活動刺激的相對值(空心柱)。
圖7以柱形圖表示化合物EN139499處理(每公斤體重10mg，靜脈注射)對圖3所顯示的麻醉大鼠除了十二指腸上D2位點以外出現(xiàn)的腸動力活動舒張幅度的影響。舒張的幅度以所占對照“組群活動”的百分數(shù)來表示。柱的高度代表動力活動的舒張幅度分別占在注射EN139499之前“組群活動”的相對值(斜紋柱為100％)；在注射EN139499之前“組群間活動”的相對值(實心柱)；以及在注射EN139499之后活動刺激的相對值(空心柱)。
圖8以柱形圖表示化合物EN139499處理(每公斤體重10mg，靜脈注射)對圖4所顯示的麻醉大鼠除了十二指腸上D2位點以外出現(xiàn)的腸動力活動舒張頻率的影響。舒張的頻率以所占對照“組群活動”的百分數(shù)來表示。柱的高度代表動力活動的舒張頻率分別占在注射EN139499之前“組群活動”的相對值(斜紋柱為100％)；在注射EN139499之前“組群間活動”的相對值(實心柱)；以及在注射EN139499之后活動刺激的相對值(空心柱)。
圖9以柱形圖表示化合物EN139499處理(每公斤體重10mg，靜脈注射)對圖5所顯示的麻醉大鼠除了十二指腸上D2位點以外出現(xiàn)的腸動力活動收縮幅度的影響。收縮的幅度以所占對照“組群活動”的百分數(shù)來表示。柱的高度代表動力活動的收縮幅度分別占在注射EN139499之前“組群活動”的相對值(斜紋柱為100％)；在注射EN139499之前“組群間活動”的相對值(實心柱)；以及在注射EN139499之后活動刺激的相對值(空心柱)。
圖10以柱形圖表示化合物EN139499處理(每公斤體重10mg，靜脈注射)對圖6所顯示的麻醉大鼠除了十二指腸上D2位點以外出現(xiàn)的腸動力活動收縮頻率的影響。收縮的頻率以所占對照“組群活動”的百分數(shù)來表示。柱的高度代表動力活動的收縮頻率分別占在注射EN139499之前“組群活動”的相對值(斜紋柱為100％)；在注射EN139499之前“組群間活動”的相對值(實心柱)；以及在注射EN139499之后活動刺激的相對值(空心柱)。
圖11以柱形圖表示化合物EN139499處理(每公斤體重10mg，靜脈注射)對麻醉大鼠胃竇上(位點S1)出現(xiàn)的腸動力活動舒張幅度的影響。舒張的幅度以所占對照“組群活動”的百分數(shù)來表示。柱的高度代表動力活動的舒張幅度分別占在注射EN139499之前“組群活動”的相對值(斜紋柱為100％)；在注射EN139499之前“組群間活動”的相對值(實心柱)；以及在注射EN139499之后活動刺激的相對值(空心柱)。
圖12以柱形圖表示化合物EN139499處理(每公斤體重10mg，靜脈注射)對麻醉大鼠胃竇上(位點S1)出現(xiàn)的腸動力活動舒張頻率的影響。舒張的頻率以所占對照“組群活動”的百分數(shù)來表示。柱的高度代表動力活動的舒張頻率分別占在注射EN139499之前“組群活動”的相對值(斜紋柱為100％)；在注射EN139499之前“組群間活動”的相對值(實心柱)；以及在注射EN139499之后活動刺激的相對值(空心柱)。
圖13以柱形圖表示化合物EN139499處理(每公斤體重10mg，靜脈注射)對麻醉大鼠胃竇上(位點S1)出現(xiàn)的腸動力活動收縮幅度的影響。收縮的幅度以所占對照“組群活動”的百分數(shù)來表示。柱的高度代表動力活動的收縮幅度分別占在注射EN139499之前“組群活動”的相對值(斜紋柱為100％)；在注射EN139499之前“組群間活動”的相對值(實心柱)；以及在注射EN139499之后活動刺激的相對值(空心柱)。
圖14以柱形圖表示化合物EN139499處理(每公斤體重10mg，靜脈注射)對麻醉大鼠胃竇上(位點S1)出現(xiàn)的腸動力活動收縮頻率的影響。收縮的頻率以所占對照“組群活動”的百分數(shù)來表示。柱的高度代表動力活動的收縮頻率分別占在注射EN139499之前“組群活動”的相對值(斜紋柱為100％)；在注射EN139499之前“組群間活動”的相對值(實心柱)；以及在注射EN139499之后活動刺激的相對值(空心柱)。
圖15所示為在10天的喂養(yǎng)期間(第1天到第10天)雄性Sprague-Dawley大鼠的日平均體重。以克(g)表示的日平均體重顯示大鼠的喂養(yǎng)情況正常粉狀飼料(陽性對照，菱形)；添加化合物EN139495(3-乙?；?DON碳酸鹽，20ppm)的正常粉狀飼料；添加(混合)化合物EN139499(20ppm)的正常粉狀飼料；和添加“pair-fed”量化合物EN139499的正常粉狀飼料；詳細描述見下面的正文。在試驗開始前所有大鼠都以正常粉狀飼料(未添加化合物)喂養(yǎng)并觀察三天(-3天到-1天)以確保對照組和試驗組的基線飼料消耗和體重無顯著差異。
圖16以柱形圖表示在10天的喂養(yǎng)試驗期內(nèi)雄性Sprague-Dawley大鼠體重增加量占對照組的百分比。動物分為幾組分別以下列飼料喂養(yǎng)添加(混合)20ppm或40ppm EN139499(實心柱)的正常飼料(正常飲食)；添加20ppm或40ppm EN139500(方格柱)的正常飼料；添加20ppm DON(斜線柱)的正常飼料；以及單獨的正常飼料(對照組，空心柱)。
圖17顯示的是雄性Sprague-Dawley大鼠在一段時間(數(shù)天)的喂養(yǎng)研究期間標準化的日飼料消耗量(g×10-2)。在第1天根據(jù)喂養(yǎng)飼料的不同把大鼠進行分組，這時開始喂養(yǎng)的飼料由正常粉狀飼料(正常飲食)改為添加20ppm EN139518的正常飼料(矩形)或單獨正常飼料(對照組，菱形)。對照組和EN139518喂養(yǎng)組之間有顯著差異(p＜0.05)的數(shù)據(jù)點用星號標記(第3天到第五天)。
圖18顯示的是在5天的喂養(yǎng)試驗期內(nèi)雄性Sprague-Dawley大鼠體重增加量占對照組的百分比。大鼠分別以正常飼料喂養(yǎng)(對照組，空心柱)；如圖17所描述的添加20ppm EN139518的正常飼料喂養(yǎng)(實心柱)。
圖19以柱形圖表示豬兩天內(nèi)(第1天和第2天)上午(AM)和晚上(PM)喂食時的標準化食物消耗量，在第1天上午喂食前約20分鐘分別給予豬含不同劑量DON的單一食物，共分為三個劑量組0.11mg/kg DON(低劑量組，L)；0.17mg/kg DON(中等劑量組，M)和0.34mg/kg DON(高劑量組，H)。對照組的動物在第一天上午給予無DON的食物。
圖20顯示的是如圖19一樣豬的標準化食物消耗量，所不同的是食物中含化合物EN139499而不是DON。對照組的動物在第一天上午給予無EN139499的食物。圖21顯示的是如圖19一樣豬的標準化食物消耗量，所不同的是食物中含化合物EN139518而不是DON。對照組的動物在第一天上午給予無EN139518的食物。
詳細描述本發(fā)明提供了通過調(diào)節(jié)人和其他脊椎動物腸道器官動力活動來控制食物攝入和治療持續(xù)體重增加的組合物和方法.本發(fā)明的組合物和方法是基于發(fā)現(xiàn)單端孢霉烯化合物如天然4-脫氧瓜萎鐮菌醇(DON)可以刺激腸道器官的收縮和舒張運動，這種收縮和舒張在正常情況下消化食物時也會發(fā)生。腸動力信號飽脹感進食模式即飽滿感覺的刺激，是影響個體進食時間的重要因素。單端孢霉烯如DON作用于腸道器官外的位點，產(chǎn)生一個信號沿神經(jīng)元通路到達胃腸器官的平滑肌(見國際PCT申請PCT/CA00/00790號，2000年7月6日提出申請；本文已納入作為參考)。
另外，大量的實驗研究證實DON和單端孢霉烯霉菌毒素具有抑制蛋白合成的能力，如vero細胞(綠猴腎細胞)，鼠紅白血病(MEL)細胞和大鼠脾淋巴細胞的細胞培養(yǎng)實驗(見Erhlich和Daigle，Biochem.Biophys.Acta，923206-213(1987)；Rotter等，J.Toxicol.Env.Health，481-34(1996))。研究表明DON及其相關的單端孢霉烯可與紅細胞核糖體60S亞單位結合干擾肽基轉移酶的活動。這些毒理學的研究證實DON及其相關的天然單端孢霉烯的某些特定結構是其發(fā)揮已知毒性作用所必須的。特別是單端孢霉烯核上9和10之間的雙鍵，12，13-環(huán)氧環(huán)的存在，8-酮基以及羥基和其他基團的存在，這些結構也存在于DON及其相關的天然單端孢霉烯霉菌毒素上，上述結構被認為對于保持這些霉菌毒素的毒性是至關重要的，包括可觀察到的減少人食物攝入量的能力和誘導攝入單端孢霉烯的其他動物拒食的能力。(見Betina，Chem.-Biol.Interactions，71105-146(1989))。
本發(fā)明還提供了可以調(diào)節(jié)腸動力的新型多環(huán)有機化合物。本文所描述的化合物特別用于刺激人和其他脊椎動物的腸動力進食模式產(chǎn)生飽脹感信號(飽滿)和減少食物攝入。一種確立的觀點認為某些特定的結構對DON和其他單端孢霉烯霉菌毒素的毒性效應來說是重要的，其毒性來自于這些化合物可以抑制蛋白合成(如上所述)，但是，本發(fā)明的化合物也包括那些特定結構減少或者說改變的化合物，這些特定結構包括9和10之間的雙鍵和/或8-酮基和/或3，4-環(huán)氧，上述結構在已知的單端孢霉烯如DON中正常情況下也存在。
為了更清晰地描述本發(fā)明，對下列術語進行了定義本文所述的“腸道”是指包括胃，小腸和大腸在內(nèi)的腸道。
本文所述的“腸動力”或“腸動力活動”是指人或其他動物腸道器官(胃，小腸和大腸)平滑肌的動力活動，這些活動包括交替出現(xiàn)的肌肉收縮和舒張期，也包括靜息期或者說是活動相對少的間期。例如，正常健康的人和其他動物小腸肌肉收縮和舒張的頻率和幅度在進食時加強以便推動食物下行進入腸道進行消化和吸收(見下述的腸動力的“進食模式”)。腸動力另一模式的發(fā)生依賴于腸道各部分內(nèi)食物的存在與否(見下)。而且，通過檢測動力活動顯示腸道器官的近端部分的動力活動與遠端部分活動是不同的，例如十二指腸(小腸的起始段)和回腸(小腸的終末段)。
本文所述的“進食模式”和“進食模式活動”的意義相同，都是指動物(包括人)的小腸持續(xù)的收縮和舒張模式，一般在攝食時發(fā)生。腸動力進食模式推動攝入的食物通過腸道進行營養(yǎng)物質的消化和吸收，未吸收的物質作為廢物排泄出體外。比較典型的腸動力進食模式開始于進食后數(shù)分鐘內(nèi)，負責產(chǎn)生飽脹感信號，即飽滿的感覺。這樣，來自于腸動力進食模式的飽脹感信號將進食可以結束的信息傳遞給個體。個體通過腸動力進食模式感覺到飽脹感要遠早于大腦開始分析血液中營養(yǎng)物質的含量(一個獨立發(fā)過程，發(fā)生于事物被消耗后，負責產(chǎn)生對某些營養(yǎng)物質的饑餓信號，如蛋白質，碳水化合物，鹽和脂肪，這些都必須維持在一定水平以保持健康)。
每一腸道器官甚至同一腸道器官的不同部位其進食模式都是不同的，各有其自身的特點。小腸進食模式的特點是平滑肌的一系列持續(xù)的收縮和舒張，從而混合腸內(nèi)容物，推動食物在腸道內(nèi)下行，同時延遲食物下行的速度以利于食物的吸收(Lundgren等，Dig.Dis.Sci.，34264-283(1989))。用Krantis等人的方法(Can.J.Physiol.Pharmacol.，74894-903(1996))檢測和記錄體內(nèi)的腸道活動時發(fā)現(xiàn)，十二指腸的腸動力進食模式其特征是密集的超強活動，而同時胃竇內(nèi)進食模式的特征在于在所記錄的組織內(nèi)可檢測到動力活動受到抑制或下降。這種進食模式活動代替了腸動力活動的“禁食模式”(見下)，禁食模式一般發(fā)生在食物被推進通過腸道進行營養(yǎng)物質的提取之后。這種進食模式活動初始時由外周交感神經(jīng)節(jié)通過輸入初級迷走神經(jīng)信號而啟動，但是，很快就被中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)所控制(見Yoshida等，J.Pharmacol.Exp.Therap.，256272-278(1991)；Tanka等，J.Surg.Res.，53588-595(1996)；Chung等，Can.J.Physiol.Pharmacol.，701148-1153(1992))。交感神經(jīng)的活動過度可以加速起始過程，延長進食模式的持續(xù)時間，同時也增強腸動力活動的頻率和幅度(Hall等，Am.J.Physiol.，250G501-G510(1986)；Johnson等，Am.J.Surg.，16780-88(1994))。如上文所提到的，單端孢霉烯如單端孢霉烯霉菌毒素，DON和本文所描述的新型化合物都可以適當?shù)膭┝看碳ぎa(chǎn)生腸動力進食模式。
腸動力活動“禁食模式”或“禁食環(huán)行動力模式”是指在沒有攝入食物或在攝入食物之前無食物從胃推進到腸的情況下腸道的動力活動模式。在十二指腸內(nèi)(小腸的起始段)，腸動力活動禁食模式的特征是交替出現(xiàn)靜息期，不規(guī)則的收縮/舒張期(稱為“組群活動”或“MMC活動”)以及相對靜息期(稱為“組群間活動”)。在一個實施例中記錄了十二指腸交替出現(xiàn)組群活動和組群間活動的禁食模式，結果如圖2所示，在給予化合物EN139499之前腸道活動出現(xiàn)在早期時段(t＝8分鐘到t＝40分鐘之間)。在回腸內(nèi)(小腸的終末段)，禁食模式的特征是隨機出現(xiàn)的收縮和/或舒張活動，或者基本處于靜息狀態(tài)。進食就會打斷腸動力的禁食模式，刺激出現(xiàn)持續(xù)的腸動力活動進食模式。
以前沒有精確的方法記錄，測定和特征化腸動力，在實驗條件下只能測定一個參數(shù)，或者是收縮或者是舒張。然而最近Krantis和他的同事設計了一種方法，可以同時測定腸道各種器官動力活動的收縮和舒張參數(shù)，該方法是將小型的易彎曲的鉑絲應變儀放置到體內(nèi)腸道器官的各個位置上(見Krantis等，Can.J.Physiol.Pharmacol.，74894-903(1996))。使用這種方法是從放置在器官上的壓力表中引出一根電線連接到一臺計算機化的數(shù)據(jù)分析系統(tǒng)上。Krantis等人(1996)的方法可用于腸道藥理學，神經(jīng)學以及生理學的研究中，即可用于在體器官，也可用于離體器官(器官放置在體腔外)，還可用于體外處理(從腸道器官提取的組織)。由于這種方法具有同時記錄腸道器官的收縮和舒張活動，并且可以在器官內(nèi)的多個位置進行測量，因此可以使我們較精確地確定腸動力活動的特征，包括腸動力活動兩種不同的模式(即禁食模式和進食模式)，食物及各種化合物對這些模式的影響。
在禁食狀態(tài)下，腸道表現(xiàn)一種環(huán)行動力活動模式，即我們所知道的“組群”，“MMC”，“遷移動力復合群”，或者“遷移肌電復合群”。MMC與腸道內(nèi)容物在消化期間的推進有關，包括連續(xù)的興奮性神經(jīng)元和抑制性神經(jīng)元活動將收縮和舒張的循環(huán)從胃開始傳播到回腸而終止。一個MMC循環(huán)包括三個不同的相相I是靜息期；相II是一段不規(guī)則的活動峰；相III是較短時間的一段快速活動峰爆發(fā)。MMC提供了一種基本的內(nèi)在動力活動模式，其功能在于是小腸的“管家”。例如，每一MMC循環(huán)的高度推進性的相III動力活動都可以清除腸腔，將其殘留物清除以阻止細菌的過度生長，腸分泌物的回流和積聚(Caenepeel等，Dig.Dis.Sci.，341180-1184(1989))。通過Krantis等人的方法，現(xiàn)在已經(jīng)清楚腸動力活動由平滑肌的收縮和舒張運動組成。在缺乏食物的情況下，腸道動力禁食模式的組群活動表現(xiàn)出與典型的MMC循環(huán)相III一樣的動力活動類型。在腸腔內(nèi)存在食物的情況下，腸動力活動從禁食模式轉換到進食模式。
通過Krantis等人的方法，可以使我們了解單端孢霉烯對于腸動力的作用方式。單端孢霉烯4-脫氧瓜萎鐮菌醇(DON)作用于腸道外的位點刺激產(chǎn)生腸動力進食模式，其特征是在攝入食物后發(fā)生，產(chǎn)生飽脹感信號即飽滿的感覺(見國際PCT申請PCT/CA00/00790號)。這一發(fā)現(xiàn)可以解釋已被廣泛報道的人和其他動物在吃了被霉菌污染的谷物后產(chǎn)生厭食或拒食行為的現(xiàn)象，這些霉菌能產(chǎn)生DON或其他單端孢霉烯。
而且，通過Krantis等人的方法所確定的能改變腸動力活動的DON和本發(fā)明所涉及的化合物的作用時間過程和輪廓與單端孢霉烯依賴性蛋白合成抑制或激素依賴的食物攝入調(diào)節(jié)所具有的時間過程和輪廓是不一樣的(見下)，后者在出現(xiàn)腸動力和/或食物攝入調(diào)節(jié)效應之前需要一個較長的時間區(qū)間。
在歷史上，單端孢霉烯化合物被確定為能污染谷物的各種霉菌所產(chǎn)生的二級毒性代謝產(chǎn)物之一，因此被定義為單端孢霉烯霉菌毒素。動物，包括人，在吃了上述被污染的谷物后可能會出現(xiàn)各種霉菌中毒病理癥狀，如嘔吐、腹瀉、臟器出血、營養(yǎng)性毒性白細胞缺乏癥(ATA)、粒細胞缺乏癥、再生性障礙性貧血、壞死性咽峽炎、黏膜炎癥、拒食、驚厥、膿毒癥，有些病歷甚至死亡(例如，見Ueno，“單端孢霉烯霉菌毒素霉菌學，化學和毒理學”，營養(yǎng)研究進展1980，3301-353(1980))。
本文所使用的“單端孢霉烯霉菌毒素”或“單端孢霉烯”是指一族倍半萜醇化合物中的一個，這族化合物都有非烯烴核心化合物單端孢霉烯。所有的單端孢霉烯都是修飾的倍半萜，9位和10位碳原子(C-9，C-10)之間含有烯烴鍵(雙鍵)(因此，單端孢霉烯)，12位和13位碳原子(C-12，C-13)之間形成環(huán)氧環(huán)。因此，單端孢霉烯也被特征性地看作是環(huán)氧單端孢霉烯化合物。Ueno根據(jù)結構和霉菌特征將天然單端孢霉烯霉菌毒素分為四類(見Ueno，1980，同上)。根據(jù)這一分類方法，以瓜萎鐮菌醇為代表的一組單端孢霉烯是非大環(huán)化合物，8位碳原子(C-8)被一個酮基(氧代-)取代。除了瓜萎鐮菌醇之外，“瓜萎鐮菌醇相關”單端孢霉烯族化合物還包括天然單端孢霉烯霉菌毒素如4-脫氧瓜萎鐮菌醇(DON)、trichothecolon、單端孢霉素、3-乙?；撗豕衔牼?3-乙酰基-DON)，4-乙?；衔牼?醋酸瓜類萎蔫醇-X)和4，15-二乙?；衔牼?。這里所描述的“DON”，“4-DON”，“脫氧瓜萎鐮菌醇”，“4-脫氧瓜萎鐮菌醇”和“vomitoxin”都指具有圖3所示結構的同一單端孢霉烯化合物。因此，瓜萎鐮菌醇與DON是不同的，瓜萎鐮菌醇在4位碳原子上有一個羥基，而DON沒有。
盡管在攝入足夠量的DON后會引起嚴重的可廣泛傳播的中毒事件，但是DON從來沒有被認為是一個關于亞致命中毒的強力單端孢霉烯(見Prelusky等，Arch.Environ.Contam.Toxicol.，2236-40(1992)；Friend等，Can.J.Anim.Sci.，66765-775(1986)；Ueno，Developments in Food Science IV，Trichothecenes，chemical，biological，and toxicological aspects(Elsevier，Amsterdam，1983)，135-146頁)。
DON一般很少經(jīng)肝臟代謝，而是主要從尿液中排出。
本發(fā)明所涉及的化合物合成所用的單端孢霉烯可以用生物學方法從培養(yǎng)的霉菌中提取，也可以用化學方法合成。有些已經(jīng)商品化。許多土壤霉菌被發(fā)現(xiàn)可以污染并在谷物和其他糧食中生長，作為二級代謝物產(chǎn)生單端孢霉烯。這些霉菌包括鐮孢菌屬，單端孢屬，木霉屬，myrothecium，cylindrocarpon和stachybotrys霉菌(見Ueno，1980)。從鐮孢菌屬霉菌培養(yǎng)液中制備和純化DON及其乙酰酯(如3-乙酰DON和15-乙酰DON)的方法在文獻中已有報道(見Can.J.Microbiol.，291171-1178(1983)；Miller和Blackwell，Can.J.Bot.，641-5(1986)；Greenhalgh等，第六界霉菌毒素和蛋白毒素IUPAC國際論壇通訊137-152(Steyn，P.S.編)(Elsevier出版，Amsterdam，1986)；Miller和Arnison(Can.J.Plant Path.，8147-150(1986))。因此，用于本文所描述的化合物合成的各種單端孢霉烯如DON和3-乙酰DON都可以從霉菌培養(yǎng)液中以標準培養(yǎng)和制備技術制備和提取(見Ehrlich等，Biochim.Biophys.Acta，932206-213(1987)；Ueno，1980(同上)引用作為參考)。例如，3-乙酰DON可以很容易地從鐮刀霉屬發(fā)酵培養(yǎng)液中純化。如上面所提到的，DON是谷物和小麥的天然污染物，并且含量豐富。另外，這些物質也可以從巴西灌木Baccharis magapotomica和cordfolia中分離(Kupchan等，J.Org.Chem.，424221-4225(1997))。
如下面較詳細的描述，本發(fā)明涉及治療體重過高和肥胖的方法，該方法充分利用新型化合物所具有的與已知的單端孢霉烯化合物相似的誘導腸動力進食模式和飽脹感的能力，因而可以減少或停止食物攝入。人以外的動物所誘導的停止進食也稱為“拒食”。本文所描述的治療體重過高和肥胖的方法包括給予個體以本文所描述的化合物，該化合物可以刺激腸動力進食模式從而產(chǎn)生飽脹感。一旦產(chǎn)生飽脹感，個體就會收到信號停止進食。隨著循環(huán)系統(tǒng)中所給予的化合物水平的降低，飽脹感隨之減弱，個體可以繼續(xù)開始進食或喂養(yǎng)。
用于本發(fā)明的化合物對于天然單端孢霉烯的化學性質已經(jīng)知道的很清楚(見Ueno，“單端孢霉烯霉菌毒素霉菌學，化學和毒理學”，營養(yǎng)研究進展1980，3301-353(1980)；Williams，Arch.Environ.Contam.Toxicol.，18374-387(1989))。因此，一旦了解了本文所描述的新型化合物的結構，就可以從某些特定單端孢霉烯如3-乙?；鵇ON及其各種合成衍生物開始通過有機合成方法將其合成出來(見下面的實施例)。本文所描述的化合物的結構用本領域所熟知的標準方法可以很容易地被確定，這些方法中有許多已被用于確定或確認已知的單端孢霉烯的結構。確定或確認本發(fā)明化合物結構的特別有用的方法是核磁共振(NMR)分析技術，薄層色譜(TLC)和質譜(MS)。
本發(fā)明的某些組合物含有如結構式I所示的腸動力調(diào)節(jié)化合物“8-O-取代-7α，15-碳酸鹽”，結構式I見下圖(包括有選擇地對化學結構中的各種原子和基團進行單端孢霉烯類型的編號) 其中，x代表9位碳原子和10位碳原子之間的單鍵或雙鍵；R1和R2分別代表氫原子；C1-C6的烷基；C1-C6的芳烷基；或?；鵆(O)R5，其中R5選自C1-C6的烷基；C2-C6的烯基；C2-C6的炔基；苯基；被選自鹵素、烷基(如甲基)、烷氧基(如甲氧基)、硫代甲基、亞硫酰甲基、硫酰甲基及其組合的取代基取代的苯基；五元或六元雜芳環(huán)；或被選自鹵素、烷基(如甲基)、烷氧基(如甲氧基)、硫代甲基、亞硫酰甲基、硫酰甲基及其組合的取代基取代的五元或六元雜芳環(huán)。
結構式I的代表例子包括3α-乙酰氧基-12，13-環(huán)氧-8α-羥基單端孢霉-9-烯-7α，15-碳酸鹽(標示為EN139499，見圖1A)；3α，8α-二乙酰氧基-12，13-環(huán)氧單端孢霉-9-烯-7α，15-碳酸鹽(標示為EN139500，見圖1A)；和3α，8α-二乙酰氧基-12，13-環(huán)氧-9α-甲基單端孢霉-7α，15-碳酸鹽(標示為EN139507)(見圖1D)。
本發(fā)明的另外一些組合物含有如結構式II所示的腸動力調(diào)節(jié)“乙縮醛化合物”，如下圖所示(包括有選擇地對化學結構中的各種原子和基團進行單端孢霉烯類型的編號)
其中，x代表9位碳原子和10位碳原子之間的單鍵或雙鍵；R1和R2分別代表氫原子；C1-C6的烷基；C1-C6的芳烷基；或酰基C(O)R5，其中R5選自C1-C6的烷基；C2-C6的烯基；C2-C6的炔基；苯基；被選自鹵素、烷基(如甲基)、烷氧基(如甲氧基)、硫代甲基、亞硫酰甲基、硫酰甲基及其組合的取代基取代的苯基；五元或六元雜芳環(huán)；或被選自鹵素、烷基(如甲基)、烷氧基(如甲氧基)、硫代甲基、亞硫酰甲基、硫酰甲基及其組合的取代基取代的五元或六元雜芳環(huán)。
R3和R4分別代表氫原子；C1-C6的烷基；苯基；被選自鹵素、烷基(如甲基)、烷氧基(如甲氧基)、硫代甲基、亞硫酰甲基、硫酰甲基及其組合的取代基取代的苯基；五元或六元雜芳環(huán)；或R3和R4和乙縮醛的碳原子一起形成具有5、6或7個碳原子的碳環(huán)。
結構式II的代表例子包括3α-乙酰氧基-7α，15-苯亞甲基-12，13-環(huán)氧-9α-甲基單端孢霉-8α-醇(標示為EN139501，見圖1A)和7α，15-苯亞甲基-3α，8α-二乙酰氧基-12，13-環(huán)氧-9α-甲基單端孢霉(標示為EN139505)(見圖1C)。
本發(fā)明還涉及含有如結構式III所示的腸動力調(diào)節(jié)“7α，15-二醇”化合物的一些組合物，如下圖所示(包括有選擇地對化學結構中的各種原子和基團進行單端孢霉烯類型的編號) 其中，x代表9位碳原子和10位碳原子之間的單鍵或雙鍵；R1和R2分別代表氫原子；C1-C6的烷基；C1-C6的芳烷基；或酰基C(O)R5，其中R5選自C1-C6的烷基；C2-C6的烯基；C2-C6的炔基；苯基；被選自鹵素、烷基(如甲基)、烷氧基(如甲氧基)、硫代甲基、亞硫酰甲基、硫酰甲基及其組合的取代基取代的苯基；五元或六元雜芳環(huán)；被選自鹵素、烷基(如甲基)、烷氧基(如甲氧基)、硫代甲基、亞硫酰甲基、硫酰甲基及其組合的取代基取代的五元或六元雜芳環(huán)。
結構式III的代表例子包括3α-乙酰氧基-12，13-環(huán)氧-9α-甲基單端孢霉-7α，8α，15-三醇(標示為EN139503，見圖1B)和3α，8α-二乙酰氧基-12，13-環(huán)氧-9α-甲基單端孢霉-7α，15-二醇(標示為EN139506，見圖1C)。
本發(fā)明還涉及含有如結構式IV所示的腸動力調(diào)節(jié)8-酮-7α，15-碳酸鹽化合物，如下圖所示(包括有選擇地對化學結構中的各種原子和基團進行單端孢霉烯類型的編號) 其中，x代表9位碳原子和10位碳原子之間的單鍵；R2代表
氫原子；C1-C6的烷基；C1-C6的芳烷基；或?；鵆(O)R5，其中R5選自C1-C6的烷基；C2-C6的烯基；C3-C6的炔基；苯基；被選自鹵素、烷基(如甲基)、烷氧基(如甲氧基)、硫代甲基、亞硫酰甲基、硫酰甲基及其組合的取代基取代的苯基；五元或六元雜芳環(huán)；和被選自鹵素、烷基(如甲基)、烷氧基(如甲氧基)、硫代甲基、亞硫酰甲基、硫酰甲基及其組合的取代基取代的五元或六元雜芳環(huán)。
結構式IV的優(yōu)選代表例子包括3α-乙酰氧基-12，13-環(huán)氧-9α-甲基單端孢霉-8-酮-7α，15-碳酸鹽(標示為EN139511，見圖1E)和3α-苯甲酸基-12，13-環(huán)氧單端孢霉-9-烯-8-on-7α，15碳酸鹽(標示為EN139514，見圖1E)。
本發(fā)明還涉及含有如結構式V所示的腸動力調(diào)節(jié)8-酮-12，13-環(huán)氧-化合物，如下圖所示 其中，R2代表氫原子；C1-C6的烷基；C1-C6的芳烷基；或?；鵆(O)R5，其中R5選自C1-C6的烷基；C2-C6的烯基；C2-C6的炔基；苯基；被選自鹵素、烷基(如甲基)、烷氧基(如甲氧基)、硫代甲基、亞硫酰甲基、硫酰甲基及其組合的取代基取代的苯基；五元或六元雜芳環(huán)；和被選自鹵素、烷基(如甲基)、烷氧基(如甲氧基)、硫代甲基、亞硫酰甲基、硫酰甲基及其組合的取代基取代的五元或六元雜芳環(huán)；以及R3和R4分別代表氫原子；C1-C6的烷基；苯基；被選自鹵素、烷基(如甲基)、烷氧基(如甲氧基)、硫代甲基、亞硫酰甲基、硫酰甲基及其組合的取代基取代的苯基；五元或六元雜芳環(huán)；或R3和R4和乙縮醛的碳原子一起形成具有5、6或7個碳原子的碳環(huán)。
結構式V的優(yōu)選代表例子包括而不限于3α-乙酰氧基-7α，15-苯亞甲基-12，13-環(huán)氧單端孢霉-8-酮(標示為EN139519)和7α，15-苯亞甲基-12，13-環(huán)氧-9β-羥基單端孢霉-8-酮(標示為EN139520)。
本發(fā)明還涉及含有如結構式VI所示的腸動力調(diào)節(jié)8-酮-12α-羥基化合物，如下圖所示 其中，R2代表氫原子；C1-C6的烷基；C1-C6的芳烷基；或?；鵆(O)R5，其中R5選自C1-C6的烷基；C2-C6的烯基；C3-C6的炔基；苯基；被選自鹵素、烷基(如甲基)、烷氧基(如甲氧基)、硫代甲基、亞硫酰甲基、硫酰甲基及其組合的取代基取代的苯基；
五元或六元雜芳環(huán)；和被選自鹵素、烷基(如甲基)、烷氧基(如甲氧基)、硫代甲基、亞硫酰甲基、硫酰甲基及其組合的取代基取代的五元或六元雜芳環(huán)；以及R3和R4分別代表氫原子；C1-C6的烷基；苯基；被選自鹵素、烷基(如甲基)、烷氧基(如甲氧基)、硫代甲基、亞硫酰甲基、硫酰甲基及其組合的取代基取代的苯基；五元或六元雜芳環(huán)；或R3和R4和乙縮醛的碳原子一起形成具有5、6或7個碳原子的碳環(huán)。
結構式VI的優(yōu)選代表例子包括而不限于7α，15-苯亞甲基-9α，12β-二甲基-3α，12α-二羥基單端孢霉-8-酮(標示為EN139522)。
用于本發(fā)明組合物和方法的另一個化合物是12，13-環(huán)氧單端孢霉-9-烯-3α，7α，8α，15-四醇(標示為EN139518)。
化合物7α，15-苯亞甲基-9α，12β-二甲基單端孢霉-3α，8α，12α-三醇(EN139502，見圖1B)缺少特征性的9，10之間的雙鍵，8-酮基和12，13-環(huán)氧環(huán)的單端孢霉烯。EN139502不能誘導腸動力進食模式，但是可以促進或增強腸動力的禁食模式。
本發(fā)明還提供了化合物7α，15-苯亞甲基-3α，8α-二乙酰氧基-9α，12β-二甲基單端孢霉-12α-醇(EN139508，見圖1D)。
化合物的腸動力調(diào)節(jié)活性本發(fā)明的某些化合物可用于本發(fā)明所涉及的組合物和方法以誘導腸動力的進食模式，該模式可用Krantis等人的方法或類似的方法檢測。個體的腸動力進食模式被誘導出來后會產(chǎn)生飽脹感信號并減少進食(食物攝入，吃，喂養(yǎng))，這些都是治療體重增長過速或肥胖所需要的效果。相反，本文所描述的另外一些化合物如EN139502由于缺乏已知單端孢霉烯所具有的12，13環(huán)氧環(huán)結構，因而不能誘導產(chǎn)生腸動力進食模式。事實上，EN139502是一個不能誘導進食模式的例子，但是卻可以增強或促進腸動力活動的禁食模式。
Krantis等人的方法是檢測和分析化合物是否具有調(diào)節(jié)麻醉大鼠或豬腸動力能力的經(jīng)典方法，盡管也可用于其他動物。簡言之，每一動物被麻醉后(如用halothane氧混合氣)，通過股動脈插管將化合物或藥物輸入。給動物實施刨腹手術，然后將鉑絲計量器(Showa N11型，Durham Instruments，Pickering，Ontario)用組織膠固定到選定的腸道器官的位點上。上述較常用的位點包括胃竇(S1位點)，十二指腸(D1位點和D2位點)和末端回腸。在這三個位點記錄的腸動力可以使我們看到最完整的腸動力畫面，也可以使我們知道是否誘導出了進食模式。與每一鉑絲計量器相連的電線從腹腔中引出連接到計算機化的數(shù)據(jù)獲得系統(tǒng)上，就可以得到持續(xù)的實時的腸動力記錄。
化合物的活性也可以通過在喂養(yǎng)試驗中測定試驗動物食物消耗量和體重增加量來進一步檢測，給予這些試驗動物以各種劑量的本文所描述的腸動力調(diào)節(jié)化合物。上述試驗最初也可以在小型哺乳動物如試驗用嚙齒動物和豬上進行。
治療方法，藥用組合物，給藥模式本發(fā)明所提供的藥用組合物可用于人和其他動物的攝食調(diào)節(jié)和肥胖治療。也可制備成特殊制劑給予人之外的動物以控制食物攝入和體重增加。
本發(fā)明所涉及的另外一些組合物含有能增強或促進腸動力禁食模式的化合物。這些化合物可用于增加食物攝入或對抗那些誘導進食模式從而減少食物攝入的組合物所產(chǎn)生的效應。增加食物攝入的組合物對于增加市場上出售的家禽和家畜等肉食動物的體重特別有用。其他組合物也可以制成適當?shù)闹苿┙o予人以刺激人的食物攝入量，因而可以治療人的營養(yǎng)失調(diào)和食欲減弱。人和其他脊椎動物在控制腸動力方面具有相似的基礎腸道神經(jīng)生理學。因此，可以使用本發(fā)明方法和組合物的動物包括而不限于人和其他靈長類動物，豬，牛，羊，鳥類(家禽和其他鳥類)，馬，貓，狗，以及嚙齒類動物，如蒼鼠，豚鼠，大鼠和小鼠。藥用組合物和本發(fā)明所涉及的給其他動物使用的組合物都含有有效劑量的本文所描述的化合物以達到對腸動力(進食模式或禁食模式)產(chǎn)生所希望的效果，即產(chǎn)生飽脹感信號以減少食物攝入，治療肥胖和體重增長過快，或者增加食物攝入以達到增加營養(yǎng)或體重的目的，所有組合物都沒有明顯的或不希望的副作用，如嘔吐。
在本發(fā)明的一個實施方式中，在進食時間前(即之前10，20或60分鐘不等)給予個體一個本發(fā)明的化合物，優(yōu)選以口服方式，以便該化合物調(diào)節(jié)腸動力從而達到減少個體在進食期間食物攝入量的效果(或增加食物攝入量，依據(jù)所給予的化合物的性質)。在一個特別優(yōu)選實施方式中，化合物的效應在1到數(shù)小時內(nèi)逐漸減弱，因此不會下一次進食期間的食物攝入量，除非再次給予個體藥物。
有經(jīng)驗的健康專家有能力評價人或其他動物是否具有臨床意義的體重超標，肥胖，體重過低，以及個體是否適于作為候選者用本發(fā)明的組合物和方法進行治療。按照本發(fā)明的描述，上述狀況可以通過給予人或其他動物以組合物進行治療，所給予的組合物中含有一個或多個本文所描述的化合物，并且給予的組合物要達到有效劑量才能夠調(diào)節(jié)腸動力模式，從而降低食物攝入或增加進食時間和食物攝入。典型的上述本發(fā)明的組合物也含有至少一種藥學上可接受的載體(或用于非人動物的藥學上可接受的載體的類似物)，這些載體如下面的描述可以是液體的，也可以是固體的。
根據(jù)給藥的特定模式不同，本發(fā)明的組合物可以制備成各種形式的制劑，包括固體，半固體或液體劑量形式，例如片劑，菱形，丸藥，膠囊，粉劑，栓劑，粉末，水性或油性懸液，糖漿，酏劑和水溶液。優(yōu)選的是藥用組合物制成單位劑量的形式以便單次給藥達到精確劑量，一個單位可以是能產(chǎn)生所期望腸動力效應藥物用量的一部分或多倍。如上所述，組合物包括有效劑量的所選化合物加上藥學上可接受的載體或緩沖液，另外還可以包括其他藥物，載體，稀釋液，填料和制劑佐劑，或者其混合，所有這些都是無毒的，惰性的和可作藥用的。在液體混合物或制備物中，藥學上可接受的載體是緩沖液，如磷酸鹽緩沖液或其他藥用緩沖液，特別是等滲水性緩沖液。
所謂“藥用”是指所用的材料不會與機體的化學和代謝產(chǎn)生不相容的生物學，化學或其他任何形式的效應，而且對存在于組合物中的任何其他組分不會產(chǎn)生相反的效應。
對于固體組合物來說，傳統(tǒng)的無毒固體載體包括藥用級的甘露醇，乳糖，淀粉，硬脂酸鎂，糖精納，滑石，纖維素，葡萄糖，蔗糖，碳酸鎂，及其類似物質。藥用液體組合物可以通過將本文所描述的調(diào)節(jié)腸動力的活性化合物和配方中較佳的藥用佐劑如水，鹽水，葡萄糖水溶液，甘油，乙醇及其類似物質溶解或分散而制備成溶液或懸液。如果需要，使用的藥用組合物液可以含有少量無毒的輔助物質如濕潤劑或乳化劑，pH緩沖劑和類似物質，如乙酸鈉，三乙醇胺油酸鹽。
標準的劑型制備方法對本領域熟練技術人員來說都是已知的或顯而易見的(見Remington’s Pharmaceutical Sciences(Martin，E.W.編，最新版，Mack出版公司，Easton，PA)本發(fā)明的組合物中主要的活性成分是本文所描述的一種或多種腸動力調(diào)節(jié)化合物。這些化合物在進食時發(fā)揮其活性。因此，本發(fā)明優(yōu)選的組合物是制備成口服給藥的劑型，這些化合物液可以通過非腸道途徑給藥，例如靜脈注射，肌肉注射或腹膜內(nèi)注射。
對于較優(yōu)選的口服給藥來說，本發(fā)明的組合物可以制成精細粉末或顆粒制劑，這些制劑含有能調(diào)節(jié)腸動力的本文所描述的化合物，還可以含有稀釋劑，分散劑和/或表面活性劑?？诜o藥的組合物也可以溶解在水中或糖漿中制成溶液或懸液，以干粉狀態(tài)存在于丸劑、膠囊或香料中，或者制成含有懸浮藥物的非水性溶液或懸液。黏合劑或潤滑劑也可用于組合物的口服劑型。如果希望或需要，調(diào)味劑、防腐劑、懸浮劑、濃厚劑或乳化劑也可以包含其中。片劑和顆粒是較佳的口服制劑形式，而且還可以包被。
如果采用非腸道給藥一般通過注射的方法。注射制劑可以制備成傳統(tǒng)形式，溶液或懸液、可以在注射前溶解或懸浮在液體中固體形式、或者乳化液。在大多數(shù)情況下，用于調(diào)節(jié)腸動力的化合物都可以溶解在藥用緩沖液中通過靜脈注射給藥。但是，在本發(fā)明的范圍內(nèi)，這種化合物可以制備成大丸藥，其中含有媒染劑以便于從注射部位梯級釋放。一種非腸道給藥方式是利用緩釋系統(tǒng)或持續(xù)釋放系統(tǒng)，這樣就可以維持一個持續(xù)的藥物濃度(見美國專利3,710,795號)。
本文所描述的組合物和方法中的用于調(diào)節(jié)腸動力的化合物的精確、有效劑量由于個體差異而不同，主要考慮年齡、體重和治療對象的一般狀況、體重過渡增加或肥胖的程度、所使用的化合物特性，給藥模式，以及類似因素。因此，要確定一個適合所有個體的特定劑量是不可能的。但是，可以預計的是，本發(fā)明的化合物的使用或試驗劑量一般在每公斤體重0.01-100mg范圍內(nèi)。而且，給予一個特定個體的優(yōu)選使用劑量為亞嘔吐劑量，就是說該劑量不會激發(fā)個體出現(xiàn)嘔吐。對于商品化的藥用組合物來說，很容易理解的是本文所描述的化合物的藥理效果和合適劑量要由健康專家根據(jù)美國食品藥品監(jiān)督管理局(或類似機構)的標準結合使用者的狀況來確定。如果是動物使用，含有本文所描述的化合物的合適組合物應根據(jù)商品化動物飼料或獸用藥物的標準來確定和制備。
本發(fā)明的其他實施方式和特征可以很容易地從下面這些非限定性實施例中推導出來。
實施例實施例1.起始化合物及其分析本發(fā)明的各種代表性的腸動力調(diào)節(jié)化合物的合成都是利用一組起始化合物，這些化合物可以從市場上買到或利用本領域熟知的方法按照下面的描述來合成。
脫氧瓜萎鐮菌醇(3α，7α，15-三羥基-12，13-環(huán)氧-單端孢霉-9-烯-8-酮，C15H20O6，“DON”)是由David Miller博士用生物合成方法從霉菌培養(yǎng)物中制備出來的(化學系，Carleton大學，Ottawa，Ontario，Canada)。DON是從霉菌培養(yǎng)物的發(fā)酵培養(yǎng)基中純化出來的，基本按照Miller等人的方法(見Can.J.Microbiol.，291171-1178(1983)；Miller和Blackwell，Can.J.Bot.，641-5(1986)；Miller和Arnison(Can.J.Plant Path.，8147-150(1986))。
DON的一個乙酰酯，3α-乙酰氧基-12，13-環(huán)氧單端孢霉-9-烯-8-酮(C17H22O7，也叫“3乙酰DON”)是從霉菌發(fā)酵液中制備和純化出來的，基本按照Miller和Blackwell的描述(見Can.J.Bot.，641-5(1986))。主要過程如下Fusariumculmorum HLX1503霉菌培養(yǎng)物發(fā)酵肉湯過濾去除菌絲，用碳酸鉀溶液小心中和到pH＝7。每1.5升過濾液加入145g氯化鈉。所得到的溶液用500ml二氯甲烷萃取4次?；旌系挠袡C萃取物用無水硫酸鎂干燥，在真空狀態(tài)下將溶劑蒸發(fā)。所得到的原材料用100g硅膠色譜柱分離。然后用乙酰乙酸和己烷的混合物(6∶4混合)將3乙酰DON從硅膠上洗脫下來。一輪代表性的純化過程可以產(chǎn)生570mg 3乙酰DON。
除了作為合成一組新型化合物的起始化合物外，3-乙酰DON還可以通過堿金屬氫氧化物的皂化作用轉化為DON，方法見Blight等人的描述(J.Chem.Soc.Perkin11691(1974))。
DON的另一個衍生物，3α-乙酰氧基-12，13-環(huán)氧單端孢霉-9-烯-8-酮-7α，15-碳酸鹽(C18H20O8，也叫“3乙酰DON碳酸鹽”，在國際PCT申請PCT/CA00/00790號中被標示為EN139495，申請日為2000年7月6日)可以以20mg 3-乙酰DON、0.023ml嘧啶和10mg三碳酰氯為起始物制備，產(chǎn)率達99％。用7∶3乙酰乙酸∶己烷混合物將產(chǎn)物從硅膠色譜柱上洗脫下來后得到的是白色固體物。標準核磁共振(NMR)分析提供的如下數(shù)據(jù)顯示產(chǎn)物具有我們所期望的分子結構1H NMR分析(CDCl3，200MHz)δ6.61(d，J＝8.0Hz，1H)，5.36(m，1H)，5.29(s，1H)，4.49(d，J＝8.0Hz，1H)，4.41(d，J＝16.0Hz，1H)，4.19(d，J＝16.0Hz，1H)，3.95(d，J＝4.0Hz，1H)，3.20(m，2H)，2.39(s，1H)，2.12(s，3H)，1.92(m，1H)，1.92(s，3H)，1.12(s，3H)。
DON的另一個衍生物，3α-乙酰氧基-7α，15-苯亞甲基-12，13-環(huán)氧單端孢霉-9-烯-8-酮(C24H26O8，也叫“3乙酰DON苯亞甲基乙縮醛”或“7，15-苯亞甲基-3-乙酰-DON”，被標示為EN139496，見國際PCT申請PCT/CA00/00790號，申請日為2000年7月6日)可以以20mg 3-乙酰DON和13mg苯甲醛二甲基乙縮醛為起始物制備，產(chǎn)率達95％。用4∶6乙酰乙酸∶己烷混合物將產(chǎn)物從硅膠色譜柱上洗脫下來后得到的是白色固體物。標準核磁共振(NMR)分析提供的如下數(shù)據(jù)顯示產(chǎn)物具有我們所期望的分子結構1H NMR分析(CDCl3，200MHz)δ7.45(m，5H)，6.81(d，J＝8.0Hz，1H)，5.39(s，1H)，5.10(m，1H)，4.90(s，1H)，4.35(d，J＝8.0Hz，1H)，4.31(d，J＝16.0Hz，1H)，3.81(d，J＝16.0Hz)，3.81(d，J＝16Hz，1H)，3.21(m，2H)，2.20-2.45(m，2H)，2.01(s，3H)，1.91(s，3H)，1.31(s，3H)。
化合物在體內(nèi)誘導腸動力進食模式的能力可用Krantis等人的方法測定(Can.J.Physiol.Pharmacol.，74894-903(1996)；也見國際PCT申請PCT/CA00/00790號，申請日為2000年7月6日，本文已納入作為參考)。
本文所描述的化合物對食物攝入的影響效果也可在喂養(yǎng)試驗中加以評價，比如可利用小型哺乳動物如嚙齒動物作為研究對象。在喂養(yǎng)試驗中，每一接受化合物的試驗組動物的食物消耗量和體重增加量都被記錄下來與對照組動物進行比較。
實施例2.3α-乙酰氧基-12，13-環(huán)氧-8α-羥基單端孢霉-9-烯-7α，15-碳酸鹽(EN139499)的合成。
化合物3α-乙酰氧基-12，13-環(huán)氧-8α-羥基單端孢霉-9-烯-7α，15-碳酸鹽(C18H22O8，也被稱作“3-乙?；?DON-碳酸鹽-8-醇”)通過下列步驟合成硼氫化鈉(2.4mg，0.072mmol)在0℃時加入到攪拌的3-乙酰-DON碳酸鹽(50mg，0.13mmol)甲醇溶液(5ml)中。根據(jù)薄層色譜(TLC)判斷20分鐘后降解完成。反應混合物用0.1N的鹽酸(2ml)淬滅后用5ml水稀釋，然后用乙酰乙酸(2×15ml)萃取。混合有機相先用sat.二碳酸鈉(10ml)洗滌，然后用鹽溶液(10ml)洗滌，無水硫酸鎂干燥，在真空狀態(tài)下將溶劑去除。所得到的粗產(chǎn)物進行色譜柱純化(用1∶1的乙酰乙酸和己烷混合物)，可以得到50mg白色固體產(chǎn)物(99％)。
終產(chǎn)物被標示為EN139499，其結構用標準核磁共振(NMR)技術確定，得到如下數(shù)據(jù)1H NMR分析(CDCl3，200MHz)δ5.98(d，J＝8.0Hz，1H)，5.45(d，J＝16Hz，1H)，5.18(m，1H)，5.02(d，J＝16Hz，1H)，4.78(d，J＝8.0Hz，1H)，3.72-3.88(m，2H)，3.12(m，2H)，2.60-2.72(m，1H)，2.12(s，3H)，2.02-2.18(m，1H)，1.92(s，3H)，1.01(s，3H)。
上述合成過程和分析結構表明EN139499具有圖1A所示的結構。
根據(jù)Krantis等人的方法(1996)，單劑量的碳酸鹽化合物EN139499(10mg/kg)用以檢測其誘導大鼠腸動力進食模式的能力。靜脈注射EN139499后的30秒內(nèi)，在十二指腸上的位點(D1，D2)出現(xiàn)了持續(xù)較長時間(40分鐘，n＝10)的過渡活動，同時在胃竇(S1)上的動力活動平行減弱。這些對體內(nèi)腸道活動影響的例子在圖2的腸動力記錄上被顯示出來。
給試驗動物靜脈注射劑量為每公斤體重10mg的EN139499誘導腸動力活動的進食模式。圖3-14是以柱形圖表示EN139499(空心柱)對腸道舒張和收縮的幅度及頻率的影響，記錄的位點為十二指腸上的D1和D2以及胃竇的S1，以對照的禁食模式“組群活動”(斜線柱)為100％，試驗組的數(shù)據(jù)為與對照組相比所得的百分數(shù)。特別要指出的是，圖3和4分別表示EN139499在十二指腸D1位點上所誘導出的腸動力舒張幅度和頻率，圖5和圖6表示EN139499在十二指腸D1位點上所誘導出的腸動力收縮幅度和頻率。同樣的效應也出現(xiàn)在十二指腸的D2位點上(圖7-10)。作為對比，圖3-10也顯示了相對靜息的“組群間”活動(實心柱)。EN139499也可以使胃竇(S1)的舒張幅度和收縮(分別表示在圖11和圖12)以及收縮幅度和收縮(分別表示在圖13和圖14)明顯下降。十二指腸動力活動的增強同時伴隨胃竇動力活動的降低說明給試驗對象注射EN139499可以顯著刺激腸動力的進食模式。
其他數(shù)據(jù)顯示EN139499在1mg/kg的注射劑量時也可以誘導同樣水平的進食模式活動出現(xiàn)，但持續(xù)時間只有20-30分鐘。
實施例3.3α，8α-二乙酰氧基-12，13-環(huán)氧單端孢霉-9-烯-7α，15-碳酸鹽(EN139500)的合成。
化合物3α，8α-二乙酰氧基-12，13-環(huán)氧單端孢霉-9-烯-7α，15-碳酸鹽(C20H24O9，也被稱作“3，8-二乙酰-DON-碳酸鹽”)通過下列步驟合成乙酸酐(1.32mmol)加入到0℃的8-羥基-3-乙酰-DON碳酸鹽(EN139499，如上面所合成的)(25mg，0.066mmol)、三乙酰胺(1.32mmol)和DMAP(1mg)的無水CH2Cl2(4ml)，乙酸酐(1.32mmol)溶液中。6小時后在真空狀態(tài)下將溶劑去除。所得到的粗產(chǎn)物用1∶1的乙酰乙酸∶己烷混合物進行色譜柱處理，可以得到23mg終產(chǎn)物(95％)。
終產(chǎn)物被標示為EN139500，其結構用標準NMR技術確定，得到如下數(shù)據(jù)1H NMR分析(CDCl3，200MHz)δ5.86(d，J＝8.0Hz，1H)，5.48(d，J＝16Hz，1H)，5.18(m，1H)，5.08(d，J＝16Hz，1H)，4.55(d，J＝8.0Hz，1H)，4.44(d，1H)，4.10(d，1H)，3.14(m，2H)，2.18-2.26(m，2H)，2.12(s，3H)，1.99(s，3H)，1.93(s，3H)，1.03(s，3H)。
上述合成過程和分析結果表明EN139500具有圖1A所示的結構。
實施例4.3-乙酰氧基-7α，15-亞芐基-12，13-環(huán)氧-9，10-二羥基單端孢霉素-8α-醇(EN139501)的合成。
化合物3-乙酰氧基-7α，15-亞芐基-12，13-環(huán)氧-9α-甲基單端孢霉-8α-醇(C24H30O7)通過下列步驟合成硼氫化鈉(3.6mg，0.11mmol)在0℃時加入到攪拌的7，15-苯亞甲基-3-乙酰-DON(50mg，0.13mmol，如上面所描述的EN139496)甲醇溶液(3ml)中。30分鐘后反應混合物用0.1N的鹽酸(5ml)淬滅后用5ml水稀釋，然后用乙酰乙酸(2×15ml)萃取。混合有機相用鹽溶液(15ml)洗滌，無水硫酸鎂干燥，在真空狀態(tài)下蒸發(fā)溶劑。通過色譜柱純化(3∶7的乙酰乙酸∶己烷混合物)，可以得到50mg白色固體產(chǎn)物EN139501(產(chǎn)率大于99％)。
合成EN139501的優(yōu)選方法是用NaBH4甲醇溶液降解3-α-乙酰氧基-7α，15-亞芐基-12，13-環(huán)氧單端孢霉-8-酮(標示為化合物EN139519，見實施例7)。EN139519的降解步驟與EN139496降解到EN139519的步驟一樣(見實施例7)。產(chǎn)物為白色固體，產(chǎn)率大于90％。
終產(chǎn)物的結構用標準NMR技術和質譜(MS)技術確定，得到如下數(shù)據(jù)1H和13C NMR分析1H NMR(丙酮-d6，500MHz)δ0.97(d，J＝6.8Hz，3H)，1.26(s，3H)，1.93-1.99(td，1H)，1.95(s，3H)，2.29(dd，J＝15，4.4Hz，1H)，3.04(d，J＝4.0Hz，1H)，3.10(d，J＝4.0Hz，1H)，3.66(d，J＝4.5Hz，1H)，3.78(t，J＝2.0Hz，1H)，4.04(d，J＝7.2Hz，1H)，4.18(d，J＝11.8Hz，1H)，4.30(m，2H)，4.49(d，J＝15.0Hz，1H)，5.02(td，J＝11.2，4.4Hz，1H)，7.02(s，1H)，7.25-7.33(m，3H)，7.43(-74.6(m，2H)。
13C NMR(丙酮-d6，125，MHz)d14.5，17.6，18.1，20.8，20.8，30.78，40.0，47.3，48.5，65.9，67.6，72.3，72.6，75.0，77.2，78.6，97.0，127.2，128.8，141.1，170.7。
質譜430 M+，37)，429(25)，373(4.3)105(100)。
上述數(shù)據(jù)說明EN139501具有下面的結構 化合物EN139501在許多情況下可以由EN139496降解而直接得到，沒有中間產(chǎn)物EN139519產(chǎn)生。
實施例5.7α，15-苯亞甲基-9α，12β-二甲基單端孢霉-3α，8α，12α-三醇(EN139502)的合成。
化合物7α，15-苯亞甲基-9α，12β-二甲基單端孢霉-3α，8α，12α-三醇(C22H30O6)通過下列步驟合成
氫化鋰鋁(3.7mg，10mmol)在0℃時加入到攪拌的含有EN139501(25mg，0.067mmol，如上面所合成的)的無水四氫呋喃溶液中。反應15分鐘后撤去冰浴，反應混合物退潮？1小時。然后將反應混合液在0℃冷卻，滴加冷水淬滅反應。在真空狀態(tài)下蒸發(fā)溶劑，殘留物用二氯甲烷(3×15ml)萃取?；旌嫌袡C相用鹽溶液(15ml)洗滌，無水硫酸鎂干燥，在真空中蒸發(fā)溶劑。通過色譜柱純化(7∶3的乙酰乙酸∶己烷混合物)，可以得到18mg白色固體產(chǎn)物EN139502(產(chǎn)率為72％)。
終產(chǎn)物標示為EN139502，其結構用標準質譜和NMR技術確定，得到如下數(shù)據(jù)質譜MS(EI)390.(M+)NMR分析1H NMR(丙酮-d6，500MHz)δ7.28-7.58(m，5H)，6.85(s，1H)，4.58(m，3H)，4.42(d，1H)，4.28(m，1H)，4.18(m，1H)，4.04(m，1H)，3.92(m，1H)，3.52(d，1H)，2.20-2.18(m，3H)，1.52(s，3H)，1.48(s，3H)，0.98(d，3H)。
13C NMR(丙酮-d6)141.49，128.72，128.51，127.35，97.43，83.13，83.11，80.25，77.36，75.26，71.29，70.52，69.83，53.02，43.33，41.53，31.42，30.62，22.57，18.47，17.92，14.44。
上述合成過程和NMR分析結果表明EN139502具有圖1B所示的結構。EN139502缺少9，10之間的雙鍵，8-酮基和天然單端孢霉烯所具有的特征性的12，13-環(huán)氧環(huán)。通過Krantis等人的方法(Can.J.Physicol.Pharmacol.，74894-903(1996)，本文已納入作為參考)測定，EN139502不能誘導腸動力進食模式，但確實可以在一個相對短的延遲(大約15分鐘)后促進或增強禁食模式。所誘發(fā)的禁食模式是很強的，并且就MMC(即組群活動)的組群間活動期間和長度而言在整個禁食模式期間無任何改變。組群間活動和組群活動變得特別明顯。這一現(xiàn)象在那些禁食模式控制記錄較弱的動物身上最明顯。
這些數(shù)據(jù)說明如EN139502一樣的特定化合物可用于增加禁食或喂養(yǎng)時間，因而可以增加食物攝入量和體重，或可用于對抗或中和本文所描述的能誘導進食模式的其他化合物的效應。
EN139502和化合物EN139499、EN139500、EN139501的試驗數(shù)據(jù)使我們對某些結構特征的重要性有了新的認識，以前認為這些結構特征是單端孢霉烯維持減少食物攝入和誘導拒食的效應所必須的。從傳統(tǒng)意義上說，天然單端孢霉烯的特征性9，10之間的雙鍵和8-酮基被認為是維持上述活性所必須的。然而，令人意外的是，本文所提供的數(shù)據(jù)顯示這些基團都不是誘導腸動力活動進食模式而減少食物攝入所必須的。特別是EN139499，雖然具有9，10之間的雙鍵和天然單端孢霉烯的特征性12，13-環(huán)氧環(huán)，但是其8-酮基降解為乙醇。而EN139499仍然能夠誘導腸動力進食模式。同樣，EN139500也能誘導進食模式，盡管其擁有一個8-乙酰氧基而不是8-酮基。這些數(shù)據(jù)搜說明單端孢霉烯特征性的8-酮基并非誘導腸動力進食模式所必須。另外，9，10之間雙鍵的降解和EN139501上的8-酮基一樣不會降低其誘導腸動力進食模式的能力。因此，與以前所熟知的觀點相反，9，10之間雙鍵也不是維持腸動力進食模式誘導能力所必須的。
但是，EN139499、EN139500和EN139501仍然保留了12，13-環(huán)氧環(huán)。這個12，13-環(huán)氧環(huán)對于誘導進食模式和減少食物攝入是非常重要的，這一點在EN139502上表現(xiàn)出來，不僅EN139502上的經(jīng)典單端孢霉烯s所具有的9，10之間雙鍵和8-酮基被降解，而且2，13-環(huán)氧環(huán)也被打開。如上所述，與EN139499、EN139500和EN139501，EN139502不能誘導腸動力活動進食模式。
實施例6.3α-乙酰氧基-12，13-環(huán)氧-9α-甲基單端孢霉-7α，8α，15-三醇(EN139503)的合成。
標示為EN139503的化合物(C17H26O7)通過下列步驟合成溶解在5ml甲醇中的EN139501(25mg，0.067mmol)和硫酸樟腦(23.31mg，0.1mmol)溶液室溫下攪拌90分鐘。反應混合物用20ml乙酰乙酸稀釋，水、飽和二碳酸鈉和鹽水洗滌。有機相用硫酸鎂干燥，在真空中蒸發(fā)溶劑。粗產(chǎn)物用6∶4的乙酰乙酸∶己烷混合物進行色譜柱純化，可以得到19.3mg白色固體產(chǎn)物EN139503(＞99％)。
終產(chǎn)物標示為EN139502，其結構用NMR技術確定，得到如下數(shù)據(jù)1H NMR(CDCl3，500MHz)δ5.12(m，1H)，4.28(d，1H)，3.93(m，2H)，3.80(m，1H)，3.75(d，1H)，3.66(d，2H)，3.12(m，2H)，2.04-2.10(m，2H)，2.05(s，3H)，1.76-1.84(m，1H)，1.50(dt，1H)，1.22-1.25(m，1H)，1.08(s，3H)，0.97(d，3H)。
13C NMR(CDCl3，500MHz)δ170.54，78.28，76.30，73.06，72.62，71.40，64.83，63.16，48.10，47.99，46.83，41.03，30.81，29.43，20.84，17.05，14.87。
上述合成過程和NMR分析結果表明EN139503具有圖1B所示的結構。
實施例7.其它化合物的合成。
正如下面所概括描述的，附加的新型化合物可以很容易的用本領域熟知的有機合成方法從各種“起始”或“母體”化合物來合成。
脫苯亞甲基反應可以通過將起始化合物溶于甲醇中，加入催化量的樟腦硫酸？，在室溫下攪拌經(jīng)薄層色譜監(jiān)測直到反應完全為止。一般情況下反應時間為1小時。
羰基化反應是通過將7α，15-二醇與溶于二氯甲烷中的三碳酰氯和嘧啶在室溫下反應而完成的。通常的反應時間是6小時。
乙?；捅郊柞；峭ㄟ^在室溫下分別與溶于二氯甲烷的乙酸酐和苯甲酰氯反應來進行的。三乙酰胺和4-二甲基氨基嘧啶(DMAP)分別用作輔助試劑？和催化劑。
9α，12β-二甲基單端孢霉-3α，7α，8α，12α，15-戊醇(標示為EN139504，圖1B)是通過將EN139502去苯亞甲基來完成的。
3α-乙酰氧基-12，13-環(huán)氧-9α-甲基單端孢霉烯-7，8，15-三醇(標示為EN139503，圖1B)是通過將EN139501去苯亞甲基來完成的。
7α，15-苯亞甲基-3α，8α-二乙酰氧基-12，13-環(huán)氧-9α-甲基單端孢霉(標示為EN139505，圖1C)是通過將EN139501乙酰化來完成的。
3α，8α-二乙酰氧基-12，13-環(huán)氧-9α-甲基單端孢霉-7α，15-二醇(標示為EN139506，圖1C)是通過將EN139505去苯亞甲基來完成的。
3α，8α-二乙酰氧基-12，13-環(huán)氧-9α-甲基單端孢霉-7α，15-碳酸鹽(標示為EN139507，圖1C)是通過將EN139505羰基化來完成的。
7α，15-苯亞甲基-3α，8α-二乙酰氧基-9α，12β-甲基單端孢霉-12α-醇(標示為EN139508，圖1D)是通過將EN139502乙?；瘉硗瓿傻?。
3α-乙酰氧基-12，13-環(huán)氧-9α-甲基單端孢霉-8-酮-7α，15-碳酸鹽(標示為EN139511，圖1E)是通過將EN139495(3α-乙酰氧基-12，13-環(huán)氧單端孢霉-9-烯-8-酮-7α，15-碳酸鹽；如上所述)羥基化來完成的。
3α-苯甲酸基-12，13-環(huán)氧單端孢霉-9-烯-8-酮-7α，15-碳酸鹽(標示為EN139514，圖1E)是通過將EN139494苯甲?；瘉硗瓿傻?。
將EN139495用H2/Pd/C氫化而得到EN139512。
12，13-環(huán)氧單端孢霉-9-烯e-3α，7α，8α，15-四醇(標示為EN139518)是通過將EN139495在水合甲醇KOH中進行皂化而合成的。EN139518的結構如下
3α-乙酰氧基-7α，15-苯亞甲基-12，13-環(huán)氧單端孢霉-8-酮(標示為EN139519)是通過在甲醇中用NaBH4將EN139496降解來完成的。
65mg硼氫化鈉在0℃時加入到含426mg EN139496的40ml甲醇溶液中。然后將反應混合液放置于室溫下使之達到室溫后攪拌，直到TLC顯示起始材料消失，一般需1小時。然后加入25ml 1％的鹽酸溶液，在負壓下去除大部分甲醇。剩余的水性溶液用20ml乙酰乙酸萃取三次。混合有機萃取物用硫酸鎂干燥，去除溶劑。以2∶3的乙酰乙酸∶己烷混合物作為洗脫液經(jīng)硅膠色譜純化后可得到410mg純化的產(chǎn)物(＞95％)。EN139519的結構如下 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ1.1(d，3H)，1.3(s，3H)，1.7-1.9(m，3H)，2.03(s，3H)，2.0-2.28(m，3H)，2.6-3.05(m，1H)，3.05(d，1H)，3.1(d，1H)，3.6(d，1H)，3.8-3.8(m，2H)，4.15(d，1H)，4.85(s，1H)，5.25(td，1H)，5.7(s，1H)，7.25-7.7(m，3H)，7.45-7.55(m，2H)。
13C NMR δ12.5，16.4，20.2，35.5，36.8，39.8，46.8，47.6，47.9，65，67.5，69.8，70.7，78，79.5，97.6，125.9，128，128.5，137，170.3，208。
7α，15-苯亞甲基-12，13-環(huán)氧-3β-羥基單端孢霉-8-酮(標示為EN139520)和7α，15-苯亞甲基-9α，12β-二甲基-3α，12α-二羥基單端孢霉-8-酮(標示為EN139522)。
溶于5ml THF中的135mg LiAlH4懸液冷卻到0℃，在30分鐘內(nèi)滴加含有757mg化合物EN139496的25ml THF溶液。使溶液升到室溫后加熱退潮？1到2小時。然后將混合液從新冷卻到0℃后加冰水淬滅。在真空中去除大部分THF，剩余的液體酸化到pH為5，40ml乙酰乙酸萃取三次。混合有機萃取物用硫酸鈉干燥，蒸發(fā)去除溶劑。粗產(chǎn)物用硅膠柱進行色譜純化，以2∶3的乙酰乙酸洗脫后可得到150mg EN399520。以4∶1的乙酰乙酸洗脫后可得到168mg EN399522。
7α，15-苯亞甲基-12，13-環(huán)氧-3β-羥基單端孢霉-8-酮(化合物EN139520)的結構數(shù)據(jù)如下
1H NMR(CDCl3，500MHz)δ1.11(d，J＝6.5Hz，3H)，1.3(s，3H)，1.78(td，J＝14.3，2.6Hz，1H)，2.03(dd，J＝14.1，4.1Hz，1H)，2.07(dd，J＝14.1，4.1Hz，1H)，2.08(bs，0H)，2.15-2，2(m，2H)，2.95-3.07(m，1H)，3.07(d，J＝4.1Hz，1H)，3.11(d，J＝4.1Hz，1H)，3.59(d，J＝4.5Hz，1H)，3.61(d，J＝12.6Hz，1H)，4.17(dd，J＝12.3，1.9Hz，1H)，4.56(td，J＝10.7，4.4Hz，1H)，4.88(s，1H)，5.72(s，1H)，7.3-7.38(m，3H)，7.43-7.5(m，2H)。
13C δ13.4，16.9，35.6，37.5，43.0，47.6，48.4，65.7，67.7，69.4，70.2，79.7，80.2，97.5，126.3，128.3，129.0，137.6，206.6。
7α，15-苯亞甲基-9α，12β-二甲基-3α，12α-二羥基tricocethcan-8-酮(化合物EN139522)的結構數(shù)據(jù)如下 1H NMR(丙酮-d6，500MHz)δ1.02(d，J＝7.0Hz，3H)，1.41(s，3H)，1.59(s，3H)，1.76(dd，J＝14.1，3.2Hz，1H)，1.88(td，J＝14.2，3.3Hz，1H)，2.17(dd，J＝14.1，10.5Hz，1H)，2.88(bs，1H)，2.96(m，1H)，3.49(d，J＝12.7Hz，1H)，3.60(d，J＝4.6Hz，1H)，3.82(s，1H)，4.0-4.08(m，1H)，4.12(dd，J＝12.6，1.4Hz，1H)，4.16(t，J＝1.4Hz，1H)，4.64-4.68(m，1H)，5.08(s，1H)，5.78(s，1H)，7.3-7.4(m，3H)，7.5(m，2H)。
13C NMR δ14.1，17.3，22.4，37.4，38.9，43.9，50.2，52.8，69.2，70.5，71.3，77.1，80.1，80.2，97.0，127.2，128.3，139.9，209.2。
實施例8.大鼠喂養(yǎng)試驗。
成年Sprague-Dawley大鼠喂養(yǎng)試驗的方法采用Prelusky(NaturalToxins，5(3)121-125(1997))描述的豬的單端孢霉烯喂養(yǎng)試驗方法。根據(jù)體內(nèi)動力掃描試驗結果確定誘導成年Sprague-Dawley大鼠腸動力進食模式所需的單端孢霉烯DON的劑量為每公斤體重1-10mg。假如一個300克的大鼠，實際需要注射的DON等于0.3-3.0毫克(mg)。DON喂養(yǎng)試驗中食物中化合物的濃度范圍(ppm)要與體內(nèi)動力試驗中靜脈注射的劑量相匹配，同時要與文獻報道的其他喂養(yǎng)/毒理學試驗一致。Arnold等人(Fundament.Appl.Toxicol.，6(4)891-696(1986))的試驗數(shù)據(jù)說明每公斤體重給予0.25mg DON相當于1.69ppm，如果大鼠每天攝入22g食物(成年大鼠一天的正常食物攝入量)，就相當于攝入了0.037mg DON。在Prelusky的試驗中，豬每天接受的藥物為大約每公斤體重1.26mg，根據(jù)外推法計算，相當于一個300克的大鼠每天接受0.378mg DON。
用Krantis等人的方法檢測證實新合成的化合物能夠誘導腸動力進食模式，進一步評價這些化合物對大鼠食物消耗和體重增加的效應。在這些喂養(yǎng)試驗中，試驗化合物和普通DON單端孢霉烯(陽性對照)在食物中的濃度都設了三個，同時設了“無藥物”對照組。如下所示，另外一組作為陰性對照。另一個對照組(pair-fed組)的設立是為了校正那些由于藥物的作用導致食物消耗變化時的數(shù)據(jù)。
基于動物的體重為300克，食物中藥物的濃度分別為0.083mg/天(3ppm)；0.276mg/天(10ppm)；和0.55mg/天(20ppm)。從雄性Spragur-Dawley大鼠正常飲食日食物消耗量預試驗的結果來看，大鼠每天消耗的食物量平均為27.6克。如果考慮生物利用度(Arnold等，1986)，每一飲食試驗濃度組每天攝入的DON或試驗化合物經(jīng)計算分別為0.28mg/kg b.w./天，0.92mg/kg b.w./天和1.38mg/kg b.w./天。
每一個喂養(yǎng)試驗都用下面的方法。從Charles River，Quebec Canada獲得25只雄性Sprague-Dawley大鼠，體重在175-200克之間，先適應新環(huán)境6天，然后隨機分組，每組10只(n＝10)第一組為對照組，喂養(yǎng)正常食物和水，在整個試驗過程中隨意飲食和飲水。
第二組為“pair-fed”對照組，兩天后開始(從適應環(huán)境開始第8天)喂養(yǎng)食物的量限制到試驗組的兩天前的平均水平(5只同第4組，另5只同第5組)。
第4、第5組等，是試驗組，喂養(yǎng)本文所描述的化合物(如EN139499和EN139500)，其接受的食物分別含有3、10或20ppm的試驗化合物，飲水無限制。
喂養(yǎng)試驗開始時所有組都先喂養(yǎng)3天的正常食物(對照)(-3到-1天)，檢測這個時間段的食物消耗和體重增加的基線變化。在以后的七天或十天內(nèi)，每一只大鼠都是按照預定的試驗方案來喂養(yǎng)食物。動物每天稱重。每天給予新鮮食物，每天剩余的食物(也收集干的、溢撒出食槽外的食物)也要稱重。記錄全天所提供的食物量。
所有動物都喂養(yǎng)標準大鼠飼料，飼料以粉末形式提供(18％autoclavableRodent Feed，Purina Mills，Woodstock，ON)。每一治療組的試驗化合物(粉末形式)都混合到飼料中以提供所需要的藥物終濃度。
每一大鼠都單獨放置在一個籠子里。在每一籠子底部安裝兩層支架放到木板的上面。這樣就保證動物只能吃到提供的食物。粉狀飼料放到籠內(nèi)特制的磁罐中(為了防止食物溢出)。動物保持在12小時光照/12小時黑夜的循環(huán)中，嚴格限制進入動物房的次數(shù)以最大程度的減少外界活動和/或噪音造成動物飲食行為的異常?；\子的更換、動物的稱重、剩余食物的稱重和添加新鮮食物都在每天光照開始時進行(大約上午9:00點)。這個例行程序要嚴格執(zhí)行以盡量減少對動物的壓力。每一只大鼠都有一個放在籠子的塑料管用于藏身。
13天后(第-3天到第10天)，動物稱重并確定最終的食物消耗量。第7天或第10天標明為試驗完成。每組取兩只動物處死，解剖出胃、小腸和大腸標本進行組織學檢測。
在-3天到-1天，治療組食物消耗和體重增加的基線變化和對照組相比無明顯變化。
DON飲食治療組和試驗化合物飲食治療組的所有動物食物消耗和體重增加從喂養(yǎng)治療飲食第1天開始都減少。
在EN139499和EN139500(20ppm)試驗組，接受這兩個化合物的動物的食物消耗和體重增加量都減少。EN139499對日體重增加量的影響可以持續(xù)10天(圖15)。為了比較，EN139495(3-乙酰-DON)治療組和EN139499 pair fed組的每日變化顯示在圖15中?？傊珽N139499組的自重增加量在第10天時減少19％。EN139500組也得到了同樣的結果。
這些喂養(yǎng)試驗巨額國表明通過飲食給予的DON(陽性對照)和EN139499(試驗化合物)可以即時和持續(xù)地減少Sprague-Dawley大鼠的食物消耗和體重增加量。用于試驗的每一化合物的選擇都是基于其用如上所述的Krantis等人的方法(1996)所測定的誘導腸動力進食模式的能力。按照Krantis等人的方法分析出的具有腸動力調(diào)節(jié)活性的化合物具有與DON相同的作用模式，即在注射后的20-120秒內(nèi)，麻醉的Sprague-Dawley大鼠胃十二指腸上自然發(fā)生的禁食動力模式轉變?yōu)榈湫偷奈桂B(yǎng)動力模式。這以效應持續(xù)30-60分鐘，然后自然發(fā)生的動力活動恢復到禁食模式。根據(jù)本發(fā)明，能誘導這種進食模式的化合物都可以人為地縮短喂養(yǎng)時間，因此可以減少敏感物種的食物攝入總量。
本發(fā)明代表性化合物的喂養(yǎng)試驗結果證明了這種效應。特別是DON和本文所描述的試驗化合物在第一天時達到了其調(diào)節(jié)食物消耗的最大效應，并且這種效應不能恢復(數(shù)據(jù)未列出)。食物消耗減少的結果就是體重增加量的減少。
總之，這種喂養(yǎng)試驗方法能夠很容易地監(jiān)測飲食行為的日常變化，表明DON(陽性對照)和試驗化合物具有一致的和相同的作用模式。而且，結果也表明Krantis等人(1996)的體內(nèi)動力檢測方法可以用于篩選具有調(diào)節(jié)食物攝入活性的化合物。喂養(yǎng)試驗的結果說明，DON、EN139495以及本發(fā)明的試驗化合物EN139499和EN139500混合在食物中的濃度等于或低于其他大鼠試驗中的最大濃度時，其降低食物消耗和體重增加量的效應時濃度依賴性的。這些新型化合物的效應彼此相同。在這些試驗中，比較了試驗化合物和等價濃度DON的效應，結果表明他們具有相同的作用模式和相似的調(diào)節(jié)能力。
實施例9.附加的EN139499依賴性進食模式誘導試驗。
前面的化合物EN139499的試驗(前面的實施例2)表明當對Sprague-Dawley大鼠全身給藥(即，10mg/kg，iv)時，用Krantis等人的方法(1966)檢測發(fā)現(xiàn)化合物可以在胃十二指腸誘導出經(jīng)典的進食模式動力活動。進一步的EN139499試驗是為了評價化合物在1mg/kg(iv)(n＝6)低劑量時的效應。
EN139499溶于0.9％鹽水中給氟烷麻醉的大鼠注射，用上述Krantis等人的方法(1996)記錄腸動力活動。本試驗的結果清楚地表明EN139499在1mg/kg(iv)低劑量時也能有效地誘導出大鼠的經(jīng)典進食模式動力活動。特別是在小腸的十二指腸部位(D1位點)，EN139499的誘導使收縮和舒張的幅度和頻率都增加。與經(jīng)典腸動力活動進食模式相一致的是，胃(胃竇位點S1)的動力活動呈典型而明顯的減弱(數(shù)據(jù)未列出)。
與前面的10mg/kg(iv)劑量結果相比，化合物的劑量效應是很明顯的EN139499在低劑量時起作用的開始時間是在注射后120秒，而高劑量時為70秒，低劑量的作用持續(xù)時間為20-30分鐘，而高劑量為40分鐘。
實施例10.其他化合物所誘導的腸動力進食模式。
用Krantis等人的方法(1996)進一步檢測了一組其他化合物誘導大鼠腸動力進食模式的能力。從胃(即胃竇位點S1)和小腸(十二指腸D1和/或D2位點)上所記錄的特征性動力模式以及對所記錄的動力活動的各個組分(即，收縮和舒張的幅度和頻率)進行分析得出的結果來看，這些化合物誘導出的經(jīng)典腸動力進食模式是很明顯的(見圖7-14)。對每一化合物的數(shù)據(jù)進行分析后把特別的結果概述如下EN139506和EN139507溶于20％的二甲基亞砜(DMSO)中。EN139503溶于40％的二甲基亞砜(DMSO)中。EN139505和EN139508溶于70％的二甲基亞砜(DMSO)中。EN139518溶于0.9％的鹽水中。按照本文所描述的體內(nèi)試驗方案，用Krantis等人的方法(1996)確定，DMSO在高達70％時也不會對記錄的胃十二指腸(位點S1、D1和D2)的腸動力活動產(chǎn)生影響。
在對照條件下，氟烷麻醉雄性Sprague-Dawley大鼠的胃竇出現(xiàn)自發(fā)的小幅變動的收縮和舒張動力反應。在近端十二指腸(位點D1)和小腸遠端大約在近端回腸(位點D2)部位，自發(fā)動力活動的模式表現(xiàn)為劇烈傳播動力活動期(MMC或組群活動)和非傳播動力活動期(組群間活動)的交替循環(huán)，每一循環(huán)大約持續(xù)6-9分鐘。MMC或組群活動持續(xù)大約1-4.5分鐘，其組成為大幅度、高頻率的舒張和收縮。界于二個循環(huán)之間的非傳播動力活動基本是由小幅度、低頻率的舒張和收縮組成的。由此看出，所有動力活動的控制模式都與以前的試驗一致(見上述)。
當劑量為10mg/kg(體重)、iv(n＝10)時，用Krantis等人的腸動力分析方法(1996)檢測發(fā)現(xiàn)化合物EN139503可以誘導大鼠出現(xiàn)經(jīng)典的進食模式。作用持續(xù)時間為40-50分鐘，起作用的開始時間是在注射后60秒。
EN139503對小腸(位點D1)作用的一個例子顯示在圖16中。注射EN139503后(垂直箭頭)就會出現(xiàn)一個經(jīng)典的腸動力活動進食模式(水平箭頭)，在十二指腸的D1位點上誘導出一種緊張模式的活動過度。與可靠的進食模式相一致的是在胃竇(位點S1)部位所記錄的組織動力活動同時減弱(數(shù)據(jù)未列出)。正如所預料的那樣，對腸動力活動的每一個組分(幅度和頻率)的分析也表明在小腸和胃上誘導出了經(jīng)典的腸動力活動進食模式(數(shù)據(jù)未列出)。
化合物EN139506在注射劑量為10mg/kg，iv(n＝8)時也可以誘導出與EN139503一樣的經(jīng)典腸動力活動進食模式。EN139506作用持續(xù)時間為30-40分鐘，起作用的開始時間是在注射后120秒。
化合物EN139507在注射劑量為10mg/kg，iv(n＝8)時也可以誘導出經(jīng)典腸動力活動進食模式。EN139507誘導進食模式的的起始時間與其他試驗化合物是一樣的，即注射后120秒，但是作用持續(xù)時間與其他試驗化合物如EN139503和EN139506的30-40分鐘相比稍短，約為15分鐘。
化合物EN139505的試驗劑量為20mg/kg，iv(n＝5)?？梢耘紶栍^察到有腸動力活動禁食模式出現(xiàn)，持續(xù)時間為30-35分鐘。在十二指腸位點D1部位出現(xiàn)活動的時間為60秒。在胃中，動力活動減弱，是典型的進食模式，起作用的平均起始時間為注射后84秒(數(shù)據(jù)未列出)。
化合物EN139508在注射劑量為10mg/kg和20mg/kg，iv時也可以誘導出劑量依賴的腸動力進食模式。高劑量時作用持續(xù)時間較長(大約30分鐘)。兩個劑量起作用的起始時間均為注射后約60秒。
化合物EN139518在注射劑量為10mg/kg，iv(n＝8)時可以在注射后120秒內(nèi)誘導出腸動力活動進食模式。作用持續(xù)時間為20-34分鐘。
化合物EN139519在注射劑量為10mg/kg，iv(n＝7)時可以誘導出腸動力進食模式。作用起始時間為25秒，作用持續(xù)時間為30-50分鐘。
化合物EN139522在注射劑量為10mg/kg，iv(n＝6)時可以誘導出經(jīng)典進食模式。作用起始時間為20秒，作用持續(xù)時間為35分鐘。
實施例11.大鼠附加喂養(yǎng)試驗。
附加試驗的目的是為了研究所選擇的本發(fā)明化合物對食物攝入量和體重增加量的影響，基本按照前面所描述的實施例8的方法進行。除非另外提示，這些試驗都持續(xù)13天，在此期間給雄性Sprague-Dawley大鼠喂養(yǎng)含監(jiān)測所選擇的本發(fā)明化合物的飼料，并檢測大鼠的體重增加量和食物消耗量。喂養(yǎng)大鼠的飼料是含或不含試驗化合物的粉末狀標準大鼠飼料(Purina Mills，Woodstock，ON)。
在這些試驗中，體重在175-200克之間的雄性Sprague-Dawley大鼠(CharlesRiver，Quebec Canada)先適應新環(huán)境6天，然后隨機分為下列5組進行試驗第1組(對照組)喂養(yǎng)正常食物，在整個試驗過程中隨意飲水。
第2組喂養(yǎng)含3、10或20ppm DON的食物，在整個試驗過程中隨意飲水。
第3和第4組(試驗組)喂養(yǎng)含所選擇的本發(fā)明化合物的食物。
第5組(pair-fed組)，本試驗組的大鼠兩天后開始(從適應環(huán)境開始第8天)喂養(yǎng)食物的量限制到試驗組(第3組或第4組)的兩天前的平均水平。
喂養(yǎng)試驗開始時所有組都先喂養(yǎng)3天的正常食物(對照)(-3到-1天)，檢測這個時間段的食物消耗和體重增加的基線變化。在以后的十天內(nèi)，每一只大鼠都是按照預定的試驗方案來喂養(yǎng)單獨新鮮食物或新鮮食物加試驗化合物。動物每天稱重。每天給予新鮮食物，每天剩余的食物和干的、溢撒出食槽外的食物也要稱重。記錄全天所提供的食物量。
每一大鼠都單獨放置在一個籠子里，這樣就保證動物只能吃到提供的食物。粉狀飼料放到籠內(nèi)特制的磁罐中以防止食物溢出。動物保持在12小時光照/12小時黑夜的循環(huán)中，嚴格限制進入動物房的次數(shù)以最大程度的減少外界活動和/或噪音造成動物飲食行為的異常?；\子的更換、動物的稱重、剩余食物的稱重和添加新鮮食物都在每天上午9:00點進行。這個例行程序要嚴格執(zhí)行并在每天的同一時間進行。每一只大鼠都有一個放在籠子的塑料管用于藏身。
13天后(第-3天到第10天)，動物稱重并確定最終的食物消耗量。在第5、第7或第10天完成試驗。每組取兩只動物處死，解剖出胃、小腸和大腸標本進行組織病理學檢測。
上述試驗方法用于研究和比較DON及其他化合物對食物攝入量和體重增加量的影響。
試驗1在試驗1中，大鼠分別喂養(yǎng)添加下列化合物的正常粉末飼料(正常飲食)20ppm(n＝8)或40ppm(n＝5)的EN139499；20ppm(n＝8)或40ppm(n＝6)的EN139500；以及無化合物(對照組，n＝6)。
喂養(yǎng)添加DON的飼料的大鼠與對照組相比每天的食物消耗量和平均日體重增加量都下降。喂養(yǎng)添加EN139499或EN139500的飼料的大鼠與對照組相比每天的食物消耗量呈“上下反復模式”，這也是喂養(yǎng)添加DON的飼料的動物所具有的典型模式(數(shù)據(jù)未列出)。
喂養(yǎng)添加20ppm EN139499飼料的大鼠在第10天是總體重增加量未對照組(正常飼料)的63.6％(見圖16)。40ppm EN139499飼料組大鼠的總體重增加量大約為20ppmEN139499飼料組大鼠的兩倍。與此相反的是，EN139500在20ppm時具有與20ppmEN139499相同的效應，而在40ppm時兩者相差很多，說明兩個化合物的濃度反應范圍是不同的。
試驗2在試驗2中，大鼠分別喂養(yǎng)添加下列化合物的正常粉末飼料20ppm(n＝10)的EN139518和無化合物(正常飲食對照，n＝6)。EN139518具有良好的均一性并且是完全可溶的。這種特性在將化合物添加到食物如本試驗所用的正常粉末飼料中時特別有益。
日體重增加量的百分比變化是一種典型的“上下反復模式”(數(shù)據(jù)未列出)。EN139518飼料組大鼠的標準化日消耗量與喂養(yǎng)正常飼料的對照組大鼠相比在試驗的第3天到第5天出現(xiàn)并維持明顯的下降(見圖17)。EN139518飼料組大鼠的體重增加量與對照組大鼠相比在試驗的第5天減少約16％(圖18)。
試驗3在試驗3中，大鼠分別喂養(yǎng)添加40ppm(n＝8)EN139505的正常飼料和單獨的正常飼料(對照，n＝10)。EN139503對食物消耗量和體重增加量無影響。
實施例12.剛斷奶豬的喂養(yǎng)試驗。
用豬的喂養(yǎng)試驗檢測DON和精選的本發(fā)明化合物在體內(nèi)的效應。豬是良好的腸動力體內(nèi)試驗模型，因為豬的腸道神經(jīng)肌肉生理學與人是一樣的。
下面的方法用于研究化合物(藥物)對剛斷奶豬的飲食表現(xiàn)(食物攝入量)的體內(nèi)效應。在本方法中，喂食時間限制到每天的兩個45分鐘內(nèi)，即上午(“AM”)和晚上(“PM”)，第一天的第一次喂食用含有各種劑量化合物(“藥物的”或“加藥的”處理)的飼料。所有試驗都按照Saskatchewan大學動物飼養(yǎng)與供應委員會所發(fā)布的《動物飼養(yǎng)守則#19970021》執(zhí)行。
DON、EN139499和EN139518所用的劑量分別為每公斤體重0.11kg(“低”劑量)、0.17kg(“中等”劑量)和0.34kg(“高”劑量)(只在第一天上午喂食前給予，見下)。用含有涂抹在頭道甜點(starter crumble)外的奶替代物的前飼料給予所述化合物。在整個基線期(見下)和試驗期的第一天上午(AM)對照組給予安慰劑(奶替代物和頭道甜點)。
用于試驗的動物為60頭雜交(Camborough 15×Canabrid；Pig ImprovementCanada)閹割雄性豬(barrows)，分成獨立的三組，每組20頭，體重在5到7公斤之間，相差最好不超過±0.5公斤，年齡大約為25天，斷奶后5±3天。有明顯健康問題(如虛弱、瘸、疝氣)的要排除在試驗之外。豬的鑒別是通過在出生后耳朵鉸口的方法，以顯示出生的窩別和在一窩中的編號。豬在出生后大約20天斷奶，然后轉移到仔豬護理室，一組關入一個圍攔中飼養(yǎng)直到挑選時為止。豬可以隨意進食第I階段摻入藥物的食物和水，按照典型護理程序管理直到挑選時為止。
零劑量安慰劑和每一試驗化合物的三個劑量(低，0.mg/kg bw；中，0.17mg/kg bw；高，0.34mg/kg bw)隨機分配給五頭豬(按照-1天的體重給藥)。養(yǎng)在每一圍攔里的每一頭豬作為一個試驗單位。
先假設喂養(yǎng)試驗化合物的豬和喂養(yǎng)安慰劑的豬的表現(xiàn)沒有什么不同。如果這種可能性發(fā)生的平均幾率是5％或更低，則排除這種預先假設而接受與其相反的假設，即在第1天上午9:00喂養(yǎng)試驗化合物的豬和喂養(yǎng)安慰劑的豬的表現(xiàn)是不同的。
適應新環(huán)境期在選擇的時候，先稱量豬的體重，然后移到各自的圍攔里。讓豬先適應新豬舍和圍攔，單獨喂養(yǎng)至少兩天。在此期間，豬可以隨意接近無藥物的食物和水。
基線期監(jiān)測5天(-5天到-1天)飲食表現(xiàn)和體重的處理前差異。在此期間，早餐(AM)和晚餐(PM)前先讓豬接受和適應無藥物(即，無化合物存在)“款待物(treat)”約20分鐘。然后大約在上午9:20和下午14:20開始讓豬隨意接近無藥物食物45分鐘。在5分鐘內(nèi)不吃款待物的豬不給食物直到吃完約75％的款待物后20分鐘為止。不吃款待物的豬在喂食時間內(nèi)(AM或PM)不給人任何食物。
試驗期基線期(見上)后開始2天的試驗期。在第1天上午，喂給豬含有設定化合物的款待物，款待物的量等于其在上述基線期內(nèi)所吃的量(只是在45分鐘內(nèi))。在第1天下午，在喂食前不給款待物。同樣，第2天(AM或PM)在喂食前也不給款待物。小心照看以免45分鐘的喂食期內(nèi)剩在食槽內(nèi)的食物過多。豬可以自由飲水。在45分鐘的喂食時間結束時，剩在食槽內(nèi)的食物打掃干凈以保證每個動物的進食時間相同。
在第1天的45分鐘晚餐結束后從每一只動物的頸靜脈收集血液標本。大約5ml血液標本收集到7ml的紅頭試管中。在試管上標明縮寫的試驗號、動物標簽號和日期。
在收集標本后的3個小時內(nèi)，3500×g離心20分鐘分離血液標本。將血漿輕輕倒出或吸出移入一個貼標簽的帶塑料蓋的試管中以便進行下面的分析。
在第3天早晨將豬移出豬舍回到群體前稱重。
測量和觀察在選擇的時候就給每頭豬稱重，基線期和試驗期內(nèi)(試驗期內(nèi)劑量的計算以同一天的體重為基準)每天在提供計劃的款待物前也要稱重，另外在試驗期的第3天結束試驗前也要稱重。在每次的45分鐘進食時間結束時要稱重添加和回收的食物并作記錄。任何的溢撒都要注意，如果較多應計算在內(nèi)。
每一動物體重用于計算每一時期日體重增加量和總的體重增加量(在特定時期每一圍攔內(nèi)的體重增加量被天數(shù)除)。
添加和回收的食物的量被用來計算每一喂養(yǎng)時期(AM和PM)每天和總的進食表現(xiàn)(在特定時期內(nèi)的進食表現(xiàn)被喂養(yǎng)豬的天數(shù)除)。
在基線期的前4天和試驗期的2天內(nèi)要觀察的指標包括動物飲食行為的一般狀態(tài)(給食物后馬上吃或等一會兒再吃，不間斷地吃或間歇地吃，在45分鐘前吃完或者是在拿走食物時動物還想吃，對款待物、食物的興趣以及情緒(嬉戲，疲倦，焦慮))。
在基線期的最后1天和試驗期的第1天要觀察的指標包括動物開始吃款待物的時間，吃完的時間，是否持續(xù)吃款待物，是否和合適發(fā)生嘔吐，以及吃完款待物的情緒(嬉戲，昏睡，病態(tài)，焦慮)。在45分鐘的喂食期內(nèi)，要注意開始進食和結束進食的時間，也要注意是否有嘔吐、用鼻拱地、吃食/飲水時的情緒(嬉戲，昏睡，病態(tài))，動物對食物和款待物的興趣，以及任何異常行為。
在試驗期間，每一圍攔內(nèi)的豬每天至少要觀察兩次，并且估計其健康狀況。任何表現(xiàn)出病癥的豬要記錄下來，并且在以后要更加仔細觀察。任何不利的化合物相關反應、非化合物誘導的食物攝入減少也要記錄下來。
食物制備，要求，混合和取樣適應新環(huán)境期、基線期和試驗期的飼料都是商品化的無藥物護理飼料(Ultrawean 21，F(xiàn)ederated CO-OP Limited)。飼料制備的標準至少要達到(1.35％Tlys，3600kcal DE)，并且要超過5-12公斤豬的NRC 1998日營養(yǎng)要求。飼料要以粉末形式提供。在飼料內(nèi)不含有可檢測水平的任何單端孢霉烯，因為這些物質可能會影響試驗結果。本試驗中的混合物和計算結果列表如下試驗期的第一天化合物(藥物)飼料計算結果
存貨的制備1.確定第一天每組中豬的總重量(5頭豬)＝W2.將上述值W乘上藥物＝每組中所需要的藥物總量3.將上述值W乘上奶替代物＝每組中所需要的奶替代物總量4.將上述物質混合在一起放置在貼標簽的容器內(nèi)。
確定每一動物的治療飼料量每一動物的體重(以公斤計)乘以治療劑量，稱出來后裝入每一動物帶標簽的藥物容器內(nèi)。加等量的飼料搖晃混勻。
結果按照上述方法，可以得到接受低、中、高劑量的DON、EN139499或EN139518的豬所消耗的食物量，以柱形圖分別繪制在圖19、20和21中。數(shù)據(jù)顯示，在第一天早餐時間前給予每一試驗組動物的所有三個化合物的一個或多個劑量可以降低豬在早餐期間的食物消耗量。而且，每一化合物對食物消耗量的影響到下一次進食時逐漸減弱，即第一天的晚餐和隨后的進食時間。事實上，有些接受中或高劑量化合物的豬在第一天早餐時所吃的食物比化合物效應逐漸減弱的第一天晚餐時吃的還要多(見圖21中EN139518處理豬在第一天下午時的食物消耗量)。
本試驗中，接受中或高劑量DON的某些豬出現(xiàn)嘔吐現(xiàn)象。然而，接受EN139499或EN139518的豬沒有出現(xiàn)嘔吐現(xiàn)象。
本試驗的結果表明本發(fā)明的化合物可以預期的、高度可控的方式有效和暫時降低食物攝入量，即如果在特定的進食時間前給予，那些由于長期得不到營養(yǎng)攝入而出現(xiàn)的潛在生理問題就不會出現(xiàn)。
而且，體內(nèi)的試驗數(shù)據(jù)清楚地表明降低食物攝入的活性是與任何“毒”副作用分離的，如嘔吐，因為以前的經(jīng)驗表明動物攝入被天然單端孢霉烯化合物如DON污染的食物是引起食物攝入量減少的原因。在這方面特別有意思的是來自接受化合物EN139499或EN139519豬的數(shù)據(jù)，本發(fā)明的這兩個化合物都不含有8-酮基基團，以前被認為是天然單端孢霉烯誘導嘔吐和抑制蛋白合成等毒性效應的關鍵基團。
上面正文中所引用的所有專利、申請和出版物都已納入本文作為參考。
在不脫離本發(fā)明的范圍和下面權利要求的精神的情況下，本文所描述的本發(fā)明的其他變化和實施方式對于本領域的普通技術人員來說是顯而易見的。
權利要求
1.一種組合物，其特征在于，所述組合物含有如結構式I所示的腸動力調(diào)節(jié)化合物 其中，x代表9位碳原子和10位碳原子之間的單鍵或雙鍵；R1和R2分別代表氫原子；C1-C6的烷基；C1-C6的芳烷基；或?；鵆(O)R5，其中R5選自C1-C6的烷基；C2-C6的烯基；C2-C6的炔基；苯基；被選自鹵素、烷基、烷氧基、硫代甲基、亞硫酰甲基、硫酰甲基及其組合的取代基取代的苯基；五元或六元雜芳環(huán)；或被選自鹵素、烷基、烷氧基、硫代甲基、亞硫酰甲基、硫酰甲基及其組合的取代基取代的五元或六元雜芳環(huán)。
2.含有如權利要求1所述化合物的組合物，其中所述化合物選自3α-乙酰氧基-12，13-環(huán)氧-8α-羥基單端孢霉-9-烯-7α，15-碳酸鹽(標示為EN139499)；3α，8α-二乙酰氧基-12，13-環(huán)氧單端孢霉-9-烯-7α，15-碳酸鹽(標示為EN139500)；和3α，8α-二乙酰氧基-12，13-環(huán)氧-9α-甲基單端孢霉(trichothecan)-7α，15-碳酸鹽(標示為EN139507)。
3.一種組合物，其特征在于，所述組合物含有如結構式II所示的腸動力調(diào)節(jié)化合物 其中，x代表9位碳原子和10位碳原子之間的單鍵或雙鍵；R1和R2分別代表氫原子；C1-C6的烷基；C1-C6的芳烷基；或?；鵆(O)R5，其中R5選自C1-C6的烷基；C2-C6的烯基；C2-C6的炔基；苯基；被選自鹵素、烷基、烷氧基、硫代甲基、亞硫酰甲基、硫酰甲基及其組合的取代基取代的苯基；五元或六元雜芳環(huán)；或被選自鹵素、烷基、烷氧基、硫代甲基、亞硫酰甲基、硫酰甲基及其組合的取代基取代的五元或六元雜芳環(huán)。R3和R4分別代表氫原子；C1-C6的烷基；苯基；被選自鹵素、烷基、烷氧基、硫代甲基、亞硫酰甲基、硫酰甲基及其組合的取代基取代的苯基；五元或六元雜芳環(huán)；或R3和R4和乙縮醛的碳原子一起形成具有5、6或7個碳原子的碳環(huán)。
4.含有如權利要求3所述化合物的組合物，其中所述化合物選自3α-乙酰氧基-7α，15-苯亞甲基-12，13-環(huán)氧-9α-甲基單端孢霉-8α-醇(標示為EN139501)和7α，15-苯亞甲基-3α，8α-二乙酰氧基-12，13-環(huán)氧-9α-甲基單端孢霉(trichothecane)(標示為EN139505)。
5.一種組合物，其特征在于，所述化合物含有如結構式III所示的腸動力調(diào)節(jié)化合物 其中，x代表9位碳原子和10位碳原子之間的單鍵或雙鍵；R1和R2分別代表氫原子；C1-C6的烷基；C1-C6的芳烷基；或?；鵆(O)R5，其中R5選自C1-C6的烷基；C2-C6的烯基；C2-C6的炔基；苯基；被選自鹵素、烷基、烷氧基、硫代甲基、亞硫酰甲基、硫酰甲基及其組合的取代基取代的苯基；五元或六元雜芳環(huán)；被選自鹵素、烷基、烷氧基、硫代甲基、亞硫酰甲基、硫酰甲基及其組合的取代基取代的五元或六元雜芳環(huán)。
6.含有如權利要求5所述化合物的組合物，其中所述化合物選自3α-乙酰氧基-12，13-環(huán)氧-9α-甲基單端孢霉-7α，8α，15-三醇(標示為EN139503)和3α，8α-二乙酰氧基-12，13-環(huán)氧-9α-甲基單端孢霉-7α，15-二醇(標示為EN139506)。
7.一種組合物，含有如結構式IV所示的腸動力調(diào)節(jié)化合物 其中，x代表9位碳原子和10位碳原子之間的單鍵；R2代表氫原子；C1-C6的烷基；C1-C6的芳烷基；或?；鵆(O)R5，其中R5選自C1-C6的烷基；C2-C6的烯基；C2-C6的炔基；苯基；被選自鹵素、烷基、烷氧基、硫代甲基、亞硫酰甲基、硫酰甲基及其組合的取代基取代的苯基；五元或六元雜芳環(huán)；和被選自鹵素、烷基、烷氧基、硫代甲基、亞硫酰甲基、硫酰甲基及其組合的取代基取代的五元或六元雜芳環(huán)。
8.含有如權利要求7所述化合物的組合物，其中所述化合物選自3α-乙酰氧基-12，13-環(huán)氧-9α-甲基單端孢霉-8-酮-7α，15-碳酸鹽(標示為EN13951)和3α-苯甲酸基-12，13-環(huán)氧單端孢霉-9-烯-8-酮-7α，15-碳酸鹽(標示為EN139514)。
9.一種組合物，其特征在于，所述組合物含有如結構式V所示的腸動力調(diào)節(jié)化合物 其中，R2代表氫原子；C1-C6的烷基；C1-C6的芳烷基；或?；鵆(O)R5，其中R5選自C1-C6的烷基；C2-C6的烯基；C1-C6的炔基；苯基；被選自鹵素、烷基、烷氧基、硫代甲基、亞硫酰甲基、硫酰甲基及其組合的取代基取代的苯基；五元或六元雜芳環(huán)；和被選自鹵素、烷基、烷氧基、硫代甲基、亞硫酰甲基、硫酰甲基及其組合的取代基取代的五元或六元雜芳環(huán)；以及R3和R4分別代表氫原子；C1-C6的烷基；苯基；被選自鹵素、烷基、烷氧基、硫代甲基、亞硫酰甲基、硫酰甲基及其組合的取代基取代的苯基；五元或六元雜芳環(huán)；或R3和R4和乙縮醛的碳原子一起形成具有5、6或7個碳原子的碳環(huán)。
10.含有權利要求9所述化合物的組合物，其中所述化合物選自3α-乙酰氧基-7α，15-苯亞甲基-12，13-環(huán)氧單端孢霉-8-酮(標示為EN139519)和7α，15-苯亞甲基-12，13-環(huán)氧-9β-羥基單端孢霉-8-酮(標示為EN139520)。
11.一種組合物，其特征在于，所述組合物含有如結構式VI所示的腸動力調(diào)節(jié)化合物 其中，R2代表氫原子；C1-C6的烷基；C1-C6的芳烷基；或?；鵆(O)R5，其中R5選自C1-C6的烷基；C2-C6的烯基；C1-C6的炔基；苯基；被選自鹵素、烷基、烷氧基、硫代甲基、亞硫酰甲基、硫酰甲基及其組合的取代基取代的苯基；五元或六元雜芳環(huán)；和被選自鹵素、烷基、烷氧基、硫代甲基、亞硫酰甲基、硫酰甲基及其組合的取代基取代的五元或六元雜芳環(huán)；以及R3和R4分別代表氫原子；C1-C6的烷基；苯基；被選自鹵素、烷基、烷氧基、硫代甲基、亞硫酰甲基、硫酰甲基及其組合的取代基取代的苯基；五元或六元雜芳環(huán)；或R3和R4和乙縮醛的碳原子一起形成具有5、6或7個碳原子的碳環(huán)。
12.含有如權利要求11所述化合物的組合物，其中所述化合物為7α，15-苯亞甲基-9α，12β-二甲基-3α，12α-二羥基單端孢霉-8-酮(標示為EN139522)。
13.如權利要求1-12中任一項所述的組合物，它還含有藥學上可接受的載體。
14.一種減少個體食物攝入量的方法，其特征在于，其特征在于，所述方法包括給予所述個體以權利要求1-12中任一項所述的組合物，所述組合物的量足以暫時減少食物消耗量。
15.一種治療個體肥胖的方法，其特征在于，所述方法包括給予所述個體以權利要求1-12中任一項所述的組合物，所述組合物的量足以暫時減少食物消耗量。
16.一種誘導個體產(chǎn)生腸動力進食模式的方法，其特征在于，所述方法包括給予所述個體以權利要求1-12中任一項所述的組合物，所述組合物的量足以使所述個體產(chǎn)生飽脹感。
17.權利要求14-16中任一項所述的方法，其中，所述組合物通過口服給藥。
18.一種能增強或促進腸動力禁食模式的組合物，其特征在于，所述組合物含有7α，15-苯亞甲基-9α，12β-二甲基單端孢霉-3α，8α，12α-三醇(標示為EN139502)。
19.如權利要求18所述的組合物，它還包含藥學上可接受的載體。
20.一種增加個體食物攝入量的方法，其特征在于，所述方法包括給予所述個體以權利要求18或19所述的組合物，所述組合物的量足以暫時增加食物消耗量。
21.一種治療個體營養(yǎng)失調(diào)的方法，其特征在于，所述方法包括給予所述個體以權利要求18或19所述的組合物，所述組合物的量足以暫時增加食物消耗量。
22.一種治療個體食欲減退的方法，其特征在于，所述方法包括給予所述個體以權利要求18或19所述的組合物，所述組合物的量足以暫時增加食物消耗量。
全文摘要
本發(fā)明涉及用于組合物和方法的多環(huán)有機化合物，該組合物和方法用于調(diào)節(jié)腸動力以調(diào)控食物攝入以及治療肥胖和營養(yǎng)失調(diào)。
文檔編號A61K31/366GK1610684SQ02805516
公開日2005年4月27日 申請日期2002年1月11日 優(yōu)先權日2001年1月11日
發(fā)明者安東尼·克蘭迪斯, 托尼·德斯特 申請人:En法瑪有限公司, 安東尼·克蘭迪斯, 托尼·德斯特