專利名稱：用作ip拮抗劑的烷氧基羰基氨基雜芳基羧酸衍生物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及通式I的烷氧基羰基氨基-雜芳基羧酸衍生物或其單個(gè)的異構(gòu)體、異構(gòu)體的外消旋或非外消旋混合物或其可藥用鹽或溶劑化物 其中G1選自基團(tuán)a和b； 和 A選自苯基、吡啶基、嘧啶基和噻吩基，所有這些基團(tuán)均任選地被低級(jí)烷基、鹵素、鹵代烷基、烷氧基、氰基、硝基、-SO2R′、-NSO2R′、-SO2NR′R″、-NR′R″或-COR′取代；R′和R″彼此獨(dú)立地是氫或低級(jí)烷基；G2選自由式c、d、e、f、g、h、i和j表示的基團(tuán)； 和
R1和R2在每次出現(xiàn)時(shí)彼此獨(dú)立地選自氫、低級(jí)烷基、鹵素、鹵代烷基、硝基、-NR′R″、-OR′、-SO2R′、-NSO2R′、-COR′、氰基、硝基、未取代的或被鹵素、烷基、氰基或烷氧基取代的苯基；或未取代的或被鹵素、烷基、氰基或烷氧基取代的雜芳基；或者R1和R2如果彼此相鄰，也可以與它們所連接的碳原子一起形成未取代的或被一個(gè)或兩個(gè)選自低級(jí)烷基、鹵素、氰基或低級(jí)烷氧基的取代基取代的芳環(huán)。
現(xiàn)已驚奇地發(fā)現(xiàn)，式I化合物是前列腺素IP(“PGI2選擇性(PGI2-preferring)”)受體拮抗劑。
前列腺素或前列腺素類(PG)是一組由膜磷脂得到的生物活性化合物，其由含有3、4或5個(gè)雙鍵的20個(gè)碳的必需脂肪酸和一個(gè)環(huán)戊烷環(huán)組成。它們分為用字母D、E、F、G、H或I表示的幾個(gè)大類，它們的區(qū)別在于環(huán)戊烷環(huán)上的取代情況。這些大類又通過(guò)下標(biāo)1、2或3進(jìn)一步細(xì)分，這些下標(biāo)反應(yīng)了它們的脂肪酸前體。因此，PGI2具有雙環(huán)結(jié)構(gòu)，下標(biāo)2表示它與花生四烯酸有關(guān)。
已知前列腺素可由于生理刺激(例如逼尿平滑肌舒張、膀胱粘膜損傷和神經(jīng)刺激)而在膀胱局部產(chǎn)生(K.Anderson，Pharmacological Reviews1993，45(3)，253-308)。PGI2(也稱為前列環(huán)素)是由人類膀胱所釋放的主要的前列腺素。有人提出，前列腺素可能是由膀胱充滿所產(chǎn)生的逼尿肌舒張和由膀胱膨脹導(dǎo)致的C傳入纖維激活之間的聯(lián)系物。已有人提出，前列腺素可能與膀胱疾病的病理生理學(xué)有關(guān)。因此，預(yù)期前列腺素IP受體的拮抗劑可用于治療膀胱疾病，例如膀胱出口阻塞、尿失禁、膀胱容量減小、排尿頻繁、緊迫性失禁、壓力性失禁、膀胱反應(yīng)過(guò)度、良性前列腺增生(BPH)、前列腺炎、逼尿肌反射亢進(jìn)、尿頻、夜尿、尿急、膀胱活動(dòng)過(guò)度、骨盆過(guò)敏、尿道炎、骨盆疼痛綜合征、前列腺痛、膀胱炎、特發(fā)性膀胱過(guò)敏等。
PGI2還可作用于血小板和血管以抑制血小板凝集和引起血管擴(kuò)張，據(jù)信這對(duì)于血管內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定是非常重要的。曾有人提出PGI2可能與完整血管壁的抗血栓形成特性有關(guān)。PGI2還被認(rèn)為是血管緊張的生理調(diào)節(jié)劑，其作用是對(duì)抗血管收縮劑的作用。由于PGI2在與膿毒性休克有關(guān)的低血壓中起作用，使得這些血管作用的重要性受到了重視。盡管前列腺素似乎不會(huì)直接影響血管的通透性，但PGI2可以通過(guò)促進(jìn)炎癥部位的血流而顯著增加水腫的形成和白細(xì)胞浸潤(rùn)。因此，IP受體拮抗劑可以預(yù)防與過(guò)度出血有關(guān)的病癥，例如但不限于血友病和出血，可以減輕與膿毒性休克有關(guān)的低血壓，并且可減輕水腫的形成。
對(duì)嚙齒動(dòng)物的許多體內(nèi)鎮(zhèn)痛研究表明，PGI2在誘導(dǎo)痛覺(jué)過(guò)敏中起重要作用。同樣，體外研究提供了實(shí)質(zhì)性的證據(jù)，表明“PGI2選擇性”(IP)受體是感覺(jué)神經(jīng)元功能的重要調(diào)節(jié)劑(K.Bley等，Trends in PharmacologicalSciences 1998，19(4)，141-147)。由于感覺(jué)神經(jīng)元中的IP受體與腺苷酸環(huán)化酶和磷脂酶C的激活有關(guān)，并因此與cAMP-依賴型蛋白激酶和蛋白激酶C的激活有關(guān)，這些受體可以對(duì)離子通道活性和神經(jīng)遞質(zhì)的釋放產(chǎn)生很強(qiáng)的影響。根據(jù)最近對(duì)缺乏IP受體的轉(zhuǎn)基因小鼠的研究，獲得了IP受體在炎性疼痛中起顯著作用的證據(jù)(T.Murata等人，Nature 1997，388，678-682)。
預(yù)期IP受體拮抗劑還可用于呼吸道過(guò)敏(其中，由于對(duì)過(guò)敏原的應(yīng)答而產(chǎn)生PGI2)或呼吸道病癥例如哮喘。
關(guān)于前列腺素及其受體的其它資料記載于Goodman & Gillman′s，ThePharmacological Basis of Therapeutics，第9版，McGraw-Hill，紐約，1996，第26章，601-616頁(yè)。
因此需要可以通過(guò)作用于IP受體而選擇性地治療上述病癥的拮抗劑。
下述文獻(xiàn)描述了與本發(fā)明的式I化合物有關(guān)的化合物轉(zhuǎn)讓給F.Hoffmann-La Roche AG的國(guó)際專利申請(qǐng)WO 01/68591涉及某些作為IP拮抗劑的羧酸衍生物。轉(zhuǎn)讓給Syntex LLC的US 6,184,242涉及某些作為IP拮抗劑的咪唑啉衍生物。轉(zhuǎn)讓給Merck & Co的US 5,908,842公開(kāi)了可用作一氧化氮合酶抑制劑的某些取代的酰氨基吡啶化合物。
Bley等人在Trends in Pharmacological Sciences 1998，19(4)，141-147中提出了IP前列腺素類受體在炎性疼痛中的作用。Smith等人在BritishJournal of Pharmacology 1998，124(3)，513-523中提到了在大鼠感覺(jué)神經(jīng)元中由前列腺素類受體引起的反應(yīng)的特征。在Murata等，Nature 1997，388(6643)，678-682中描述了在缺乏前列環(huán)素受體的小鼠中疼痛感受和炎癥反應(yīng)的改變。在Anderson等，Pharmacological Reviews 1993，45(3)，253-308中綜述了下泌尿道平滑肌和陰莖勃起組織的藥理學(xué)。Coleman等人在Pharmacological Review 1994，46(2)，205-229中提到了前列腺素類受體及其亞型的特性、分布和結(jié)構(gòu)。
本文中所引用的所有出版物、專利和專利申請(qǐng)，無(wú)論是上文中所提到的，還是將要在下文中提到的，均全文引入本文作為參考。
本發(fā)明涉及式I的烷氧基羰基氨基-雜芳基羧酸衍生物或其單個(gè)的異構(gòu)體、異構(gòu)體的外消旋或非外消旋混合物或其可藥用鹽或溶劑化物。本發(fā)明還涉及有關(guān)的藥物組合物，該藥物組合物含有治療有效量的式I化合物和與其混合的至少一種可藥用載體，本發(fā)明還涉及式I化合物作為前列腺素IP(I2或PGI2)拮抗劑的用途及其制備方法。
另一方面，本發(fā)明涉及式I化合物用于對(duì)患有可通過(guò)用IP受體拮抗劑治療而緩解之疾病的個(gè)體進(jìn)行治療的用途，所述治療包括向該個(gè)體施用治療有效量的至少一種式I化合物。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述個(gè)體患有與泌尿道、疼痛、炎癥、呼吸狀態(tài)、水腫形成或低血壓血管疾病有關(guān)的疾病。
另一方面，本發(fā)明涉及一種制備方法，該方法包括用光氣酰化通式2、3、4、5、6、7、8或9的酯 和
其中R是低級(jí)烷基或三甲基硅烷基乙基，并且R1和R2如文中所定義，然后與通式1的化合物反應(yīng) 其中G1如文中所定義；然后水解；得到通式I的化合物 其中G1和G2如文中所定義。
若無(wú)另外說(shuō)明，在本申請(qǐng)、包括說(shuō)明書(shū)和權(quán)利要求書(shū)中使用的如下術(shù)語(yǔ)具有以下給出的定義。必需注意，若在上下文中沒(méi)有明確的相反指示，在說(shuō)明書(shū)和所附權(quán)利要求中使用單數(shù)形式也包括復(fù)數(shù)。
“低級(jí)烷基”是指含有1至6個(gè)碳原子的一價(jià)直鏈或支鏈的飽和烴基，除非另有說(shuō)明。低級(jí)烷基的例子包括但不限于甲基、乙基、丙基、異丙基、1-乙基丙基、仲丁基、叔丁基、正丁基、正戊基、正己基等。
“烷氧基”是指基團(tuán)-O-R，其中R是本文所定義的低級(jí)烷基。烷氧基的例子包括但不限于甲氧基、乙氧基、異丙氧基等。
“芳基”是指由一個(gè)單獨(dú)的環(huán)、或其中至少有一個(gè)環(huán)是芳香性的一個(gè)或多個(gè)稠合的環(huán)組成的一價(jià)碳環(huán)基團(tuán)，其可以任選地被一個(gè)或多個(gè)、優(yōu)選一個(gè)或兩個(gè)取代基所取代。芳基的例子包括但不限于苯基、萘基、4-氟苯基等。
“鹵素”、“鹵代”或“鹵化物”是指基團(tuán)氟、溴、氯和/或碘。
“鹵代烷基”是指在任何位置被一個(gè)或多個(gè)本文所定義的鹵素原子所取代的本文所定義的低級(jí)烷基。鹵代烷基的例子包括但不限于1，2-二氟丙基、1，2-二氯丙基、三氟甲基、2，2，2-三氟乙基、2，2，2-三氯乙基等。
“雜芳基”是指具有一個(gè)或多個(gè)環(huán)，優(yōu)選1-3個(gè)環(huán)、每個(gè)環(huán)具有4-8個(gè)原子并且在環(huán)中含有一個(gè)或多個(gè)雜原子，優(yōu)選一個(gè)或兩個(gè)雜原子(選自氮、氧或硫)的一價(jià)芳環(huán)基團(tuán)，其可任選地被一個(gè)或多個(gè)，優(yōu)選一個(gè)或兩個(gè)取代基所取代。雜芳基的例子包括但不限于咪唑基、吡唑基、噁唑基、噻唑基、吡嗪基、噻吩基、呋喃基、吡啶基、嘧啶基、喹啉基、異喹啉基、萘啶基等。
“任選取代的”是指一個(gè)基團(tuán)可以被一個(gè)或多個(gè)、優(yōu)選一個(gè)或兩個(gè)彼此獨(dú)立地選自指定基團(tuán)的取代基所取代也可以不被取代。例如，任選地被低級(jí)烷基、烷氧基、鹵素或氰基取代的苯基是指苯基可以在任何位置被一個(gè)或多個(gè)、優(yōu)選一個(gè)或兩個(gè)彼此獨(dú)立地選自低級(jí)烷基、烷氧基、鹵素和氰基的取代基所取代或不被取代。
“離去基”是指具有合成有機(jī)化學(xué)中的常規(guī)含義的基團(tuán)，即，可被親核試劑置換的原子或基團(tuán)。離去基的例子包括但不限于鹵素、烷基-或芳基磺酰氧基，例如甲磺酰氧基、乙磺酰氧基、甲硫基、苯磺酰氧基、甲苯磺酰氧基和噻吩基氧基、二鹵代膦酰氧基(dihalophosphinoyloxy)、任選取代的芐氧基、異丙氧基、酰氧基等。
“異構(gòu)現(xiàn)象”是指具有相同的分子式但性質(zhì)或其原子的連接順序或其原子的空間排列不同的化合物。其原子的空間排列不同的異構(gòu)體稱為“立體異構(gòu)體”。彼此不互為鏡像的立體異構(gòu)體稱為“非對(duì)映體”，是不可重疊的鏡像的立體異構(gòu)體稱為“對(duì)映體”，或有時(shí)稱為光學(xué)異構(gòu)體。與四個(gè)不同的取代基結(jié)合的碳原子稱為“手性中心”。
“手性化合物”是指有一個(gè)手性中心的化合物。它有兩個(gè)具有相反手性的對(duì)映體形式，并且可以以單個(gè)對(duì)映體或?qū)τ丑w混合物的形式存在。含有等量具有相反手性的單個(gè)對(duì)映體形式的混合物稱為“外消旋混合物”。含有一個(gè)以上手性中心的化合物具有2n-1個(gè)對(duì)映體對(duì)，其中n是手性中心的數(shù)量。含有一個(gè)以上手性中心的化合物可以以單個(gè)的非對(duì)映體或非對(duì)映體混合物的形式存在，稱為“非對(duì)映體混合物”。當(dāng)存在一個(gè)手性中心時(shí)，可將立體異構(gòu)體用該手性中心的絕對(duì)構(gòu)型(R或S)來(lái)表征。絕對(duì)構(gòu)型是指與手性中心相連的取代基的空間排列。與所述手性中心相連的取代基按照Sequence Rule of Cahn，Ingold和Prelog.(Cahn等，Angew.Chem.Inter.Edit.1966，5，385；勘誤表511；Cahn等，Angew.Chem.1966，78，413；Cahn和Ingold，J.Chem.Soc.(London)1951，612；Cahn等，Experientia1956，12，81；Cahn，J.Chem.Educ.1964，41，116)排序。
“基本上純的”是指至少存在約80mol％、更優(yōu)選至少約90mol％、最優(yōu)選至少約95mol％所需的對(duì)映體或立體異構(gòu)體。
“可藥用的”是指可用于制備通常是安全、無(wú)毒并且在生物學(xué)或其它方面均沒(méi)有不利影響的藥物組合物，包括可獸藥用的以及可人藥用的。
化合物的“可藥用鹽”是指具有母體化合物的所需藥理學(xué)活性的可藥用的(如上所定義)鹽。所述的鹽包括(1)與無(wú)機(jī)酸例如鹽酸、氫溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等形成的酸加成鹽；或與有機(jī)酸例如乙酸、苯磺酸、苯甲酸、樟腦磺酸、檸檬酸、乙磺酸、富馬酸、葡庚糖酸、葡糖酸、谷氨酸、乙醇酸、羥基萘酸、2-羥基乙磺酸、乳酸、馬來(lái)酸、蘋(píng)果酸、扁桃酸、甲磺酸、粘康酸、2-萘磺酸、丙酸、水楊酸、琥珀酸、二苯甲酰基-L-酒石酸、酒石酸、對(duì)甲苯磺酸、三甲基乙酸、2，2，2-三氟乙酸等形成的酸加成鹽；或者(2)當(dāng)母體化合物中所存在的酸性質(zhì)子被金屬離子例如堿金屬離子、堿土金屬離子或鋁離子代替時(shí)所形成的鹽；或與有機(jī)或無(wú)機(jī)堿的絡(luò)合物。可接受的有機(jī)堿包括二乙醇胺、乙醇胺、N-甲基葡糖胺、三乙醇胺、氨丁三醇等?？山邮艿臒o(wú)機(jī)堿包括氫氧化鋁、氫氧化鈣、氫氧化鉀、碳酸鈉和氫氧化鈉。
應(yīng)當(dāng)理解，所有關(guān)于可藥用鹽的描述均包括本文所定義的同一酸加成鹽的溶劑加成形式(溶劑化物)或結(jié)晶形式(多晶型)。
“溶劑化物”是指含有化學(xué)計(jì)算量或非化學(xué)計(jì)算量的溶劑的溶劑加成形式。某些化合物具有在結(jié)晶固體狀態(tài)捕獲固定摩爾比的溶劑分子的傾向，從而形成溶劑化物。如果溶劑是水，則形成的溶劑化物是水合物，當(dāng)溶劑是醇時(shí)，形成的溶劑化物是醇化物。
“前藥”是指化合物的藥理學(xué)上無(wú)活性的形式，其在給藥后必需由個(gè)體在體內(nèi)代謝、例如通過(guò)生物學(xué)液體或酶代謝成化合物的藥理學(xué)活性形式，以產(chǎn)生所需的藥理學(xué)作用。前藥可以在吸收前、吸收過(guò)程中、吸收后或在特定的位點(diǎn)代謝。雖然許多化合物的代謝主要是在肝臟中進(jìn)行，但幾乎所有的其它組織和器官、特別是肺，均可以進(jìn)行不同程度的代謝?；衔锏那八幮问娇捎糜诶绺纳粕锢枚?、改善個(gè)體的可接受性(例如，通過(guò)掩蓋或降低令人不愉快的特性例如苦味或胃腸刺激性)、改變?nèi)芙舛?例如用于靜脈內(nèi)應(yīng)用)、提供延時(shí)或持續(xù)的釋放或遞送、使配制更為容易或用于位點(diǎn)特異性地遞送化合物。本文中關(guān)于化合物的描述包括化合物的前藥形式。前藥描述于The Organic Chemistry of Drug Design and Drug Action，Richard B.Silverman，Academic Press，San Diego，1992，第8章“前藥和藥物遞送系統(tǒng)”，352-401頁(yè)；Design of Prodrugs，H.Bundgaard編，ElsevierScience，Amsterdam，1985；Design of Biopharmaceutical Properties throughProdrugs and Analogs，E.B.Roche編，American PharmaceuticalAssociation，Washington，1977；和Drug Delivery Svstems，R.L.Juliano編，Oxford Univ.Press，Oxford，1980。
“個(gè)體”是指哺乳動(dòng)物和非哺乳動(dòng)物。哺乳動(dòng)物是指哺乳類中的任何成員，包括但不限于人類、非人的靈長(zhǎng)類例如黑猩猩和其它猿和猴類；牲畜，例如牛、馬、綿羊、山羊和豬；家養(yǎng)動(dòng)物例如兔子、狗和貓；實(shí)驗(yàn)室動(dòng)物，包括嚙齒動(dòng)物，例如大鼠、小鼠和豚鼠等。非哺乳動(dòng)物的例子包括但不限于鳥(niǎo)、爬蟲(chóng)類等。
“治療有效量”是指當(dāng)向個(gè)體給藥以治療疾病狀態(tài)時(shí)，足以完成所述對(duì)疾病狀態(tài)的治療的化合物的量。“治療有效量”會(huì)隨著化合物、所治療的疾病狀態(tài)、所治療疾病的嚴(yán)重程度、個(gè)體的年齡和相對(duì)健康情況、給藥途徑和給藥形式、主治醫(yī)生或獸醫(yī)的判斷以及其它因素而改變。
本文中所用的“藥理學(xué)作用”包括在個(gè)體中產(chǎn)生的達(dá)到預(yù)定治療目的的作用。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，藥理學(xué)作用是指所治療個(gè)體的主要的指征得到預(yù)防、緩解或減輕。例如，藥理學(xué)作用可以是導(dǎo)致所治療個(gè)體的主要指征得到預(yù)防、緩解或減輕的作用。在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，藥理學(xué)作用是指所治療個(gè)體的主要指征的病癥或癥狀得到預(yù)防、緩解或減輕。例如，藥理學(xué)作用可以是導(dǎo)致所治療個(gè)體的主要指征得到預(yù)防或減輕的作用。
“疾病狀態(tài)”是指任何疾病、病癥、癥狀或指征。
疾病狀態(tài)的“治療”包括(1)預(yù)防疾病狀態(tài)，即，使可能患病或易患疾病狀態(tài)但還未經(jīng)歷或顯示出疾病癥狀的個(gè)體不出現(xiàn)疾病狀態(tài)的臨床癥狀。
(2)抑制疾病狀態(tài)，即阻止疾病狀態(tài)或其臨床癥狀的發(fā)展，或(3)緩解疾病狀態(tài)，即引起疾病狀態(tài)或其臨床癥狀的暫時(shí)性或永久性的消退。
“拮抗劑”是指可以減弱或阻止另一種分子或受體位點(diǎn)的作用的分子，例如化合物、藥物、酶抑制劑或激素。
“膀胱疾病”包括但不僅限于，膀胱出口阻塞、尿失禁、膀胱容量減小、排尿頻繁、緊迫性失禁、壓力性失禁、膀胱反應(yīng)過(guò)度、良性前列腺增生(BPH)、前列腺炎、逼尿肌反射亢進(jìn)、尿頻、夜尿、尿急、膀胱活動(dòng)過(guò)度、骨盆過(guò)敏、尿道炎、骨盆疼痛綜合征、前列腺痛、膀胱炎或特發(fā)性膀胱過(guò)敏。
“膀胱出口阻塞”包括但不限于良性前列腺增生(BPH)、尿道狹窄疾病、腫瘤等。其在癥狀上通常表現(xiàn)為阻塞性(低流速、排尿開(kāi)始困難等)和刺激性的(尿急、恥骨上疼痛等)。
“出口關(guān)閉不全”包括但不限于尿道高運(yùn)動(dòng)性、內(nèi)因性括約肌功能不全或混合型失禁。其在癥狀上通常表現(xiàn)為壓力性尿失禁。
“骨盆過(guò)敏”包括但不限于骨盆疼痛、間質(zhì)性(細(xì)胞)膀胱炎、前列腺痛、前列腺炎、外陰痛、尿道炎、睪丸痛等。其在癥狀上表現(xiàn)為涉及骨盆區(qū)域的疼痛、炎癥或不適，通常包括膀胱活動(dòng)過(guò)度的癥狀。
“疼痛”是指或多或少地局部化的不適、痛苦或劇痛的感覺(jué)，是由于刺激特定的神經(jīng)末梢引起的?？梢杂性S多種類型的疼痛，包括但不限于閃痛、幻肢痛(phantompain)、閃電樣痛、急性疼痛、炎性疼痛、神經(jīng)病性疼痛、復(fù)合的局部疼痛、神經(jīng)痛、神經(jīng)病等(Dorland′s Illustrated MedicalDictiontary，第28版，W.B.Saunders Company，Philadelphia，Pa.)。治療疼痛的目標(biāo)是減輕治療對(duì)象所感受到的疼痛的嚴(yán)重程度。
在整個(gè)申請(qǐng)中使用如下縮寫(xiě)，其具有如下含義BINAP 2，2’-二(二苯基膦基)1，1-聯(lián)萘DMAP4-二甲基氨基吡啶DMF N，N-二甲基甲酰胺DMSO二甲亞砜EtOAc 乙酸乙酯THF 四氫呋喃命名法總的來(lái)說(shuō)，本專利申請(qǐng)中所用的命名法是基于AUTONOMTM4.0版，一種用于產(chǎn)生IUPAC系統(tǒng)命名的Beilstein Institute計(jì)算機(jī)系統(tǒng)。例如，其中G1為式a的基團(tuán)，A為苯基，G2為式c的基團(tuán)并且R1為苯基的式I化合物命名為2-苯基-5-(5-苯基-苯并呋喃-2-基甲氧基羰基氨基)-嘧啶-4-甲酸。
在本發(fā)明化合物中，優(yōu)選某些式I化合物或其單個(gè)的異構(gòu)體、異構(gòu)體的外消旋或非外消旋混合物或其可藥用鹽或溶劑化物例如，優(yōu)選的式I化合物包括其中的G1選自基團(tuán)a和b，更優(yōu)選選自基團(tuán)a的那些化合物。
其它優(yōu)選的式I化合物包括如下化合物其中A優(yōu)選地選自苯基、吡啶基、嘧啶基和噻吩基，更優(yōu)選苯基、吡啶基和噻吩基，所有的基團(tuán)都可以如上所述任選地被取代。特別優(yōu)選的是其中A為苯基的式I化合物。
優(yōu)選的式I化合物還包括其中的G2選自基團(tuán)c、d、e、f、g、h、i和j，更優(yōu)選選自基團(tuán)c、d和g的化合物。
優(yōu)選的式I化合物包括如下化合物其中R1和R2優(yōu)選為氫、低級(jí)烷基、鹵素、鹵代烷基、-NR′R″、-OR′、-SO2R′、-NSO2R′、-COR′、氰基、硝基、未取代的或取代的苯基或未取代的或取代的雜芳基，并且如果相鄰的話，R1和R2可以與它們所連接的碳原子一起形成未取代的或被一個(gè)或兩個(gè)選自低級(jí)烷基、鹵素、氰基或低級(jí)烷氧基的取代基取代的芳環(huán)；更優(yōu)選R1為氫、低級(jí)烷基、鹵素、-OR′、-SO2R′、-COR′、硝基或氰基；仍更優(yōu)選R1為未取代的或取代的苯基。
示例性的特別優(yōu)選的化合物或其單個(gè)的異構(gòu)體、異構(gòu)體的外消旋或非外消旋混合物或其可藥用鹽或溶劑化物包括其中A為任選取代的苯基的化合物。
進(jìn)一步特別優(yōu)選的化合物或其單個(gè)的異構(gòu)體、異構(gòu)體的外消旋或非外消旋混合物或其可藥用鹽或溶劑化物包括其中G1為式a的基團(tuán)的化合物。尤其優(yōu)選的是其中G1為式a的基團(tuán)并且G2為式c的基團(tuán)的式I化合物。更優(yōu)選的是其中G1為式a的基團(tuán)、G2為式c的基團(tuán)并且A為任選取代的苯基的式I化合物。優(yōu)選的小組是其中G1為式a的基團(tuán)、G2為式c的基團(tuán)、A為任選取代的苯基并且R1為苯基的化合物。還優(yōu)選其中G1為式a的基團(tuán)、G2為式c的基團(tuán)、A為任選取代的苯基并且R1選自氫、低級(jí)烷基、鹵素、-OR′、-SO2R′、-COR′、硝基和氰基的化合物小組。另一組優(yōu)選的式I化合物是其中G1為式a的基團(tuán)、G2為式c的基團(tuán)并且A為任選取代的噻吩基的化合物。
示例性的其中G1為式a的基團(tuán)、G2為式c的基團(tuán)并且A為任選取代的苯基的優(yōu)選的式I化合物包括2-苯基-5-(5-苯基-苯并呋喃-2-基甲氧基羰基氨基)-嘧啶-4-甲酸和5-[5-(4-氟-苯基)-苯并呋喃-2-基甲氧基羰基氨基]-2-苯基-嘧啶-4-甲酸。
其中G1為式a的基團(tuán)、G2為式c的基團(tuán)并且A為任選取代的噻吩基的化合物的例子是2-苯基-5-(5-噻吩-3-基-苯并呋喃-2-基甲氧基羰基氨基)-嘧啶-4-甲酸。
另外優(yōu)選的式I化合物是其中G1為式a的基團(tuán)并且G2為式d的基團(tuán)的化合物。更優(yōu)選的式I化合物是其中G1為式a的基團(tuán)、G2為式d的基團(tuán)開(kāi)且R1為任選取代的苯基的化合物。1-苯基-3-(5-苯基-苯并呋喃-2-基甲氧基羰基氨基)-1H-吡唑-4-甲酸是該化合物的一個(gè)例子。
另一組優(yōu)選的式I化合物是其中G1為式a的基團(tuán)并且G2為式g、h、i或j的基團(tuán)的化合物。更優(yōu)選的式I化合物是其中G1為式a的基團(tuán)并且G2為式g的基團(tuán)的化合物。尤其優(yōu)選的式I化合物是其中G1為式a的基團(tuán)、G2為式g的基團(tuán)并且R1為任選取代的苯基的化合物。優(yōu)選的化合物小組是其中G1為式a的基團(tuán)、G2為式g的基團(tuán)、A為任選取代的苯基并且R1是苯基的化合物。
還優(yōu)選的化合物小組是其中G1為式a的基團(tuán)、G2為式g的基團(tuán)、A為任選取代的苯基并且R1選自氫、低級(jí)烷基、鹵素、-OR′、-SO2R′、-COR′、硝基和氰基的化合物。3-(5-苯基-苯并呋喃-2-基甲氧基羰基氨基)-異煙酸是該化合物的一個(gè)例子。
其中G1為式a的基團(tuán)、G2為式g的基團(tuán)、A為任選取代的苯基的另一個(gè)優(yōu)選的化合物小組是其中R1和R2(如果相鄰的話)也可以與它們所連接的碳原子一起形成任選地被一個(gè)或兩個(gè)選自低級(jí)烷基、鹵素、氰基或低級(jí)烷氧基的取代基取代的芳環(huán)的化合物。
其它特別優(yōu)選的化合物或其單個(gè)的異構(gòu)體、異構(gòu)體的外消旋或非消旋混合物或其可藥用鹽或溶劑化物包括其中G1為式b的基團(tuán)的化合物。尤其優(yōu)選的式I化合物是其中G1為式b的基團(tuán)、G2為式c的基團(tuán)并且A為任選取代的苯基的化合物。仍更優(yōu)選的式I化合物是其中G1為式b的基團(tuán)、G2為式c的基團(tuán)、A為任選取代的苯基并且R1為任選取代的苯基的化合物。該化合物的一個(gè)例子是5-(聯(lián)苯-4-基甲氧基羰基氨基)-2-苯基-嘧啶-4-甲酸。
本發(fā)明的式I化合物可以通過(guò)以下所示和描述的示例性合成反應(yīng)方案中所描述的方法來(lái)制備。
在制備這些化合物中所用的原料和試劑通?？梢詮纳虡I(yè)途徑例如Aldrich Chemical Co.獲得，或者可以通過(guò)本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法、按照參考文獻(xiàn)例如Fieser and Fieser′s Reagents for Organic Synthesis；Wiley& SonsNewYork，1991，第1-15卷；Rodd′s Chemistry of CarbonCompounds，Elsevier Science Publishers，1989，第1-5卷和增刊以及Organic Reactions，Wiley & Sons紐約，1991，第1-40卷中所描述的方法制得。以下合成反應(yīng)方案僅僅是對(duì)可以合成本發(fā)明化合物的某些方法的舉例說(shuō)明，參照本申請(qǐng)所公開(kāi)的內(nèi)容，本領(lǐng)域的技術(shù)人員可以對(duì)這些合成反應(yīng)方案進(jìn)行各種改變或提出改變方案。
如果需要，合成反應(yīng)方案的原料和中間體可以用常規(guī)的技術(shù)進(jìn)行分離和純化，這些技術(shù)包括但不限于過(guò)濾、蒸餾、結(jié)晶、色譜法等。這些物質(zhì)可以用常規(guī)的方法進(jìn)行鑒定，包括物理常數(shù)和光譜數(shù)據(jù)。
若無(wú)相反指示，本文中所描述的反應(yīng)優(yōu)選在常壓下、在約-78℃至約150℃、更優(yōu)選約0℃至約125℃的溫度范圍內(nèi)、并且最優(yōu)選且最方便地是在室溫(或周圍溫度)、例如約20℃下進(jìn)行。
方案1式I化合物的制備下列方案描述了制備其中G1和G2如上所定義的式I化合物的方法。
通常，其中Het是如上G2基團(tuán)中所定義的雜芳基并且R是保護(hù)基如低級(jí)烷基或三甲基硅烷基乙基的2-氨基雜芳基羧酸酯可在惰性溶劑中用光氣酰化得到異氰酸酯，隨后可將其與通式1的2-羥基甲基衍生物反應(yīng)得到氨基甲酸酯-羧基酯衍生物，水解羧基酯基團(tuán)后可得到式I的苯甲酸。用光氣?；敿?xì)地描述于例如Ozaki，Chem.Rev.1972，72，457-496中。異氰酸酯與通式1的2-羥基甲基衍生物的縮合可在堿，例如三乙胺或二甲基氨基吡啶(DMAP)的存在下完成。酯基的水解可利用本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的方法，例如用堿金屬氫氧化物如氫氧化鈉、氫氧化鋰或氫氧化鉀在低級(jí)鏈烷醇溶液中進(jìn)行以便制備式Ia的酸。
方案2式1化合物的制備 通常，其中G1是a的式1化合物可在催化劑，優(yōu)選四-三苯基膦-鈀和堿如碳酸鈉、碳酸鉀或磷酸鉀的存在下，使5-溴-苯并呋喃-2-甲酸酯和適宜的硼酸反應(yīng)，然后將酸在適宜的溶劑如THF、乙醚或1，2-二甲氧基乙烷中，用例如氫化鋰鋁或硼氫化物還原來(lái)制備。5-溴-苯并呋喃-2-甲酸酯的合成可在堿如碳酸鉀的存在下，由5-溴水楊醛和溴代丙二酸二乙酯來(lái)完成。
方案2a 或者，其中G1是由式b表示的基團(tuán)的式1化合物可通過(guò)商業(yè)渠道獲得或者通過(guò)將4-鹵代-苯甲醛與適宜的硼烷衍生物反應(yīng)，然后例如用硼氫化鈉將醛基氫化或還原得到適宜的苯基甲醇衍生物(方案2a)來(lái)制備。所述方法詳細(xì)描述于例如Zhang等人(1999)，Tetrahedron Lett.，40，32，5813-5816中。
方案3通式2、3、4、5、6、7、8和9的胺的制備某些其中R1和R2如上所定義并且R是保護(hù)基的式2、3、4、5、6、7、8和9的胺可通過(guò)商業(yè)渠道獲得或者通過(guò)本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的方法制備。
例如，其中的雜芳基是嘧啶基并且R1和R2如本發(fā)明所定義的通式2的胺可由其中X是鹵素的式n的5-鹵代-嘧啶甲酸制備。例如，適宜的原料可以是可按照Kunekell等人，Chem.Ber.1902，35，3164所述制備的5-溴-2-苯基嘧啶甲酸。鹵化物-甲酸n向胺-甲酸o的轉(zhuǎn)化可通過(guò)本領(lǐng)域公知的方法，例如，如Grant等人；Can.J.Chem.1956，34；1444所述用氨水來(lái)完成。通式o酸可進(jìn)行酯化得到通式2的5-氨基-2-苯基嘧啶甲酸酯，其中R是保護(hù)基如低級(jí)烷基或三甲基硅烷基乙基。
方案3a 其中的雜芳基是吡唑基，R1是苯基并且R2是氫的式3化合物的制備可如Massa S等人，J.Heterocycl.Chem.1990，27(6)，1805-1809(方案3a)中所述，由通式p的氰基乙酸酯和苯甲醛苯腙q來(lái)完成。
其中的雜芳基是吡嗪基并且R1和R2是氫的式4化合物可如Ellingson等人，J.Am.Chem.Soc.1945，67，1711中所述，通過(guò)將市售的酸衍生物酯化來(lái)制備。其中R1和R2如文中所定義的式4化合物也記載于該文獻(xiàn)中。
例如，Lang等人，Helv.Chim.Acta 1986，793-802和Thompson等人，J.Org.Chem 1988，2052-2055中描述了3-氨基-6-苯基-吡嗪-2-甲酸甲酯的制備。另外，Thompson描述了例如被呋喃基或甲氧基-苯基取代的化含物的制備。在另一實(shí)例中，Ellingson等人，J.Am.Chem.Soc.1949，2798和Russ等人，Arch.Pharm.1992，761-768中描述了3-氨基-6-溴-吡嗪-2-甲酸甲酯的制備。
某些其中的雜芳基是吡啶基并且R1和R2如上所定義的式6、7、8和9的化合物可通過(guò)商業(yè)渠道獲得。其它化合物是本領(lǐng)域已知的。例如，3-氨基-吡啶-2-甲酸乙酯和5-氨基-吡啶-2-甲酸酯描述于Min，R.S.等人，Chem.Heterocycl.Compd.1998，24(8)，885-886中；4-氨基-煙酸甲酯描述于Leroy，F(xiàn).等人，Synth.Commun.1996，26，12，2257-2272中；2-氨基煙酸甲酯描述于Koller，Chem.Ber.1927，60，408中；4-氨基-喹啉-3-甲酸甲酯和3-氨基-喹啉-4-甲酸甲酯描述于Godard，A.等人，J.Heterocycl.Chem.1980，17，465-473中。
本發(fā)明的式I化合物是IP受體拮抗劑。IP受體拮抗劑，例如本發(fā)明所描述的那些，優(yōu)選可用于與膀胱出口阻塞有關(guān)的膀胱疾病和尿失禁，例如膀胱出口阻塞、尿失禁、膀胱容量減小、排尿頻繁、緊迫性尿失禁、壓力性尿失禁、膀胱反應(yīng)過(guò)度、良性前列腺增生(BPH)、前列腺炎、逼尿肌反射亢進(jìn)、尿頻、夜尿、尿急、膀胱活動(dòng)過(guò)度、骨盆過(guò)敏、尿道炎、骨盆疼痛綜合征、前列腺痛、膀胱炎或特發(fā)性膀胱過(guò)敏。
優(yōu)選的化合物還具有體內(nèi)抗炎和/或鎮(zhèn)痛特性。因此，優(yōu)選的化合物可在哺乳動(dòng)物、特別是人中用作抗炎劑和/或鎮(zhèn)痛劑。它們可用于由各種原因引起的疼痛，包括但不限于炎性疼痛、手術(shù)疼痛、內(nèi)臟疼痛、牙痛、經(jīng)前期疼痛、中樞疼痛、燒傷引起的疼痛、偏頭痛或叢集性頭痛、神經(jīng)損傷、神經(jīng)炎、神經(jīng)痛、中毒、局部缺血性損傷、間質(zhì)性膀胱炎、癌癥疼痛、病毒、寄生蟲(chóng)或細(xì)菌感染、創(chuàng)傷后損傷(包括骨折和運(yùn)動(dòng)損傷)以及與功能性腸疾病例如腸易激綜合癥有關(guān)的疼痛。
優(yōu)選的化合物還可用于各種原因引起的炎癥，包括但不限于細(xì)菌、真菌或病毒感染、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎、手術(shù)、膀胱感染或特發(fā)性膀胱炎、過(guò)度使用(over-use)、老年或營(yíng)養(yǎng)不足、前列腺炎和結(jié)膜炎。
優(yōu)選的化合物還可用于治療低血壓性血管疾病，例如與膿毒性休克有關(guān)的低血壓。
此外，優(yōu)選的化合物還可用于治療呼吸疾病，例如過(guò)敏和哮喘。
這些以及其它的治療用途記載于例如Goodman & Gilman′s，ThePharmacological Basis of Therapeutics，第9版，McGraw-Hill，紐約，1996，第26章601-616；和Coleman，R.A.，《藥理學(xué)評(píng)論》，1994，46，205-229。
本發(fā)明式I化合物對(duì)預(yù)定靶點(diǎn)的結(jié)合親和性用實(shí)施例11中更詳細(xì)描述的體外人血小板IP受體結(jié)合試驗(yàn)來(lái)測(cè)定。下表中給出了某些具體的本發(fā)明化合物的體外人血小板IP受體結(jié)合數(shù)據(jù)
本發(fā)明化合物對(duì)膀胱收縮的抑制作用可以通過(guò)體內(nèi)試驗(yàn)例如分別在實(shí)施例14和15中更詳細(xì)描述的對(duì)通過(guò)等容膀胱膨脹誘導(dǎo)的大鼠膀胱收縮的抑制作用和對(duì)體積誘導(dǎo)的(volume-induced)大鼠收縮的抑制作用來(lái)測(cè)定。本發(fā)明化合物的抗炎/鎮(zhèn)痛活性通過(guò)體內(nèi)試驗(yàn)，例如分別在實(shí)施例12、13和17中更詳細(xì)描述的大鼠角叉菜膠爪試驗(yàn)、大鼠完全弗氏佐劑誘導(dǎo)的試驗(yàn)和碳酰前列環(huán)素(Carbaprostacyclin)誘導(dǎo)的扭動(dòng)試驗(yàn)來(lái)測(cè)定。抑制膿毒性休克的活性可以通過(guò)體內(nèi)試驗(yàn)例如在實(shí)施例16中更詳細(xì)描述的在大鼠中逆轉(zhuǎn)由內(nèi)毒素引起的低血壓的試驗(yàn)來(lái)測(cè)定。
本發(fā)明包括含有至少一種本發(fā)明的化合物或其單個(gè)的異構(gòu)體、異構(gòu)體的外消旋或非外消旋混合物或其可藥用鹽或溶劑化物以及至少一種可藥用載體的藥物組合物，其中可還任選地含有其它治療和/或預(yù)防成分。
總的來(lái)說(shuō)，本發(fā)明的化合物可以通過(guò)用于具有類似用途之藥物的任何可接受的給藥方式以治療有效量給藥。適宜的劑量范圍通常為每天1-500mg，優(yōu)選每天1-100mg，最優(yōu)選每天1-30mg，這取決于多種因素，例如所治療疾病的嚴(yán)重程度、個(gè)體的年齡和相對(duì)健康情況、所用化合物的效力，給藥途徑和形式、給藥所針對(duì)的適應(yīng)癥、參與治療的醫(yī)生的偏好和經(jīng)驗(yàn)。治療所述疾病的普通技術(shù)人員不用過(guò)多的經(jīng)驗(yàn)就可以根據(jù)其本人的知識(shí)和本申請(qǐng)所公開(kāi)的內(nèi)容確定出本發(fā)明化合物對(duì)于給定疾病的治療有效量。
通常，本發(fā)明的化合物以藥物制劑的形式給藥，包括適于口服(包括頰部和舌下)、直腸、鼻、局部、肺、陰道或胃腸外(包括肌肉內(nèi)、動(dòng)脈內(nèi)、鞘內(nèi)、皮下和靜脈內(nèi))給藥的形式，或是適于通過(guò)吸入或吹入給藥的形式。優(yōu)選的給藥方式通常是采用常規(guī)每日劑量方案的口服給藥，可以根據(jù)疾病的程度對(duì)該每日劑量方案進(jìn)行調(diào)整。
本發(fā)明的化合物，與一種或多種常規(guī)的輔劑、載體或稀釋劑一起，可以制成藥物組合物和單位劑量的形式。藥物組合物和單位劑量形式可以含有常規(guī)比例的常規(guī)成分，可以含或不含另外的活性化合物或活性成分，并且單位劑量形式可以含有與所要采用的預(yù)定的每日劑量范圍相稱的任何適宜有效量的活性成分。藥物組合物可以是固體，例如片劑或填充的膠囊、半固體、粉劑、緩釋制劑或液體，例如溶液劑、混懸劑、乳劑、酏劑或用于口服的填充膠囊；或是用于直腸或陰道給藥的栓劑形式；或是用于胃腸外應(yīng)用的無(wú)菌可注射溶液。因此，每片含有約一(1)毫克活性成分，或更寬地，約0.01-約一百(100)毫克活性成分的制劑是適宜的代表性單位劑量形式。
本發(fā)明的化合物可以配制成各種口服給藥劑量形式。藥物組合物和劑量形式可以含有本發(fā)明的化合物或其可藥用鹽作為活性成分?？伤幱幂d體可以是固體或液體。固體形式的制劑包括散劑、片劑、丸劑、膠囊、扁囊劑、栓劑和可分散的顆粒劑。固體載體可以是一種或多種還起稀釋劑、矯味劑、增溶劑、潤(rùn)滑劑、懸浮劑、粘合劑、防腐劑、片劑崩解劑或包封材料作用的物質(zhì)。在散劑中，載體通常是細(xì)分散的固體，它是與細(xì)分散的活性成分的混合物。在片劑中，通常將活性成分與適當(dāng)比例的具有所需粘合能力的載體混合然后壓制成所需的形狀和大小。散劑和片劑優(yōu)選含有約百分之一(1)至約七十(70)的活性化合物。適宜的載體包括但不限于碳酸鎂、硬脂酸鎂、滑石、糖、乳糖、果膠、糊精、淀粉、明膠、黃蓍膠、甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉、低熔點(diǎn)的蠟、可可脂等。術(shù)語(yǔ)“制劑”還包括活性化合物與用包封材料作為載體的制劑，從而提供活性成分(含或不含載體)被載體包圍的膠囊。同樣，還包括扁囊劑和錠劑。片劑、散劑、膠囊、丸劑、扁囊劑和錠劑可以是適于口服給藥的固體形式。
其它適于口服給藥的形式包括液體形式的制劑，包括乳劑、糖漿、酏劑、含水溶液、含水混懸液或是用于在臨用之前轉(zhuǎn)化成液體形式制劑的固體形式的制劑。乳劑可以在溶液中制備，例如在丙二醇的水溶液中制備，或者可以含有乳化劑例如卵磷脂、脫水山梨醇一油酸酯或金合歡膠。含水溶液可以通過(guò)將活性成分溶于水并加入適宜的著色劑、矯味劑、穩(wěn)定劑和增稠劑來(lái)制備。含水懸浮液可以通過(guò)將細(xì)分散的活性成分分散在含有粘性材料例如天然或和合成的樹(shù)膠、樹(shù)脂、甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉和其它公知的懸浮劑的水中來(lái)制備。固體形式的制劑包括溶液劑、混懸液和乳劑，并且除活性成分外，其中還可以含有著色劑、矯味劑、穩(wěn)定劑、緩沖劑、抗菌劑和天然甜味劑、分散劑、增稠劑、增溶劑等。
本發(fā)明的化合物可以配制成用于胃腸外給藥(例如，通過(guò)注射，例如通過(guò)快速濃注或連續(xù)輸注)的形式并以單位劑量的形式存在于安瓿、預(yù)填充的注射器、小容積的輸注容器或含有防腐劑的多劑量容器中。組合物可以是在油或含水溶媒例如聚乙二醇水溶液中的混懸劑、溶液劑或乳劑的形式。油或非水載體、稀釋劑、溶劑或溶媒的例子包括丙二醇、聚乙二醇、植物油(例如橄欖油)和可注射的有機(jī)酯(例如油酸乙酯)，并可含有藥物輔劑如防腐劑、濕潤(rùn)劑、乳化劑或助懸劑、穩(wěn)定劑和/或分散劑?；蛘?，活性成分可以是用于在臨用前用適宜的溶媒如無(wú)菌、無(wú)熱源的水構(gòu)建的粉末形式，該形式通過(guò)無(wú)菌分離無(wú)菌固體或通過(guò)凍干溶液得到。
可將本發(fā)明的化合物配制成軟膏、霜?jiǎng)┗蛳磩┗蛲钙べN劑的形式用于向表皮局部給藥。軟膏和霜?jiǎng)┛梢杂美缢蛴突渲撇⒓尤脒m宜的增稠劑和/或膠凝劑。洗劑可以用水和油基配制并通常也含有一種或多種乳化劑、穩(wěn)定劑、分散劑、助懸劑、增稠劑或著色劑。適于在口腔內(nèi)局部給藥的組合物包括在矯味基質(zhì)(通常是蔗糖和金合歡膠或黃蓍膠)中含有活性成分的錠劑；在惰性基質(zhì)如明膠和甘油或蔗糖和金合歡膠中含有活性成分的香錠；在適宜的液體載體中含有活性成分的漱口水。
還可將本發(fā)明的化合物配制成用于以栓劑給藥的形式。首先將低熔點(diǎn)的蠟、例如脂肪酸甘油酯的混合物或可可脂熔融，然后通過(guò)例如攪拌將活性成分均勻地分散。然后將熔融的均勻混合物倒入適宜大小的模具中，使其冷卻固化。
還可將本發(fā)明的化合物配制成用于陰道給藥的形式。適宜的形式包括含有活性成分和本領(lǐng)域已知的載體的陰道栓、棉塞、霜?jiǎng)?、凝膠、糊劑、泡沫劑或噴霧劑。
本發(fā)明的化合物還可配制成用于經(jīng)鼻給藥的形式。將溶液或混懸液通過(guò)常規(guī)方法例如滴管、吸管或噴霧器直接施用到鼻腔內(nèi)。該制劑可以是單劑量或多劑量的形式。在后一種的滴管或吸管的情況下，可以通過(guò)患者自己施用適宜的、預(yù)定體積的溶液或混懸液來(lái)完成。在噴霧劑的情況下，可以通過(guò)例如計(jì)量霧化噴霧泵來(lái)實(shí)現(xiàn)。
本發(fā)明的化合物還可以配制成用于氣霧劑給藥的形式，特別是向呼吸道、包括鼻內(nèi)給藥。化合物通常應(yīng)具有較小的粒度，例如五(5)微米或更小。這樣的粒度可以通過(guò)本領(lǐng)域已知的方法來(lái)達(dá)到，例如通過(guò)微粉化。將活性化合物置于含有適宜的拋射劑例如氯氟化碳(CFC)，例如二氯二氟甲烷、三氯氟甲烷或二氯四氟乙烷或二氧化碳或其它適宜氣體的預(yù)先加壓的包裝內(nèi)。氣霧劑還可以含有表面活性劑例如卵磷脂。藥物的劑量可以通過(guò)計(jì)量閥來(lái)控制?；蛘?，可將活性成分以干粉、例如化合物在適宜的粉末基質(zhì)例如乳糖、淀粉、淀粉衍生物例如羥丙甲基纖維素和聚乙烯吡咯烷酮(PVP)中的混合物的形式來(lái)提供。粉末載體可以在鼻腔內(nèi)形成凝膠。粉末組合物可以以單位劑量形式例如明膠膠囊或藥筒或凸泡包裝的形式提供，可以借助吸入器通過(guò)這些形式施用粉末。
當(dāng)需要時(shí)，制劑可用適用于緩釋或控釋給藥活性組分的腸溶包衣制備。例如，本發(fā)明化合物可以配制成經(jīng)皮或皮下給藥裝置。當(dāng)需要緩釋化合物以及當(dāng)患者對(duì)治療方案的依從性非常重要時(shí)，這種給藥系統(tǒng)非常有利。經(jīng)皮給藥系統(tǒng)中的化合物通常粘附在皮膚粘性的固體載體上。還可將所用化合物與透皮促進(jìn)劑例如氮酮(1-十二烷基氮雜環(huán)庚-2-酮)合用。可以通過(guò)手術(shù)或注射將緩釋給藥系統(tǒng)經(jīng)皮下插入到皮下層。皮下植入物將化合物包在脂溶性的膜例如硅橡膠或生物可降解的聚合物例如聚乳酸中。
藥物制劑優(yōu)選單位劑量形式。在這些形式中，制劑被進(jìn)一步分成含有適宜量活性成分的單位劑量。單位劑量形式可以是包裝的制劑、含有不連續(xù)量的制劑的包裝，例如小袋裝的片劑、膠囊和在小瓶或安瓿內(nèi)的粉末。此外，單位劑量形式還可以是膠囊、片劑、扁囊劑或錠劑本身，或者可以是適宜數(shù)量的任何這些包裝形式。
其它適宜的藥物載體及其制劑記載于RemingtonThe Science andPractice of Pharmacy 1995，E.W.Martin編，Mack Publishing Company，第19版，Easton，Pennsylvania。在實(shí)施例4-10中描述了含有本發(fā)明化合物的代表性藥物制劑。
實(shí)施例給出如下制備方法和實(shí)施例是為了使本領(lǐng)域的技術(shù)人員能夠更清楚地理解和實(shí)踐本發(fā)明。不應(yīng)將其看作是對(duì)本發(fā)明范圍的限定，它們僅僅是對(duì)本發(fā)明的舉例說(shuō)明和本發(fā)明的代表性例子。
制備例1(5-苯基-苯并呋喃-2-基)-甲醇1 步驟15-溴-苯并呋喃-2-甲酸乙酯將5-溴水楊醛(10g，50mmol)、溴代丙二酸二乙酯(13.1g，55mmol)、碳酸鉀(6.9g，50mmol)和2-丁酮(80ml)的混合物在90℃下攪拌16小時(shí)。在45℃下減壓除去溶劑，殘余物用1M HCl酸化，萃取，洗滌，干燥并蒸發(fā)。殘余物通過(guò)色譜法純化得到約3.6g 5-溴-苯并呋喃-2-甲酸乙酯，mp.59-60℃。
步驟25-苯基-苯并呋喃-2-甲酸將5-溴-苯并呋喃-2-甲酸乙酯(2.5g，9.3mmol)、苯硼酸(1.25g，10.2mmol)、四(三苯基膦)鈀(0)(118mg)、碳酸鈉(3.25g，30.6mmol)在水(25ml)和二噁烷(25ml)中的混合物在氬環(huán)境下攪拌并加熱至100℃16小時(shí)。將白色多相的物質(zhì)用1M HCl酸化，萃取，洗滌，干燥并蒸發(fā)得到約2.2g 5-苯基-苯并呋喃-2-甲酸，mp.218-220℃。
步驟3(5-苯基-苯并呋喃-2-基)-甲醇1
將溶解在THF(50ml)中的5-苯基-苯并呋喃-2-甲酸(2.1g，8.8mmol)的溶液在冰浴中冷卻至5℃，分次加入LiAlH4(0.67g，17.6mmol)并在室溫下攪拌1.5小時(shí)。通過(guò)加入1M HCl分解過(guò)量的試劑，將酸化的混合物用乙酸乙酯萃取，洗滌，干燥并蒸發(fā)。殘余物通過(guò)色譜法純化得到約1.22g(5-苯基-苯并呋喃-2-基)-甲醇1，mp.134-135℃。
類似地，按照該方法，但將苯硼酸用適宜的雜芳基硼烷衍生物代替制得下列通式1的化合物(5-吡啶-3-基苯并呋喃-2-基)甲醇；(5-噻吩-3-基苯并呋喃-2-基)甲醇；和(5-嘧啶-2-基苯并呋喃-2-基)甲醇。
實(shí)施例12-苯基-5-(5-苯基-苯并呋喃-2-基甲氧基羰基氨基)-嘧啶-4-甲酸 步驟15-氨基-2-苯基-嘧啶-4-甲酸向8.75g(0.0314mol)5-溴-2-苯基-嘧啶-4-甲酸的濃氫氧化銨(69ml)懸浮液中加入0.39g硫酸銅(II)的水(1.6ml)溶液。將該混合物密封并加熱至80℃6天。冷卻至室溫并過(guò)濾后，將固體加入100ml沸水中，過(guò)濾，冷卻并用乙酸酸化。過(guò)濾并干燥得到4.40g褐色固體狀的5-氨基-2-苯基-嘧啶-4-甲酸，mp.199-202℃。
步驟25-氨基-2-苯基-嘧啶-4-甲酸甲酯向4.0g(0.0186mol)在冰浴中的5-氨基-2-苯基-嘧啶-4-甲酸中緩慢地加入48ml三氟乙酸酐并將該混合物加熱至50℃5小時(shí)。將反應(yīng)混合物過(guò)濾，用少量三氟乙酸酐洗滌并干燥。向所得到的產(chǎn)物的甲醇(50ml)懸浮液中加入0.1ml 0.5M甲醇鈉的甲醇溶液。將該混合物回流15分鐘，冷卻至室溫，并通入HCl氣泡1小時(shí)。冷卻并過(guò)濾后，將固體用200ml 1N NaOH和200ml乙醚處理。有機(jī)層用硫酸鎂干燥，過(guò)濾，蒸發(fā)得到2.43g黃色固體狀的5-氨基-2-苯基-嘧啶-4-甲酸甲酯。
步驟32-苯基-5-(5-苯基-苯并呋喃-2-基甲氧基羰基氨基)-嘧啶-4-甲酸甲酯在氮環(huán)境下，向5-氨基-2-苯基-嘧啶-4-甲酸甲酯(1.5g，6.54mmol)的甲苯(15ml)和吡啶(2.1ml，26.2mmol)溶液中加入20％光氣的甲苯溶液(5.9ml，11.1mmol)。將該混合物在90℃下加熱1小時(shí)，冷卻至25℃并過(guò)濾。將濾液濃縮至干。在氮環(huán)境下，將THF(30ml)、(5-苯基-苯并呋喃-2-基)-甲醇(0.55g，2.45mmol)和三乙胺(0.99g，9.8mmol)加到殘余物中。將反應(yīng)混合物在50℃下加熱10小時(shí)，然后濃縮至干。通過(guò)色譜法純化，然后結(jié)晶得到1.05g 2-苯基-5-(5-苯基-苯并呋喃-2-基甲氧基-羰基氨基)-嘧啶-4-甲酸甲酯。
步驟42-苯基-5-(5-苯基-苯并呋喃-2-基甲氧基羰基氨基)-嘧啶-4-甲酸向2-苯基-5-(5-苯基-苯并呋喃-2-基甲氧基-羰基氨基)-嘧啶-4-甲酸甲酯(0.956g，1.99mmol)的THF(20ml)溶液中加入氫氧化鋰一水合物(0.167g，3.99mmol)的水(4ml)溶液。將該混合物在5℃下攪拌2小時(shí)，并加入1N HCl調(diào)節(jié)pH至2。真空除去溶劑并過(guò)濾所得到的懸浮液。將白色粗品固體重結(jié)晶得到0.82g 2-苯基-5-(5-苯基-苯并呋喃-2-基甲氧基羰基氨基)-嘧啶-4-甲酸，mp.184-185℃。
類似地，按照實(shí)施例1的方法，但在步驟4中，用適宜的苯并呋喃-2-基-甲醇衍生物代替(5-苯基-苯并呋喃-2-基)-甲醇制得下列化合物
5-[5-(4-氟-苯基)-苯并呋喃-2-基甲氧基羰基氨基]-2-苯基-嘧啶-4-甲酸，mp.181.5-181.8℃；或2-苯基-5-(5-噻吩-3-基-苯并呋喃-2-基甲氧基羰基氨基)-嘧啶-4-甲酸，mp.191.9-192.2℃。
類似地，按照實(shí)施例1的方法并在步驟4中用聯(lián)苯-4-甲醇代替(5-苯基-苯并呋喃-2-基)-甲醇得到5-(聯(lián)苯-4-基甲氧基羰基氨基)-2-苯基-嘧啶-4-甲酸，mp.172.7-173.1℃。
實(shí)施例21-苯基-3-(5-苯基-苯并呋喃-2-基甲氧基羰基氨基)-1H-吡唑-4-甲酸 步驟12-(三甲基硅烷基)乙基氰基乙酸酯向氰基乙酸(17.0g，200mmol)、2-(三甲基硅烷基)乙醇(26.0g，220mmol)和DMAP(2.44g，20mmol)的混合物中小心地加入二環(huán)己基碳二亞胺(45.4g，220mmol)。立即析出白色沉淀物N，N-二氯尿烷，將該混合物在室溫下攪拌過(guò)夜。
將混合物過(guò)濾除去N，N-二氯尿烷并將濾液蒸發(fā)至干。將殘余物溶解在乙醚中，用水、5％乙酸水溶液、飽和NaHCO3溶液、飽和鹽水洗滌并用MgSO4干燥。蒸發(fā)乙醚得到得到粗產(chǎn)物，將其在高真空下分餾。收集在102-104℃下沸騰的餾分得到30.41g無(wú)色液體狀2-(三甲基硅烷基)乙基氰基乙酸酯。
步驟22-(三甲基硅烷基)乙基3-氨基-1-苯基吡唑-4-甲酸酯將2-(三甲基硅烷基)乙基氰基乙酸酯(30.0g，167mmol)、原甲酸三乙酯(23.8g，160mmol)和34.1g(334mmol)乙酸酐在N2下混合并加熱回流24小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，然后在高真空下分餾。收集在大約143℃下沸騰的餾分得到28.3g(73％)產(chǎn)物。NMR顯示該物質(zhì)含大約70％的2-(三甲基硅烷基)乙基2-乙氧基亞甲基-氰基乙酸酯和大約30％的2-(三甲基硅烷基)乙基氰基乙酸酯(原料)。不必進(jìn)一步純化。
步驟32-(三甲基硅烷基)乙基3-(N′-亞芐基-N-苯基肼基)-2-氰基丙烯酸酯將2-(三甲基硅烷基)乙基2-乙氧基亞甲基氰基乙酸酯(10.0g，41.4mmol)和苯甲醛-苯腙(8.13g，41.4mmol)在N2下，在50ml二甲苯中混合并加熱回流5小時(shí)，冷卻至室溫，然后用己烷(50ml)處理并攪拌過(guò)夜。濾出沉淀物，用己烷洗滌并干燥得到5.46g粗產(chǎn)物。
通過(guò)色譜法純化得到2.69g(16％)2-(三甲基硅烷基)乙基3-(N′-亞芐基-N-苯基肼基)-2-氰基丙烯酸酯，為白色固體。
步驟42-(三甲基硅烷基)乙基3-氨基-1-苯基吡唑-4-甲酸酯向2-(三甲基硅烷基)乙基3-(N′-亞芐基-N-苯基肼基)-2-氰基丙烯酸酯(2.69g，6.87mmol)的乙醇(10ml)溶液中加入2.1ml濃HCl溶液并將該混合物在氮?dú)庀录訜峄亓?小時(shí)。減壓蒸發(fā)乙醇。將殘余物溶解在乙酸乙酯中，緩慢地用30ml冷的1N NaOH溶液處理。分離乙酸乙酯層，用飽和鹽水洗滌并用MgSO4干燥。蒸發(fā)溶劑得到1.68g粗品，將粗品通過(guò)色譜法純化得到976mg(47％)2-(三甲基硅烷基)乙基3-氨基-1-苯基吡唑-4-甲酸酯，為淡黃色固體。
步驟51-苯基-3-(5-苯基-苯并呋喃-2-基甲氧基羰基氨基)-1H-吡唑-4-甲酸三甲基硅烷基乙酯在氮?dú)庀?，?-(三甲基硅烷基)乙基3-氨基-1-苯基吡唑-4-甲酸酯(967mg，3.1mmol)的無(wú)水甲苯(11ml)和吡啶(504mg，0.52ml，6.3mmol)溶液中加入光氣溶液(2.4ml 1.93M的甲苯溶液，4.62mmol)。立即形成白色沉淀，將該混合物在90℃下加熱30分鐘。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫并過(guò)濾。將濾液蒸發(fā)至干。在氮?dú)庀?，?5-苯基-苯并呋喃-2-基)-甲醇1(556mg，2.48mmol)和DMAP(40mg，0.33mmol)的甲苯(15ml)溶液加到該殘余物中。將反應(yīng)混合物在75℃下加熱4小時(shí)，然后濃縮至干。通過(guò)色譜法純化得到1.28g 1-苯基-3-(5-苯基-苯并呋喃-2-基甲氧基羰基氨基)-1H-吡唑-4-甲酸三甲基硅烷基乙酯，為淡黃色固體。
步驟61-苯基-3-(5-苯基-苯并呋喃-2-基甲氧基羰基氨基)-1H-吡唑-4-甲酸在N2下，向1-苯基-3-(5-苯基-苯并呋喃-2-基甲氧基羰基-氨基)-1H-吡唑-4-甲酸三甲基硅烷基乙酯(1.27g，2.29mmol)的DMF(10ml)溶液中加入氟化四正丁銨(2.75ml 1M THF溶液，2.75mmol)。將該混合物在室溫下攪拌2小時(shí)。在高真空下蒸除溶劑(最高60℃)。加入水并萃取該混合物。加入4ml 1N HCl后，析出白色沉淀物并過(guò)濾。將該物質(zhì)在10ml沸騰的EtOH中研制得到684mg白色固體狀1-苯基-3-(5-苯基-苯并呋喃-2-基甲氧基羰基氨基)-1H-吡唑-4-甲酸，mp 220.6-220.8℃。
實(shí)施例33-(5-苯基-苯并呋喃-2-基甲氧基羰基氨基)-異煙酸
步驟13-(5-苯基-苯并呋喃-2-基甲氧基羰基氨基)-異煙酸乙酯在室溫、氬環(huán)境下，向3-氨基吡啶-4-甲酸乙酯鹽酸鹽(1.0g，4.93mmol)和吡啶(1.2ml，14.8mmol)的甲苯(10ml)溶液中加入20％光氣的甲苯溶液(3.7ml，7.15mmol)并將該混合物在90℃下加熱1小時(shí)。將該混合物過(guò)濾，將濾液濃縮至干。將粗品溶解在甲苯(10ml)中，加入(5-苯基-苯并呋喃-2-基)-甲醇(0.922g，4.11mmol)和DMAP(0.05g，0.411mmol)并將該混合物在90℃下加熱18小時(shí)。將溶劑蒸發(fā)至干。通過(guò)色譜法純化得到0.538g白色固體狀3-(5-苯基-苯并呋喃-2-基甲氧基羰基氨基)-異煙酸乙酯。
步驟23-(5-苯基-苯并呋喃-2-基甲氧基羰基氨基)-異煙酸在室溫下，向3-(5-苯基-苯并呋喃-2-基甲氧基羰基氨基)-異煙酸乙酯(0.150g，0.36mmol)的THF(3ml)溶液中加入1.0M LiOH(0.72ml，0.72mmol)并將該混合物攪拌3小時(shí)。蒸發(fā)溶劑，加入水，然后加入2N HCl調(diào)節(jié)pH至1-2，產(chǎn)物用EtOAc萃取。萃取液用水、鹽水洗滌，用硫酸鎂干燥并濃縮至干。通過(guò)結(jié)晶純化得到0.072g白色固體狀3-(5-苯基-苯并呋喃-2-基甲氧基羰基氨基)-異煙酸，mp 235.7-238.9℃。
實(shí)施例4用于口服的組合物
將各成分混合然后分裝到膠囊中，每粒膠囊含有約100mg；一粒膠囊接近一個(gè)總的日劑量。
實(shí)施例5用于口服的組合物
將各成分混合然后用溶劑例如甲醇制粒。然后將配料干燥并用適宜的壓片機(jī)制成片劑(含有約20mg活性化合物)。
實(shí)施例6用于口服的組合物
將各成分混合形成用于口服的混懸液。
實(shí)施例7胃腸外制劑(IV)
將活性成分溶于一部分注射用水。然后在攪拌下加入足夠量的氯化鈉將溶液調(diào)至等滲。用剩余的注射用水使溶液達(dá)到重量，用0.2微米的膜濾器過(guò)濾，然后在無(wú)菌條件下包裝。
實(shí)施例8栓劑制劑
將各成分在蒸汽浴上熔融并混合在一起，然后倒入容量為2.5g總重量的模具中。
實(shí)施例9局部制劑
將除水之外的所有成分混合并在攪拌下加熱至約60℃。然后在劇烈攪拌下加入足夠量的約60℃的水使各成分乳化，然后加入適量的水至約100g。
實(shí)施例10鼻噴霧制劑制備多種含有約0.025-0.5％活性化合物的含水混懸液作為鼻噴霧制劑。這些制劑任選地含有非活性成分，例如微晶纖維素、羧甲基纖維素鈉、葡萄糖等?？梢约尤臌}酸來(lái)調(diào)節(jié)pH值?？蓪⒈菄婌F制劑通過(guò)每次操作時(shí)通常可以遞送約50-100微升制劑的鼻噴霧計(jì)量泵來(lái)給藥。一般的給藥方案是每4-12小時(shí)噴霧2-4次。
實(shí)施例11體外人血小板IP受體放射性配體結(jié)合試驗(yàn)體外入血小板IP受體結(jié)合試驗(yàn)用于測(cè)定潛在的藥物對(duì)其預(yù)定靶點(diǎn)的結(jié)合親和性的強(qiáng)度。
對(duì)于測(cè)試的每一藥物，用迭代曲線擬合方法測(cè)定對(duì)結(jié)合產(chǎn)生50％抑制的濃度(IC50)和Hill斜率。如果放射性配體的Kd是已知的，則按照Cheng& Prusoff(1973)的方法測(cè)定各藥物的抑制解離常數(shù)(Ki)。對(duì)于該受體，使用前述實(shí)驗(yàn)條件時(shí)的典型Kd為1E-8M。通常給出Ki的負(fù)對(duì)數(shù)(pKi)。
實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)用可以獲得的最純水制備如下緩沖液。
溶解緩沖液10mM Tris-HCl，1.0mM EDTA(二鈉) pH7.5，4℃試驗(yàn)緩沖液20mM Tris-HCl，5.0mM MgCl2pH7.4，25℃洗滌緩沖液20mM Tris-HCl，5.0mM MgCl2pH7.4，4℃
1.膜制備將250ml血小板富集的血漿轉(zhuǎn)移到250ml離心管中，然后在20℃下以6000g旋轉(zhuǎn)10分鐘。然后將血小板重新懸浮在IP溶解緩沖液中并用polytron勻漿化(設(shè)置7，1×20秒，暴發(fā)式的)，使最終體積達(dá)到180ml，然后于4℃下以40000g離心15分鐘。然后將沉積物重新懸浮在IP試驗(yàn)緩沖液中，通過(guò)BCA法(Pierce)測(cè)定蛋白質(zhì)密度，然后在2.0ml的小瓶中于-80℃下保存以用于隨后的試驗(yàn)。
為了獲得至少80％的特異性結(jié)合，在競(jìng)爭(zhēng)性實(shí)驗(yàn)中使用50μg蛋白/試驗(yàn)試管。最終的放射性配體濃度為1-3E-8M。
2.競(jìng)爭(zhēng)試驗(yàn)將膜于室溫下融化，然后在試驗(yàn)緩沖液中稀釋至適宜的濃度。向試驗(yàn)試管中首先加入緩沖液、藥物、放射性配體，最后加入膜。將試驗(yàn)試管于25℃保溫60分鐘。將試驗(yàn)試管用Packard Top Count 96孔細(xì)胞收集器過(guò)濾到用0.3％PEI預(yù)處理的玻璃纖維濾墊(GF/B)上。將試管用冰冷的20mMTris-HCl，5mM MgCl2，pH＝7.4沖洗3次(3×0.5ml/樣品)。通過(guò)液體閃爍計(jì)數(shù)測(cè)定結(jié)合的放射性。
實(shí)施例12角叉菜膠誘導(dǎo)的機(jī)械痛覺(jué)過(guò)敏試驗(yàn)通過(guò)角叉菜膠誘導(dǎo)的機(jī)械痛覺(jué)過(guò)敏試驗(yàn)，通過(guò)測(cè)定對(duì)角叉菜膠誘導(dǎo)的大鼠爪痛覺(jué)過(guò)敏的抑制作用，使用L.O.Randall和J.J.Selitto，Archives ofInternational Pharmacodynamics，1957，11，409-419和Vinegar等，Journalof Pharmacology and Experimental Therapeutics，1969，166，96-103所描述的方法的改良形式來(lái)測(cè)定本發(fā)明化合物的抗炎/鎮(zhèn)痛活性。
將雄性Sprague-Dawley大鼠(130-150g)稱重然后隨機(jī)分到治療組(n＝10)中。為了誘導(dǎo)機(jī)械痛覺(jué)過(guò)敏，將大鼠用氟烷輕度麻醉然后在左后爪的趾面上施用1％角叉菜膠或載體1(100μl)。在試驗(yàn)前1小時(shí)對(duì)大鼠施用載體(10ml/kg，口服或1ml/kg，靜脈內(nèi))或本發(fā)明的化合物(1、3、10、30和100mg/kg，口服)或(0.3、1.0、3.0和10mg/kg，靜脈內(nèi))。用Analgesy計(jì)(UGO BASILE，Biological Research Apparatus，Comerio，意大利)測(cè)定機(jī)械痛覺(jué)過(guò)敏。將用載體或角叉菜膠處理過(guò)的后爪置于儀器的圓頂上，趾面朝下。然后向爪的背側(cè)面施加不斷增加的力。將大鼠撤回爪子、掙扎或發(fā)出叫聲時(shí)的力看作是終點(diǎn)。
用單向方差分析對(duì)爪撤回力(RESP)在各治療組之間進(jìn)行比較。用Fisher′s LSD策略和Dunn′s法進(jìn)行藥物治療組與載體組的成對(duì)比較。計(jì)算各動(dòng)物的機(jī)械痛覺(jué)過(guò)敏的抑制百分比，用如下S型模型評(píng)估平均ID50值％抑制＝100/(1+exp((ID50-劑量)/N))其中ID50是抑制最大響應(yīng)(即，該模型中的100％)的一半所需要的化合物的劑量，N是曲率參數(shù)。
本發(fā)明的化合物在該試驗(yàn)中具有活性。
實(shí)施例13完全弗氏佐劑誘導(dǎo)的機(jī)械痛覺(jué)過(guò)敏試驗(yàn)還可以用佐劑誘導(dǎo)的大鼠關(guān)節(jié)炎疼痛模型來(lái)測(cè)定本發(fā)明化合物的抗炎/鎮(zhèn)痛活性，其中用J.Hylden等，Pain 1989，37，229-243所描述的方法的改良形式，通過(guò)動(dòng)物對(duì)于對(duì)發(fā)炎爪子的擠壓的反應(yīng)對(duì)疼痛進(jìn)行評(píng)估。所述的改良包括評(píng)估的是痛覺(jué)過(guò)敏而不是脊髓神經(jīng)元活性的改變。
簡(jiǎn)單地講，將大鼠稱重然后隨機(jī)分到治療組中。為了誘導(dǎo)機(jī)械痛覺(jué)過(guò)敏，將大鼠用氟烷輕度麻醉然后在左后爪的趾面內(nèi)施用100μl完全弗氏佐劑或鹽水。24小時(shí)后，向大鼠口服給藥水(載體)或本發(fā)明的化合物，1小時(shí)后進(jìn)行試驗(yàn)。用Analgesy計(jì)(UGO BASILE，Biological ResearchApparatus，Comerio，意大利)測(cè)定機(jī)械痛覺(jué)過(guò)敏。將用鹽水或角叉菜膠處理過(guò)的后爪置于儀器的圓頂上，趾面朝下。然后向爪的背側(cè)面施加不斷增加的力。將大鼠撤回爪子、掙扎或發(fā)出叫聲時(shí)的力看作是終點(diǎn)。用單向方差分析對(duì)爪撤回力在各治療組之間進(jìn)行比較。用如下公式對(duì)各動(dòng)物計(jì)算抑制百分比100×((c/d-c/v)÷(s/v-c/v))
其中c/d是在施用藥物的動(dòng)物中用角叉菜膠處理的爪子的爪撤回力；c/v是在施用載體的動(dòng)物中用角叉菜膠處理的爪子的爪撤回力；s/v是在施用載體的動(dòng)物中用鹽水處理的爪子的爪撤回力。用學(xué)生t檢驗(yàn)測(cè)定顯著性。
本發(fā)明的化合物在該試驗(yàn)中具有活性。
實(shí)施例14對(duì)通過(guò)等容膀胱膨脹誘導(dǎo)的大鼠膀胱收縮的抑制作用采用C.A.Maggi等，J.Pharm and Exper.Therapeutics，1984，230，500-513所描述的方法的改良形式來(lái)測(cè)定對(duì)膀胱收縮的抑制作用。
簡(jiǎn)單地講，將雄性Sprague-Dawley大鼠(200-250g)稱重然后隨機(jī)分到治療組中。通過(guò)尿道向膀胱內(nèi)插入導(dǎo)管以誘導(dǎo)膀胱收縮，然后輸入溫?zé)岬柠}水(5ml)。在約30％的動(dòng)物中產(chǎn)生了有節(jié)奏的收縮。將本發(fā)明的化合物(0.1、0.3或1mg/kg)在開(kāi)始規(guī)律性節(jié)奏收縮時(shí)通過(guò)靜脈內(nèi)給藥。然后測(cè)定對(duì)節(jié)奏性收縮的影響。
本發(fā)明的化合物在該試驗(yàn)中具有活性。
實(shí)施例15對(duì)體積誘導(dǎo)的大鼠收縮的抑制作用采用S.S.Hegde等，Proceedings of the 26th Annual Meeting of theInternational Continence Society(8月27-30日)1996，摘要126所描述的方法的改良形式來(lái)測(cè)定對(duì)膀胱收縮的抑制作用。
將雌性Sprague-Dawley大鼠用尿烷麻醉然后裝配用于靜脈內(nèi)給藥以及在某些情況下用于測(cè)定動(dòng)脈壓、心率和膀胱內(nèi)壓力的儀器。在另一組動(dòng)物中測(cè)定試驗(yàn)化合物對(duì)體積誘導(dǎo)的膀胱收縮的影響。通過(guò)將膀胱內(nèi)充滿鹽水來(lái)誘導(dǎo)體積誘導(dǎo)的反射性膀胱收縮。將試驗(yàn)化合物以累積的方式以10分鐘為間隔進(jìn)行靜脈內(nèi)給藥。在研究結(jié)束時(shí)給藥阿托品(0.3mg/kg，靜脈內(nèi))作為陽(yáng)性對(duì)照。
本發(fā)明的化合物在該試驗(yàn)中具有活性。
實(shí)施例16在大鼠中逆轉(zhuǎn)由內(nèi)毒素引起的低血壓膿毒性休克，有時(shí)稱為內(nèi)毒素性休克，是由于在血流中存在感染性物質(zhì)、特別是細(xì)菌性內(nèi)毒素所引起的，其特征是低血壓和器官功能障礙。許多膿毒性休克的癥狀、特別是低血壓，可以通過(guò)施用細(xì)菌性內(nèi)毒素在大鼠中引發(fā)。因此，化合物抑制由內(nèi)毒素引起的低血壓的能力可以預(yù)示該化合物在治療膿毒性或內(nèi)毒素性休克中的用途。
本發(fā)明化合物在治療膿毒性或內(nèi)毒素性休克中的活性通過(guò)用M.Giral等，British Journal of Pharmacology，1969，118，1223-1231所描述的方法的改良形式測(cè)定在大鼠中逆轉(zhuǎn)由內(nèi)毒素引起的低血壓來(lái)確定。
簡(jiǎn)單地講，將成年大鼠(＞200g)用吸入麻醉劑麻醉然后對(duì)股動(dòng)脈和股靜脈進(jìn)行插管，分別用于插入血壓傳感器和給藥管。在仍處于麻醉劑的影響下時(shí)，將其置于Mayo限制器內(nèi)。在從麻醉中恢復(fù)過(guò)來(lái)并且在心率和血壓穩(wěn)定后(通常需要約30分鐘)，靜脈內(nèi)給藥內(nèi)毒素(50mg/kg大腸桿菌(E.Coli)和25mg/kg沙門(mén)氏菌(Salmonella))。監(jiān)測(cè)血壓和心率的變化。1小時(shí)后，靜脈內(nèi)給藥本發(fā)明的化合物或載體，然后對(duì)心血管參數(shù)繼續(xù)監(jiān)測(cè)3小時(shí)。將反應(yīng)用恢復(fù)到起始舒張血壓的百分比表示。用學(xué)生t檢驗(yàn)測(cè)定顯著性。
本發(fā)明的化合物在該試驗(yàn)中具有活性。
實(shí)施例17碳酰前列環(huán)素(Carbaprostacyclin)誘導(dǎo)的扭動(dòng)試驗(yàn)用碳酰前列環(huán)素誘導(dǎo)的扭動(dòng)試驗(yàn)來(lái)研究這些化合物的鎮(zhèn)痛特性。將大鼠(100-130g)稱重然后隨機(jī)分到治療組(n＝8)中。以研究主管確定的劑量和給藥體積向各動(dòng)物給藥載體、參考物質(zhì)或試驗(yàn)物質(zhì)。在給藥后的適宜時(shí)間(試驗(yàn)化合物作用的峰值時(shí)間)，給藥碳酰前列環(huán)素(30μg/kg，2ml/kg，腹膜內(nèi))。在給藥碳酰前列環(huán)素后，將大鼠置于單個(gè)的有機(jī)玻璃籠子內(nèi)。從給藥碳酰前列環(huán)素5分鐘后開(kāi)始，對(duì)扭動(dòng)計(jì)數(shù)15分鐘的時(shí)間。扭動(dòng)包括背屈或同時(shí)伴有伸展的腹部肌肉系統(tǒng)的強(qiáng)烈收縮。
組比較用單向方差分析對(duì)治療組和陰性對(duì)照(載體+誘導(dǎo)劑)進(jìn)行比較。用Fisher′s LSD試驗(yàn)進(jìn)行陰性對(duì)照和各治療組之間的成對(duì)比較，如果總的差異沒(méi)有顯著性，進(jìn)行Bonferroni′s調(diào)整。在分析中采用分等級(jí)的數(shù)據(jù)。將陽(yáng)性對(duì)照組與陰性對(duì)照組用Wilcoxon秩和檢驗(yàn)進(jìn)行比較以分析驗(yàn)證。
ID50的估算以公式100*(1-(扭動(dòng)的次數(shù)/載體組的平均扭動(dòng)))來(lái)計(jì)算各動(dòng)物的％抑制。用如下S型模型來(lái)估算ID50％抑制＝100/(1+(ID50/劑量)N)，其中ID50是在劑量響應(yīng)曲線中達(dá)到最大響應(yīng)的一半(50％)時(shí)化合物的劑量，N是曲率參數(shù)。在該模型中，將最大響應(yīng)假定為100％。
雖然參照具體的實(shí)施方案對(duì)本發(fā)明進(jìn)行了描述，但本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，可以進(jìn)行各種改變和等同物的替換而不超出本發(fā)明的實(shí)質(zhì)和范圍。此外，可以進(jìn)行多種改變以使特定的情況、材料、組合物、方法、工藝步驟與本發(fā)明的實(shí)質(zhì)和范圍相適應(yīng)。所有這些改變均包括在所附權(quán)利要求所定義的范圍內(nèi)。
權(quán)利要求
1.具有如下通式的化合物，或其單個(gè)的異構(gòu)體、異構(gòu)體的外消旋或非外消旋混合物或其可藥用鹽或溶劑化物 其中G1選自基團(tuán)a和b； 和 A選自苯基、吡啶基、嘧啶基和噻吩基，所有這些基團(tuán)均任選地被低級(jí)烷基、鹵素、鹵代烷基、烷氧基、氰基、硝基、-SO2R′、-NSO2R′、-SO2NR′R″、-NR′R″或-COR′取代；R′和R″彼此獨(dú)立地是氫或低級(jí)烷基；G2選自由式c、d、e、f、g、h、i和j表示的基團(tuán)； 和 R1和R2在每次出現(xiàn)時(shí)彼此獨(dú)立地選自氫、低級(jí)烷基、鹵素、鹵代烷基、硝基、-NR′R″、-OR′、-SO2R′、-NSO2R′、-COR′、氰基、硝基、未取代的或被鹵素、烷基、氰基或烷氧基取代的苯基；或未取代的或被鹵素、烷基、氰基或烷氧基取代的雜芳基；或者R1和R2如果彼此相鄰，也可以與它們所連接的碳原子一起形成未取代的或被一個(gè)或兩個(gè)選自低級(jí)烷基、鹵素、氰基或低級(jí)烷氧基的取代基取代的芳環(huán)。
2.權(quán)利要求1的化合物，其中A為任選取代的苯基。
3.權(quán)利要求1的化合物，其中G1為式a的基團(tuán)。
4.權(quán)利要求3的化合物，其中G2為式c的基團(tuán)。
5.權(quán)利要求4的化合物，其中A為任選取代的苯基。
6.權(quán)利要求5的化合物，其中的化合物選自2-苯基-5-(5-苯基-苯并呋喃-2-基甲氧基羰基氨基)-嘧啶-4-甲酸，和5-[5-(4-氟-苯基)-苯并呋喃-2-基甲氧基羰基氨基]-2-苯基-嘧啶-4-甲酸。
7.權(quán)利要求4的化合物，其中A為任選取代的噻吩基。
8.權(quán)利要求7的化合物，其中所述化合物是2-苯基-5-(5-噻吩-3-基-苯并呋喃-2-基甲氧基羰基氨基)-嘧啶-4-甲酸。
9.權(quán)利要求3的化合物，其中G2為式d的基團(tuán)。
10.權(quán)利要求9的化合物，其中所述化合物為1-苯基-3-(5-苯基-苯并呋喃-2-基甲氧基羰基氨基)-1H-吡唑-4-甲酸。
11.權(quán)利要求3的化合物，其中G2為選自g、h、i和j的基團(tuán)。
12.權(quán)利要求11的化合物，其中所述化合物為3-(5-苯基-苯并呋喃-2-基甲氧基羰基氨基)-異煙酸。
13.權(quán)利要求1的化合物，其中G1為基團(tuán)b。
14.權(quán)利要求13的化合物，其中G2為基團(tuán)c。
15.權(quán)利要求14的化合物，其中所述化合物是5-(聯(lián)苯-4-基甲氧基羰基氨基)-2-苯基-嘧啶-4-甲酸。
16.一種藥物組合物，其含有與至少一種可藥用載體相混合的治療有效量的權(quán)利要求1至15中任何一項(xiàng)所述的化合物。
17.權(quán)利要求16所述的藥物組合物，用于對(duì)患有可以通過(guò)用IP拮抗劑治療而緩解的疾病的個(gè)體給藥。
18.權(quán)利要求1至15中任何一項(xiàng)所述的式I化合物用于治療和預(yù)防疾病。
19.權(quán)利要求1至15中任何一項(xiàng)所述的式I化合物在生產(chǎn)用于對(duì)患有可以通過(guò)用IP拮抗劑治療而緩解的疾病狀態(tài)的個(gè)體進(jìn)行治療的藥物中的用途。
20.根據(jù)權(quán)利要求19所述的用途，其中的疾病狀態(tài)包括尿道疾病、疼痛、炎癥、呼吸疾病如過(guò)敏和哮喘、水腫形成或低血壓血管疾病。
21.權(quán)利要求1-15中任何一項(xiàng)所述的化合物的制備方法，該方法包括用光氣?；ㄊ?、3、4、5、6、7、8或9的酯 和 其中R是低級(jí)烷基或三甲基硅烷基乙基，并且R1和R2如權(quán)利要求1所定義，然后與通式1的化合物反應(yīng) 其中G1如權(quán)利要求1所定義；然后水解得到通式I的化合物 其中G1和G2如權(quán)利要求1所定義。
22.上文所述的本發(fā)明。
全文摘要
本發(fā)明涉及通式(I)所示的IP受體拮抗劑化合物或其單個(gè)的異構(gòu)體、異構(gòu)體的外消旋或非外消旋混合物或其可藥用鹽或溶劑化物，其中G
文檔編號(hào)A61P11/06GK1494544SQ02805869
公開(kāi)日2004年5月5日 申請(qǐng)日期2002年2月25日 優(yōu)先權(quán)日2001年3月2日
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