專利名稱：藥用活性哌啶衍生物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及用作葡糖基神經(jīng)酰胺合酶抑制劑(GCS；UDP-葡萄糖神經(jīng)酰胺葡糖基轉(zhuǎn)移酶UDP-葡萄糖N-?；拾贝糄-葡糖基轉(zhuǎn)移酶，EC 2.4.1.80)的新的哌啶衍生物，用于它們的制備的方法和它們在醫(yī)學(xué)中的用途，具體地是在治療和預(yù)防由GCS介導(dǎo)的疾病癥狀中的用途?；衔锇l(fā)現(xiàn)了在治療以下疾病中的用途糖脂貯積疾病、與糖脂積聚有關(guān)的疾病、其中糖脂合成異常的癌癥、由使用細胞表面糖脂作為受體的有機體引起的感染性疾病、其中葡糖基神經(jīng)酰胺合成是必需的或者重要的感染性疾病、其中過度的糖脂合成發(fā)生的疾病、神經(jīng)元疾病和神經(jīng)元損傷。還描述了它們的合成，以及含所述化合物的藥用制劑和采用這些化合物治療的方法。
GCS為細胞內(nèi)酶，其催化尿苷二磷酸葡糖和神經(jīng)酰胺成為糖脂、葡糖基神經(jīng)酰胺。GCS在生物學(xué)中的作用目前屬于熱門的基礎(chǔ)和應(yīng)用科學(xué)的課題。例如，許多研究者正在探索GCS在調(diào)節(jié)神經(jīng)酰胺水平中的作用，因為這種分子可誘導(dǎo)程序性細胞死亡(J.Biol.Chem.，2000，Mar 10，275(10)，7138-43)。類似地，正在積極研究GCS在維持膽固醇/糖脂“卵筏”中的作用，卵閥為細胞表面膜的具體通透性和功能性的功能域，它們似乎參與多種信號傳導(dǎo)過程(Nature，1997，Jun 5，387(6633)，56-72)。
GCS也是治療某些人類疾病的靶點。葡糖基神經(jīng)酰胺和結(jié)構(gòu)相關(guān)的糖脂貯積于患有遺傳病的患者的溶酶體中，遺傳病是由必需的糖脂-降解酶之一的突變造成的(例如，高歇氏病，泰-沙二氏病，桑德霍夫氏病，GM1神經(jīng)節(jié)糖苷沉積癥和法布里氏病)。糖脂貯積也作為帶有遺傳性貯積病例如尼-皮二氏病、粘多糖代謝病、粘脂貯積病IV型(Proc.Natl.Acad.Sci.USA，1998，May 26，95(11)，6373-8)和α-甘露糖苷過多癥(Proc.Natl.Acad.Sci.USA，1991，Dec 15，88(24)，11330-4)的某些組織(例如神經(jīng)組織)的次生作用發(fā)生。通過推理已經(jīng)得出結(jié)論，GCS抑制劑可以應(yīng)用于降低染病細胞中糖脂合成的速率以致于只有很少的糖脂被貯積，即一種稱之為底物喪失的治療方法。研究已證實事實上GCS抑制劑可以用于減少在糖脂貯積的細胞和動物模型中觀察到的糖脂聚積(Proc.Natl.Acad.Sci.USA，1999，May 25，96(11)，6388-93；Science，1997，Apr 18，276(5311)，428-31；J.Clin.Invest.，2000，Jun，105(11)，1563-71)。另外，一份最新的臨床試驗報告顯示GCS抑制劑N-丁基脫氧吉瑞霉素(NB-DNJ)可以用于治療患有高歇氏病的人患者(Lancet，2000，Apr 29，355(9214)，1481-5)。在EP-A-0698012中公開了作為GCS抑制劑的亞氨基糖NB-DNJ的用途。EP-A-0536402和EP-A-0698012公開了脫氧半乳糖吉瑞霉素的N-烷基衍生物，例如N-丁基脫氧半乳糖吉瑞霉素(NB-DGJ)，也可以用于治療糖脂貯積疾病。EP-A-0698012也公開了甘露糖(NB-DMJ)、果糖(NB-DFJ)和N-乙?；咸前?NB-NAG)的相應(yīng)N-丁基衍生物作為糖脂生物合成的抑制劑不起作用。
GCS抑制劑在治療人惡性腫瘤中的用途已被提出。腫瘤可以合成異常量的糖脂和/或于正常組織中不存在的糖脂。另外糖脂或者神經(jīng)節(jié)苷脂特別由腫瘤細胞脫落并且釋放到細胞外空間和血流中。脫落了腫瘤糖脂的腫瘤和結(jié)合有神經(jīng)節(jié)苷脂的細胞表面兩者都可以影響腫瘤宿主細胞相互作用，例如細胞-細胞接觸或者粘附(MethodsEnzymol.，2000，312，447-58)、細胞遷移(Mol.Chem.Neuropathol.，1995Feb-Apr，24(2-3)，121-35)、生長因子信號傳導(dǎo)過程(J.Biol.Chem.，2000Nov 3，275(44)，34213-23)、腫瘤刺激的血管形成(Acta.Oncol.，1997，36(4)，383-7)和腫瘤特異性免疫反應(yīng)(J.Immunol.，1999 Oct1，163(7)，3718-26)。所有這些過程均可影響腫瘤產(chǎn)生和進展。已知糖脂尤其是葡糖基神經(jīng)酰胺聚集于廣譜抗藥性(MDR)腫瘤細胞(Anticancer Res.，1998 Jan-Feb，18(1B)，475-80)中，并且用GCS抑制劑體外處理這些細胞可以逆轉(zhuǎn)MDR表型(J.Biol.Chem.，1997，Jan 17，272(3)，1682-7；Br.J.Cancer，1999，Oct，81(3)，423-30)。
細胞表面糖脂也在感染性疾病中起作用，用作結(jié)合病原菌(APMIS，1990，Dec，98(12)，1053-60，綜述)、真菌(Infect.Immun.，1990 Jul，58(7)，2085-90)和病毒(FEBS Lett，1984 May 7，170(1)，15-8)的受體。另外，細胞表面的糖脂通過細菌毒素(Methods Enzymol.，2000，312，459-73)例如霍亂毒素(神經(jīng)節(jié)苷脂GMl)和Vero細胞毒素(globotriaosylceramide GB3)的B亞單位結(jié)合(J.Infect.Dis.，2001，suppl.70-73，183)。
GCS抑制劑的用途也可以適于多種其它的臨床適應(yīng)癥，它們與糖脂合成異常有關(guān)。人主動脈的動脈粥樣硬化病灶比未受影響的主動脈區(qū)域具有更高的神經(jīng)節(jié)苷脂含量并且動脈粥樣硬化患者體內(nèi)的血清神經(jīng)節(jié)苷脂濃度高于正常個體(Lipids，1994，29(1)，1-5)。衍生于患有多囊腎疾病的患者的腎組織含有高水平的葡糖基神經(jīng)酰胺和乳糖基神經(jīng)酰胺(J.Lipid.Res.，1996，Jun，37(6)，1334-44)。糖尿病的動物模型中的腎肥大與糖脂合成增加有關(guān)(J.Clin.Invest.，1993，Mar，91(3)，797-803)。
糖脂代謝也可以在其它的神經(jīng)疾病例如阿爾滋海默氏病和癲癇中起至關(guān)重要的作用。例如，尼-皮二氏病(NPC)患者神經(jīng)元出現(xiàn)阿爾滋海默氏病中所觀察到的形態(tài)學(xué)的纖維纏結(jié)痕跡。
令人感興趣的是，通過淀粉樣β-蛋白結(jié)合的GM1神經(jīng)節(jié)苷脂誘導(dǎo)構(gòu)象變化，這支持纖維狀聚合物的形成，并且這種蛋白的纖維沉積作用是阿爾滋海默氏病的早期癥狀(Yanagisawa等，(1995)，Nat.Med.1，1062-6；Choo-Smith等，(1997)，Biol.Chem.，272，22987-90)。因此，用藥物例如NB-DNJ減少GM1合成能夠抑制在阿爾滋海默氏病中觀察到的纖維化形成。
相反，初步臨床試驗顯示經(jīng)GM1神經(jīng)節(jié)苷脂治療患者似乎可以改善帕金森氏病、休克和脊髓損傷觀察到的神經(jīng)退化進程(Alter，(1998)，Ann.NY Acad.Sci.845，391-4011；Schneider，(1998)，Ann.NY.Acad.Sci.，845，363-73；Geisler，(1998)，Ann.NY.Acad.Sci.，845，374-81)。聯(lián)合給予葡糖基神經(jīng)酰胺合成抑制劑可能提供臨床醫(yī)師對這個治療過程的更大的控制。通過阻斷它們的神經(jīng)糖脂合成，抑制劑像NB-DNJ可限制患者的特異性不協(xié)調(diào)行為。另外，抑制葡糖基神經(jīng)酰胺合成將限制給予的糖脂代謝成為其它的，或許是非生產(chǎn)性的形式。因此，用抑制劑例如NB-DNJ調(diào)節(jié)葡糖基神經(jīng)酰胺合成的能力可以在治療各種神經(jīng)元疾病中是有用的。
也顯示亞氨基糖能夠可逆性誘導(dǎo)男性不育，因此可用作男性避孕藥。
在Anal.Biochem.，2000，284(1)，136-142中公開了作為分析參比物的化合物3，4，5-哌啶三醇，1-丁基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)，對這個化合物未公開或者提示有藥物用途。
WO 01/10429(在該申請的優(yōu)先權(quán)日后公開)公開了化合物N-壬基-阿托伐他汀(3，4，5-哌啶三醇，1-壬基-2-(羥基甲基)-，(2S，3S，4R，5S))及其在治療病毒感染中的用途。
Tet.Lett.，1990，31(47)6777-80公開了化合物3，4，5-哌啶三醇，1-苯基甲基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)作為在合成3，4，5-哌啶三醇，1-苯基甲基-2-(羥基甲基)-，(2R，3R，4R，5S)中少量的副產(chǎn)物，對這個化合物未公開或者提示有藥物用途?；衔镞哙ぃ?-苯基甲基-3，4，5-三(苯基甲氧基)-2-[(苯基甲氧基)-甲基]-，(2S，3R，4R，5S)和哌啶，1-苯基甲基-3，4，5-三(乙酰氧基)-2-[(乙酰氧基)-甲基]-，(2S，3R，4R，5S)作為在合成相應(yīng)的(2R，3R，4R，5S)化合物中得到的副產(chǎn)物也被公開。
Tetrahedron，1997，53(9)，3407-16公開了化合物哌啶，1-苯基甲基-3，4，5-二(乙酰氧基)-5-(苯基甲氧基)-2-[(苯基甲氧基)-甲基]-，(2S，3S，4R，5S)和哌啶，1-甲基-3，4，5-二(乙酰氧基)-5-(苯基甲氧基)-2-[(苯基甲氧基)-甲基]，(2S，3S，4R，5S)作為在合成相應(yīng)的(2R，3S，4R，5S)化合物中得到的副產(chǎn)物。
Bioorganic and Medicinal Chemistry，1996，4(11)，1857-65公開了化合物哌啶，1-苯基甲基-3，4-二(苯基甲氧基)-5-(苯甲酰氧基)-2-[(苯基甲氧基)-甲基]-，(2S，3R，4R，5S)作為合成3，4，5-哌啶三醇，2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)的中間體。
給出GCS在廣泛的基礎(chǔ)和應(yīng)用科學(xué)方面的重要性，開發(fā)提供調(diào)節(jié)這種酶的功能的方法的新的工具是必要的。迄今，我們已合成了許多用于抑制GCS的催化活性的新化合物。
本發(fā)明提供式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或者前藥 其中R為任選由C3-7環(huán)烷基取代和任選被-O-間隔的C1-16直鏈或支鏈烷基，所述氧與環(huán)氮至少被兩個碳原子分開，或者C1-10烷基芳基，其中芳基為苯基、吡啶基、噻吩基或者呋喃基，其中苯基由一個或者更多個選自以下的取代基任選取代，包括F、Cl、Br、CF3、OCF3、OR1和C1-6直鏈或支鏈烷基；和R1為氫，或C1-6直鏈或支鏈烷基；條件是化合物不是a)3，4，5-哌啶三醇，1-丁基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)；b)3，4，5-哌啶三醇，1-苯基甲基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)；或c)3，4，5-哌啶三醇，1-壬基-2-(羥基甲基)-，(2S，3S，4R，5S)。
3位的羥基可以以R或者S構(gòu)型存在。3位的羥基優(yōu)選以R構(gòu)型存在，即式(I)化合物具有立體化學(xué)(2S，3R，4R，5S)。
R優(yōu)選為C1-16直鏈或支鏈的烷基或者C1-10烷基苯基，其中苯基由一個或者更多個選自以下的取代基任選取代，包括F、Cl、Br、CF3、OCF3、OR1和C1-6直鏈或支鏈的烷基。R更優(yōu)選為C1-16直鏈或支鏈烷基。R甚至更優(yōu)選為C3-10直鏈烷基，尤其是C4-7直鏈烷基。
用于本發(fā)明方法的化合物優(yōu)選具有低于800，更優(yōu)選低于600的分子量。
可被提及的本發(fā)明的具體化合物包括如下3，4，5-哌啶三醇，1-丙基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)；3，4，5-哌啶三醇，1-戊基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)；3，4，5-哌啶三醇，1-庚基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)；3，4，5-哌啶三醇，1-丁基-2-(羥基甲基)-，(2S，3S，4R，5S)；3，4，5-哌啶三醇，1-壬基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)；3，4，5-哌啶三醇，1-(1-乙基)丙基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)；3，4，5-哌啶三醇，1-(3-甲基)丁基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)；3，4，5-哌啶三醇，1-(2-苯基)乙基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)；3，4，5-哌啶三醇，1-(3-苯基)丙基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)；3，4，5-哌啶三醇，1-(1-乙基)己基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)；3，4，5-哌啶三醇，1-(2-乙基)丁基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)；3，4，5-哌啶三醇，1-[(2R)-(2-甲基-2-苯基)乙基]-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)；3，4，5-哌啶三醇，1-[(2S)-(2-甲基-2-苯基)乙基]-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)；及其藥學(xué)上可接受的鹽和前藥。
特別優(yōu)選的化合物為3，4，5-哌啶三醇，1-戊基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)及其藥學(xué)上可接受的鹽。
可被提及的一組特別的本發(fā)明化合物為式(Ia)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽 式(Ia)
其中R為C1-16直鏈或支鏈的烷基或者C1-10烷基芳基，其中芳基為苯基、吡啶基、噻吩基或者呋喃基，其中苯基由一個或者更多個選自以下的取代基任選取代，包括F、Cl、Br、CF3、OCF3、OR1和C1-6直鏈或支鏈烷基；和R1為氫或者C1-6直鏈或支鏈烷基；條件是化合物不為a)3，4，5-哌啶三醇，1-丁基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)；b)3，4，5-哌啶三醇，1-苯基甲基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)；或c)3，4，5-哌啶三醇，1-壬基-2-(羥基甲基)-，(2S，3S，4R，5S)。
如在此描述的那樣，本發(fā)明的化合物可以用于抑制GCS。因此，在第二方面，本發(fā)明提供式(I)化合物在醫(yī)療中的用途，但沒有條件a)和b)。除以上提及的那些，用于本發(fā)明這個方面的具體化合物包括化合物3，4，5-哌啶三醇，1-丁基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)。
合適地，式(I)化合物的藥學(xué)上可接受的鹽包括(但不限于)與無機酸形成的鹽，例如鹽酸鹽、硫酸鹽、磷酸鹽、磷酸氫鹽、氫溴酸鹽和硝酸鹽，或者與有機酸形成的鹽，例如蘋果酸鹽、馬來酸鹽、富馬酸鹽、酒石酸鹽、琥珀酸鹽、枸櫞酸鹽、乙酸鹽、乳酸鹽、甲磺酸鹽、對-甲苯磺酸鹽、雙羥萘酸鹽、水楊酸鹽和硬脂酸鹽。
式(I)化合物的合適的前藥包括(但不限于)藥學(xué)上可接受的酯例如C1-6烷基酯。
本發(fā)明的一些化合物可以自溶劑例如含水溶劑或者有機溶劑中結(jié)晶或者重結(jié)晶。在這些情況下，可以形成溶劑合物。本發(fā)明在其范圍內(nèi)包括化學(xué)計量的溶劑合物，包括水合物以及含可變化量的水的化合物，后者通過諸如冷凍干燥的方法產(chǎn)生。
一些式(I)化合物可以以光學(xué)異構(gòu)體的形式存在，例如非對映體和所有比例的異構(gòu)體的混合物存在，例如外消旋混合物。本發(fā)明包括所有這些形式，尤其是純異構(gòu)體形式。通過常規(guī)方法可以把不同的異構(gòu)體形式彼此分離或者拆分開來，或者通過常規(guī)合成方法或者立體特異性或不對稱合成可以得到任何給定的異構(gòu)體。
由于式(I)化合物打算用于藥用組合物，應(yīng)易于理解的是它們每個優(yōu)選以基本純的形式提供，例如至少60％純，更適合至少75％純且優(yōu)選至少85％純，尤其是至少98％純(％為重量比重量基礎(chǔ))。不純制備的化合物可以用于制備用于藥用組合物的更純的形式；這些不太純制備的化合物應(yīng)含至少1％，更合適至少5％且優(yōu)選10-59％的式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的衍生物。
在此使用的術(shù)語“烷基”無論其自身或者作為更大的基團例如“烷基芳基”的部分包括直和分支鏈基團。術(shù)語烷基也包括那些其中一個或者更多個氫原子被氟置換的基團。
通過本領(lǐng)域認可的方法，從已知的或者市場上可以得到的原料，可以制備式(I)的化合物。如果原料無法從商業(yè)來源獲得，在此描述它們的合成，或者通過本領(lǐng)域已知的方法可以制備它們。
具體地，通過以下方法可以制備式(I)的化合物，方法包括(a)使式(II)化合物 與NaBH3CN和式R2CHO的醛在乙酸-甲醇中反應(yīng)，或者與NaBH(OAc)3和式R2CHO的醛在溶劑例如二氯甲烷中反應(yīng)；其中R2為由C3-7環(huán)烷基任選取代且由-O-任選間隔的C1-15直和分支鏈烷基，所述氧被至少一個碳原子與CHO部分分開，或者其中芳基如在式(I)中定義的C0-9烷基芳基；或者(b)使式(III)化合物脫保護
其中R如式(I)中定義，并且P(可以相同或者不同)為羥基保護基團，例如芐基(Bn)。當P為CH2Ph時，在合適的溶劑例如醇如乙醇中，于氫氣和催化劑例如PdCl2或者披鈀炭存在下進行脫保護。應(yīng)該理解，當P為CH2Ph且R為CH2Ph時，在這些條件下也可以除去R基團以得到式(II)化合物，而采用以上的方法a)優(yōu)選產(chǎn)生其中R為CH2Ph的式(I)化合物。
式(II)化合物是已知的，參見例如Carbohydr.Res.，1993，246，377-81(2S3R4R5S)和Tet.Lett.，1997，38(45)，8009-12(2S3S4R5S)。
在無溶劑或在溶劑例如四氫呋喃中，通過使式(IV)化合物， 其中L(它可以是相同或者不同的)為離去基團，例如甲磺?；?，并且P如在式(III)中定義，與式RNH2的胺反應(yīng)，其中R如在式(I)中定義，可以制備式(III)化合物。
化合物(IVa)，其中L為甲磺酰基且P為芐基，為已知化合物V.S.Rao等，Can.J.Chem.，(1981)，59(2)，333-8；P.A.Fowler等，Carbohydr.Res.，(1993)，246，377-81。
在堿例如吡啶存在下，通過使2，3，4，6-四-O-芐基-D-半乳糖醇與甲磺酰氯反應(yīng)，可以制備化合物(IVb)，其中L為甲磺?；襊為芐基。
在此描述的任何新的中間體化合物也落入本發(fā)明的范圍內(nèi)。
因此，本發(fā)明的另一方面提供如上定義的式(III)化合物，條件是化合物不為i)哌啶，1-苯基甲基-3，4，5-三(苯基甲氧基)-2-[(苯基甲氧基)甲基]，(2S，3R，4R，5S)；ii)哌啶，1-苯基甲基-3，4，5-三(乙酰氧基)-2-[(乙酰氧基)-甲基]，(2S，3R，4R，5S)；iii)哌啶，1-苯基甲基-3，4，5-二(乙酰氧基)-5-(苯基甲氧基)-2-[(苯基甲氧基)-甲基]，(2S，3S，4R，5S)；或者iv)哌啶，1-甲基-3，4，5-二(乙酰氧基)-5-(苯基甲氧基)-2-[(苯基甲氧基)-甲基]，(2S，3S，4R，5S)。
在合成式(I)化合物期間，可以保護中間體化合物中的不穩(wěn)定的官能團，例如羥基、羧基和氨基。在例如Protective Groups in OrganicChemistry，T.W.Greene and P.G.M.Wuts，(Wiley-Interscience，NewYork，第2版，1991中給出了其中可以保護各種不穩(wěn)定的官能團的方法和裂解得到的被保護的衍生物的方法的綜合討論。
在實施例中可發(fā)現(xiàn)制備式(I)化合物的其它細節(jié)。
式(I)化合物可以單獨制備或者作為含至少2個，例如5-500個化合物且更優(yōu)選10-100個式(I)化合物的化合物庫來制備。通過組合的“裂分”和“混合”方法或者通過采用液相或固相化學(xué)的多平行合成，通過本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法，可以制備式(I)化合物的庫。
因此，本發(fā)明的另一方面提供含至少2個式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽的化合物庫。
可以以通過本領(lǐng)域熟知的常規(guī)方法使式(I)化合物(“活性成分”)與標準藥用載體或者稀釋劑組合制備的常規(guī)劑型給予藥用有效的式(I)化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽。這些方法可以包括使成分混合、制粒和壓制或者溶解以適合于要求的制劑。
本發(fā)明另一方面提供含與一種或者更多種藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑一起的一種或者更多種式(I)化合物(但不包括a)-b))的藥用制劑。
本發(fā)明的藥用組合物可以配制用于通過任何途徑給藥，并且包括那些以適于口服、局部或者非腸道給予包括人在內(nèi)的哺乳動物的形式存在的組合物。
藥用制劑可以適于任何合適的途徑給藥，例如通過口服(包括頰或者舌下)、直腸、鼻、局部(包括頰、舌下或者經(jīng)皮)、陰道或者非腸道(包括皮下、肌內(nèi)、靜脈或者真皮內(nèi))途徑給予。通過藥學(xué)領(lǐng)域任何已知的方法，例如使活性成分與載體或者賦形劑混合在一起，可以制備這樣的制劑。
適于口服給藥的藥用制劑可以作為分散單位例如膠囊劑或片劑、散劑或顆粒劑、在含水或者不含水液體中的溶液劑或混懸劑、可食用泡沫劑或發(fā)泡劑(whips)，或水包油液體乳劑或油包水液體乳劑存在。
適于經(jīng)皮給藥的藥用制劑可作為打算與接受者的表皮長時間保持緊密接觸的分散貼劑存在。例如，如通常在Pharmaceutical Research，3(6)，318，(1986)中描述的，活性成分可以通過離子導(dǎo)入法自貼劑傳遞。
適于局部給藥的藥用制劑可以配制為軟膏劑、霜劑、混懸劑、洗劑、散劑、溶液劑、糊劑、凝膠劑、浸漬劑、噴霧劑、氣溶膠或者油劑并且可以包含合適的常規(guī)添加劑，例如防腐劑、輔助藥物滲透的溶劑和在軟膏劑和霜劑中的軟化劑。
為應(yīng)用于眼睛或者其它的外部組織，例如口腔和皮膚，制劑優(yōu)選作為局部軟膏劑或者霜劑運用。當以軟膏劑配制時，活性成分可以與石蠟或者水混溶的軟膏劑基質(zhì)一起使用?；蛘撸钚猿煞挚梢砸院兴退獎┗|(zhì)或者油包水基質(zhì)的霜劑配制。
適于眼部局部給藥的藥用制劑包括滴眼劑，其中活性成分溶解或者懸浮于合適的載體尤其是含水溶劑中。
適于口腔局部給藥的藥用制劑包括錠劑、軟錠劑和漱口劑。
適于直腸給藥的藥用制劑可以作為栓劑或者灌腸劑存在。
適于鼻給藥的其中載體為固體的藥用制劑包括具有例如在20-500微米范圍內(nèi)的粒子大小的粗散末，它以鼻吸法的方式給藥，即通過把緊密貼住鼻子的裝有粉末的容器經(jīng)鼻通道迅速吸入。其中載體為液體的合適的制劑，作為鼻噴霧劑或者作為鼻滴劑給藥，包括活性成分的含水或者油溶液。
適于經(jīng)吸入給藥的藥用制劑包括細分的顆粒粉末或者霧劑，它們可以通過各種類型的可計量劑量的加壓氣溶膠、拋射劑或者吸入劑來生成。
適于陰道給藥的藥用制劑可以作為陰道栓劑、棉塞劑、霜劑、凝膠劑、糊劑、泡沫劑或者噴霧制劑存在。
適于非腸道給藥的藥用制劑包括含水和非水滅菌注射溶液劑，后者可以含抗氧化劑、緩沖劑、殺菌劑和溶質(zhì)，它們使制劑變得與打算給予的接受者的血液等滲，含水和非水滅菌混懸劑可含懸浮劑和增稠劑。制劑可以以單位劑量或者多劑量容器存在，例如密封的安瓿和小瓶，并且可以在冷凍干燥(凍干)條件下貯存，臨用前僅需加入滅菌液體載體，例如注射用水。自滅菌粉末、顆粒和片劑可以制備臨時用的注射溶液劑和混懸劑。
應(yīng)理解的是除以上具體提及的成分外，制劑也可以包括本領(lǐng)域中的其它的常規(guī)視為研究中的制劑類型的試劑，例如那些適于口服給藥的制劑可以包括矯味劑。
本發(fā)明的藥用制劑優(yōu)選適于口服給藥。
制劑也可以含適配的常規(guī)載體，例如霜劑或者軟膏劑基質(zhì)和乙醇或者用于洗劑的油醇。這樣的載體可以作為制劑的約1％至最多98％存在。它們更通常占制劑的約80％。
口服給藥的片劑和膠囊劑可以以單位劑量形式存在，并且可以含常規(guī)賦形劑例如粘合劑，如糖漿、阿拉伯膠、明膠、山梨醇、黃蓍膠或者聚乙烯吡咯烷酮，填充劑例如乳糖、蔗糖、玉米淀粉、磷酸鈣、山梨醇或者甘氨酸。壓片潤滑劑例如硬脂酸鎂、滑石粉、聚乙二醇或者硅膠，崩解劑例如馬鈴薯淀粉，或者可接受的潤濕劑例如十二烷基硫酸鈉。按照正常藥學(xué)實踐中熟知的方法可以將片劑包衣?？诜后w制劑可以以例如含水或者油混懸劑、溶液劑、乳劑、糖漿劑或者酏劑的形式存在，或者可以作為臨用前用水或者其它合適的介質(zhì)重構(gòu)成的干燥產(chǎn)品存在。這樣的液體制劑可以含常規(guī)添加劑，例如混懸劑，例如山梨醇、甲基纖維素、葡萄糖糖漿、明膠、羥乙基纖維素、羧甲基纖維素、硬脂酸鋁凝膠或者氫化食用脂肪、乳化劑，例如卵磷脂、山梨醇單油酸酯，或阿拉伯膠、非水介質(zhì)(其可包括食用油)，例如杏仁油、油狀酯例如甘油、丙二醇或者乙醇；防腐劑，例如對-羥基苯甲酸甲酯或丙酯或者抗壞血酸，并且，如果需要，可以含常規(guī)矯味劑或者著色劑。
栓劑應(yīng)含有常規(guī)栓劑基質(zhì)，例如可可豆酯或者其它的甘油酯。
對非腸道給藥，采用化合物和滅菌介質(zhì)可制備液體單位劑型，水為優(yōu)選。依所采用的介質(zhì)和濃度而定，化合物可以懸浮或者溶解在介質(zhì)中。在制備溶液劑時，化合物可以溶解在注射用水中并且填充到合適的小瓶或者安瓿之前過濾滅菌，接著密封。
有利地，試劑例如局部麻醉劑、防腐劑和緩沖劑可以溶于介質(zhì)中。為增強穩(wěn)定性，填充到小瓶并真空除去水后，可以冷凍組合物。然后將凍干粉末密封在小瓶中，臨用前同時提供注射用水可使之重構(gòu)成為液體?；旧弦韵嗤姆椒ㄖ苽浞悄c道混懸劑，除了把化合物懸浮于介質(zhì)中以替代溶解并且滅菌不能用過濾進行。懸浮于滅菌介質(zhì)前，通過暴露于環(huán)氧乙烷可以使化合物滅菌。有利地，在組合物中可包含表面活性劑或者潤濕劑以便利于化合物的均勻分布。
依給藥方法而定，組合物可以含0.1％重量，優(yōu)選10-60％重量的活性物質(zhì)。
藥用制劑可以以每劑含預(yù)先確定量的活性成分的單位劑型存在。依所治療的病癥、給藥途徑和患者的年齡、體重和病情而定，這樣的單位可含例如最多可達1g，合適地10mg-600mg，優(yōu)選50mg-300mg且更優(yōu)選50mg-150mg。如在此說明的那樣，優(yōu)選的單位劑量制劑為那些含每天劑量或者亞劑量的，或它們的合適的部分的活性成分的制劑。
本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)意識到根據(jù)受治療疾病的性質(zhì)和程度、給藥的形式、途徑和部位，和受治療的具體哺乳動物，可以確定式(I)化合物的各自劑量的最佳定量和給藥間隔，并且通過常規(guī)技術(shù)可以確定這樣的最佳條件。本領(lǐng)域技術(shù)人員也應(yīng)意識到可以由本領(lǐng)域技術(shù)人員采用常規(guī)療程測定試驗來確定最佳療程，即在指定的天數(shù)內(nèi)每天給予式(I)化合物的劑量次數(shù)。
當以如上提及的劑量范圍給予式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的衍生物時，未表明具有毒理學(xué)作用。
本發(fā)明的化合物是有用的，其中它們能夠抑制葡糖基神經(jīng)酰胺合酶。因此，本發(fā)明的化合物可用于治療各種糖脂貯積疾病，例如高歇氏病、桑德霍夫氏病、泰-沙二氏病、法布里氏病、GM1神經(jīng)節(jié)糖苷沉積癥等。另外，也發(fā)現(xiàn)本發(fā)明的化合物可以用于治療其中發(fā)生糖脂聚集的癥狀，例如尼-皮二氏病、粘多糖貯積病(MPS I、MPSIIIA、MPS IIIB、MPS VI和MPS VII)、粘脂貯積病IV型和α-甘露糖苷過多癥。
本發(fā)明的化合物一般也用于治療其中糖脂合成異常的癌癥，例如腦癌、神經(jīng)母細胞瘤、惡性黑素瘤、腎腺瘤和廣譜抗藥性癌癥。
本發(fā)明的化合物也可用于治療傳染性有機體或者經(jīng)傳染性有機體產(chǎn)生的毒素引起的疾病，所述有機體采用細胞表面的糖脂作為傳染性有機體的受體。
本發(fā)明的化合物也可用于治療傳染性有機體引起的疾病，對所述有機體而言，葡糖基神經(jīng)酰胺的合成是必需的或者重要的過程的，例如病原性真菌新型隱球菌。
本發(fā)明的化合物也可用于治療其中發(fā)生過度糖脂合成的疾病，例如(但不限于)動脈粥樣硬化、多囊腎疾病和糖尿病腎肥大。
本發(fā)明的化合物也可用于治療神經(jīng)元疾病，例如阿爾滋海默氏病和癲癇，和神經(jīng)元退化性疾病例如帕金森氏病。
本發(fā)明的化合物也可用于治療神經(jīng)損傷例如脊髓損傷或者中風(fēng)。
本發(fā)明的化合物也可用于治療肥胖癥。
因此，在另外的方面，本發(fā)明提供(i)式(I)化合物(但不包括條件a)-c))作為葡糖基神經(jīng)酰胺合酶抑制劑的用途。
(ii)式(I)化合物(但不包括條件a)-c))在制備用于治療糖脂貯積疾病的藥物中的用途?？芍委煹奶侵A積疾病的實例包括(但不限于)高歇氏病、桑德霍夫氏病、泰-沙二氏病、法布里氏病或者GM1神經(jīng)節(jié)糖苷沉積癥。
(iii)式(I)化合物(但不包括條件a)-c))在制備用于治療尼-皮二氏病A和C型的藥物中的用途。
(iv)式(I)化合物(但不包括條件a)-c))在制備用于治療I型粘多糖貯積病、IIID型粘多糖貯積病、IIIA型粘多糖貯積病、VI型粘多糖貯積病或者VII型粘多糖貯積病的藥物中的用途。
(v)式(I)化合物(但不包括條件a)-c))在制備用于治療α-甘露糖苷過多癥或者IV型粘脂貯積病的藥物中的用途。
(vi)式(I)化合物(但不包括條件a)-c))在制備用于治療其中糖脂合成異常的癌癥的藥物中的用途，癌癥包括(但不限于)神經(jīng)癌癥包括神經(jīng)母細胞瘤、腦癌、腎腺瘤、惡性黑素瘤、多發(fā)性骨髓瘤和廣譜抗藥性癌癥。
(vii)式(I)化合物(但不包括條件a)-c))在制備用于治療阿爾滋海默氏病、癲癇或者中風(fēng)的藥物中的用途。
(viii)式(I)化合物(但不包括條件a)-c))在制備用于治療帕金森氏病的藥物中的用途。
(ix)式(I)化合物(但不包括條件a)-c))在制備用于治療脊髓損傷的藥物中的用途。
(x)式(I)化合物(但不包括條件a)-c))在制備用于治療由傳染性微生物或所述生物產(chǎn)生的毒素引起的疾病的藥物中的用途，所述傳染性微生物采用細胞表面的糖脂作為所述生物自身的受體。
(xi)式(I)化合物(但不包括條件a)-c))在制備用于治療由傳染性生物引起的疾病的藥物中的用途，對所述傳染性生物而言，葡糖基神經(jīng)酰胺的合成是必需的或者重要的過程，例如(但不限于)與病原性真菌新型隱球菌的感染有關(guān)的病變。
(xii)式(I)化合物(但不包括條件a)-c))在制備用于治療與異常糖脂合成有關(guān)的疾病，包括(但不限于)多囊腎疾病、糖尿病腎肥大和動脈粥樣硬化的藥物中的用途。
(xiii)式(I)化合物(但不包括條件a)-c))在制備用于通過給予神經(jīng)節(jié)糖苷例如GM1神經(jīng)節(jié)糖苷可以治療的病癥的藥物中的用途。這樣疾病的實例包括帕金森癥、中風(fēng)和脊髓損傷。
(xiv)式(I)化合物(但不包括條件a)-c))在制備用于使雄性哺乳動物可逆性不育的藥物中的用途。
(xv)式(I)化合物(但不包括條件a)-c))在制備用于治療肥胖癥的藥物(例如作為食欲抑制劑)中的用途。
(xvi)一種用于治療糖脂貯積疾病，例如高歇氏病、桑德霍夫氏病、泰-沙二氏病或者GM1神經(jīng)節(jié)糖苷沉積癥的方法，方法包括給予患者有效量的式(I)化合物(但不包括條件a)-c))的步驟。
(xvii)一種用于治療尼-皮二氏病A和C型的方法，方法包括給予患者有效量的式(I)化合物(但不包括條件a)-c))的步驟。
(xviii)一種用于治療I型粘多糖貯積病、IIID型粘多糖貯積病、IIIA型粘多糖貯積病、VI型粘多糖貯積病或者VII型粘多糖貯積病的方法，方法包括給予患者有效量的式(I)化合物(但不包括條件a)-c))的步驟。
(xvix)一種用于治療α-甘露糖苷過多癥或者IV型粘脂貯積病的方法，方法包括給予患者有效量的式(I)化合物(但不包括條件a)-c))的步驟。
(xx)一種用于治療其中糖脂合成異常的癌癥的方法，癌癥包括(但不限于)神經(jīng)癌癥，包括神經(jīng)母細胞瘤、腦癌、腎腺瘤、惡性黑素瘤、多發(fā)性骨髓瘤和廣譜抗藥性癌癥，方法包括給予患者有效量的式(I)化合物(但不包括條件a)-c))的步驟。
(xxi)一種用于治療阿爾滋海默氏病、癲癇或者中風(fēng)的方法，方法包括給予患者有效量的式(I)化合物(但不包括條件a)-c))的步驟。
(xxii)一種用于治療帕金森氏病的方法，方法包括給予患者有效量的式(I)化合物(但不包括條件a)-c))的步驟。
(xxiii)一種用于治療脊髓損傷的方法，方法包括給予患者有效量的式(I)化合物(但不包括條件a)-c))的步驟。
(xxiv)一種用于治療由傳染性微生物或所述生物產(chǎn)生的毒素引起的疾病的方法，所述傳染性微生物利用細胞表面的糖脂作為所述生物自身的受體，該方法包括給予患者有效量的式(I)化合物(但不包括條件a)-c))的步驟。
(xxv)一種用于治療由傳染性生物引起的疾病的方法，對所述傳染性生物而言，葡糖基神經(jīng)酰胺的合成是必需的或者重要的過程，例如(但不限于)與病原性真菌新型隱球菌的感染有關(guān)的病變，方法包括給予患者有效量的式(I)化合物(但不包括條件a)-c))的步驟。
(xxvi)一種用于治療與異常糖脂合成有關(guān)的疾病包括(但不限于)多囊腎疾病、糖尿病腎肥大和動脈粥樣硬化的方法，方法包括給予患者有效量的式(I)化合物(但不包括條件a)-c))的步驟。
(xxvii)一種用于治療通過給予神經(jīng)節(jié)糖苷例如GM1神經(jīng)節(jié)糖苷可以治療的病癥的方法，方法包括給予患者有效量的式(I)化合物(但不包括條件a)-c))的步驟。這樣的病癥的實例為帕金森氏病、中風(fēng)和脊髓損傷。
(xxviii)一種用于使雄性哺乳動物可逆性不育的方法，方法包括給予所述雄性哺乳動物有效量的式(I)化合物(但不包括條件a)-c))的步驟。
(xxix)一種用于治療肥胖癥的方法，方法包括給予患者有效量的式(I)化合物(但不包括條件a)-c))的步驟。
本發(fā)明也提供式(I)化合物(但不包括條件a)-c))用于治療以上提及的疾病和病癥的用途。


圖1顯示哺乳動物細胞內(nèi)糖脂代謝的代表性途徑。經(jīng)葡糖基神經(jīng)酰胺合酶催化的反應(yīng)，尿苷-二磷酸葡糖與神經(jīng)酰胺裝配成為葡糖基神經(jīng)酰胺被顯示。導(dǎo)致人糖脂貯積疾病的酶途徑以及經(jīng)N-丁基脫氧吉瑞霉素(NB-DNJ)抑制的葡糖基神經(jīng)酰胺合酶反應(yīng)也被表示?？s寫UDP-Glc，尿苷-二磷酸葡糖；Cer，神經(jīng)酰胺；Sial，唾液酸；Gal，半乳糖；GalNAc，N-乙?；肴樘前?；Glc，葡萄糖；和圖2顯示(a)自用50μM實施例2化合物(1)處理7天的MCF-7乳腺癌細胞提取的非極性類脂組分的薄層層析法(TLC)色譜圖，MCF-7乳腺癌細胞(2)和(3)表示葡糖基神經(jīng)酰胺標準物；并且(b)表示相對于(1)代表性實施例2化合物處理的樣品和(2)未處理空白對照組背景，對TLC色譜圖的葡糖基神經(jīng)酰胺譜帶強度的測量。
所有公開包括(但不限于)在這個說明書中引用的專利和專利申請，在此通過引用結(jié)合到本文中，就好象每一各自的公開通過充分概述專門地和獨立地指明在此通過引用結(jié)合到本文中。
現(xiàn)參照以下實施例描述本發(fā)明，實施例僅僅作為舉例說明并不視為對本發(fā)明的范圍的限制。
實施例1 3，4，5-哌啶三醇，1-丙基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)a)2，3，4，6-四-O-芐基-1，5-二-O-甲磺?；?D-葡萄糖醇 將2，3，4，6-四-O-芐基-D-葡萄糖醇(glucitol)(45g)溶于吡啶(200ml)中并在0℃下于30分鐘內(nèi)加入到甲磺酰氯(15ml)在吡啶(100ml)中的溶液中。把澄明的溶液在4℃下貯存過夜，之后TLC分析顯示反應(yīng)完成。將反應(yīng)混合物在乙酸乙酯和水/冰之間分配。先后用5％鹽酸和飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌有機部分，干燥(Na2SO4)并濃縮為黃/橙色油。將油與甲苯共沸并直接用于下一步。
b)哌啶，1-丙基-3，4，5-三(苯基甲氧基)-2-[(苯基-甲氧基)甲基]，(2S，3R，4R，5S) 將粗品2，3，4，6-四-O-芐基-1，5-二-O-甲磺?；?D-葡萄糖醇(988mg)溶于正丙胺(10ml)中并在55℃下攪拌4天。TLC分析表明反應(yīng)已經(jīng)進行完全。濃縮反應(yīng)混合物并經(jīng)快速層析法(0→16％乙酸乙酯/石油醚的梯度洗脫)純化生成的粗品油，得到哌啶，1-丙基-3，4，5-三(苯基甲氧基)-2-[(苯基甲氧基)-甲基]，(2S，3R，4R，5S)(610mg，73％)。1H NMR(CDCl3)δ□0.9(3H，t)，1.4(2H，m)，2.45(2H，m)，2.6(1H，m)，2.8(1H，dd，J＝5，11Hz)，3.3(1H，m)，3.5(2H，m)，3.6(2H，m)，3.7(1H，dd)，4.4-4.8(8H，m，OCH2Ph)，7.2-7.4(20H，m，ArH)。
c)3，4，5-哌啶三醇，1-丙基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S) 將哌啶，1-丙基-3，4，5-三(苯基甲氧基)-2-[(苯基甲氧基)-甲基]，(2S，3R，4R，5S)(610mg)溶于MeOH(10ml)中并在氫氣氛下于PdCl2(300mg)存在下攪拌過夜。TLC表明反應(yīng)完成。通過硅藻土過濾反應(yīng)混合物(隨后甲醇/水洗滌)，濃縮濾液。把溶液用水(10ml)稀釋并緩慢加入到已經(jīng)用鹽酸預(yù)先洗滌的5gDowex 50X4-200樹脂上。將樹脂用水洗滌，然后用1∶7濃氨水∶水的混合液洗脫。濃縮產(chǎn)物部分，得到為膠質(zhì)固體的3，4，5-哌啶三醇，1-丙基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)(200 mg，90％)。1H NMR(D2O)δ 0.75(3H，t)，1.35(2H，m)，2.45(3H，m)，2.75(1H，dd，J＝5，12.5Hz)，3.0(1H，dd，J＝4，9Hz)，3.3(1H，t)，3.45(1H，m)，3.6(1H，dd，J＝5，10Hz)，3.7(2H，m)。
實施例2 3，4，5-哌啶三醇，1-丁基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)a)哌啶，1-丁基-3，4，5-三(苯基甲氧基)-2-[(苯基甲氧基)-甲基]，(2S，3R，4R，5S) 將粗品2，3，4，6-四-O-芐基-1，5-二-O-甲磺?；?D-葡萄糖醇(實施例1a)，30g)溶于正丁胺(200ml)中并在50℃下攪拌4天。TLC分析表明反應(yīng)已經(jīng)進行完全。濃縮反應(yīng)混合物并經(jīng)快速層析法(0→16％乙酸乙酯/石油醚的梯度洗脫)純化生成的粗品油，得到哌啶，1-丁基-3，4，5-三(苯基甲氧基)-2-[(苯基甲氧基)-甲基]，(2S，3R，4R，5S)(23g，90％)。1HNMR(CDCl3)δ□0.9(3H，t)，1.2(2H，m)，1.4(2H，m)，2.5(2H，m)，2.7(1H，m)，2.9(1H，dd，J＝6，12Hz)，3.4(1H，m)，3.5(1H，AB四重峰J＝10Hz)，3.55(1H，m)，3.65(1H，m)，3.7(1H，dd，J＝2，13Hz)，3.8(1H，dd，J＝6，10Hz)，4.4-4.9(8H，m，OCH2Ph)，7.2-7.4(20H，m，ArH)。
b)3，4，5-哌啶三醇，1-丁基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S) 將哌啶，1-丁基-3，4，5-三(苯基甲氧基)-2-[(苯基甲氧基)-甲基]，(2S，3R，4R，5S)(15g)溶于MeOH(300ml)中并在氫氣氛下于PdCl2(5g)存在下攪拌過夜。TLC表明反應(yīng)完成。通過硅藻土過濾反應(yīng)混合物(隨后甲醇/水洗滌)并把濾液濃縮為大約50ml。把溶液緩慢加入到已經(jīng)用鹽酸預(yù)先洗滌的70g Dowex 50X12-200樹脂上。將樹脂用水洗滌，然后用1∶7濃氨水∶水的混合液洗脫。濃縮產(chǎn)物部分，得到為無色油的3，4，5-哌啶三醇，1-丁基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)(4.8g，85％)。1H NMR(D2O)δ0.90(3H，t)，131(2H，m)，1.49(2H，m)，2.53(1H，dd)，2.63(1H，ddd)，2.72(1H，ddd)，2.87(1H，dd)，3.14(1H，q)，3.44(1H，t)，3.61(1H，ddd)，3.75(1H，dd)，3.85(1H，dd)，3.89(1H，dd)。
實施例3 3，4，5-哌啶三醇，1-戊基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)a)哌啶，1-戊基-3，4，5-三(苯基甲氧基)-2-[(苯基-甲氧基)甲基]，(2S，3R，4R，5S) 將粗品2，3，4，6-四-O-芐基-1，5-二-O-甲磺?；?D-葡萄糖醇(實施例1a)，1g)溶于正戊胺(10ml)中并在55℃下攪拌4天。TLC分析表明反應(yīng)已經(jīng)進行完全。濃縮反應(yīng)混合物并經(jīng)快速層析法(0→12％乙酸乙酯/石油醚的梯度洗脫)純化生成的粗品油，得到哌啶，1-戊基-3，4，5-三(苯基甲氧基)-2-[(苯基甲氧基)-甲基]，(2S，3R，4R，5S)(680mg，76％)。1HNMR(CDCl3)δ□1.0(3H，t)，1.2(2H，m)，1.4(4H，m)，1.6(2H，m)，2.7(2H，m)，2.85(1H，m)，3.05(1H，dd，J＝5，10.5Hz)，3.55(1H，m)，3.7(2H，m)，3.85(2H，m)，3.95(1H，dd，J＝5，9Hz)，4.6-5.05(8H，m，OCH2Ph)，7.4-7.5(20H，m，ArH)。
b)3，4，5-哌啶三醇，1-戊基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S) 將哌啶，1-戊基-3，4，5-三(苯基甲氧基)-2-[(苯基甲氧基)-甲基]，(2S，3R，4R，5S)(680mg)溶于MeOH(10ml)中并在氫氣氛下于PdCl2(300mg)存在下攪拌過夜。TLC表明反應(yīng)完成。通過硅藻土過濾反應(yīng)混合物(隨后甲醇/水洗滌)并濃縮濾液。把濃縮液用水稀釋并緩慢加入到已經(jīng)用鹽酸預(yù)先洗滌的5g Dowex 50X4-200樹脂上。將樹脂用水洗滌，然后用1∶7濃氨水∶水的混合液洗脫。濃縮產(chǎn)物部分，得到為膠質(zhì)固體的3，4，5-哌啶三醇，1-戊基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)(240mg，90％)。1H NMR(D2O)δ0.75(3H，t)，1.15(4H，m)，1.35(2H，m)，2.35(1H，dd，J＝10，12.5Hz)，2.5(2H，m)，2.7(1H，dd，J＝5，12Hz)，3.0(1H，dd，J＝4，9Hz)，3.25(1H，t)，3.45(1H，m)，3.6(1H，dd，J＝5，10Hz)，3.75(2H，m)。
實施例4 3，4，5-哌啶三醇，1-庚基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)a)哌啶，1-庚基-3，4，5-三(苯基甲氧基)-2-[(苯基-甲氧基)甲基]，(2S，3R，4R，5S) 將粗品2，3，4，6-四-O-芐基-1，5-二-O-甲磺?；?D-葡萄糖醇(實施例1a)，1g)溶于正庚胺(10ml)中并在55℃下攪拌4天。TLC分析表明反應(yīng)已經(jīng)進行完全。濃縮反應(yīng)混合物并經(jīng)快速層析法(0→25％乙醚/石油醚的梯度洗脫)純化生成的粗品油，得到哌啶，1-庚基-3，4，5-三(苯基甲氧基)-2-[(苯基甲氧基)-甲基]，(2S，3R，4R，5S)(690mg，76％)。1H NMR(CDCl3)δ□0.9(3H，t)，1.3(8H，m)，1.4(2H，m)，2.5(2H，m)，2.7(1H，m)，2.9(1H，dd，J＝5，11Hz)，3.4(1H，m)，3.55(2H，m)，3.7(2H，m)，3.8(1H，dd，J＝6，13Hz)，4.4-4.9(8H，m，OCH2Ph)，7.2-7.4(20H，m，ArH)。
b)3，4，5-哌啶三醇，1-庚基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S) 將哌啶，1-庚基-3，4，5-三(苯基甲氧基)-2-[(苯基甲氧基)-甲基]，(2S，3R，4R，5S)(690mg)溶于MeOH(10ml)中并在氫氣氛下于PdCl2(350mg)存在下攪拌過夜。TLC表明反應(yīng)完成。通過硅藻土過濾反應(yīng)混合物(隨后甲醇/水洗滌)并濃縮濾液。把濃縮液用水(5ml)稀釋并緩慢加入到已經(jīng)用鹽酸預(yù)先洗滌的5g Dowex 50X4-200樹脂上。將樹脂用水洗滌，然后用1∶7濃氨水∶水的混合液洗脫。濃縮產(chǎn)物部分，得到為膠質(zhì)固體的3，4，5-哌啶三醇，1-庚基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)(260 mg，90％)。1H NMR(D2O)δ0.7(3H，t)，1.1(8H，m)，1.3(2H，m)，2.45(3H，m)，2.7(1H，dd，J＝5，10Hz)，2.95(1H，dd，J＝4，9Hz)，3.25(1H，t)，3.4(1H，m)，3.55(1H，dd，J＝5.5，9.5Hz)，3.65(2H，m)。
實施例5 3，4，5-哌啶三醇，1-丁基-2-(羥基甲基)-，(2S，3S，4R，5S)a)2，3，4，6-四-O-芐基-D-半乳糖醇 將2，3，4，6-四-O-芐基-D-吡喃半乳糖(107g)溶于乙醇(0.6L)中并在于0℃下攪拌的同時加入硼氫化鈉(31g)。攪拌過夜后，TLC分析表明反應(yīng)完成。將乙醇溶液在水(3L)和乙醚(1.5L)之間分配。干燥(Na2SO4)有機相，過濾并濃縮。經(jīng)快速層析法(使用20→50％乙酸乙酯/石油醚梯度洗脫)純化生成的油，然后從乙酸乙酯/石油醚的混合物中結(jié)晶，得到為白色固體的2，3，4，6-四-O-芐基-D-半乳糖醇(97g，91％)。1H NMR(CDCl3)δ2.4(1H，bs)，3.35(1H，bs)，3.55(2H，m)，3.8(3H，m)，3.9(2H，m)，4.1(1H，m)，4.4-4.8(8H，m，OCH2Ph)，7.2-7.4(20H，m，ArH)。質(zhì)譜m/z 543(M+H)+565(M+Na)+。
b)2，3，4，6-四-O-芐基-1，5-二-O-甲磺?；?D-半乳糖醇 在0℃下，將2，3，4，6-四-O-芐基-D-半乳糖醇(7.6g)于吡啶(20ml)中攪拌并加入甲磺酰氯(2.5ml)在吡啶(20ml)中的溶液。把溶液在4℃下貯存過夜。TLC分析顯示反應(yīng)完成。將反應(yīng)混合物在乙酸乙酯和水/冰之間分配。先后用5％鹽酸和飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌有機部分，干燥(Na2SO4)并濃縮，得到無色的油，將其直接用于下一步。
c)哌啶，1-丁基-3，4，5-三(苯基甲氧基)-2-[(苯基甲氧基)-甲基]，(2S，3S，4R，5S) 將粗品2，3，4，6-四-O-芐基-1，5-二-O-甲磺?；?D-半乳糖醇溶于正丁胺(50ml)中并在55℃下攪拌5天。濃縮反應(yīng)混合物并經(jīng)快速層析法(5→16％乙酸乙酯/石油醚的梯度洗脫)純化粗品油，得到為無色油的哌啶，1-丁基-3，4，5-三(苯基甲氧基)-2-[(苯基甲氧基)-甲基]，(2S，3S，4R，5S)(自2，3，4，6-四-O-芐基-1，5-二-O-甲磺酰基-D-半乳糖醇得到4.8g，59％)。1H NMR(CDCl3)δ0.9(t，3H，J＝6Hz)，1.25(m，2H)，1.4(m，2H)，2.6(m，3H)，2.8(m，1H)，3.0(m，1H)，3.4(m，1H)，3.55(2H，m)，3.75(1H，m)，3.8(1H，m)，4.3-4.6(8H，m，OCH2Ph)，7.15-7.3(20H，m，ArH)。
d)3，4，5-哌啶三醇，1-丁基-2-(羥基甲基)-，(2S，3S，4R，5S) 將哌啶，1-丁基-3，4，5-三(苯基甲氧基)-2-[(苯基甲氧基)-甲基]，(2S，3S，4R，5S)(4.8g)溶于甲醇(100ml)中并在氫氣氛下于PdCl2(2.5g)存在下攪拌過夜。TLC表明反應(yīng)完成。通過硅藻土過濾反應(yīng)混合物(隨后用甲醇/水洗滌)并濃縮為25ml水溶液。把該溶液緩慢加入到已經(jīng)用鹽酸預(yù)先洗滌的40ml Amberlite IR-120(正)樹脂上。將樹脂用水洗滌，然后用1∶7濃氨水∶水的混合液(500ml)洗脫。濃縮產(chǎn)物部分，得到為無色油的3，4，5-哌啶三醇，1-丁基-2-(羥基甲基)-，(2S，3S，4R，5S)(1.27g，70％)。1H NMR(D2O)δ0.95(3H，t)，1.35(m，2H)，2.61(1H，dd)，2.70(1H，m)，2.87(1H，dd)，2.95(1H，ddd)，3.76(1H，ddd)，3.78(1H，dd)，3.90(1H，dd)，3.94(1H，ddd)，4.06(1H，dd)。
實施例6 3，4，5-哌啶三醇，1-壬基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)a)哌啶，1-壬基-3，4，5-三(苯基甲氧基)-2-[(苯基甲氧基)甲基]，(2S，3R，4R，5S) 將粗品2，3，4，6-四-O-芐基-1，5-二-O-甲磺?；?D-葡萄糖醇(實施例1a)，1.0g)溶于壬胺(1.2ml)中并在55℃下攪拌5天。濃縮反應(yīng)混合物并經(jīng)柱層析法(0→12％乙醚/石油醚的梯度洗脫)純化生成的粗品油，得到哌啶，1-壬基-3，4，5-三(苯基甲氧基)-2-[(苯基甲氧基)甲基]，(2S，3R，4R，5S)(660mg，71％)。1H NMR(300 MHz，CDCl3)δ0.88(3H，t，J7Hz)；1.14-1.40(12H，m)；1.40-1.55(2H，m)；2.43-2.54(2H，m)；2.60-2.71(1H，m)；2.84(1H，dd，J＝12，5Hz)；3.30-3.36(1H，m)；3.42-3.57(2H，m)；3.64(1H，dd，9，5Hz)；3.67(1H，dd，J＝11，3Hz)；3.78(1H，dd，J＝9，6Hz)；4.47(2H，ABq)；4.56-4.72(4H，m)；4.78(2H，ABq)；7.18-7.42(20H，m)。
b)3，4，5-哌啶三醇，1-壬基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S) 將哌啶，1-壬基-3，4，5-三(苯基甲氧基)-2-[(苯基甲氧基)-甲基]，(2S，3R，4R，5S)(660mg)溶于MeOH(10ml)中并在氫氣氛下于PdCl2(300mg)存在下攪拌過夜。通過硅藻土過濾反應(yīng)混合物(隨后用甲醇/水洗滌)并濃縮濾液。經(jīng)吸取到Dowex 50X4-200樹脂(8g)上并用1∶7氨水∶水的混合液洗脫純化濃縮液，得到為膠質(zhì)固體的3，4，5-哌啶三醇，1-壬基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)(160mg，61％)。1H NMR(300MHz，CD3OD)δ0.91(3H，m)；1.3(12H，bs)；1.45-1.58(2H，m)；2.53-2.69(2H，m)；2.70-2.84(2H，m)；3.00-3.07(1H，m)；3.35-3.42(1H，m)；3.49-3.58(1H，m)；3.70(1H，dd，J＝9，5Hz)；3.78-3.89(2H，m)。MS m/z 290.4(M+H)+。
實施例7 3，4，5-哌啶三醇，1-(1-乙基)丙基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)a)哌啶，1-(1-乙基)丙基-3，4，5-三(苯基甲氧基)-2-[(苯基甲氧基)甲基]，(2S，3R，4R，5S) 將1，5-二-O-甲磺?；?2，3，4，6-四-O-芐基-D-葡萄糖醇(4.0g)溶于1-乙基丙胺(6ml)中并在55℃下攪拌4天。濃縮反應(yīng)混合物并經(jīng)硅膠上的柱層析法(0-15％乙醚/石油醚的梯度洗脫)純化生成的棕色油，得到為淺黃色油的哌啶，1-(1-乙基)丙基-3，4，5-三(苯基甲氧基)-2-[(苯基甲氧基)甲基]，(2S，3R，4R，5S)(1.46 g，33％)。1H NMR(CDCl3)δ 0.79-0.86(6H，m)，1.17-1.30(4H，m)，2.30-2.41(1H，m)，2.62-2.71(1H，m)，2.83(1H，dd，J＝12，5Hz)，3.30-3.34(1H，m)，3.43-3.53(2H，m)，3.66-3.73(2H，m)，3.83(1H，dd，J＝9，6Hz)，4.50(2H，s)，4.63-4.79(4H，m)，4.83(2H，ABq)，7.23-7.42(20H，m)。
b)3，4，5-哌啶三醇，1-(1-乙基)丙基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S) 向哌啶，1-(1-乙基)丙基-3，4，5-三(苯基甲氧基)-2-[(苯基-甲氧基)甲基]，(2S，3R，4R，5S)(1.46g)在甲醇(15ml)中的溶液中加入PdCl2(750mg)。將反應(yīng)混合物在氫氣氛下攪拌過夜。TLC分析表明反應(yīng)完成，將其通過硅藻土墊過濾并濃縮。經(jīng)吸取到8.5g Dowex 50X4-200樹脂上并用1∶728％氨水∶水的混合液洗脫純化粗品物料，凍干后得到為白色固體的3，4，5-哌啶三醇，1-(1-乙基)丙基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)(530mg，92％)。1H NMR(D2O)δ0.82(6H，t，J＝7Hz)，1.29-1.58(4H，m)，2.41-2.52(2H，m)，2.87(1H，dd，J＝13，5Hz)，3.16(1H，dd，J10，4Hz)，3.36-3.44(1H，m)，3.47-3.56(1H，m)，3.69-3.77(3H，m)。MS m/z 234(M+H)+。
實施例8 3，4，5-哌啶三醇，1-(3-甲基)丁基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)a)哌啶，1-(3-甲基)丁基-3，4，5-三(苯基甲氧基)-2-[(苯基甲氧基)甲基]，(2S，3R，4R，5S) 將1，5-二-O-甲磺?；?2，3，4，6-四-O-芐基-D-葡萄糖醇(4.0g)溶于異戊胺(4ml)中并在55℃下攪拌4天。濃縮反應(yīng)混合物并經(jīng)硅膠上的柱層析法(0-20％乙醚/石油醚的梯度洗脫)純化生成的棕色油，得到為無色油的哌啶，1-(3-甲基)丁基-3，4，5-三(苯基甲氧基)-2-[(苯基甲氧基)甲基]，(2S，3R，4R，5S)(2.53g，67％)。1H NMR(CDCl3)δ0.80(6H，d，J＝6Hz)，1.12-1.33(3H，m)，2.39-2.50(2H，m)，2.59-2.70(1H，m)，2.79(1H，dd，J＝11，4Hz)，3.26-3.32(1H，m)，3.38-3.52(2H，m)，3.56-3.67(2H，m)，3.74(1H，dd，J＝11，6Hz)，4.43(2H，ABq)，4.52-4.67(4H，m)，4.75(2H，ABq)，7.18-7.30(20H，m)。
b)3，4，5-哌啶三醇，1-(3-甲基)丁基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S) 向哌啶，1-(3-甲基)丁基-3，4，5-三(苯基甲氧基)-2-[(苯基甲氧基)甲基]，(2S，3R，4R，5S)(2.53 g)在甲醇(30ml)中的溶液中加入PdCl2(1.2g)。將反應(yīng)混合物在氫氣氛下攪拌過夜。TLC分析表明反應(yīng)完成，將其通過硅藻土墊過濾并濃縮。經(jīng)吸取到12g Dowex 50X4-200樹脂上并用1∶7 28％氨水∶水的混合液洗脫純化粗品物料，得到為膠質(zhì)固體的3，4，5-哌啶三醇，1-(3-甲基)丁基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)(960mg，97％)。1H NMR(D2O)δ0.83(6H，dd，J＝7，1Hz)，1.26-1.42(2H，m)，1.43-1.55(1H，m)，2.46(1H，dd，J＝12，10Hz)，2.57(1H，ddd，J＝12，10，6Hz)，2.68(1H，ddd，J＝12，10，6Hz)，2.81(1H，dd，J＝12，5Hz)，3.08(1H，dd，J＝10，5Hz)，3.36(1H，t，J＝9Hz)，3.54(1H，ddd，J＝10，9，5Hz)，3.68(1H，dd，J＝10，6Hz)，3.75-3.87(2H，m)。MS m/z 234(M+H)+。
實施例9 3，4，5-哌啶三醇，1-(2-苯基)乙基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)a)哌啶，1-(2-苯基)乙基-3，4，5-三(苯基甲氧基)-2-[(苯基甲氧基)甲基]，(2S，3R，4R，5S) 將1，5-二-O-甲磺?；?2，3，4，6-四-O-芐基-D-葡萄糖醇(5.0g)溶于苯乙胺(10ml)中并在55℃下攪拌3天。濃縮反應(yīng)混合物并經(jīng)硅膠上的柱層析法(0-30％乙醚/石油醚的梯度洗脫)純化生成的棕色油，得到為無色油的哌啶，1-(2-苯基)乙基-3，4，5-三(苯基甲氧基)-2-[(苯基甲氧基)甲基]，(2S，3R，4R，5S)(3.2g，71％)。1H NMR(CDCl3)δ0.86-0.98(2H，m)，1.16-1.28(2H，m)，2.56-2.7(1H，m)，2.70-2.88(1H，m)，2.91(1H，dd，J＝11，4Hz)，2.98-3.06(1H，m)，3.41-3.46(1H，m)，3.46-3.60(2H，m)，3.66(1H，dd，J＝9，6Hz)，3.75(1H，dd，J 10，3Hz)，3.87(1H，dd，J＝10，6Hz)，4.52(2H，ABq)，4.60-4.74(4H，m)，4.83(2H，ABq)，7.10-7.38(25H，m)。
b)3，4，5-哌啶三醇，1-(2-苯基)乙基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S) 向哌啶，1-(2-苯基)乙基-3，4，5-三(苯基甲氧基)-2-[(苯基甲氧基)甲基]，(2S，3R，4R，5S)(4.0g)在甲醇(30ml)中的溶液中加入PdCl2(1.4g)。將反應(yīng)混合物在氫氣氛下攪拌過夜。TLC分析表明反應(yīng)完成，將其通過硅藻土墊過濾并濃縮。將粗品物料吸取到20g Dowex 50X4-200樹脂上并用1∶7 28％氨水∶水的混合液洗脫。把產(chǎn)物部分凍干，然后經(jīng)硅膠上的柱層析法(0-20％MeOH/二氯甲烷的梯度洗脫)純化，得到為膠質(zhì)固體的3，4，5-哌啶三醇，1-(2-苯基)乙基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)(970mg，81％)。1H NMR(D2O)δ2.50(1H，dd，J＝12，10Hz)，2.68-2.97(5H，m)，3.3(1H，dd，J＝9，5Hz)，3.36(1H，t，J＝9Hz)，3.51-3.61(1H，m)，3.66-3.73(2H，m)，3.74-3.83(1H，m)，7.18-7.37(5H，m)。MS m/z 268(M+H)+。
實施例10 3，4，5-哌啶三醇，1-(3-苯基)丙基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)a)哌啶，1-(3-苯基)丙基-3，4，5-三(苯基甲氧基)-2-[(苯基甲氧基)甲基]，(2S，3R，4R，5S) 將1，5-二-O-甲磺?；?2，3，4，6-四-O-芐基-D-葡萄糖醇(5.0g)溶于3-苯基丙胺(5ml)中并在55℃下攪拌3天。濃縮反應(yīng)混合物并經(jīng)硅膠上的柱層析法(0-25％乙醚/石油醚的梯度洗脫)純化生成的棕色油，得到為淺黃色油的哌啶，1-(3-苯基)丙基-3，4，5-三(苯基甲氧基)-2-[(苯基甲氧基)甲基]，(2S，3R，4R，5S)(4.25g，100％)。1H NMR(CDCl3)δ1.72-1.84(2H，m)，2.54-2.64(4H，m)，2.70-2.80(1H，m)，2.87(1H，dd，J＝11，5Hz)，3.34-3.39(1H，m)，3.46-3.62(2H，m)，3.65-3.74(2H，m)，3.84(1H，dd，J＝10，6Hz)，4.52(2H，ABq)，4.62-4.75(4H，m)，4.84(2H，ABq)，7.12-7.39(25H，m)。
b)3，4，5-哌啶三醇，1-(3-苯基)丙基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S) 向哌啶，1-(3-苯基)丙基-3，4，5-三(苯基甲氧基)-2-[(苯基甲氧基)甲基]，(2S，3R，4R，5S)(4.2g)在甲醇(40ml)中的溶液中加入PdCl2(1.6g)。
將反應(yīng)混合物在氫氣氛下攪拌過夜。TLC分析表明反應(yīng)完成，將其通過硅藻土墊過濾并濃縮。將粗品物料吸取到20g Dowex 50X4-200樹脂上并用1∶7 28％氨水∶水的混合液洗脫。把產(chǎn)物部分凍干，然后經(jīng)硅膠上的柱層析法(0-20％MeOH/二氯甲烷的梯度洗脫)純化，得到為澄明的樹膠的3，4，5-哌啶三醇，1-(3-苯基)丙基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)(1.36 g，71％)。1H NMR(D2O)δ1.69-1.82(2H，m)，2.44(1H，dd，J＝12，10Hz)，2.51-2.72(4H，m)，2.78(1H，dd，J＝13，5Hz)，3.05(1H，dd，J＝11，5Hz)，3.34(1H，t，J＝9Hz)，3.52(1H，ddd，J＝10，9，5Hz)，3.66(1H，dd，J＝10，5Hz)，3.71-3.81(2H，m)，7.17-7.35(5H，m)。MSm/z 282(M+H)+。
實施例11 3，4，5-哌啶三醇，1-(1-乙基)己基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)a)哌啶，1-(2-乙基)己基-3，4，5-三(苯基甲氧基)-2-[(苯基甲氧基)甲基]，(2S，3R，4R，5S) 將1，5-二-O-甲磺?；?2，3，4，6-四-O-芐基-D-葡萄糖醇(5.0g)溶于2-乙基己胺(5ml)中并在55℃下攪拌4天。濃縮反應(yīng)混合物并經(jīng)硅膠上的柱層析法(0-17.5％乙醚/石油醚的梯度洗脫)純化生成的棕色油，得到為無色油的哌啶，1-(2-乙基)己基-3，4，5-三(苯基甲氧基)-2-[(苯基甲氧基)甲基]，(2S，3R，4R，5S)(2.6g，57％)。1H NMR(CDCl3)δ 0.75-0.93(6H，m)，1.17-1.38(9H，m)，2.16(1H，dd，J＝13，6Hz)，2.25-2.36(2H，m)，2.52-2.60(1H，m)，3.02-3.09(1H，m)，3.24-3.36(2H，m)，3.40-3.51(2H，m)，3.60(1H，dd，J＝10，6Hz)，4.53(2H，ABq)，4.62-4.76(4H，m)，4.85(2H，ABq)，7.18-7.31(20H，m)。
b)3，4，5-哌啶三醇，1-(2-乙基)己基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S) 向哌啶，1-(2-乙基)己基-3，4，5-三(苯基甲氧基)-2-[(苯基甲氧基)甲基]，(2S，3R，4R，5S)(2.6g)在甲醇(20ml)中的溶液中加入PdCl2(900mg)。將反應(yīng)混合物在氫氣氛下攪拌過夜。TLC分析表明反應(yīng)完成，將其通過硅藻土墊過濾并濃縮。將粗品物料吸取到13g Dowex 50X4-200樹脂上并用1∶7 28％氨水∶水的混合液洗脫。然后把產(chǎn)物部分經(jīng)硅膠上的柱層析法(0-10％MeOH/二氯甲烷的梯度洗脫)純化，凍干后，得到為膠質(zhì)固體的3，4，5-哌啶三醇，1-(1-乙基)己基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)(320mg，28％)。1H NMR(CDCl3)δ0.68-0.80(6H，m)，1.08-1.32(9H，m)，2.30-2.46(3H，m)，2.60(1H，dd，J＝13，5Hz)，2.90(1H，dd，J＝12，6Hz)，3.30-3.38(1H，m)，3.40-3.49(1H，m)，3.55(1H，dd，J＝13，9Hz)，3.66(1H，dd，J＝9，5Hz)，3.74(1H，dd，J＝11，7Hz)。MS m/z276(M+H)+。
實施例12 3，4，5-哌啶三醇，1-(2-乙基)丁基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)a)哌啶，1-(2-乙基)丁基-3，4，5-三(苯基甲氧基)-2-[(苯基甲氧基)甲基]，(2S，3R，4R，5S) 將1，5-二-O-甲磺?；?2，3，4，6-四-O-芐基-D-葡萄糖醇(3.0g)溶于2-乙基丁胺(2.5ml)中并在55℃下攪拌4天。濃縮反應(yīng)混合物并經(jīng)硅膠上的柱層析法(0-12％乙醚/石油醚的梯度洗脫)純化生成的棕色油，得到為無色油的哌啶，1-(2-乙基)丁基-3，4，5-三(苯基甲氧基)-2-[(苯基甲氧基)甲基]，(2S，3R，4R，5S)(1.93 g，74％)(Rf0.25，20％乙酸乙酯/石油醚)，其直接用于下一步。
b)3，4，5-哌啶三醇，1-(2-乙基)丁基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S) 向哌啶，1-(2-乙基)丁基-3，4，5-三(苯基甲氧基)-2-[(苯基甲氧基)甲基]，(2S，3R，4R，5S)(1.93g)在甲醇(20ml)中的溶液中加入PdCl2(800mg)。將反應(yīng)混合物在氫氣氛下攪拌過夜。TLC分析表明反應(yīng)完成，將其通過硅藻土墊過濾并濃縮。經(jīng)吸取到10g Dowex 50X4-200樹脂上并用1∶7 28％氨水∶水的混合液洗脫純化粗品物料，凍干后，得到為白色固體的3，4，5-哌啶三醇，1-(2-乙基)丁基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)(735mg，94％)。1H NMR(CDCl3)δ0.78(6H，t，J＝7Hz)，1.14-1.30(5H，m)，2.32-2.48(3H，m)，2.63(1H，dd，J＝13，5Hz)，2.92(1H，dd，J＝13，6Hz)，3.37(1H，t，J＝9Hz)，3.47(1H，ddd，J＝10，9，4Hz)，3.57(1H，dd，J＝11，7Hz)，3.68(1H，dd，J＝9，6Hz)，3.77(1H，dd，J＝11，4Hz)。MS m/z 248(M+H)+。
實施例13 3，4，5-哌啶三醇，1-[(2R)-(2-甲基-2-苯基)乙基]-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)a)哌啶，1-[(2R)-(2-甲基-2-苯基)乙基]-3，4，5-三(苯基甲氧基)-2-[(苯基甲氧基)甲基]，(2S，3R，4R，5S) 將1，5-二-O-甲磺?；?2，3，4，6-四-O-芐基-D-葡萄糖醇(2.5g)溶于DMF(3ml)中。加入二異丙基乙胺(1.5ml)和R(+)-β-甲基苯乙胺(1g)并把反應(yīng)物在55℃下攪拌5天。濃縮反應(yīng)混合物并經(jīng)硅膠上的柱層析法(0-25％乙醚/石油醚的梯度洗脫)純化生成的棕色油，得到為淺黃色油的哌啶，1-[(2R)-(2-甲基-2-苯基)乙基]-3，4，5-三(苯基甲氧基)-2-[(苯基甲氧基)-甲基]，(2S，3R，4R，5S)(740mg，32％)。1H NMR(CDCl3)δ1.21-1.27(3H，m)，2.52-2.59(1H，m)，2.70-2.95(4H，m)，3.35-3.40(1H，m)，3.44-3.52(2H，m)，2.64(1H，dd，J＝12，9Hz)，3.74(1H，dd，J＝11，3Hz)，3.86(1H，dd，J＝9，6Hz)，4.47-4.69(6H，m)，4.83(2H，ABq)，7.17-7.37(25H，m)。
b)3，4，5-哌啶三醇，1-[(2R)-(2-甲基-2-苯基)乙基]-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S) 向哌啶，1-[(2R)-(2-甲基-2-苯基)乙基]-3，4，5-三(苯基甲氧基)-2-[(苯基甲氧基)甲基]，(2S，3R，4R，5S)(740mg)在甲醇(15ml)中的溶液中加入PdCl2(300mg)。將反應(yīng)混合物在氫氣氛下攪拌過夜。TLC分析表明反應(yīng)完成，將其通過硅藻土墊過濾并濃縮。經(jīng)吸取到10g Dowex50X4-200樹脂上并用1∶7 28％氨水∶水的混合液洗脫純化粗品物料，凍干后，得到為膠質(zhì)固體的3，4，5-哌啶三醇，1-[(2R)-(2-甲基-2-苯基)乙基]-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)(300mg，92％)。1H NMR(CDCl3)δ1.18(3H，d，J＝5Hz)，2.42(1H，dd，J＝12，9Hz)，2.56-2.87(5H，m)，3.29(1H，t，J＝9Hz)，3.39-3.66(4H，m)，7.07-7.23(5H，m)。MS m/z 282.3(M+H)+。
實施例14 3，4，5-哌啶三醇，1-[(2S)-(2-甲基-2-苯基)乙基]-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)a)哌啶，1-[(2S)-(2-甲基-2-苯基)乙基]-3，4，5-三(苯基甲氧基)-2-[(苯基甲氧基)甲基]，(2S，3R，4R，5S) 將1，5-二-O-甲磺?；?2，3，4，6-四-O-芐基-D-葡萄糖醇(2.5g)溶于DMF(3ml)中。加入二異丙基乙胺(1.5ml)和S(-)-β-甲基苯乙胺(1g)并把反應(yīng)物在55℃下攪拌5天。將反應(yīng)混合物在NaOH水溶液(1M，30ml)和乙酸乙酯(50ml)之間分配。用飽和NaHCO3水溶液洗滌有機相，經(jīng)Na2SO4干燥并濃縮。經(jīng)硅膠上的柱層析法(0-17％乙醚/石油醚的梯度洗脫)純化生成的粗品油，得到為淺黃色油的哌啶，1-[(2S)-(2-甲基-2-苯基)乙基]-3，4，5-三(苯基甲氧基)-2-[(苯基甲氧基)-甲基]，(2S，3R，4R，5S)(700mg，31％)。1H NMR(CDCl3)δ 1.17-1.21(3H，m)，2.55-2.64(1H，m)，2.79(1H，dd，J＝12，7Hz)，2.87(1H，dd，J＝13，6Hz)，2.98(1H，dd，J＝13，7Hz)，3.20-3.26(1H，m)，3.40-3.54(3H，m)，3.69(1H，dd，J＝10，2Hz)，3.84(1H，dd，J＝13，7Hz)，4.46-4.70(6H，m)，4.8(2H，ABq)，7.09-7.38(25H，m)。
b)3，4，5-哌啶三醇，1-[(2S)-(2-甲基-2-苯基)乙基]-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S) 向哌啶，1-[(2S)-(2-甲基-2-苯基)乙基]-3，4，5-三(苯基甲氧基)-2-[(苯基甲氧基)甲基]，(2S，3R，4R，5S)(700mg)在甲醇(15ml)中的溶液中加入PdCl2(300mg)。將反應(yīng)混合物在氫氣氛下攪拌過夜。TLC分析表明反應(yīng)完成，將其通過硅藻土墊過濾并濃縮。經(jīng)吸取到10g Dowex50X4-200樹脂上并用1∶7 28％氨水∶水的混合液洗脫純化粗品物料，凍干后，得到為膠質(zhì)固體的3，4，5-哌啶三醇，1-[(2S)-(2-甲基-2-苯基)乙基]-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)(250mg，81％)。1H NMR(CDCl3)δ1.17(3H，d，J＝5Hz)，2.45(1H，dd，J＝13，10Hz)，2.59(1H，dd，J＝13，4Hz)，2.64-2.86(3H，m)，2.95(1H，dd，J＝14，6Hz)，3.34(1H，t，J＝8Hz)，3.42-3.55(2H，m)，3.64(1H，dd，J＝8，5Hz)，3.74(1H，dd，J＝11，6Hz)，7.08-7.23(5H，m)。MS m/z 282.3(M+H)+。
實施例15 哌啶，1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-3，4，5-三(苯基甲氧基)-2-[(苯基甲氧基)甲基]，(2S，3R，4R，5S)[保護的中間體] 將1，5-二-O-甲磺?；?2，3，4，6-四-O-芐基-D-葡萄糖醇(25g)溶于4-甲氧基芐基胺(50ml)中并在55℃下攪拌4天。濃縮反應(yīng)混合物并經(jīng)硅膠上的柱層析法(0-23％乙醚/石油醚的梯度洗脫)純化生成的棕色油，得到為淺黃色油的哌啶，1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-3，4，5-三(苯基甲氧基)-2-[(苯基-甲氧基)甲基]，(2S，3R，4R，5S)(17.1g，75％)。1H NMR(CDCl3)δ2.50-2.60(1H，m)，2.83(1H，dd，J＝13，4Hz)，3.39-3.44(1H，m)，3.51-3.61(2H，m)，3.64-3.80(3H，m)，3.84(3H，s)，3.70-3.77(2H，m)，4.54(2H，s)，4.58-4.69(4H，m)，4.85(2H，ABq)，6.87(2H，d，J＝7Hz)，7.18(2H，d，J＝7Hz)，7.26-7.40(20H，m)。
生物數(shù)據(jù)測試本發(fā)明的化合物(表1)以測定它們對半乳糖苷酶和葡糖基神經(jīng)酰胺合酶的IC50濃度。在前者情況下，按照在Jacob和Scudder，Methods in Enzymology，(1994)，230，280中描述的方法進行試驗。在葡糖基神經(jīng)酰胺合酶的情況下，按照在Platt等，J.Biol.Chem.，(1994)，269，27108中描述的方法進行試驗。
表1
表2顯示對人體酶的數(shù)據(jù)。必須按照在Platt等，J.Biol.Chem.，(1994)，269，27108中描述的，進行GCS的抑制作用試驗，酶源為在昆蟲細胞中表達的人重組GCS。如(Biochemical Genetics，A LaboratoryManual，Oxford University Press)描述的那樣，進行葡糖苷酶試驗，除將對-硝基苯基連接的底物用于替代甲基傘形酮連接的底物。
表2
因此，本發(fā)明的化合物對葡糖苷酶和半乳糖苷酶比化合物例如NB-DNJ或者NB-DGJ呈現(xiàn)更小的抑制作用(因此減少副作用)，同時保持對葡糖基神經(jīng)酰胺合酶的活性。
權(quán)利要求
1.一種式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或者前藥 其中R為任選由C3-7環(huán)烷基取代和任選被-O-間隔的C1-16直鏈或支鏈烷基，所述氧與環(huán)氮通過至少兩個碳原子分開，或者C1-10烷基芳基，其中芳基為苯基、吡啶基、噻吩基或者呋喃基，其中苯基由一個或者更多個選自以下的取代基任選取代F、Cl、Br、CF3、OCF3、OR1和C1-6直鏈或支鏈烷基；和R1為氫，或C1-6直鏈或支鏈烷基；條件是化合物不是a)3，4，5-哌啶三醇，1-丁基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)；b)3，4，5-哌啶三醇，1-苯基甲基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)；或c)3，4，5-哌啶三醇，1-壬基-2-(羥基甲基)-，(2S，3S，4R，5S)。
2.一種如在權(quán)利要求1中定義的化合物，其中3位羥基以R構(gòu)型存在。
3.一種如在權(quán)利要求1或者2中定義的化合物，其中R為C1-16直鏈或支鏈烷基。
4.一種如在權(quán)利要求3中定義的化合物，其中R為C3-10直鏈烷基。
5.一種化合物選自3，4，5-哌啶三醇，1-丙基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)3，4，5-哌啶三醇，1-戊基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)3，4，5-哌啶三醇，1-庚基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)3，4，5-哌啶三醇，1-丁基-2-(羥基甲基)-，(2S，3S，4R，5S)3，4，5-哌啶三醇，1-壬基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)3，4，5-哌啶三醇，1-(1-乙基)丙基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)3，4，5-哌啶三醇，1-(3-甲基)丁基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)3，4，5-哌啶三醇，1-(2-苯基)乙基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)3，4，5-哌啶三醇，1-(3-苯基)丙基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)3，4，5-哌啶三醇，1-(1-乙基)己基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)3，4，5-哌啶三醇，1-(2-乙基)丁基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)3，4，5-哌啶三醇，1-[(2R)-(2-甲基-2-苯基)乙基]-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)3，4，5-哌啶三醇，1-[(2S)-(2-甲基-2-苯基)乙基]-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)或其藥學(xué)上可接受的鹽或者前藥。
6.化合物3，4，5-哌啶三醇，1-戊基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)或其藥學(xué)上可接受的鹽或者前藥。
7.一種如在先前權(quán)利要求的任一項中定義的化合物，但不包括條件a)和b)，它用于醫(yī)藥中。
8.一種藥用制劑，它包括至少一種如在權(quán)利要求1-6的任一項中定義化合物，但不包括條件a)和b)，任選與一或更多種藥學(xué)上可接受的載體、賦形劑和/或稀釋劑混合在一起。
9.一種用于制備如在權(quán)利要求1-6的任一項中定義的化合物的方法，方法包括a)使式(II)化合物 與NaBH3CN和式R2CHO的醛在乙酸-甲醇中反應(yīng)，其中R2為C1-15直或分支鏈烷基，或者在溶劑中與NaBH(OAc)3和式R2CHO的醛反應(yīng)；其中R2為由C3-7環(huán)烷基任選取代且由-O-任選間隔的C1-15直或分支鏈烷基，所述氧通過至少一個碳原子與CHO部分分開，或者為其中芳基如在權(quán)利要求1中定義的C0-9烷基芳基；或者b)使式(III)化合物脫保護 其中R如在權(quán)利要求1中定義，并且P可以相同或者不同，為羥基保護基團。
10.如在權(quán)利要求1-6的任一項中定義的化合物，但不包括條件a)-c)，在制備葡糖基神經(jīng)酰胺合酶抑制劑中的用途。
11.如在權(quán)利要求1-6的任一項中定義的化合物，但不包括條件a)-c)，在制備用于治療糖脂貯積疾病的藥物中的用途。
12.如在權(quán)利要求11中要求的用途，其中糖脂貯積疾病為高歇氏病、桑德霍夫氏病、泰-沙二氏病、法布里氏病或者GM1神經(jīng)節(jié)糖苷沉積癥。
13.如在權(quán)利要求1-6的任一項中定義的化合物，但不包括條件a)-c)，在制備用于治療C型尼-皮二氏病、I型粘多糖貯積病、IIID型粘多糖貯積病、IIIA型粘多糖貯積病、VI型粘多糖貯積病、VII型粘多糖貯積病、α-甘露糖苷過多癥或者IV型粘脂貯積病的藥物中的用途。
14.如在權(quán)利要求1-6的任一項中定義的化合物，但不包括條件a)-c)，在制備用于治療神經(jīng)癌癥包括神經(jīng)母細胞瘤、腦癌、腎腺瘤、惡性黑素瘤、多發(fā)性骨髓瘤和廣譜抗藥性癌癥的藥物中的用途。
15.如在權(quán)利要求1-6的任一項中定義的化合物，但不包括條件a)-c)，在制備用于治療阿爾滋海默氏病、癲癇、中風(fēng)、帕金森氏病或者脊髓損傷的藥物中的用途。
16.如在權(quán)利要求1-6的任一項中定義的化合物，但不包括條件a)-c)，在制備用于治療由傳染性微生物或所述生物產(chǎn)生的毒素引起的疾病的藥物中的用途，所述傳染性微生物采用細胞表面的糖脂作為所述生物自身的受體，或者在制備用于治療由傳染性生物引起的疾病的藥物中的用途，對所述傳染性生物而言，葡糖基神經(jīng)酰胺的合成是必需的或者重要的過程。
17.如在權(quán)利要求1-6的任一項中定義的化合物，但不包括條件a)-c)，在制備用于治療與異常糖脂合成有關(guān)的疾病例如多囊腎疾病、糖尿病腎肥大和動脈粥樣硬化的藥物中的用途。
18.如在權(quán)利要求1-6的任一項中定義的化合物，但不包括條件a)-c)，在制備用于治療通過給予神經(jīng)節(jié)糖苷例如GM1神經(jīng)節(jié)糖苷可以治療的病癥的藥物中的用途。
19.如在權(quán)利要求1-6的任一項中定義的化合物，但不包括條件a)-c)，在制備用于使雄性哺乳動物可逆性不育的藥物中的用途。
20.式(I)化合物，但不包括條件a)-c)，在制備用于治療肥胖癥的藥物中的用途。
21.一種式(III)化合物 其中R如在權(quán)利要求1中定義，并且P可以相同或者不同，為羥基保護基團，條件是化合物不為i)哌啶，1-苯基甲基-3，4，5-三(苯基甲氧基)-2-[(苯基甲氧基)-甲基]，(2S，3R，4R，5S)；ii)哌啶，1-苯基甲基-3，4，5-三(乙酰氧基)-2-[(乙酰氧基)-甲基]，(2S，3R，4R，5S)；iii)哌啶，1-苯基甲基-3，4，5-二(乙酰氧基)-5-(苯基甲氧基)-2-[(苯基甲氧基)-甲基]，(2S，3S，4R，5S)；或者iv)哌啶，1-甲基-3，4，5-二(乙酰氧基)-5-(苯基甲氧基)-2-[(苯基甲氧基)-甲基]，(2S，3S，4R，5S)。
全文摘要
式(I)化合物，其中R表示各種取代基，用作葡糖基神經(jīng)酰胺合酶抑制劑。
文檔編號A61K31/445GK1496351SQ02806226
公開日2004年5月12日 申請日期2002年1月11日 優(yōu)先權(quán)日2001年1月12日
發(fā)明者T·D·布特爾斯, T D 布特爾斯, R·A·德維克, 德維克, G·弗利特, 奧爾查德, M·G·奧爾查德, 普拉特, F·M·普拉特 申請人:牛津格萊克科學(xué)(英國)有限公司, 牛津大學(xué)校委會