專利名稱：紫杉烷類藥物的節(jié)拍式給藥的制作方法
相關(guān)申請依據(jù)35§119(e)，本申請要求在2001年2月28日提交的第60/271,944號U.S.臨時申請的優(yōu)先權(quán)。
背景技術(shù)：
按傳統(tǒng)慣例，治療癌癥的化療藥物施用方案是設(shè)計成通過用“最大耐受劑量”(MTD)的這些細(xì)胞毒害劑治療來殺死盡可能多的腫瘤細(xì)胞(Hanahan等人，J.Clinical Invest.2000 105(8)1045-1047)。該MTD給藥方案一般還稱為誘導(dǎo)治療。然而，施用這些MTD所帶來的與破壞健康組織中增殖細(xì)胞有關(guān)的毒副作用嚴(yán)重限制了這些治療劑的使用。為了平衡毒性與效力，常規(guī)給藥方案要求階段性地施用MTD或接近MTD的細(xì)胞毒害劑，然后是一段休息期以讓正常組織恢復(fù)(Hanahan等人，J.Clinical Invest.2000 105(8)1045-1047)。然而，該標(biāo)準(zhǔn)MTD方案不僅嚴(yán)重?fù)p害了患者的生命質(zhì)量，而且還導(dǎo)致僅僅是很短暫的反應(yīng)，之后通常復(fù)發(fā)，并經(jīng)常發(fā)生對細(xì)胞毒害劑有抗藥性的侵襲性更強(qiáng)的癌癥。
因此，人們正積極尋找替代療法。一種替代療法是以形成腫瘤血管的血管系統(tǒng)的細(xì)胞而不是腫瘤細(xì)胞自身作為靶目標(biāo)。血管生成是由先前存在的血管組織形成血管的過程，并涉及先前存在的內(nèi)皮的募集和擴(kuò)張。在女性生殖周期和傷口愈合中，血管生成是正常發(fā)生的生理過程。然而，血管生成還在癌癥中發(fā)生，以確立起對于腫瘤生長和擴(kuò)散來說是必不可少的功能性微血管系統(tǒng)。
最近的臨床前試驗(yàn)已證實(shí)了以較短的間隔并且在最長達(dá)210天的治療中不中斷來施用細(xì)胞毒害劑環(huán)磷酰胺(Browder等人，Cancer Res.2000 601878-1886)和長春堿以及非細(xì)胞毒害性VEGF受體-2抗體(Klement等人，J.Clinical Invest.2000 105(8)R15-R24)的效力。
Browder等人描述了每天或者每3、4、5、6、7或8天給植入了抗藥性Lewis肺癌的小鼠施用環(huán)磷酰胺。在這些實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，每6天給藥的環(huán)磷酰胺(170mg/kg)在控制腫瘤生長方面比所實(shí)驗(yàn)的其它環(huán)磷酰胺給藥方案，包括采用較高劑量強(qiáng)度例如每4天135mg/kg的方案更有效(Browder等人，Cancer Res.2000 601878-1886)。
Klement等人用低劑量的長春堿、以VEGF的flk-1/KDR(2型)受體為靶目標(biāo)的單克隆中和抗體(DC101)或這兩種治療劑一起連續(xù)治療2種獨(dú)立的成神經(jīng)細(xì)胞瘤細(xì)胞系的異種移植物。在這些實(shí)驗(yàn)中，長春堿是以約每3天1.5mg/m2的劑量給藥，這個劑量是該藥物在人中的MTD的約1/4，在小鼠中的MTD的1/16-1/20(Klement等人，J.ClinicalInvest.2000 105(8)R15-R24)。
WO 00/64436公開了通過在足以實(shí)現(xiàn)治療有益效果的給藥期間內(nèi)施用亞治療劑量水平的藥物活性劑來治療個體虛弱的方法。然而，對于在該申請的第10-16頁所列出的任一42類藥物活性劑，沒有提供關(guān)于該方法的效力的任何數(shù)據(jù)。
以低于最大耐受劑量的劑量連續(xù)或者以較短間隔且不中斷的方式施用藥物經(jīng)常稱為長期或“節(jié)拍式(metronomic)”給藥(Hanahan等人，J.Clinical Invest.2000 105(8)1045-1047)。
發(fā)明概述本發(fā)明的目的是提供紫杉烷類藥物的節(jié)拍式給藥方案。
本發(fā)明的另一個目的是提供抑制腫瘤生長的方法，包括經(jīng)由節(jié)拍式給藥方案將腫瘤暴露于紫杉烷類藥物。該節(jié)拍式給藥方案可單獨(dú)使用或者與其它已確立的抗癌治療聯(lián)合使用。
發(fā)明詳述通常已接受的是，微管蛋白聚合是癌癥化療的最有效的靶目標(biāo)之一。市售紫杉烷類藥物TAXOL(紫杉醇(paclitaxel))和TAXOTERE(docitaxel)已經(jīng)在多種癌癥中取得了臨床上的成功。這些藥物的效力取決于用藥程序，其中延長對腫瘤的暴露時間顯示出了有益效果。例如，最近使用每周一次重復(fù)施用TAXOL證實(shí)了臨床實(shí)用性。
此外，有臨床前報道指出，TAXOL可具有強(qiáng)效抗血管生成活性(Dordunoo等人，Cancer Chemother.Pharmacol.1995 36279-82；Burt等人，Cancer Letters 1995 8873-9；Oktaba等人，Proc.Annu.Meet.Am.Assoc.Cancer Res.1995 36A2597；Belotti等人，Proc.Annu.Meet.Am.Assoc.Cancer Res.1996 37A397；Belotti等人，Clinical Cancer Res.1996 21843-9；Klauber等人，Cancer research1997 5781-6；和Velasco等人，J.Invest.Dermatol.1999 112655)。因?yàn)榭寡苌苫衔锏陌心繕?biāo)群體是內(nèi)皮而不是腫瘤，所以有人提出，為了實(shí)現(xiàn)有效治療，抗血管生成劑必須長期施用。遺憾的是，市售紫杉烷類藥物的口服生物利用度非常低(在大鼠中小于＜1％)，使得長期重復(fù)給藥是非常重的負(fù)擔(dān)。
3’-叔丁基-3’-N-叔丁氧基羰基-4-去乙?；?3’-去苯基-3’-N-去苯甲酰基-4-O-甲氧基羰基紫杉醇是具有口服活性的紫杉醇類似物。3’-叔丁基-3’-N-叔丁氧基羰基-4-去乙?；?3’-去苯基-3’-N-去苯甲?；?4-O-甲氧基羰基紫杉醇的結(jié)構(gòu)如式I所示。因此，可口服生物利用的該紫杉烷在下文中稱為式I口服活性紫杉烷。
式I口服活性紫杉烷在大鼠和狗中都表現(xiàn)出了良好的口服生物利用度，并且在多種人細(xì)胞系中表現(xiàn)出與靜脈內(nèi)施用的紫杉醇相差不大的抗腫瘤活性。稱為IDN 5109的口服有效的紫杉烷也已描述過(Polizzi等人，Clinical Cancer Res.May 2000 6(5)2070-4；Nicoletti等人，Cancer Res.February 15，2000 60(4)842-6)。此外，WO99/49848描述了紫杉烷類藥物例如紫杉醇和多西他賽(docetaxel)的口服制劑，WO 98/53811描述了其中還施用口服增強(qiáng)劑的紫杉烷類藥物的給藥方案。
本發(fā)明涉及施用紫杉烷類藥物，優(yōu)選可口服生物利用的紫杉烷類藥物例如式I口服活性紫杉烷、IDN 5109或TAXOL的口服制劑以抑制腫瘤生長和治療癌癥的節(jié)拍式給藥方案。對于本發(fā)明的目的，“節(jié)拍式給藥方案”是表示以所確立的藥物最大耐受劑量以下的劑量重復(fù)施用藥物，經(jīng)過重復(fù)給藥后將產(chǎn)生所需的藥理作用，并且與通過具有休息期間的傳統(tǒng)方案以最大耐受劑量施用該藥物所觀測到的毒副作用相比，其具有減輕的毒副作用。休息期間可以與在其之前的治療期間一樣長或者比治療期間長。在節(jié)拍式給藥中，最終可以施用與通過標(biāo)準(zhǔn)MTD方案-在本文中還稱為誘導(dǎo)療法施用的劑量相同的累積劑量。在某些情況下，這是通過延長進(jìn)行給藥方案的時間范圍和/或頻率，同時降低每次給藥的量來實(shí)現(xiàn)的。因此，“重復(fù)”意指包括長期和/或連續(xù)的給藥方案。然而，節(jié)拍式給藥的重點(diǎn)不是治療頻率或持續(xù)時間，而是能夠維持由經(jīng)過其標(biāo)準(zhǔn)MTD方案施用的藥物給患者產(chǎn)生的有益效果的較安全治療。因此，通過本發(fā)明節(jié)拍式給藥方案施用的紫杉烷類藥物可被患者更好地耐受。節(jié)拍式給藥還可以稱為維持給藥或長期給藥。
對于本發(fā)明目的，紫杉烷類藥物節(jié)拍式給藥的期望的藥理效果是抑制腫瘤生長?！耙种颇[瘤生長”是指引起腫瘤生長的抑制和/或引起腫瘤大小的消退。雖然不想受縛于特定機(jī)制，但是據(jù)信紫杉烷類藥物的節(jié)拍式給藥可以以形成腫瘤血管的血管系統(tǒng)的細(xì)胞而不是腫瘤細(xì)胞自身作為靶目標(biāo)。因此，抑制腫瘤生長可通過使腫瘤細(xì)胞不能確立起對于腫瘤生長和擴(kuò)散來說是決定性的功能性微血管系統(tǒng)來實(shí)現(xiàn)。
通過本發(fā)明給藥方案減輕的毒副作用包括但不限于神經(jīng)毒性、對正常增殖細(xì)胞的破壞和體重下降。
口服紫杉烷類藥物的節(jié)拍式給藥可單獨(dú)用于癌癥的治療，或者可以與其它已確立起來的通過用標(biāo)準(zhǔn)MTD方案給藥來進(jìn)行的抗癌療法聯(lián)合或結(jié)合使用?？梢耘c本發(fā)明節(jié)拍式給藥方案聯(lián)合或結(jié)合使用的已確立的抗癌療法的實(shí)例包括但不限于紫杉醇、多西他賽、環(huán)磷酰胺、卡鉑、依托泊苷、多柔比星、伊立替康、托泊替康、長春堿、吉西他濱、替加氟/尿嘧啶組合、卡培他濱(capecitabine)、5-氟尿嘧啶、抗體例如曲妥單抗(herceptin)或西妥昔單抗(cetuximab)(a.k.a.，ERBITUXTM)、抗激素治療例如比卡魯胺或氟他胺和放射治療?！奥?lián)合或結(jié)合”是表示，本發(fā)明節(jié)拍式給藥方案與已確立的抗癌治療的標(biāo)準(zhǔn)MTD方案同時進(jìn)行，或者更優(yōu)選在誘導(dǎo)治療的療程之間進(jìn)行以保持誘導(dǎo)治療方案給患者產(chǎn)生的有益效果。當(dāng)在誘導(dǎo)治療的療程之間給藥時，目的是為了持續(xù)抑制腫瘤生長，同時不過度危害患者的健康或患者的能力以經(jīng)得起下一個誘導(dǎo)治療的療程。
在內(nèi)皮細(xì)胞中對式I口服紫杉烷的抗血管生成活性進(jìn)行了體外評價，并在腫瘤獨(dú)立的體內(nèi)血管生成模型中對其抗血管生成活性進(jìn)行了評價。使用了增殖和管形成測定來評價體外內(nèi)皮細(xì)胞活性。
為了評價體外活性，評價了與TAXOL(紫杉醇)相比，式I口服紫杉烷對涉及血管生成過程的內(nèi)皮細(xì)胞功能的影響。所評價的功能包括形成擴(kuò)張血管系統(tǒng)的腔的內(nèi)皮細(xì)胞的增殖。如表1所示，在兩個獨(dú)立的實(shí)驗(yàn)中，式I口服紫杉烷在抑制人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)增殖方面與TAXOL幾乎等效。還在大約與測定HUVEC所用相同的濃度下觀測了對腫瘤細(xì)胞系H3396的抑制，結(jié)果表明這些紫杉烷類藥物發(fā)揮了既抑制內(nèi)皮細(xì)胞也抑制腫瘤細(xì)胞增殖的細(xì)胞毒害作用。
表1抑制HUVEC和H3396增殖
還評價了對內(nèi)皮細(xì)胞的涉及它們增殖以在MATRIGEL上形成管的功能的影響。如表2所示，對在MATRIGEL上的管形成產(chǎn)生完全抑制的這兩種紫杉烷類藥物的最低濃度是0.0500μM。此外，對于這兩種紫杉烷類藥物，進(jìn)一步降低濃度仍然保持著抑制作用。
表2抑制在MATRIGEL上的HUVEC管形成
C＝完全；P＝部分因此，這些紫杉烷類藥物抑制血管生成的兩個關(guān)鍵過程，即內(nèi)皮細(xì)胞增殖和分化。所以它們的抗腫瘤作用不僅是其抗增殖活性的結(jié)果，而且是其對內(nèi)皮細(xì)胞其它功能的活性的結(jié)果。
還使用MATRIGEL栓在體內(nèi)評價這些紫杉烷類藥物。在這些實(shí)驗(yàn)中，血管生成反應(yīng)是通過在不同的治療和亞治療劑量評估在MATRIGEL栓中發(fā)現(xiàn)的內(nèi)皮細(xì)胞數(shù)目來測定的。對于TAXOL和式I口服紫杉烷，在栓中發(fā)現(xiàn)的內(nèi)皮細(xì)胞數(shù)目以劑量依賴方式與測試的劑量有關(guān)。在TAXOL的最大耐受劑量(MTD)-24mg/kg，當(dāng)按照該實(shí)驗(yàn)程序(每隔一天給藥一次，5天；q2dx5)與對照組比較時，觀測到細(xì)胞數(shù)目減少了50％以上。對于式I口服紫杉烷，在60mg/kg的MTD以及兩個較低劑量36mg/kg和18mg/kg，觀測到栓中的細(xì)胞數(shù)目減少了50％以上。因此，低至MTD的30％的劑量仍然能導(dǎo)致細(xì)胞數(shù)目減少50％以上。此外，這些紫杉烷類藥物對內(nèi)皮細(xì)胞數(shù)目的影響-雖然在較低的測試劑量下較弱-仍然導(dǎo)致形態(tài)缺損，這可通過與對照動物相比這些細(xì)胞構(gòu)成含有血紅細(xì)胞的管狀結(jié)構(gòu)的能力來證實(shí)。因此，在比最大耐受劑量低大約13倍的式I口服紫杉烷的劑量下，在體內(nèi)仍然觀察到了抗血管生成作用。
還證實(shí)了當(dāng)作為維持治療在誘導(dǎo)化療的療程之間給藥時，與靜脈內(nèi)給藥的紫杉醇相比，式I口服紫杉烷具有臨床前抗腫瘤效力。在這些實(shí)驗(yàn)中，攜帶乳房16/C鼠腫瘤的小鼠接受下列兩個一般治療方法中的任一個a)在通過18天的休息期間分隔的兩個連續(xù)日治療程序中靜脈內(nèi)施用紫杉醇，即qdx5；10，32；或b)在通過18天的休息期間分隔的兩個連續(xù)日治療程序中靜脈內(nèi)施用紫杉醇，并具有另外一個qdx5治療的療程，該治療是在第一個靜脈內(nèi)紫杉醇療程結(jié)束后一周開始口服施用式I口服紫杉烷，即紫杉醇qdx5；10，32+式I qdx5；21。用每種治療方法進(jìn)行劑量反應(yīng)滴定。用所選的治療方案獲得的總對數(shù)細(xì)胞殺死(LCK)值的總結(jié)如表3所示。
表3在攜帶階段性皮下乳房16/C癌的小鼠中，在靜脈內(nèi)紫杉醇治療之間進(jìn)行的口服紫杉烷藥物維持治療的效果
*在腫瘤植入后第88天評價的治愈率因此，對于單獨(dú)用紫杉醇獲得的最佳效果-10.1LCK，包括2/8的治愈率，使用可能的MTD方案，在兩個治療療程的每個療程期間施用30mg/kg/注射紫杉醇也獲得了類似效果。在任一個或兩個療程期間施用較少量的紫杉醇導(dǎo)致效力降低。與之相比，當(dāng)向一些靜脈內(nèi)紫杉醇治療療程中加入式I口服紫杉烷時，觀測到了總體效力的提高。在這些實(shí)驗(yàn)中，最佳聯(lián)合化療方案包括施用20mg/kg式I口服紫杉烷和每個紫杉醇療程靜脈內(nèi)注射20mg/kg紫杉醇。此外，與其中在治療療程之間的間歇發(fā)生腫瘤再生長的單獨(dú)紫杉醇治療不同，在紫杉醇療程之間施用式I口服紫杉烷抑制了，甚至是稍微減小了該聯(lián)合治療組的中值腫瘤大小。
在另外的實(shí)驗(yàn)中，將口服紫杉烷作為在使用靜脈內(nèi)紫杉醇的誘導(dǎo)治療的單獨(dú)療程后的維持治療給藥。對于僅接受靜脈內(nèi)紫杉醇的小鼠，MTD方案包括45mg/kg/注射，qdx5，iv，在腫瘤植入后第10天開始，產(chǎn)生了與下一個較低劑量30mg/kg/注射相同的最佳治療結(jié)果，1.9LCK。與之不同，其它組的小鼠接受使用紫杉醇的誘導(dǎo)化療，之后接受使用式I口服紫杉烷的兩個不同維持治療方案之一。表4提供了各種不同治療和從該實(shí)驗(yàn)獲得的結(jié)果的總結(jié)。
表4在攜帶階段性皮下乳房16/C癌的小鼠中，在用靜脈內(nèi)紫杉醇進(jìn)行誘導(dǎo)治療后用式I口服紫杉烷進(jìn)行維持治療的效果
*在腫瘤植入后第60天評價的治愈率在這些結(jié)果中，另外約4周的口服紫杉烷藥物的有益效果很清楚明顯。采用最大耐受聯(lián)合治療(紫杉醇+式I)方案，所達(dá)到的最佳LCK是5.5，經(jīng)判斷在終止實(shí)驗(yàn)時(第60天)有偶爾的治愈。更有效的口服紫杉烷藥物維持治療不僅阻止了腫瘤發(fā)展，而且還減輕了腫瘤負(fù)擔(dān)。
單獨(dú)用紫杉烷類藥物進(jìn)行的節(jié)拍式給藥方案也成功地抑制了小鼠中人腫瘤細(xì)胞的生長。在這些實(shí)驗(yàn)中，在抑制L2987人肺腫瘤生長方面，使用劑量在MTD以下的式I口服紫杉烷進(jìn)行的長時間的30天治療方案與常規(guī)使用的MTD和聯(lián)合治療方法相差很小。在給藥之前，植入L2987人肺腫瘤，并讓其生長到50-100mm3。常規(guī)使用的MTD和聯(lián)合治療方法包括依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)治療程序(q2dx5)，每次給藥口服遞送60mg/kg的劑量。雖然遞送300mg/kg的相同累積劑量，但是該節(jié)拍式給藥方案包括依據(jù)改變的程序(每隔一天給藥一次，15天；q2dx15)，每次給藥口服遞送20mg/kg的劑量。雖然用該標(biāo)準(zhǔn)治療程序觀察到了較強(qiáng)的抗腫瘤反應(yīng)，但是也觀察到了體重下降。相反，節(jié)拍式給藥方案也抑制了腫瘤生長，但未觀察到體重減輕。因此，用紫杉烷類藥物進(jìn)行的節(jié)拍式給藥提供了既安全又有效的抑制腫瘤生長的手段。
本領(lǐng)域技術(shù)人員通過閱讀本申請公開內(nèi)容應(yīng)當(dāng)理解，在這些實(shí)驗(yàn)中使用的節(jié)拍式給藥方案僅是為了達(dá)到最佳節(jié)拍式給藥方案而對標(biāo)準(zhǔn)MTD治療程序所作出的給藥間隔和持續(xù)期間方面的可能改變的一個實(shí)例。例如，對于式I口服紫杉烷，預(yù)期在抑制腫瘤生長方面有效的節(jié)拍式給藥方案包括但不限于每日給藥間隔、每隔一天給藥間隔和每周一次給藥。這些給藥方案延長到約一個月-至少一年。在這些示例性節(jié)拍式給藥方案中施用的藥物劑量分別可以為約0.25mg/M2-120mg/M2、0.50mg/M2-240mg/M2和1mg/M2-700mg/M2。此外，體外和體內(nèi)血管生成實(shí)驗(yàn)提供的證據(jù)表明，低于300mg/kg的累積劑量也能有效地抑制腫瘤生長。因此，式I口服紫杉烷的節(jié)拍式給藥方案還可以設(shè)計為遞送較低的累積劑量例如225mg/kg、150mg/kg、75mg/kg、37.5mg/kg和甚至是18.75mg/kg。此外，對于其它紫杉烷類藥物，可以依據(jù)本文提供的關(guān)于式I口服紫杉烷的教導(dǎo)，基于它們各自的標(biāo)準(zhǔn)MTD治療程序以及它們在體外和體內(nèi)血管生成測定例如下述實(shí)施例中描述的那些測定中的活性來例行設(shè)計它們的節(jié)拍式給藥方案。
本發(fā)明還涉及使用紫杉烷類藥物的節(jié)拍式給藥方案來抑制動物中腫瘤生長的方法。在優(yōu)選的實(shí)施方案中，在這些方法中使用的紫杉烷類藥物是可以口服生物利用的。優(yōu)選的口服紫杉烷類藥物是式I口服紫杉烷。然而，也可以使用其它紫杉烷類藥物和用于施用連續(xù)的低劑量該紫杉烷類藥物的其它手段。例如，本發(fā)明節(jié)拍式劑量的其它給藥方式包括但不限于經(jīng)由吸入給藥、皮內(nèi)給藥-即經(jīng)由透皮貼劑給藥、經(jīng)由栓劑直腸給藥、肌內(nèi)給藥、腹膜內(nèi)給藥、靜脈內(nèi)給藥和皮下給藥。
對于本發(fā)明的目的，“動物”意欲包括腫瘤在其中生長的任何動物，特別是人。
提供下述非限制性實(shí)施例來進(jìn)一步舉例說明本發(fā)明。
實(shí)施例實(shí)施例1HUVEC增殖從CLONETICS Inc.(San Diego，CA)購得原代人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)，并在第2-3代使用。使用在收獲細(xì)胞培養(yǎng)物之前24小時通過脈沖摻入到細(xì)胞中的3H-胸苷來測定增殖。使用人乳腺癌系H3396來評價化合物對腫瘤細(xì)胞的活性。將細(xì)胞(2×103)鋪在覆蓋于96孔平板上面的膠原IV上。24小時后，加入不同濃度的化合物。48小時后，加入3H-胸苷，并用24小時讓細(xì)胞中摻入該標(biāo)記物。將細(xì)胞提取物收獲到玻璃濾器上，并通過在β閃爍計數(shù)器中計數(shù)來測定摻入的放射性。從繪制成圖的數(shù)據(jù)外推出定義為使得3H-胸苷摻入被抑制50％時的藥物濃度的IC50。特定化合物對內(nèi)皮細(xì)胞的細(xì)胞選擇性抑制定義為當(dāng)與H3396腫瘤細(xì)胞系比較時，對HUVEC原代細(xì)胞培養(yǎng)物的抑制至少要大10倍。
實(shí)施例2體外管形成血管生成導(dǎo)致含有血紅細(xì)胞的功能血管網(wǎng)絡(luò)。已經(jīng)確立起了部分模擬該過程的體外測定。當(dāng)放置在MATRIGEL(CollaborativeResearch，Inc.)上時，原代內(nèi)皮細(xì)胞例如HUVEC形成排列成索帶的三維管網(wǎng)絡(luò)。在該測定系統(tǒng)中，管形成是在由用培養(yǎng)基(EBM-2；CLONETICS，Inc.)進(jìn)行了1∶1稀釋的MATRIGEL構(gòu)成的細(xì)胞外蛋白基質(zhì)上評價的，并讓其在37℃聚合60分鐘。將在24孔平板中的HUVEC(3.5×104/孔)在含有載體或測試化合物的0.5ml培養(yǎng)基中分布到聚合的MATRIGEL(0.3ml)上。鋪細(xì)胞后18小時，取出培養(yǎng)基，將培養(yǎng)物固定在福爾馬林中。在使用相差照明的反向顯微鏡(invertedmicroscope)上評價MATRIGEL上的管抑制。
為了測定化合物在該測定中的作用，開發(fā)了一種敘述方法。完全沒有抑制定義為當(dāng)化合物以給定濃度暴露時，致使不到1％鋪在平板上的HUVEC作為單細(xì)胞存在，其余細(xì)胞形成網(wǎng)絡(luò)或具有或不具有分枝的伸長的管狀結(jié)構(gòu)。部分抑制定義為具有大量單細(xì)胞的不完全網(wǎng)絡(luò)。完全抑制定義為99％以上的細(xì)胞作為單細(xì)胞存在，沒有伸長或分枝結(jié)構(gòu)。在評價測試化合物的作用之前，從治療組中存在的單細(xì)胞的總數(shù)目中減去用載體治療(對照)后存在的單細(xì)胞的數(shù)目以確立起背景效應(yīng)。
實(shí)施例3體內(nèi)模型和實(shí)驗(yàn)將通過在無胸腺(nu/nu)Balb/C小鼠中系列皮下傳代來維持的LX1人肺腫瘤碎片以約0.1mm3大小的小碎片形式皮下植入。在這些實(shí)驗(yàn)中，對于該腫瘤，腫瘤體積加倍時間是2.8天。當(dāng)腫瘤達(dá)到150-200mm3的大小時，將液體MATRIGEL皮下注射到腫瘤對側(cè)上。24小時后，以不同劑量和方案開始治療。在植入之前，依據(jù)Passiniti等人描述的方法(Lab.Invest.1992 67519-28)，通過將固化的MATRIGEL在冰上于4℃放置過夜來制備MATRIGEL。在液相并且在冰上時，分別以75ng/ml和300ng/ml的終濃度將VEGF和bFGF(Peprotech，Inc.Rocky Hill，NJ)加到MATRIGEL中。將這些生長因子的貯備液在PBS中制成濃度為10mg/ml的新鮮溶液。最后一次治療后24小時，通過頸脫臼法將動物殺死，從治療的動物和對照動物上切下來MATRIGEL栓，并在10％中性緩沖的福爾馬林中固定至少48小時。然后加工這些栓以進(jìn)行石蠟包埋，切成5μm厚的切片，然后用蘇木紫和曙紅染色，之后進(jìn)行定量分析。使用IMAGEPRO PLUS軟件(Media Cybernetics，Inc.，Silver Spring，MD)以20×的放大倍數(shù)定量測定栓中的內(nèi)皮細(xì)胞數(shù)目。每個栓使用50個視野以計數(shù)內(nèi)皮細(xì)胞的數(shù)目。累加細(xì)胞的數(shù)目并與對照進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)比較。
由化合物治療組相對于載體治療組，根據(jù)遷移進(jìn)入栓中的內(nèi)皮細(xì)胞的數(shù)目，在這些栓中評價血管生成。為了保證在治療劑量的化合物效力，植入腫瘤以在這些實(shí)驗(yàn)期間監(jiān)測這些化合物的抗腫瘤效力。
為了給藥，將TAXOL和式I口服紫杉烷懸浮在1∶1的CREMOPHOR/乙醇溶液中，并以含有任一化合物的10％CREMOPHOR和10％乙醇的終濃度給藥。對于TAXOL，使用標(biāo)準(zhǔn)鹽水作為稀釋劑，并靜脈內(nèi)給藥。對于式I口服紫杉烷，使用滅菌水作為稀釋劑，并通過口服管飼法給藥。實(shí)施例4聯(lián)合使用節(jié)拍式給藥與已確立的紫杉醇治療的臨床前實(shí)驗(yàn)將紫杉醇和式I口服紫杉烷溶解在CREMOPHOR/乙醇(50/50)中，然后在使用之前約1小時內(nèi)用水(式I)或鹽水(紫杉醇)稀釋。載體的各組分的終濃度如下CREMOPHOR 10％；乙醇10％；水80％。
從Harlan-Sprague Dawley(Indianapolis，IN)購得C3H常規(guī)小鼠，給其喂鼠食物，讓它們可自由攝取水。
將轉(zhuǎn)移性乳房16/C鼠癌每兩周一次在C3H鼠中增殖。通過用套針皮下插入腫瘤碎片來開始實(shí)驗(yàn)。
為了進(jìn)行體內(nèi)腫瘤測試，給C3H小鼠皮下植入乳房16/C腫瘤碎片。除了未治療的對照組以外，所有治療都是在腫瘤植入后第10天開始。所有組都含有8只小鼠。腫瘤每周測定1次或2次，并使用下述公式將尺寸轉(zhuǎn)化成重量重量(毫克)＝a×b2，其中a＝長度，且b＝寬度(毫米)。測定每組小鼠中腫瘤達(dá)到1克的中值時間(median time)，并計算相對于對照組(C)，治療組(T)達(dá)到1克腫瘤目標(biāo)大小的中值時間延遲。使用下述公式將這些腫瘤生長中的延遲(以天數(shù)表示的T-C值)進(jìn)一步轉(zhuǎn)化成總對數(shù)細(xì)胞殺死(LCK)值T-C/(對照組的腫瘤體積加倍時間，TVDT)×(3.32)。大于或等于1 LCK的LCK視為積極有效的結(jié)果。在每個實(shí)驗(yàn)結(jié)束時評價治愈，并且治愈定義為不存在大于35毫克的腫瘤塊。在完成所有治療后10×TVDT以上的時間終止實(shí)驗(yàn)。
實(shí)施例5在患有晚期惡性腫瘤的患者中以連續(xù)每天節(jié)拍式方案施用的式I口服紫杉烷的I期安全性、藥動學(xué)和劑量增加實(shí)驗(yàn)已經(jīng)設(shè)計了I期、開放標(biāo)記、單臂劑量增加實(shí)驗(yàn)，其中患有晚期或轉(zhuǎn)移性癌癥的患者組在門診病人基礎(chǔ)上每日口服接受劑量不斷增加的式I口服紫杉烷，以評價式I口服紫杉烷的安全性、劑量限制毒性和最佳生物活性劑量。還進(jìn)行藥動學(xué)和藥效學(xué)測定。該實(shí)驗(yàn)是用大約45-65名患者進(jìn)行的?？诜仙纪榈拈_始劑量水平是2mg的固定劑量，在連續(xù)基礎(chǔ)上每天空腹給藥一次。如下所示逐漸增加劑量。
在開始下一個劑量水平之前，所有患者都被觀察至少28天以被允許繼續(xù)參加實(shí)驗(yàn)。在該實(shí)驗(yàn)期間，患者可同時參與開放劑量水平。如果所有6名患者在當(dāng)前的劑量水平下已經(jīng)完成其第一個治療療程，并且在第一個療程期間少于1名患者表現(xiàn)出劑量限制性毒性，則允許增加到下一個劑量水平。
進(jìn)行藥動學(xué)和藥效學(xué)測定以及替代標(biāo)記物評價所需的血樣是從所有患者中采集的。評價內(nèi)皮細(xì)胞激活的血漿標(biāo)記物，包括sICAM-1、sVCAM-1、sET-1、sE-選擇蛋白和sMCP-1。還在同意的患者中采集血液和/或腫瘤樣本以進(jìn)行遺傳藥理學(xué)評價。
為了有資格參與該實(shí)驗(yàn)，患者必須滿足所有資格標(biāo)準(zhǔn)，包括但不限于1)在組織學(xué)和細(xì)胞學(xué)上證實(shí)的非血液惡性腫瘤診斷，對于該腫瘤已經(jīng)有了標(biāo)準(zhǔn)治療或者沒有任何已知的標(biāo)準(zhǔn)治療；2)可檢測的或不可檢測的疾病；3)足夠的骨髓、肝和腎功能；4)自最后一次免疫治療、放療或化療，包括紫杉烷類藥物治療以來至少過去了4周(對于亞硝基脲類或絲裂霉素-C，6周)；5)患者必須已經(jīng)從先前治療所致的毒性中恢復(fù)至基準(zhǔn)或1級水平；和6)Eastern CooperativeOncology Group行為狀態(tài)0-1。
毒性將依據(jù)National Institute of Cancer’s Common ToxicityCriteria Version 2.0來進(jìn)行評價。
式I口服紫杉烷的血漿藥動學(xué)樣本將在第1、8、15、22、29和56天從所有患者中采集，其后對于繼續(xù)治療的患者每4周進(jìn)行一次限制性采樣。
實(shí)施例6合成式I口服紫杉烷-3’-叔丁基-3’-N-叔丁氧基羰基-4-去乙酰基-3’-去苯基-3’-N-去苯甲?；?4-O-甲氧基羰基紫杉醇制備(±)-順式-4-叔丁基-1-叔丁氧基羰基-3-三乙基甲硅烷氧基氮雜環(huán)丁烷-2-酮 在室溫將三甲基乙醛(20.3mL，1.25當(dāng)量)加到對甲氧基苯胺(18.4g，0.150mol)和無水Na2SO4(150g)在無水二氯甲烷(250mL)內(nèi)的攪拌著的懸浮液中。2小時后，將該反應(yīng)混合物過濾，用另外的無水二氯甲烷洗滌固體。將溶劑從濾液中除去，把結(jié)晶殘余物溶解在無水二氯甲烷(750mL)中，并置于氮?dú)夥障?。加入三乙?48.0mL，2.3當(dāng)量)，將該反應(yīng)冷卻至-78℃。滴加芐氧基乙酰氯(27.2mL，1.15當(dāng)量)，然后讓該反應(yīng)溫?zé)嶂潦覝亍?4小時后，將該混合物依次用0.5MHCl(2次)、飽和碳酸氫鈉水溶液和鹽水洗滌，并干燥(Na2SO4)。除去溶劑，將殘余物通過硅膠柱色譜純化(用含有0-20％EtOAc的20％二氯甲烷在己烷中的混合物進(jìn)行梯度洗脫)，獲得了(±)-順式-4-叔丁基-3-芐氧基-1-對甲氧基芐基氮雜環(huán)丁烷酮，為固體結(jié)晶(46.9g，92％)
1H NMR(CDCl3)1.09(s，9H)，3.81(s，3H)，4.15(d，1H，J＝5.5Hz)，4.77(d，1H，J＝11.9Hz)，4.81(d，1H，J＝5.5Hz)，5.03(d，1H，J＝11.9Hz)，6.87-7.43(m，9Hz)；LRMS(ESI)340([M+H]+).
用1小時將硝酸高鈰銨(60.4g，3.6當(dāng)量)在900mL水中的溶液加到置于冰浴內(nèi)的上述氮雜環(huán)丁烷酮(10.38g，30.6mmol)在乙腈(600mL)中的充分?jǐn)嚢柚娜芤褐?。然后用EtOAc萃取(2次)該反應(yīng)，將合并的有機(jī)萃取液依次用飽和碳酸氫鈉水溶液(2次)、20％NaHSO3水溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液和鹽水洗滌。干燥(Na2SO4)后，除去溶劑，將殘余物通過硅膠柱色譜純化(用含有10-40％EtOAc的己烷部分進(jìn)行梯度洗脫)，獲得了5.64g稍微不純的(±)-順式-3-芐氧基-4-叔丁基氮雜環(huán)丁烷-2-酮1H NMR(CDCl3)1.04(s，9H)，3.51(d，1H，J＝5.2Hz)，4.71(m，2H)，4.96(d，1H，J＝11.9Hz)，6.10(brs，1H)，7.35(m，5H).
將該產(chǎn)物(5.54g，23.8mmol)和2.5g 10％披鈀炭在無水EtOH(100mL)中的懸浮液氫化(34psi H2，帕爾裝置)23小時。再加入2g這種鈀催化劑，并在50psi H2下繼續(xù)氫化17小時。通過過濾除去催化劑，將溶劑從濾液中除去，獲得了(±)-順式-3-羥基-4-(叔丁基)氮雜環(huán)丁烷-2-酮粗產(chǎn)物1H NMR(CDCl3+1drop D2O)1.05(s，9H)，3.48(d，1H，J＝5.0Hz)，4.98(d，1H，J＝5.0Hz).
將該產(chǎn)物溶解在干燥N，N-二甲基甲酰胺(40mL)中，并加入咪唑(3.24g，2當(dāng)量)和三乙基甲硅烷基氯(4.0mL，1當(dāng)量)。10分鐘后，將該反應(yīng)在水與EtOAc和己烷混合物(1∶1)之間分配。將有機(jī)相用水(2次)和鹽水洗滌，然后干燥(Na2SO4)。除去溶劑，將殘余物通過硅膠柱色譜純化(用20-25％EtOAc在己烷中的混合物進(jìn)行梯度洗脫)，獲得了(±)-順式-4-叔丁基-3-三乙基甲硅烷氧基氮雜環(huán)丁烷-2-酮(3.86g)1H NMR(CDCl3)0.70(m，6H)，0.98(m，18H)，3.39(d，1H，J＝5.0Hz)，4.88(dd，1H，J＝2.1，5.0Hz)，6.08(brs，1H).
將該氮雜環(huán)丁烷酮(2.04g，7.92mmol)、二異丙基乙基胺(1.66mL，1.2當(dāng)量)、二碳酸二叔丁酯(1.90g，1.1當(dāng)量)和對二甲基氨基吡啶(194mg，0.2當(dāng)量)在干燥二氯甲烷(24mL)中的溶液于室溫攪拌3小時。用二氯甲烷將該反應(yīng)混合物稀釋，用鹽水洗滌，并干燥(Na2SO4)。除去溶劑，然后通過硅膠柱色譜純化(用0-20％EtOAc在己烷中的混合物進(jìn)行梯度洗脫)，獲得了2.71g(96％)本標(biāo)題化合物，為油狀物1H NMR(CDCl3)0.70(m，6H)，1.00(m，9H)，1.09(s，9H)，1.53(s，9H)，3.90(d，1H，J＝6.5Hz)，4.93(d，1H，J＝6.5Hz).
制備漿果赤霉素(baccatin)衍生物A 在環(huán)境溫度向10-去乙酰基漿果赤霉素(47.4g，87mmol)在無水N，N-二甲基甲酰胺(DMF)(500mL)內(nèi)的溶液中加入咪唑(47g，691mmol)。將該溶液攪拌10-15分鐘直至觀察到澄清溶液。向該反應(yīng)混合物中滴加二異丙基二氯甲硅烷(58mL，322mmol)。將該反應(yīng)混合物在環(huán)境溫度攪拌16小時。向該溶液中再加入一定量的二異丙基二氯甲硅烷(6mL)，并將該反應(yīng)混合物攪拌60分鐘。此時的HPLC表明反應(yīng)已完全。向該混合物中加入甲醇(36mL)，將該溶液攪拌60分鐘。停止反應(yīng)，用叔丁基甲基酮(TBME)(500mL)和水(200mL)的混合物稀釋。分離各層，有機(jī)相用鹽水(250mL)洗滌，干燥(硫酸鈉)并蒸發(fā)，獲得了三甲硅烷基化的漿果赤霉素衍生物A(91g，產(chǎn)率＞100％)，為白色非晶形化合物，其不用進(jìn)一步純化直接用于下一步驟。
LRMS(ESI)M+C50H84O13Si3的計算值977，實(shí)測值977。
制備漿果赤霉素衍生物B 在0℃將咪唑(22g，320mmol)加到漿果赤霉素衍生物A(90g，92mmol)在DMF(500mL)內(nèi)的溶液中。在0℃滴加二甲基二氯甲硅烷(35mL，320mmol)。在此時觀察到化合物沉淀。將該反應(yīng)混合物(漿液)在0℃攪拌0.5小時。過濾出固體，用冷的DMF(3×150mL)洗滌。風(fēng)干后，將固體再溶解在TBME(700mL)中，將該溶液用水(3×200mL)、鹽水(250mL)洗滌，并干燥(硫酸鈉)。將該溶液經(jīng)由短的二氧化硅墊過濾。在真空下除去溶劑，以77％的產(chǎn)率獲得了B(70g)。
LRMS(ESI)M+C50H90O13Si4的計算值1035，實(shí)測值1035。
制備漿果赤霉素衍生物C
在-34℃，用10分鐘向B(66.3g，64mmol)在甲苯(680mL)內(nèi)的攪拌著的溶液中滴加Red-Al(50mL，160mmol，65wt％氫化二(2-甲氧基乙氧基)鋁鈉在甲苯中的溶液)。將該反應(yīng)混合物溫?zé)嶂?25℃，攪拌1.5小時。向該反應(yīng)混合物中滴加甲醇(62mL)，同時將內(nèi)溫保持在-20至-25℃。用TBME(500mL)將該溶液稀釋，然后加入1N氫氧化鈉溶液(60mL)和鹽水(60mL)。將該溶液攪拌30分鐘。將硅藻土(12g)加到該混合物中，攪拌10分鐘，并經(jīng)由硅藻土墊過濾。分離各層。將有機(jī)層用水、鹽水洗滌，并干燥(硫酸鈉)。讓該溶液通過短的二氧化硅墊，然后除去溶劑。以97％的產(chǎn)率獲得了該化合物(62g)，為白色固體。
LRMS(ESI)M+C50H88O12Si4的計算值993，實(shí)測值993。
制備漿果赤霉素衍生物D 在氬氣氛下，于-60℃向漿果赤霉素衍生物C(62g，62mmol)在無水四氫呋喃(THF)(600mL)內(nèi)的溶液中滴加二(三甲基甲硅烷基)氨基鋰(125mL，125mmol，1M的THF溶液)。將該溶液攪拌15分鐘，然后加入氨甲酸甲酯(9mL，116mmol)；將該溶液的內(nèi)溫保持在-60℃。將該反應(yīng)緩慢地溫?zé)嶂?℃，并將該混合物攪拌3小時。反應(yīng)完全后，加入飽和氯化銨(300mL)。用TBME(100mL)萃取該反應(yīng)混合物。將有機(jī)層用飽和氯化銨(200mL)、水(200mL)和鹽水(200mL)洗滌，干燥(硫酸鈉)并蒸發(fā)，獲得了D，為油狀物(67g，＞100％)。該粗產(chǎn)物不用進(jìn)一步純化直接用于下一步驟。
LRMS(ESI)M+C52H90O14Si4的計算值1051，實(shí)測值1051。
制備漿果赤霉素衍生物E
在環(huán)境溫度，向漿果赤霉素衍生物D(62g，59mmol)在干燥THF(260mL)內(nèi)的溶液中加入三乙胺氫氟酸復(fù)合物(56mL，344mmol)。將該反應(yīng)攪拌3小時。周乙酸乙酯(350mL)稀釋該反應(yīng)混合物，用水(200mL)、鹽水(200mL)洗滌，干燥(硫酸鈉)并蒸發(fā)，獲得了E(43g，粗產(chǎn)物產(chǎn)率＞100％)。將該粗產(chǎn)物在熱乙酸乙酯(350mL)與己烷(50mL)的混合物中再漿化，以90％的產(chǎn)率獲得了純的E。
LRMS(ESI)M+C29H36O11的計算值560，實(shí)測值560。
制備漿果赤霉素衍生物F 在-65℃、氬氣氛下，向漿果赤霉素衍生物E(32g，57mmol)和咪唑(11.7g，172mmol)在DMF(220mL)內(nèi)的攪拌著的溶液中加入二異丙基二氯甲硅烷(26.8mL)。將該反應(yīng)混合物的溫度保持在-60℃，并將該混合物攪拌2小時。反應(yīng)完全(HPLC)后，加入咪唑在甲醇中的溶液(溶解在35mL甲醇中的11.7g咪唑)，并將該溶液在0℃攪拌30分鐘。用TBME(500mL)萃取該混合物。將有機(jī)相用水(4×150mL)洗滌，干燥(硫酸鈉)并蒸發(fā)，獲得了F的粗產(chǎn)物(45g)。將該粗產(chǎn)物進(jìn)一步溶解在乙腈(150mL)中，并用己烷(3×100mL)洗滌該溶液。除去乙腈，獲得了純的F，為白色固體(34g，產(chǎn)率為84％)。
LRMS(ESI)M+C36H52O12Si的計算值704，實(shí)測值704。
制備4-去乙?；?7-[二異丙基(甲氧基)]甲硅烷氧基-4-甲氧基羰基漿果赤霉素 在-43℃，向漿果赤霉素衍生物F(33.2g，47mmol)在DMF(200mL)內(nèi)的溶液中滴加二(三甲基甲硅烷基)氨基鋰(61.2mL，61.2mmol，1M的THF溶液)。將該反應(yīng)混合物攪拌15分鐘，然后加入乙酸酐(5.8mL，63mmol)。將該反應(yīng)混合物在-40℃攪拌30分鐘。加入乙酸(3.6mL)，并移去冷卻浴。用TBME(300mL)萃取該反應(yīng)混合物。將有機(jī)層分離并用水(3×150mL)和鹽水(150mL)洗滌，干燥(硫酸鈉)并蒸發(fā)，獲得了粗產(chǎn)物。通過用THF∶庚烷(1∶6)的混合物結(jié)晶來純化該化合物。40g粗產(chǎn)物經(jīng)純化獲得了21g結(jié)晶的本標(biāo)題產(chǎn)物(產(chǎn)率為60％)。
LRMS(ESI)M+C38H54O13Si的計算值746，實(shí)測值746。
制備3’-叔丁基-3’-N-叔丁氧基羰基-4-去乙?；?3’-去苯基-3’-N-去苯甲?；?4-O-甲氧基羰基紫杉醇(式I口服紫杉烷)
在氮?dú)夥障?，?±)-順式-4-叔丁基-1-(叔丁氧基羰基)-3-三乙基甲硅烷氧基氮雜環(huán)丁烷-2-酮(2.71g，5當(dāng)量)和4-去乙?；?7-[二異丙基(甲氧基)]甲硅烷氧基-4-甲氧基羰基漿果赤霉素(1.13g，1.52mmol)在干燥THF(100mL)中的溶液冷卻至-50℃，加入二(三甲基甲硅烷基)氨基鋰(1.97mL，1.3當(dāng)量，1.0M的THF溶液)。5分鐘后，將該反應(yīng)混合物轉(zhuǎn)移到冷卻浴中，在-35至-30℃保持20小時，然后在-25℃保持24小時。用飽和氯化銨水溶液終止該反應(yīng)，并用EtOAc與己烷(1∶1)的混合物萃取。用鹽水洗滌有機(jī)萃取液，并將其干燥(Na2SO4)。除去溶劑，通過色譜法(在6mm硅膠板上的徑向色譜；用5-20％EtOAc在己烷中的混合物進(jìn)行梯度洗脫)純化殘余物，獲得了1.55g 3’-叔丁基-3’-N-叔丁氧基羰基-7-[二異丙基(甲氧基)]甲硅烷氧基-4-去乙?；?3’-去苯基-3’-N-去苯甲?；?4-O-甲氧基羰基-2’-三乙基甲硅烷氧基紫杉醇，為2’，3’-非對映體的混合物。將該混合物溶解在干燥THF(60mL)中，加入三乙胺三氫氟酸鹽(0.92mL，4當(dāng)量)。在室溫保持22小時后，用飽和碳酸氫鈉水溶液將該反應(yīng)混合物中和，然后用EtOAc萃取。用鹽水洗滌有機(jī)萃取液，干燥(Na2SO4)，除去溶劑。通過色譜法(徑向色譜；在2mm硅膠板上；用10-50％EtOAc在己烷中的混合物進(jìn)行梯度洗脫)純化殘余物，獲得了(按洗脫次序)210mg(18％)2’S，3’R-3’-叔丁基-3’-N-叔丁氧基羰基-4-去乙酰基-3’-去苯基-3’-N-去苯甲?；?4-O-甲氧基羰基紫杉醇{1H NMR(CDCl3)1.04(s，9H)，1.13(s，3H)，1.20(s，3H)，1.37(s，9H)，1.65(s，1H)，1.66(s，3H)，1.84-1.93(m，2H)，2.17(s，3H)，2.25(s，3H)，2,55(m，3H)，3.00(d，1H，J＝6.5Hz)，3.74(d，1H，J＝10.8Hz)，3.79(d，1H，J＝6.9Hz)，3.92(s，3H)，4.16(d，1H，J＝8.5Hz)，4.33(d，1H，J＝8.5Hz)，4.42(m，1H)，4.54(d，1H，J＝6.5Hz)4.87(d，1H，J＝10.6Hz)，5.01(d，1H，J＝7.7Hz)，5.68(d，1H，J＝7.0Hz)，5.76(m，1H)，6.32(s，1H)，7.44-8.05(m，5H)；LRMS(ESI)846[(M+H)+]}和668mg(56％)本標(biāo)題化合物
{1H NMR(CDCl3)1.07(s，9H)，1.14(s，3H)，1.24(s，3H)，1.33(s，9H)，1.66(s，4H)，2.23(s，3H)，2.38-2.59(m，4H)，3.11(d，1H，J＝5.8Hz)，3.77(d，1H，J＝11.1Hz)，3.82(d，1H，J＝7.0Hz)，3.96(s，3H)，4.20(d，1H，J＝8.6Hz)，4.33(d，1H，J＝8.6Hz)，4.39(m，1H)，4.53(d，1H，J＝5.4Hz)4.88(d，1H，J＝10.6Hz)，4.98(d，1H，J＝7.9Hz)，5.69(d，1H，J＝7.1Hz)，6.03(m，1H)，6.28(s，1H)，7.40-8.11(m，5H)；LRMS(ESI)846[(M+H)+]}.
權(quán)利要求
1.紫杉烷類藥物的節(jié)拍式給藥方案，包括以已確立的該紫杉烷類藥物的最大耐受劑量以下的劑量施用紫杉烷類藥物，其中經(jīng)過重復(fù)給藥后，所述給藥方案能抑制腫瘤生長，并且與施用最大耐受劑量的紫杉烷類藥物相比，產(chǎn)生較小的毒副作用。
2.權(quán)利要求1的節(jié)拍式給藥方案，其中所述紫杉烷類藥物是可口服生物利用的。
3.權(quán)利要求2的節(jié)拍式給藥方案，其中所述紫杉烷類藥物是式I口服紫杉烷。
4.抑制腫瘤細(xì)胞生長的方法，包括通過節(jié)拍式給藥方案讓腫瘤細(xì)胞暴露于紫杉烷類藥物。
5.抑制動物中腫瘤生長的方法，包括通過節(jié)拍式給藥方案給動物施用紫杉烷類藥物。
6.抑制動物中腫瘤生長的方法，包括給動物聯(lián)合使用下列治療通過標(biāo)準(zhǔn)最大耐受劑量方案給動物施以已確立的抗癌治療，和給動物采用紫杉烷類藥物的節(jié)拍式給藥方案。
7.權(quán)利要求4、5或6的方法，其中所述紫杉烷類藥物是可口服生物利用的。
8.權(quán)利要求7的節(jié)拍式給藥方案，其中所述紫杉烷類藥物是式I口服紫杉烷。
全文摘要
本申請?zhí)峁┝艘种苿游镏心[瘤生長的紫杉烷類藥物的節(jié)拍式給藥方案。
文檔編號A61K45/06GK1533273SQ02809030
公開日2004年9月29日 申請日期2002年2月26日 優(yōu)先權(quán)日2001年2月28日
發(fā)明者J·法尼奧利, W·C·羅斯, P·特雷爾, J 法尼奧利, 羅斯, 錐 申請人:布里斯托爾-邁爾斯斯奎布公司