專利名稱：作為抗血管生成劑的新的苯鄰二甲酰亞胺模擬物的合成和評估的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及新的取代的苯鄰二甲酰亞胺和異喹啉衍生物以及這些衍生物作為治療藥物的用途。已發(fā)現這些化合物具有抗血管生成活性。
背景技術：
不適當的血管生成是許多疾病狀態(tài)的原因或加重的因素。例如，與年齡相關的視網膜黃斑變性(ARMD)指竊走中心視力而留下周邊視力完整的疾病。所述疾病可以以幾種形式出現并影響到大約1/5的65歲以上年齡的人以及1/4的75歲以上的人。這相當于大約2千萬美國人。
視網膜黃斑變性有兩種類型干性視網膜黃斑變性和濕性視網膜黃斑變性。干性類型，其中黃斑細胞緩慢開始衰變，90％的黃斑變性病例診斷為此類型。它可以發(fā)生在一只眼或雙眼。濕性類型，盡管它僅占所述病例的10％，但可以導致90％的人失明。對于濕性類型更糟的情況是，病人開始在黃斑后面有不正常的血管生長。這些血管非常脆弱并滲出液體和血液(由此稱為‘濕性’黃斑變性)，引起對黃斑的快速損壞。至今沒有特效的藥物治療。
由新血管生成(新血管形成)導致的ARMD的濕性類型和其它眼部疾病是導致失明的主要原因之一。因此，特別需要發(fā)現新的藥物以便治療所述眼疾病。一種方法是給予藥物抗血管生成劑以預防不適當的新血管形成。
新的抗血管生成化合物也具有抗癌藥物的效用。惡性腫瘤是以腫瘤的生長和擴散為特征。在該疾病的發(fā)展過程中的一個重要因素是血管生成，一個其中毛細血管在有序事件中生長的復雜過程。一旦腫瘤開始生長，腫瘤細胞群的每一次增加必然是新的毛細血管增加在前，所述毛細血管集中在腫瘤上并給細胞提供氧和營養(yǎng)。因此，只要防止激活伴隨的血管生長過程，腫瘤可以是對它們所在的組織無害和受到限制的。由于在腫瘤形成過程中血管生長依賴步驟為所有病因學的實體腫瘤所共享，因此，能夠抑制與腫瘤相關的血管生成是對抗癌癥的有希望的方法。
實驗證據的實質性部分支持這樣的假設，即腫瘤血管生成是實體腫瘤生長和轉移的基礎[Folkman，J.Natl.Cancer Inst.，第82卷，第4-6頁(1989)；N.Weidner等，Amer.J.Pathol.，第143卷，第401-409頁(1993)]。的確，大多數實體腫瘤臨床不易發(fā)現直至出現新生血管形成，在實體腫瘤中的新生血管形成是由一個或更多個生成血管的因素引起。
另外，血管生成在其它一些病理過程中也是重要的，包括關節(jié)炎、銀屑病、糖尿病性視網膜病、慢性炎癥、硬皮病、血管瘤、晶狀體后纖維組織形成和血友病者關節(jié)中不正常的毛細血管增生、延長的經期和出血，以及其它女性生殖系統(tǒng)的疾病。
因此，需要一些具有如抗血管生成劑活性并且可以安全給予病人以便治療與生成血管有關的疾病的化合物。本發(fā)明涉及一種組合物，它包含抗-血管生成化合物，用于治療與血管生成有關的疾病以及惡性腫瘤，包括抑制原發(fā)性腫瘤的生長、腫瘤的發(fā)展和轉移。更具體地說，本發(fā)明涉及沙利度胺衍生物以及它們作為抗血管生成組合物的用途。
沙利度胺最初作為鎮(zhèn)靜藥，然而，當發(fā)現它是潛在的引起嚴重的胎兒缺陷、特別是影響肢體發(fā)育的致畸胎藥后，它被停止使用。由沙利度胺導致的肢體畸形(肢體缺陷)是因為抑制了在發(fā)育胎兒肢體胚基中的血管生長。盡管其影響的是形成血管(影響毛細血管床的形成)，但研究已證實沙利度胺也抗血管生成(影響從先前存在的血管生長部位上形成新的血管床)。當非妊娠的成人服用時，沙利度胺是相對無毒的并且現階段在第二期臨床實驗中作為潛在的抗癌藥并用于治療血管性眼疾病如糖尿病性視網膜病、早產兒的視網膜病以及視網膜黃斑變性。
Folkman等(PNAS，91(9)4082-5，1994)已報道沙利度胺具有明顯的抗血管生成效果。已有報道(Kruse等，Graefes Archive for Clinical&Experimental Ophthalmology.236(6)461-6，1998)沙利度胺對通過血管內皮生長因子(VEGF)引起的角膜血管生成具有作用。在Kruse等所述中，在兔體內通過載有500或750ng的VEGF的基質內顆粒引起角膜新血管形成。動物接受每天兩次喂飼200mg/kg的沙利度胺，治療第五天后產生角膜血管生成的統(tǒng)計學上有意義的抑制(P＜0.0001)。該實驗表明沙利度胺對于VEGF誘導的眼新血管生長具有明顯的抗血管生成效果。
在堿性成纖維細胞生長因子(bFGF)誘導的兔角膜微囊測定和在小鼠模型的口服測定中，也已經證實了沙利度胺對于血管生成的抑制效果(Joussen等，Graefes Archive for Clinical & ExperimentalOphthalmology.237(12)952-61，1999和Kenyon等，Experimental EyeResearch.64(6)971-8，1997)。已報道沙利度胺和沙利度胺類似物(cc-1069)抑制體外內皮細胞增殖(該細胞構成血管系統(tǒng))。所述研究的結果揭示在用沙利度胺和/或cc-1069處理的培養(yǎng)物中內皮細胞增殖明顯減少。總而言之，這些數據支持沙利度胺在抗血管生成潛能和抑制內皮細胞增殖之間的密切相關性。
研究顯示，沙利度胺的S(-)-對映體在VEGF誘導和bFGF誘導的角膜新血管形成中具有最強的抗-血管生成活性。該對映體選擇性傾向于支持可能的受體介導的機理。本發(fā)明涉及新的一系列沙利度胺類似物以及這些類似物作為血管生成抑制劑的用途。更具體地說，本發(fā)明的沙利度胺類似物沒有沙利度胺的哌啶-2，6-二酮部分。
本發(fā)明概述本發(fā)明涉及具有如下通用結構的化合物 和 其中R1選自H、鹵代基、烷基、鹵代烷基、-NR5R6、羥基和烷氧基；R2選自任選取代的二環(huán)、任選取代的芳基和 R3選自烷基、苯基、取代的苯基、芐基和取代的芐基；R8選自H或C1-C6烷基，或者R8和R3與相鄰的環(huán)一起可以形成任選取代的5-或6-元芳基；R5和R6獨立是H或C1-C8烷基；R19是任選取代的芳基；以及m是0-6。本發(fā)明也涉及含有這些化合物的組合物以及這些組合物抑制血管生成的用途。
本發(fā)明詳述在本發(fā)明的敘述中，以下術語將按照以下所述的定義使用。
如在本文中使用的術語“純化的”和類似術語指基本上不含有與天然或自然環(huán)境下通常與其有關的污染物的分子或化合物的分離形式。
如在本文中使用的術語“治療”包括特定疾病或病癥的預防，或與特定疾病或病癥有關癥狀的緩解和/或預防或消除所述癥狀。
如在本文中使用的術語“鹵代基”或“鹵代基”指Cl、Br、F、I。特別優(yōu)選的鹵代基包括Cl、Br和F。本文中所使用的術語“鹵代烷基”指具有至少一個鹵代基取代基的C1-C4烷基例如氯代甲基、氟代乙基或三氟代甲基等。
如在本文中使用的術語“C1-Cn烷基”其中n是一個整數，代表具有1到特定數目碳原子的支鏈或直鏈烷基。典型的C1-C6烷基包括、但不限于甲基、乙基、正-丙基、異-丙基、丁基、異-丁基、仲-丁基、叔-丁基、戊基、己基等。
如在本文中使用的術語“C2-Cn鏈烯基”其中n是一個整數，指具有2到特定數目的碳原子和至少一個雙鍵的烯屬不飽和支鏈或直鏈基團。此類基團的實例包括、但不限于1-丙烯基、2-丙烯基、1，3-丁二烯基、1-丁烯基、己烯基、戊烯基等。
術語“C2-Cn炔基”其中n是一個整數，指具有2到特定數目的碳原子和至少一個三鍵的不飽和支鏈或直鏈基團。此類基團的實例包括、但不限于1-丙炔基、2-丙炔基、1-丁炔基、2-丁炔基、1-戊炔基等。
術語“C3-Cn環(huán)烷基”其中n是一個整數，指環(huán)狀非芳族基團，例如C3-C8環(huán)烷基，代表環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基、環(huán)庚基和環(huán)辛基。
如在本文中使用的術語“低級烷基”指含有1-8個碳原子的支鏈或直鏈烷基，包括甲基、乙基、丙基、異丙基、正-丁基、叔-丁基、新戊基等。
如在本文中使用的術語“任選取代的”指從0-4個取代基，其中所述取代基每一個為獨立選擇的。所述獨立選擇的每一個取代基可以與其它取代基相同或不相同。
如在本文中使用的術語“芳基”指具有一個或兩個芳族環(huán)的單或二環(huán)碳環(huán)系統(tǒng)，包括但不限于苯基、芐基、萘基、四氫萘基、2，3-二氫化茚基、茚基等?！叭芜x取代的芳基”包括具有0-4個取代基的芳基化合物，以及“取代的芳基”包括具有1-3個取代基的芳基化合物，其中所述取代基包括烷基、鹵代基或氨基取代基。術語(C5-C8烷基)芳基指任何通過烷基連接到母體部分的芳基基團。
術語“雜環(huán)基團”指含有1-3個雜原子的單或雙碳環(huán)的環(huán)系統(tǒng)，其中所述雜原子選自氧、硫和氮。
如在本文中使用的術語“雜芳基”指含有1-2個芳族環(huán)的單或二環(huán)碳環(huán)的環(huán)系統(tǒng)，所述芳族環(huán)含有1-3個雜原子，包括但不限于呋喃基、噻吩基、吡啶基等。
術語“二環(huán)的”代表不飽和或飽和穩(wěn)定的7-到12-元橋接或稠合的二環(huán)的碳環(huán)。所述二環(huán)可以連接在任何碳原子上以提供一個穩(wěn)定結構。所述術語包括但不限于萘基、二環(huán)己基、二環(huán)己烯基等。
如在本文中使用的術語“藥學上可接受的載體”包括任何標準藥用載體，例如磷酸緩沖鹽溶液、水和乳劑如油/水或水/油乳劑，以及不同類型的潤濕劑。
如在本文中使用，“有效量”指足以產生所需效果的量。例如鄰苯二酰亞胺衍生物的有效量為在體內或體外足以減少內皮細胞增殖、或降低血管生長速度的化合物的量。
術語“胃腸外”指不通過消化道而是通過一些其它途徑如皮下、肌內、脊柱內或靜脈內給藥。
如在本文中使用的術語“血管生成”指新的血管增殖到組織或器官中。
如在本文中使用的術語“血管生成有關的”疾病或病癥指所述疾病狀況或病癥由不適當的或過量的血管生成引起或使其加重的疾病。例如，被認為與血管生成有關的疾病包括癌癥以及血管性眼疾病如糖尿病性視網膜病、早產兒視網膜病以及黃斑變性。
本發(fā)明的具有一個或更多個不對稱碳原子的化合物可以存在任選純的對映體，或任選純的非對映體，以及對映體的混合物，非對映體的混合物和這些立體異構體的外消旋混合物。本發(fā)明包括所有這些異構體以及它們的混合物的范圍。
本發(fā)明本發(fā)明涉及預期具有抗血管生成活性的新的取代的鄰苯二甲酰亞胺和異喹啉衍生物系列。尤其是，本發(fā)明涉及沙利度胺衍生物系列，其中所述哌啶-2，6-二酮部分已由其它取代基如以下所示取代基取代 根據一種實施方案，提供具有選自以下基團的通式結構的新的化合物
和 其中R1選自H、鹵代基、C1-C8烷基、C1-C8鹵代烷基、-NR5R7、羥基和C1-C8烷氧基；R2選自任選取代的二環(huán)、任選取代的芳基，和 R3選自 和 R8選自H、C1-C8烷基，或R3和R8與相鄰的環(huán)一起可以形成任選取代的5-或6-元芳族環(huán)；R10和R11獨立選自H、鹵代基、C1-C8烷基、C1-C8鹵代烷基、-NR5R7、羥基和C1-C8烷氧基或R10和R11與相鄰的環(huán)一起可以形成任選取代的5-或6-元芳族環(huán)；R5和R7獨立是H，或C1-C8烷基；R6選自H、或C1-C12烷基、C2-C8鏈烯基和C2-C8炔基；n是0-2的一個整數；以及m是0-6的一個整數。
根據一個實施方案，抗血管生成化合物具有以下通式結構
和 其中R1選自H、鹵代基、C1-C4烷基、羧基和C1-C8烷氧基；R2選自 和 R3選自 和 R8選自H、C1-C8烷基，或R3和R8與相鄰的環(huán)一起可以形成任選取代的5-或6-元雜芳基；R4選自H、C1-C8烷基、苯基和芐基；R13和R9獨立選自H、鹵代基和C1-C8烷氧基或R13和R9與相鄰的環(huán)一起可以形成任選取代的C5-C6環(huán)烷基或任選取代的C5-C6芳族環(huán)；R10和R11獨立選自H、鹵代基、C1-C8烷基、C1-C8鹵代烷基、-NR5R7、羥基和C1-C8烷氧基或R10和R11與相鄰的環(huán)一起可以形成任選取代的C5-C6環(huán)烷基或任選取代的C5-C6芳族環(huán)；R5和R7獨立選自H、或C1-C8烷基；
R6選自H、或C1-C12烷基、C2-C8鏈烯基和C2-C8炔基；R12選自H、鹵代基、C1-C4鹵代烷基、-NR5R6、C1-C8烷基、羥基和C1-C8烷氧基；n是1-3的一個整數和m是0-6的一個整數。在一個實施方案中，R1、R4和R8每一個是H，n是1和m是0。
在一個實施方案中，抗血管生成化合物具有以下通式結構 或 其中R1選自H、鹵代基、C1-C8烷基、羥基和C1-C8烷氧基和R3選自 和 其中R6為H或C1-C8烷基；R10和R11獨立選自H、鹵代基、C1-C8烷基、C1-C8鹵代烷基、-NR5R7、羥基和C1-C8烷氧基，或R10和R11與相鄰的環(huán)一起可以形成任選取代的C5-C6環(huán)烷基或C5-C6芳族環(huán)；R5和R7獨立為H或C1-C8烷基；以及m是0-6的一個整數。在一個實施方案中，R1是H和R3選自苯基；
和 其中R6是H或C1-C8烷基；R10和R11獨立選自H、鹵代基、C1-C8烷基、C1-C8鹵代烷基、-NR5R7、羥基和C1-C8烷氧基以及R5和R7獨立是H、或C1-C8烷基。
在一個實施方案中，抗血管生成化合物具有以下通式結構 其中R1選自H、鹵代基、C1-C8烷基、羥基和C1-C8烷氧基；和R2選自 和 其中R10和R11獨立選自H、鹵代基、C1-C8烷基、C1-C8鹵代烷基、-NR5R7、羥基和C1-C8烷氧基或R10和R11與相鄰的環(huán)一起可以形成任選取代的C5-C6環(huán)烷基或任選取代的C5-C6芳族環(huán)；m是0-3的一個整數。
R5和R7獨立是H或C1-C8烷基；R6選自H、C1-C12烷基、C2-C8鏈烯基和C2-C8炔基；
R12選自H、鹵代基、C1-C4鹵代烷基、-NR5R6、C1-C8烷基、羥基和C1-C8烷氧基；和n是1-3的一個整數。
在一個實施方案中，本發(fā)明的化合物具有以下通式結構 其中R2選自 和 其中R10和R11獨立選自H、鹵代基、C1-C4鹵代烷基、-NR5R7、羥基和C1-C8烷氧基；和R5和R7獨立是H或C1-C4烷基；R12選自H、鹵代基和C1-C8烷氧基；和R6是C1-C8烷基。在一個優(yōu)選的實施方案中，R2選自 和
其中R10和R11獨立選自H、鹵代基和C1-C8烷氧基。
在一個優(yōu)選的實施方案中，所述化合物具有以下結構 其中R6是C1-C8烷基和R10和R11獨立選自H和C1-C4烷氧基或R10和R11與相鄰的環(huán)一起可以形成任選取代的5-或6-元芳族環(huán)。
本發(fā)明的一方面涉及治療與血管生成有關的疾病或病癥的方法。尤其是，本發(fā)明的一個實施方案涉及在溫血脊椎動物體內包括人體內抑制不需要的血管生成。所述方法包括給予人或動物含有有效量的以下通式化合物的組合物 和 其中R1選自H、鹵代基、C1-C8烷基、C1-C8鹵代烷基、-NR5R7、羥基和C1-C8烷氧基；R2選自任選取代的二環(huán)、任選取代的芳基，和 R3選自
和 R8選自H和C1-C8烷基或R3和R8與相鄰的環(huán)一起可以形成任選取代的5-或6-元芳族環(huán)。
R10和R11獨立選自H、鹵代基、C1-C8烷基、C1-C8鹵代烷基、-NR5R7、羥基和C1-C8烷氧基或R10和R11與相鄰的環(huán)一起可以形成任選取代的C5-C6環(huán)烷基或任選取代的C5-C6芳族環(huán)；R5和R7獨立是H或C1-C8烷基；R6選自H或C1-C8烷基、C2-C8鏈烯基和C2-C8炔基；n是0-2的一個整數；和m是0-6的一個整數。
在一個實施方案中，抑制血管生成的方法包括給予具有以下通式的化合物 其中R1是H、鹵代基或C1-C4鹵代烷基；R2選自 和 其中R10和R11獨立選自H、鹵代基、C1-C4鹵代烷基、-NR5R7、羥基和C1-C8烷氧基；R5和R7獨立是H或C1-C4烷基；R12選自H、鹵代基和C1-C8烷氧基；和
R6是C1-C8烷基。在一個實施方案中，R10和R11獨立是H、鹵代基或C1-C4烷氧基，R1和R12是H，以及R6是C1-C6烷基。
根據一個實施方案，所述本發(fā)明的沙利度胺衍生物化合物可以通過將所述化合物與一種或更多種藥學上可接受的載體結合制備成藥用組合物。這些制劑可以通過標準途徑給藥。通常，所述組合物可以通過局部、經皮、口服、直腸或胃腸外(例如靜脈內、皮下或肌內)途徑給藥。另外，所述組合物可以摻入到可以持續(xù)釋放化合物的生物可降解的聚合物中，將所述聚合物植入到希望藥物釋放例如腫瘤部位的周圍。適合本發(fā)明使用的生物可降解的聚合物是本領域技術人員已知的并在例如Brem等J，Neurosurg.74441-446(1991)中有詳細敘述。
除了這些藥用組合物作為抗血管生成化合物的用途外，沙利度胺衍生的化合物和相應的組合物也具有作為鈉通道阻斷劑、鈣通道阻斷劑、避孕藥、抗炎藥和抗癌藥的效用。在一個實施方案中，本發(fā)明的含有沙利度胺衍生物的組合物用于治療年齡相關的黃斑變性。
根據本發(fā)明的一個實施方案所述組合物經口服或胃腸外給藥。當口服給藥時，所述化合物以液體溶液、散劑、片劑、膠囊或錠劑的形式給藥。所述化合物可以與一種或更多種常規(guī)的用于制備片劑、膠囊、錠劑和其它口服給藥形式的藥用添加劑或賦形劑結合使用。當胃腸外給藥時，并且更優(yōu)選靜脈給藥時，本發(fā)明的衍生物可以與鹽水溶液和/或常規(guī)IV溶液混合。
所述活性化合物的劑量可以根據所治療的疾病、具體化合物以及其它臨床因素如人或動物的體重和狀況以及所述化合物的給藥途徑而決定。應該理解，本發(fā)明化合物適合人和獸醫(yī)使用。對于病人的口服給藥，通常足夠的劑量為大約0.1-300mg/kg/天，優(yōu)選大約0.5-50mg/kg/天，更優(yōu)選大約1-10mg/kg/天。
應該理解，除了活性的抗血管生成化合物外，本發(fā)明的組合物可以包括常規(guī)用于本領域中的其它試劑包括增溶劑、惰性填充劑、稀釋劑、賦形劑和調味劑。
根據一個實施方案，通過給予含有以下通式結構的化合物可以治療與角膜新血管形成有關的疾病 和 其中R1選自H、鹵代基、烷基、鹵代烷基、-NR5R6、羥基和烷氧基；R2選自 和 R3選自 和 R8選自H和烷基，或R3和R8與相鄰的環(huán)一起可以形成任選取代的C5-C6環(huán)烷基或C5-C6芳族環(huán)；R10和R11獨立選自H、鹵代基、C1-C4鹵代烷基、-NR5R7、羥基和C1-C8烷氧基或R10和R11與相鄰的環(huán)一起可以形成任選取代的C5-C6環(huán)烷基或任選取代的C5-C6芳族環(huán)；
R5和R7獨立是H或C1-C4烷基；R12選自H、鹵代基或C1-C8烷氧基；m是0-4的一個整數；和R6是C1-C8烷基。在一個實施方案中，所述化合物具有以下通式結構 其中R1是H或鹵代基；和R2選自 和 其中R10和R11獨立是H、鹵代基或C1-C4烷氧基，R1和R12是H，以及R6是C1-C6烷基。
根據本發(fā)明可以治療的其它疾病是類風濕性關節(jié)炎。相信血管在關節(jié)的滑膜中進行血管生成。除了形成新的血管網外，內皮細胞釋放導致血管翳生長和軟骨破壞的因子和反應性氧物質。所述涉及血管生成的因子可積極性促進和幫助維持類風濕性關節(jié)炎的慢性炎癥狀態(tài)。
也預期本發(fā)明的沙利度胺衍生化合物用于治療多種與血管生成有關的疾病或病癥，包括糖尿病性視網膜病、早產兒視網膜病、角膜移植排斥、新血管形成性青光眼和晶狀體后纖維組織形成、流行性角結膜炎、維生素A缺乏、帶隱性眼鏡的過度損傷(contact lensoverwear)、特應性角膜炎、上支性角膜炎、翼狀胬肉角膜炎干燥癥、斯耶格倫綜合征、紅色痤瘡、phylectenulosis、梅毒、分枝干菌感染、脂質變性、化學灼傷、細菌性潰瘍、真菌性潰瘍、單純皰疹感染、帶狀皰疹感染、原蟲感染、卡波濟氏肉瘤、莫倫潰瘍、Terrien’s緣變性、緣角質層分離、創(chuàng)傷、類風濕性關節(jié)炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、多動脈炎、韋格納結節(jié)病、鞏膜炎、史蒂文斯-約翰遜病、類天皰瘡(pemphigold)放射狀角膜切開術和角膜標記排斥(corneal graphrejection)。根據本發(fā)明也可以治療的與視網膜/脈絡膜新血管生成有關的疾病包括、但不限于糖尿病性視網膜病、黃斑變性、鐮狀細胞性貧血、肉樣瘤、梅毒、彈力纖維性假黃瘤、佩吉特病、靜脈閉塞、動脈閉塞、頸動脈阻塞性疾病、慢性葡萄膜炎/玻璃體炎(vitritis)、分支桿菌感染、萊姆氏病、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、早產兒視網膜病、伊爾斯病、Bechets病、感染引起的視網膜炎或脈絡膜炎、假定的眼組織胞漿菌病、Bests病、近視、眼部潰瘍、施塔加特病、扁平部睫狀體炎、慢性視網膜脫離、高粘滯性綜合征、弓形體病、創(chuàng)傷和激光后并發(fā)癥。
實施例1分子模型用來便于新的異喹啉類系列的設計。首先，考慮將一個碳加入到二酰亞胺環(huán)上以制備以下通式結構的化合物 連接在多腺苷磷酸核糖聚合酶(polyADP-ribose polymerase)的晶體結構中的鄰苯二甲酰亞胺類似物的構象分析顯示所申請結構模擬鄰苯二甲酰亞胺的構象的相似性。考慮到這一點，提出兩種初始類似物系列的合成作為合成目標的初級構型。
A系列 B系列
這些化合物代表第一代類似物，對重要結構和對映選擇性關系進行異喹啉類的研究。模擬物1-10的合成列在流程I中并代表適當文獻中所報道的有機轉化。這種合成流程的作用為便于連接多種多樣的官能團。另外，所述合成設計便于通過加入選擇性的手性氨基酸直接合成對映體純的最終產物。
流程I.用于該研究中類似物的合成流程 實施例2制備附加的化合物，其中沙利度胺的哌啶-2，6-二酮部分被具有以下通式結構的剛性的(rigid)或開環(huán)結構替代，其中R22為H、C1-C12烷基、C2-C12鏈烯基或C2-C12炔基，或R22和R23與插入的碳一起形成芳基。用于制備這些化合物合成流程如下
2-2，3-二氫化茚-5-基-1，3-二氧代-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-羧酸的合成 也可以通過以下反應制備化合物5-7 2-(1，2，3，4-四氫-萘-1-基)-異吲哚-1，3-二酮的合成3天 化合物號R24n化合物號R24n產率8 H 310 H 378％9 3-F311 3-F3100％
化合物號R24n產率化合物號R24R25n產率12 H 116198％13 H 370％17 H H 3100％14 H 318 H 3-CH3376％15 3-F348％19 3-F2-F362％20 3-F3-CH3350％21 H 2-F372％22 H H 284％2-(10，11-二氫-5H-二苯并[a，d]-環(huán)庚烯-5-基)-異吲哚-1，3-二酮的合成
2-(1-萘-2-基-丙基)-異吲哚-1，3-二酮的合成 2-[1-(3，4-二甲氧基-苯基)-庚基]-異吲哚-1，3-二酮的合成
2-異喹啉-1-基-異吲哚-1，3-二酮的合成 N-(2-苯乙基)-苯鄰二甲酰亞胺的合成 苯基取代的苯鄰二甲酰亞胺的合成
4-羥基-2H-異喹啉-1-酮的合成 吡咯并[1，2-b]異喹啉-5，10-二酮的合成 3H-喹唑啉-4-酮類的合成
評估這些化合物抑制角膜新血管生成和內皮細胞增殖的能力。
實施例3內皮細胞增殖的測定將人血管內皮細胞(HUVECS)在20％血清中培養(yǎng)到周邊匯合(80％)并用沙利度胺(標準物)或它的類似物(40-400μM)處理。20小時后，用2-4小時將[3H]-沙利度胺(2μCi/ml)加入到培養(yǎng)基中。用冰冷卻的PBS(洗滌3次)停止[3H]-沙利度胺的結合并將所述細胞與冷的10％三氯乙酸(TCA)在4℃下溫育10分鐘。將所述細胞與TCA在室溫下再溫育10分鐘并用PBS洗滌三次。將細胞用1N NaOH溶解過夜并用相當量的1N NCl中和，然后確定放射性。計算沙利度胺或它的類似物的抗增殖活性作為HUVECS促有絲分裂反應對20％血清(胎牛血清)的百分抑制作用。
對于沙利度胺抑制3H-胸苷進入內皮細胞的評估揭示該化合物具有200μM的IC50。對于化合物的第一組實驗對象的初步IC50數據揭示在抑制3H-胸苷結合進入內皮細胞方面四種化合物(5、29、32和50)具有比沙利度胺強2-4倍的效能(參見表1)。這種結構活性關系(SAR)證實所述哌啶-2，6-二酮部分對于增加內皮細胞增殖的抑制作用是不需要的。
表1.對于所述研究中類似物的生物學數據
擴環(huán)結構的制備
權利要求
1.一種由選自以下通式結構代表的化合物 和 其中R1選自H、鹵代基、C1-C4烷基、羧基和C1-C8烷氧基；R2選自 和 R3選自 和 R8選自H、C1-C8烷基、苯基和芐基，或R3和R8與相鄰的環(huán)一起可以形成任選取代的5-或6-元雜芳基；R9和R13獨立選自鹵代基、甲氧基和C3-C8烷氧基；R10和R11獨立選自H、鹵代基、C1-C8烷基、C1-C8鹵代烷基、-NR5R7、羥基和C1-C8烷氧基或R10和R11與相鄰的環(huán)一起可以形成任選取代的C5-C6環(huán)烷基或任選取代的C5-C6芳族環(huán)；R5和R7獨立選自H、或C1-C8烷基；R6選自H、或C1-C12烷基、C2-C8鏈烯基和C2-C8炔基；R12選自H、鹵代基、C1-C4鹵代烷基、-NR5R6、C1-C8烷基、羥基和C1-C8烷氧基；n是1-3的一個整數和m是0-6的一個整數。
2.根據權利要求1的化合物，其中R1是H或鹵代基；R2選自 和 R3選自 和 R4和R8是H；R6是C1-C8烷基；R10和R11獨立選自H、鹵代基和C1-C8烷氧基或R10和R11與相鄰的環(huán)一起可以形成任選取代的C5-C6環(huán)烷基或任選取代的C5-C6芳族環(huán)；R12選自H、鹵代基、C1-C4烷氧基；和m是1或0。
3.根據權利要求1的化合物，其中所述化合物由以下通式結構代表 其中R1是H或鹵代基；和R2選自 和 其中R6是H或C1-C8烷基；和R10和R11獨立選自H、鹵代基、-NH2、羥基和C1-C8烷氧基。
4.權利要求3的化合物，其中R1是H。
5.一種藥用組合物，它含有權利要求1的化合物和藥學上可接受的載體。
6.一種在溫血脊錐動物體內抑制血管生成的方法，所述方法包括給予所述脊錐動物含有以下通式結構的化合物的組合物步驟 和 其中R2選自 和 R3選自 和 R8選自H、C1-C8烷基、苯基和芐基或R3和R8與相鄰的環(huán)一起可以形成任選取代的5-或6-元雜芳基；R10和R11獨立選自H、鹵代基、C1-C8烷基、C1-C8鹵代烷基、-NR5R7、羥基和C1-C8烷氧基或R10和R11與相鄰的環(huán)一起可以形成任選取代的C5-C6環(huán)烷基或任選取代的C5-C6芳族環(huán)；R5和R7獨立是H或C1-C8烷基；R6選自H或C1-C12烷基、C2-C8鏈烯基和C2-C8炔基；R12選自H、鹵代基、C1-C4鹵代烷基、-NR5R6、C1-C8烷基、羥基和C1-C8烷氧基；和m是0-6的一個整數。
7.權利要求6的方法，其中所述化合物具有以下通式結構 其中R1是H或鹵代基；和R2選自 和 其中R6是H或C1-C8烷基；和R10和R11獨立選自H、鹵代基和C1-C8烷氧基或R10和R11與相鄰的環(huán)一起可以形成任選取代的C5-C6環(huán)烷基或任選取代的C5-C6芳族環(huán)。
8.一種藥用組合物，它含有由以下通式結構代表的化合物 和 其中R1是H或鹵代基；R2選自 和 R3選自 和 R10和R11獨立選自H、鹵代基、C1-C8烷基、C1-C8鹵代烷基、-NR5R7、羥基和C1-C8烷氧基或R10和R11與相鄰的環(huán)一起可以形成任選取代的C5-C6環(huán)烷基或任選取代的C5-C6芳族環(huán)；R5和R7獨立是H或C1-C8烷基；R6選自H或C1-C12烷基、C2-C8鏈烯基和C2-C8炔基；R12選自H、鹵代基、C1-C4鹵代烷基、-NR5R6、C1-C8烷基、羥基和C1-C8烷氧基；和m是0-2的一個整數；和藥學上可接受的載體。
8.一種藥用組合物，它含有由以下通式結構代表的化合物 其中R1是H或鹵代基；和R2選自 和 其中R6是C1-C8烷基；和R10和R11獨立選自H、鹵代基和C1-C8烷氧基。
9.權利要求8的組合物，其中R1是H以及R10和R11獨立選自H和C1-C8烷氧基。
全文摘要
本發(fā)明涉及新的沙利度胺衍生化合物，該化合物具有抗血管生成化合物的活性。特別是，所述化合物具有所述通式結構其中R
文檔編號A61P27/06GK1518447SQ02812468
公開日2004年8月4日 申請日期2002年4月22日 優(yōu)先權日2001年4月23日
發(fā)明者M·L·布朗, M L 布朗 申請人:弗吉尼亞大學專利基金會