專利名稱：使用活性維生素d類似物治療與惡性腫瘤有關(guān)的血鈣過多的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明概括地涉及一種用于治療與惡性腫瘤有關(guān)的血鈣過多(MAH)的方法，更具體地是涉及使用維生素D的活性形式降低與抑制過度增殖性疾病有關(guān)的血鈣過多。
背景技術(shù)：
在過去二十間進(jìn)行的深入研究已經(jīng)確認(rèn)了維生素D除其在骨和礦物質(zhì)代謝中的傳統(tǒng)作用外的重要生物作用。1α，25-二羥基維生素D3(維生素D的激素活性形式)的特異性核受體，存在于并不參與鈣體內(nèi)平衡的各種器官的細(xì)胞中。例如，在人前列腺癌細(xì)胞系--LNCaP中已證實(shí)了特異性的、生物活性的維生素D受體(Miller等人，52 Cancer Res.(1992)515-520)；在許多其他腫瘤如乳腺癌和結(jié)腸癌的細(xì)胞中也存在維生素D受體。
已有報(bào)道稱，某些維生素D化合物和類似物是惡性細(xì)胞增殖的強(qiáng)效抑制劑，而且是細(xì)胞分化的誘導(dǎo)劑/刺激劑。例如，Suda等人的美國專利4,391,802公開了1α-羥基維生素D化合物，特別是1α，25-二羥基維生素D3以及1α-羥基維生素D3，由于可以誘發(fā)惡性細(xì)胞(特別是白血病細(xì)胞)分化為非惡性的巨噬細(xì)胞(單細(xì)胞)，具有強(qiáng)效的抗白血病活性，而且可用于治療白血病。1α，25-二羥基維生素D3以及其他維生素D3類似物的抗增殖及分化作用已在癌細(xì)胞系中予以報(bào)道。最近，已報(bào)道了在維生素D受體基因多形性與癌癥風(fēng)險(xiǎn)之間的關(guān)系，提示出維生素D受體有可能在癌癥的發(fā)展以及癌癥的治療中扮演重要的角色。
這些以前的研究?jī)H集中于維生素D3化合物。雖然這些化合物在培養(yǎng)基中有可能的確能夠非常有效地促進(jìn)惡性細(xì)胞的分化，但是由于它們同樣是非常有效的影響鈣代謝的藥物，這些化合物作為抗癌劑在分化治療中的實(shí)際應(yīng)用受到嚴(yán)重的限制。在例如有效作為抗白血病藥物所需要的體內(nèi)濃度下，這些相同的化合物由于固有的鈣血癥活性可誘發(fā)血鈣濃度顯著升高，并達(dá)到潛在危險(xiǎn)的水平。也就是說，由于血鈣過多的風(fēng)險(xiǎn)，阻止了1α，25-二羥基維生素D3以及其他維生素D3類似物作為抗癌劑在臨床上的使用，或者該應(yīng)用受到了嚴(yán)重的限制。
血鈣過多通常與惡性腫瘤有關(guān)(MAH)，而且經(jīng)常是死亡的主要因素，并使惡性腫瘤的臨床治療更加復(fù)雜化。甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白(PTHrP)與甲狀旁腺激素緊密相關(guān)，而且可結(jié)合與PTH相同的受體以及其他受體。PTHrP是所述血鈣過多的主要誘因物質(zhì)之一，而且可由惡性細(xì)胞過度產(chǎn)生。已發(fā)現(xiàn)1，25-二羥基維生素D3可抑制PTHrP基因在細(xì)胞中的轉(zhuǎn)錄，但是1，25-二羥基維生素D3化合物本身可增加血清鈣濃度。因此，仍需要具有更高特異性活性以及選擇性的化合物，即、具有抗增殖作用和分化作用但是血鈣癥活性低的維生素D化合物。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供一種用于治療與惡性腫瘤有關(guān)的血鈣過多(MAH)的方法，例如與過度增殖性細(xì)胞生長和/或異常細(xì)胞分化有關(guān)的血鈣過多。該方法包括使用活性維生素D化合物治療血鈣過多并降低甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白(PTHrP)的血清濃度。
本發(fā)明的上述以及其他優(yōu)點(diǎn)是在其一個(gè)方面中實(shí)現(xiàn)的。在該方面中提供一種治療由于人腫瘤或增生細(xì)胞的過度增殖活性導(dǎo)致的與惡性腫瘤有關(guān)的血鈣過多的方法，其包括用有效量的低鈣血性羥基維生素D化合物治療所述細(xì)胞，該化合物在分子的側(cè)鏈上于24位處具有取代的烴基。治療步驟包括抑制所述細(xì)胞的增殖，以及誘發(fā)并增強(qiáng)該細(xì)胞中的分化作用。
根據(jù)本發(fā)明的羥基維生素D化合物是活性維生素D，而且可以用以下式(I)表示。合適的式(I)化合物是1α，24-二羥基維生素D2、1α，24-二羥基維生素D4、1α，25-二羥基維生素D4、1α，25-二羥基維生素D2、1α-羥基維生素D2和1α-羥基維生素D4。
可根據(jù)本發(fā)明向需要治療的患者給藥的有效量或者治療量的低鈣血性羥基維生素D化合物在0.01-2.0μg/kg體重/天的范圍內(nèi)。
在本發(fā)明的另一個(gè)方面中，提供一種用于在罹患血鈣過多癥的患者中降低甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白(PTHrP)之血清濃度的方法，其包括向所述患者給藥有效量的低鈣血性維生素D化合物以降低甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白(PTHrP)的血清濃度。
低鈣血性維生素D化合物也可用于治療乳腺、前列腺和結(jié)腸癌以及其他腫瘤如胰腺癌、子宮內(nèi)膜癌、睪丸癌、肺部的小細(xì)胞及非小細(xì)胞癌(包括鱗狀、腺癌和大細(xì)胞類型)、腦和頸部的鱗狀細(xì)胞、膀胱、卵巢和子宮頸癌、髓性和淋巴細(xì)胞性白血病、淋巴瘤、肝腫瘤、髓性甲狀腺癌、多發(fā)性骨髓瘤、成視網(wǎng)膜細(xì)胞瘤、以及軟組織和骨的肉瘤，即表達(dá)維生素D受體的腫瘤。
根據(jù)本發(fā)明，當(dāng)向罹患MAH的患者給藥有效量的低鈣血性維生素D化合物時(shí)，可觀察到顯著降低的血鈣過多，其作用明顯高于按照已知制劑給藥的相同量的活化維生素D3(如1α-OH D3、1α，25-(OH)2D3)。因此，根據(jù)本發(fā)明的化合物相對(duì)于活性形式的維生素D3類似物具有更高的治療指數(shù)。
因此，本發(fā)明的另一個(gè)方面是治療與惡性腫瘤有關(guān)的血鈣過多的方法，其包括向罹患所述病癥的患者給藥有效量的活性維生素D化合物，該化合物通過體內(nèi)代謝具有或者可以達(dá)到基本上與1α，25-二羥基維生素D3相同的維生素D受體(VDR)結(jié)合親和性，而且其血鈣過多的風(fēng)險(xiǎn)大大低于1α，25-二羥基維生素D3，以使血清鈣濃度正常化或者降低該濃度。
為根據(jù)本發(fā)明治療與惡性腫瘤有關(guān)的血鈣過多以及其他惡性病癥，所述活性維生素D適合于在藥物組合物中單獨(dú)作為活性成分進(jìn)行給藥，或者與其他抗癌劑共同給藥。
另外，在本發(fā)明的范圍內(nèi)還包括給藥低鈣血性維生素D化合物以及細(xì)胞毒性或抗癌劑。該細(xì)胞毒性或抗癌劑適當(dāng)?shù)匕勾x藥(如5-氟尿嘧啶、氨甲蝶呤、氟達(dá)拉濱)、抗微管劑(antimicrotubule agent)(例如長春新堿、長春堿、紫杉烷類藥物如紫杉醇、多西他塞)、烷基化劑(如環(huán)膦酰胺、美法侖、二氯乙基硝基脲、羥基脲)、鉑藥物(如順鉑、卡鉑、奧沙利鉑、JM-216、CI-973)、蒽環(huán)霉素(多柔比星、柔紅霉素)、antibiolitics(例如絲裂霉素、伊達(dá)比星、多柔比星、柔紅霉素)、拓?fù)洚悩?gòu)酶抑制劑(例如依托泊苷、喜樹堿)或者任何其他的抗腫瘤劑(磷酸雌莫司汀、潑尼莫司汀)。
復(fù)合使用活性維生素D化合物和各種抗癌藥物，可期望對(duì)癌細(xì)胞產(chǎn)生顯著增強(qiáng)的細(xì)胞毒性作用，并由此增加治療效果。具體而言，與單獨(dú)使用各抗癌藥物的治療相比，使用更低濃度的抗癌藥物的上述組合即可明顯增加生長抑制作用，而且與單獨(dú)或大劑量地使用抗癌藥物相比，可顯著降低與這些抗癌藥物有關(guān)的副作用。這些共同給藥的抗癌劑的可能劑量范圍是0.1-20mg/kg/天。
共同給藥有效劑量的低鈣血性維生素D化合物以及其它已知可緩解骨疾病的激素或藥物如雌激素，也包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)。例如，前列腺癌經(jīng)常轉(zhuǎn)移至骨上，導(dǎo)致骨丟失和相關(guān)的疼痛。此等骨治療劑可包括結(jié)合雌激素或其等價(jià)物、降鈣素、二膦酸酯、鈣添加劑、鈷胺素、百日咳毒素和硼。
在另一個(gè)方面中，本發(fā)明提供藥物組合物，其包括是活性低鈣血性維生素D化合物的抗癌劑；選自于以下組中的藥劑(i)抗癌劑、(ii)骨治療劑、和它們的組合；以及生理上可接受的載體。
在閱讀以下優(yōu)選實(shí)施方案的詳細(xì)描述后可更容易理解本發(fā)明方法、組合物以及物理性質(zhì)的其他優(yōu)點(diǎn)和改進(jìn)。


沒有
具體實(shí)施例方式
本發(fā)明提供治療與腫瘤和過度增殖性疾病有關(guān)的血鈣過多(即、非生理性高并且有害的血鈣濃度)的有效方法。具體而言，本發(fā)明涉及用于改善或者緩解與惡性和腫瘤疾病的過度增殖性細(xì)胞活性有關(guān)的血鈣過多、并且誘導(dǎo)、增強(qiáng)或者促進(jìn)患病細(xì)胞中的細(xì)胞分化的方法。本發(fā)明用活性低鈣血性維生素D化合物為罹患過度增殖性疾病的患者提供了一種新的治療方法。優(yōu)選的是，活性維生素D類似物是羥基維生素D化合物，并且可以用以下式(I)表示?；钚跃S生素D類似物在給藥于患者時(shí)，其本身不會(huì)產(chǎn)生劑量限制性的血鈣過多和尿鈣過多，而且事實(shí)上降低了由惡性疾病導(dǎo)致的血鈣過多。
根據(jù)本發(fā)明，當(dāng)向罹患惡性疾病的患者給藥有效量的低鈣血性活性維生素D化合物時(shí)，減少了血鈣過多，降低了PTHrP血清濃度，并抑制、降低或者穩(wěn)定了異常細(xì)胞的增殖活性，而且誘導(dǎo)、促進(jìn)或者增強(qiáng)了細(xì)胞分化。因此，本發(fā)明的低鈣血性維生素D化合物相對(duì)于活性形式的維生素D3類似物具有更高的治療指數(shù)。
已知的是，在活化前，即、產(chǎn)生生物應(yīng)答前，維生素D3必須在C-1和C-25位被羥基化?；罨渌问降木S生素D，如維生素D2和維生素D4，也似乎需要類似的代謝過程。因此，在此所用術(shù)語“活化維生素D”或“活性維生素D”是指已至少在分子的C-1、C-24或C-25位被羥基化而且該化合物本身或者作為前體藥物(如1α-羥基維生素D2)時(shí)其代謝物結(jié)合維生素D受體(VDR)的維生素D化合物或類似物。僅在C-1位被羥基化的維生素D化合物在此稱為“前體藥物”。此等化合物在體內(nèi)經(jīng)歷進(jìn)一步的羥基化，而且它們的代謝物結(jié)合VDR。
術(shù)語“低鈣血性維生素D化合物”是指具有低鈣血活性的活性維生素D類似物，即、與1α，25-二羥基維生素D3相比具有低的血鈣活性，其包括24-羥基維生素D化合物、25-羥基維生素化合物和1α-羥基維生素化合物。
同樣，對(duì)于烷基、烯基、?；颦h(huán)烷基而言，在此所用術(shù)語“低級(jí)”是指具有1-4個(gè)碳原子的直鏈或支鏈、飽和或不飽和的烴基。此等烴基的具體例子是甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、叔丁基、乙烯基、丙烯基、丁烯基、異丁烯基、異丙烯基、甲酰基、乙酰基、丙?；?、丁?；颦h(huán)丙基。術(shù)語“芳香?；笔侵肝幢蝗〈蚪?jīng)取代的苯甲?；?。
在此所用術(shù)語“烴基團(tuán)”是指低級(jí)烷基、低級(jí)烯基、低級(jí)酰基或低級(jí)環(huán)烷基，即、直鏈或支鏈、飽和或不飽和的C1-C4烴基。
根據(jù)本發(fā)明的化合物是低鈣血性的活性維生素D化合物，其條件是該化合物在C-24位處具有烴基團(tuán)，即、在C-24位處的低級(jí)烷基、烯基或酰基。另外，根據(jù)本發(fā)明的活性維生素D可具有不飽和的側(cè)鏈，即、在C-22和C-23、C-25和C-26或者C-26和C-27之間適當(dāng)?shù)鼐哂须p鍵。
本發(fā)明的低鈣血性羥基維生素D優(yōu)選具有以下通式(I) 其中A1和A2分別是氫或在C-22和C-23之間形成雙鍵的碳-碳鍵；R1和R2可相同或不同并且是氫、羥基、低級(jí)烷基、低級(jí)氟代烷基、O-低級(jí)烷基、低級(jí)烯基、低級(jí)氟代烯基、O-低級(jí)烯基、O-低級(jí)?；-芳香?；⒌图?jí)環(huán)烷基，其條件是R1和R2不能都是烯基，或與它們所連接的碳一起形成C3-C8環(huán)碳環(huán)；R3是低級(jí)烷基、低級(jí)烯基、低級(jí)氟代烷基、低級(jí)氟代烯基、O-低級(jí)烷基、O-低級(jí)烯基、O-低級(jí)酰基、O-芳香酰基或低級(jí)環(huán)烷基；X1是氫或羥基；X2是氫或羥基，或者與R1或R2構(gòu)成雙鍵；X3是氫和羥基，其條件是X1、X2或X3中至少一個(gè)是羥基，而且如果與Y連接的鍵是雙鍵，則Y是亞甲基，或者如果與Y連接的鍵是單鍵，則是甲基或氫。
式(I)的1α-羥基維生素D化合物可用通式(II)表示 其中A1和A2分別是氫或在C-22和C-23之間形成雙鍵的碳-碳鍵；R1和R2可相同或不同并且是氫、羥基、低級(jí)烷基、低級(jí)氟代烷基、O-低級(jí)烷基、低級(jí)烯基、低級(jí)氟代烯基、O-低級(jí)烯基、O-低級(jí)酰基、O-芳香?；⒌图?jí)環(huán)烷基，其條件是R1和R2不能都是烯基，或與它們所連接的碳一起形成C3-C8環(huán)碳環(huán)；R3是低級(jí)烷基、低級(jí)烯基、低級(jí)氟代烷基、低級(jí)氟代烯基、O-低級(jí)烷基、O-低級(jí)烯基、O-低級(jí)酰基、O-芳香?；虻图?jí)環(huán)烷基；X1是氫或羥基；X2是氫或羥基，或者與R1或R2構(gòu)成雙鍵；而且如果與Y連接的鍵是雙鍵，則Y是亞甲基，或者如果與Y連接的鍵是單鍵，則是甲基或氫。
具體而言，根據(jù)本發(fā)明的1α-羥基維生素D化合物可用以下通式(III)表示
其中A1和A2分別是氫或在C-22和C-23之間形成雙鍵的碳-碳鍵；R1和R2可相同或不同并且是氫、羥基、低級(jí)烷基、低級(jí)氟代烷基、O-低級(jí)烷基、低級(jí)烯基、低級(jí)氟代烯基、O-低級(jí)烯基、O-低級(jí)酰基、O-芳香酰基、低級(jí)環(huán)烷基，其條件是R1和R2不能都是烯基，或與它們所連接的碳一起形成C3-C8環(huán)碳環(huán)；R3是低級(jí)烷基、低級(jí)烯基、低級(jí)氟代烷基、低級(jí)氟代烯基、O-低級(jí)烷基、O-低級(jí)烯基、O-低級(jí)?；-芳香?；虻图?jí)環(huán)烷基；X1是氫或羥基；而X2是氫或羥基，或者與R1或R2構(gòu)成雙鍵。
本發(fā)明的低鈣血性羥基維生素D化合物是那些具有有效的抗增殖活性和細(xì)胞分化活性(即、反轉(zhuǎn)惡性轉(zhuǎn)化)，但產(chǎn)生血鈣過多和/或尿鈣過多之副作用的能力低或者無此能力者，即、與1α，25-二羥基維生素D3相比具有更低血鈣癥活性的低鈣血性化合物。換言之，本發(fā)明的化合物在與惡性或其它過度增殖性細(xì)胞接觸時(shí)可起到抗增殖劑和細(xì)胞分化劑的作用，并可降低與惡性疾病有關(guān)的血鈣過多。該作用的選擇性和特異性可使低鈣血性維生素D化合物優(yōu)選用作抗血鈣過多的藥劑，以及用于安全地抑制過度增殖作用并促進(jìn)惡性或增殖細(xì)胞的分化。因此，本發(fā)明的化合物克服了上述已知活性維生素D3化合物的缺陷，并可作為用于控制和治療惡性疾病的優(yōu)選藥劑，所述疾病例如是乳腺、前列腺和結(jié)腸癌以及其他腫瘤如胰腺癌、子宮內(nèi)膜癌、睪丸癌、肺部的小細(xì)胞及非小細(xì)胞癌(包括鱗狀、腺癌和大細(xì)胞類型)、腦和頸部的鱗狀細(xì)胞、膀胱、卵巢和子宮頸癌、髓性和淋巴細(xì)胞性白血病、淋巴瘤、肝腫瘤、髓性甲狀腺癌、多發(fā)性骨髓瘤、黑素瘤、成視網(wǎng)膜細(xì)胞瘤、以及軟組織和骨的肉瘤，即表達(dá)維生素D受體的腫瘤。
根據(jù)本發(fā)明之合適的低鈣血性維生素D化合物是1α，24-二羥基維生素D2、1α，24-二羥基維生素D4、1α，25-二羥基維生素D2、1α，25-二羥基維生素D4、1α-羥基維生素D2、和1α-羥基維生素D4。應(yīng)理解的是，在那些側(cè)鏈(如C-24)中具有手性中心的式(I)化合物中，差向異構(gòu)體(如S和R)和外消旋化合物也在本發(fā)明的范圍內(nèi)。
因此，本發(fā)明提供用有效量的低鈣血性維生素D化合物治療與惡性細(xì)胞有關(guān)的血鈣過多的方法。有效劑量為約0.01-2.0μg/kg患者體重/天。
式(I)化合物可根據(jù)Knutson等人的第5,448,120號(hào)、DeLuca等人的第4,670,190和4,554,106號(hào)美國專利、DeLuca等人的第5,486,66號(hào)美國專利、以及Strugnell等人(310 Biochem.J.(1995)，第233-241頁)的方法來制備。上述文獻(xiàn)的內(nèi)容在此并入作為參考。
已研究了式(I)化合物的生物效用，并與1α，25-二羥基維生素D3的生物效用進(jìn)行了比較，后者為維生素D的活性激素形式，并且是所用維生素D化合物和類似物的測(cè)量標(biāo)準(zhǔn)。例如，現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)，式(I)化合物或其活性代謝物的維生素D受體(VDR)結(jié)合親和性基本上等于(即、等于或弱3倍)1α，25-二羥基維生素D3的親和性。此等受體結(jié)合親和性是有效生物活性的指示。
同時(shí)，已發(fā)現(xiàn)式(I)化合物的毒性明顯低于它們相應(yīng)的維生素D3類似物。例如，在第08/265,438號(hào)共同未決的母案申請(qǐng)(該文獻(xiàn)的內(nèi)容在此并入作為參考)中，1α-羥基維生素D4的LD50在男性中是1.0mg/kg，在女性中為3.0mg/kg，也就是說大大低于1α-羥基維生素D3的毒性(LD50約為0.2mg/kg)。另外，在第5,403,831號(hào)母案美國專利、及其第5,104,864號(hào)母案的母案美國專利(這兩個(gè)文獻(xiàn)的內(nèi)容在此并入作為參考)中，已表明1α-羥基維生素D2的生物效用與1α-羥基維生素D3和1α，25-二羥基維生素D3的相同，但毒性卻更低。即使對(duì)患有絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥的婦女給藥至10μg/天的1α-羥基維生素D2，也僅誘發(fā)中等程度的尿鈣過多(尿Ca＞300mg/24小時(shí))，而且僅由于1α-羥基維生素D2也不會(huì)產(chǎn)生明顯的血鈣過多(血清Ca＞11.0mg/dl)。另外，根據(jù)肌酸酐清除和BUN測(cè)定，該化合物對(duì)腎功能沒有副作用；也沒有增加羥基脯氨酸的尿排泄，這表明對(duì)骨重吸收沒有產(chǎn)生任何刺激作用。以最大至8μg/天的劑量向成年男性給藥1-羥基維生素D2沒有表現(xiàn)出明顯的臨床血鈣過多癥或其它副作用。
本發(fā)明的低鈣血性維生素D化合物可在藥物組合物中作為活性成分使用，降低副作用的產(chǎn)生，而且與維生素D3已知的活性形式類似物相比，毒性更低。
本發(fā)明的藥理活性化合物可根據(jù)藥學(xué)常規(guī)方法進(jìn)行處理，以制成用于給藥于患者如包括人的哺乳動(dòng)物的藥劑。例如，低鈣血性維生素D化合物可以與常規(guī)賦形劑的混合物形式使用，所述賦形劑例如是適用于腸道(如口服)或非胃腸道給藥而且不損壞性地與活性化合物反應(yīng)的藥物學(xué)上可接受的載體物質(zhì)。
合適的藥物學(xué)上可接受的載體包括但不限于水、鹽溶液、醇、阿拉伯膠、植物油(如玉米油、棉籽油、花生油、橄欖油、椰子油)、礦物油、魚肝油、油酯如Polysorbate 80、聚乙二醇、明膠、碳水化合物(如乳糖、直鏈淀粉或淀粉)、硬脂酸鎂、滑石、硅酸、粘性石蠟、脂肪酸單甘油酯和二甘油酯、季戊四醇脂肪酸酯、羥甲基纖維素、聚乙烯吡咯烷酮、等等。
藥物制劑可以是無菌的，而且如果需要的話，可與輔助試劑混合，所述輔助試劑例如是潤滑劑、防腐劑、穩(wěn)定劑、濕潤劑、乳化劑、調(diào)節(jié)滲透壓的鹽、緩沖劑、著色劑、調(diào)味劑和/或一種或多種其它活性成分，例如維生素D3及其1α-羥基化代謝物、結(jié)合雌激素或其等價(jià)物、抗雌激素、降鈣素、二膦酸酯、鈣添加劑、鈷胺素、百日咳毒素和硼。
對(duì)于非胃腸道給藥，無菌注射液是特別合適的，優(yōu)選為油性或含水溶液、以及混懸液、乳液、或者植入劑包括栓劑。非胃腸道給藥適當(dāng)?shù)匕ㄆは?、肌肉或靜脈注射、鼻咽或粘膜吸收、或者透皮吸收。安瓿是常規(guī)的單元?jiǎng)┝俊?br> 對(duì)于腸內(nèi)給藥，特別合適的是片劑、糖衣片劑、液體、滴劑、錠劑、粉末或膠囊劑。如果需要甜味載體，糖漿、甘香酒劑等也可使用。
對(duì)于局部給藥，可使用合適的非噴霧性粘稠、半固體或者固體劑型，其包括適合于局部給藥的載體并且具有優(yōu)選大于水的動(dòng)態(tài)粘度，例如礦物油、杏仁油、自乳化蜂蠟、植物油、白色軟石蠟、以及丙二醇。合適的劑型包括但不限于乳膏劑、軟膏劑、洗劑、溶液劑、混懸劑、乳劑、粉末劑、擦劑、藥膏、氣霧劑、透皮藥貼等，如果需要，這些劑型可進(jìn)行消毒或者與輔劑混合，所述輔劑例如是防腐劑、穩(wěn)定劑、乳化劑、濕潤劑等。根據(jù)本發(fā)明的乳膏劑可適當(dāng)?shù)匕ɡ缢⑿尤视?、礦物油以及自乳化蜂蠟的混合物，軟膏劑可適當(dāng)?shù)匕ɡ缧尤视秃桶咨浭灥幕旌衔?，而洗劑可適當(dāng)?shù)匕ɡ鐭o水丙二醇。
在治療皮膚疾病時(shí)，根據(jù)本發(fā)明的化合物的局部制劑還可包括誘導(dǎo)表皮生長的藥物如類視色素(如維生素A)、苯并二氫吡喃醇(chromanols)如維生素E、β-激動(dòng)劑如異丙腎上腺素或環(huán)腺苷單磷酸酯(cAMP)、抗炎藥如皮質(zhì)甾類(例如氫化可的松或其乙酸酯、或地塞米松)、以及角質(zhì)促成劑如煤焦油或地蒽酚。這些藥物的有效量，例如維生素A約為組合物重量的0.003-0.3％，維生素E約為0.1-10％，異丙腎上腺素約為0.1-2％，cAMP約為0.1-1％，氫化可的松約為0.25-5％，煤焦油約為0.1-20％，而地蒽酚約為0.05-2％。
對(duì)于直腸給藥，化合物可形成為包含栓劑基質(zhì)如可可油或其他三甘油酯的藥物組合物。為延長儲(chǔ)存時(shí)間，所述組合物可有利地包括抗氧劑，如抗壞血酸、丁基化羥基茴香醚或氫醌。
在治療與惡性腫瘤疾病有關(guān)的血鈣過多時(shí)，口服給藥本發(fā)明的藥物組合物是優(yōu)選的。通常情況下，本發(fā)明的化合物通常是以單元?jiǎng)┝縿┬头峙湓谒幬飳W(xué)上可接受的載體中，每個(gè)單元?jiǎng)┝縿┬桶s0.5-25μg的本發(fā)明化合物。本發(fā)明化合物的劑量通常約為10-200μg/天。
在局部使用治療皮膚疾病時(shí)，本發(fā)明化合物在每克局部用組合物中的劑量通常為約0.01-50μg。在治療皮膚癌時(shí)，低鈣血性維生素D化合物在局部使用的組合物中的劑量通常約為0.01-100μg每克組合物。
應(yīng)注意的是，根據(jù)本發(fā)明之低鈣血性化合物的給藥也可階段性地進(jìn)行，在此情況下，如果每2-7天給藥1次，則通?？墒褂眉s20-200μg的更高劑量。該劑量可以作為單個(gè)劑量或者分為2-5個(gè)亞劑量給藥，所述亞劑量可例如每1小時(shí)給藥1次直至給完所有的劑量。
根據(jù)良好的醫(yī)療實(shí)踐以及個(gè)體患者的臨床情況，本領(lǐng)域技術(shù)人員可容易地對(duì)有效劑量和共同給藥方案進(jìn)行優(yōu)化。無論何種給藥方式，應(yīng)認(rèn)識(shí)到，在具體情況下活性化合物的實(shí)際優(yōu)選用量可根據(jù)所用具體化合物的功效、配制的具體組分、給藥形式以及所治療的具體部位和生物而變化。例如，對(duì)于具體患者的具體劑量取決于患者年齡、性別、體重、健康狀況、飲食、給藥的時(shí)間和方式、排泄速率、復(fù)合用藥、以及所治療疾病的嚴(yán)重性。用于某一宿主的劑量可根據(jù)常規(guī)方法來確定，例如通過合適的常規(guī)藥理學(xué)方法比較所用化合物與已知藥劑的不同活性。
另外，共同給藥低鈣血性維生素D化合物和抗癌劑例如細(xì)胞毒性劑也包括在本發(fā)明的范圍中。所述抗癌劑可合適地包括抗代謝藥(如5-氟尿嘧啶、氨甲蝶呤、氟達(dá)拉濱)、抗微管劑(例如長春新堿、長春堿、紫杉烷類藥物如紫杉醇、多西他塞)、烷基化劑(如環(huán)膦酰胺、美法侖、二氯乙基硝基脲、羥基脲)、鉑藥物(如順鉑、卡鉑、奧沙利鉑、JM-216、CI-973)、蒽環(huán)霉素(多柔比星、柔紅霉素)、antibiolitics(例如絲裂霉素、伊達(dá)比星、多柔比星、柔紅霉素)、拓?fù)洚悩?gòu)酶抑制劑(例如依托泊苷、喜樹堿)或者任何其他的抗腫瘤劑(磷酸雌莫司汀、潑尼莫司汀)。復(fù)合使用低鈣血性維生素D化合物和各種抗癌劑，可期望對(duì)癌細(xì)胞產(chǎn)生顯著增強(qiáng)的細(xì)胞毒性作用，并由此增加治療效果。具體而言，與單獨(dú)使用各抗癌劑相比，使用低濃度的抗癌藥物的上述組合即可明顯增加生長抑制作用，而且與單獨(dú)或大劑量地使用抗癌劑相比，可顯著降低與這些抗癌藥物有關(guān)的副作用。這些共同給藥的抗癌劑的可能劑量范圍是0.1-20mg/kg/天。
在此所用術(shù)語“共同給藥”是指其中兩種或者更多種藥物給藥于患者或者宿主的任何給藥途徑。例如，所述藥物一起或者先后進(jìn)行給藥。藥物可按照不同的途徑進(jìn)行給藥，例如一種藥物通過靜脈給藥，而第二種藥物通過肌肉內(nèi)、靜脈內(nèi)或者口服途徑給藥。這些藥物可同時(shí)或者順序地給藥，只要它們的給藥方式能夠使藥物在體內(nèi)達(dá)到有效的濃度。這些藥物也可以混合物的形式給藥，例如在同一個(gè)片劑中。在順序給藥時(shí)，一種藥物可直接在給藥另一種藥物后進(jìn)行給藥，或者這些藥物可階段性地給藥，例如一種藥物在一個(gè)時(shí)間給藥，而另一種藥物在以后的時(shí)間給藥，通常在一周之內(nèi)。一個(gè)合適的共同給藥方案的例子是，在給藥細(xì)胞毒性劑之前0.5-7天給藥低鈣血性維生素D化合物。
共同給藥有效劑量的式(I)類似物和其它已知可緩解骨疾病的激素或藥物如雌激素，也包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)。如上應(yīng)注意的是，前列腺癌經(jīng)常轉(zhuǎn)移至骨上，導(dǎo)致骨丟失和相關(guān)的疼痛。此等骨治療劑可包括結(jié)合雌激素或其等價(jià)物、降鈣素、二膦酸酯、鈣添加劑、鈷胺素、百日咳毒素和硼。這些骨治療劑也具有抗血鈣過多的作用，并且可增強(qiáng)與惡性腫瘤有關(guān)的血鈣過多的治療。這些共同給藥的治療劑的可能劑量范圍見表1。
表1與式(I)之1α-羥基維生素D共同給藥的各種藥劑的可能口服劑量范圍

如TamoxifenTM的抗雌激素物質(zhì)也是已知的骨治療劑，并且可適當(dāng)?shù)嘏c本發(fā)明的低鈣血性維生素D化合物復(fù)合使用。
以下將根據(jù)實(shí)施例進(jìn)一步闡明本發(fā)明的實(shí)施方案，這些實(shí)施例不應(yīng)被理解為是對(duì)本發(fā)明范圍的限制，其僅是用于說明本發(fā)明。
VDR結(jié)合分析實(shí)施例11α，24-二羥基維生素D2[1α，24-(OH)2D2]使用從Incstar(Stillwater，Minnesota)購得的牛胸腺VDR試劑盒及標(biāo)準(zhǔn)1α，25-(OH)2D3溶液，測(cè)定1α，24-(OH)2D2對(duì)哺乳動(dòng)物維生素D受體(VDR)的結(jié)合親和性。化學(xué)合成的1α，24-(OH)2D2的半最大結(jié)合是約150pg/ml，而1α，25-(OH)2D3的半最大結(jié)合為80pg/ml。因此，1α，25-(OH)2D2對(duì)牛胸腺VDR的親和性類似于1α，25-(OH)2D3，這表明具有強(qiáng)的生物活性。
實(shí)施例21α，24-二羥基維生素D4[1α，24-(OH)2D4]研究1α，24-(OH)2D4的VDR親和結(jié)合作用。將1α，24-(OH)2D4與維生素D受體和放射性標(biāo)記的痕量1α，25-(OH)2D3一起培養(yǎng)。培養(yǎng)后，測(cè)量結(jié)合于受體的放射活性量，并與共同培養(yǎng)后未標(biāo)記及標(biāo)記的1α，25-(OH)2D3的結(jié)合量進(jìn)行比較。發(fā)現(xiàn)50pg/試管的1α，24-(OH)2D4等于約20pg的1α，25-(OH)2D3。
這些結(jié)果表明，1α，24-(OH)2D4與維生素D受體的結(jié)合略低于1α，25-(OH)2D3。該數(shù)據(jù)意味著，1α，24-(OH)2D4對(duì)VDR具有高親和性及顯著的生物活性，類似于1α，25-(OH)2D3。這些數(shù)據(jù)與用1α，24-(OH)2D4進(jìn)行的基因表達(dá)研究(以下將描述)是一致的，后者表明1α，24-(OH)2D4的活性略低于1α，25-(OH)2D3。
與現(xiàn)有技術(shù)相比，這些結(jié)果是令人驚奇的，同時(shí)也是出乎意料的。它們與維生素D領(lǐng)域中以前認(rèn)為維生素D4化合物的生理活性低的觀點(diǎn)正相反。
實(shí)施例31α，24-二羥基維生素D2[1α，24-(OH)2D2]用Skowronski等人的方法(136 Endocrinology(1995)20-26，該文獻(xiàn)的內(nèi)容在此并入作為參考)證實(shí)維生素D化合物在前列腺細(xì)胞中與VDR的結(jié)合。將前列腺衍生的細(xì)胞系培養(yǎng)至接近融合，然后洗滌并刮集。離心洗滌細(xì)胞，然后將細(xì)胞沉淀物重新懸浮在經(jīng)緩沖的鹽溶液中，該溶液包含蛋白酶抑制劑。用超聲破碎細(xì)胞，并同時(shí)在冰上冷卻。在4℃、207000×g下離心經(jīng)破碎的細(xì)胞35分鐘，分析由此得到的上清液以檢測(cè)結(jié)合情況。200μl可溶性提取物(1-2mg蛋白/ml上清液)與1nM的3H-1α，25-(OH)2D3培養(yǎng)，并在4℃下于16-20小時(shí)中增加1α，24-(OH)2D2的濃度(0.01-100nM)。用羥基磷灰石通過標(biāo)準(zhǔn)方法分離結(jié)合及游離的激素。從測(cè)定的總結(jié)合中減去在250倍過量的非放射性1α，25-(OH)2D3存在時(shí)得到的非特異性結(jié)合，由此計(jì)算特異性結(jié)合。結(jié)果表明，1α，24-(OH)2D2對(duì)前列腺VDR具有強(qiáng)的親和性，這說明1α，24-(OH)2D2對(duì)前列腺細(xì)胞具有強(qiáng)的生物活性。
實(shí)施例41α，24-二羥基維生素D4[1α，24-(OH)2D4]使用活性維生素D類似物1α，24-(OH)2D4重復(fù)實(shí)施例3的方法，并測(cè)定特異性結(jié)合。結(jié)果表明，1α，24-(OH)2D4對(duì)前列腺VDR具有強(qiáng)的親和性，這說明1α，24-(OH)2D4對(duì)前列腺細(xì)胞具有強(qiáng)的生物活性。
實(shí)施例51α，25-二羥基維生素D4[1α，25-(OH)2D4]使用活性維生素D類似物1α，25-(OH)2D4重復(fù)實(shí)施例3的方法，并測(cè)定特異性結(jié)合。結(jié)果表明，1α，25-(OH)2D4對(duì)前列腺VDR具有強(qiáng)的親和性，這說明1α，25-(OH)2D4對(duì)前列腺細(xì)胞具有強(qiáng)的生物活性。
基因表達(dá)實(shí)施例61α，24-二羥基維生素D4[1α，24-(OH)2D4]使用質(zhì)粒p(CT4)4TKGH(其是維生素D受體(VDR)表達(dá)質(zhì)粒)和pSG5-hVDR1/3(其是包含生長激素(GH)基因的質(zhì)粒)，在維生素D應(yīng)答元素(VDRE)的對(duì)照下進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，以發(fā)現(xiàn)1α，24-(OH)2D4與1α，25-(OH)2D3相比誘導(dǎo)維生素D依賴性生長激素的能力，該激素的作用是作為報(bào)道基因。用上述兩種質(zhì)粒轉(zhuǎn)染在培養(yǎng)基中的細(xì)胞。在維生素D應(yīng)答元素(VDRE)的對(duì)照下，一種質(zhì)粒包含表達(dá)生長激素(GH)的基因，另一種質(zhì)粒包含表達(dá)維生素D受體(VDR)的結(jié)構(gòu)基因。這些經(jīng)轉(zhuǎn)染的培養(yǎng)基與1α，24-(OH)2D4或1α，25-(OH)2D3一起培養(yǎng)，然后測(cè)量生長激素的產(chǎn)生。下表2示出了該實(shí)驗(yàn)的結(jié)果。
表2維生素D化合物對(duì)生長激素的誘導(dǎo)

這些數(shù)據(jù)表明，1α，24-(OH)2D4刺激維生素D依賴性的生長激素的能力接近等于1α，25-(OH)2D3。該結(jié)果是非常令人驚奇的，而且是所有現(xiàn)有技術(shù)都沒有公開的。
實(shí)施例71α，24(S)-二羥基維生素D2和1α，24(R)-二羥基維生素D2[1α，24(S)-(OH)2D2和1α，24(R)-(OH)2D2]進(jìn)行實(shí)施例6所述的基因表達(dá)研究，以比較化學(xué)合成的1α，24(S)-(OH)2D2和1α，24(R)-(OH)2D2與1α，25-(OH)2D3和25-OH-D3的體外生物活性。使用維生素D依賴性的轉(zhuǎn)錄活化模型系統(tǒng)，其中將質(zhì)粒pSG5-hVDR1/3和p(CT4)4TKGH共同轉(zhuǎn)染在綠猴腎COS-1細(xì)胞中。
經(jīng)轉(zhuǎn)染的細(xì)胞與維生素D代謝物一起培養(yǎng)，然后測(cè)定生長激素的產(chǎn)生。如表3所示，在該系統(tǒng)中，1α，24(S)-(OH)2D2及其差向異構(gòu)體--1α，24(R)-(OH)2D2都具有明顯比25-OH-D3更高的活性，而1α，24(R)-(OH)2D2的活性幾乎與1α，25-(OH)2D3的相同。
表3在經(jīng)轉(zhuǎn)染的COS-1細(xì)胞中維生素D誘導(dǎo)的生長激素產(chǎn)生

*兩次測(cè)量的平均值對(duì)細(xì)胞增殖的抑制作用實(shí)施例81α，24-二羥基維生素D2[1α，24-(OH)2D2]使用Skowronski等人的方法(132 Endocrinology(1993)1952-1960，以及136 Endocrinology(1995)20-26，這兩個(gè)文獻(xiàn)的內(nèi)容在此并入作為參考)證實(shí)對(duì)細(xì)胞增殖的抑制作用。將得自于人前列腺之腺癌的細(xì)胞系--LnCaP和PC-3接種在六孔組織培養(yǎng)板上，它們的密度為約50000個(gè)細(xì)胞/板。在連接細(xì)胞并穩(wěn)定后，約為2-3天，用包含載體或濃度為10-11-10-7M的活性維生素D類似物--1α，24-(OH)2D2的培養(yǎng)基補(bǔ)充前述培養(yǎng)基。包含測(cè)試類似物或載體的培養(yǎng)基每3天更換一次。6-7天后，除去培養(yǎng)基，并沖洗細(xì)胞，用冷卻的5％三氯乙酸沉淀，然后用冷乙醇洗滌。將細(xì)胞溶解在0.2N氫氧化鈉中，然后通過標(biāo)準(zhǔn)方法測(cè)定DNA的量。結(jié)果表明，根據(jù)本發(fā)明用1α，24-(OH)2D2培養(yǎng)的培養(yǎng)基與對(duì)照培養(yǎng)基相比具有顯著更少的細(xì)胞。
實(shí)施例91α，24-二羥基維生素D4[1α，24-(OH)2D4]使用活性維生素D類似物1α，24-(OH)2D4重復(fù)實(shí)施例8的方法，并測(cè)定細(xì)胞數(shù)量。用1α，24-(OH)2D4培養(yǎng)的培養(yǎng)基與對(duì)照培養(yǎng)基相比具有顯著更少的細(xì)胞。
實(shí)施例101α，25-二羥基維生素D4[1α，25-(OH)2D4]使用活性維生素D類似物1α，25-(OH)2D4重復(fù)實(shí)施例8的方法，并測(cè)定細(xì)胞數(shù)量。用1α，25-(OH)2D4培養(yǎng)的培養(yǎng)基與對(duì)照培養(yǎng)基相比具有顯著更少的細(xì)胞。
對(duì)細(xì)胞分化的刺激作用實(shí)施例111α，24-二羥基維生素D2[1α，24-(OH)2D2]使用Skowronski等人的方法(132 Endocrinology(1993)1952-1960，以及136 Endocrinology(1995)20-26，這兩個(gè)文獻(xiàn)的內(nèi)容在此并入作為參考)，將得自于人前列腺之轉(zhuǎn)移腺癌的細(xì)胞系--LnCaP的細(xì)胞接種在六孔組織培養(yǎng)板上，其密度為約50000個(gè)細(xì)胞/板，而且已知該細(xì)胞可表達(dá)PSA。在連接細(xì)胞并穩(wěn)定后，約為2-3天，用包含載體或濃度為10-11-10-7M的活性維生素D類似物--1α，24-(OH)2D2的培養(yǎng)基補(bǔ)充前述培養(yǎng)基。6-7天后，除去培養(yǎng)基，并在-20℃下儲(chǔ)存，用于前列腺特異性抗原(PSA)的分析。
沖洗平行培養(yǎng)基中的細(xì)胞，然后通過標(biāo)準(zhǔn)方法測(cè)定DNA的量。用標(biāo)準(zhǔn)的已知方法測(cè)定PSA。以PSA量/細(xì)胞計(jì)，用1α，24-(OH)2D2培養(yǎng)的培養(yǎng)基與對(duì)照培養(yǎng)基相比具有顯著更多的PSA。
實(shí)施例121α，24-二羥基維生素D4[1α，24-(OH)2D4]使用活性維生素D類似物1α，24-(OH)2D4重復(fù)實(shí)施例12的方法，并測(cè)定PSA。以PSA量/細(xì)胞計(jì)，用1α，24-(OH)2D4培養(yǎng)的培養(yǎng)基與對(duì)照培養(yǎng)基相比具有顯著更多的PSA。
實(shí)施例131α，25-二羥基維生素D4[1α，25-(OH)2D4]使用活性維生素D類似物1α，25-(OH)2D4重復(fù)實(shí)施例12的方法，并測(cè)定PSA。以PSA量/細(xì)胞計(jì)，用1α，25-(OH)2D4培養(yǎng)的培養(yǎng)基與對(duì)照培養(yǎng)基相比具有顯著更多的PSA。
臨床研究實(shí)施例14MAH的總治療方法罹患與惡性腫瘤有關(guān)的血鈣過多癥的患者參與根據(jù)本發(fā)明之低鈣血性維生素D化合物的開標(biāo)研究。患者的每日鈣攝入量被限制在約400-500mg。每位患者還被要求比通常飲水多飲入4-6杯的水，以確保足夠的口腔水合作用。
每位受試者在規(guī)定的間隔檢測(cè)以下指標(biāo)(1)血鈣過多、血清PTHrP水平、血磷過多、尿鈣過多、尿磷過多以及其他毒性；(2)轉(zhuǎn)移性疾病發(fā)展變化的證據(jù)；以及(3)與處方測(cè)試藥物劑量的順應(yīng)性。
給藥方案通常是每日劑量基礎(chǔ)為約10μg或20μg每日-約100μg每日，共進(jìn)行10周?；蛘呖墒褂梅敲咳战o藥的方案，即、每隔一天給藥40μg，每周一次100μg。給藥途徑可為口服、靜脈直至區(qū)域性轉(zhuǎn)運(yùn)(例如動(dòng)脈輸注、通過門靜脈)。當(dāng)然，口服給藥是最容易的而且也是最有效的途徑。區(qū)域性轉(zhuǎn)運(yùn)可允許高的給藥劑量，并且通?？杀苊猱a(chǎn)生血鈣過多。但在根據(jù)本發(fā)明的化合物時(shí)，所述化合物基本上是低鈣血性的。
在治療期后，用于評(píng)估轉(zhuǎn)移性疾病發(fā)展的CAT、掃描、X射線以及骨掃描顯示在更低的劑量水平下疾病保持穩(wěn)定或者在許多患者中有部分減輕，而且在更高的劑量時(shí)在許多患者中疾病保持穩(wěn)定以及部分或者完全減輕。血清鈣濃度在正常范圍內(nèi)，而血清PTHrP水平降低。
實(shí)施例15使用1α，24(S)-二羥基維生素D2[1α，24(S)-(OH)2-D2]治療MAH使用1α，24(S)-(OH)2D2重復(fù)進(jìn)行實(shí)施例14的步驟。結(jié)果顯示血清鈣濃度在正常范圍內(nèi)，而血清PTHrP水平降低。
實(shí)施例16使用1α-羥基維生素D2[1α-OH-D2]治療MAH使用1α-OH-D2重復(fù)進(jìn)行實(shí)施例14的步驟。結(jié)果顯示血清鈣濃度在正常范圍內(nèi)，而血清PTHrP水平降低。
雖然已具體地描述了本發(fā)明，但本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)認(rèn)識(shí)到，還可在本發(fā)明的范圍內(nèi)進(jìn)行各種改進(jìn)，其包括改變、添加和省略。因此，這些改進(jìn)也應(yīng)在本發(fā)明的范圍之內(nèi)，而且本發(fā)明的范圍僅應(yīng)局限在所附權(quán)利要求書的法律解釋范圍內(nèi)。
權(quán)利要求
1.一種用于治療與惡性或腫瘤細(xì)胞有關(guān)的血鈣過多的方法，其包括使用有效量的低鈣血性維生素D化合物治療所述細(xì)胞，而且所述維生素D化合物在C24位處具有烴基團(tuán)。
2.如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述細(xì)胞是乳腺、結(jié)腸癌、肺癌、頸和頭部的癌癥、胰腺癌、子宮內(nèi)膜癌、膀胱癌、子宮頸癌、睪丸癌、卵巢癌、鱗狀細(xì)胞癌、髓性和淋巴細(xì)胞性白血病、淋巴瘤、髓性甲狀腺癌、黑素瘤、多發(fā)性骨髓瘤、成視網(wǎng)膜細(xì)胞瘤、或者軟組織和骨的肉瘤。
3.如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述低鈣血性羥基維生素D是以下通式(I)表示的化合物 其中A1和A2分別是氫或在C-22和C-23之間形成雙鍵的碳-碳鍵；R1和R2可相同或不同并且是氫、羥基、低級(jí)烷基、低級(jí)氟代烷基、O-低級(jí)烷基、低級(jí)烯基、低級(jí)氟代烯基、O-低級(jí)烯基、O-低級(jí)?；?、O-芳香?；?、低級(jí)環(huán)烷基，其條件是R1和R2不能都是烯基，或與它們所連接的碳一起形成C3-C8環(huán)碳環(huán)；R3是低級(jí)烷基、低級(jí)烯基、低級(jí)氟代烷基、低級(jí)氟代烯基、O-低級(jí)烷基、O-低級(jí)烯基、O-低級(jí)?；-芳香?；虻图?jí)環(huán)烷基；X1是氫或羥基，或者當(dāng)R3是烯基時(shí)，與R3構(gòu)成一個(gè)鍵；X2是氫或羥基，或者與R1或R2構(gòu)成雙鍵；X3是氫或羥基，其條件是X1、X2或X3中至少一個(gè)是羥基；而且如果與Y連接的鍵是雙鍵，則Y是亞甲基，或者如果與Y連接的鍵是單鍵，則是甲基或氫。
4.如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述低鈣血性羥基維生素D是以下通式(I)表示的1α-羥基維生素D化合物 其中A1和A2分別是氫或在C-22和C-23之間形成雙鍵的碳-碳鍵；R1和R2可相同或不同并且是氫、羥基、低級(jí)烷基、低級(jí)氟代烷基、O-低級(jí)烷基、低級(jí)烯基、低級(jí)氟代烯基、O-低級(jí)烯基、O-低級(jí)酰基、O-芳香酰基、低級(jí)環(huán)烷基，其條件是R1和R2不能都是烯基，或者與它們所連接的碳一起形成C3-C8環(huán)碳環(huán)；R3是低級(jí)烷基、低級(jí)烯基、低級(jí)氟代烷基、低級(jí)氟代烯基、O-低級(jí)烷基、O-低級(jí)烯基、O-低級(jí)?；?、O-芳香?；虻图?jí)環(huán)烷基；X1是氫或羥基，或者當(dāng)R3是烯基時(shí)，與R3構(gòu)成一個(gè)鍵；而X2是氫或羥基，或者與R1或R2構(gòu)成雙鍵。
5.如權(quán)利要求4所述的方法，其中所述式(I)化合物是1α，24-二羥基維生素D2、1α，24-二羥基維生素D4、1α，25-二羥基維生素D4、1α，25-二羥基維生素D2、1α-羥基維生素D2和1α-羥基維生素D4。
6.如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述低鈣血性維生素D化合物的給藥方案是每日給藥或者階段性給藥的方案。
7.如權(quán)利要求6所述的方法，其中所述階段性給藥方案是每2-7天給藥一次。
8.如權(quán)利要求6所述的方法，其中所述低鈣血性維生素D化合物的每日給藥劑量為約10-100μg/天。
9.如權(quán)利要求6所述的方法，其中所述低鈣血性維生素D化合物是通過口服、靜脈給藥或者區(qū)域性轉(zhuǎn)運(yùn)至癌部位。
10.如權(quán)利要求9所述的方法，其中所述低鈣血性維生素D化合物是通過口服給藥。
11.如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述低鈣血性維生素D化合物與細(xì)胞毒性劑共同給藥。
12.如權(quán)利要求11所述的方法，其中所述細(xì)胞毒性劑是抗代謝藥、抗微管劑、烷基化劑、鉑藥物、蒽環(huán)霉素、拓?fù)洚悩?gòu)酶抑制劑或者抗生素。
13.如權(quán)利要求12所述的方法，其中所述抗代謝藥是5-氟尿嘧啶、氨甲蝶呤或氟達(dá)拉濱。
14.如權(quán)利要求12所述的方法，其中抗微管劑是長春新堿、長春堿或紫杉烷類藥物。
15.如權(quán)利要求14所述的方法，其中所述紫杉烷類藥物是紫杉醇或多西他塞。
16.如權(quán)利要求12所述的方法，其中所述烷基化劑是環(huán)膦酰胺、美法侖、二氯乙基硝基脲或羥基脲。
17.如權(quán)利要求12所述的方法，其中所述鉑藥物是順鉑、卡鉑、奧沙利鉑、JM-216或CI-973。
18.如權(quán)利要求12所述的方法，其中蒽環(huán)霉素是多柔比星或柔紅霉素。
19.如權(quán)利要求12所述的方法，其中所述抗生素是絲裂霉素、伊達(dá)比星、多柔比星或柔紅霉素。
20.如權(quán)利要求12所述的方法，其中所述拓?fù)洚悩?gòu)酶抑制劑是依托泊苷或喜樹堿。
21.如權(quán)利要求12所述的方法，其中所述細(xì)胞毒性劑是磷酸雌莫司汀或潑尼莫司汀。
22.一種用于治療人以緩解與乳腺癌、結(jié)腸癌、前列腺癌、睪丸癌、胰腺癌、子宮內(nèi)膜癌、肺部的小細(xì)胞及非小細(xì)胞癌(包括鱗狀、腺癌和大細(xì)胞類型)、腦和頸部的鱗狀細(xì)胞、膀胱、卵巢和子宮頸癌、髓性和淋巴細(xì)胞性白血病、淋巴瘤、肝腫瘤、髓性甲狀腺癌、多發(fā)性骨髓瘤、黑素瘤、成視網(wǎng)膜細(xì)胞瘤、或者軟組織和骨的肉瘤有關(guān)的血鈣過多的方法，其包括向所述人給藥治療量的低鈣血性維生素D化合物。
23.如權(quán)利要求22所述的方法，其中所述低鈣血性羥基維生素D是以下通式(III)表示的1α-羥基維生素D化合物 其中A1和A2分別是氫或在C-22和C-23之間形成雙鍵的碳-碳鍵；R1和R2可相同或不同并且是氫、羥基、低級(jí)烷基、低級(jí)氟代烷基、O-低級(jí)烷基、低級(jí)烯基、低級(jí)氟代烯基、O-低級(jí)烯基、O-低級(jí)?；?、O-芳香酰基、低級(jí)環(huán)烷基，其條件是R1和R2不能都是烯基，或者與它們所連接的碳一起形成C3-C8環(huán)碳環(huán)；R3是低級(jí)烷基、低級(jí)烯基、低級(jí)氟代烷基、低級(jí)氟代烯基、O-低級(jí)烷基、O-低級(jí)烯基、O-低級(jí)?；?、O-芳香酰基或低級(jí)環(huán)烷基；X1是氫或羥基，或者當(dāng)R3是烯基時(shí)，與R3構(gòu)成一個(gè)鍵；而X2是氫或羥基，或者與R1或R2構(gòu)成雙鍵。
24.如權(quán)利要求23所述的方法，其中所述治療量是0.01-2.0μg/lg/天。
25.如權(quán)利要求23所述的方法，其中所述式(I)化合物是1α，24-二羥基維生素D2、1α，24-二羥基維生素D4、1α，25-二羥基維生素D4、1α，25-二羥基維生素D2、1α-羥基維生素D2和1α-羥基維生素D4。
26.一種用于治療人以緩解與惡性細(xì)胞有關(guān)的血鈣過多的方法，其包括向所述人給藥低鈣血性維生素D化合物以及細(xì)胞毒性劑。
27.如權(quán)利要求26所述的方法，其中所述低鈣血性維生素D化合物是在給藥所述細(xì)胞毒性劑之前0.5-7天給藥。
28.如權(quán)利要求26所述的方法，其中所述低鈣血性維生素D化合物是在給藥所述細(xì)胞毒性劑之前2-4天給藥。
29.如權(quán)利要求26所述的方法，其中所述低鈣血性羥基維生素D是以下通式(III)表示的1α-羥基維生素D化合物 其中A1和A2分別是氫或在C-22和C-23之間形成雙鍵的碳-碳鍵；R1和R2可相同或不同并且是氫、羥基、低級(jí)烷基、低級(jí)氟代烷基、O-低級(jí)烷基、低級(jí)烯基、低級(jí)氟代烯基、O-低級(jí)烯基、O-低級(jí)酰基、O-芳香酰基、低級(jí)環(huán)烷基，其條件是R1和R2不能都是烯基，或者與它們所連接的碳一起形成C3-C8環(huán)碳環(huán)；R3是低級(jí)烷基、低級(jí)烯基、低級(jí)氟代烷基、低級(jí)氟代烯基、O-低級(jí)烷基、O-低級(jí)烯基、O-低級(jí)?；?、O-芳香?；虻图?jí)環(huán)烷基；X1是氫或羥基，或者當(dāng)R3是烯基時(shí)，與R3構(gòu)成一個(gè)鍵；而X2是氫或羥基，或者與R1或R2構(gòu)成雙鍵。
30.如權(quán)利要求29所述的方法，其中所述治療量是0.01-2.0μg/kg/天。
31.如權(quán)利要求29所述的方法，其中所述式(I)化合物是1α，24-二羥基維生素D2、1α，24-二羥基維生素D4、1α，25-二羥基維生素D4、1α，25-二羥基維生素D2、1α-羥基維生素D2和1α-羥基維生素D4。
32.如權(quán)利要求29所述的方法，其中所述細(xì)胞毒性劑是抗代謝藥、抗微管劑、烷基化劑、鉑藥物、蒽環(huán)霉素、拓?fù)洚悩?gòu)酶抑制劑或者抗生素。
33.一種用于降低患者中的甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白血清濃度的方法，其包括向所述患者給藥有效量的低鈣血性維生素D化合物。
全文摘要
本發(fā)明涉及使用活性維生素D類似物治療與惡性腫瘤有關(guān)的血鈣過多的方法。該方法包括使用有效量的低鈣血性維生素D化合物以緩解血鈣過多并降低甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白的血清濃度。
文檔編號(hào)A61K31/407GK1520301SQ02812871
公開日2004年8月11日 申請(qǐng)日期2002年6月26日 優(yōu)先權(quán)日2001年6月26日
發(fā)明者查爾斯·W·畢曉普, 理查德·B·梅茲斯, B 梅茲斯, 查爾斯 W 畢曉普 申請(qǐng)人:骨療國際公司