專利名稱：用作5－h(huán)t的制作方法
本文所述的發(fā)明涉及用作5-HT6和/或5-HT75-羥色胺受體的配體的5-鹵代色胺衍生物；它們的制備方法；它們作為藥物，特別是用于治療與5-羥色胺水平不足有關(guān)的神經(jīng)系統(tǒng)病理情況，涉及心血管系統(tǒng)、胃腸道的系統(tǒng)病理情況的藥物的應(yīng)用；和包含它們的藥物組合物。
背景技術(shù)：
在過去的10年中，分子克隆已揭示14種5-羥色胺亞型，這些亞型已被分成7個亞族。已提出5-羥色胺受體的多樣性是5-HT系統(tǒng)進(jìn)化時代的直接結(jié)果。除了作為配體門控的離子通道的5-HT3受體以外，所有的受體都是5-羥色胺受體超家族的成員，屬于一大類通過G-蛋白與它們的效應(yīng)子功能相連的受體。(Gerhardt，C.C.等人，Brain Res.746207-219，1997；Hoyer，D等人，Neuropharmacol.36；419-428，1997)。
1994年，在豬尾狀核和小腦膜上發(fā)現(xiàn)5-HT65-羥色胺受體。從那時起，在嗅結(jié)節(jié)、額葉和內(nèi)嗅皮層、伏隔核、紋狀體、海馬和小腦的分子層中觀察到5-HT65-羥色胺受體。5-HT65-羥色胺受體似乎幾乎專門存在于腦和5-HT投射區(qū)，而不存在于縫核的5-HT神經(jīng)元中，這表明5-HT6受體可能具有突觸后作用。還發(fā)現(xiàn)5-HT6受體是G-蛋白超家族的成員，且它們與腺苷酸環(huán)化酶第二信使系統(tǒng)正偶聯(lián)。
5-羥色胺與5-HT6受體結(jié)合誘導(dǎo)腺苷酸環(huán)化酶的活化，同時增加細(xì)胞內(nèi)cAMP水平。最近對于5-HT65-羥色胺受體的發(fā)現(xiàn)已刺激了深入5-HT6-選擇性配體的研究，以表明該新的受體亞族的獨特性及其本身確切的臨床意義。實際上已知許多精神藥物(抗抑郁藥、抗精神藥)表現(xiàn)出對5-HT6的高度親合力，但是不具有選擇性(Monsma，F(xiàn).J.等人，Molecular Pharmacology(分子藥理學(xué))43.320-327，1993；Roth，B.L.等人，J.Pharmacol.Exp.Ther.(藥理實驗治療雜志)268，1403-1410；1994)，而5-HT6受體可能調(diào)節(jié)中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的膽堿能神經(jīng)傳遞。而且，已提出出現(xiàn)在紋狀體中含GABA的神經(jīng)元和海馬含谷氨酸的神經(jīng)元上的5-HT6受體介導(dǎo)內(nèi)源性5-羥色胺作用。因此，5-HT6受體的配體可能用于治療運(yùn)動障礙、抑郁、焦慮、心境障礙、記憶障礙、亨廷頓舞蹈病、帕金森病和阿爾茨海默氏病(Branchek，T.A.和Blackburn，T.P.，Annu.Rev.Pharm.Toxicol.40319-34，2000)。
在數(shù)種嚙齒動物和人組織中鑒定了5-HT75-羥色胺受體。在大鼠腦中，5-HT7受體出現(xiàn)并特別高度分布在下丘腦、丘腦和海馬，而在大腦皮層、紋狀體、嗅球和嗅結(jié)節(jié)中發(fā)現(xiàn)較低的5-HT7受體RNAm水平。5-HT7受體RNAm的存在不限于腦，還見于外周組織(脾、胃、腸、心臟、冠狀動脈)。5-HT7受體與腺苷酸環(huán)化酶系統(tǒng)在功能上偶聯(lián)。體外藥理學(xué)證據(jù)表明在5-HT7受體刺激之后細(xì)胞內(nèi)cAMP水平升高。同5-HT65-羥色胺受體一樣，5-HT7受體的臨床價值目前未知(Sleight，A.J.，Boess，F(xiàn).G.，Bourson，A.，Sibley，D.R.，Monsma，F(xiàn).J.，1997DN&P；10(4)214-224)。已提出5-HT7受體可能參與調(diào)節(jié)血壓的機(jī)理。5-HT7受體高度分布于血管上，藥理學(xué)數(shù)據(jù)表明在5-羥色胺與5-HT7受體結(jié)合后發(fā)生血管舒張，這些事實提示可將5-HT7配體用作降低血壓藥(Martin，G.R.和Wilson，R.，(1995)British J.Pharmacol.(英國藥理學(xué)雜志)114383P)。而且，以前證明在下丘腦中豐富存在的5-HT7受體涉及調(diào)控中樞神經(jīng)系統(tǒng)中自發(fā)的神經(jīng)元電活動的生理節(jié)奏(Lowenberg，T.N.等人，Neuron(神經(jīng)元)(1993)11449-58)。
因此，5-HT7配體可以是多種由生理節(jié)奏特別是睡眠周期調(diào)節(jié)的過程的調(diào)節(jié)劑，它的失調(diào)導(dǎo)致睡眠障礙。其它證據(jù)表明5-HT7受體可能參與抑郁的發(fā)病機(jī)理和治療。大鼠下丘腦中的5-HT7受體結(jié)合部位決定了在抗抑郁劑氟西汀長期治療之后的下調(diào)，這一觀察支持了這種治療適應(yīng)癥(Sleight，A.J.等人，Mol.Pharm.(分子藥理學(xué))(1996)，4799-103)。神經(jīng)遞質(zhì)失調(diào)假設(shè)的嚴(yán)格的經(jīng)典觀點將抑郁與可利用的神經(jīng)遞質(zhì)的不足或主要是去甲腎上腺素能和/或5-羥色胺能受體系統(tǒng)的反應(yīng)性低下相關(guān)聯(lián)，這種觀點近來已擴(kuò)展至包括生物節(jié)律調(diào)節(jié)的紊亂。許多人已提出節(jié)律保持效力的損害或節(jié)律失調(diào)導(dǎo)致精神疲勞和抑郁(Goodwin F.K.，Wirz-Justice A.，Wehr T.A.，1982.In CostaRagni(eds.)，Typical and atypical antidepressantClinical Pratical(典型和非典型抗抑郁藥臨床實踐))。
雖然一般認(rèn)為褪黑激素是主要的生理節(jié)奏功能調(diào)節(jié)劑，但5-羥色胺也起著關(guān)鍵作用，特別是作用于下丘腦交叉上核中的5-HT1a、5-HT1b、5-HT2a、5-HT7亞型(Van Den Pol，A.N.，Dudek，F(xiàn).E.，(1993)Neurosciensce(神經(jīng)科學(xué))56793-811；Mullins，U.L.等人，(1999)Neuropsychopharmacology(神經(jīng)心理藥理學(xué))21，(3)352-367)。
5-HT6和5-HT7受體部位同時定位于在功能上與注意力和學(xué)習(xí)過程有關(guān)的腦區(qū)域(海馬、額葉皮層)，雖然以不同的分布密度存在，并且兩種受體在被刺激之后具有相同的增加細(xì)胞內(nèi)cAMP水平的能力表明與5-HT6和5-HT7受體結(jié)合的物質(zhì)可調(diào)節(jié)個體獲知和隨后的學(xué)習(xí)過程所潛在的神經(jīng)元可塑性機(jī)理。
對5-HT6和5-HT7受體同時具有親合力的配體可能在需要改善認(rèn)知過程的病癥中具有治療應(yīng)用(Menese，A.，(1999)Neurosci.Biobehav.Rev.，23(8)1111-25)。
近來的證據(jù)提出5-HT7-配體在過敏性腸疾病的治療中的可能應(yīng)用。認(rèn)為胃動力減弱是這種綜合征的病理生理學(xué)機(jī)理中的一種潛在機(jī)理，并仍是一個誘人的治療目標(biāo)。實際上，新一代促動力藥包括5-HT4受體配體(替加色羅、普卡比利)。初步的證據(jù)引起對定向針對上述治療目標(biāo)的5-HT7受體配體研究的興趣(De Ponti，F(xiàn).，Tonini，M.，(2001)Drugs(藥物)，61(3)317-332)。實際上，關(guān)于5-HT7受體介導(dǎo)平滑肌松馳和5-HT7結(jié)合部位定位于腸組織上的觀察結(jié)果應(yīng)該表明5-HT7受體的配體的治療應(yīng)用。
目前，已鑒定對5-HT6受體具有親合力的化合物屬于不同的化學(xué)種類。例如，EP 0 815 861和EP 0 930 302，Hoffmann-La Roche描述磺酰胺和苯并磺酸酯衍生物為上述受體的選擇性配體；WO 98/27058，SmithKline Beecham描述羧基酰胺吲哚衍生物為5-HT6受體拮抗劑，而WO 98/27081和WO 99/42465，SmithKline Beecham和US 6,187,805，Merck Sharp和Dohme特別描述了磺酰胺衍生物；WO 00/12623，SmithKline Beecham描述了磺酸酯和磺酰胺衍生物；WO 00/37452，Merck Patent描述磺?；鶉f唑基胺；WO 00/63203和US 6,133,287，Allelix Bio-pharmaceutical Inc.描述哌啶子基吲哚用作5-HT6拮抗劑。
已知色胺衍生物用于數(shù)種藥理學(xué)應(yīng)用。WO 97/06140描述它們用于治療與褪黑激素紊亂有關(guān)的病理情況；WO 97/46525和WO98/23587描述它們作為5-HT1D受體的選擇性配體和它們在偏頭痛治療中的應(yīng)用；WO 97/48680描述用于血管痙攣的治療；WO 98/06695描述用于皮膚病治療；WO 98/47868描述作為多種5-HT1受體亞型的拮抗劑的聯(lián)合活性；WO 00/11619描述它們作為選擇性5-HT2A受體的選擇性拮抗劑；WO 99/51576描述用于治療與5-羥色胺能系統(tǒng)有關(guān)的神經(jīng)疾??；WO 99/54301描述它們作為抗菌劑；WO 00/37441描述用于心血管、局部缺血、寄生蟲、炎性、神經(jīng)變性疾病、肌病和鐮狀細(xì)胞貧血的治療；WO 00/78716和WO 00/44721描述它們作為作用于腎上腺素能系統(tǒng)的活性劑。
注意到其它色胺衍生物對不同于5-HT6的5-羥色胺能受體的活性，例如WO 95/14004、WO 95/24200、WO 96/26922、WO 96/26923、WO 97/13512、WO 99/51576，EP 1023898和WO 00/52002。
關(guān)于對5-HT6受體具有特異性活性的化合物，WO 99/47516，Slassi等人描述了對5-HT6受體具有親合力的在3位被烷基吡咯烷取代的1-酰基或1-磺?；胚帷O 99/65906，Allelix Biopharmaceuticals Inc.公開了與吲哚殘基連接的二環(huán)哌啶和哌嗪作為5-HT6受體的抑制劑。
專利申請WO 00/34242，Virginia Commonwealth University公開了具有增加的對5-HT6受體的親合力和選擇性的5-羥色胺衍生物。專利申請WO 00/63203，Allelix Biopharmaceuticals Inc.公開了對5-HT6受體具有親合力的在3位被哌啶取代的1-?；?-磺?；胚帷?br> 關(guān)于5-HT7受體，WO 00/37082，SmithKline Beecham公開了在WO 97/29097、WO 98/48681和WO 97/49695中所述的5-HT7受體拮抗劑用于治療由局部缺血事件導(dǎo)致的神經(jīng)元變性的應(yīng)用；EP 0 998 923，BASF公開5-HT7受體拮抗劑在預(yù)防局部缺血，特別是梗塞中的應(yīng)用；WO 99/54303和WO 98/00400，Meiji公開四氫苯并吲哚用于治療精神和循環(huán)疾病。
發(fā)明概述本發(fā)明涉及對5-HT6和/或5-HT75-羥色胺受體具有親合力的基于色胺的配體。從治療學(xué)的觀點來看，這些物質(zhì)可以用于治療與5-羥色胺水平不足有關(guān)的神經(jīng)系統(tǒng)病理情況，涉及心臟循環(huán)系統(tǒng)(高血壓)和胃腸道(過敏性腸疾病)的系統(tǒng)病理情況。
已知許多中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病通過使用可與5-羥色胺受體特異性相互作用的藥物來有效地治療，所述藥物由于這個原因在臨床上被批準(zhǔn)用于治療偏頭痛、抑郁、高血壓、精神病和精神疲勞、睡眠障礙和其它由生理節(jié)奏失調(diào)導(dǎo)致的效應(yīng)。
已發(fā)現(xiàn)式(I)的化合物對5-HT6和/或5-HT7受體具有親合力， 其中R1和R2，相同或不同，為H或C1-C6直鏈或支鏈烷基；R3＝C1-C6直鏈或支鏈烷基；R4＝鹵素。
因此，本發(fā)明的一個目的是以上式(I)的化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽用于制備用作5-HT6和/或5-HT75-羥色胺能受體的配體，特別是用于治療與5-羥色胺水平不足有關(guān)的神經(jīng)系統(tǒng)病理情況，涉及心臟循環(huán)系統(tǒng)(特別是高血壓)、胃腸道(特別是過敏性腸疾病)的系統(tǒng)病理情況的藥物的用途。
本發(fā)明的其它目的是式(I)的新化合物，從式(I)中排除這樣的化合物其中的R4為氟、氯或溴，R3為甲基或乙基，R1和R2相同或不同，為氫和甲基；一種用于制備所述式(I)的新化合物的方法；其用作藥物，特別是用于治療與5-羥色胺水平不足有關(guān)的神經(jīng)系統(tǒng)病理情況，涉及心血管系統(tǒng)(特別是高血壓)、胃腸道(特別是過敏性腸疾病)的系統(tǒng)病理情況的藥物的應(yīng)用；和包含該化合物作為活性成分的藥物組合物。
發(fā)明詳述在式(I)的化合物中，術(shù)語C1-C6烷基意指甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、已基和所有可能的異構(gòu)體，優(yōu)選甲基和乙基。
鹵素意指氟、氯、溴和碘，優(yōu)選氯和溴。
在式(I)的化合物中，第一優(yōu)選的小組包括其中的R1和R2相同，特別是甲基的化合物。
第二優(yōu)選的小組包括這樣的式(I)的化合物，其中R3為如以上定義的烷基，特別是甲基或乙基，而R4為氯。
其中的R4為氯的式(I)的化合物對5-HT65-羥色胺受體具有選擇性親合力，因而用于制備用作5-HT6的配體的藥物，例如用于治療抑郁、心境障礙、精神病、精神分裂癥、運(yùn)動障礙、認(rèn)知障礙、帕金森病、阿爾茨海默氏病、亨廷頓舞蹈病。
第三優(yōu)選的小組包括這樣的式(I)的化合物，其中R3為如以上定義的烷基，特別是甲基，而R4為溴。
特別地，當(dāng)R4為溴時，所述分子還獲得對5-HT7受體亞型的親合力。
由于這種性能，所述化合物被指示用于治療抑郁、偏頭痛、高血壓，特別是改善個體學(xué)習(xí)過程，對抗生物節(jié)律失調(diào)和許多源于此的變化(精神疲勞、抑郁、睡眠障礙)。
特別優(yōu)選的化合物為5-溴-2-甲基-N，N-二甲基色胺(ST 1938)、5-氯-2-乙基-N，N-二甲基色胺(ST 2253)和5-氯-2-甲基-N，N-二甲基色胺(ST 1936)。
在Chapman，N.B等人，J.Chem.Soc.(化學(xué)學(xué)會雜志)1965；1424-1428中描述了這樣的式(I)的化合物，其中R3為甲基，R1和R2相同或不同，為氫和甲基。
根據(jù)本發(fā)明的化合物可以通過以下路線例示的方法，根據(jù)在文獻(xiàn)中對類似化合物所報道的步驟來制備(Spadoni，G.等人，J.Med.Chem.(醫(yī)藥化學(xué)雜志)，1993；36(25)4069-74)。
對于與上述式(I)有關(guān)的目標(biāo)最終產(chǎn)物，本領(lǐng)域技術(shù)人員將能夠選擇正確的原料化合物和相應(yīng)的試劑與反應(yīng)條件。
本發(fā)明的方法根據(jù)以下報道的路線1完成。
原料化合物5-鹵代-2-烷基-吲哚可商購得到或可以由類似J.Med.Chem.1993，36，4069所述的方法制備，但還參見JOC 1994，59，6372-6377。
將式(I)的化合物與可商購得到的1-二甲基氨基-2-硝基乙烯反應(yīng)。摩爾比不是關(guān)鍵，例如便利的是使所述化合物以等摩爾量反應(yīng)，即使有關(guān)不同的式(I)的最終產(chǎn)物可能考慮到存在過量的一種或另一種反應(yīng)物。所述反應(yīng)在三氟乙酸中，并在可以根據(jù)所用的反應(yīng)物、它們的濃度和溶劑而選擇的一定的溫度下持續(xù)一段時間。適宜地，反應(yīng)可以在低溫下，例如0℃，高至與反應(yīng)條件相容的溫度下，在不存在或存在減少量的次要產(chǎn)物或降解的情況下，進(jìn)行數(shù)分鐘至數(shù)小時的時間。
如果需要的話，使用本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的常規(guī)方法從反應(yīng)介質(zhì)中分離化合物(2)，然后將與硝基相鄰的乙基雙鍵還原得到對應(yīng)的飽和衍生物(3)。本領(lǐng)域技術(shù)人員可以從前面的段落中獲得有關(guān)反應(yīng)條件的考慮。
最終的步驟用在R1和R3的定義中所給出的基團(tuán)將伯氨基官能化。這通過文獻(xiàn)如J.Org.Chem.(有機(jī)化學(xué)雜志)37，1673-1674(1972)記載的常規(guī)方法完成。
以下的實施例進(jìn)一步例示本發(fā)明。
實施例1(E)-5-溴-2-甲基-3-(2-硝基乙烯基)-1H-吲哚將在5mL三氟乙酸中的0.58g 1-(二甲基氨基)-2-硝基乙烯(5mmol)的溶液攪拌并冷卻至0℃，加入1.05g(5mmol)5-溴-2-甲基-吲哚，并使所得的混合物在室溫下和氮氣氛下反應(yīng)30分鐘。然后將反應(yīng)混合物置于冰水浴中。用乙酸乙酯萃取水溶液，并合并有機(jī)相，然后用飽和碳酸氫鹽溶液洗滌，隨后用水洗滌，最后用無水硫酸鈉干燥。過濾后，在低壓下除去溶劑，剩下固體、橙色殘余物，然后將其懸浮在乙酸乙酯-乙醚混合物中，并過濾。
產(chǎn)率89％Rf＝0.3(環(huán)己烷/EtOAc∶1)M.p.196-198℃(分解)1H-NMR(200MHz)(DMSO-d6)δ2.59(s，3H)，7.34(m，2H)，7.97(d，1H，J＝13.2Hz)，8.06(m，1H)，8.26(d，1H，J＝13.2Hz)EIMSm/z 280，282(M+)，154(100)5-溴-2-甲基色胺鹽酸鹽在氮氣氛和0℃下將在25mL無水THF中的硝基乙烯基吲哚(2)(1.7g，6mmol)的溶液滴加到LiAlH4(1.2g，36mmol)在THF(6.5mL)中的懸浮液，并將所得的混合物于室溫下攪拌5小時。冷卻至0℃后，通過小心地加入水而破壞過量的LiAlH4并使所得的懸浮液通過C鹽過濾。將溶劑真空蒸發(fā)，用2N HCl將殘余物酸化，然后用水和乙酸乙酯進(jìn)行分配。隨后用6N NaOH將水相堿化，并用乙酸乙酯萃取3次。用鹽水洗滌合并的有機(jī)相，用無水硫酸鈉干燥，并在真空下濃縮。然后通過加入在無水甲醇中的HCl溶液將所得的游離胺轉(zhuǎn)化為鹽酸鹽。隨后通過在乙酸乙酯中結(jié)晶而將鹽純化。
產(chǎn)率69％。
1H NMR(200MHz，(DMSO-d6)δ2,33(s，3H)，7.09(dd，1H，J＝1,9和J＝8,3Hz)，7.21(d，1H，J＝8,3Hz)，7.65(d，1H，J＝1,5Hz)，7.94(br，s，3H)，11,15(s，1H)，7.94(br，s，3H)，11.15(s，1H)。
5-溴-2-甲基-N，N-二甲基色胺(ST 1938)將在16mL MeOH中的40％HCHO溶液(0.95mL)滴加到攪拌的5-溴-2-甲基色胺(0.8g，3.16mmol)、AcOH(0.47mL)和NaCNBH4(0.35g)的溶液。使此溶液在室溫和攪拌下反應(yīng)2.5小時；然后加入5mLK2CO3飽和水溶液；在真空下蒸發(fā)甲醇，并用乙酸乙酯萃取水相。
用無水硫酸鈉干燥有機(jī)相，并在真空下蒸發(fā)溶劑后得到一種橙色油，通過硅膠過濾和隨后用二氯甲烷-己烷結(jié)晶將其純化。
產(chǎn)率56％M.p.135-136℃Rf＝0,52(CH2Cl2/MeOH/TEA 9∶0,4∶0,4)1H NMR(200MHz，(CDCl3)δ2,35(s，6H)，2,37(s，3H)，2,44-2,52(m，2H)，2,78-2,86(m，2H)，7,11(d，1H，J＝8,5Hz)，7,18(dd，1H，J＝1,6eJ＝8,5Hz)，7,60(d，1H，J＝1,6Hz)，7,95(br s，1H)。
EIMSm/z 280，282(M+)，222，224(100)。
實施例2
根據(jù)所述的方法，并根據(jù)以上的路線和實施例，制備以下化合物(E)-5-氯-2-甲基-3-(2-硝基乙烯基)-1H-吲哚橙色固體產(chǎn)率85％；M.p..191-193℃1H NMR(200MHz，(丙酮-d6)δ2,68(s，3H)，7,21(dd，1H，J＝1,95和J＝8,5Hz)，7,5(d，1H，J＝8,5Hz)，7,85(d，1H，J＝13,3Hz)，7,86(d，1H，J＝1,95Hz)，8,30(d，1H，J＝13,3Hz)；EIMSm/z 236(M+)，154(100)。
5-氯-2-甲基色胺鹽酸鹽從EtOH/Et2O沉淀的淡棕色固體結(jié)晶。
產(chǎn)率72％1H NMR(200MHz，(DMSO-d6)δ2,33(s，3H)，6,97(dd，1H，J＝1,9和J＝8,3Hz)，7,25(d，1H，J＝8,3Hz)，7,52(d，1H，J＝1,5Hz)，8,03(br，s，3H)，11,15(s，1H)。
5-氯-2-甲基-N，N-二甲基色胺(ST 1936)白色固體；產(chǎn)率75％；M.p.＝126-127℃1H NMR(200MHz，CDCl3)δ2,35(s，6H)，2,38(s，3H)，2,44-2,52(m，2H)，2,79-2,87(m，2H)，7,05(d，1H，J＝1,9和J＝8,6Hz)，7,17(d，1H，J＝8,2Hz)，7,45(d，1H，J＝1,9Hz)，7,86(br s，1H)EIMSm/z 236(M+)，178(100)。
實施例3
反應(yīng)物(a)t-BuLi，THF，-20℃；EtI，-78°至室溫，2h；(b)2N NaOH、MEOH，回流，40h；(c)1-(二甲基氨基)-2硝基乙烯，TFA，0℃，0,5h；(d)LiAlH4，THF，室溫，6h；(e)NaCNBH3，40％，HCHO，MeOH，AcOH，室溫，2,5h。
N-(苯磺?；?-5-氯-2-乙基吲哚(2).
在-70℃和氮氣氛下將t-BuLi(3.7mL在戊烷中的1.7M溶液)滴加到在THF(35mL)中的N-(苯磺?；?-5-氯吲哚(1)(J.Org.Chem.(有機(jī)化學(xué)雜志)1981，46，3859)(1.5g，5.14mmol)的溶液。將混合物攪拌15分鐘，在20分鐘內(nèi)溫至室溫，冷卻至-70℃，并用在無水THF(5mL)中的碘乙烷溶液(0.84mL，10.5mmol)處理。將混合物于-78℃下攪拌1小時，使其溫至室溫，攪拌2小時，傾入冰(15g)和飽和NH4Cl水溶液，然后用乙醚(3×20mL)萃取。用鹽水洗滌合并的有機(jī)萃取物，干燥(Na2SO4)，并真空蒸發(fā)得到殘余物，通過快速色譜處理(硅膠，環(huán)己烷/乙酸乙酯，8∶2)和用乙酸乙酯/環(huán)己烷結(jié)晶而將殘余物純化。
產(chǎn)率80％M.p.108℃(分解)1H-NMR(MHz，)(CDCl3)δ1.33(τ，3H)，3.01(q，2H)，6.35(s，1H)，7.23(dd，1H)，7.39-7.74(m，6H)，8.11(d，1H)
EIMSm/z 319(M+)；178，143(100％)5-氯-2-乙基吲哚(3)將2(1.3g，4.07mmol)、2N NaOH(12mL)和MeOH(62mL)的混合物回流40小時。蒸發(fā)有機(jī)溶劑，并用EtOAc萃取殘余物。用鹽水洗滌合并的萃取物，干燥(Na2SO4)，并在真空下蒸發(fā)得到殘余物，通過快速色譜處理(硅膠，環(huán)己烷/乙酸乙酯，8∶2)和用乙醚/環(huán)己烷結(jié)晶對其進(jìn)行純化。
M.p.＝89℃產(chǎn)率90％1H NMR(CDCl3)δ1.35(t，3H)，2.79(q，2H)，6.19(s，1H)，7.06(dd，1H)，7.21(d，1H)，7.49(s，1H)，7.92(br s，1H)EIMSm/z 179(M+)；164(100)(E)-5-氯-2-乙基-3-(2-硝基乙烯基)-1H-吲哚(4)將吲哚3(5mmol)加到攪拌的冰冷的在三氟乙酸(5mL)中的1-(二甲基氨基)-2-硝基乙烯(0.58g，5mmol)的溶液。將混合物于室溫和N2氣氛下攪拌0.5小時，然后傾入冰水。用乙酸乙酯萃取水溶液，用飽和NaHCO3溶液洗滌合并的有機(jī)層，然后用水洗滌。用Na2SO4干燥之后，在減壓下蒸發(fā)溶劑得到粗橙色固體，將其懸浮在EtOAc-Et2O的混合物中并過濾，或者用硅膠進(jìn)行色譜處理(環(huán)己烷/EtOAc，1∶1，作為洗脫劑)。
產(chǎn)率89％M.p.188℃分解。
1H(CDCl3)δ1,42(t，3H)，3,02(q，2H)，7,21-7,34(m，2H)，7,68(m，1H)，7,72(d，1H)，8,3(d，1H)，8,68(br s，1H)EIMSm/z 250(M+)，203，188(100)5-氯-2-乙基色胺(5)
在氮氣氛下將在無水THF(25mL)中的硝基乙烯基吲哚4(6mmol)的溶液滴加到攪拌的冰冷的LiAlH4(1.2g，36mmol)在無水THF(65mL)中的懸浮液，并將混合物于室溫下攪拌5小時。冷卻至0℃后，通過小心地加入水而破壞未反應(yīng)的LiAlH4。用Celite墊過濾所得的混合物，在真空下濃縮濾液，然后用2N HCl酸化，并用水和乙酸乙酯分配。用6N NaOH使水相變?yōu)閴A性，然后用EtOAc萃取(3×)，用鹽水洗滌合并的有機(jī)層，干燥(Na2SO4)，并在減壓下濃縮得到粗油狀胺。
(油)；EIMSm/z 222(M+)；192(100)，1775-氯-2-乙基-N，N-二甲基色胺(6)(ST 2253)將在MeOH(16mL)中的40％HCHO(0.95mL)滴加到攪拌的冷卻的(0℃)(5)(3.16mmol)、AcOH(0.47mL)和氰基硼氫化鈉(0.35g)的溶液。將所得的混合物于25℃下攪拌2.5小時。加入飽和的K2CO3水溶液(5mL)。在真空下除去MeOH，并用EtOAc萃取水相。用Na2SO4干燥后，在減壓下蒸發(fā)溶劑得到粗殘余物，用硅膠過濾而將其純化。
(非晶形固體)；1H NMR(CDCl3)δ1.3(t，3H)；2.42(s，6H)；2.55(m，2H)，2.83(m，4H)，7.06(dd，1H)，7.19(d，1H)，7.45(m，1H)，7.88(br s，1H)EIMSm/z 250(M+)；192，177，58(100)根據(jù)本發(fā)明的化合物是5-HT6和/或5-HT75-羥色胺能受體的配體；因此它們用作藥物，特別是用于治療與5-羥色胺水平不足有關(guān)的神經(jīng)系統(tǒng)病理情況，涉及心臟循環(huán)系統(tǒng)(高血壓)、胃腸道(過敏性腸疾病)的系統(tǒng)病理情況的藥物。
用本發(fā)明的化合物治療的病理情況有偏頭痛、抑郁、高血壓、精神病和其它涉及功能改變，由生理節(jié)奏失調(diào)和/或喪失(清醒/睡眠周期、褪黑激素合成)導(dǎo)致的過程。
關(guān)于一組優(yōu)選的式(I)的化合物，其中R3為甲基而R4為溴或氯，特別是當(dāng)R4為溴時，所述分子獲得對5-HT7受體亞型的親合力。由于這種性能，稱為ST 1938的化合物被指示用于治療抑郁、偏頭痛和高血壓，特別是促進(jìn)和改善個體的學(xué)習(xí)過程，和對抗導(dǎo)致精神疲勞、抑郁和睡眠障礙的人生物節(jié)律失調(diào)。
根據(jù)已公開的方法測定對結(jié)合5-HT6受體的抑制作用(Monsma，F(xiàn).J.等人，Molecular Pharm.(分子藥理學(xué))，1993，43320-327)。采用穩(wěn)定轉(zhuǎn)染到HEK293(人胚胎腎細(xì)胞)的大鼠5-HT6并以[3H]-LSD(麥角酰二乙胺)作為放射性配體進(jìn)行結(jié)合試驗。先將每種化合物溶于DMSO以制備10mM儲備溶液，然后將其溶于H2O達(dá)到0.1mM的最終濃度。在連續(xù)稀釋之后，使用一式兩份的8種不同濃度(從10μM至0.001nM)獲得競爭曲線，由此評價每種受試化合物對5-HT6受體的結(jié)合親合力。實驗條件為2nM[3H]-LSD，100μM 5-羥色胺肌酸酐硫酸鹽以定義非特異性結(jié)合，和60分鐘，在37℃下，用于每份樣品的溫育。在溫育之后，在真空下將膜快速過濾通過玻璃纖維過濾器(GF/B，Packard)。用閃爍計數(shù)器(Topcount，Packard)，使用液體閃爍混合物(Microscint 0，Packard)測定結(jié)合放射性。使用Hill方程曲線擬合法對競爭曲線進(jìn)行非線性回歸分析而測定每種化合物的IC50。然后使用這些值計算抑制常數(shù)(Ki)值，由此表示每種受試化合物對5-HT6受體的親合力。由Cheng Prusoff方程定義Ki值Ki＝IC50/1+([L]/Kd)，其中IC50值是將50％的特異性放射性配體從受體上置換下來的受試化合物的濃度(nM)，L是試驗中特異性放射性配體的濃度，而Kd是放射性配體對受體的親合力。
根據(jù)公開的方法(Shen，Y.等人，(1993)Journal BiologicalChemistry(生物化學(xué)雜志)26818220-18204)，進(jìn)行置換實驗以測定所述物質(zhì)對5-HT7受體的親合力。關(guān)于試驗的進(jìn)行，使用被穩(wěn)定轉(zhuǎn)染至CHO細(xì)胞(人卵巢細(xì)胞)的人5-HT7受體，并以[3H]-LSD(4nM)作為放射性配體。進(jìn)一步實驗條件為10μM 5-羥色胺作為非特異性配體，和120’，在22℃下，用于每份樣品的溫育。以一式兩份的8種不同濃度(10-5M至10-12M)研究各種受試化合物以獲得完全的競爭曲線。先將每種化合物溶于DMSO以獲得10-3M儲備液，然后將其溶于H2O至最終濃度為10-5M。在真空下通過玻璃纖維過濾器(GF/B，Packard)進(jìn)行快速過濾而中斷每種受試化合物的結(jié)合反應(yīng)。然后用冰冷的緩沖液將過濾器洗滌數(shù)次。采用閃爍計數(shù)器(Topcount，Packard)，使用液體閃爍混合物(Microscint 0，Packard)測定結(jié)合的放射性。如上述，通過對每條競爭曲線進(jìn)行非線性回歸分析而測定IC50值，并由Chen Prusoff方程(Ki＝IC50/(1+L/Kd)計算Ki值。
在表1中，報道了每種受試化合物的5-HT6和5-HT7結(jié)合親合力值。
表1對5-HT6e5-HT7的親合力
ST 1936、ST 1938、ST 2253表現(xiàn)出對大鼠重組5-HT6受體的高度親合力。此外，它們的結(jié)合親合力還大于對5-羥色胺的觀察結(jié)果。
在這些化合物中，稱為ST1938的化合物還表現(xiàn)出對人重組5-HT7受體的最高親合力，而ST1936和ST2253分別表現(xiàn)出中等和可以忽略的親合力。
檢查所選擇的化合物以測定它們與5-HT6受體結(jié)合的特異性。預(yù)先評價對其它5-羥色胺部位的結(jié)合親合力。
在表2中，顯示了所選擇的化合物對多種5-羥色胺亞型的親合力值(Ki，nM)。
表2
該表表明化合物ST 1936和ST 2253能夠選擇性地結(jié)合5-HT6受體。而且還在對與其它神經(jīng)遞質(zhì)有關(guān)的一些受體的結(jié)合親合力進(jìn)行評價之后，測試了ST 1936和ST 2253對5-HT6受體的結(jié)合特異性。
在23個部位測試了ST 1936和ST 2253。在大部分的這些受體中，所選擇的化合物表現(xiàn)出可以忽略不計的親合力。具體而言，ST 1936和ST 2253對以下受體的親合力值類似或大于1000nMα1a和β1腎上腺素能；D1、D2、D3、D4，4、D5多巴胺能；NMDA、毒蕈堿性(非選擇性)；N神經(jīng)元(α-BGTX-sens.)，N神經(jīng)元(α-BGTX-ins.)煙堿性，H1組胺能，阿片劑(非選擇性)，血管加壓素的V1a、V1b、V2，褪黑激素的ML1和ML2，NA轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，DA轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白。此外所述化合物表現(xiàn)出對α1b腎上腺素能受體的中等親合力，對于ST 1936和ST 2253分別為53nM和69nM。但是，所選擇的化合物與α1b受體的相互作用能力比對5-HT6受體的評價值低約2倍和3倍。所有的數(shù)據(jù)表明化合物ST1936和ST 2253對5-HT6受體具有選擇性親合力。
相對于表現(xiàn)出對5-HT6和5-HT75-羥色胺受體的混合活性的稱為ST 1938的所選擇化合物而言，其對這些部位表現(xiàn)出的親合力可以忽略不計(Ki＞1000nM)H1；NMDA；PCP；毒蕈堿性受體；煙堿性受體，阿片劑；血管加壓素V1和V2；D1、D2、D3、D4，4、D5；DA轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，NA轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白。
本發(fā)明的另一個目的涉及包含至少一種式(I)的化合物作為活性成分的藥物組合物，該化合物單獨存在或與一種或多種其它的式(I)的化合物組合，或者該式(I)的化合物與其它用于治療本文所述的病理情況的活性成分例如其它對5-HT6和/或5-HT75-羥色胺能受體具有活性的產(chǎn)物組合，所述組合物作為單獨的劑量或適于聯(lián)合治療的形式存在。根據(jù)本發(fā)明的活性成分與適宜的在制藥技術(shù)中常用的載體和/或賦形劑混合，例如這些載體和/或賦形劑如在Remington′s PharmaceuticalSciences Handbook(Remington藥學(xué)科學(xué)手冊)最新版中所述。本發(fā)明的組合物包含治療有效量的活性成分。其劑量將由本領(lǐng)域技術(shù)人員如臨床工作人員或醫(yī)生根據(jù)所治療的病理情況和患者的一般情況或者根據(jù)其它活性成分的給藥來確定。
藥物組合物的實例是允許口服、腸胃外、靜脈內(nèi)、肌內(nèi)、皮下、透皮給藥的藥物組合物。
適于此目的的藥物組合物為丸劑、硬或軟膠囊、粉劑、溶液、懸浮液、糖漿、用于臨時配成液體的固體劑型。例如，用于腸胃外給藥的組合物是所有的可注射形式，不論肌內(nèi)、靜脈內(nèi)、皮下注射劑，為溶液、懸浮液和乳液形式。還提及脂質(zhì)體制劑。也包括活性成分的控釋劑型，用于口服，例如用適宜的包衣材料包衣的劑型、微膠囊化粉劑、環(huán)糊精復(fù)合物，以及長效劑型，如用于進(jìn)行皮下應(yīng)用或作為植入物應(yīng)用。
權(quán)利要求
1.式(I)的化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽用于制備用作5-HT6和/或5-HT75-羥色胺能受體的配體的藥物的應(yīng)用 其中R1和R2，相同或不同，為H或者C1-C6直鏈或支鏈烷基；R3＝C1-C6直鏈或支鏈烷基；R4＝鹵素。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的應(yīng)用，其中該藥物用于治療與5-羥色胺水平不足有關(guān)的神經(jīng)系統(tǒng)病理情況，涉及心血管系統(tǒng)和胃腸道的系統(tǒng)病理情況。
3.根據(jù)權(quán)利要求2的應(yīng)用，其中該藥物用于治療高血壓。
4.根據(jù)權(quán)利要求2的應(yīng)用，其中該藥物用于治療過敏性腸疾病。
5.根據(jù)權(quán)利要求1的應(yīng)用，其中該藥物用于治療偏頭痛、抑郁、高血壓、精神病和由生理節(jié)奏(清醒/睡眠周期和褪黑激素合成)失調(diào)和/或喪失引起的癥狀。
6.根據(jù)權(quán)利要求1的應(yīng)用，其中該藥物是5-HT65-羥色胺能受體的配體，并用于治療抑郁、心境障礙、精神病、精神分裂癥、運(yùn)動障礙、認(rèn)知障礙、帕金森病、阿爾茨海默氏病、亨廷頓舞蹈病。
7.根據(jù)權(quán)利要求1的應(yīng)用，其中在式(I)的化合物中，R1等于R2。
8.根據(jù)權(quán)利要求1或4的應(yīng)用，其中在式(I)的化合物中，R3為甲基，而R4為溴或氯。
9.根據(jù)權(quán)利要求1或5的應(yīng)用，其中在式(I)的化合物中，R4為溴。
10.根據(jù)權(quán)利要求9的應(yīng)用，其中式(I)的化合物為5-溴-2-甲基-N，N-二甲基色胺。
11.根據(jù)權(quán)利要求1或6的應(yīng)用，其中在式(I)的化合物中，R4為氯。
12.根據(jù)權(quán)利要求11的應(yīng)用，其中式(I)的化合物為5-氯-2-甲基-N，N-二甲基色胺或5-氯-2-乙基-N，N-二甲基色胺。
13.根據(jù)權(quán)利要求9的應(yīng)用，其中該藥物用作5-HT75-羥色胺能受體的配體。
14.根據(jù)權(quán)利要求11或12的應(yīng)用，其中該藥物用作5-HT65-羥色胺能受體的配體。
15.根據(jù)權(quán)利要求13的應(yīng)用，用于制備用于治療抑郁、偏頭痛和高血壓，特別是幫助或改善個體學(xué)習(xí)過程和對抗導(dǎo)致精神疲勞、抑郁和睡眠障礙的人生物節(jié)律失調(diào)的藥物。
16.根據(jù)權(quán)利要求14的應(yīng)用，用于制備用于治療抑郁、心境障礙、精神病、精神分裂癥、運(yùn)動障礙、認(rèn)知障礙、帕金森病、阿爾茨海默氏病、亨廷頓舞蹈病的藥物。
17.式(I)的化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽， 其中R1和R2，相同或不同，為H或C1-C6烷基；R3＝C1-C6烷基；R4＝鹵素；附帶條件是當(dāng)R4為氟、氯或溴，R3為甲基時，R1和R2相同或不同，不為H或甲基。
18.用于制備根據(jù)權(quán)利要求17的化合物的方法，所述方法遵循以下路線
19.根據(jù)權(quán)利要求17的化合物作為藥物的應(yīng)用。
20.藥物組合物，包含至少一種權(quán)利要求17的化合物作為活性成分，與藥學(xué)上可接受的載體和/或賦形劑相混合。
全文摘要
式(I)的化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽用作制備作為5－HT
文檔編號A61P25/20GK1535146SQ02814337
公開日2004年10月6日 申請日期2002年6月17日 優(yōu)先權(quán)日2001年6月21日
發(fā)明者P·米內(nèi)蒂, M·A·迪切薩雷, G·塔吉亞, G·斯帕多尼, P 米內(nèi)蒂, 煉嗄, 迪切薩雷 申請人:希格馬托制藥工業(yè)公司