專利名稱：抗糖尿病的2－取代的－5′－o－(1－甲硼烷代三磷酸鹽)腺苷衍生物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
和
背景技術(shù)：
本發(fā)明涉及新的抗糖尿病化合物，尤其涉及新的2-取代的-5’-O-(1-甲硼烷代三磷酸鹽)腺苷衍生物，它是有效和選擇的胰島素促分泌素。
糖尿病的病理生理學(xué)糖尿病是西方世界最普遍的急性疾病之一，影響多達(dá)5％的人口，它是以急性高血糖癥為特征并帶有附加的脂質(zhì)和蛋白質(zhì)代謝異常的疾病的異種組。高血糖癥由胰島素分泌、胰島素作用或兩者的結(jié)合方面的缺陷產(chǎn)生，除了其急性代謝作用異常外，糖尿病還伴隨著長期并發(fā)癥，包括各種器官，例如眼、神經(jīng)，血管、心臟和腎，它會(huì)導(dǎo)致失明、切斷術(shù)、心血管疾病和末期腎病。兩種主要形式的糖尿病被分類為I型和II型，II型糖尿病，先前稱為非胰島素依賴性糖尿病(NIDDM)是疾病的最普遍形式，影響約95％的糖尿病患者。
II型糖尿病糖尿病并發(fā)癥的發(fā)展似乎與糖血的慢性升高有關(guān)，對糖尿病目前沒有治愈辦法，然而，有效的糖血控制能夠降低糖尿病并發(fā)癥的發(fā)病率和降低其嚴(yán)重程度。
II型糖尿病似乎是復(fù)雜的多基因疾病，其中胰島素阻力和相對胰島素缺乏共存，因此，胰島素分泌的改善是主要的治療目標(biāo)。胰島素釋放不足不僅由不存在對應(yīng)于葡萄糖的第1相胰島素響應(yīng)本身說明，而且由胰島素釋放的數(shù)量全球性下降至正常分泌能力的10-20％說明(Cerasi，1992)。
II型糖尿病中高血糖癥的治療II糖尿病患者用各種口服抗糖尿病藥、胰島素注射或兩者的組合治療，目前可得到的口服抗糖尿病藥以降低末梢胰島素阻力，增加胰腺β-細(xì)胞的胰島素分泌或減緩由腸吸收碳水化合物為目標(biāo)。
約半數(shù)的II型糖尿病患者以口服藥物治療，相當(dāng)比例的患者使用刺激胰島素分泌的藥物。胰島素促分泌素的選擇限制于磺?；搴拖嚓P(guān)化合物(“glinides”)，它通過結(jié)合于膜ATP-敏感鉀通道的調(diào)節(jié)亞單元，誘導(dǎo)其閉合引起胰島素分泌(Lebovitz，1994)。兩種類型的藥物用于削弱末梢胰島素阻力甲福明二甲雙胍和噻唑烷二酮類似物(Edelman，1998)。α-葡萄糖苷酶抑制劑、假四糖阿卡波糖用于減緩碳水化合物的腸吸收。
除了可能長期不利地影響其具體目標(biāo)，胰腺β-細(xì)胞之外，磺?；寰哂腥舾刹恍枰男Ч?。這些副效果包括由于在低葡萄糖濃度下刺激胰島素分泌血糖過低的風(fēng)險(xiǎn)，在大多數(shù)患者中獲得正常糖血的困難，適當(dāng)糖血控制的5-10％每年第二的失敗率和對心血管系統(tǒng)可能的副作用(Lebovitz，1994；Leibowitz和Cerasi，1996；Brady和Terzic，1998)。
P2-受體P2受體(P2-Rs)是膜蛋白質(zhì)，它在結(jié)合ADP，ATP或在某些亞型，UTP時(shí)致使抑制或刺激作用(Bhagwat and Williams，1997；King等，1998)。在G-蛋白質(zhì)-偶合受體和配體-有閘離子通道受體之間的基本區(qū)別是將P2-Rs分別分離成兩種主要種類，P2Y和P2X(Abbracchio andBurnstock，1994)。P2-Rs是多種病理生理學(xué)癥狀新藥開發(fā)的重要目標(biāo)(Chan等，1998；Boarder and Hourani，1998；Barnard等，1997；Inoue，1998；Abbracchio，1996)。此外，在不同組織中P2-R亞型的大不均一性展現(xiàn)開發(fā)選擇的器官或組織特異P2-R靶向藥物的可能性。
在胰腺β-細(xì)胞中存在P2Y亞型的P2-Rs已被文獻(xiàn)充分證明(Loubatieres-Mariani等，1979；Chapal and Loubatieres-Mariani，1981；Bertrand等，1987；Bertrand等，1991)。由細(xì)胞外ATP和結(jié)構(gòu)類似物胰腺P2-Rs的活化引起胰島素分泌的刺激。已研究了后者類似物的結(jié)構(gòu)活性關(guān)系(Chapal等，1997)。另外評論了胰島素分泌細(xì)胞的P2受體的藥理學(xué)性質(zhì)和生理學(xué)相關(guān)性(Petit等，1996；Loubatieres-Mariani等，1997；Petit等，2001)。近來的報(bào)告建議，除P2Y-Rs外，功能P2X-Rs也存在于胰腺β細(xì)胞中。然而，盡管在低，非刺激葡萄糖水平時(shí)P2X-Rs增加胰島素分泌，但P2Y-Rs僅在刺激葡萄糖濃度下增強(qiáng)胰島素分泌，與磺?；逑喾?，并不影響血漿膜的鉀傳導(dǎo)力(Petit等，1998)。P2Y-R激動(dòng)劑提高葡萄糖誘導(dǎo)的胰島素釋放的機(jī)理包括環(huán)狀A(yù)MP/蛋白質(zhì)激酶A信號途徑(Petit等，2000)，據(jù)報(bào)道增加了葡萄糖的非K+ATP通道依賴作用的效力(Yajima等，1999)。β-細(xì)胞P2Y受體的偶合機(jī)理受到P2Y-Rs選擇配體誘導(dǎo)的葡萄糖依賴的胰島素響應(yīng)的支持。
P2Y-R配體作為有效抗糖尿病藥各種P2-R選擇配體已顯示出在體內(nèi)增加胰島素分泌和降低糖血(Ribes等，1988；Hillaire-Buys等，1993)。人們發(fā)現(xiàn)2-甲硫基-ATP刺激胰島素釋放，稍微地降低狗的糖血；然而，為避免它迅速衰弱成腺苷，該ATP類似物被直接注射到胰十二指腸動(dòng)脈(Ribes等，1988)。腺苷-5’-O-(2-硫代)二磷酸酯[ADP-，這對于酶解是穩(wěn)定的，通過靜脈內(nèi)或口服向大鼠和狗給藥](Hillaire-Buys等，1993)。在喂食的大鼠中，ADP-β-S隨糖血的下降引起延遲的胰島素響應(yīng)。在有知覺的狗中進(jìn)行的進(jìn)行的體內(nèi)試驗(yàn)顯示該物質(zhì)在口服給藥后是有效的，瞬間增加胰島素血和降低糖血(Hillaire-Buys等，1993)。還顯示P2Y-Rs的活化在糖尿病動(dòng)物的胰腺中是功能有效的(Hillaire-Buys等，1992；Tang等，1996)。此外，近來報(bào)道，P2Y-R活化可放大由人體胰腺分離的島的葡萄糖誘導(dǎo)的胰島素釋放(Fernandez-Alvarez等，2001)。
匯總在一起。
如上概括的資料支持如下觀點(diǎn)，即P2Y-R激動(dòng)劑被認(rèn)為是新的胰島素釋放化合物，對治療II型糖尿病是有效的。
有效，穩(wěn)定和亞型選擇的P2Y-R配體的鑒定幾乎所有目前合成的P2-受體激動(dòng)劑是ATP或UTP藥效基團(tuán)的修飾。嘌呤(嘧啶)環(huán)系，核糖基團(tuán)或三磷酸鹽鏈在一個(gè)或多個(gè)位置被修飾(Fischer，1999)。先前，我們報(bào)道了有效和亞型選擇的P2-R-激動(dòng)劑的合成(Fischer等，1993；Burnstock等，1994；Boyer等，1995；Boyer等，1996；Fischer等，1999)，一系列的這些類似物顯示在C-2位置帶有長硫醚取代的ATP衍生物(Fischer等，1993；Burnstock等，1994；Boyer等，1995；Fischer等，1999)。顯然，該取代作用使得分子對酶解穩(wěn)定(Zimmet等，1993)，此外，與ATP相比，它增加分子作為P2Y-Rs配體的效力2-5個(gè)數(shù)量級(Fischer等，1993；Burnstock等，1994；Boyer等，1995；Boyer等，1996)。2-硫代醚基-5’-O-(1-硫代三磷酸鹽)腺苷衍生物作為有效胰島素促分泌素在以前的研究中，我們合成了新P2Y-R配體，2-硫醚-5’-O-(1-硫代三磷酸鹽)腺苷，2-RS-ATP-α-S，衍生物(Fischer等，1999)作為有效胰島素促分泌素。新類似物對胰島素分泌和胰腺流量的作用在分離和灌注的大鼠胰腺中評價(jià)。在葡萄糖誘導(dǎo)的胰島素分泌方面的多達(dá)500％的高增加是由于加入了nM濃度范圍的2-已基硫代-ATP-α-S，這代表相對于ATP效力的100倍的改善。此外，這些化合物在火雞紅血球是十分有效的P2Y1-R-配體，顯示關(guān)于胰腺I型ATPDase的相對酶穩(wěn)定性(Fischer等，1999)。此外，這些化合物在生理?xiàng)l件下是高度化學(xué)穩(wěn)定的，甚至是在刺激胃液酸性的條件下(Hillaire-Buys等，2001)。然而，由它們在胰島素分泌濃度下誘導(dǎo)血管的能力說明的其對胰島素分泌細(xì)胞差的選擇性使得這些衍生物不太適合用于有效抗糖尿病藥的藥物開發(fā)，因?yàn)檠苁马?xiàng)是疾病的主要病理生理學(xué)并發(fā)癥。
發(fā)明概述我們現(xiàn)在發(fā)現(xiàn)，根據(jù)本發(fā)明，某些2-取代的-5’-O-(1-甲硼烷代三磷酸鹽)-腺苷衍生物，本文確定為2-R-ATP-α-B，通過存在于胰腺β細(xì)胞的膜中的P2Y(ATP)-受體，以高功效和效力用作胰島素促分泌素，在輕微刺激的葡萄糖濃度下以nM濃度范圍提高胰島素分泌多達(dá)900％。
本發(fā)明涉及新的下式的化合物 其中R1選自H、鹵素、O-烴基、S-烴基、NR3R4；任選被鹵素、CN、SCN、NO2、OR3、SR3或NR3R4取代的烴基；其中R3和R4分別是H或烴基或R3和R4與和其相連的氮原子一起形成飽和或不飽和雜環(huán)，它任選含有1-2個(gè)其它選自氧、氮和硫的雜原子；R2是H或烴基，和M+表示可藥用的鹽，或其非對映體或非對映體混合物的陽離子。
上述化合物用于提高胰島素分泌和治療II型糖尿病。
因此，在另一實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及藥物組合物，尤其用于治療II型糖尿病，其含有至少一種本發(fā)明的2-取代的-5’-O-(1-甲硼烷代三磷酸鹽)-腺苷衍生物和可藥用的載體或稀釋劑。
在另一實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及提高胰島素分泌和治療II型糖尿病的方法，其包括向需要的個(gè)體給藥有效量的至少一種本發(fā)明的2-取代的-5 ’-O-(1-甲硼烷代三磷酸鹽)-腺苷衍生物。
附圖簡述附

圖1顯示增加本文識(shí)別為2-甲基硫基-ATPαB的化合物的異構(gòu)體A(VK38A)的濃度對用含有8.3mmol/L葡萄糖的Krebs-碳酸氫鹽緩沖液灌注的分離的大鼠胰腺的胰島素分泌的效果。濃度用插入部分表示，帶有在每種條件下單獨(dú)實(shí)驗(yàn)的次數(shù)。根據(jù)實(shí)驗(yàn)組，在45分鐘時(shí)的平均胰島素輸出(ng/min)在10.43±3.89和14.37±0.47之間，每個(gè)點(diǎn)表示垂直線所示的SEM的平均值。
附圖2顯示增加VK38A的濃度對用含有8.3mmol/L葡萄糖的Krebs-碳酸氫鹽緩沖液灌注的分離的大鼠胰腺的胰腺流量的效果，基線流量(45分鐘)為2.5mL/min。濃度用插入部分表示，帶有在每種條件下單獨(dú)實(shí)驗(yàn)的次數(shù)。每個(gè)點(diǎn)表示垂直線所示的SEM的平均值。
附圖3顯示增加2-甲基硫基-ATPαB的異構(gòu)體B(VK38B)的濃度對用含有8.3mmol/L葡萄糖的Krebs-碳酸氫鹽緩沖液灌注的分離的大鼠胰腺的胰島素分泌的效果。濃度用插入部分表示，帶有在每種條件下單獨(dú)實(shí)驗(yàn)的次數(shù)。根據(jù)實(shí)驗(yàn)組，在45分鐘時(shí)的平均胰島素輸出(ng/min)在9.62±3.14和14.18±2.95之間，每個(gè)點(diǎn)表示垂直線所示的SEM的平均值。
附圖4顯示增加VK38B的濃度對用含有8.3mmol/L葡萄糖的Krebs-碳酸氫鹽緩沖液灌注的分離的大鼠胰腺的胰腺流量的效果，基線流量(45分鐘)為2.5mL/min。濃度用插入部分表示，帶有在每種條件下單獨(dú)實(shí)驗(yàn)的次數(shù)。每個(gè)點(diǎn)表示垂直線所示的SEM的平均值。
附圖5顯示增加本文識(shí)別為2-氯-ATPαB的化合物的異構(gòu)體A(VK44A)的濃度對用含有8.3mmol/L葡萄糖的Krebs-碳酸氫鹽緩沖液灌注的分離的大鼠胰腺的胰島素分泌的效果。濃度用插入部分表示，帶有在每種條件下單獨(dú)實(shí)驗(yàn)的次數(shù)。根據(jù)實(shí)驗(yàn)組，在45分鐘時(shí)的平均胰島素輸出(ng/min)在8.75±1.56和9.80±0.45之間，每個(gè)點(diǎn)表示垂直線所示的SEM的平均值。
附圖6顯示增加VK44A的濃度對用含有8.3mmol/L葡萄糖的Krebs-碳酸氫鹽緩沖液灌注的分離的大鼠胰腺的胰腺流量的效果，基線流量(45分鐘)為2.5mL/min。濃度用插入部分表示，帶有在每種條件下單獨(dú)實(shí)驗(yàn)的次數(shù)。每個(gè)點(diǎn)表示垂直線所示的SEM的平均值。
附圖7顯示增加本文識(shí)別為ATP-α-B的化合物的異構(gòu)體A(VK39A)的濃度對用含有8.3mmol/L葡萄糖的Krebs-碳酸氫鹽緩沖液灌注的分離的大鼠胰腺的胰島素分泌的效果。濃度用插入部分表示，帶有在每種條件下單獨(dú)實(shí)驗(yàn)的次數(shù)。根據(jù)實(shí)驗(yàn)組，在45分鐘時(shí)的平均胰島素輸出(ng/min)在12.32±2.62和16.27±2.38之間，每個(gè)點(diǎn)表示垂直線所示的SEM的平均值。
附圖8顯示增加VK39A的濃度對用含有8.3mmol/L葡萄糖的Krebs-碳酸氫鹽緩沖液灌注的分離的大鼠胰腺的胰腺流量的效果，基線流量(45分鐘)為2.5mL/min。濃度用插入部分表示，帶有在每種條件下單獨(dú)實(shí)驗(yàn)的次數(shù)。每個(gè)點(diǎn)表示垂直線所示的SBM的平均值。
發(fā)明詳述本發(fā)明涉及如上所示的新2-取代-5 ’-O-(1-甲硼烷代三磷酸鹽)-胰腺衍生物。
用于本文的術(shù)語“鹵素”包括氟、氯、溴和碘，優(yōu)選氯或溴，最優(yōu)選氯。
在不同基團(tuán)R1-R4的任何定義中的術(shù)語“烴基”包括任何飽和或不飽和的，包括芳香、直鏈、支鏈或環(huán)狀，包括多環(huán)的含有碳和氫的基團(tuán)，例如，但不限于，C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、C3-C10環(huán)烷基、芳基和芳(C1-C8)烷基。
術(shù)語“C1-C8烷基”通常是指含有1-8個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烴基，包括，例如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、仲丁基、異丁基、叔丁基、正戊基、2，2-二甲基丙基、正已基、正庚基、正辛基等，優(yōu)選是C1-C6烷基，最優(yōu)選甲基。術(shù)語“C2-C8烯基”和“C2-C8炔基”通常是指含有2-8個(gè)碳原子和分別一個(gè)雙鍵或三鍵的直鏈和支鏈烴基，包括乙烯基、3-丁烯-1-基、2-乙烯基丁基、3-辛烯-1-基等，和丙炔基、2-丁炔-1-基、3-戊炔-1-基等，優(yōu)選C2-C6烯基。術(shù)語“C3-C10環(huán)烷基”是指環(huán)狀或雙環(huán)狀烴基，例如環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)已基、金剛烷基、雙環(huán)[3.2.1]辛基、雙環(huán)[2.2.1]庚基等。術(shù)語“芳基”表示碳環(huán)芳香基團(tuán)，例如苯基和萘基，術(shù)語“芳(C1-C8)烷基”表示芳烷基，例如芐基和苯乙基。
當(dāng)基團(tuán)R1是O-烴基或S-烴基或被O-烴基或S-烴基取代的烴基時(shí)，烴基優(yōu)選是C1-C6烷基，最優(yōu)選甲基，或芳基，最優(yōu)選苯基或芳烷基，最優(yōu)選芐基。在最優(yōu)選實(shí)施方案中，R1是SCH3。
在基團(tuán)NR3R4中，R3和R4分別是H或如上定義的烴基或與和其相連的N原子一起形成飽和或不飽和的，優(yōu)選5-或6-元，雜環(huán)，任選含有1或2個(gè)其它選自氮、氧和硫的雜原子。該環(huán)可被取代，例如被一或二個(gè)C1-C6烷基取代?；鶊F(tuán)NR3R4的實(shí)例包括，但不限于，氨基、二甲基氨基、二乙基氨基、乙基甲基氨基、苯基甲基氨基、吡咯烷基、哌啶子基、四氫吡啶基、哌嗪基、嗎啉代、噻唑基等。
本發(fā)明的優(yōu)選化合物是其中R2是H，R1是氯或，更優(yōu)選2-甲硫基的化合物。
本發(fā)明包括化合物本身、其非對映體或非對映體水合物以及其可藥用的鹽，例如，但不限于，其中M+是Na+、K+、NH4+或胺的陽離子，尤其是步驟的陽離子，例如N(R)3H+的化合物，其中R優(yōu)選是烷基。
本發(fā)明的化合物，例如根據(jù)如下方案A所示的和本文實(shí)施例中舉例的合成方法制備。具有不同取代基的其它化合物通過相同的方法由合適的化合物得到或在合成中用本領(lǐng)域已知的標(biāo)準(zhǔn)方法引入所需基團(tuán)得到。
本發(fā)明的化合物作為非對映體得到，它可使用半制備逆相LichroCART 250-10柱和流量為6mL/min的恒溶劑成分洗脫[100mM三乙基乙酸銨(TEAA)，pH7(A)∶MeOH(B)，84∶16]分離。含有相同異構(gòu)體(相類似的滯留時(shí)間)的餾分被凍干。具有較短滯留時(shí)間的本文稱為異構(gòu)體A，其它為異構(gòu)體B?；衔锏牟?gòu)體A，尤其是本文稱為2-SMe-ATPαB的化合物的異構(gòu)體A構(gòu)成本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方案。
在一優(yōu)選實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及本發(fā)明化合物非對映體A，該非對映體A以在使用半制備逆相Lichro CART 250-10柱和流量為6mL/min的恒溶劑成分洗脫[100mM三乙基乙酸銨(TEAA)，pH7(A)∶MeOH(B)，84∶16]由非對映體混合物分離時(shí)具有較短滯留時(shí)間(Rt)為特征。
本發(fā)明的2-取代的-5’-O-(1-甲硼烷代三磷酸鹽)-腺苷衍生物是有效的胰島素促分泌素，它以β-細(xì)胞P2Y-受體為目標(biāo)，在輕微刺激葡萄糖濃度的nM濃度范圍內(nèi)提高胰島素分泌多達(dá)900％。在這些濃度下，與現(xiàn)有技術(shù)中最接近的化合物，我們以前提供的P2Y-R配體，2-硫醚-5’-O-(1-硫代三磷酸鹽)腺苷衍生物相反，本發(fā)明的化合物沒有或僅有輕微的血管副作用(Fischer等，1999)，上述現(xiàn)有技術(shù)的化合物同樣是有效的胰島素促分泌素，但由它們在胰島素分泌濃度下誘導(dǎo)血管效果的能力說明的對胰島素分泌細(xì)胞差的選擇性使得這些衍生物不太適合用于有效抗糖尿病藥的藥物開發(fā)，因?yàn)檠苁马?xiàng)是疾病的主要病理生理學(xué)并發(fā)癥。
本發(fā)明的化合物中P2Y受體配體，具有有效的胰島素釋放作用以及對胰島素分泌的依賴于葡萄糖的放大效果，它限制限血糖過低的風(fēng)險(xiǎn)，也限制了血管副作用。，因此適用于治療II型糖尿病。因此，本發(fā)明在其范圍內(nèi)包括藥物組合物，其含有，作為活性成分的有效量的至少一種本發(fā)明的2-取代的-5’-O-(1-甲硼烷代三磷酸鹽)-腺苷衍生物或其可藥用的或其非對映體或非對映體混合物，與可藥用的載體或稀釋劑。
含有本發(fā)明化合物的藥物組合物可通過常規(guī)技術(shù)制備，例如如RemingtonThe Science and Practice of Pharmacy，19th Ed.，1995中所述。組合物可存在常規(guī)形式，例如膠囊、片劑、溶液或懸浮液。
給藥途徑可以是將活性化合物有效傳輸至作用的合適或所需位置，口服途徑是優(yōu)選的。如果固體載體用于口服給藥，制劑可以是片狀的，放置在硬明膠膠囊中的粉末或丸劑形式或可以是錠劑形式。如果使用液體載體，制劑可以是糖漿、乳液或軟明膠膠囊形式。含有滑石和/或碳水化合物載體或粘合劑等的片劑、糖丸劑或膠囊尤其適合于口服。用于片劑、糖丸劑或膠囊的優(yōu)選載體包括乳糖、玉米淀粉和/或馬鈴薯淀粉。
本發(fā)明還提供治療II型糖尿病的方法，尤其用于提高所述患者的胰島素分泌，其包括給藥有效量的本發(fā)明的2-取代的-5’-O-(1-甲硼烷代三磷酸鹽)-腺苷衍生物。給藥的劑量在每天0.5-25mg，優(yōu)選1-20mg，最優(yōu)選1-10mg。
本發(fā)明現(xiàn)在用如下非限制實(shí)施例說明。
實(shí)施例1.化學(xué)1.1一般實(shí)驗(yàn)資料所有空氣-和水分-敏感的反應(yīng)在火焰干燥的，氮?dú)鉀_洗的用橡膠隔片密封的雙頸燒瓶中進(jìn)行，試劑用注射器加入。反應(yīng)進(jìn)程用預(yù)涂覆的Merck硅膠板(60F-254)的TLC監(jiān)測。柱色譜法用Merck硅膠60(230-400目)進(jìn)行，化合物用核磁共振(NMR)，使用Brucker DPX-300，DMX-600或AC-200分光計(jì)表征。1H NMR光譜在D2O中測量，化學(xué)位移以相對內(nèi)標(biāo)HOD(4.78ppm)的ppm報(bào)道。核苷也在D2O中，使用85％H3PO4作為外參用31P NMR表征。所有最終產(chǎn)物用AutoSpec-EFISION VG高拆分質(zhì)譜儀通過化學(xué)離子化作用表征。核苷在FAB(快速原子轟擊)條件下以低和高拆分由甘油基質(zhì)解吸。核苷的初級純化用LC(Isco UA-6)系統(tǒng)，使用在冷的1M碳酸氫鈉中膨脹1d的SephadexDEAE-A25柱進(jìn)行，核苷的最終純化和非對映體對的分離在HPLC(Merck-Hitachi)系統(tǒng)中，用半制備逆相(LiChrospher 60，RP-select-B)柱進(jìn)行。用于LC和HPLC分離的條件如下描述。
1.2中間體2-甲硫基-腺苷如先前所述由2-SH-腺苷合成(Methods inEnzymology，1992，215137-142)，2-SH-腺苷根據(jù)先前報(bào)導(dǎo)的方法用三個(gè)步驟由腺苷得到(J.Med.Chem.1973，161381-1388；Chem.Pharm.Bull.1977，251959-1969)。
2-氯-腺苷由鳥苷(Synthesis 1982，670-672)，通過2，6-氯-9β-(2’，3’，5’-三-O-乙?；?-D-呋喃核糖基嘌呤(Can.J.Chem.1981，592601-2606)，在100℃的密封的安瓿中用乙醇中的NH3處理后者24小時(shí)制備。
1.3用于制備2’，3’-O-甲氧基亞甲基腺苷衍生物次甲基腺苷衍生物(方案A的化合物2)將p-TsOH(2mmol，2當(dāng)量)在氮?dú)庵屑尤朐趦深i燒瓶中的元水腺苷衍生物(1mmol，1當(dāng)量)(化合物1)，隨后加入無水DMF(4mL)。隨后加入三甲基原甲酸酯(50當(dāng)量)，得到的溶液在室溫下攪拌1天。將混合物冷卻到0℃，加入Dowex MWA-1(弱堿性陰離子交換材料)。在室溫下持續(xù)攪拌3小時(shí)，真空干燥出Dowex樹脂，減壓濃縮濾液，與甲醇共同蒸發(fā)幾次以除去殘余的DMF。將殘余物溶解在氯仿中，用飽和碳酸氫鈉提取，有機(jī)相用硫酸鈉干燥，蒸發(fā)得到純保護(hù)的腺苷衍生物2。
根據(jù)此方法制備如下化合物1.3.a)2′，3′-O-甲氧基次甲基腺苷(其中R是H的化合物2)由腺苷和三甲基原甲酸酯以80％的收率得到。1H NMR(DMSO-d6，300MHz)δ8.42，8.38(2s，H-8，1H)，8.21，8.20(2s，H-2，1H)，7.42(br.s，NH2，2H)，6.30，6.20(2d，J＝3Hz和J＝2.8Hz，H-1′，1H)，6.22，6.11(2s，CH-OCH3，1H)，5.53，5.47(2dd，J＝2.8，6Hz和J＝3，7Hz，H-2′，1H)，5.26，5.20(2t，J＝5.5Hz，OH-5′，1H)，5.11，5.03(2dd，J＝2.8，6Hz和J＝3，7Hz，H-3′，1H)，4.31，4.24(2dt，J＝3，5Hz，H-4′，1H)，3.51-3.68(m，H-5′，2H)，3.40(s，O-CH3，3H)ppm。13CNMR(DMSO-d6，300MHz)δ156.16(C-6)，152.73(CH-2)，148.88，148.84(C-4)，139.79，139.69(CH-8)，119.04，119.00(C-5)，118.44，116.93(CH-OMe)，89.40，88.76(CH-1′)，86.93，85.90(CH-2′)，83.47，82.45(CH-3′)，81.08，80.72(CH-4′)，61.58，61.32(CH2-5′)，51.87，50.40(OCH3)ppm。MS CI/NH3m/z310(MH)。
1.3.b)2-甲硫基-(2′，3′-O-甲氧基次甲基)腺苷(其中R是SCH3的化合物2)由2-甲硫基腺苷和三甲基原甲酸酯以75％的收率得到。1H NMR(CDCl3，300MHz)δ7.96，7.93(2s，H-8，1H)，6.17，5.91(2d，J＝3.6Hz，J＝3.9Hz，H-1′，1H)，6.05，5.97(2s，CH-OMe，1H)，5.47，5.39(2dd，J＝3.9，6Hz，H-2′和J＝3.6，7Hz，H-2′，1H)，5.18-5.22(m，H-3′，1H)，4.55，4.48(2″q″，J＝2.5Hz，J＝1.8Hz，H-4′，1H)，3.18-4.03(m，H-5′，2H)，3.46，3.35(2s，OCH3，3H)，2.57，2.56(2s，S-CH3，3H)ppm。13C NMR(CDCl3，300MHz)δ165.86(C-2)，154.31，154.24(C-6)，149.52(C-4)，139.35(C-8)，119.48，117.74(CH-OMe)，117.41，117.33(C-5)，92.33，92.03(CH-1′)，87.41，86.10(CH-2′)，83.87，82.72(CH-3′)，80.97，80.73(CH-4′)，62.79，62.72(CH2-5′)，52.95，51.72(O-CH3)，14.47，14.41(S-CH3)ppm。FAB(正模式)m/z356.035(MH+)。HR FAB(正模式)m/zC13H17N5O5S(Mt)計(jì)算值356.1028，實(shí)驗(yàn)值356.1038。
1.3.c)2-氯-(2′，3′-O-甲氧基次甲基)腺苷(其中R是氯的化合物2)由2-氨-腺苷和三甲基原甲酸酯以81％的收率得到。1H NMR(CDCl3，300MHz)δ7.70(H-8，1H)，6.69(s，NH2，2H)，6.16，5.85(2d，J＝3.6Hz，J＝.9Hz，H-1′，1H)，6.03，5.95(2s，CH-OMe，1H)，5.35-5.17(2m，H-2′和H-3′，2H)，4.53，4.49(2″brs″，H-4′，1H)，4.02-3.8(m，H-5′，2H)，3.47，3.32(2s，OCH3，3H)ppm。13C NMR(CDCl3，300MHz)δ163.54(C-2)，156.45(C-6)，154.15(C-4)，130.86(C-8)，119.54，117.67(CH-OMe)，117.85(C-5)，92.71，92.44(CH-1′)，87.55，85.94(CH-2′)，83.98，82.68(CH-3′)，80.95，80.73(CH-4′)，62.97，62.88(CH2-5′)，53.04，51.72(O-CH3)ppm。MS CI/NH3m/z344(MH+)。HRMSm/zC12H14ClN5O5計(jì)算值343.0683，實(shí)驗(yàn)值343.0671。
實(shí)施例1.制備腺苷-5 ’-O-(甲硼烷代三磷酸鹽)衍生物的一般方法(根據(jù)方案A)在氮?dú)庵性诨鹧娓稍锏碾p頸燒瓶中將保護(hù)的核苷2(0.5mmol)溶解在無水氯仿(7mL)中，在室溫下加入(iPr)2NEt(0.11mL，1.3當(dāng)量)，溶液攪拌30分鐘。將混合物冷卻到0℃，用注射器緩慢加入溶解在氯仿(2mL)中的[(iPr)2N]2PCl(148mg，1.1當(dāng)量)(步驟a)得到衍生物3。得到的衍生物3的溶液在0℃攪拌2小時(shí)，隨后加入H2P2O7-2(HNBu3)2在DMF中的1M溶液(0.75mL，1.5當(dāng)量)(步驟b)得到化合物4。該溶液在室溫下再保持4小時(shí)，隨后冷卻到0℃，加入BH3-SMe2配合物在THF中的2M溶液(2.52mL，10當(dāng)量)(步驟c)，在室溫?cái)嚢?5分鐘后，加入軟化水(8mL)，得到的混合物攪拌1小時(shí)(步驟d)，隨后凍干。得到的半固體化合物6溶解在水中，用氯仿提取。水相凍干，得到的殘余物施加于活化的Sephadex DEAE-A25柱(0-0.7 MNH4HCO3，總體積＞2000mL)。收集相關(guān)的餾分并凍干；通過用軟化水重復(fù)凍干除去過量碳酸氫銨得到化合物6的三銨鹽。通過酸性水解除去甲氧基次甲基保護(hù)基團(tuán)(加入10％HCl溶液直到達(dá)到pH 2.3)。在室溫下3小時(shí)后，通過加入NH4OH溶液(pH 11)使pH迅速升高到9，溶液在室溫保持40分鐘(步驟e)。在溶液凍干后得到所需的腺苷-5’-O-(1-甲硼烷代三磷酸鹽)衍生物，下文稱為“ATPαB衍生物”(化合物7)。非對映體7的最終純化和分離用半制備HPLC柱完成。三乙基銨抗衡離子通過將純非對映體流過Sephadex-CM C-25柱被Na+交換。
實(shí)施例2.腺苷-5 ’-O-(甲硼烷代三磷酸鹽)的制備方法標(biāo)題化合物，本文稱為ATPαB[VK 39]，根據(jù)實(shí)施例1的方法，由四苯甲?；佘?為原料以19％的收率得到。
實(shí)施例3.2-甲硫基腺苷-5’-O-(甲硼烷代三磷酸鹽)的制備方法標(biāo)題化合物，本文稱為2-SMe-ATPαB[VK 38]，根據(jù)實(shí)施例1的方法，由2-甲硫基-(2′，3′-O-甲氧基次甲基)腺苷為原料以38％的收率得到。
實(shí)施例4.2-氯腺苷-5’-O-(甲硼烷代三磷酸鹽)的制備方法標(biāo)題化合物，本文稱為2-Cl-ATPαB[VK 44]，根據(jù)實(shí)施例1的方法，由2-氯-(2′，3′-O-甲氧基次甲基)腺苷為原料以43％的收率得到。
實(shí)施例5.腺苷-5’-O-(甲硼烷代三磷酸鹽)衍生物的非對映體的逆相HPLC分離使用半制備逆相Lichro CART 250-10柱和流量為6mL/min的恒溶劑成分洗脫[100mM三乙基乙酸銨(TEAA)，pH7(A)∶MeOH(B)，84∶16]分離非對映體。含有相同異構(gòu)體(相類似的滯留時(shí)間)的餾分被凍干。用軟化水重復(fù)凍干除去過量緩沖液。具有較短滯留時(shí)間(Rt)異構(gòu)體本文稱為異構(gòu)體A，其它為異構(gòu)體B。
ATPαB，異構(gòu)體A[VK 39A](Rt 10.4min)，pH 6.51H NMR(D2O，200MHz)δ8.62(s，H-8，1H)，8.25(s，H-2，1H)，6.16(d，J＝7Hz，H-1′，1H)，4.79(m，H-2′，1H)，4.65(m，H-3′，1H)，4.42(m，H-4′，1H)，4.25(m，H-5′，2H)，0.36(m，BH3，3H)ppm。31P NMR(D2O，200MHz)δ83.88(m，Pα-BH3)，-9.42(d，Pγ)-22.23(t，Pβ)ppm。FAB(負(fù)模式)m/z526.162(M4-+2H++Na+)。異構(gòu)體B[VK 39B](Rt 12.4min)，pH 6.51H NMR(D2O，200MHz)δ8.58(s，H-8，1H)，8.25(s，H-2，1H)，6.15(d，J＝7Hz，H-1′，1H)，4.77(m，H-2′，1H)，4.56(m，H-3′，1H)，4.41(m，H-4′，1H)，4.23(m，H-5′，2H)，0.36(m，BH3，3H)ppm。31P NMR(D2O，200MHz)δ84.5(m，Pα-BH3)，-9.34(d，Pγ)，-22.2(t，Pβ)ppm。FAB(負(fù)模式)m/z504.094。
2-SMe-ATPαB，異構(gòu)體A[VK 38A](Rt 13.4min)(Na+型，pH 7.5)1H NMR(D2O，300MHz)δ8.46(s，H-8，1H)，6.14(d，J＝5.3Hz，H-1′，1H)，4.69(dd，J＝3.8，4.9Hz，H-3′，1H)，4.38(m，H-4′，1H)，4.35，4.14(αm，H-5′，2H)，2.59(s，CH-S，3H)，0.47(m，BH3，3H)ppm。31P NMR(D2O，200MHz)δ82.7(m，Pα-BH3)，-6.5(d，Pγ)，-21.5(t，Pβ)ppm。FAB(負(fù)模式)m/z550.172。異構(gòu)體B[VK38B](Rt15.6min)(Na+型，pH 7.5)1H NMR(D2O，300MHz)δ8.42(s，H-8，1H)，6.13(d，J＝5.6Hz，1H)，4.86(dd，J＝5，5.6Hz，H-2′，1H)，4.61(dd，J＝3.6，5Hz，H-3′，1H)，4.39(q，J＝3.6，6Hz，H-4′，1H)，4.29(ddd，J＝2.9，7.4，11.8Hz，H-5′，1H)，4.19(ddd，J＝2.9，5.5，11.8Hz，H-5′，1H)，2.59(s，CH3-S，3H)，0.46(m，BH3，3H)ppm。31P NMR(D2O，200MHz)δ83.9(m，Pα-BH3)，-6.8(d，Pγ)，-21.6(t，Pβ)ppm。FAB(負(fù)模式)m/z550.202。
2-氯-ATPαB，異構(gòu)體A[VK 44A](Rt 10.2min)(Na+型，pH 7.5)1HNMR(D2O，300MHz)δ8.59(s，H-8，1H)，6.07(d，J＝5Hz，H-1′，1H)，4.69(dd，J＝3.6，4.5Hz，H-3′，1H)，4.41(m，H-4′，1H)，4.17，4.37(αm，H-5′，2H)，0.5(m，BH3，3H)ppm。31P NMR(D2O，200MHz)δ82.9(m，Pα-BH3)，-6.01(d，Pγ)，-21.4(t，Pβ)ppm。FAB(負(fù)模式)m/z559.023(M4-+H++Na+)。異構(gòu)體B[VK 44B](Rt 12.6min)(Na+型，pH 7.5)1H NMR(D2O，300MHz)δ8.54(s，H-8，1H)，6.04(d，J＝5.6Hz，H-1′，1H)，4.57(dd，J＝3.5，4.7Hz，H-3′，1H)，4.40(m，H-4′，1H)，4.30(ddd，J＝2.6，7.5，11.5Hz，H-5′，1H)，4.18(ddd，J＝2.9，5，11.5Hz，H-5′，1H)，0.45(m，BH3，3H)ppm。31P NMR(D2O，200MHz)δ84.0(m，Pα-BH3)，-6.4(d，Pγ)，-21.6(t，Pβ)ppm。FAB(負(fù)模式)m/z559.765(M4-+H++Na+)。
2.藥理學(xué)由本發(fā)明的合成配體誘導(dǎo)的胰島素響應(yīng)的曲線、功效和效力在大鼠分離的胰腺模型中體外評價(jià)，同時(shí)記錄化合物對胰腺血管阻力的效果。
2.1方法化合物對大鼠分離和灌注的胰腺中胰島素分泌和血管阻力的效果在輕微刺激的葡萄糖濃度(8.3mmol/L)存在下評價(jià)。
實(shí)驗(yàn)用由喂食ad libitum和體重300-350g的雄性Wistar白化變種的大鼠的分離的灌注的胰腺體外進(jìn)行。根據(jù)先前描述的技術(shù)完全分離胰腺(Loubatieres等，Diabetologia，1969，5，1-10)，用其本身的動(dòng)脈系統(tǒng)用含有8.3mmol/L葡萄糖和2g/L牛血清白蛋白的Krebs-Ringer碳酸氫鈉緩沖液灌注。氧氣(95％)和二氧化碳(5％)的混合物在常壓下通過介質(zhì)鼓泡。溶液的pH為7.35，制備過程保持在37.5℃。每個(gè)器官以所選擇的恒定壓力(40-50cm水柱)灌注以便在實(shí)驗(yàn)開始時(shí)產(chǎn)生2.5ml/min的流量；在這些條件下，流量的任何變化反映血管阻力的變化(Hillaire-Buys等，Eur.R Pharmacol.，1991，199，309-314)。在用于胰島素試驗(yàn)的第一次取樣前進(jìn)行30分鐘的適應(yīng)期。15分鐘后，在45分鐘時(shí)，取樣，隨后在30分鐘內(nèi)進(jìn)行ATP類似物的灌輸，記錄胰腺流量，測量流出物中的胰島素。
胰島素用Herbert等的放射免疫法(J.Clin.Endocrinol.Metab.，1965，25，1375-1384)使用純化大鼠胰島素作為標(biāo)準(zhǔn)(LincoResearch，St.Charles，MO，USA)和抗胰島素血清(ICN Biochemicals，Miles，Puteaux，F(xiàn)rance)化驗(yàn)?；?yàn)的靈敏度為0.1ng/ml，由灌注的胰腺的胰島素輸出以ng/min表示，由流出餾分中的激素濃度乘以流量確定。
結(jié)果用平均標(biāo)準(zhǔn)誤差(SEM)的平均值表示，對于胰島素分泌和血管流量的動(dòng)力學(xué)，結(jié)果以相對于45分鐘時(shí)的數(shù)值的變化以百分?jǐn)?shù)表示。為確定濃度-響應(yīng)關(guān)系，平均胰島素輸出速率計(jì)算如下藥物灌輸時(shí)期曲線下的面積除以分鐘數(shù)(AUC/30)。
2.2結(jié)果如下結(jié)果顯示兩種非對映體均是病理學(xué)活性的，但異構(gòu)體A比相應(yīng)的異構(gòu)體B更加有效和有選擇性。
實(shí)施例6.2-甲硫基-ATPαB(異構(gòu)體A和B)的效果。
如附圖1所示，給藥A稱為VK38A的ATPαB衍生物2-甲硫基-ATPαB異構(gòu)體A誘導(dǎo)直接和與濃度有關(guān)的0.0015-5.0μmol/L范圍的胰島素響應(yīng)。葡萄糖誘導(dǎo)的胰島素釋放的增加首先是峰形式，隨后是持續(xù)分泌的第二階段(兩階段類型)，除了最低濃度(1.5nmol/L)之外，此時(shí)，藥物誘導(dǎo)230％的短暫單階段胰島素響應(yīng)。最大效果在0.5和5.011mol/L之間得到，達(dá)到約900％(AUC 30min，％/min)，EC50在15-50nmol/L之間。關(guān)于血管效果，直到150nmol/L沒有明顯的效果；在0.5，1.5和5.0μmol/L，觀察至輕微和短暫的胰腺流量下降(增加的血管阻力)，分別達(dá)到-6±3％，-10±3％和-8±6％(附圖2)。
給藥稱為VK38B的2-甲硫基-ATPαB的異構(gòu)體B誘導(dǎo)相似類型的胰島素響應(yīng)，雖然與異構(gòu)體A誘導(dǎo)相比，具有較低效果(附圖3)。此外，與異構(gòu)體A相反，從濃度15nmol/L開始VK38B誘導(dǎo)明顯和短暫的-27±5％的胰腺流量下降(血管阻力增加)(附圖4)。
實(shí)施例7.2-氯-ATPαB(異構(gòu)體A)的效果給藥稱為VK44A的2-氯-ATPαB異構(gòu)體A誘導(dǎo)似乎于VK38A相當(dāng)?shù)囊葝u素響應(yīng)(附圖5)。然而，它還導(dǎo)致和持續(xù)的胰腺流量增加(降低的血管阻力)，在0.015，0.15和1.5μmol/L分別達(dá)到+8±3％，+16±5％和+12±5％。
實(shí)施例8.ATPαB(異構(gòu)體A)的效果給藥稱為VK39A的母體化合物ATPαB(異構(gòu)體A)誘導(dǎo)明顯不如VK38A有效的兩階段胰島素響應(yīng)(附圖7)；它還誘導(dǎo)輕微和持續(xù)的血管響應(yīng)，在0.5和5.0μmol/L分別增加胰腺流量+7±3％和+10±3％。實(shí)施例9.在分離的大鼠胰腺中VK38A觸發(fā)的與葡萄糖有關(guān)的胰島素響應(yīng)大鼠分離的胰腺用含有不同濃度葡萄糖的生理介質(zhì)體外灌注，在20分鐘過程中以20nmol/L加入VK38A。胰島素響應(yīng)由VK38A給藥期間濃度-時(shí)間曲線下的面積確定，以平均值±SEM表示。結(jié)果示于表1中。
表1葡萄糖濃度(mmol/L)胰島素響應(yīng)(ng/min)2.8 0.97±0.035.8 2.68±0.528.3 33.12±1.75實(shí)施例10.VK38A在體內(nèi)對糖血的效果在有7天清除時(shí)間的交換實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)中，在葡萄糖耐量試驗(yàn)之前向正常(非糖尿病)Wistar大鼠給藥單一口服劑量的VK38A(0.2mg/kg)或安慰劑(賦形劑)進(jìn)行處理。葡萄糖(2g/kg)通過腹膜內(nèi)注射給藥，在葡萄糖給藥之前和之后的10、20、30、60分鐘采血樣以測量糖血。計(jì)算血漿葡萄糖濃度曲線下的面積(以基線值的百分?jǐn)?shù))。在表2中給出4個(gè)動(dòng)物的結(jié)果(在對照和處理動(dòng)物中基線葡萄糖濃度分別是1.26±0.02和1.26±0.04g/L)。
表2動(dòng)物AUC(對照組)AUC(VK38A處理)1 1731582 2242013 1471344 197176
a)(iPr)2NEt，[(iPr)2N]PCl，CHCl3，0℃，2h；b)H2P2O7-2(HBu3N+)2(1M in DMF)，rt，4h；c)BH3*SMe2(2M in THF)，rt，15min；d)H2O，rt，45min；e)pH2.3，rt，3h，followed by pH9，rt，40n方案A腺苷-5’-O-(1-甲硼烷代三磷酸鹽)衍生物
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權(quán)利要求
1.下式的2-取代-5’-O-(1-甲硼烷代三磷酸鹽)腺苷化合物 其中R1選自H、鹵素、O-烴基、S-烴基、NR3R4；任選被鹵素、CN、SCN、NO2、OR3、SR3或NR3R4取代的烴基；其中R3和R4分別是H或烴基或R3和R4與和其相連的氮原子一起形成飽和或不飽和雜環(huán)，它任選含有1-2個(gè)其它選自氧、氮和硫的雜原子；R2是H或烴基，和M+表示可藥用的鹽，或其非對映體或非對映體混合物的陽離子。
2.權(quán)利要求1的化合物，其中R1是烴基、O-烴基或S-烴基，所述烴基選自飽和或不飽和的，包括芳香、直鏈、支鏈或環(huán)狀，包括多環(huán)的含有碳和氫的基團(tuán)。
3.權(quán)利要求1的化合物，其中R1是NR3R4中，R3和R4分別是H或烴基或R3和R4與和其相連的N原子一起形成飽和或不飽和的雜環(huán)，任選含有1或2個(gè)其它選自氮、氧和硫的雜原子。
4.權(quán)利要求2或3的化合物，其中所述烴基選自C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、C3-C10環(huán)烷基、芳基或芳(C1-C8)烷基。
5.權(quán)利要求4的化合物，其中所述烴基選自C1-C6烷基、苯基或芐基。
6.權(quán)利要求5的化合物，其中R1是S-C1-C6烷基。
7.權(quán)利要求6的化合物，其中R1是S-CH3。
8.2-甲硫基腺苷-5’-O-(1-甲硼烷代三磷酸鹽)。
9.權(quán)利要求1的化合物，其中R1是鹵素。
10.權(quán)利要求9的化合物，其中R1是氯或溴。
11.權(quán)利要求10的化合物，其中R1是氯。
12.2-氯腺苷-5’-O-(1-甲硼烷代三磷酸鹽)。
13.權(quán)利要求1-12的任何之一的化合物的非對映體A，其特征在于在使用半制備逆相Lichro CART 250-10柱和流量為6mL/min的恒溶劑成分洗脫[100mM三乙基乙酸銨(TEAA)，pH7(A)MeOH(B)，8416]由非對映體混合物分離時(shí)，是具有較短滯留時(shí)間(Rt)的異構(gòu)體。
14.2-甲硫基腺苷-5’-O-(1-甲硼烷代三磷酸鹽)的非對映體A(Rt13.4min)。
15.藥物組合物，其含有至少一種權(quán)利要求1-14的任何之一的2-取代的-5’-O-(1-甲硼烷代三磷酸鹽)-腺苷衍生物，或其可藥用的鹽，或其非對映體或非對映體混合物，和可藥用的載體或稀釋劑。
16.權(quán)利要求15的藥物組合物，其含有2-甲硫基腺苷-5’-O-(1-甲硼烷代三磷酸鹽)。
17.權(quán)利要求15的藥物組合物，其含有至少一種所述2-取代-5’-O-(1-甲硼烷代三磷酸鹽)腺苷衍生物的非對映體。
18.權(quán)利要求17的藥物組合物，其含有所述2-取代-5’-O-(1-甲硼烷代三磷酸鹽)腺苷衍生物的非對映體A。
19.權(quán)利要求18的藥物組合物，其含有2-甲硫基腺苷-5’-O-(1-甲硼烷代三磷酸鹽)的非對映體A。
20.權(quán)利要求15-19的任何之一的藥物組合物，其用于提高胰島素分泌和治療II型糖尿病。
21.用于口服給藥的權(quán)利要求20的藥物組合物。
22.治療II型糖尿病的方法，其包括向需要的糖尿病患者給藥有效量的權(quán)利要求1的化合物。
23.治療II型糖尿病的方法，其包括向需要的糖尿病患者給藥有效量的2-甲硫基腺苷-5’-O-(1-甲硼烷代三磷酸鹽)。
全文摘要
本發(fā)明公開了在2位帶有基團(tuán)R
文檔編號A61P3/10GK1575180SQ02821193
公開日2005年2月2日 申請日期2002年10月23日 優(yōu)先權(quán)日2001年10月24日
發(fā)明者B·菲舍爾, V·克萊曼－內(nèi)厄姆, P·珀蒂 申請人:巴爾-伊蘭大學(xué), 蒙彼利埃大學(xué)