專利名稱：包括應(yīng)用zd6474和紫杉烷的聯(lián)合療法的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種在溫血動物(例如人)體內(nèi)產(chǎn)生抗血管生成和/或血管通透性降低效應(yīng)的方法，特別是治療癌癥(包括實體瘤)的方法，所述方法包括聯(lián)合給予ZD6474和紫杉烷；一種包含ZD6474和紫杉烷的藥用組合物；一種包含ZD6474和紫杉烷、用于人或動物體的治療方法的組合產(chǎn)品；一種包含ZD6474和紫杉烷的藥盒；ZD6474和紫杉烷在制備用于在溫血動物(例如人)體內(nèi)產(chǎn)生抗血管生成和/或血管通透性降低效應(yīng)的藥物中的用途，其中所述溫血動物任選采用電離輻射進行治療。
正常的血管生成在各種過程(包括胚胎發(fā)育、傷口愈合和雌性生殖功能的幾個要素)中起著重要作用。不需要的或病理性的血管生成與如下疾病狀態(tài)有關(guān)糖尿病性視網(wǎng)膜病、牛皮癬、癌癥、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、動脈粥樣化、卡波西肉瘤(Kaposi′s sarcoma)和血管瘤(Fan等，1995，Trends Pharmacol.Sci.1657-66；Folkman，1995，Nature Medicine 127-31)。人們認(rèn)為，血管通透性的改變在正常和病理性生理過程中都起作用(Cullinan-Bove等，1993，Endocrinology 133829-837；Senger等，1993，Cancer and Metastasis Reviews，12303-324)。已鑒定出幾種具有體外內(nèi)皮細(xì)胞生長促進活性的多肽，包括酸性和堿性成纖維細(xì)胞生長因子(aFGF和bFGF)以及血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)。由于其受體的限制性表達，VEGF的生長因子活性與FGF的活性相反，相對而言對內(nèi)皮細(xì)胞有特異性。最近的證據(jù)表明，VEGF無論對正常的還是對病理性的血管生成(Jakeman等，1993，Endocrinology，133848-859；Kolch等，1995，Breast Cancer Research and Treatment，36139-155)以及血管通透性(Connolly等，1989，J.Biol.Chem.26420017-20024)都是重要的刺激物。通過VEGF與抗體螯合對VEGF所產(chǎn)生的拮抗作用可以導(dǎo)致腫瘤生長受到抑制(Kim等，1993，Nature 362841-844)。
受體酪氨酸激酶(RTK)在生化信號跨細(xì)胞質(zhì)膜傳遞中是重要的。這些跨膜分子的特征在于由通過質(zhì)膜中的區(qū)段與細(xì)胞內(nèi)酪氨酸激酶結(jié)構(gòu)域連接的細(xì)胞外配體結(jié)合結(jié)構(gòu)域組成。配體與受體的結(jié)合導(dǎo)致刺激受體相關(guān)酪氨酸激酶活性，從而引起受體和其它胞內(nèi)分子上酪氨酸殘基的磷酸化。酪氨酸磷酸化的這些變化啟動信號級聯(lián)，從而產(chǎn)生多種細(xì)胞反應(yīng)。迄今為止，根據(jù)氨基酸序列同源性來定義，已鑒定出至少19種不同的RTK亞家族。目前，這些亞家族之一由fms樣酪氨酸激酶受體即Flt-1、含激酶插入結(jié)構(gòu)域的受體即KDR(也稱為Flk-1)和另一個fms樣酪氨酸激酶受體即Flt-4組成。已經(jīng)證明，這些相關(guān)RTK中的兩種-Flt-1和KDR以高親和力結(jié)合VEGF(De Vries等，1992，Science 255989-991；Terman等，1992，Biochem.Biophys.Res.Comm.1992，1871579-1586)。VEGF與這些在異源細(xì)胞中表達的受體的結(jié)合與細(xì)胞蛋白的酪氨酸磷酸化狀態(tài)和鈣流出方面的變化相關(guān)。
作為VEGF受體酪氨酸激酶抑制劑的喹唑啉衍生物描述于國際專利申請公布號WO 98/13354和WO 01/32651。在WO 98/13354和WO01/32651中描述了具有抗VEGF受體酪氨酸激酶活性同時還具有某些抗EGF受體酪氨酸激酶活性的化合物。
本發(fā)明化合物ZD6474屬于WO 98/13354的廣義一般公開內(nèi)容，并且在WO 01/32651中有范例說明。
在WO 98/13354和WO 01/32651中，說明了其發(fā)明的化合物“可用作單一療法或者除本發(fā)明化合物以外還可包括一種或多種其它物質(zhì)和/或治療?？刹捎猛瑫r、序貫或獨立給予各單一治療組分的方式達到這樣的聯(lián)合治療。”WO 98/13354和WO 01/32651繼而還描述了這樣的聯(lián)合治療的實施例，包括手術(shù)、放射療法和各種類型的化學(xué)治療劑。
無論在WO 98/13354還是在WO 01/32651中都沒有描述此中發(fā)明的任何化合物與其它治療的聯(lián)合應(yīng)用將會產(chǎn)生令人驚奇的有益效果。
現(xiàn)在，意想不到和令人驚奇的是，我們已經(jīng)發(fā)現(xiàn)將特定化合物ZD6474與從WO 98/13354和WO 01/32651所列舉的聯(lián)合治療中具體選出的紫杉烷聯(lián)合使用，與單獨使用ZD6474和紫杉烷中的任一種相比，產(chǎn)生顯著更好的效果。特別是，將ZD6474與紫杉烷聯(lián)合用于實體瘤，與單獨使用ZD6474和紫杉烷中的任一種相比，產(chǎn)生顯著更好的效果。
本發(fā)明治療方法的抗癌效應(yīng)包括但不限于抗腫瘤效應(yīng)、應(yīng)答率、疾病進程的時間和存活率。本發(fā)明治療方法的抗腫瘤效應(yīng)包括但不限于腫瘤生長抑制、腫瘤生長延遲、腫瘤消退、腫瘤縮小、停止治療后到腫瘤重新生長時間增加、疾病進程減慢。當(dāng)將本發(fā)明治療方法用于需要治療癌癥(包括實體瘤)的溫血動物(例如人)時，預(yù)期所述治療方法將產(chǎn)生根據(jù)以下的一種或多種測量確定的效果抗腫瘤效應(yīng)的程度、應(yīng)答率、疾病進程的時間和存活率。
根據(jù)本發(fā)明，提供一種在溫血動物(例如人)體內(nèi)產(chǎn)生抗血管生成和/或血管通透性降低效應(yīng)的方法，所述方法包括在給予所述動物有效量的紫杉烷之前、之后或同時給予有效量的4-(4-溴-2-氟苯胺基)-6-甲氧基-7-(1-甲基哌啶-4-基甲氧基)喹唑啉(也稱為ZD6474) 或其藥學(xué)上可接受的鹽。
根據(jù)本發(fā)明的另一方面，提供一種治療溫血動物(例如人)的癌癥的方法，所述方法包括在給予所述動物有效量的紫杉烷之前、之后或同時給予有效量的ZD6474或其藥學(xué)上可接受的鹽。
根據(jù)本發(fā)明的另一方面，提供一種治療溫血動物(例如人)的癌癥(包括實體瘤)的方法，所述方法包括在給予所述動物有效量的紫杉烷之前、之后或同時給予有效量的ZD6474或其藥學(xué)上可接受的鹽。
根據(jù)本發(fā)明的另一方面，提供一種在溫血動物(例如人)體內(nèi)產(chǎn)生抗血管生成和/或血管通透性降低效應(yīng)的方法，所述方法包括在給予所述動物有效量的紫杉烷之前、之后或同時給予有效量的ZD6474或其藥學(xué)上可接受的鹽；其中ZD6474和紫杉烷可分別任選與藥學(xué)上可接受的賦形劑或載體一起給藥。
根據(jù)本發(fā)明的另一方面，提供一種治療溫血動物(例如人)的癌癥的方法，所述方法包括在給予所述動物有效量的紫杉烷之前、之后或同時給予有效量的ZD6474或其藥學(xué)上可接受的鹽；其中ZD6474和紫杉烷可分別任選與藥學(xué)上可接受的賦形劑或載體一起給藥。
根據(jù)本發(fā)明的另一方面，提供一種治療溫血動物(例如人)的癌癥(包括實體瘤)的治療方法，所述方法包括在給予所述動物有效量的紫杉烷之前、之后或同時給予有效量的ZD6474或其藥學(xué)上可接受的鹽；其中ZD6474和紫杉烷可分別任選與藥學(xué)上可接受的賦形劑或載體一起給藥。
根據(jù)本發(fā)明的另一方面，提供一種藥用組合物，所述組合物包含ZD6474或其藥學(xué)上可接受的鹽、和紫杉烷、以及藥學(xué)上可接受的賦形劑或載體。
根據(jù)本發(fā)明的另一方面，提供一種組合產(chǎn)品，所述產(chǎn)品包含用于人或動物體治療方法的ZD6474或其藥學(xué)上可接受的鹽以及紫杉烷。
根據(jù)本發(fā)明的另一方面，提供一種藥盒，所述藥盒包含ZD6474或其藥學(xué)上可接受的鹽以及紫杉烷。
根據(jù)本發(fā)明的另一方面，提供一個藥盒，所述藥盒包含a)第一單位劑型的ZD6474或其藥學(xué)上可接受的鹽；b)第二單位劑型的紫杉烷；和
c)裝有所述第一和第二劑型的容器裝置。
根據(jù)本發(fā)明的另一方面，提供一種藥盒，所述藥盒包含a)第一單位劑型的ZD6474或其藥學(xué)上可接受的鹽以及藥學(xué)上可接受的賦形劑或載體；b)第二單位劑型的紫杉烷以及藥學(xué)上可接受的賦形劑或載體；和c)裝有所述第一和第二劑型的容器裝置。
根據(jù)本發(fā)明的另一方面，提供ZD6474或其藥學(xué)上可接受的鹽和紫杉烷在制備用于在溫血動物(例如人)體內(nèi)產(chǎn)生抗血管生成和/或血管通透性降低效應(yīng)的藥物中的用途。
根據(jù)本發(fā)明的另一方面，提供ZD6474或其藥學(xué)上可接受的鹽和紫杉烷在制備用于在溫血動物(例如人)體內(nèi)產(chǎn)生抗癌效應(yīng)的藥物中的用途。
根據(jù)本發(fā)明的另一方面，提供ZD6474或其藥學(xué)上可接受的鹽和紫杉烷在制備用于在溫血動物(例如人)體內(nèi)產(chǎn)生抗腫瘤效應(yīng)的藥物中的用途。
根據(jù)本發(fā)明的另一方面，提供一種聯(lián)合療法，該療法包括給予需要這種治療性治療的溫血動物(例如人)有效量的ZD6474或其藥學(xué)上可接受的鹽，任選一起給予藥學(xué)上可接受的賦形劑或載體，并且同時、序貫或獨立地給予有效量的紫杉烷；其中紫杉烷可任選與藥學(xué)上可接受的賦形劑或載體一起給予。這種治療性治療包括抗血管生成和/或血管通透性效應(yīng)、抗癌效應(yīng)和抗腫瘤效應(yīng)。
通過同時、序貫或獨立給予所述治療的不同組分，可以達到本文定義的本發(fā)明聯(lián)合療法。本文定義的聯(lián)合療法可用作單一治療或者除本發(fā)明聯(lián)合療法以外還可以包括手術(shù)或放射療法或其它化學(xué)治療劑。
手術(shù)療法可包括在給予包括本文描述的ZD6474聯(lián)合療法之前、期間或之后部分或完全腫瘤切除的步驟。
任選與本發(fā)明聯(lián)合療法同時使用的其它化學(xué)治療劑包括那些在WO 01/32651中所描述的治療劑，所述文獻通過引用結(jié)合到本文中。
這樣的化學(xué)療法可包括五大類治療藥物(i)包括血管靶向藥物在內(nèi)的其它抗血管生成劑；(ii)細(xì)胞生長抑制劑；(iii)生物反應(yīng)調(diào)節(jié)物(例如干擾素)；(iv)抗體(例如依決可單抗)；和(v)如醫(yī)學(xué)腫瘤學(xué)中所使用的抗增殖藥/抗腫瘤藥及其組合。
ZD6474、紫杉烷和電離輻射三者聯(lián)合給藥產(chǎn)生的效應(yīng)(例如抗腫瘤效應(yīng))可以大于ZD6474、紫杉烷和電離輻射中任一種單用所達到的效果，大于ZD6474和紫杉烷聯(lián)用所達到的效果，大于ZD6474和電離輻射聯(lián)用所達到的效果，大于紫杉烷和電離輻射聯(lián)用所達到的效果。
根據(jù)本發(fā)明，提供一種在溫血動物(例如人)體內(nèi)產(chǎn)生抗血管生成和/或血管通透性降低效應(yīng)的方法，所述方法包括在給予所述動物有效量的紫杉烷之前、之后或同時，并且在給予有效量的電離輻射之前、之后或同時給予有效量的ZD6474或其藥學(xué)上可接受的鹽。
根據(jù)本發(fā)明的另一方面，提供一種治療溫血動物(例如人)的癌癥的方法，所述方法包括在給予所述動物有效量的紫杉烷之前、之后或同時，并且在給予有效量的電離輻射之前、之后或同時給予有效量的ZD6474或其藥學(xué)上可接受的鹽。
根據(jù)本發(fā)明的另一方面，提供一種治療溫血動物(例如人)的癌癥(包括實體瘤)的方法，所述方法包括在給予所述動物有效量的紫杉烷之前、之后或同時，并且在給予有效量的電離輻射之前、之后或同時給予有效量的ZD6474或其藥學(xué)上可接受的鹽。
根據(jù)本發(fā)明的另一方面，提供一種在溫血動物(例如人)體內(nèi)產(chǎn)生抗血管生成和/或血管通透性降低效應(yīng)的方法，所述方法包括在給予所述動物有效量的紫杉烷之前、之后或同時，并且在給予有效量的電離輻射之前、之后或同時給予有效量的ZD6474或其藥學(xué)上可接受的鹽；其中ZD6474和紫杉烷可分別任選與藥學(xué)上可接受的賦形劑或載體一起給藥。
根據(jù)本發(fā)明的另一方面，提供一種治療溫血動物(例如人)的癌癥的方法，所述方法包括在給予所述動物有效量的紫杉烷之前、之后或同時，并且在給予有效量的電離輻射之前、之后或同時給予有效量的ZD6474或其藥學(xué)上可接受的鹽；其中ZD6474和紫杉烷可分別任選與藥學(xué)上可接受的賦形劑或載體一起給藥。
根據(jù)本發(fā)明的另一方面，提供一種治療溫血動物(例如人)的癌癥(包括實體瘤)的方法，所述方法包括在給予所述動物有效量的紫杉烷之前、之后或同時，并且在給予有效量的電離輻射之前、之后或同時給予有效量的ZD6474或其藥學(xué)上可接受的鹽；其中ZD6474和紫杉烷可分別任選與藥學(xué)上可接受的賦形劑或載體一起給藥。
根據(jù)本發(fā)明的另一方面，提供ZD6474或其藥學(xué)上可接受的鹽和紫杉烷在制備在正在進行電離輻射治療的溫血動物(例如人)體內(nèi)產(chǎn)生抗血管生成和/或血管通透性降低效應(yīng)的藥物中的用途。
根據(jù)本發(fā)明的另一方面，提供ZD6474或其藥學(xué)上可接受的鹽以及紫杉烷在制備在正在進行電離輻射治療的溫血動物(例如人)體內(nèi)產(chǎn)生抗癌效應(yīng)的藥物中的用途。
根據(jù)本發(fā)明的另一方面，提供ZD6474或其藥學(xué)上可接受的鹽以及紫杉烷在制備在正在進行電離輻射治療的溫血動物(例如人)體內(nèi)產(chǎn)生抗腫瘤效應(yīng)的藥物中的用途。
根據(jù)本發(fā)明的另一方面，提供一種治療性聯(lián)合療法，該療法包括給予需要這種治療性治療的溫血動物(例如人)有效量的ZD6474或其藥學(xué)上可接受的鹽，任選與藥學(xué)上可接受的賦形劑或載體一起給藥；和給予有效量的紫杉烷，任選與藥學(xué)上可接受的賦形劑或載體一起給藥；以及給予有效量的電離輻射；其中所述ZD6474、紫杉烷和電離輻射可同時、序貫或獨立地并以任何順序給藥。
正在進行電離輻射治療的溫血動物(例如人)是指在給予包含ZD6474和紫杉烷的藥物或聯(lián)合療法之前、之后或同時接受電離輻射治療的溫血動物(例如人)。例如可在給予包含ZD6474和紫杉烷的藥物或聯(lián)合療法之前一周內(nèi)至之后一周內(nèi)，給予所述溫血動物(例如人)所述電離輻射。這表明ZD6474、紫杉烷和電離輻射可以獨立或按任何順序序貫給予，或者可以同時給予。所述溫血動物可同時經(jīng)受ZD6474、紫杉烷和輻射中每一種的效應(yīng)。
根據(jù)本發(fā)明的一個方面，在給予ZD6474和紫杉烷中的一種之前，或在給予ZD6474和紫杉烷中的一種之后，給予電離輻射。
根據(jù)本發(fā)明的一個方面，在給予ZD6474和紫杉烷兩者之前，或在給予ZD6474和紫杉烷兩者之后，給予電離輻射。
根據(jù)本發(fā)明的一個方面，將ZD6474給予接受電離輻射治療之后的溫血動物。
根據(jù)本發(fā)明的另一方面，預(yù)期本發(fā)明治療方法的效應(yīng)至少等同于單獨使用所述療法的每種組分的效應(yīng)之和，即等同于單獨使用ZD6474和紫杉烷中的每一種的效應(yīng)，或者等同于單獨使用ZD6474、紫杉烷和電離輻射中的每一種的效應(yīng)。
根據(jù)本發(fā)明的另一方面，預(yù)期本發(fā)明治療方法的效應(yīng)大于單獨使用所述療法的每種組分的效應(yīng)之和，即大于單獨使用ZD6474和紫杉烷中的每一種的效應(yīng)，或者大于單獨使用ZD6474、紫杉烷和電離輻射中的每一種的效應(yīng)。
根據(jù)本發(fā)明的另一方面，預(yù)期本發(fā)明治療方法的效應(yīng)是協(xié)同效應(yīng)。
根據(jù)本發(fā)明，當(dāng)采用例如所述應(yīng)答的程度、應(yīng)答率、疾病進程的時間或存活周期進行測試時，如果所述效應(yīng)在治療上優(yōu)于以其常規(guī)劑量給予聯(lián)合療法中任一組分所達到的效應(yīng)的話，則定義該聯(lián)合療法為提供協(xié)同效應(yīng)。例如，如果所述效應(yīng)在治療上優(yōu)于單獨使用ZD6474或紫杉烷或電離輻射所達到的效應(yīng)的話，則該聯(lián)合療法的效應(yīng)是協(xié)同效應(yīng)。此外，當(dāng)在一組對單獨的ZD6474或紫杉烷或電離輻射無應(yīng)答(或應(yīng)答弱)的病人中獲得有益的效應(yīng)時，所述聯(lián)合療法的效應(yīng)是協(xié)同效應(yīng)。另外，當(dāng)所述組分中的一種以常規(guī)劑量給予而其它組分以減少的劑量給予時，采用例如所述應(yīng)答的程度、應(yīng)答率、疾病進程的時間或存活周期，測試其治療效應(yīng)是等同于給予常規(guī)劑量的聯(lián)合療法各組分所達到的效應(yīng)，所述聯(lián)合療法的效應(yīng)則被定義為提供協(xié)同效應(yīng)。特別是，當(dāng)ZD6474或紫杉烷或電離輻射的常規(guī)劑量可減少而不損害應(yīng)答范圍、應(yīng)答率、疾病進程的時間和存活數(shù)據(jù)中的一個或多個方面時，特別是在不損害應(yīng)答持續(xù)時間、但與所用各組分的常規(guī)劑量所出現(xiàn)的情況相比，幾乎和/或完全沒有不利副作用時，則認(rèn)為是產(chǎn)生了協(xié)同效應(yīng)。
如上所述，本文所定義的本發(fā)明聯(lián)合療法在其抗血管生成和/或血管通透性效應(yīng)上是有價值的。在各種各樣的疾病狀態(tài)中都存在血管生成和/或血管通透性增加，所述疾病狀態(tài)包括癌癥(包括白血病、多發(fā)性骨髓瘤和淋巴瘤)、糖尿病、牛皮癬、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、卡波西肉瘤、血管瘤、急性和慢性腎病、動脈粥樣化、動脈再狹窄、自身免疫病、急性炎癥、淋巴水腫(lymphoedema)、子宮內(nèi)膜異位、功能失調(diào)性子宮出血和視網(wǎng)膜血管增生性眼病。預(yù)期本發(fā)明的聯(lián)合療法在預(yù)防和治療諸如癌癥和卡波西肉瘤的疾病中特別有用。特別是，預(yù)期本發(fā)明的這種聯(lián)合療法能有利地減慢原發(fā)性和復(fù)發(fā)性實體瘤(例如結(jié)腸、乳房、前列腺、肺和皮膚實體瘤)的生長。在本發(fā)明的一個方面，預(yù)期本發(fā)明的這種聯(lián)合療法能有利地減慢乳房的原發(fā)性和復(fù)發(fā)性實體瘤的生長。在本發(fā)明的一個方面，預(yù)期本發(fā)明的這種聯(lián)合療法能有利地減慢肺部的原發(fā)性和復(fù)發(fā)性實體瘤例如非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)的生長。
在本發(fā)明的另一方面，預(yù)期任選與電離輻射聯(lián)用的ZD6474和紫杉烷能抑制與EGF相關(guān)的原發(fā)性和復(fù)發(fā)性實體瘤、尤其是那些生長和擴散顯著依賴于EGF的腫瘤的生長。
在本發(fā)明的另一方面，預(yù)期任選與電離輻射聯(lián)用的ZD6474和紫杉烷能抑制與VEGF和EGF相關(guān)的原發(fā)性和復(fù)發(fā)性實體瘤、尤其是那些生長和擴散顯著依賴于VEGF和EGF的腫瘤的生長。
本文所述組合物可以為適用于口服的形式，例如作為片劑或膠囊劑；適用于鼻腔給藥或吸入給藥的形式，例如作為散劑或溶液劑；適用于胃腸外注射(包括靜脈、皮下、肌內(nèi)、血管內(nèi)或輸注)的形式，例如作為無菌溶液劑、混懸劑或乳劑；適用于局部給藥的形式，例如作為軟膏劑或乳膏劑；適用于直腸給藥的形式，例如作為栓劑；或者，給藥途徑可以是直接注射到腫瘤內(nèi)或者是局部給藥。在本發(fā)明的其它實施方案中，所述聯(lián)合療法的ZD6474可以經(jīng)內(nèi)窺鏡、氣管內(nèi)、病灶內(nèi)、經(jīng)皮、靜脈內(nèi)、皮下、腹膜內(nèi)或腫瘤內(nèi)給藥。一般來說，可以以常規(guī)方法，采用常規(guī)賦形劑制備本文描述的組合物。本發(fā)明組合物最好為單位劑型。
ZD6474通常以每平方米動物體表面積10-500mg范圍內(nèi)的單位劑量給予溫血動物，例如給予人約0.3-15mg/kg。設(shè)想單位劑量范圍如0.3-15mg/kg，優(yōu)選0.5-5mg/kg，并且這通常是治療有效劑量。單位劑量(如一粒片劑或一粒膠囊)通常含有例如25-500mg的活性成分。使用的日用量優(yōu)選在0.5-5mg/kg范圍。
紫杉烷包括紫杉醇和多西他賽。紫杉醇和多西他賽都是市售的。
在本發(fā)明的一個實施方案中，紫杉烷是多西他賽。
在本發(fā)明的一個實施方案中，紫杉烷是紫杉醇。
紫杉烷可按已知的給藥途徑和劑量給藥。
例如，紫杉醇可每隔3周、在約24小時內(nèi)、以135-200mg/m2的劑量經(jīng)輸注給藥?；蛘撸?，紫杉醇也可每隔3周、在約3小時內(nèi)、以135-225mg/m2的劑量經(jīng)輸注給藥?；蛘?，例如，紫杉醇可連續(xù)多周、每周在約1小時內(nèi)、以80-100mg/m2的劑量經(jīng)輸注給藥。或者，例如，紫杉醇也可每隔3周、在約1小時內(nèi)、以200mg/m2的劑量經(jīng)輸注給藥。或者，例如，紫杉醇也可每隔3周、在約96小時內(nèi)、以120-140mg/m2的劑量經(jīng)輸注給藥。
多西他賽可按已知的給藥途徑和劑量給藥。例如，多西他賽可在每隔3周、在1小時內(nèi)、以55-100mg/m2的劑量經(jīng)輸注給藥。
可按已知的臨床放射療法操作規(guī)程進行放射療法。電離輻射的劑量將是用于臨床放射療法的已知劑量。所采用的放射療法將包括例如使用γ-射線、X-射線和/或直接給予放射性同位素的輻射。本發(fā)明中還包括其它形式的DNA損傷因素，諸如微波和紫外輻射。例如，X-射線的劑量可按1.8-2.0Gy的日劑量，每周給予5天，持續(xù)5-6周。通常，分次劑量的總和將在45-60Gy范圍內(nèi)。單次較大劑量(例如5-10Gy)可作為放射療法過程的一部分來給予。單次劑量可在手術(shù)中給予。當(dāng)在一段時間內(nèi)有規(guī)律地給予小劑量的X-射線(例如在數(shù)天內(nèi)給予0.1Gy/小時)時，可采用高分割放射療法。放射性同位素的劑量范圍變化很大，取決于同位素的半衰期、放射的強度和類型，以及細(xì)胞攝入量。
如上所述，對具體疾病狀態(tài)進行治療性或預(yù)防性治療所需的每種療法的劑量大小必需隨待治療宿主、給藥途徑和待治療疾病的嚴(yán)重程度而變化。因此，最佳劑量可由治療任一具體病人的醫(yī)師來確定。例如，降低上述聯(lián)合療法的組分劑量以降低毒性可能是必需的或所要求的。劑量和時間表可根據(jù)具體疾病狀態(tài)和病人的總體狀況而變化。當(dāng)除本發(fā)明的聯(lián)合療法外還采用一種或多種其它化學(xué)治療劑時，也可改變劑量和時間表。治療任一具體病人的醫(yī)師可以制定時間表。
本發(fā)明涉及紫杉烷和ZD6474或ZD6474鹽的聯(lián)合使用。
藥用組合物中所用的鹽將是藥學(xué)上可接受的鹽，但在制備ZD6474和其藥學(xué)上可接受的鹽中也可使用其它鹽。這樣的鹽可用提供藥學(xué)上可接受的陽離子的無機堿或有機堿形成，這樣的與無機堿或有機堿的鹽包括例如堿金屬鹽諸如鈉鹽或鉀鹽、堿土金屬鹽諸如鈣鹽或鎂鹽、銨鹽或甲胺、二甲胺、三甲胺、哌啶、嗎啉或三-(2-羥乙基)胺的鹽。
例如，可按以下實施例(a)-(c)所示的任一方法制備ZD6474，除非另有說明，其中(i)通過真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)進行蒸發(fā)，后處理步驟在通過過濾除去殘留固體(例如干燥劑)后進行；(ii)操作在環(huán)境溫度即18-25℃下、在惰性氣氛如氬氣中進行；(iii)柱色譜(通過快速方法)和中壓液相色譜(MPLC)在得自E.Merck，Darmstadt，Germany的Merck Kieselgel硅膠(Art.9385)或MerckLichroprep RP-18(Art.9303)反相硅膠上進行；(iv)所給出的收率僅用以說明目的，不一定是所能獲得的最大收率；(v)熔點未經(jīng)校正，是用Mettler SP62自動熔點儀、油浴裝置或Koffler加熱板裝置測量的。
(vi)終產(chǎn)物式I的結(jié)構(gòu)通過核(通常是質(zhì)子)磁共振(NMR)和質(zhì)譜技術(shù)確認(rèn)；質(zhì)子磁共振的化學(xué)位移值在δ范圍內(nèi)測定，峰的多重性如下所示s，單峰；d，雙重峰；t，三重峰；m，多重峰；br，峰寬；q，四重峰；NMR譜在24℃下、在一臺400MHz機器上進行。
(vii)中間體一般未完全表征，純度通過薄層色譜(TLC)、高效液相色譜(HPLC)、紅外(IR)或NMR分析確定。
(viii)采用了以下縮寫DMF N，N-二甲基甲酰胺DMSO二甲亞砜THF 四氫呋喃TFA 三氟乙酸NMP 1-甲基-2-吡咯烷酮。]方法(a)往4-(4-溴-2-氟苯胺基)-6-甲氧基-7-(哌啶-4-基甲氧基)喹唑啉(139mg，0.3mmol)在THF/甲醇(1.4ml/1.4ml)混合物中的溶液中加入37％甲醛水溶液(50μl，0.6mmol)，再加入氰基硼氫化鈉(23mg，0.36mmol)。在環(huán)境溫度下攪拌1小時后，加入水并真空除去揮發(fā)物。殘余物用水研磨，過濾，用水洗滌并真空干燥。所得固體經(jīng)中性氧化鋁色譜純化，用二氯甲烷、繼而用二氯甲烷/乙酸乙酯(1/1)、再用二氯甲烷/乙酸乙酯/甲醇(50/45/5)洗脫。將含有所要產(chǎn)物的流分真空蒸發(fā)。將所得白色固體溶于二氯甲烷/甲醇(3ml/3ml)中，然后加入溶于乙醚(0.5ml)的3N鹽酸，真空除去揮發(fā)物。所得固體用乙醚研磨，過濾，用乙醚洗滌并真空干燥，得到4-(4-溴-2-氟苯胺基)-6-甲氧基-7-(1-甲基哌啶-4-基甲氧基)喹唑啉鹽酸鹽(120mg，69％)。
MS-ESI475-477[MH]+4-(4-溴-2-氟苯胺基)-6-甲氧基-7-(1-甲基哌啶-4-基甲氧基)喹唑啉鹽酸鹽的質(zhì)子化形式的NMR譜顯示存在A和B兩種構(gòu)型，A∶B之比約為9∶1。
1H NMR譜(DMSOd6；CF3COOD)1.55-1.7(m，，A型2H)；1.85-2.0(m，B型4H)；2.03(d，A型2H)；2.08-2.14(br s，A型1H)；2.31-2.38(br s，B型1H)；2.79(s，A型3H)；2.82(s，B型3H)；3.03(t，A型2H)；3.21(br s，B型2H)；3.30(br s，B型2H)；3.52(d，A型2H)；4.02(s，3H)；4.12(d，A型2H)；4.30(d，B型2H)；7.41(s，1H)；7.5-7.65(m，2H)；7.81(d，1H)；8.20(s，1H)；8.88(s，1H)元素分析 實測值C 46.0 H 5.2 N 9.6C22H24N4O2BrF0.3H2O2.65HCl理論值C 45.8 H 4.8 N 9.7％原料按下列方法制備將7-芐氧基-4-氯-6-甲氧基喹唑啉鹽酸鹽(8.35g，27.8mmol)(例如按照WO 97/22596的實施例1中描述的方法制備)和4-溴-2-氟苯胺(5.65g，29.7mmol)的2-丙醇(200ml)溶液在回流下加熱4小時。所得沉淀通過過濾收集，先用2-丙醇、然后用乙醚洗滌并真空干燥，得到7-芐氧基-4-(4-溴-2-氟苯胺基)-6-甲氧基喹唑啉鹽酸鹽(9.46g，78％)。
1H NMR譜(DMSOd6；CD3COOD)4.0(s，3H)；5.37(s，2H)；7.35-7.5(m，4H)；7.52-7.62(m，4H)；7.8(d，1H)；8.14(9s，1H)；8.79(s，1H)MS-ESI456[MH]+元素分析 實測值C 54.0 H 3.7 N 8.7C22H17N3O2BrF0.9HCl理論值C 54.2 H 3.7 N 8.6％將7-芐氧基-4-(4-溴-2-氟苯胺基)-6-甲氧基喹唑啉鹽酸鹽(9.4g，19.1mmol)的TFA(90ml)溶液在回流下加熱50分鐘。讓該混合物冷卻，然后傾入到冰中。所得沉淀通過過濾收集并溶于甲醇(70ml)中。用濃氨水溶液將該溶液調(diào)至pH9-10。該混合物通過蒸發(fā)濃縮至原始體積的一半。所得的沉淀通過過濾收集，先用水、然后用乙醚洗滌并真空干燥，得到4-(4-溴-2-氟苯胺基)-7-羥基-6-甲氧基喹唑啉(5.66g，82％)。
1H NMR譜(DMSOd6；CD3COOD)3.95(s，3H)；7.09(s，1H)；7.48(s，1H)；7.54(t，1H)；7.64(d，1H)；7.79(s，1H)；8.31(s，1H)MS-ESI366[MH]+元素分析 實測值C 49.5 H 3.1 N 11.3C15H11N3O2BrF理論值C 49.5 H 3.0 N 11.5％當(dāng)保持在0-5℃的溫度范圍內(nèi)，將二碳酸二叔丁酯(41.7g，0.19mol)的乙酸乙酯(75ml)溶液分批加入到于5℃冷卻的4-哌啶甲酸乙酯(30g，0.19mol)的乙酸乙酯溶液(150ml)中。在環(huán)境溫度下攪拌48小時后，將該混合物傾入到水(300ml)中，分離有機層，依次用水(200ml)、0.1N鹽酸水溶液(200ml)、飽和碳酸氫鈉(200ml)和鹽水(200ml)洗滌，干燥(MgSO4)并蒸發(fā)，得到4-(1-叔丁氧羰基)哌啶)甲酸乙酯(48g，98％)。
1H NMR譜(CDCl3)1.25(t，3H)；1.45(s，9H)；1.55-1.70(m，2H)；1.8-2.0(d，2H)；2.35-2.5(m，1H)；2.7-2.95(t，2H)；3.9-4.1(br s，2H)；4.15(q，2H)將1M氫化鋁鋰的THF(133ml，0.133mol)溶液分批加入到于0℃冷卻的4-(1-叔丁氧羰基)哌啶)甲酸乙酯(48g，0.19mol)的無水THF(180ml)溶液中。于0℃攪拌2小時，加入水(30ml)，再加入2N氫氧化鈉(10ml)。沉淀通過硅藻土過濾而除去并用乙酸乙酯洗滌。濾液用水、鹽水洗滌，干燥(MgSO4)并蒸發(fā)，得到1-(叔丁氧羰基)-4-羥甲基哌啶(36.3g，89％)。
MS(EI)215[M.]+1H NMR譜(CDCl3)1.05-1.2(m，2H)；1.35-1.55(m，10H)；1.6-1.8(m，2H)；2.6-2.8(t，2H)；3.4-3.6(t，2H)；4.0-4.2(br s，2H)將1，4-二氮雜雙環(huán)[2.2.2]辛烷(42.4g，0.378mol)加入到1-(叔丁氧羰基)-4-羥甲基哌啶(52.5g，0.244mol)的叔丁基·甲基醚(525ml)溶液中。在環(huán)境溫度下攪拌15分鐘后，將混合物冷卻至5℃，在2小時內(nèi)分批加入甲苯磺酰氯(62.8g，0.33mmol)的叔丁基·甲基醚(525ml)溶液，同時保持0℃的溫度。在環(huán)境溫度下攪拌1小時后，加入石油醚(1L)。通過過濾除去沉淀。濾液經(jīng)蒸發(fā)，得到固體。將該固體溶于乙醚中并依次用0.5N鹽酸水溶液(2×500ml)、水、飽和碳酸氫鈉和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)并蒸發(fā)，得到1-(叔丁氧羰基)-4-(4-甲基苯基磺酰氧基甲基)哌啶(76.7g，85％)。
MS(ESI)392[MNa]+1H MR譜(CDCl3)1.0-1.2(m，2H)；1.45(s，9H)；1.65(d，2H)；1.75-1.9(m，2H)；2.45(s，3H)；2.55-2.75(m，2H)；3.85(d，1H)；4.0-4.2(br s，2H)；7.35(d，2H)；7.8(d，2H)將碳酸鉀(414mg，3mmol)加入到4-(4-溴-2-氟苯胺基)-7-羥基-6-甲氧基喹唑啉(546mg，1.5mmol)的DMF(5ml)懸浮液中。在環(huán)境溫度下攪拌10分鐘后，加入1-(叔丁氧羰基)-4-(4-甲基苯基磺酰氧基甲基)哌啶(636mg，1.72mmol)，將該混合物于95℃加熱2小時。冷卻后，將該混合物傾入到冷卻水(20ml)中。通過過濾收集沉淀，用水洗滌并真空干燥，得到4-(4-溴-2-氟苯胺基)-7-(1-(叔丁氧羰基)哌啶-4-基甲氧基)-6-甲氧基喹唑啉(665mg，79％)。
MS-ESI561-563[MH]+1H NMR譜(DMSOd6)1.15-1.3(m，2H)，1.46(s，9H)，1.8(d，2H)，2.0-2.1(m，1H)，2.65-2.9(m，2H)，3.95(s，3H)，4.02(br s，2H)，4.05(d，2H)，7.2(s，1H)，7.48(d，1H)，7.55(t，1H)，7.65(d，1H)，7.8(s，1H)，8.35(s，1H)，9.55(br s，1H)將TFA(3ml)加入到4-(4-溴-2-氟苯胺基)-7-(1-(叔丁氧羰基)哌啶-4-基甲氧基)-6-甲氧基喹唑啉(673mg，1.2mmol)的二氯甲烷(10ml)懸浮液中。在環(huán)境溫度下攪拌1小時后，真空除去揮發(fā)物。該殘余物在水/乙醚中研磨。分離有機層。水層再用乙醚洗滌。用2N氫氧化鈉水溶液將水層調(diào)至pH10。用二氯甲烷萃取水層。干燥(MgSO4)有機層并真空除去溶劑。該固體用乙醚/石油醚(1/1)的混合物研磨，過濾，用乙醚洗滌并真空干燥，得到4-(4-溴-2-氟苯胺基)-6-甲氧基-7-(哌啶-4-基甲氧基)喹唑啉(390mg，70.5％)。
MS-ESI461-463[MH]+1H MR譜(DMSOd6)1.13-1.3(m，2H)，1.75(d，2H)，1.87-2.0(m，1H)，2.5(d，2H)，3.0(d，2H)，3.96(s，3H)，3.98(d，2H)，7.2(s，1H)，7.5(dd，1H)，7.55(t，1H)，7.68(dd，1H)，7.80(s，1H)，8.36(s，1H)，9.55(br s，1H)元素分析 實測值C 54.5 H 4.9 N 12.1C21H22N4O2BrF理論值C 54.7 H 4.8 N 12.1％方法(b)將37％甲醛水溶液(3.5ml，42mmol)加入到4-(4-溴-2-氟苯胺基)-7-(1-叔丁氧羰基)哌啶-4-基甲氧基)-6-甲氧基喹唑啉(3.49g，6.22mmol)(按上述方法(a)對原料描述的制備方法來制備)的甲酸(35ml)溶液中。于95℃加熱4小時后，真空除去揮發(fā)物。將殘余物懸浮于水中，通過緩慢加入2N氫氧化鈉溶液將混合物調(diào)節(jié)至pH10.5。懸浮液用乙酸乙酯萃取。有機層用鹽水洗滌，干燥(MgSO4)并蒸發(fā)，得到4-(4-溴-2-氟苯胺基)-6-甲氧基-7-(1-甲基哌啶-4-基甲氧基)喹唑啉(2.61g，88％)。
MS-ESI475-477[MH]+1H NMR譜(DMSOd6)1.3-1.45(m，2H)，1.8(d，2H)，1.7-1.9(m，1H)，1.95(t，2H)，2.2(s，3H)，2.85(d，2H)，3.96(s，3H)，4.05(d，2H)，7.19(s，1H)，7.5(d，1H)，7.55(t，1H)，7.67(d，1H)，7.81(s，1H)，8.37(s，1H)，9.54(s，1H)元素分析 實測值C 55.4 H 5.1 N 11.6C22H24N4O2BrF理論值C 55.6 H 5.1 N 11.8％方法(c)將4-氯-6-甲氧基-7-(1-甲基哌啶-4-基甲氧基)喹唑啉(200mg，0.62mmol)和4-溴-2-氟苯胺(142mg，0.74mmol)在含溶于異丙醇的6N鹽酸(110μl，0.68ml)的異丙醇(3ml)溶液中在回流下加熱1.5小時。冷卻后，該沉淀通過過濾收集，先用異丙醇、然后用乙醚洗滌并真空干燥，得到4-(4-溴-2-氟苯胺基)-6-甲氧基-7-(1-甲基哌啶-4-基甲氧基)喹唑啉鹽酸鹽(304mg，90％)。
元素分析 實測值C 47.9 H 4.9 N 10.0C22H24N4O2BrF0.5H2O1.8HCl理論值C 48.2 H 5.0 N 10.1％0.08異丙醇4-(4-溴-2-氟苯胺基)-6-甲氧基-7-(1-甲基哌啶-4-基甲氧基)喹唑啉鹽酸鹽的質(zhì)子化形式的NMR譜顯示存在A和B兩種構(gòu)型，A∶B之比約為9∶1。
1H NMR譜(DMSOd6)1.6-1.78(m，A型2H)；1.81-1.93(br s，B型4H)；1.94-2.07(d，A型2H)；2.08-2.23(br s，A型1H)；2.29-2.37(br s，B型1H)；2.73(d，A型3H)；2.77(d，B型3H)；2.93-3.10(q，A型2H)；3.21(br s，B型2H)；3.27(br s，B型2H)；3.42-3.48(d，A型2H)；4.04(s，3H)；4.10(d，A型2H)；4.29(d，B型2H)；7.49(s，1H)；7.53-7.61(m，2H)；7.78(d，1H)；8.47(s，1H)；8.81(s，1H)；10.48(br s，A型1H)；10.79(br s，B型1H)；11.90(br s，1H)為得到另一NMR讀數(shù)，將一些固體碳酸鉀加入到上述4-(4-溴-2-氟苯胺基)-6-甲氧基-7-(1-甲基哌啶-4-基甲氧基)喹唑啉鹽酸鹽的DMSO溶液中，以便在NMR管中釋放游離堿。然后再記錄NMR譜，顯示出僅有如下所述的一種構(gòu)型1H NMR譜(DMSOd6；固體碳酸鉀)1.3-1.45(m，2H)；1.75(d，2H)；1.7-1.9(m，1H)；1.89(t，2H)；2.18(s，3H)；2.8(d，2H)；3.98(s，3H)；4.0(d，2H)；7.2(s，1H)；7.48(d，1H)；7.55(t，1H)；7.68(d，1H)；7.8(s，1H)；8.35(s，1H)；9.75(s，1H)由4-(4-溴-2-氟苯胺基)-6-甲氧基-7-(1-甲基哌啶-4-基甲氧基)喹唑啉鹽酸鹽(按如上所述方法制備)，如下產(chǎn)生4-(4-溴-2-氟苯胺基)-6-甲氧基-7-(1-甲基哌啶-4-基甲氧基)喹唑啉(游離堿)樣品將4-(4-溴-2-氟苯胺基)-6-甲氧基-7-(1-甲基哌啶-4-基甲氧基喹唑啉鹽酸鹽(50mg)懸浮于二氯甲烷(2ml)中，然后用飽和碳酸氫鈉洗滌。將二氯甲烷溶液干燥(MgSO4)，通過蒸發(fā)除去揮發(fā)物，得到4-(4-溴-2-氟苯胺基)-6-甲氧基-7-(1-甲基哌啶-4-基甲氧基)喹唑啉(游離堿)。如此產(chǎn)生的游離堿的NMR顯示僅有如下所述的一種構(gòu)型1H NMR譜(DMSOd6)1.3-1.45(m，2H)；1.76(d，2H)；1.7-1.9(m，1H)；1.9(t，2H)；2.19(s，3H)；2.8(d，2H)；3.95(s，3H)；4.02(d，2H)；7.2(s，1H)；7.48(d，1H)；7.55(t，1H)；7.68(dd，1H)；7.8(s，1H)；8.38(s，1H)；9.55(brs，1H)為了得到另一NMR讀數(shù)，將一些CF3COOD加入到上述4-(4-溴-2-氟苯胺基)-6-甲氧基-7-(1-甲基哌啶-4-基甲氧基)喹唑啉(游離堿)的NMR DMSO溶液中，再次記錄NMR譜。如此獲得的4-(4-溴-2-氟苯胺基)-6-甲氧基-7-(1-甲基哌啶-4-基甲氧基)喹唑啉三氟乙酸鹽的質(zhì)子化形式的NMR譜存在A和B兩種構(gòu)型，A∶B之比約為9∶1。
1H NMR譜(DMSOd6；CF3COOD)1.5-1.7(m，A型2H)；1.93(br s，B型4H)；2.0-2.1(d，A型2H)；2.17(br s，A型1H)；2.35(br s，B型1H)；2.71(s，A型3H)；2.73(s，B型3H)；2.97-3.09(t，A型2H)；3.23(br s，B型2H)；3.34(br s，B型2H)；3.47-3.57(d，A型2H)；4.02(s，3H)；4.15(d，A型2H)；4.30(d，B型2H)；7.2(s，1H)；7.3-7.5(m，2H)；7.6(d，1H)；7.9(s，1H)；8.7(s，1H)原料制備如下將1-(叔丁氧羰基)-4-(4-甲基苯基磺酰氧基甲基)哌啶(40g，0.11mol)(按如上方法(a)對原料描述的制備方法來制備)加入到4-羥基-3-甲氧基苯甲酸乙酯(19.6g，0.1mol)和溶于無水DMF(200ml)的碳酸鉀(28g，0.2mol)的懸浮液中。于95℃攪拌2.5小時后，讓混合物冷卻至環(huán)境溫度并在水和乙酸乙酯/乙醚之間分配。有機層用水、鹽水洗滌，干燥(MgSO4)并蒸發(fā)。所得的油狀物從石油醚重結(jié)晶，懸浮液在5℃保存過夜。通過過濾收集固體，用石油醚洗滌并真空干燥，得到4-(1-(叔丁氧羰基)哌啶-4-基甲氧基)-3-甲氧基苯甲酸乙酯(35g，89％)。
m.p.81-83℃MS(ESI)416[MNa]+
1H NMR譜(CDCl3)1.2-1.35(m，2H)；1.4(t，3H)；1.48(s，9H)；1.8-1.9(d，2H)；2.0-2.15(m，2H)；2.75(t，2H)；3.9(d，2H)；3.95(s，3H)；4.05-4.25(brs，2H)；4.35(q，2H)；6.85(d，1H)；7.55(s，1H)；7.65(d，1H)元素分析 實測值C 63.4 H 8.0 N 3.5C21H31NO60.3H2O理論值C 63.2 H 8.0 N 3.5％將甲醛(12M，37％的水溶液，35ml，420mmol)加入到4-(1-(叔丁氧羰基)哌啶-4-基甲氧基)-3-甲氧基苯甲酸乙酯(35g，89mmol)的甲酸(35ml)溶液中。于95℃攪拌3小時后，通過蒸發(fā)除去揮發(fā)物，將殘余物溶于二氯甲烷中，然后加入溶于乙醚的3M鹽酸(40ml，120mmol)。經(jīng)乙醚稀釋后，研磨混合物，直至形成固體。通過過濾收集固體，用乙醚洗滌并于50℃真空干燥過夜，得到3-甲氧基-4-(1-甲基哌啶-4-基甲氧基)苯甲酸乙酯(30.6g，定量)。
MS(ESI)308[MH]+1H NMR譜(DMSOd6)1.29(t，3H)；1.5-1.7(m，2H)；1.95(d，2H)；2.0-2.15(br s，1H)；2.72(s，3H)；2.9-3.1(m，2H)；3.35-3.5(br s，2H)；3.85(s，3H)；3.9-4.05(br s，2H)；4.3(q，2H)；7.1(d，1H)；7.48(s，1H)；7.6(d，1H)將3-甲氧基-4-(1-甲基哌啶-4-基甲氧基)苯甲酸乙酯(30.6g，89mmol)的二氯甲烷(75ml)溶液冷卻至0-5℃。加入TFA(37.5ml)，接著在15分鐘內(nèi)滴加24N發(fā)煙硝酸(7.42ml，178mmol)的二氯甲烷溶液(15ml)。加入完成后，讓該溶液升溫并在環(huán)境溫度下攪拌2小時。真空除去揮發(fā)物，將殘余物溶于二氯甲烷(50ml)中。將該溶液冷卻至0-5℃，然后加入乙醚。通過過濾收集沉淀并于50℃真空干燥。將固體溶于二氯甲烷(500ml)中，然后加入溶于乙醚的3M鹽酸(30ml)，再加入乙醚(500ml)。通過過濾收集固體并于50℃真空干燥，得到3-甲氧基-4-(1-甲基哌啶-4-基甲氧基)-6-硝基苯甲酸乙酯(28.4g，82％)。
MS(ESI)353[MH]+1H NMR譜(DMSOd6)1.3(t，3H)；1.45-1.65(m，2H)；1.75-2.1(m，3H)；2.75(s，3H)；2.9-3.05(m，2H)；3.4-3.5(d，2H)；3.95(s，3H)；4.05(d，2H)；4.3(q，2H)；7.32(s，1H)；7.66(s，1H)
在1.8個大氣壓下，將3-甲氧基-4-(1-甲基哌啶-4-基甲氧基)-6-硝基苯甲酸乙酯(3.89g，10mmol)在含10％披鉑活性炭(濕度50％)(389mg)的甲醇(80ml)中的懸浮液氫化，直至停止吸收氫。過濾該混合物并蒸發(fā)濾液。將殘余物溶于水(30ml)中，然后用飽和碳酸氫鈉溶液調(diào)節(jié)至pH10?；旌衔镉靡宜嵋阴?乙醚(1/1)稀釋，然后分離有機層。水層進一步用乙酸乙酯/乙醚萃取，合并有機層。有機層用水、鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，過濾并蒸發(fā)。所得的固體在乙醚/石油醚混合液中研磨，過濾，用石油醚洗滌并于60℃真空干燥，得到6-氨基-3-甲氧基-4-(1-甲基哌啶-4-基甲氧基)苯甲酸乙酯(2.58g，80％)。
m.p.111-112℃MS(ESI)323[MH]+1H NMR譜(CDCl3)1.35(t，3H)；1.4-1.5(m，2H)；1.85(m，3H)；1.95(t，2H)；2.29(s，3H)；2.9(d，2H)；3.8(s，3H)；3.85(d，2H)；4.3(q，2H)；5.55(br s，2H)；6.13(s，1H)；7.33(s，1H)元素分析 實測值C 62.8 H 8.5 N 8.3C17H26N2O40.2H2O理論值C 62.6 H 8.2 N 8.6％將6-氨基-3-甲氧基-4-(1-甲基哌啶-4-基甲氧基)苯甲酸乙酯(16.1g，50mmol)的含有乙酸甲脒(5.2g，50mmol)的2-甲氧基乙醇(160ml)溶液于115℃加熱2小時。在4小時內(nèi)每隔30分鐘分批加入乙酸甲脒(10.4g，100mmol)，在最后一次加入后繼續(xù)加熱30分鐘。冷卻后，真空除去揮發(fā)物。將固體溶于乙醇(100ml)和二氯甲烷(50ml)中。過濾除去沉淀，濾液濃縮到終體積為100ml。將該懸浮液冷卻至5℃，通過過濾收集固體，先用冷乙醇、再用乙醚洗滌，然后于60℃真空干燥過夜，得到6-甲氧基-7-(1-甲基哌啶-4-基甲氧基)-3，4-二氫喹唑啉-4-酮(12.7g，70％)。
MS(ESI)304[MH]+1H NMR譜(DMSOd6)1.25-1.4(m，2H)；1.75(d，2H)；1.9(t，1H)；1.9(s，3H)；2.16(s，2H)；2.8(d，2H)；3.9(s，3H)；4.0(d，2H)；7.11(s，1H)；7.44(s，1H)；7.97(s，1H)將6-甲氧基-7-(1-甲基哌啶-4-基甲氧基)-3，4-二氫喹唑啉-4-酮(2.8g，9.24mmol)的含有DMF(280μl)的亞硫酰氯(28ml)溶液在回流下于85℃加熱1小時。冷卻后，通過蒸發(fā)除去揮發(fā)物。沉淀用乙醚研磨，過濾，用乙醚洗滌，然后真空干燥。將固體溶于二氯甲烷中，然后加入飽和碳酸氫鈉水溶液。分離有機層，用水、鹽水洗滌，干燥(MgSO4)并蒸發(fā)，得到4-氯-6-甲氧基-7-(1-甲基哌啶-4-基甲氧基)喹唑啉(2.9g，98％)。
MS(ESI)322[MH]+1H NMR譜(DMSOd6)1.3-1.5(m，2H)；1.75-1.9(m，3H)；2.0(t，1H)；2.25(s，3H)；2.85(d，2H)；4.02(s，3H)；4.12(d，2H)；7.41(s，1H)；7.46(s，1H)；8.9(s，1H)或者，所述6-甲氧基-7-(1-甲基哌啶-4-基甲氧基)-3，4-二氫喹唑啉-4-酮可以如下制備將氫化鈉(1.44g 60％礦物油懸浮液，36mmol)在20分鐘內(nèi)分批加入到7-芐氧基-6-甲氧基-3，4-二氫喹唑啉-4-酮(8.46g，30mmol)(例如按照WO 97/22596的實施例1中描述的方法制備)的DMF(70ml)溶液中，然后將混合物攪拌1.5小時。分批加入新戊酸氯甲酯(5.65g，37.5mmol)，然后將混合物在環(huán)境溫度下攪拌2小時。該混合物用乙酸乙酯(100ml)稀釋，傾入到冰/水(400ml)和2N鹽酸(4ml)中。分離有機層，水層用乙酸乙酯萃取，合并的萃取液用鹽水洗滌，干燥(MgSO4)并通過蒸發(fā)除去溶劑。將該殘余物在乙醚和石油醚的混合物中研磨，通過過濾收集固體并真空干燥，得到7-芐氧基-6-甲氧基-3-((新戊酰氧基)甲基)-3，4-二氫喹唑啉-4-酮(10g，84％)。
1H NMR譜(DMSOd6)1.11(s，9H)；3.89(s，3H)；5.3(s，2H)；5.9(s，2H)；7.27(s，1H)；7.35(m，1H)；7.47(t，2H)；7.49(d，2H)；7.51(s，1H)；8.34(s，1H)在大氣壓下，將7-芐氧基-6-甲氧基-3-((新戊酰氧基)甲基)-3，4-二氫喹唑啉-4-酮(7g，17.7mmol)和10％披鈀炭催化劑(700mg)在乙酸乙酯(250ml)、DMF(50ml)、甲醇(50ml)和乙酸(0.7ml)中的混合物在氫氣中攪拌40分鐘。通過過濾除去催化劑并通過蒸發(fā)除去濾液中的溶劑。殘余物用乙醚研磨，通過過濾收集并真空干燥，得到7-羥基-6-甲氧基-3-((新戊酰氧基)甲基)-3，4-二氫喹唑啉-4-酮(4.36g，80％)。
1H NMR譜(DMSOd6)1.1(s，9H)；3.89(s，3H)；5.89(s，2H)；7.0(s，1H)；7.48(s，1H)；8.5(s，1H)在氮氣下，將三苯基膦(1.7g，6.5mmol)加入到7-羥基-6-甲氧基-3-((新戊酰氧基)甲基)-3，4-二氫喹唑啉-4-酮(1.53g，5mmol)的二氯甲烷(20ml)的懸浮液中，再加入1-(叔丁氧羰基)-4-(羥甲基)哌啶(1.29g，6mmol)(按上述方法(a)對原料描述的方法來制備)，最后加入偶氮二羧酸二乙酯(1.13g，6.5mmol)的二氯甲烷(5ml)溶液。在環(huán)境溫度下攪拌30分鐘后，將反應(yīng)混合物傾入到硅膠柱上并用乙酸乙酯/石油醚(1/1，然后6/5、6/4和7/3)洗脫。將含有所需產(chǎn)物的流分蒸發(fā)，得到一種油狀物，該油狀物用戊烷研磨后結(jié)晶。通過過濾收集固體并真空干燥，得到7-(1-(叔丁氧羰基)哌啶-4-基甲氧基)-6-甲氧基-3-((新戊酰氧基)甲基)-3，4-二氫喹唑啉-4-酮(232g，92％)。
MS-ESI526[MNa]+1H NMR譜(CDCl3)1.20(s，9H)，1.2-1.35(m，2H)，1.43(s，9H)，1.87(d，2H)，2.05-2.2(m，1H)，2.75(t，2H)，3.96(d，2H)，3.97(s，3H)，4.1-4.25(br s，2H)，5.95(s，2H)，7.07(s，1H)，7.63(s，1H)，8.17(s，1H)元素分析 實測值C 61.8 H 7.5 N 8.3C26H37N3O7理論值C 62.0 H 7.4 N 8.3％將7-(1-(叔丁氧羰基)哌啶-4-基甲氧基)-6-甲氧基-3-((新戊酰氧基)甲基)-3，4-二氫喹唑啉-4-酮(2.32g，4.6mmol)的含有TFA(5ml)的二氯甲烷(23ml)溶液在環(huán)境溫度下攪拌1小時。真空除去揮發(fā)物，讓殘余物在乙酸乙酯和碳酸氫鈉之間分配。真空除去有機溶劑并將殘余物過濾。沉淀用水洗滌并真空干燥。該固體與甲苯一起共沸并真空干燥，得到6-甲氧基-7-(哌啶-4-基甲氧基)-3-((新戊酰氧基)甲基)-3，4-二氫喹唑啉-4-酮(1.7g，92％)。
MS-ESI404[MH]+1H NMR譜(DMSOd6；CF3COOD)1.15(s，9H)，1.45-1.6(m，2H)，1.95(d，2H)，2.1-2.25(m，1H)，2.95(t，2H)，3.35(d，2H)，3.95(s，3H)，4.1(d，2H)，5.95(s，2H)，7.23(s，1H)，7.54(s，1H)，8.45(s，1H)往6-甲氧基-7-(哌啶-4-基甲氧基)-3-((新戊酰氧基)甲基)-3，4-二氫喹唑啉-4-酮(1.21g，3mmol)在THF/甲醇(10ml/10ml)混合物中的溶液中分批加入37％甲醛水溶液(501μl，6mmol)，然后加入氰基硼氫化鈉(228mg，3.6mmol)。在環(huán)境溫度下攪拌30分鐘后，真空除去有機溶劑，讓殘余物在二氯甲烷和水之間分配。分離有機層，用水和鹽水洗滌、干燥(MgSO4)并通過蒸發(fā)除去揮發(fā)物。殘余物用乙醚研磨，通過過濾收集所得固體，用乙醚洗滌并真空干燥，得到6-甲氧基-7-(1-甲基哌啶-4-基甲氧基)-3-((新戊酰氧基)甲基)-3，4-二氫喹唑啉-4-酮(1.02g，82％)。
MS-ESI418[MH]+1H NMR譜(CDCl3)1.19(s，9H)，1.4-1.55(m，2H)，1.9(d，2H)，2.0(t，2H)，1.85-2.1(m，1H)，2.3(s，3H)，2.92(d，2H)，3.96(s，3H)，3.99(d，2H)，5.94(s，2H)，7.08(s，1H)，7.63(s，1H)，8.17(s，1H)將在甲醇中飽和的氨水溶液(14ml)加入到6-甲氧基-7-(1-甲基哌啶-4-基甲氧基)-3-((新戊酰氧基)甲基)-3，4-二氫喹唑啉-4-酮(1.38g，3.3mmol)的甲醇(5ml)溶液中。在環(huán)境溫度下攪拌20小時后，用二氯甲烷(10ml)稀釋懸浮液。過濾溶液。真空蒸發(fā)濾液，殘余物用乙醚研磨，通過過濾收集，用乙醚洗滌并真空干燥，得到6-甲氧基-7-(1-甲基哌啶-4-基甲氧基)-3，4-二氫喹唑啉-4-酮(910mg，83％)。
MS-ESI304[MH]+1H NMR譜(DMSOd6)1.3-1.45(m，2H)，1.75(d，2H)，1.7-1.85(m，1H)，1.9(t，2H)，2.2(s，3H)，2.8(d，2H)，3.9(s，3H)，4.0(d，2H)，7.13(s，1H)，7.45(s，1H)，7.99(s，1H)例如，以下試驗可用來證明ZD6474在與紫杉烷聯(lián)合使用時的活性。
(a)GEO人結(jié)腸癌異種移植模型腹腔內(nèi)給予ZD6474在第0天，給4-6周齡雌性BALB/c無胸腺(nu+/nu+)小鼠皮下注射(s.c.)GEO人結(jié)腸癌細(xì)胞(107細(xì)胞，重懸于200μl基質(zhì)膠中)。在皮下移植GEO細(xì)胞后第7天，當(dāng)平均腫瘤體積為0.25(±0.05)cm3時，開始治療。每組10只小鼠在第7、14、21和28天腹膜內(nèi)(i.p)給予紫杉醇(400μg/小鼠)，或者在7-11、14-18、21-25和28-32天給予ZD6474(100mg/kg/天i.p.，懸浮于1％(v/v)的聚氧乙烯(20)山梨聚糖單油酸酯的去離子水溶液中)，或者給予兩種藥物的組合。就聯(lián)合療法而論，如果小鼠在同一天接受這兩種藥物，則先給予紫杉醇，10-15分鐘后，再給予ZD6474。運用公式π/6×較大直徑×(較小直徑)2，計算腫瘤大小。
表1ZD6474單用或與紫杉醇聯(lián)用時對GEO人結(jié)腸癌異種移植物的抗腫瘤活性
*第110天處死時，該組10只小鼠中有2只沒有GEO腫瘤的組織學(xué)證據(jù)。在計算生長延遲時間時，不包括這兩只小鼠的數(shù)據(jù)。
對照小鼠注射腫瘤細(xì)胞后第28天的平均腫瘤體積為1.95(±0.15)cm3，約占裸鼠體重的10％，此時處死該組小鼠。當(dāng)其腫瘤達到相當(dāng)大小時，處死每個治療組的小鼠。
運用Mantel-Cox logrank檢驗，對腫瘤體積達到2cm3的時間進行統(tǒng)計學(xué)評價，結(jié)果如下ZD6474(100mg/kg)相對于對照(p＝0.001)；紫杉醇+ZD6474(100mg/kg)相對于對照(p＝0.0001)；紫杉醇+ZD6474(100mg/kg)相對于紫杉醇(p＝0.001)；紫杉醇+ZD6474(100mg/kg)相對于ZD6474(100mg/kg)(p＝0.01)。
結(jié)果表明，ZD6474和紫杉醇聯(lián)用，比ZD6474或紫杉醇單用產(chǎn)生的抗腫瘤效應(yīng)顯著增大。
(b)SW620人結(jié)腸癌異種移植模型口服ZD6474給至少8周齡小鼠進行腫瘤植入程序。讓人類腫瘤異種移植物在雌性Alderley Park無胸腺(nu/nu基因型，Swiss)小鼠體內(nèi)生長，所述小鼠在負(fù)壓隔離器(PFI Systems Ltd.，Oxon，UK)中關(guān)養(yǎng)。
將SW620細(xì)胞植入無胸腺小鼠(1×106細(xì)胞/小鼠，懸浮于含50％基質(zhì)膠的無血清培養(yǎng)基中；s.c左脅)體內(nèi)，讓其生長例如5天，在該點進行隨機抽樣(10或12個動物/組)。使用紫杉醇(例如5mg/ml；i.p.每天2次，共3天)或溶媒(3％聚氧乙烯蓖麻油3％甲醇94％PBS/A；i.p.每天2次，共3天)對動物進行治療。然后以0.1ml/10g體重(p.o)的劑量、每天一次給予動物懸浮于1％(v/v)的聚氧乙烯(20)山梨聚糖單油酸酯的去離子水溶液的ZD6474(口服(p.o.))或相應(yīng)的溶媒。在不同治療組中使用不同劑量的ZD6474，例如25mg/kg或50mg/kg。
可以在給予紫杉醇之前、之后或同時給予ZD6474；給藥方案可以是不同的。
采用雙邊游標(biāo)卡尺測量法，測量跨越腫瘤的最大直徑為長度，與之垂直的直徑為寬度，運用公式(π/6)×(長×寬)×v(長×寬)進行計算，每周至少兩次評價腫瘤體積。通過比較對照組和治療組間腫瘤體積的差異，評價從治療開始以來的生長抑制。
運用單側(cè)雙樣t檢驗評價統(tǒng)計學(xué)顯著性。
其中聯(lián)合給予25mg/kg ZD6474的研究數(shù)據(jù)示于

圖1中。在第17天和第20天，聯(lián)合給藥組的平均腫瘤體積顯著小于接受單獨的ZD6474的組的平均腫瘤體積(分別是p＝0.008和p＝0.032)。
權(quán)利要求
1.一種在溫血動物例如人體內(nèi)產(chǎn)生抗血管生成和/或血管通透性降低效應(yīng)的方法，所述方法包括在給予所述動物有效量的紫杉烷之前、之后或同時給予有效量的ZD6474或其藥學(xué)上可接受的鹽。
2.一種治療溫血動物例如人的癌癥的方法，所述方法包括在給予所述動物有效量的紫杉烷之前、之后或同時給予有效量的ZD6474或其藥學(xué)上可接受的鹽。
3.一種權(quán)利要求2的方法，所述方法用于治療包括實體瘤在內(nèi)的癌癥。
4.一種藥用組合物，所述組合物包含ZD6474或其藥學(xué)上可接受的鹽、和紫杉烷、以及藥學(xué)上可接受的賦形劑或載體。
5.一種藥盒，所述藥盒包含ZD6474或其藥學(xué)上可接受的鹽以及紫杉烷。
6.ZD6474或其藥學(xué)上可接受的鹽和紫杉烷在制備用于在溫血動物例如人體內(nèi)產(chǎn)生抗血管生成和/或血管通透性降低效應(yīng)的藥物中的用途。
7.ZD6474或其藥學(xué)上可接受的鹽和紫杉烷在制備用于在溫血動物例如人體內(nèi)產(chǎn)生抗癌效應(yīng)的藥物中的用途。
8.權(quán)利要求7的用途，其中所述抗癌效應(yīng)包括抗腫瘤效應(yīng)。
9.一種在溫血動物例如人體內(nèi)產(chǎn)生抗血管生成和/或血管通透性降低效應(yīng)的方法，所述方法包括在給予所述動物有效量的紫杉烷之前、之后或同時，并且在給予有效量的電離輻射之前、之后或同時給予有效量的ZD6474或其藥學(xué)上可接受的鹽。
10.一種治療溫血動物例如人的癌癥的方法，所述方法包括在給予所述動物有效量的紫杉烷之前、之后或同時，并且在給予有效量的電離輻射之前、之后或同時給予有效量的ZD6474或其藥學(xué)上可接受的鹽。
11.一種權(quán)利要求10的方法，所述方法用于治療包括實體瘤在內(nèi)的癌癥。
12.ZD6474或其藥學(xué)上可接受的鹽和紫杉烷在制備用于在正在進行電離輻射治療的溫血動物例如人體內(nèi)產(chǎn)生抗血管生成和/或血管通透性降低效應(yīng)的藥物中的用途。
13.ZD6474或其藥學(xué)上可接受的鹽和紫杉烷在制備用于在正在進行電離輻射治療的溫血動物例如人體內(nèi)產(chǎn)生抗癌效應(yīng)的藥物中的用途。
14.權(quán)利要求13的用途，其中所述抗癌效應(yīng)包括抗腫瘤效應(yīng)。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種在溫血動物例如人體內(nèi)產(chǎn)生抗血管生成和/或血管通透性降低效應(yīng)的方法，特別是癌癥(包括實體瘤)的治療方法，所述方法包括聯(lián)合給予ZD6474和紫杉烷；一種包含ZD6474和紫杉烷的藥用組合物；一種包含ZD6474和紫杉烷、用于人或動物體的治療方法的組合產(chǎn)品；一種包含ZD6474和紫杉烷的藥盒；ZD6474和紫杉烷在制備用于在溫血動物例如人體內(nèi)產(chǎn)生抗血管生成和/或血管通透性降低效應(yīng)的藥物中的用途，其中所述溫血動物任選采用電離輻射進行治療。
文檔編號A61P9/00GK1612738SQ02826795
公開日2005年5月4日 申請日期2002年11月6日 優(yōu)先權(quán)日2001年11月8日
發(fā)明者S·R·韋奇 申請人:阿斯特拉曾尼卡有限公司