專利名稱：碳環(huán)核苷半硫酸鹽和它在治療病毒性感染中的應用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及(1S，4R)-順式-4-[2-氨基-6-(環(huán)丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-環(huán)戊烯-1-甲醇的新的鹽或者它的溶劑化物、含有這樣化合物的藥用制劑和它們在醫(yī)學上特別是在治療人免疫缺陷病毒(HIV)和乙型肝炎病毒(HBV)感染的用途。
在歐洲專利說明書第0434450號中描述了(1S，4R)-順式-4-[2-氨基-6-(環(huán)丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-環(huán)戊烯-1-甲醇(“該化合物”)和它的抗病毒尤其是抵抗HIV感染的用途，該專利也涉及該化合物的藥學上可接受的衍生物，尤其是鹽、酯和這樣的酯的鹽，并且特別描述了該化合物的鹽酸鹽。此外PCT專利申請?zhí)朠CT GB95/02014描述了以上化合物的琥珀酸鹽。
化合物(1S，4R)-順式-4-[2-氨基-6-(環(huán)丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-環(huán)戊烯-1-甲醇目前作為一種抗HIV藥物正處于臨床研究中。對于該化合物存在著在大規(guī)模生產(chǎn)中以易于分離的適合形式制備和對于給予人體易于配制成為可接受產(chǎn)品的需要。我們已經(jīng)發(fā)現(xiàn)該化合物游離堿的制備產(chǎn)生了其捕集溶劑的非晶形固體，因此在沒有另外的純化方法情況下就不適宜于大規(guī)模純化或者制劑。
而在PCT專利申請?zhí)朠CT/GB95/02014中所描述的琥珀酸鹽則在它的制備中具有有利條件，例如它從該酸和堿的化學計量比率的角度來說容易成鹽并且很容易從溶液中結(jié)晶出來，對于藥用制劑特別是制備片劑來說它并不是一個理想的對象。尤其是該化合物的琥珀酸鹽團聚并形成了“多塊的”團，其不易于傾倒并且因此不適宜于在商業(yè)壓片機械中使用，以至于需要高能量研磨的額外加工步驟以得到均勻的顆粒體積。伴隨該化合物琥珀酸鹽制劑的另外的復雜性是它能以幾種晶形存在，每一種晶形具有稍微不同的物理性質(zhì)。該化合物的琥珀酸鹽的制備需要密切關(guān)注以避免制備出不希望得到的晶形，如果一旦形成不希望得到的晶形，就要返工使之變成所要求的晶形。
我們已經(jīng)發(fā)現(xiàn)優(yōu)于所公開的鹽酸鹽和琥珀酸鹽的該化合物的半硫酸鹽，其使得半硫酸鹽特別適合于和有利于大規(guī)模的制備，尤其是在用于制備藥用制劑時。特別地該半硫酸鹽形成了自由流動的粉末，該粉末缺乏任何不適當?shù)膱F聚的傾向，并且該粉末易于傾倒和成形，因此對于在商業(yè)壓片機中使用是理想的，且不需要研磨。該鹽被確信作為單形態(tài)形式和晶形存在。該鹽不易于水合或溶劑化(如在貯存中)。該鹽易于過濾和干燥，因而有助于制備。另一個有利條件是該半硫酸鹽與該琥珀酸鹽相比具有較高的水溶性，這使得該半硫酸鹽特別適宜于制備液體制劑。
我們已經(jīng)發(fā)現(xiàn)該半硫酸鹽通過鹽交換方法進行制備，就是說通過轉(zhuǎn)化(1S，4R)-順式-4-[2-氨基-6-(環(huán)丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-環(huán)戊烯-1-甲醇的前體鹽特別是戊二酸鹽或琥珀酸鹽，在光學純度方面超過該前體鹽的富集是可達到的。因此，可以減少或省略任何另外的以增強該半硫酸鹽產(chǎn)物的光學純度的制備或純化方法。
本發(fā)明的第一個方面，提供了(1S，4R)-順式-4-[2-氨基-6-(環(huán)丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-環(huán)戊烯-1-甲醇的半硫酸鹽或它的溶劑化物包括其水合物，下文稱之為本發(fā)明化合物。
為避免疑問，如在這里所使用的，(1S，4R)-順式-4-[2-氨基-6-(環(huán)丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-環(huán)戊烯-1-甲醇的半硫酸鹽意指在(1S，4R)-順式-4-[2-氨基-6-(環(huán)丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-環(huán)戊烯-1-甲醇與硫酸之間以化學計量比2∶1形成的鹽。
本發(fā)明另一方面包括a)本發(fā)明化合物在醫(yī)學，特別是在治療病毒性感染尤其是HIV或HBV感染中的用途。
b)治療病毒性感染特別是人HIV或HBV感染的方法，該方法包括給予病人有效量的本發(fā)明化合物。
c)本發(fā)明化合物在治療病毒性感染特別是HIV或HBV感染的藥物制備中的用途。
本發(fā)明化合物特別用于治療HIV感染。
本領(lǐng)域技術(shù)人員將意識到在此涉及的治療擴展到預防以及已經(jīng)確立的感染或癥狀的治療。
由HIV感染引起的其可依據(jù)本發(fā)明進行治療的臨床疾病的實例包括獲得性免疫缺陷綜合征(AIDS)或經(jīng)常在AIDS之前發(fā)生的癥狀、或者相關(guān)的臨床疾病如AIDS相關(guān)綜合征(ARC)、進行性全身性淋巴結(jié)病(PGL)、卡波濟氏肉瘤、血小板減少性紫癜、AIDS相關(guān)的神經(jīng)性疾病如多發(fā)性硬化癥或局部下身輕癱，并且也包括AIDS無癥狀患者的抗-HIV抗體陽性和HIV-陽性的情況。
本發(fā)明化合物可單獨給藥或與其它的適合于治療HIV感染的藥物如核苷逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑(NRTIs)例如齊多夫定、扎西他濱、拉米夫定、地達諾新、stavudine、5-氯-2′，3′-二脫氧-3′-氟尿苷、adefovir和(2R，5S)-5-氟-1-[2-(羥基甲基)-1，3-oxathiolan-5-基]胞嘧啶、lovaride，非-NRTIs如nevirapine、delavuridine、α-APA、HBY-1293和efavirenzHIV蛋白酶抑制劑如噻喹努佛(saquinavir)、indinavir、nelfinavir、ritonavir和VX-478，其它的抗HIV藥物如可溶的CD4、免疫調(diào)節(jié)劑如白細胞介素II、erythyropoetin、tucaresol和干擾素如α-干擾素聯(lián)合給藥。另外本發(fā)明化合物可與適合于治療HBV感染的其它治療藥物如拉米夫定、(2R，5S)-5-氟-1-[2-(羥基甲基)-1，3-oxathiolan-5-基]胞嘧啶、免疫調(diào)節(jié)劑和如上所描述的干擾素聯(lián)合給藥。這樣的聯(lián)合可一起或依次給藥，條件是在給予每一個治療藥物之間的任何持續(xù)時間不會削弱它們的加和作用。
盡管本發(fā)明化合物能夠作為原料給藥，但是以藥用制劑形式提供本發(fā)明化合物是優(yōu)選的和有利的，并且代表了本發(fā)明的又一個特征。該藥用制劑包括本發(fā)明化合物及其一種或多種可接受的載體和任選的其它治療藥物。這些載體在與該制劑的其它成分相容的并且對于它的接受者是無害的意義上來說必須是“可接受的”。
本發(fā)明化合物可通過適宜于所要治療疾病的任何途徑給藥，適宜的途徑包括口服、直腸、鼻、局部(包括經(jīng)皮、頰和舌下)、陰道和非腸道(包括皮下、肌內(nèi)、靜脈、皮內(nèi)、鞘內(nèi)和硬膜外)。應該理解該優(yōu)選的途徑可隨著例如接受者的病情而改變。
對于以上表明的每一種用途和適應癥來說，各個活性成分所需要的量將依多種因素包括所要治療的疾病的嚴重程度和接受者的特性而定并將最后取決于主治醫(yī)師的判斷。然而，一般地對于每一種的這些用途和適應癥而言，適宜的有效劑量為接受者每天每公斤體重1至120mg的范圍內(nèi)，優(yōu)選地為每天每公斤體重3至90mg的范圍內(nèi)并且最優(yōu)選地為每天每公斤體重5至60mg的范圍內(nèi)，如每天每公斤體重5至20mg。如果要求的話該劑量全天可作為二、三、四或更多的亞劑量以適宜的間隔來提供。
該制劑包括那些適合于口服、直腸、鼻、局部(包括頰和舌下)、陰道或非腸道(包括皮下、肌內(nèi)、靜脈、皮內(nèi)、鞘內(nèi)和硬膜外)的給藥。該制劑可便利地以單位劑型提供并且可通過藥學領(lǐng)域熟知的任何一種方法進行制備。這樣的方法包括使活性組分與構(gòu)成一種或多種輔助成分的載體混合。一般地該制劑通過使活性成分與液體載體或細分的固體載體均勻地和緊密地混合或者與該兩種載體混合來制備，然后如果必要的話使產(chǎn)物成型。
適合于口服給藥的本發(fā)明制劑可以分散的單位如每一種含有預先確定了活性成分量的膠囊劑、扁膠囊劑或片劑形式提供；作為粉劑或顆粒劑提供；作為溶液劑或在水溶性液體或非水溶性液體中的混懸劑提供；或作為水包油液體乳劑或油包水液體乳劑提供；該活性成分也可作為大丸制劑或膏劑提供或可包含在脂質(zhì)體內(nèi)。
片劑可與任選的一種或多種輔助成分通過壓制或者模壓來制備。壓制片劑可通過在適宜的機械中任選地與粘合劑(例如聚乙烯吡咯烷酮、明膠、羥丙基甲基纖維素)、潤滑劑、惰性稀釋劑、崩解劑(例如羥基乙酸淀粉鈉、交聯(lián)聚乙烯吡咯酮、交聯(lián)羧甲基纖維素)、表面活性劑或分散劑混合的以自由流動形式如粉末或顆粒存在的活性成分壓制來制備。模壓片劑可通過在適宜的機械中模壓以惰性液體稀釋劑濕潤的粉末狀化合物的混合物來制備。該片劑可任選地被包衣或刻痕并且可被配制以通過其中采用例如變化比例的羥丙基甲基纖維素以提供所要求的釋放分布來提供活性成分的緩慢或控制釋放。
膠囊劑可通過任選與一種或多種添加劑共同填充松散的或壓制的粉末或通過適合的填充機械來制備。對于片劑的適宜的添加劑實例包括粘合劑如聚乙烯吡咯烷酮、明膠、潤滑劑、惰性稀釋劑、崩解劑。膠囊劑也可配制為含有小丸或分散的亞單位以提供概述成分的緩釋或控制釋放。這能通過壓制和球磨該藥物加上壓制成型酸(例如微晶纖維素)加上稀釋劑如乳糖的濕的混合物來得到。因此所產(chǎn)生的球狀體能夠用半滲透膜(例如乙基纖維素、Eudragit WE30D)包衣以產(chǎn)生持續(xù)釋放的性質(zhì)。
對于眼部或其它外部組織如口腔和皮膚的感染而言，該制劑優(yōu)選地作為局部軟膏劑或霜劑應用，它們含有一定量如0.075至20％w/w，優(yōu)選為0.2至15％w/w和最優(yōu)選為0.5至10％w/w的活性成分。當配制軟膏劑時，該活性成分可與石蠟或與水混溶的膏劑基質(zhì)一起使用?；蛘?，該活性成分可用水包油霜劑基質(zhì)或油包水基質(zhì)配制成霜劑。
如果要求的話，該霜劑基質(zhì)的水相可包括例如至少40-45％w/w的多元醇，即具有二個或多個羥基基團的醇如丙二醇、丁烷-1，3-二醇、甘露糖醇、山梨醇、甘油和聚乙二醇和它們的混合物。該局部制劑可合乎需要地包括可增強活性成分穿透皮膚或其它受感染的區(qū)域的吸收或滲透性的化合物。這樣的皮膚滲透增強劑的實例包括二甲基亞砜和相關(guān)的類似物。
本發(fā)明乳劑的油相可從已知成分由已經(jīng)知道的方式來構(gòu)成。當該相僅包括乳化劑(另外稱作利泄藥(emulgent))時，其合乎需要地包括至少一種乳化劑與脂肪或油或者與脂肪和油兩者的的混合物。優(yōu)選地，親水性乳化劑與作為穩(wěn)定劑的親脂性乳化劑包括在一起。它也優(yōu)選地包括脂肪和油兩者。乳化劑與(或無)穩(wěn)定劑一起構(gòu)成所謂的乳化蠟，并且該蠟與油和/或脂肪構(gòu)成所謂的乳化軟膏劑基質(zhì)，該基質(zhì)形成該霜劑制劑的油分散相。
適用于本發(fā)明制劑的泄出劑和乳化穩(wěn)定劑包括吐溫60、司盤80、cetostearyl醇、肉豆蔻醇、單硬脂酸甘油脂和十二烷基硫酸鈉。
根據(jù)第一個方法A，本發(fā)明化合物可通過優(yōu)選地在溶液中，更優(yōu)選地在水溶性有機溶劑中，優(yōu)選地在升高的溫度下，更優(yōu)選地在所選擇的溶劑系統(tǒng)的回流溫度下使硫酸與(1S，4R)-順式-4-[2-氨基-6-(環(huán)丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-環(huán)戊烯-1-甲醇以大約1∶2的化學計量比的混合來制備。在冷卻下本發(fā)明化合物形成結(jié)晶。優(yōu)選地結(jié)晶作用通過以小量的本發(fā)明化合物在溶液中“放入晶種”來實現(xiàn)。任選的洗滌和重結(jié)晶可用來改善該產(chǎn)物的純度。
依據(jù)另一個方法B，本發(fā)明化合物可通過在溶液中使(1S，4R)-順式-4-[2-氨基-6-(環(huán)丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-環(huán)戊烯-1-甲醇單硫酸鹽(1∶1的鹽)與(1S，4R)-順式-4-[2-氨基-6-(環(huán)丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-環(huán)戊烯-1-甲醇以基本上1∶1的摩爾比例的混合來形成。
制備本發(fā)明化合物一個特別有利的方法(C)包括將(1S，4R)-順式-4-[2-氨基-6-(環(huán)丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-環(huán)戊烯-1-甲醇的鹽轉(zhuǎn)化為本發(fā)明化合物。對于該轉(zhuǎn)化適宜的鹽包括二羧酸鹽如琥珀酸鹽、戊二酸鹽、半辛二酸鹽(即由堿∶辛二酸為2∶1形成的鹽)、己二酸鹽、富馬酸鹽、半癸二酸鹽(即由堿∶癸二酸為2∶1形成的鹽)和庚二酸鹽?？墒褂枚人猁}的混合物。優(yōu)選使用該琥珀酸鹽和戊二酸鹽。在PCT專利申請第PCT/GB95/02014號中描述了該琥珀酸鹽的制備。用于轉(zhuǎn)化為該半硫酸鹽的(1S，4R)-順式-4-[2-氨基-6-(環(huán)丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-環(huán)戊烯-1-甲醇的其它的鹽包括苯甲酸鹽和水楊酸鹽和它們的混合物。這樣的鹽代表了本發(fā)明的另一個特征。
在本發(fā)明一個優(yōu)選的方面中，該轉(zhuǎn)化可通過以適合的化學計量比使硫酸和(1S，4R)-順式-4-[2-氨基-6-(環(huán)丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-環(huán)戊烯-1-甲醇的除了半硫酸鹽以外的鹽混合來實現(xiàn)。為避免疑問，如果該鹽是1∶1的鹽(即(1S，4R)-順式-4-[2-氨基-6-(環(huán)丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-環(huán)戊烯-1-甲醇對酸的比率為1∶1)，該適合的化學計量比(即(1S，4R)-順式-4-[2-氨基-6-(環(huán)丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-環(huán)戊烯-1-甲醇的鹽∶硫酸)則為2∶1，并且如果該鹽是2∶1的鹽(即(1S，4R)-順式-4-[2-氨基-6-(環(huán)丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-環(huán)戊烯-1-甲醇對酸的比率為2∶1)該適合的化學計量比則為1∶1。該混合優(yōu)選在溶液中進行，更優(yōu)選在水溶性有機溶劑中進行，優(yōu)選在升高的溫度下進行，更優(yōu)選在所選擇的溶劑系統(tǒng)的回流溫度下進行。在冷卻該反應混合物下任選地如先前所描述的用放入晶種的方法形成該半硫酸鹽結(jié)晶。就此所得到的化合物的純度而論這種鹽互變的方法提供了有利條件。
使以上述及的鹽轉(zhuǎn)化為該半硫酸鹽的方法的一個特別有利的特征為該轉(zhuǎn)化結(jié)果導致光學純度提高，即在因此所產(chǎn)生的本發(fā)明化合物中與起始的鹽中相比具有更少量的不想要的(1R，4S)異構(gòu)體。
用于本發(fā)明方法的適合的溶劑包括醇如乙醇或丙-2-醇。這樣的溶劑可單獨使用或混合使用，任選在另一種有機溶劑如丙酮或在水的存在下而形成水溶性有機溶劑混合物來使用。
按照歐洲專利說明書第0434450號或PCT專利申請第PCT/GB/9500225號能夠合成化合物(1S，4R)-順式-4-[2-氨基-6-(環(huán)丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-環(huán)戊烯-1-甲醇，所述專利通過引用結(jié)合到本文中。
按照PCT專利申請第PCT/GB95/02014號能夠合成化合物(1S，4R)-順式-4-[2-氨基-6-(環(huán)丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-環(huán)戊烯-1-甲醇的琥珀酸鹽，所述專利通過引用結(jié)合到本文中。
本發(fā)明在以下實施例中進一步描述，這些實施例為本方明的舉例說明形式并不局限于此。
如在下列實施例中所使用的，IMS意指工業(yè)甲基化酒精(變性乙醇)和IPA意指丙-2-醇。
中間體1(1S，4R)-順式-4-[2-氨基-6-(環(huán)丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-環(huán)戊烯-1-甲醇的制備在工業(yè)甲基化酒精(800ml)中將(1S，4R)-順式-4-[2-氨基-6-氯-9H-嘌呤-9-基]-2-環(huán)戊烯-1-甲醇鹽酸鹽(EP0434450(80g))與環(huán)丙基胺(110ml)一起在回流下加熱約5h。把該混合物冷卻至70至75℃并將氫氧化鈉水溶液(10M，55ml，2摩爾當量)滴加入內(nèi)。生成的懸浮液冷卻至20至25℃并過濾，所收集的固體用IMS洗滌(2×60ml)。合并的濾液和洗滌液以炭(8g)和助濾劑Harborlite J2(4g)處理，然后加熱至40至50℃。大約0.5h后，把該混合物冷卻至15至20℃，通過過濾除去固體，以IMS(2×160ml和1×80ml)洗滌，并且合并的濾液和洗滌液通過減壓蒸餾濃縮至殘余的體積為大約240ml。加入IMS(240ml)并將該混合物減壓濃縮至殘余的體積為大約240ml。該稀釋和再濃縮重復進行，該生成的濃縮物以IMS(240ml)稀釋并加熱得到分為四個等份的完全的溶液。
將一份在減壓下通過蒸餾濃縮至殘余體積為大約60ml。加入丙酮(140ml)并且該混合物再次濃縮至大約60ml。這個稀釋和再濃縮重復兩次得到大約80ml的流體體積。生成的懸浮液冷至0到5℃并且過濾該產(chǎn)物，以冷的(0到5℃)丙酮洗滌(2×40ml)并真空干燥，得到橙色固體的標題化合物(16.8g，90％)；1H-NMR(D2O)δ7.71(s，1，嘌呤CH)，6.22(m，1，＝CH)，5.93(m，1，＝CH)，5.37(m，1，NCH)，3.61(m，2，OCH2)，3.04(br m，1，環(huán)丙基CH)，2.82(br m，1 CH)，2.80-2.70(m，1，CH)，1.58-1.50(m，1，CH)，0.90-0.60(m，4，環(huán)丙基2×CH2)。
實施例A(1S，4R)-順式-4-[2-氨基-6-(環(huán)丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-環(huán)戊烯-1-甲醇半硫酸鹽的制備把攪拌中的水(25ml)和IPA(100ml)混合物加熱至45到55℃并加入(1S，4R)-順式-4-[2-氨基-6-(環(huán)丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-環(huán)戊烯-1-甲醇琥珀酸鹽(WO 96/06844(50g))，且以IPA(12.5ml)沖洗。該混合物回流下加熱約0.5h得到澄清的溶液，然后冷卻至65到75℃把在水(12.5ml)中的濃硫酸(6.07g)溶液加入其中。加入IPA(37.5ml)和水(12.5ml)的混合物，然后該溶液冷卻至45到55℃，隨后加入可靠的(1S，4R)-順式-4-[2-氨基-6-(環(huán)丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-環(huán)戊烯-1-甲醇半硫酸鹽的晶種。在該溫度范圍內(nèi)攪拌大約1h后使結(jié)晶形成，加入另一份IPA(300ml)，維持該混合物的溫度在45到55℃范圍內(nèi)。把該懸浮液冷至0到5℃大約2h，過濾該產(chǎn)物，以IPA(2×75ml)洗滌并在40到55℃真空干燥，得到淺黃褐色粉末的標題化合物(34.3g，90％)；m.p.224-225℃(分解)；1H-NMR(DMSO-d6)δ10.76(br m，1，嘌呤NH)，8.53(vbr m，1，NH)，7.80(s，1，嘌呤CH)，6.67(br m，1，NH2)，6.13(m，1，＝CH)，5.87(m，1，＝CH)，5.40(m，1，NCH)，3.45(d，J＝5.8Hz，2，OCH2)，2.96(br m，1，環(huán)丙基的CH)，2.87(m，1，CH)，2.67-2.57(m，1，CH)，1.65-1.55(m，1，CH)，0.84-0.64(m，4，環(huán)丙基的2×CH2)。
實施例B(1S，4R)-順式-4-[2-氨基-6-(環(huán)丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-環(huán)戊烯-1-甲醇半硫酸鹽的制備把攪拌下的在工業(yè)甲基化酒精(IMS)(7000ml)中的(1S，4R)-順式-4-[2-氨基-6-(環(huán)丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-環(huán)戊烯-1-甲醇的琥珀酸鹽(WO 96/06844(1000g))的懸浮液回流下加熱約0.5h得到澄清的溶液。該溶液冷卻至大約70℃，然后向其中加入在IMS(1000ml)中的濃硫酸(121g)溶液。在用可靠的(1S，4R)-順式-4-[2-氨基-6-(環(huán)丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-環(huán)戊烯-1-甲醇半硫酸鹽放入晶種之后，該混合物在大約70℃下攪拌使該產(chǎn)物結(jié)晶。大約0.5h后，該混合物冷至20到30℃大約2h。過濾該混合物，濾餅以IMS(2×2000ml)洗滌并在40到55℃下真空干燥，得到淺黃褐色粉末的標題化合物(764g，92％)，波譜與實施例A的產(chǎn)物相一致。
實施例C(1S，4R)-順式-4-[2-氨基-6-(環(huán)丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-環(huán)戊烯-1-甲醇半硫酸鹽的制備把在工業(yè)甲基化酒精(IMS)(30ml)和水(5ml)中的(1S，4R)-順式-4-[2-氨基-6-(環(huán)丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-環(huán)戊烯-1-甲醇琥珀酸鹽(10g)的懸浮液回流下加熱約0.5h得到澄清溶液。該溶液冷卻至55至65℃并向其中加入在水(2.5ml)中的濃硫酸(1.21g)溶液，隨后加入IMS(7.5ml)和水(2.5ml)的混合物。該溶液進一步冷卻到45至55℃并在這個溫度范圍內(nèi)用超過0.25h時間向該混合物中加入丙酮(80ml)。該生成的懸浮液冷卻到0至5℃大約1h。過濾該產(chǎn)物，以丙酮(2×10ml)洗滌。并在40到45℃下真空干燥，得到淺黃褐色粉末的標題化合物(6.28g，82％)，其波譜與實施例A的產(chǎn)物相一致。
實施例D(1S，4R)-順式-4-[2-氨基-6-(環(huán)丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-環(huán)戊烯-1-甲醇半硫酸鹽的制備把(1S，4R)-順式-4-[2-氨基-6-(環(huán)丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-環(huán)戊烯-1-甲醇(中間體1)(5.98g)懸浮于IMS(40ml)中，并且該懸浮液回流下加熱約0.5h。該混合物冷卻到70至75℃，然后向其內(nèi)滴加入在IMS中的濃硫酸(10M，1.03ml，0.5摩爾當量)溶液和IMS(10ml)的混合物。該酸以另一份IMS(10ml)沖洗并將生成的懸浮液冷到0至5℃。通過過濾分離該產(chǎn)物，以IMS(2×12ml)洗滌并在40到45℃下真空干燥，得到淺黃色固體的標題化合物(6.15g，88％)，波譜與實施例A的產(chǎn)物相一致。
實施例E(1S，4R)-順式-4-[2-氨基-6-(環(huán)丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-環(huán)戊烯-1-甲醇半硫酸鹽的制備把另一份中間體1的IMS溶液加熱到75至80℃以確保完全溶解。將該混合物冷卻到70至75℃然后向其內(nèi)滴加入在IMS(30ml)中的濃硫酸(3.90g)溶液，得到橙色懸浮液。該混合物冷卻至0到5℃下約2h，過濾，以IMS(2×40ml)洗滌并在40到45℃下真空干燥，得到黃色/橙色固體的標題化合物(17.7g，76％)，波譜與實施例A的產(chǎn)物相一致。
把該產(chǎn)物5.0g懸浮于異丙醇(IPA)(40ml)和水(10ml)的混合物中并且在回流下加熱約0.5h，然后使之冷卻到55至60℃，隨后加入可靠的(1S，4R)-順式-4-[2-氨基-6-(環(huán)丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-環(huán)戊烯-1-甲醇半硫酸鹽的晶種。該懸浮液進一步冷卻到0至5℃并將該溫度保持約1h。過濾該固體，以IPA(2×5ml)洗滌并在40到45℃下真空干燥，得到淺褐黃色粉末的標題化合物(4.4g，88％)，波譜與實施例A的產(chǎn)物相一致。
實施例F(1S，4R)-順式-4-[2-氨基-6-(環(huán)丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-環(huán)戊烯-1-甲醇苯甲酸鹽在IMS(700ml)中使(1S，4R)-順式-4-[2-氨基-6-氯-9H-嘌呤-9-基]-2-環(huán)戊烯-1-甲醇鹽酸鹽(EP0434450)(70g)與環(huán)丙胺(94.5ml)回流下加熱約4h。該溶液冷卻到45至50℃并以助濾劑Harborlite J2(3.5g)和活性炭(7g)處理。大約0.5h后，把該混合物冷卻至20至25℃并過濾。固體以IMS(2×140ml)洗滌并將合并的濾液和洗滌液通過減壓下蒸餾濃縮至體積為大約210ml。在用IMS(490ml)稀釋后，該溶液再次濃縮至大約210ml。此稀釋和再濃縮重復一次，并將最終濃縮物分成七個等份。
把一份以IMS(80ml)稀釋并且溫熱至得到完全的溶液。苯甲酸(4.85g)作為單獨一份加入，該混合物在70至75℃下加熱得到完全的溶液，然后使之緩慢冷卻。在40至45℃下以可靠的(1S，4R)-順式-4-[2-氨基-6-(環(huán)丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-環(huán)戊烯-1-甲醇苯甲酸鹽放入晶種，并將該混合物進一步冷卻到0至5℃。過濾該固體，以IMS(2×20ml)洗滌并在40到45℃下真空干燥，得到白色固體的標題化合物(8.7g，64％)，mpt156-157℃；1H-NMR(DMSO-d6)δ7.95(m，2，苯甲酸鹽CH)，7.63(m，1，苯甲酸鹽CH)，7.61(s，1，嘌呤CH)，7.50(m，2，苯甲酸鹽CH)，7.28(br m，1，NH)，6.11(m，1，＝CH)，5.86(m，1，＝CH)，5.81(br m，1，OH)，5.39(m，1，NCH)，3.45(d，J＝6.0Hz，2，OCH2)，3.04(br m，1，環(huán)丙基的CH)，2.87(m，1，CH)，2.65-2.55(m，1，CH)，1.63-1.53(m，1，CH)，0.70-0.54(m，4，環(huán)丙基的2×CH2)。
實施例G(1S，4R)-順式-4-[2-氨基-6-(環(huán)丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-環(huán)戊烯-1-甲醇半硫酸鹽的制備把在IPA(25ml)中的(1S，4R)-順式-4-[2-氨基-6-(環(huán)丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-環(huán)戊烯-1-甲醇苯甲酸鹽(5g)的懸浮液溫熱至60至65℃。加入在水(1.25ml)中的濃硫酸(0.64g)的溶液并且把生成的混濁的懸浮液溫熱至70至75℃。將該混合物冷卻到20至25℃并過濾。以IPA(2×10ml)洗滌該固體并在40到45℃下真空干燥，得到白色固體的標題化合物(3.57g，87％)，波譜與實施例A的產(chǎn)物相一致。
實施例H(1S，4R)-順式-4-[2-氨基-6-(環(huán)丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-環(huán)戊烯-1-甲醇戊二酸鹽的制備將在IMS(250ml)中的(1S，4R)-順式-4-[2-氨基-6-氯-9H-嘌呤-9-基]-2-環(huán)戊烯-1-甲醇鹽酸鹽(EP0434450)(25g)與環(huán)丙胺(30ml)回流下加熱約4h。將該溶液冷卻到45至50℃，以IMS(75ml)稀釋并以活性炭(1g)和助濾劑Harborlite J2(0.5g)處理。大約1h后，把該混合物冷卻到20至25℃并過濾。以IMS(50ml)洗滌該固體并將合并的濾液和洗滌液以IMS(150ml)稀釋，并通過減壓下蒸餾濃縮至大約75ml。該混合物以IMS(90ml)稀釋，并且再次濃縮至大約75ml。此稀釋和再濃縮過程重復兩次，最終濃縮物用IMS(75ml)稀釋并加熱到70至75℃得到溶液。將預先加熱到70至75℃的在IMS(75ml)中的戊二酸(13g)溶液加入其中。該混合物進一步以IMS(25ml)稀釋并冷卻至約25℃大約2小時。該混合物再進一步冷卻到0至5℃，攪拌約2小時并過濾。以IMS(2×50ml)洗滌該產(chǎn)物并在約45℃下真空干燥，得到亮棕色固體的標題化合物(27.1g，78％)；mp.184-188℃；1H-NMR(DMSO-d6)δ7.60(s，1，嘌呤CH)，7.27(br m，1，NH)，6.10(m，1，＝CH)，5.86(m，1，＝CH)，5.82(br m，1，OH)，5.39(m，1，NCH)，3.44(d，J＝5.9Hz，2，OCH2)，3.04(br m，1，環(huán)丙基的CH)，2.87(br m，1，CH)，2.65-2.55(m，1，CH)，2.24(t，J＝7.2Hz，4，戊二酸鹽2×CH2)，1.70(m，J＝7.2Hz，2，戊二酸鹽CH2)，1.62-1.54(m，1，CH)，0.68-0.54(m，4，環(huán)丙基的2×CH2)。
實施例I(1S，4R)-順式-4-[2-氨基-6-(環(huán)丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-環(huán)戊烯-1-甲醇半硫酸鹽的制備把在IPA(80ml)和水(20ml)混合物中的(1S，4R)-順式-4-[2-氨基-6-(環(huán)丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-環(huán)戊烯-1-甲醇戊二酸鹽(20g)的懸浮液加熱至回流得到溶液。該溶液冷卻至大約75℃并加入在水(5ml)中的濃硫酸(2.4g)溶液。所生成的溶液以IPA(16ml)和水(4ml)的混合物稀釋，然后以IPA(20ml)稀釋。該溶液冷至50到55℃，以可靠的(1S，4R)-順式-4-[2-氨基-6-(環(huán)丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-環(huán)戊烯-1-甲醇半硫酸鹽放入晶種并攪拌約30分鐘。在約15分鐘內(nèi)向所生成的懸浮液加入IPA(160ml)，然后該懸浮液冷至約25℃約2小時，隨后冷至0-5℃。又攪拌2小時后，過濾該產(chǎn)物，以IPA(2×40ml)洗滌并在大約45℃下真空干燥，得到亮棕色固體的標題化合物(14.98g，93％)，波譜與實施例A的產(chǎn)物相一致。
實施例J在其對映體存在下從琥珀酸鹽制備(1S，4R)-順式-4-[2-氨基-6-(環(huán)丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-環(huán)戊烯-1-甲醇半硫酸鹽把具有如手性HPLC(洗脫劑為在0.05M磷酸鉀緩沖水溶液的1.0v/v乙腈，pH6.5；柱為ChromTech Chiral-AGP，100×4.0mm；流量為1.0ml/min；在220nm檢測)顯示對映體比例為97.5∶2.5的(1S，4R)-順式-4-[2-氨基-6-(環(huán)丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-環(huán)戊烯-1-甲醇的琥珀酸鹽與它的對映體(134g)的混合物懸浮在異丙醇(IPA)(302ml)和水(67ml)中，并加熱至回流得到澄清的溶液。該溶液冷卻到75至80℃并加入在水(33.5ml)中的濃硫酸(16.26g)溶液，該溶液通過熱過濾使之澄清，隨后用IPA和水(3∶1，134ml)的混合物沖洗濾器。把濾液和洗滌液冷卻到45至50℃，并用可靠的(1S，4R)-順式-4-[2-氨基-6-(環(huán)丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-環(huán)戊烯-1-甲醇半硫酸鹽放入晶種。在此溫度范圍內(nèi)加入另一份IPA(804ml)并使生成的懸浮液冷至0到5℃。過濾該懸浮液并以IPA(2×200ml)洗滌該產(chǎn)物，并且在40到45℃下真空干燥，得到白色結(jié)晶固體的標題化合物(75g，68％)。
經(jīng)過手性HPLC(條件如上)對該產(chǎn)物的分析結(jié)果顯示該對映體的比例為99.2∶0.8。
以相同的實驗原始記錄在8g規(guī)模下使用的不同比例的琥珀酸鹽對映體進料來進行一個范圍內(nèi)的相似實驗。該結(jié)果以表格形式概述如下
實施例K在其對映體存在下從戊二酸鹽制備(1S，4R)-順式-4-[2-氨基-6-(環(huán)丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-環(huán)戊烯-1-甲醇半硫酸鹽把具有如手性HPLC顯示對映體比例為98.6∶1.4(條件如以上實施例J)的(1S，4R)-順式-4-[2-氨基-6-(環(huán)丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-環(huán)戊烯-1-甲醇的戊二酸鹽和它的對映體(100g)的混合物懸浮在異丙醇(IPA)(400ml)和水(100ml)中，并加熱至回流得到澄清溶液。該溶液冷卻到70至75℃并加入在水(25ml)中的濃硫酸(12.01g)溶液，隨后依次加入IPA和水(4∶1，100ml)的混合物和IPA(100ml)。把該溶液冷卻到50至55℃，用可靠的(1S，4R)-順式-4-[2-氨基-6-(環(huán)丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-環(huán)戊烯-1-甲醇半硫酸鹽放入晶種。在此溫度范圍內(nèi)加入另一份IPA(800ml)并使生成的懸浮液冷至0到5℃。過濾該懸浮液并以IPA(2×200ml)洗滌該產(chǎn)物并在40到45℃下真空干燥，得到白色結(jié)晶固體的標題化合物(72g，90％)。
經(jīng)過手性HPLC(條件如以上實施例J)對該產(chǎn)物的分析結(jié)果顯示對映體的比例為99.6∶0.4。
實施例L(1S，4R)-順式-4-[2-氨基-6-(環(huán)丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-環(huán)戊烯-1-甲醇水楊酸鹽的制備把在IMS(大約25ml)中的(1S，4R)-順式-4-[2-氨基-6-(環(huán)丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-環(huán)戊烯-1-甲醇(中間體1)(1g)和水楊酸(0.482g)加熱直到形成透明的溶液。使之冷卻至大約20℃并過濾該生成的懸浮液，該固體產(chǎn)物在大約40℃下真空干燥，得到白色固體的標題化合物(1.163g，78％)；m.pt195-198℃；1H-NMR(dmso-d6)δ7.78(d中d，J＝7.7Hz，J＝1.7Hz，1H，芳香CH)，7.66(s，1H，嘌呤CH)，7.66(br m，1H，NH)，7.43-7.48(m，1H，芳香CH)，6.85-6.92(m，2H，2×芳香CH)，6.11(m，1H，＝CH)，6.11(br m，1H，OH)，5.87(m，1H，＝CH)，5.40(m，1H，NCH)，3.45(m，2H，OCH2)，3.03(br m，1H，環(huán)丙基的CH)，2.87(m，1H，CH)，2.55-2.65(m，1H，CH)，1.63-1.55(m，1H，CH)，0.73-0.58(m，4，環(huán)丙基的2×CH2)。
根據(jù)類似于在實施例G中描述的將該苯甲酸鹽轉(zhuǎn)化為半硫酸鹽的方法可把所形成的水楊酸鹽轉(zhuǎn)化為要求的半硫酸鹽。
實施例M(1S，4R)-順式-4-[2-氨基-6-(環(huán)丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-環(huán)戊烯-1-甲醇單硫酸鹽的制備把在工業(yè)甲基化酒精(IMS)(40ml)中的(1S，4R)-順式-4-[2-氨基-6-(環(huán)丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-環(huán)戊烯-1-甲醇(10.00g)的攪拌下的懸浮液加熱到60℃以得到澄清的溶液。滴加入在IMS(15ml)中的濃硫酸(6.99g)溶液，且將該混合物在回流下加熱0.25h并再次得到澄清的溶液。使該混合物冷卻到20至30℃約1小時，在此冷卻過程中生成結(jié)晶。該懸浮液進一步冷至0到5℃大約0.25h并在此溫度范圍內(nèi)攪拌大約1小時。過濾該產(chǎn)物，以IMS(2×15ml)洗滌并在40至45℃下真空干燥，得到細白色粉末的標題化合物(9.07g，67.5％)。1H-NMR(DMSO-d6)δ0.78(2H，m)，0.93(2H，m)，1.10(3H，t，J 7.1Hz)(乙醇)，1.63(1H，dt，J 13.8，5.5Hz)，2.64(1H，dt，J 13.8，8.8Hz)，2.8-3.0(3H，寬譜帶M)，3.46(2H，m)，3.74(2H，q，J 7.1Hz)(乙醇)，5.42(1H，m)，5.88(1H，m)，6.17(1H，m)，5.4-7.8(寬譜帶，可交換)，8.0(1H，s)。
實施例N(1S，4R)-順式-4-[2-氨基-6-(環(huán)丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-環(huán)戊烯-1-甲醇半硫酸鹽的制備把在異丙醇(IPA)(30ml)和水(10ml)中的(1S，4R)-順式-4-[2-氨基-6-(環(huán)丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-環(huán)戊烯-1-甲醇單硫酸鹽(5.00g)和(1S，4R)-順式-4-[2-氨基-6-(環(huán)丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-環(huán)戊烯-1-甲醇(3.725g)的攪拌下的懸浮液回流下加熱大約0.25h，得到澄清的溶液。該溶液冷卻到大約50至55℃，在約0.25h內(nèi)加入IPA(40ml)并保持溫度在50至55℃。在加入期間析出結(jié)晶。該混合物冷卻到20至30℃約1小時，然后進一步冷至0到5℃大約0.25h并在此溫度范圍內(nèi)攪拌大約1小時。過濾該產(chǎn)物，以IPA(2×10ml)洗滌并在40至45℃下真空干燥，得到細白色粉末的標題化合物(5.17g，59.1％)。波譜與實施例A的產(chǎn)物相一致。
實施例1片劑配制下列制劑A、B和C通過以聚乙烯吡咯烷酮溶液使該成分濕法制粒，隨后加入硬脂酸鎂并壓片來制備。
制劑Amg/片 mg/片(a)活性成分 250 250(b)乳糖B.P. 210 26(c)聚乙烯吡咯烷酮B.P.159(d)羥基乙酸淀粉鈉2012(e)硬脂酸鎂53500 300制劑Bmg/片 mg/片(a)活性成分 250 250(b)乳糖 150 -(c)微晶纖維素PH101 6026(d)聚乙烯吡咯烷酮B.P.159(e)羥基乙酸淀粉鈉2012(f)硬脂酸鎂53500 300制劑C1(控釋制劑)該制劑通過下列成分與聚乙烯吡咯烷酮溶液濕法制粒，隨后加入硬脂酸鎂并壓片來制備。
mg/片(a)活性成分 500(b)羥基丙基甲基纖維素 112(Methocel K4M Premium)(c)乳糖B.P. 53
(d)聚乙烯吡咯烷酮B.P.C. 28(e)硬脂酸鎂7700膠囊劑通過使該活性成分分散在卵磷脂和花生油中并把該分散物填充進入軟的彈性明膠膠囊來制備。
制劑C(控釋膠囊劑)下列控釋膠囊制劑通過使用擠壓機來擠壓成分a、b和c，隨后通過該擠壓物的球磨作用和干燥來制備。干燥后的小丸然后用控制釋放膜(d)包衣并填充進入兩節(jié)的硬明膠膠囊中。
mg/膠囊(a)活性成分 250(b)微晶纖維素 125(c)乳糖BP 125(d)乙基纖維素13513制劑D(薄膜包衣片)下列薄膜包衣片使用直接壓制方法來制備。該(1S，4R)-順式-4-[2-氨基-6-(環(huán)丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-環(huán)戊烯-1-甲醇的半硫酸鹽被篩分并與微晶纖維素和羥基乙酸淀粉鈉混合。然后篩分硬脂酸鎂和膠態(tài)二氧化硅并與其它成分混合。使該混合物壓制成為片劑，該片劑然后使用標準薄膜包衣技術(shù)進行包衣。
mg/片片芯(a)半硫酸鹽 351.0(b)微晶纖維素 414.6(c)羥基乙酸淀粉鈉 24.0
(d)硬脂酸鎂 8.0(e)膠態(tài)二氧化硅2.4總芯片重800.0片包衣(f)OpadryTMYellow 24.0(g)(g)純水USP q.s.
總片重 824.0存在于該片芯的膠態(tài)二氧化硅的量可變化至如0.8mg。
實施例2可注射制劑活性成分0.200g無菌、無熱原磷酸鹽緩沖液(pH7.0) 至10ml將該活性成分溶解在大部分該磷酸鹽緩沖液中(35-40℃)，然后配制到體積并經(jīng)過滅菌微孔濾膜濾至無菌的10ml琥珀玻璃小瓶(1型)中，以無菌罩密封并且再密封(overseals)。
實施例E肌內(nèi)注射液活性成分 0.20g芐醇 0.10gGlycofurol 751.45g注射用水q.s. 至3.00ml將該活性成分溶解于Glycofurol中。然后加入芐醇并使之溶解，然后加水至3ml。然后該混合物經(jīng)過滅菌微孔濾膜過濾并封閉在無菌的3ml玻璃小瓶(1型)中。
實施例4糖漿混懸劑活性成分 0.2500g
山梨醇溶液 1.5000g甘油 2.0000g可分散纖維素 0.0750g苯甲酸鈉 0.0050g矯味劑，Peach 17.42.3169 0.0125ml純凈水q.s. 至5.0000ml將苯甲酸鈉溶解于一份純凈水中并加入山梨醇溶液。加入該活性成分并使之分散。在甘油中使該增稠劑(可分散纖維素)分散。使兩個分散物混合并以純凈水配制到所需要的體積。
實施例5栓劑mg/栓劑活性成分 250硬脂肪，BP(Witepsol H15-Dynamit Nobel)7701020該活性成分作為粉末使用，其中至少90％的粒子具有63μm的直徑或更小。
使五分之一的Witepsol H15在45℃最大溫度下于夾套蒸汽鍋中熔融。該活性成分通過200μm的篩來篩分，并使用配備的切頭的銀匙伴隨混合把它加入到該熔融的基質(zhì)中，直到得到均勻的分散物。保持該混合物在45℃下，將余下的Witepsol H15加到該懸浮液中并攪拌以確保均勻混合。使整個懸浮液通過250μm不銹鋼篩，并在連續(xù)攪拌下使之冷卻至45℃。在38℃至40℃溫度下把該混合物2.02g填充到適合的塑料模具中。使該栓劑冷卻至室溫。
實施例6陰道栓劑mg/陰道栓劑活性成分250無水葡萄糖 380馬鈴薯淀粉 363
硬脂酸鎂71000該活性成分作為粉末使用，其中至少90％的粒子具有63μm的直徑或更小。
以上成分直接混合并且通過直接壓制所生成的混合物來制備陰道栓劑。
實施例7局部制劑霜劑活性化合物 5.00g甘油2.00gCetostearyl醇混合物 6.75g十二烷基硫酸鈉 0.75g白軟石蠟2.50g液體石蠟5.00g氯甲酚 0.10g純凈水 至100.00g將該活性化合物溶解于純凈水和甘油的混合物中并加熱至70℃。將余下的成分在70℃下加熱。把這兩部分加在一起并且使之乳化。冷卻并填充進入容器。
權(quán)利要求
1.(1S，4R)-順式-4-[2-氨基-6-(環(huán)丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-環(huán)戊烯-1-甲醇的二羧酸鹽，其中所述二羧酸鹽選自戊二酸鹽、半辛二酸鹽、己二酸鹽、富馬酸鹽、半癸二酸鹽和庚二酸鹽。
2.(1S，4R)-順式-4-[2-氨基-6-(環(huán)丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-環(huán)戊烯-1-甲醇的戊二酸鹽。
3.(1S，4R)-順式-4-[2-氨基-6-(環(huán)丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-環(huán)戊烯-1-甲醇的單硫酸鹽、苯甲酸鹽或水楊酸鹽。
全文摘要
描述了(1S，4R)－順式－4－[2－氨基－6－(環(huán)丙基氨基)－9H－嘌呤－9－基]－2－環(huán)戊烯－1－甲醇的半硫酸鹽或它的溶劑化物。也描述了制備該半硫酸鹽的制備途徑和原料化合物。該半硫酸鹽在醫(yī)學尤其是治療病毒性感染上是有用的。
文檔編號A61K31/52GK1515572SQ0310292
公開日2004年7月28日 申請日期1998年5月14日 優(yōu)先權(quán)日1997年5月17日
發(fā)明者A·C·布洛蒂, A C 布洛蒂, M·F·瓊斯, 瓊斯, J·F·西格, 西格, C·J·瓦利斯, 瓦利斯 申請人:葛蘭素集團有限公司