專利名稱：聯(lián)用單克隆抗體治療急性損傷引起的局部組織壞死的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明是有關(guān)聯(lián)合應(yīng)用抗細(xì)胞間粘附分子-1單克隆抗體(anti-ICAM-1 monoclonal antibody)和抗選擇素類分子單克隆抗體(anti-Selectin monoclonal antibodies)在治療急性損傷引起的局部組織壞死上的新用途，涉及生物制藥領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
單克隆抗體是一類蛋白質(zhì)分子，在基礎(chǔ)研究，臨床診斷和治療，疾病預(yù)防有廣泛的應(yīng)用。其開發(fā)前景已獲廣泛肯定。蛋白質(zhì)種內(nèi)繁多，機(jī)體內(nèi)每一生理，病理過程涉及眾多蛋白質(zhì)，目前單一單克隆抗體的生物制劑已不能滿足需要，單克隆抗體聯(lián)合應(yīng)用于臨床治療是一個(gè)新的發(fā)展方向。正如雞尾酒療法開創(chuàng)了愛滋病治療的新紀(jì)元一樣。急性損傷是一個(gè)很常見的健康問題，常見如車禍，運(yùn)動(dòng)損傷，燒傷，戰(zhàn)傷，手術(shù)(器官移植，整容及內(nèi)臟大型手術(shù))等。
損傷的病理過程較復(fù)雜，起初造成受到傷害的肌體組織受損壞死，這些受損壞死組織激活肌體本身的白細(xì)胞系統(tǒng)，激肽系統(tǒng)，補(bǔ)體系統(tǒng)，血管內(nèi)皮等系統(tǒng)，進(jìn)而對(duì)受傷的組織產(chǎn)生反應(yīng)，釋放出毒性產(chǎn)物，如白細(xì)胞分泌的蛋白酶及各種氧化產(chǎn)物，這些過程和產(chǎn)物會(huì)造成肌體損傷部位的繼發(fā)性損傷，對(duì)機(jī)體造成更大的傷害。
機(jī)體損傷后白細(xì)胞和損傷處血管內(nèi)皮的交互作用是引起損傷后局部組織壞死的主要因素。細(xì)胞間粘附分子-1和選擇素分子在此過程中起著重要的信號(hào)傳遞作用。細(xì)胞間粘附分子-1是一種糖蛋白，多存在血管內(nèi)皮細(xì)胞上。選擇素分子目前已知有白細(xì)胞選擇素分子(L-selectin)，內(nèi)皮選擇素分子(E-selectin)和血小板選擇素分子(P-selectin)亦多表達(dá)在白細(xì)胞，血管內(nèi)皮細(xì)胞上。在機(jī)體受損時(shí)，細(xì)胞間粘附分子-1(ICAM-1)和選擇素類分子(Selectins)會(huì)在受損而激活的內(nèi)皮細(xì)胞上和白細(xì)胞上表達(dá)增加，這些分子幫助白細(xì)胞集合在損傷部位，附在血管內(nèi)皮上，透過血管壁進(jìn)入損傷部位，產(chǎn)生急性局部炎性反應(yīng)，引起繼發(fā)性局部組織壞死。
目前尚無治療急性損傷后局部組織壞死的藥物，臨床上是對(duì)證治療，不能滿足臨床需要。

發(fā)明內(nèi)容
為了克服目前對(duì)急性損傷后局部組織壞死無藥治療的不足，本專利提供聯(lián)合應(yīng)用抗細(xì)胞間粘附分子-1單克隆抗體和上述3種抗選擇素類分子的單克隆抗體中任一種來減少損傷后局部組織壞死這一新的用途，為國內(nèi)外首創(chuàng)。
本發(fā)明是利用抗細(xì)胞間粘附分子-1單克隆抗體和抗選擇素類分子單克隆抗體可阻斷細(xì)胞間粘附分子-1和選擇素類分子幫助白細(xì)胞粘附到血管內(nèi)皮上的特性，通過聯(lián)合使用，從而最大程度阻斷白細(xì)胞在急性損傷過程中對(duì)損傷局部的進(jìn)一步傷害，達(dá)到治療損傷后局部組織壞死的目的。
本發(fā)明用特定波長的光(非熱效應(yīng)性光源)照射注射有光敏劑的動(dòng)物皮膚，在照射部位產(chǎn)生急性組織損傷并引起局部組織壞死為動(dòng)物模型，然后立即經(jīng)靜脈或腹腔注射抗細(xì)胞間粘附分子-1單克隆抗體(anti-ICAM-1 monoclonal antibody)和抗選擇素類分子單克隆抗體(anti-Selectin monoclonal antibodies)，用白細(xì)胞選擇素分子單克隆抗體(anti-L-Selectin antibody)為對(duì)照抗體，此為目前唯一進(jìn)入2期臨床實(shí)驗(yàn)的治療急性損傷的藥物(美國藥物公司Protein DesignLab)，在損傷后30小時(shí)內(nèi)，每隔6小時(shí)重復(fù)注射，并測量組織壞死面積，記錄結(jié)果，進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析并制圖。


在附圖中，X軸表示損傷后30小時(shí)對(duì)3組試驗(yàn)動(dòng)物測量的分組資料，Y軸表示組織壞死面積，測量用游標(biāo)卡尺，因組織壞死面積近似于橢園形，所以測量結(jié)果經(jīng)公式面積＝A/2×B/2×3.14計(jì)算，其中A表示測量的長軸，B表示測量的短軸，結(jié)果用平方厘米表示。
柱1表示該組小鼠在光照后，接受靜脈注射大白鼠Ig G2a，30微克/小鼠，每6小時(shí)注射-次。
柱2表示該組小鼠在光照后，接受靜脈注射注射細(xì)胞間粘附分子-1單克隆抗體和內(nèi)皮選擇素分子單克隆抗體各30微克/小鼠，每6小時(shí)注射一次。
柱3表示該組小鼠在光照后，接受靜脈注射白細(xì)胞選擇素分子單克隆抗體30微克/小鼠，每6小時(shí)注射一次。
權(quán)利要求
1.本發(fā)明是有關(guān)聯(lián)合抗細(xì)胞間粘附分子-1單克隆抗體(anti-ICAM-1 monoclonalantibody)和抗選擇素類單克隆抗體(anti-Selectin monoclonal antibodies)在治療急性損傷所致局部組織壞死上的應(yīng)用，此新用途可用于國家一類新藥的開發(fā)，
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的本發(fā)明的聯(lián)合應(yīng)用單克隆抗體為下列組合一.抗細(xì)胞間粘附分子-1單克隆抗體(anti-ICAM-1 monoclonal antibody)和抗內(nèi)皮選擇素單克隆抗體(anti-E-Selectin monoclonal antibody)二.抗細(xì)胞間粘附分子-1單克隆抗體(anti-ICAM-1 monoclonal antibody)和抗白細(xì)胞選擇素單克隆抗體(anti-L-Selectin monoclonal antibody)三.抗細(xì)胞間粘附分子-1單克隆抗體(anti-ICAM-1 monoclonal antibody)和抗血小板選擇素單克隆抗體(anti-P-Selectin monoclonal antibody)
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的本發(fā)明的應(yīng)用對(duì)象是人或動(dòng)物。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的本發(fā)明的每一種單克隆抗體的應(yīng)用劑量是0.5毫克/每公斤體重-5毫克/每公斤體重。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的本發(fā)明在治療急性損傷所致局部組織壞死時(shí)，每4-6小時(shí)重復(fù)注射一次。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的本發(fā)明的應(yīng)用途徑是經(jīng)靜脈注射或經(jīng)腹腔注射，或經(jīng)靜脈注射和經(jīng)腹腔注射結(jié)合。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的本發(fā)明所用單克隆抗體義為可結(jié)合細(xì)胞間粘附分子-1(ICAM-1)和選擇素類分子(Selectins)的單克隆抗體和功能上的類似物，如來自此二抗體的片段，抗體的重組形式，抗體的人源化形式。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的本發(fā)明所用攜帶抗體的注射用液為0.9％生理鹽水或其它臨床靜脈注射稀釋用液體。
全文摘要
本發(fā)明是有關(guān)聯(lián)合抗細(xì)胞間粘附分子－1單克隆抗體和抗選擇素分子類單克隆抗體用于減少急性損傷引起的局部組織壞死的臨床上新用途，涉及生物制藥領(lǐng)域。聯(lián)合應(yīng)用抗細(xì)胞間粘附分子－1單克隆抗體和抗選擇素分子類單克隆抗體去阻斷損傷組織對(duì)吸引白細(xì)胞的信號(hào)傳遞，抑制此過程中白細(xì)胞對(duì)血管內(nèi)皮和損傷組織產(chǎn)生的進(jìn)一步損害所造成的繼發(fā)局部組織壞死，產(chǎn)生良好的臨床效果，此新用途為國內(nèi)外首創(chuàng)。
文檔編號(hào)A61K39/395GK1531971SQ03118839
公開日2004年9月29日 申請(qǐng)日期2003年3月25日 優(yōu)先權(quán)日2003年3月25日
發(fā)明者孫京海 申請(qǐng)人:孫京海