專利名稱：補(bǔ)髓生血顆粒及其制備方法
所屬領(lǐng)域；本發(fā)明涉及一種補(bǔ)髓生血顆粒及其制備方法。
背景技術(shù)：
再生障礙性貧血是一種迄今病因未十分明了，且對(duì)人類健康危害較大的造血系統(tǒng)疾病。少數(shù)病例發(fā)病雖然與藥物、化學(xué)物質(zhì)、電離輻射及病毒感染等有關(guān)，但大多數(shù)病例病因仍不十分清楚。Mothlerr等綜合11家報(bào)道共302例病人中屬原發(fā)性者占78.5％，而國(guó)內(nèi)陳東豐等綜合3057例病人中屬原發(fā)性者占74％，可見(jiàn)關(guān)于原發(fā)和繼發(fā)再障發(fā)生比例各家報(bào)道不同。現(xiàn)有文獻(xiàn)報(bào)告，至少有近百種藥物被認(rèn)為和再障發(fā)病有關(guān)。報(bào)道較多的是氯霉素、保泰松、解熱鎮(zhèn)痛藥、磺胺類和抗瘧藥等。殷德厚等對(duì)牡丹江地區(qū)三個(gè)再障發(fā)病調(diào)查結(jié)果表明，再障發(fā)病與藥物有關(guān)者占45％，其中與氯霉素有關(guān)者占31％.Lssaragrisil等對(duì)多種藥物包括噻秦類利尿藥、驅(qū)蟲(chóng)藥、磺胺類藥、抗驚厥類藥物、口服避孕藥的使用與再障發(fā)病的關(guān)系進(jìn)行了研究，結(jié)果表明再障的發(fā)生與使用噻嗪利尿藥、驅(qū)蟲(chóng)藥有明顯關(guān)系，也與磺胺類藥物的使用有關(guān)，使用此三類藥物者發(fā)病率為9-12/106，但與非激素類抗炎藥物、抗驚厥藥、口服避孕藥無(wú)關(guān)。氯霉素在1948年問(wèn)世，1952年便有氯霉素導(dǎo)致再障的報(bào)道。林果為等調(diào)查發(fā)現(xiàn)患者有服用氯霉素史者發(fā)生再障的危險(xiǎn)性為對(duì)照組的6倍，特別是發(fā)病前半年內(nèi)有服用史者，其發(fā)生再障危險(xiǎn)性為對(duì)照組的33倍，氯霉素劑量超過(guò)6克發(fā)生再障的危險(xiǎn)性為對(duì)照組的12倍。服用保泰松后發(fā)生再障危險(xiǎn)為對(duì)照組的3～4倍。服用含氨基比林和非那西丁的復(fù)方制劑則為對(duì)照組的3倍。美國(guó)醫(yī)學(xué)會(huì)(AMA)藥物副作用登記處進(jìn)行統(tǒng)計(jì)724例再障患者中，其中321例AA與服用氯霉素有關(guān)，39例為服用保泰松所致。張銳發(fā)等應(yīng)用病例對(duì)照研究法對(duì)158例再障礙的發(fā)病因素作了專門(mén)調(diào)查分析，結(jié)果提示土霉素、四環(huán)素及解熱鎮(zhèn)痛藥等與再障的發(fā)病無(wú)明顯關(guān)系。綜上所述，氯霉素、四環(huán)素等藥物是引起再障的危險(xiǎn)因素，但并不是說(shuō)這些因素必然引起再障，不過(guò)我們根據(jù)這些發(fā)病因素并考慮到接觸這些藥物到發(fā)病的時(shí)間間隔，可達(dá)到預(yù)防之目的。許多化學(xué)物質(zhì)如苯類化合物、油漆、某些農(nóng)藥殺蟲(chóng)劑等都具有對(duì)骨髓毒性作用?，F(xiàn)已明確，各種形式的電離輻射均可致再障。許多病毒感染與再障發(fā)生也有關(guān)，其中病毒性肝炎相關(guān)性再障最為多見(jiàn)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種有促進(jìn)骨髓細(xì)胞增殖分化、提高病人免疫機(jī)能、改善骨髓造血的微環(huán)境狀態(tài)的補(bǔ)髓生血顆粒及其制備方法。本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供一種有效提取并制成補(bǔ)髓生血顆粒的制備方法。本發(fā)明的目的是通過(guò)以下方式實(shí)現(xiàn)的本發(fā)明為一種補(bǔ)髓生血顆粒，該藥物組分的重量配比是熟地黃2000-3000g，山萸肉1000-2000g，枸杞子1500-2500g，淫羊藿2000-3000g，黃芪4500-5500g，雞血藤1500-2500g，白花蛇舌草1500-2500g，鹿茸200-300g，紅參1000-2000g，丹參2500-3500g，茯苓1500-2500g。孫偉正教授自60年代就開(kāi)展再障的臨床與實(shí)驗(yàn)研究，積累了豐富的經(jīng)驗(yàn)，補(bǔ)髓生血顆粒劑是以孫偉正教授為學(xué)科帶頭人之寶貴經(jīng)驗(yàn)的結(jié)晶。它匯集著孫教授從醫(yī)30多年來(lái)的寶貴心血。補(bǔ)髓生血顆粒劑經(jīng)臨床中不斷應(yīng)用，并得以發(fā)展，目前補(bǔ)髓生血顆粒劑經(jīng)課題組人員從不同角度、不同層次上對(duì)其療效機(jī)理進(jìn)行了深入研究，并取得了可喜的成果。與已知治療再障的再障生血片比較，其近期或遠(yuǎn)期療效皆好于再障生血片(P＜0.01)。與目前對(duì)再障治療效果較好的西藥相比，不但克服了單純西藥作用途徑單一或毒副作用大之缺點(diǎn)，而且還避免了價(jià)格之昂貴之弊病，廣為患者所接受。補(bǔ)髓生血顆粒依據(jù)″腎主骨生髓″″精血互化″理論為組方原則。方中熟地黃性味甘微溫，歸肝腎經(jīng)，能滋陰補(bǔ)腎，填精益髓?，F(xiàn)代藥理研究發(fā)現(xiàn)，地黃具有刺激骨髓、增加紅細(xì)胞、血紅蛋白及升高血小板的作用。新近研究發(fā)還發(fā)現(xiàn)生、熟地黃還可促進(jìn)血虛動(dòng)物骨髓造血細(xì)胞CFU-E、BFU-E的增殖。另有人報(bào)道地黃具有明顯的免疫增強(qiáng)作用。山萸肉性味酸澀微溫，歸肝腎經(jīng)，能補(bǔ)益肝腎?，F(xiàn)代藥理研究表明山萸肉對(duì)免疫功能有調(diào)節(jié)作用。對(duì)巨噬細(xì)胞的吞噬功能有促進(jìn)作用。此外，山茱萸對(duì)環(huán)磷酰胺及放療引起的小鼠白細(xì)胞減少有明顯升高作用。枸杞子性味甘平，歸肝腎經(jīng)，能補(bǔ)益肝腎?，F(xiàn)代藥理研究表明枸杞子對(duì)免疫功能減退有調(diào)節(jié)作用。另有人報(bào)道枸杞子含有豐富的微量元素，如鐵、鋅、錳等。也有人研究發(fā)現(xiàn)枸杞多糖能提高小鼠骨髓BFU-E、CFU-E水平，能升高網(wǎng)織紅細(xì)胞數(shù)，增強(qiáng)集落刺激因子活性。淫羊藿性味甘溫，歸肝腎經(jīng)，能補(bǔ)腎壯陽(yáng)，強(qiáng)筋骨。現(xiàn)代藥理研究該藥能改善腎虛病人T細(xì)胞比值，增強(qiáng)網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)的吞噬功能。有人對(duì)小鼠腹腔注射淫羊藿水浸膏0.5，對(duì)機(jī)體免疫功能有促進(jìn)作用。有人以單味淫羊藿離子靜電導(dǎo)入為主治療再障5例，近期療效非常好。巴戟天性味甘辛微溫，歸肝腎經(jīng)，能補(bǔ)腎陽(yáng)，壯筋骨?，F(xiàn)代藥理研究該藥有促腎上腺皮質(zhì)激素樣作用。還有人研究巴戟天能抑制小鼠胸腺萎縮，升高白細(xì)胞之功能。鹿茸味甘、咸、性溫。歸肝腎經(jīng)。能溫腎壯陽(yáng)、生精益血、強(qiáng)筋補(bǔ)髓?，F(xiàn)代藥理研究發(fā)現(xiàn)鹿茸所含多種氨基酸和活性物質(zhì)對(duì)人體有強(qiáng)壯作用，且能提高受損骨髓的醛縮酶等的活性，能改善陽(yáng)虛狀態(tài)下能量代謝低下的病理變化。有人研究還發(fā)現(xiàn)鹿茸精能促進(jìn)骨髓造血機(jī)能，提高外周血紅細(xì)胞，白細(xì)胞、血紅蛋白水平。用鹿茸血酒每次10ml，每日3次口服，治療再生障礙性貧血、慢性苯中毒引起的血液病，血象及臨床癥狀均獲得好轉(zhuǎn)。此外。鹿茸還具有明顯的抗脂質(zhì)過(guò)氧化作用。增強(qiáng)SOD活性，提高其捕捉氧自由基能力。紅參是人參蒸制后的干燥品，味甘、微苦，性微溫，歸心、肺、脾經(jīng)，能大補(bǔ)元?dú)狻，F(xiàn)代藥理研究表明紅參中含麥芽醇(Mat01)具有抗氧化作用。人參對(duì)骨髓造血功能有保護(hù)和刺激作用，能使貧血?jiǎng)游锛t細(xì)胞、白細(xì)胞及血紅蛋白量增加。當(dāng)骨髓受到抑制時(shí)，人參增加外周血細(xì)胞的作用更為明顯。人參皂甙和人參總皂甙對(duì)小鼠骨髓多潛能干細(xì)胞具有明顯的促進(jìn)作用，能促進(jìn)紅系、粒系、巨核系組成的混合集落形成。給貧血患者每天服用人參提取物(人參皂甙)，不但能增強(qiáng)骨髓造血功能，而且能改善病人的全身倦怠、食欲不振、眩暈、心悸等癥狀。黃芪味甘，性微溫。歸脾、肺經(jīng)。能補(bǔ)氣以生血?，F(xiàn)代藥理研究證明黃芪可明顯促進(jìn)造血功能，使用以當(dāng)歸、黃芪合用組成當(dāng)歸補(bǔ)血湯或單用黃芪均能明顯提高失血性貧血小鼠紅細(xì)胞、血紅蛋白數(shù)。丹參味苦、性微寒、歸心、肝經(jīng)，能活血涼血，祛瘀生新?，F(xiàn)代藥理研究丹參有抗脂質(zhì)過(guò)氧化和清除自由基作用。有人研究表明丹參注射液能顯著提高紅細(xì)胞、心、肝、腎中SOD活性，顯著降低血清、心、肝、腎中LPO含量。還有人進(jìn)行試驗(yàn)觀察丹參對(duì)甲皺微循環(huán)的改變，結(jié)果丹參可使管袢輪廓清晰度、管袢數(shù)目及長(zhǎng)度均增加，血流速度加快。雞血藤味苦、甘，性溫，歸肝經(jīng)。能補(bǔ)血行血，舒筋活絡(luò)?，F(xiàn)代藥理研究發(fā)現(xiàn)雞血藤有升高紅細(xì)胞、白細(xì)胞和血紅蛋白的作用。有人用含雞血藤的″補(bǔ)血靈糖漿″制劑治療小兒營(yíng)養(yǎng)不良性貧血76例，取得一定療效。白花蛇舌草味苦、甘，性寒；，歸胃、大腸、小腸經(jīng)。能清熱解毒?，F(xiàn)代藥理研究白花蛇舌草能明顯增強(qiáng)機(jī)體白細(xì)胞吞噬白色葡萄球菌的能力。也有人報(bào)道本品在較低劑量下，確能增強(qiáng)小鼠的體液免疫細(xì)胞免疫功能。綜上所述，僅是從單味藥的藥理作用分析了其作用可行性。我們知道單藥有效單體的藥代參數(shù)并不能完全代表或反映含該成分的有效中藥復(fù)方的藥代參數(shù)。要想真正明晰補(bǔ)髓生血顆粒的全方綜合療效還必須深入研究其組方配伍規(guī)律。中醫(yī)認(rèn)為慢性再障發(fā)病關(guān)鍵為腎虛，方中熟地黃、山萸肉、枸杞子補(bǔ)腎填精，滋陰養(yǎng)血。巴戟天、淫羊藿、鹿茸補(bǔ)腎助陽(yáng)，益髓養(yǎng)血。紅參大補(bǔ)元真之氣，黃芪補(bǔ)氣而生血。值得一提的是補(bǔ)髓生血顆粒還依據(jù)其陰陽(yáng)互根″孤陰不生，獨(dú)陽(yáng)不長(zhǎng)″的原理，在補(bǔ)腎陰同時(shí)酌加補(bǔ)腎陽(yáng)之品，在補(bǔ)腎陽(yáng)同時(shí)還適加滋腎陰之藥。補(bǔ)髓生血顆粒還注意到慢性再障沉痼難解纏綿難愈，久病入絡(luò)的病理變化，因而在補(bǔ)腎的基礎(chǔ)上還適當(dāng)配用了丹參、雞血藤等活血之品。另外，本方還酌加部分解毒之品，使其方更有其新意。綜合分析上方，不難發(fā)現(xiàn)本方治療充分體現(xiàn)了補(bǔ)腎、活血、解毒三法。我們認(rèn)為補(bǔ)腎填精能夠增加造血干細(xì)胞數(shù)量；提高機(jī)體免疫力，也即″五臟元真通暢，人即安和″。解毒是解除致病邪氣對(duì)骨髓的侵害?；钛鲆布辞宄罢酄?zhēng)產(chǎn)生的病理性瘀積之物，改善造血微環(huán)境，以達(dá)以通為用之目的。本發(fā)明經(jīng)過(guò)黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院血液內(nèi)科對(duì)111例再障的療效研究和215例再障的生存率及遠(yuǎn)期療效的觀察，總有效率為79.35％，臨床治愈率為28.83％，五年生存率達(dá)88％，遠(yuǎn)期療效為71.64％。
本發(fā)明所述的一種補(bǔ)髓生血顆粒的制備方法是將熟地黃、山萸肉、枸杞子、淫羊藿、巴戟天、黃芪、雞血藤、白花蛇舌草、茯苓加水煎煮三次，每次加水10倍量，煎煮2.5小時(shí)，合并濾液，濾液濃縮至1∶0.5，攪拌下加入95％乙醇使含醇量達(dá)70％，放置過(guò)夜，濾過(guò)得到濾液A備用，另取鹿茸、紅參、丹參，加70％乙醇回流提取2次，每次3小時(shí)，合并濾液得到濾液B，將濾液B提取液與濾液A合并，水浴回收乙醇，并濃縮至相對(duì)密度1.30(80℃熱測(cè))的浸膏，加處約1000g糊精，混勻制成軟材，過(guò)14目篩制粒，80℃烘干，整粒，分裝即得，每袋約15g顆粒。該制備方法中，因鹿茸、紅參為貴重藥物，需要單提，其有效成分類激素及人參皂甙對(duì)乙醇溶解度較好，故可用乙醇回流提取，而丹參既含有水溶性成分，又合有脂溶性成分，如丹參酮IIA系主要活血化瘀之成分，對(duì)醇溶解度好，對(duì)水溶解不好，而其水溶性成分亦可溶于乙醇，故可選用乙醇回流提取。以上三味藥均可用乙醇提取，故將三者合并用乙醇提取，以減少工藝過(guò)程。其提取條件采用正交設(shè)計(jì)法加以考察確定。在考察中采用三因素三水平的正交設(shè)計(jì)表，考察指標(biāo)采用人參總皂甙的提取量，測(cè)定方法采用5％香草醛冰酯溶液顯色后比色測(cè)定，最后提取工藝確定為70％乙醇回流提取2次，每次3小時(shí)。由于熟地黃等九位藥材有效成分基本上對(duì)水都有較好的溶解度，所以將其共煎，用水提取，為縮小成品的體積，又采取了乙醇凈化措施。加入可溶性糊精，是為了避免制劑中加入過(guò)多的糖分而不利于諸如糖尿病人的服用。
具體實(shí)施例方式本發(fā)明為一種補(bǔ)髓生血顆粒，該藥物組分的重量配比是熟地黃2000-3000g，山萸肉1000-2000g，枸杞子1500-2500g，淫羊藿2000-3000g，黃芪4500-5500g，雞血藤1500-2500g，白花蛇舌草1500-2500g，鹿茸200-300g，紅參1000-2000g，丹參2500-3500g，茯苓1500-2500g。在本實(shí)施例中為熟地黃2500g，山萸肉1500g，枸杞子2000g，淫羊藿2500g，黃芪5000g，雞血藤2000g，白花蛇舌草2000g，鹿茸250g，紅參1500g，丹參3000g，茯苓2000g。
將熟地黃、山萸肉、枸杞子、淫羊藿、巴戟天、黃芪、雞血藤、白花蛇舌草、茯苓加水煎煮三次，每次加水10倍量，煎煮2.5小時(shí)，合并濾液，濾液濃縮至1∶0.5，攪拌下加入95％乙醇使含醇量達(dá)70％，放置過(guò)夜，濾過(guò)得到濾液A備用，另取鹿茸、紅參、丹參，加70％乙醇回流提取2次，每次3小時(shí)，合并濾液得到濾液B，將濾液B提取液與濾液A合并，水浴回收乙醇，并濃縮至相對(duì)密度1.30(80℃熱測(cè))的浸膏，加處約1000g糊精，混勻制成軟材，過(guò)14目篩制粒，80℃烘干，整粒，分裝即得，每袋約15g顆粒。
結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明的有益技術(shù)效果進(jìn)一步說(shuō)明如下1.本發(fā)明的的制備工藝簡(jiǎn)捷易行，能保證組方中各種藥材有效成份最大程度地提取出來(lái)，適于規(guī)?；a(chǎn)，有良好的社會(huì)效益和經(jīng)濟(jì)效益。
2.本發(fā)明經(jīng)鑒定證實(shí)各有效成份能得以最大程度保留，為該藥的臨床療效提供有力保障，同時(shí)經(jīng)毒理學(xué)和藥效學(xué)研究，證實(shí)該藥使用安全，無(wú)毒副作用，可在臨床推廣應(yīng)用。
3.在病理學(xué)研究中，通過(guò)對(duì)實(shí)驗(yàn)性小鼠再生障礙性貧血的治療，發(fā)現(xiàn)補(bǔ)髓生血顆粒能改善骨髓細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)，提高骨髓紅細(xì)胞中內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的含量，加強(qiáng)細(xì)胞解毒功能，恢復(fù)核膜結(jié)構(gòu)，對(duì)DNA正常代謝起到保護(hù)作用。同時(shí)提高骨髓造血微環(huán)境中上皮樣細(xì)胞數(shù)量，起到支持骨髓造血功能的作用。
4.在對(duì)慢性再生障礙性貧血患者紅細(xì)胞免疫功能影的研究中，發(fā)現(xiàn)補(bǔ)髓生血顆粒有改善CAA患者免疫功能的作用，表現(xiàn)在CAA患者療后R-C3bR、RICR、RNCR、RFER和補(bǔ)體C3均明顯升高，而升高的RFIR和CIC在療后也明顯回落。同時(shí)療前升高的IFN-o、TNF-α水平回落到正常水平。
5.實(shí)驗(yàn)研究表明，CAA骨髓造血細(xì)胞存在細(xì)胞凋亡明顯特征，在瓊脂糖凝膠電泳圖上可見(jiàn)到典型DNA梯形構(gòu)形，這提示CAA確實(shí)存在造血細(xì)胞過(guò)度凋亡現(xiàn)象。
6.對(duì)補(bǔ)髓生血顆粒治療前后CAA造血細(xì)胞進(jìn)行凋亡相關(guān)基因表達(dá)(bax、C-myc)、原位末端標(biāo)記凋亡細(xì)胞陽(yáng)性百分率及流式細(xì)胞儀Sub-G期百分率檢測(cè)，并與對(duì)照組進(jìn)行對(duì)比后發(fā)現(xiàn)療后C-myc陽(yáng)性百分率與對(duì)照組無(wú)顯著性差異(P＜0.05)，補(bǔ)髓生血顆粒能不同程度下調(diào)凋亡細(xì)胞陽(yáng)性百分率、bax基因陽(yáng)性表達(dá)率以及下調(diào)Sub-G期百分率(P＜0.01)，治療后與對(duì)照組比較有顯著性差異(P＜0.01、P＜0.05)，這進(jìn)一步揭示了補(bǔ)髓生血顆粒有明顯抑制CAA細(xì)胞凋亡的作用。
權(quán)利要求
1.一種補(bǔ)髓生血顆粒，其特征是該藥物組分的重量配比是熟地黃2000-3000g，山萸肉1000-2000g，枸杞子1500-2500g，淫羊藿2000-3000g，黃芪4500-5500g，雞血藤1500-2500g，白花蛇舌草1500-2500g，鹿茸200-300g，紅參1000-2000g，丹參2500-3500g，茯苓1500-2500g。
2.如權(quán)利要求1所提供的一種補(bǔ)髓生血顆粒的制備方法，其特征是將熟地黃、山萸肉、枸杞子、淫羊藿、巴戟天、黃芪、雞血藤、白花蛇舌草、茯苓加水煎煮三次，每次加水10倍量，煎煮2.5小時(shí)，合并濾液，濾液濃縮至1∶0.5，攪拌下加入95％乙醇使含醇量達(dá)70％，放置過(guò)夜，濾過(guò)得到濾液A備用，另取鹿茸、紅參、丹參，加70％乙醇回流提取2次，每次3小時(shí)，合并濾液得到濾液B，將濾液B提取液與濾液A合并，水浴回收乙醇，并濃縮至相對(duì)密度1.30(80℃熱測(cè))的浸膏，加處約1000g糊精，混勻制成軟材，過(guò)14目篩制粒，80℃烘干，整粒，分裝即得，每袋約15g顆粒。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種補(bǔ)髓生血顆粒及其制備方法，該藥物組分的重量配比是熟地黃2000－3000g，山萸肉1000－2000g，枸杞子1500－2500g，淫羊藿2000－3000g，黃芪4500－5500g，雞血藤1500－2500g，白花蛇舌草1500－2500g，鹿茸200－300g，紅參1000－2000g，丹參2500－3500g，茯苓1500－2500g。本發(fā)明經(jīng)過(guò)黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院血液內(nèi)科對(duì)111例再障的療效研究和215例再障的生存率及遠(yuǎn)期療效的觀察，總有效率為79.35％，臨床治愈率為28.83％，五年生存率達(dá)88％，遠(yuǎn)期療效為71.64％。
文檔編號(hào)A61P7/00GK1471956SQ0313246
公開(kāi)日2004年2月4日 申請(qǐng)日期2003年6月27日 優(yōu)先權(quán)日2003年6月27日
發(fā)明者孫偉正 申請(qǐng)人:孫偉正