專利名稱：納米銅粉作為制備抗衰老藥物的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種納米銅粉的新用途，特別是一種納米銅粉作為制備抗衰老藥物的應(yīng)用。其藥物主要用于抗衰老和腦缺血、腦血栓后遺癥等的治療。
氨基酸作為錐體神經(jīng)元的主要興奮性神經(jīng)遞質(zhì)，在突出可塑性神經(jīng)元的生長與退化等方面均有重要作用。但過度激動，氨基酸能系統(tǒng)產(chǎn)生神經(jīng)毒性損害，氨基酸的退行性神經(jīng)毒性是造成腦衰老的主要原因之一。這是由于氨基酸激活其受體，引起受體控性的離子通道開放，使Ca2+、Na+、Cl-、H2O入胞，K+出胞，以致細(xì)胞內(nèi)Na+、Cl-、H2O增加，引起急性神經(jīng)元腫脹壞死。細(xì)胞內(nèi)游離Ca2+大量增加，引起鈣超載，造成遲發(fā)性神經(jīng)元死亡。
有研究表明金屬化合物，如硫酸銅等含銅或鋅的化學(xué)化合物，用于抗衰老的藥物中既無效，又有毒副作用。
在衰老的諸多因素中，腦部供血不足是一重要因素。老年人由于動脈硬化，腦血栓后遺征，使腦循環(huán)阻力增大，腦血流速度減慢，造成腦供血量和供氧量的減少。繼而使氧自由基和興奮性氨基酸在腦細(xì)胞內(nèi)大量積累，由此引起的遲發(fā)性損傷和腦細(xì)胞變性，將影響人的學(xué)習(xí)、記憶、行為功能。
腦衰老會直接導(dǎo)致癡呆癥的發(fā)生。據(jù)國外不完全報道，老年人群體中40％左右主訴有記憶減退現(xiàn)象。而記憶減退除了影響生活外，也可能是癡呆癥早期表現(xiàn)之一。研究表明，臨床表現(xiàn)為單純記憶障礙的老年人中，有相當(dāng)一部份人經(jīng)過幾年的轉(zhuǎn)化，發(fā)展成為癡呆癥患者。我國曾于1989年和1990年進(jìn)行兩次較大規(guī)模的流行病調(diào)查，發(fā)現(xiàn)60歲以上人群的癡呆癥患病率達(dá)到了3.46％～3.90％，而隨著腦血管發(fā)病率的增加，其中60％～70％的腦血管型癡呆癥患者是由于腦缺血而引起的。因此，尋求一種安全有效延緩衰老的藥物是當(dāng)今醫(yī)藥界的一個緊迫課題。
本發(fā)明的目的是這樣實(shí)現(xiàn)的該納米銅粉作為抗衰老藥物的應(yīng)用，其技術(shù)要點(diǎn)是采用市售粒徑0.1-1000nm的納米銅粉為原料制成藥物。納米銅粉與制劑的重量比為0.002～0.04∶1。
上述納米銅粉作為藥物的應(yīng)用可制成片劑、膠囊、顆粒劑等劑型，也可加入食品、奶粉或乳制品中食用。
本發(fā)明納米銅粉作為制備抗衰老藥物的應(yīng)用，可日服1～2次，日服量以納米銅粉總量不超過2～8mg為宜。毒理實(shí)驗(yàn)表明，該劑量是安全有效劑量。其主要成份納米銅粉市場有售，相關(guān)報道也公開過，納米銅粉可采用激光法、化學(xué)法、物理低溫冷凍等方法制備。但未見到具有制備抗衰老藥物應(yīng)用的報道。
通過藥效學(xué)的研究，納米銅粉具有清除氧自由基(O2)，重新活化超氧化物岐化酶(SOD)水平的作用。由于人體內(nèi)細(xì)胞色素氧化酶、多巴胺-β羥化和超氧化物岐化酶等與腦發(fā)育有關(guān)，機(jī)體衰老時，這些酶的活性降低，中樞系統(tǒng)內(nèi)各種神經(jīng)遞質(zhì)合成減少，神經(jīng)元減少，嚴(yán)重影響大腦發(fā)育，所以出現(xiàn)腦組織萎縮，灰白質(zhì)退行性病變，大腦血管彎曲，伸長和擴(kuò)張，以及神經(jīng)發(fā)育停滯等現(xiàn)象。經(jīng)納米銅粉對小鼠生存實(shí)驗(yàn)，納米銅粉對小鼠腦組織內(nèi)超氧化物歧化酶(SOD)活性測定，納米銅粉對大鼠腦缺血后腦組織丙二醛(MDA)含量的測定等實(shí)驗(yàn)，其結(jié)果表明納米銅粉對抗衰老和腦缺血的治療，療效確切。因此，可將納米銅粉應(yīng)用于抗衰老的藥物中。
上述實(shí)驗(yàn)方法中，所用實(shí)驗(yàn)材料1.受試藥物納米銅粉，黑色粉末狀，電鏡觀察平均粒徑≤50nm，純度為99.99％，形狀近似球形，由沈陽二十一世紀(jì)納米技術(shù)有限公司提供。D-半乳糖，上海試劑二廠生產(chǎn)，批號980927。GZI-2醫(yī)用高速勻漿機(jī)、大連西崗醫(yī)用器械廠生產(chǎn)。
2.實(shí)驗(yàn)動物昆明種小鼠，Wistar大鼠，雌雄各半，均為沈陽藥科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心提供，動物合格證號為遼實(shí)動合字第030號。平均每籠5只群養(yǎng)，維持自然周期，自由進(jìn)水進(jìn)食，水為自來水，飼料為沈陽藥科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心提供的機(jī)制飼料，隨機(jī)分組，動物在實(shí)驗(yàn)室適應(yīng)環(huán)境一周后進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
3.飼料(A)為加入人用等效劑量的納米銅粉的機(jī)制飼料(納米銅粉、麥粉、面粉、黃豆粉、米粉、魚粉、骨粉、酵母粉)。
(B)為機(jī)制飼料(麥粉，面粉，黃豆粉，米粉，魚粉，骨粉，酵母粉)。實(shí)驗(yàn)方法1.納米銅粉對小鼠生存實(shí)驗(yàn)選用1年齡小鼠20只，雌雄各半，體重25.5±2.5g。隨機(jī)分為二組，每組10只，一個空白組(用飼料B)，一個給藥組(用飼料A)。正常進(jìn)食，飲水。飼養(yǎng)籠與飲水瓶每周消毒二次，墊料(木屑)一周換三次。室溫25℃，相對濕度55％～65％，觀察記錄小鼠死亡時間、體重、表征狀態(tài)。統(tǒng)計結(jié)果見表1。
表1納米銅粉對小鼠生存的影響(x)

P＜0.052.納米銅粉對小鼠腦組織內(nèi)超氧化物歧化酶(SOD)活性測定(1)小鼠衰老模型選用1年齡小鼠30只，雌雄各半，每組10只，隨機(jī)分為三組，空白組1(用飼料B)，模型組2(用飼料B)，治療組3(用飼料A)。體重25.5±2.5g。正常進(jìn)食，飲水。飼養(yǎng)籠與飲水瓶每周消毒二次，墊料(木屑)一周換三次。室溫25℃，相對濕度55％～65％，觀察記錄小鼠死亡時間、體重、表征狀態(tài)。5％D-半乳糖，用生理鹽水配置。頸部皮下注射0.5ml/只。每天1次，連續(xù)注射6周，造模成功。
(2)小鼠腦組織內(nèi)SOD活性測定小鼠快速斷頭取腦，取0.3g腦組織，加入3ml雙蒸水，制成10％腦勻漿，然后冷凍20000轉(zhuǎn)離心20分鐘。用鄰苯三酚法測定SOD的含量。測定的對比結(jié)果見

圖1。
3.納米銅粉對大鼠腦缺血后腦組織丙二醛(MDA)含量的測定取Wistar大鼠30只，雌雄各半，體重250～300g。每組10只，隨機(jī)分為三組，空白組1(用飼料B)，模型組2(用飼料B)，治療組3(用飼料A)。正常進(jìn)食，飲水。飼養(yǎng)籠與飲水瓶每周消毒二次，墊料(木屑)一周換三次。室溫25℃，相對濕度55％～65％，取D-半乳糖，用生理鹽水配置。皮下注射.劑量48mg/kg給藥容積為0.5ml/kg，每天1次，連續(xù)注射6周，造模成功。
受試大鼠，用水合氯醛麻醉，結(jié)扎雙側(cè)頸總動脈，結(jié)扎后15小時，斷頭取腦，稱重，用生理鹽水制成5％的腦勻漿。用TAB反應(yīng)比色法測定。測定的對比結(jié)果見圖2。
4.急性毒性試驗(yàn)昆明種小鼠，體重18-22g，雌雄各半，共50只，試驗(yàn)前禁食12小時，按體重隨機(jī)分為5組，每組10只，按不同劑量組的劑量分別灌胃給藥，劑距為1∶0.8，給藥容積為0.2ml/10g小鼠體重，給藥后連續(xù)觀察14天，記錄動物的反應(yīng)及死亡情況，以Bliss法計算LD50及95％可信限。
小鼠急性毒性試驗(yàn)結(jié)果動物給藥后，高劑量小鼠出現(xiàn)行動遲緩，豎毛，呼吸急促，口鼻發(fā)青現(xiàn)象，大部分死亡發(fā)生在48小時內(nèi)，死亡小鼠尸檢未見病理性改變，未死亡小鼠逐漸恢復(fù)正常。LD50及95％可信限結(jié)果見表2。表2納米銅粉灌胃給藥LD50及95％可信限

實(shí)驗(yàn)結(jié)果1.納米銅粉對小鼠生存實(shí)驗(yàn)表明，納米銅粉組明顯優(yōu)于模型對照組的小鼠生存時間。
2.納米銅粉明顯增加治療組SOD活性含量，模型組SOD水平明顯降低。
3.納米銅粉明顯降低MDA含量，模型組MDA明顯高于治療組。
4.急性毒性試驗(yàn)表明口服每天2～8mg劑量是安全的。
綜上所述，納米銅粉應(yīng)用于抗衰老藥物，對腦衰老和腦缺血具有明顯改善作用。D-半乳糖致衰老模型與人類自然衰老模型十分相似。腦衰老的發(fā)生機(jī)制十分復(fù)雜，其中氧自由基的毒性作用是導(dǎo)致腦衰老的重要因素，氧自由基的產(chǎn)生可引起一系列氧化損害，導(dǎo)致核酸、蛋白質(zhì)、脂質(zhì)膜的損傷，經(jīng)D-半乳糖處理的動物腦組織丙二醛(MDA)含量活力增高，而超氧化物岐化酶(SOD)活性降低。它反應(yīng)機(jī)體氧化損傷的程度，其主要危害是使DNA、蛋白質(zhì)膠原；另一方面是丙二醛(MDA)可與磷脂反應(yīng)，破壞生物膜結(jié)構(gòu)，使膜通透性增大，引發(fā)系列相關(guān)損害。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，腦缺血大鼠腦組織內(nèi)MDA的含量急劇增加，而納米銅粉組(A)可明顯降低MDA含量，說明納米銅粉可以改善由于氧自由基所造成的脂質(zhì)過氧化損害。D-半乳糖致衰老模型發(fā)現(xiàn)，納米銅粉組明顯增加SOD含量。增強(qiáng)機(jī)體SOD水平。調(diào)節(jié)其功能活性的表達(dá)。SOD是機(jī)體唯一能夠特異性清除超氧自由基的酶類，而且還有阻斷自由基產(chǎn)生的作用，其活力的高低與衰老關(guān)系密切，作為體內(nèi)抗氧化酶之一，其活力的提高有益于增強(qiáng)機(jī)體的抗氧化能力。
由此可見，納米銅粉完全可以作為制備抗衰老和腦缺血、腦血栓后遺癥等的治療藥物，且療效確切，服用方便、安全。納米銅粉作為制備抗衰老藥物的應(yīng)用，開辟了生命科學(xué)領(lǐng)域抗衰老的新途徑。
以下結(jié)合附圖1-2和實(shí)施方式對本發(fā)明作進(jìn)一步描述。
圖1是應(yīng)用納米銅粉對小鼠腦組織內(nèi)超氧化物歧化酶(SOD)活性測定對比結(jié)果圖表。
圖2是應(yīng)用納米銅粉對小鼠腦缺血后腦組織丙二醛(MDA)含量的測定對比結(jié)果圖表。
用法用量口服，一次一片，每日二次。
實(shí)施方式二制備膠囊采用如下步驟制成膠囊取納米銅粉加淀粉混合均勻，制粒，干燥，分裝于硬膠囊中，即得膠囊，每粒膠囊含納米銅粉為2mg。
用法用量口服，一次一粒，每日二次。
實(shí)施方式三制備顆粒劑采用如下步驟制成顆粒劑取納米銅粉加入賦型劑糖粉、淀粉制成軟材，造粒，低溫干燥，整粒，分裝成袋，即得顆粒劑，每袋含納米銅粉為2mg。
用法用量口服，一次一袋，每日二次。
上述納米銅粉也可直接食用，如加入食品、奶粉或乳制品中，其每日食用納米銅粉總量以不超過2～8mg為宜。
權(quán)利要求
1.一種納米銅粉作為制備抗衰老藥物的應(yīng)用，其特征在于采用市售粒徑為0.1-1000nm的納米銅粉為原料，制成的藥物所用原料納米銅粉與制劑的重量比為0.002～0.04∶1。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的納米銅粉作為制備抗衰老藥物的應(yīng)用，其特征在于采用如下步驟制成片劑取納米銅粉采用常規(guī)制片工藝，加入淀粉、微晶纖維素和潤滑劑硬脂酸鎂，混合均勻，直接壓制成片，包衣，即得片劑，使每片含納米銅粉為2mg。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的納米銅粉作為制備抗衰老藥物的應(yīng)用，其特征在于采用如下步驟制成膠囊取納米銅粉加淀粉混合均勻，制粒，干燥，分裝于硬膠囊中，即得膠囊，每粒膠囊含納米銅粉為2mg。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的納米銅粉作為制備抗衰老藥物的應(yīng)用，采用如下步驟制成顆粒劑取納米銅粉加入賦型劑糖粉、淀粉制成軟材，造粒，低溫干燥，整粒，分裝成袋，即得顆粒劑，每袋含納米銅粉為2mg。
全文摘要
一種納米銅粉作為制備抗衰老藥物的應(yīng)用，其技術(shù)要點(diǎn)是采用市售粒徑0.1－1000nm的納米銅粉為原料制成藥物。納米銅粉與制劑的重量比為0.002～0.04∶1。納米銅粉具有明顯降低MDA含量，改善由于氧自由基所造成的脂質(zhì)過氧化損害，明顯增加SOD含量，增強(qiáng)機(jī)體SOD水平，調(diào)節(jié)其功能活性表達(dá)的特性，從而達(dá)到延緩人體的老化過程，干預(yù)、推遲其機(jī)體組織結(jié)構(gòu)向衰老轉(zhuǎn)化。納米銅粉完全可以作為制備抗衰老和腦缺血、腦血栓后遺癥等的治療藥物，且療效確切，服用方便、安全。納米銅粉作為制備抗衰老藥物的應(yīng)用，開辟了生命科學(xué)領(lǐng)域抗衰老的新途徑。
文檔編號A61P43/00GK1475226SQ0313387
公開日2004年2月18日 申請日期2003年7月8日 優(yōu)先權(quán)日2003年7月8日
發(fā)明者馬駟, 李艷, 馬 駟 申請人:馬駟, 李艷, 馬 駟