專利名稱：復(fù)方一枝蒿膠囊的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種復(fù)方一枝蒿膠囊口服藥，用于治療病毒性肝炎及肝病的純中藥背景技術(shù)目前國內(nèi)外病毒性疾病的發(fā)病率逐年增加，并出現(xiàn)艾滋病等新的免疫缺陷病。用于治療這類疾病的藥物品種大體分為兩大類1.抗病毒藥，2.免疫調(diào)節(jié)藥，但都有其自身的問題，并且達(dá)不到治愈目的。因此研制出抗病毒效果好、副作用小的治療藥物，使醫(yī)藥界一個(gè)迫切的需要。
病毒性肝炎是一種世界性的常見病，我國屬流行“重災(zāi)區(qū)”。據(jù)預(yù)測(cè)我國感染乙型肝炎者有1億人以上，由乙型肝炎引起的肝功能不正?；颊呒s3000萬人，此外絕大部分肝癌患者有慢性肝炎病史，各種病毒性肝炎正嚴(yán)重的威脅著國人的健康，故慢性肝炎的治療成為一個(gè)迫切需解決的重大問題。目前國內(nèi)外用于慢性肝炎治療的藥物品種大體分為三類(1)抗病毒藥，主要有干擾素和幾種核苷類似物，此類藥物在停藥后約6個(gè)月至1年內(nèi)大部分病人會(huì)復(fù)發(fā)且藥費(fèi)昂貴；(2)免疫調(diào)節(jié)藥，如轉(zhuǎn)移因子、白細(xì)胞介素—2、胸腺肽等，此類藥物治療慢性肝炎療效尚待肯定，藥費(fèi)昂貴且有副作用。(3)改善肝功能藥，又稱保肝藥或抗肝細(xì)胞損傷藥，如甘草甜素、聯(lián)苯雙酯、水飛薊素等，復(fù)方甘草甜素制劑。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的在于，根據(jù)國內(nèi)外文獻(xiàn)資料和中醫(yī)、民族醫(yī)專家多年的臨床經(jīng)驗(yàn)研制了一種治療病毒性肝炎及肝病的口服藥復(fù)方一枝蒿膠囊，該藥是以一枝蒿為主，配伍貫葉金絲桃、菊苣而組成。采用先取一枝蒿、貫葉金絲桃用乙醇回流提取，濃縮至稠膏，靜置、沉淀，減壓濃縮為浸膏；再將藥渣與菊苣混合，加水煎煮，濾過，合并濾液，濾液減壓濃縮與醇提浸膏合并，噴霧干燥，并用乙醇制軟材，濕粒過網(wǎng)，烘干，加入滑石粉，混勻，過網(wǎng)即可灌裝膠囊。該膠囊經(jīng)體內(nèi)外抗病毒試驗(yàn)結(jié)果，一枝蒿AR在5ug/ml對(duì)HBV DNA的平均抑制率為57.0±22.1％，其IC50為3.4±0.5ug/ml，陽性藥1μM的拉米夫定(3TC)對(duì)HBV DNA的抑制率為67.2±16.4％。同時(shí)貫葉金絲桃的活性成分在治療抑郁癥、肝炎和艾滋病以及抗癌等方面具重要的利用前景。
本發(fā)明所述的復(fù)方一枝蒿膠囊，該膠囊是純中藥以一枝蒿為主，配伍貫葉金絲桃、菊苣而組成，其中原料配比為一枝蒿為6-24克、貫葉金絲桃3-16克、菊苣3-18克；先取一枝蒿、貫葉金絲桃用乙醇回流提取，合并煎液，濾過，濃縮至1∶1稠膏，加乙醇等量，攪勻，靜置24h以上使沉淀，取上清液減壓回收乙醇，減壓濃縮至相對(duì)密度為1.10～1.25，溫度為40～70℃的浸膏。再將藥渣與菊苣混合，加水煎煮3次，每次1小時(shí)，濾過，合并濾液，濾液減壓濃縮至濃縮至相對(duì)密度1.10～1.40，溫度為40～70℃，與醇提浸膏合并，噴霧干燥，并用75％--95％乙醇制軟材，濕粒過12目網(wǎng)，烘箱烘干，溫度為45℃-65℃，干粒按1％-2％比例加入滑石粉，混勻，過14目鐵絲網(wǎng)。半成品檢查合格后即可灌裝膠囊。
一種復(fù)方一枝蒿膠囊口服藥的制備方法，按下列步驟進(jìn)行a、取一枝蒿6-24克、貫葉金絲桃3-16克、用乙醇回流提取3次，合并煎液，濾過，濃縮至1∶1稠膏，加乙醇等量，攪勻，靜置24h以上使沉淀，取上清液減壓回收乙醇，減壓濃縮至相對(duì)密度為1.10～1.25，溫度為40～70℃的浸膏。
b、將藥渣與菊苣3-18克；混合，加水煎煮3次，每次1小時(shí)，濾過，合并濾液，濾液減壓濃縮至濃縮至相對(duì)密度1.10～1.40，溫度為40～70℃，與醇提浸膏合并，噴霧干燥，并用75％-95％乙醇制軟材，濕粒過12目網(wǎng)，烘箱烘干，溫度為45℃-65℃，干粒按1％-2％比例加入滑石粉，混勻，過14目鐵絲網(wǎng)。半成品檢查合格后即可灌裝膠囊。
一種復(fù)方一枝蒿膠囊口服藥作為制備治療病毒性肝炎及肝病的應(yīng)用，該膠囊是純中藥以一枝蒿為主，配伍貫葉金絲桃、菊苣而組成，其中原料配比為一枝蒿為6-24克、貫葉金絲桃3-16克、菊苣3-18克；先取一枝蒿、貫葉金絲桃用乙醇回流提取，合并煎液，濾過，濃縮至1∶1稠膏，加乙醇等量，攪勻，靜置24h以上使沉淀，取上清液減壓回收乙醇，減壓濃縮至相對(duì)密度為1.10～1.25，溫度為40～70℃的浸膏。再將藥渣與菊苣混合，加水煎煮3次，每次1小時(shí)，濾過，合并濾液，濾液減壓濃縮至濃縮至相對(duì)密度1.10～1.40，溫度為40～70℃，與醇提浸膏合并，噴霧干燥，并用75％-95％乙醇制軟材，濕粒過12目網(wǎng)，烘箱烘干，溫度為45℃-65℃，干粒按1％-2％比例加入滑石粉，混勻，過14目鐵絲網(wǎng)。半成品檢查合格后即可灌裝膠囊；該藥用于治療病毒性肝炎及肝病的中藥。
臨床資料表明，一枝蒿具有解毒、抗菌、抗病毒等功效，臨床用于肝炎、感冒等疾??；貫葉金絲桃為藤黃科植物，貫葉金絲桃干燥的全草，具有軟化寒濕，通經(jīng)利尿，用于寒性腫痛，小便不通，肺不利，腰腿疼痛，外敷可治燒傷及關(guān)節(jié)炎等；菊苣是維吾爾醫(yī)常用藥材，中華人民共和國衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn) 維吾爾藥分冊(cè)收錄的菊苣(卡森)顆粒、炎消迪娜爾糖漿等用于治療病毒性疾病的主要藥物是菊苣。
本發(fā)明所述的復(fù)方一枝蒿膠囊，該膠囊體內(nèi)外抗病毒試驗(yàn)為摘要為研究其抗乙型肝炎病毒的作用，本實(shí)驗(yàn)在乙型肝炎病毒基因轉(zhuǎn)染的人肝癌細(xì)胞系2.2.15細(xì)胞中，研究其對(duì)細(xì)胞的毒性和對(duì)HBV DNA分泌的抑制效果。兩次試驗(yàn)表明復(fù)方一枝蒿膠囊320ug/ml開始2倍稀釋，加入細(xì)胞培養(yǎng)8天，對(duì)細(xì)胞半數(shù)中毒濃度TC50為22.4ug/ml，最大無毒濃度TC0為5ug/ml。最大無毒濃度5ug/ml對(duì)HBVDNA的抑制率為52.4±6.6％。
材料和方法一.藥物復(fù)方一枝蒿膠囊為棕褐色粉末。實(shí)驗(yàn)時(shí)用DMSO配成20mg/ml母液4℃保存，使用時(shí)用2.2.15細(xì)胞培養(yǎng)液配成所需濃度。
二.2.2.15細(xì)胞乙型肝炎病毒(HBV)DNA克隆轉(zhuǎn)染人肝癌細(xì)胞(Hep G2)的2.2.15細(xì)胞系，美國Mount Sinal醫(yī)學(xué)中心構(gòu)建，我室引進(jìn)后自行傳代培養(yǎng)。細(xì)胞用含胎牛血清10％，3％谷氨酚胺1％，G418 380μg/ml，卡那霉素50U/ml的Eagle′s MEM培養(yǎng)液，在37℃5％CO2溫箱中培養(yǎng)，大約一周傳代一次。
三.試劑及儀器放射性同位素d 32P dCTP為亞輝生物醫(yī)學(xué)工程公司，比活度111TBq/nmol；探針標(biāo)記用的缺日標(biāo)記試劑盒購自Promerga公司。酶標(biāo)儀BIO-RAO 3550型；γ-計(jì)數(shù)儀為美國DPC公司產(chǎn)品。
四.實(shí)驗(yàn)方法1.藥物對(duì)細(xì)胞毒性試驗(yàn)藥物復(fù)方一枝蒿膠囊為棕褐色粉末，用DMSO配成20mg/ml母液，使用時(shí)用2.2.15細(xì)胞培養(yǎng)液配成所需濃度，然后用培養(yǎng)液對(duì)倍稀釋從320ug/ml加至2.5ug/ml加入96孔細(xì)胞培養(yǎng)板，每濃度3孔，每4天換同濃度藥液，設(shè)無藥物細(xì)胞對(duì)照組。以觀察細(xì)胞病變?yōu)橹笜?biāo)，8天顯微鏡下觀察細(xì)胞病變，完全破壞為4；75％為3；50％為2；25％為1；無病變?yōu)?。計(jì)算每濃度藥液平均細(xì)胞病變程度和抑制％。按Reed&Muench法計(jì)算半數(shù)有毒濃度(TC50)最大無毒濃度(TC0)2.藥物對(duì)HBV DNA的抑制試驗(yàn)各濃度組藥液的及細(xì)胞對(duì)照組的2.2.15細(xì)胞上清液按分子克隆實(shí)驗(yàn)技術(shù)方法提取其HBV DNA、各樣品斑點(diǎn)雜交、放射自顯影、測(cè)量各雜交點(diǎn)的A值后，計(jì)算抑制率。 3、選擇指數(shù)(SI)SI＝TC50/IC50結(jié)果1.復(fù)方一枝蒿膠囊在2.2.15細(xì)胞培養(yǎng)中的細(xì)胞毒性為觀察復(fù)方一枝蒿膠囊對(duì)乙型肝炎病毒基因轉(zhuǎn)染的人肝癌2.2.15細(xì)胞的毒性，在接種2.2.15細(xì)胞后24小時(shí)，加對(duì)倍稀釋藥液，實(shí)驗(yàn)自320ug/ml開始320；160；80；40；20；10；5；2.5ug/ml，同時(shí)設(shè)正常細(xì)胞對(duì)照。4天換一次藥液，維持8天，用顯微鏡觀察細(xì)胞病變，按公式計(jì)算半數(shù)有毒濃度(TC50)和最大無毒濃度(TC0)為5ug/ml。見表1。TC50兩批實(shí)驗(yàn)分另為22.4ug/ml，22.4ug/ml，平均半數(shù)有毒濃度(TC50)為22.4ug/ml，最大無毒濃度(TC0)為5ug/ml。
表1.復(fù)方一枝蒿膠囊，2，3在2.2.15細(xì)胞培養(yǎng)內(nèi)的毒性實(shí)驗(yàn) 實(shí)驗(yàn)不同藥物濃度mg/ml細(xì)胞病變TC50TC0批次 方法 320 160 80 40 20 10 5 2.5(ug/ml)1CPE 44 4 41 1 0 0 22.4544 4 41 1 0 044 4 41 1 0 0破壞％ 100 100 100 100 25 25 0 02CPE 44 4 41 1 0 0 22.4544 4 41 1 0 044 4 41 1 0 0破壞％ 100 100 100 100 25 25 0 0兩批平均22.452.復(fù)方一枝蒿膠囊在2.2.15細(xì)胞培養(yǎng)中對(duì)HBN DNA的抑制作用復(fù)方一枝蒿膠囊5ug/ml；2.5ug/ml；1.25ug/ml；0.625ug/ml；0.313ug/ml，加入2.2.15細(xì)胞中培養(yǎng)，第8天對(duì)HBV DNA的抑制率復(fù)方一枝蒿膠囊最大濃度5 ug/ml對(duì)HBV DNA的抑制率為52.4±6.6％。表2復(fù)方一枝蒿膠囊在2.2.15細(xì)胞中第8天對(duì)HBV DNA的抑制作用實(shí)驗(yàn)批次 藥物濃度 A值(X±SD)HBV DNA(ug/ml) 抑制％ IC50(ug/ml)I 50.279±0.015* 59.0 2.102.5 0.384±0.09243.61.25 0.495±0.01827.30.6250.558±0.02018.10.3130.443±0.04334.93TC 1μM 0.275±0.016* 59.6細(xì)胞對(duì)照 0.681±0.062II50.279±0.015* 45.9 ＞5.02.5 0.519±0.092 -1.25 0.522±0.024 -0.6250.551±0.034 -0.3130.473±0.1068.23TC 1μM 0.219±0.017** 57.5細(xì)胞對(duì)照5 0.583±0.061結(jié)果 ＞3.55注試驗(yàn)組以對(duì)照組比較 **P＜0.01，*P＜0.05結(jié)論1、復(fù)方一枝蒿膠囊對(duì)2.2.15細(xì)胞培養(yǎng)的毒性復(fù)方一枝蒿膠囊加入2.2.15細(xì)胞中培養(yǎng)8天，以細(xì)胞病變?yōu)橹笜?biāo)，兩批實(shí)驗(yàn)平均半數(shù)中毒濃度TC50為22.4ug/ml，最大無毒濃度TC0為5ug/ml。
2、復(fù)方一枝蒿膠囊在2.2.15細(xì)胞培養(yǎng)內(nèi)對(duì)HBV DNA的抑制作用復(fù)方一枝蒿膠囊在2.2.15細(xì)胞中培養(yǎng)8天，最大無毒濃度5ug/ml對(duì)HBV DNA的抑制率為52.4±6.6％，陽性藥1μM的拉米夫定(3TC)對(duì)HBV DNA的抑制率為52.6±1.1％。表3.復(fù)方一枝蒿膠囊對(duì)HBV DNA的抑制作用總結(jié)表細(xì)胞毒性(ug/ml) HBV DNA抑制率％TC50TC05.0ug/ml22.4 5 52.4±6.具體實(shí)施方式
實(shí)施例1、a、取一枝蒿6克、貫葉金絲桃16克用乙醇回流提取3次，合并煎液，濾過，濃縮至1∶1稠膏，加乙醇等量，攪勻，靜置24h以上使沉淀，取上清液減壓回收乙醇，減壓濃縮至相對(duì)密度為1.10，溫度為40℃的浸膏。
b、將藥渣與菊苣3克混合，加水煎煮3次，每次1小時(shí)，濾過，合并濾液，濾液減壓濃縮至濃縮至相對(duì)密度1.10，溫度為40℃，與醇提浸膏合并，噴霧干燥，并用75％乙醇制軟材，濕粒過12目網(wǎng)，烘箱烘干，溫度為45℃，干粒按1％比例加入滑石粉，混勻，過14目鐵絲網(wǎng)。半成品檢查合格后即可灌裝膠囊；該藥用于治療病毒性肝炎及肝病的中藥。
實(shí)施例2、a、取一枝蒿15克、貫葉金絲桃3克用乙醇回流提取3次，合并煎液，濾過，濃縮至1∶1稠膏，加乙醇等量，攪勻，靜置24h以上使沉淀，取上清液減壓回收乙醇，減壓濃縮至相對(duì)密度為1.20，溫度為60℃的浸膏。
b、將藥渣與菊苣10克混合，加水煎煮3次，每次1小時(shí)，濾過，合并濾液，濾液減壓濃縮至濃縮至相對(duì)密度1.20，溫度為60℃，與醇提浸膏合并，噴霧干燥，并用95％乙醇制軟材，濕粒過12目網(wǎng)，烘箱烘干，溫度為50℃，干粒按1.5％比例加入滑石粉，混勻，過14目鐵絲網(wǎng)。半成品檢查合格后即可灌裝膠囊；該藥用于治療病毒性肝炎及肝病的中藥。
實(shí)施例3、a、取一枝蒿24克、貫葉金絲桃10克份用乙醇回流提取3次，合并煎液，濾過，濃縮至1∶1稠膏，加乙醇等量，攪勻，靜置24h以上使沉淀，取上清液減壓回收乙醇，減壓濃縮至相對(duì)密度為1.25，溫度為70℃的浸膏。
b、將藥渣與菊苣18克混合，加水煎煮3次，每次1小時(shí)，濾過，合并濾液，濾液減壓濃縮至濃縮至相對(duì)密度1.40，溫度為70℃，與醇提浸膏合并，噴霧干燥，并用95％乙醇制軟材，濕粒過12目網(wǎng)，烘箱烘干，溫度為65℃，干粒按2％比例加入滑石粉，混勻，過14目鐵絲網(wǎng)。半成品檢查合格后即可灌裝膠囊；該藥用于治療病毒性肝炎及肝病的中藥。
該產(chǎn)品是利用維吾爾藥材資源開發(fā)的維吾爾醫(yī)新藥。它的開發(fā)將給數(shù)萬名病毒性肝炎及肝病患者解除病痛，給患者帶來福音。
權(quán)利要求
1.一種復(fù)方一枝蒿膠囊口服藥，其特征在于該膠囊是純中藥，以一枝蒿為主，配伍貫葉金絲桃、菊苣而組成，其中原料配比為一枝蒿為6-24克、貫葉金絲桃3-16克、菊苣3-18克；先取一枝蒿、貫葉金絲桃用乙醇回流提取，合并煎液，濾過，濃縮至1∶1稠膏，加乙醇等量，攪勻，靜置24h以上使沉淀，取上清液減壓回收乙醇，減壓濃縮至相對(duì)密度為1.10～1.25，溫度為40～70℃的浸膏。再將藥渣與菊苣混合，加水煎煮3次，每次1小時(shí)，濾過，合并濾液，濾液減壓濃縮至濃縮至相對(duì)密度1.10～1.40，溫度為40～70℃，與醇提浸膏合并，噴霧干燥，并用75％-95％乙醇制軟材，濕粒過12目網(wǎng)，烘箱烘干，溫度為45℃-65℃，干粒按1％-2％比例加入滑石粉，混勻，過14目鐵絲網(wǎng)。半成品檢查合格后即可灌裝膠囊。
2.一種復(fù)方一枝蒿膠囊口服藥的制備方法，其特征在于按下列步驟進(jìn)行a、取一枝蒿6-24克、貫葉金絲桃3-16克用乙醇回流提取3次，合并煎液，濾過，濃縮至1∶1稠膏，加乙醇等量，攪勻，靜置24h以上使沉淀，取上清液減壓回收乙醇，減壓濃縮至相對(duì)密度為1.10～1.25，溫度為40～70℃的浸膏。b、將藥渣與菊苣3-18克混合，加水煎煮3次，每次1小時(shí)，濾過，合并濾液，濾液減壓濃縮至濃縮至相對(duì)密度1.10～1.40，溫度為40～70℃，與醇提浸膏合并，噴霧干燥，并用75％-95％乙醇制軟材，濕粒過12目網(wǎng)，烘箱烘干，溫度為45℃-65℃，干粒按1％-2％比例加入滑石粒，混勻，過14目鐵絲網(wǎng)。半成品檢查合格后即可灌裝膠囊。
3.一種復(fù)方一枝蒿膠囊口服藥作為制備治療病毒性肝炎及肝病的應(yīng)用，其特征在于該膠囊是純中藥以一枝蒿為主，配伍貫葉金絲桃、菊苣而組成，其中原料配比為一枝蒿為6-24克、貫葉金絲桃3-16克、菊苣3-18克；先取一枝蒿、貫葉金絲桃用乙醇回流提取，合并煎液，濾過，濃縮至1∶1稠膏，加乙醇等量，攪勻，靜置24h以上使沉淀，取上清液減壓回收乙醇，減壓濃縮至相對(duì)密度為1.10～1.25，溫度為40～70℃的浸膏。再將藥渣與菊苣混合，加水煎煮3次，每次1小時(shí)，濾過，合并濾液，濾液減壓濃縮至濃縮至相對(duì)密度1.10～1.40，溫度為40～70℃，與醇提浸膏合并，噴霧干燥，并用75％-95％乙醇制軟材，濕粒過12目網(wǎng)，烘箱烘干，溫度為45℃-65℃，干粒按1％-2％比例加入滑石粉，混勻，過14目鐵絲網(wǎng)。半成品檢查合格后即可灌裝膠囊；該藥用于治療病毒性肝炎及肝病的中藥。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種復(fù)方一枝蒿膠囊口服藥，是根據(jù)中醫(yī)、民族醫(yī)專家多年的臨床經(jīng)驗(yàn)研制了一種治療病毒性肝炎及肝病的口服藥，該膠囊是以一枝蒿為主，配伍貫葉金絲桃、菊苣而組成。采用先將一枝蒿、貫葉金絲桃提取，濃縮，靜置、沉淀，減壓濃縮為浸膏；再將藥渣與菊苣混合，煎煮，濾過，合并濾液，濾液濃縮與醇提浸膏合并，噴霧干燥，過網(wǎng)，烘干，加入滑石粉，混勻，過網(wǎng)即可灌裝膠囊。該膠囊經(jīng)體內(nèi)外抗病毒試驗(yàn)結(jié)果表明，在治療病毒性肝炎及肝病和艾滋病等方面具重要的作用。復(fù)方一枝蒿膠囊在臨床上用于治療病毒性肝炎及肝病效果明顯。
文檔編號(hào)A61P1/16GK1454663SQ0313790
公開日2003年11月12日 申請(qǐng)日期2003年5月29日 優(yōu)先權(quán)日2003年5月29日
發(fā)明者斯拉甫·艾白, 哈木拉提·吾甫爾 申請(qǐng)人:斯拉甫·艾白, 哈木拉提·吾甫爾