專利名稱：左旋－3α－對甲苯磺酰氧基－6β－乙酰氧基莨菪烷的醫(yī)學(xué)用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及新穎的莨菪烷衍生物，更具體指左旋-3α-對甲苯磺酰氧基-6β-乙酰氧基莨菪烷作為縮瞳藥在臨床的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
青光眼是眼科常見病，主要臨床表現(xiàn)為眼壓升高，據(jù)統(tǒng)計(jì)，在40歲以上人群中，該病發(fā)病率約為2.5％，致盲率高。雖然治療青光眼的藥物種類繁多，但常用的一線藥物為縮瞳藥匹魯卡品，應(yīng)用至今已有百余年歷史，至今所用藥源全部依賴進(jìn)口。國內(nèi)經(jīng)常出現(xiàn)供不應(yīng)求而又無安全有效的同類替代藥物。臨床對研制新型縮瞳藥的要求迫切。
1977年上海第二醫(yī)科大學(xué)從中草藥旋花科植物包公藤中分離得到包公藤甲素(簡稱包甲素)，經(jīng)鑒定該化合物具有莨菪烷母核結(jié)構(gòu)。藥理實(shí)驗(yàn)證明與以往所知具有該結(jié)構(gòu)的化合物M受體拮抗藥阿托品的藥理作用不同，包甲素為M受體激動(dòng)劑。天然包公藤甲素為左旋體，在包公藤中含量極低。隨后開展了包甲素及其一系列包甲素類似物的合成，并進(jìn)行了構(gòu)效關(guān)系的探討，篩選出具有莨菪烷母核結(jié)構(gòu)的衍生物3α-對甲苯磺酰氧基-6β-乙酰氧基莨菪烷(簡稱OTS)，屬于外消旋體。本品具有很強(qiáng)的擬膽堿活性，對眼睛有縮瞳和降低眼內(nèi)壓的作用。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于尋找一種具有高效低毒的縮瞳新藥在制備治療青光眼的藥物中應(yīng)用。
本發(fā)明采用化學(xué)拆分技術(shù)，將OTS拆分成左旋-OTS和右旋-OTS，經(jīng)藥理研究證明左旋-OTS具有很強(qiáng)的擬膽堿活性，而右旋-OTS幾乎無效。
本發(fā)明的化合物左旋-3α-對甲苯磺酰氧基-6β-乙酰氧基莨菪烷[1-3α-paramethylbenzenesulfonyloxy-6β-acetoxytropane](1-OTS)，化學(xué)式為C17H23O5NS，其化學(xué)結(jié)構(gòu)如下
本發(fā)明的藥效學(xué)研究1.不同濃度的l-OTS滴眼使兔虹膜括約肌收縮，瞳孔縮小，各組間顯量效關(guān)系與時(shí)效關(guān)系。小劑量組作用較短，隨著劑量增加，作用時(shí)間延長。0.06％l-OTS縮瞳作用最強(qiáng)，0.03％l-OTS縮瞳作用與2％匹魯卡品相接近，0.015％l-OTS縮瞳作用較弱。d-OTS滴眼無縮瞳作用。(詳見表1、圖1)2.氨甲酰膽堿及l(fā)-OTS對離體家兔虹膜呈明顯的濃度依賴性收縮，阿托品能使氨甲酰膽堿和l-OTS的量效曲線平行右移，表明二者為競爭性拮抗關(guān)系，其縮瞳作用為激動(dòng)虹膜括約肌上M受體所致。氨甲酰膽堿無收縮虹膜的作用，也無拮抗l-OTS的作用。(詳見表2圖2、表3圖3)3.水負(fù)荷模擬臨床的水激發(fā)試驗(yàn)，可使眼內(nèi)壓(IOP)明顯升高。該作用可持續(xù)3h。水負(fù)荷模型制作方法簡單，重復(fù)性好，與文獻(xiàn)報(bào)道相符。實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明l-OTS與陽性藥匹魯卡品均有明顯的降眼壓作用，但0.015％l-OTS作用較弱，持續(xù)時(shí)間也短。0.03％l-OTS的降眼壓作用明顯增強(qiáng)，當(dāng)劑量增加至0.06％時(shí)其作用反不及0.03％組，量效曲線呈倒U形，說明在該模型動(dòng)物中l(wèi)-OTS最佳治療濃度為0.03％，在高眼壓恢復(fù)過程中各治療組眼壓會(huì)降至基礎(chǔ)值以下，但在其它實(shí)驗(yàn)中顯示該藥對正常眼壓無降壓作用，原因不明。(詳見表4、圖4)4.經(jīng)前房內(nèi)注射甲基纖維素(CMC)制作的高眼壓模型，方法簡單，重復(fù)性好，高眼壓作用可靠，維持時(shí)間長。實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明l-OTS與陽性藥匹魯卡品均有明顯的降眼壓作用。不同濃度的l-OTS表現(xiàn)明顯的濃度依賴性。2％匹魯卡品作用強(qiáng)度與0.06％l-OTS相似，24h時(shí)各治療組眼壓均恢復(fù)正常，但對照組眼壓仍明顯高于正常值。未見有任何毒性反應(yīng)。(詳見表5、圖5)毒性試驗(yàn)1.急性毒性試驗(yàn)表明，滴眼時(shí)由于受藥物溶解度和眼內(nèi)給藥量的限制，無法求得LD50。腹腔注射的LD50 l-OTS＞dl-OTS＞d-OTS，分別是小鼠70.16mg/kg、106.83mg/kg、189.93mg/kg；大鼠52.81mg/kg、86.48mg/kg、212.31mg/kg。
2. l-OTS局部滴眼的急性毒性實(shí)驗(yàn)未見該藥對眼睛有明顯毒性反應(yīng)和刺激性，也未見經(jīng)眼吸收后的全身反應(yīng)，說明滴眼給藥是安全的。
3. l-OTS局部滴眼對家兔的長期毒性研究表明，半年的給藥期間，各劑量組家兔無行為異常表現(xiàn)，除瞳孔極度縮小外，未見唾液分泌增加、排便變化、肌肉震顫、中樞興奮等吸收作用，飲食正常，臟器系數(shù)等方面與對照組比較也無明顯差異。
4. l-OTS皮下注射對beagle狗的長期毒性研究表明，半年的給藥期間，僅大劑量組動(dòng)物出現(xiàn)流涎、大便溏薄、小便淋漓、肌肉震顫、嘔吐、腹痛、動(dòng)物似不能耐受。約持續(xù)2小時(shí)恢復(fù)正常。病理切片見肝、腎、肺、脾臟血管擴(kuò)張，血管內(nèi)紅細(xì)胞淤積，其他臟器未見異常改變，但上述變化為可逆，停藥后能恢復(fù)。各劑量組血生化及血液學(xué)指標(biāo)、心電圖、臟器系數(shù)與對照組比較無明顯差別。


圖1 l-OTS滴眼對家兔瞳孔直徑的影響。
—-—為0.015％l-OTS試驗(yàn)組，—+—為0.03％l-OTS試驗(yàn)組，—*—為0.06％l-OTS試驗(yàn)組，—□—為0.12％d-OTS試驗(yàn)組，—×—為2％匹魯卡品試驗(yàn)組，—◇—為生理鹽水對照組。
表1 l-OTS滴眼對家兔瞳孔直徑的影響。
圖2不同濃度阿托品阻斷后l-OTS致虹膜收縮百分率比較。
—-—為l-OTS對照組，—+—為10-9M阿托品阻斷試驗(yàn)組，—*—為3*10-9M阿托品阻斷試驗(yàn)組，—□—為10-6M阿托品阻斷試驗(yàn)組。
表2不同濃度阿托品阻斷后l-OTS致虹膜收縮百分率比較。
圖3不同濃度阿托品阻斷后氨甲酰膽堿致虹膜收縮百分率比較。
—-—為氨甲酰膽堿對照組，—+—為10-9M阿托品阻斷試驗(yàn)組，—*—為3*10-9M阿托品阻斷試驗(yàn)組，—□—為10-6M阿托品阻斷試驗(yàn)組。
表3不同濃度阿托品阻斷后氨甲酰膽堿致虹膜收縮百分率比較。
圖4l-OTS滴眼對水負(fù)荷家兔眼壓的影響?！?—為0.015％l-OTS試驗(yàn)組，—+—為0.03％l-OTS試驗(yàn)組，—*—為0.06％l-OTS試驗(yàn)組，—□—為0.12％d-OTS試驗(yàn)組，—×—為2％匹魯卡品試驗(yàn)組，—◇—為生理鹽水對照組。
表4l-OTS滴眼對水負(fù)荷家兔眼壓的影響?！?—為0.015％l-OTS試驗(yàn)組，—+—為0.03％l-OTS試驗(yàn)組，—*—為0.06％l-OTS試驗(yàn)組，—□—為0.12％d-OTS試驗(yàn)組，—×—為2％匹魯卡品試驗(yàn)組，—◇—為生理鹽水對照組。
圖5l-OTS對甲基纖維素致高眼壓家兔眼壓的影響?！?—為0.015％l-OTS試驗(yàn)組，—+—為0.03％l-OTS試驗(yàn)組，—*—為0.06％l-OTS試驗(yàn)組，—□—為0.12％d-OTS試驗(yàn)組，—×—為2％匹魯卡品試驗(yàn)組，—◇—為生理鹽水對照組。
表5l-OTS對甲基纖維素致高眼壓家兔眼壓的影響。
本發(fā)明提供的一種新穎的左旋莨菪烷衍生物左旋-3α-對甲苯磺酰氧基-6β-乙酰氧基莨菪烷及其制備方法，其化合物具有明顯的縮瞳降眼壓作用，光學(xué)活性強(qiáng)，毒副作用低；本發(fā)明為發(fā)掘新型縮瞳藥物提供途徑。
具體實(shí)施方法為了更好地理解本發(fā)明的實(shí)質(zhì)，下面通過左旋-3α-對甲苯磺酰氧基-6β-乙酰氧基莨菪烷的藥理試驗(yàn)及其結(jié)果來說明左旋-3α-對甲苯磺酰氧基-6β-乙酰氧基莨菪烷在作為縮瞳藥物和在制備治療青光眼藥物中應(yīng)用。
實(shí)施例1左旋-OTS的藥效學(xué)研究一、左旋-OTS對家兔瞳孔直徑的影響實(shí)驗(yàn)動(dòng)物新西蘭兔，上海第二醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供藥物3α-對甲苯磺酰氧基-6β-乙酰氧基莨菪烷左旋體(l-OTS)3α-對甲苯磺酰氧基-6β-乙酰氧基莨菪烷右旋體(d-OTS)2％匹魯卡品，上海市瑞金醫(yī)院制劑室提供，批號9701方法新西蘭兔60只，體重2.5±0.5kg，兩眼外觀正常，雌雄兼用，隨機(jī)將兔分為6組，每組10只(20只眼)，l-OTS分0.015％、0.03％、0.06％三組、d-OTS0.12％組、2％匹魯卡品組及生理鹽水對照組。將兔置于兔盒中，各組分別滴上述藥物2滴(約0.1毫升)，閉眼10秒。為準(zhǔn)確測量瞳孔直徑，采用近距離拍照方法，135感光膠片顯影后圖象與實(shí)物基本等大。在讀片機(jī)上用分角規(guī)測量瞳孔水平直徑。暗室內(nèi)采用日光燈照明，光強(qiáng)度恒定，曝光時(shí)間1/4秒，光圈為4。
數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)方法用藥前后瞳孔直徑變化用配對t檢驗(yàn)，組間比較用團(tuán)體t檢驗(yàn)。
結(jié)果表1 l-OTS滴眼對家兔瞳孔直徑的影響(mm，x±s)藥后組別 眼數(shù) 藥前15min 30min 60min 120min 180min 240min0.015％l-OTS 20 6.0±0.4 5.0±0.5** 4.7±0.5** 5.2±0.5** 5.6±0.5* 5.9±0.5 6.1±0.40.03％l-OTS 20 6.1±0.3 4.1±0.6** 4.1±0.6** 4.7±0.5** 5.5±0.4** 5.9±0.5* 6.1±0.40.06％l-OTS 20 5.9±0.3** 3.7±0.9** 3.5±0.7** 4.0±0.7* 5.0±0.3** 5.4±0.5** 5.9±0.50.12％d-OTS 20 6.0±0.7 5.9±0.5 5.9±0.5 6.0±0.6 6.2±0.7 6.1±0.6 6.3±0.92％匹魯卡品 20 5.8±0.6 4.2±0.7** 4.3±0.4** 4.8±0.5** 5.0±0.3** 5.6±0.6* 5.8±0.5生理鹽水 20 6.0±0.3 5.9±0.5 6.1±0.4 6.1±0.5 6.0±0.6 6.1±0.6 6.1±0.4注與藥前比較*p＜0.05 **p＜0.01
從表1可以看出，不同濃度左旋-OTS和2％匹魯卡品滴眼均見有縮瞳作用，在用藥后15分鐘、30分鐘、60分鐘瞳孔縮小與給藥前比較都有非常顯著差異(P＜0.01)；在120分鐘，0.03％l-OTS、0.06％左旋-OTS、2％匹魯卡品縮瞳作用與給藥前比較都有非常顯著差異(P＜0.01)，0.015％左旋-OTS縮瞳作用與給藥前比較有顯著差異(P＜0.05)；在給藥后180分鐘，只有0.06％左旋-OTS縮瞳作用與給藥前比較都有非常顯著差異(P＜0.01)，而0.03％左旋-OTS、2％匹魯卡品縮瞳作用與給藥前比較只有顯著差異(P＜0.05)，0.015％左旋-OTS組已恢復(fù)正常。至240分鐘時(shí)，各組瞳孔直徑均已恢復(fù)正常。0.06％l-OTS縮瞳作用最強(qiáng)，其余各組也明顯強(qiáng)于小劑量組(P＜0.01)。在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中，0.12％d-OTS組和生理鹽水對照組瞳孔直徑無明顯改變。
由此可得出結(jié)論，不同濃度的l-OTS滴眼使兔虹膜括約肌收縮，瞳孔縮小，各組間有明顯量效關(guān)系與時(shí)效關(guān)系。小劑量組作用較短，作用持續(xù)時(shí)間也較短，隨著劑量增加，作用強(qiáng)度和持續(xù)時(shí)間相對延長。d-OTS滴眼無縮瞳作用，因此不同旋光結(jié)構(gòu)的OTS藥理活性不同，只有左旋OTS具有縮瞳作用。
二.l-OTS對離體虹膜收縮作用的機(jī)制研究實(shí)驗(yàn)動(dòng)物新西蘭兔，上海第二醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供受試藥物3α-對甲苯磺酰氧基-6β-乙酰氧基莨菪烷左旋體(l-OTS)。
試劑阿托品，法國AGUNTTANT藥廠，批號9333B-JUL95Modified Kerb-Ringer液組成(mmol.L-1)氯化鈉112.0 氯化鉀4.7 氯化鈣2.2 氯化鎂1.2碳酸氫鈉25.0 磷酸二氫鉀1.2 葡萄糖12.0氨甲酰膽堿，進(jìn)口分裝儀器張力換能器，上海醫(yī)科大學(xué)制造雙筆記錄儀，XWT204型，上海大華儀表廠制造超級恒溫器，CS501型，重慶實(shí)驗(yàn)設(shè)備廠制造實(shí)驗(yàn)方法1、離體虹膜標(biāo)本的制備選用2千克左右的家兔，斷頭處死，迅速摘取眼球置于Modified Kerb-Ringer液中，以球后視神經(jīng)為起點(diǎn)，沿子午線放射狀從鞏膜至睫狀肌邊緣切開，使鞏膜分開成五角星狀，用玻璃分針小心分去玻璃體和晶體并沿睫狀肌輕輕剝離出完整虹膜，按虹膜內(nèi)接等腰三角形之三頂點(diǎn)各穿一線，把底邊二線分別固定在通氣鉤上，另一端在負(fù)荷80毫克下連接張力換能器，并通入95％氧氣和5％二氧化碳，浴槽溫度為37℃±0.5℃。
2、實(shí)驗(yàn)分組和方法實(shí)驗(yàn)分為l-OTS組及氨甲酰膽堿組。離體虹膜固定后，每隔15分鐘換營養(yǎng)液一次(共四次)，待穩(wěn)定后以累積劑量法做各藥的劑量-效應(yīng)曲線，然后用營養(yǎng)液每隔15分鐘沖洗一次，共三次。分別在浴槽中加入不同克分子濃度(10-9、3×10-9和10-8mol/L)的硫酸阿托品，5分鐘后再做各藥的劑量—效應(yīng)曲線，從曲線的右移計(jì)算出拮抗參數(shù)pA23、以最大收縮的毫伏數(shù)作為100，算出每一劑量收縮毫伏數(shù)的百分率，按D/R式，將實(shí)驗(yàn)所得數(shù)據(jù)直線化，求解離常數(shù)KD。[D]/E＝KD/Emax+(1/Emax)×[D]。[D]為藥物劑量，E為某一劑量的效應(yīng)百分率。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果1、l-OTS對離體虹膜括約肌表現(xiàn)明顯的濃度依賴性收縮，求得KD＝4.9±0.13×10-7mol/L。預(yù)先加入拮抗劑阿托品10-9、3×10-9和10-8mol/L-1能使左旋-OTS量效曲線平行右移，斜率不變，求得的pA2為9.0。不同濃度阿托品阻斷后左旋-OTS致虹膜收縮百分率比較見結(jié)果表2、圖2。
表2不同濃度阿托品阻斷后l-OTS致虹膜收縮百分率比較(x±s)OTS濃度mol/L組別 n 1073*10-73*10-610-63*10-510-510-4OTS(-)10 17.7±3.6 45.2±6.4 72.9±4.7 87.3±4.710010-9M阿托品阻斷后87.7±3.0 27.6±7.7 53.6±8.2 75.2±12.1 93.1±8.4 1003*10-9M阿托品阻斷后 60 11.7±4.3 31.3±7.9 57.5±10.4 85.8±8.6 98.2±4.5 10010-8M阿托品阻斷后50 0 8.5±2.928.5±4.057±5.884.5±3.5 1002、氨甲酰膽堿對離體虹膜括約肌也表現(xiàn)明顯的濃度依賴性收縮，求得KD＝7.4±0.22*10-7mol/L。預(yù)先加入拮抗劑阿托品10-9、3*10-9和10-8mol/L能使氨甲酰膽堿量效曲線平行右移，求得的pA2為8.95。不同濃度阿托品阻斷后氨甲酰膽堿致虹膜收縮百分率比較結(jié)果見表3、圖3。
表3不同濃度阿托品阻斷后氨甲酰膽堿致虹膜收縮百分率比較(x±SD)氨甲酰膽堿濃度mol.L-1組別 n 10-73*10-710-63*10-610-53*10-510-4氨甲酰膽堿 911.8±2.8 34.9±5.5 65.5±9.0 86.2±5.3 98.6±4.310-9M阿托品阻斷后 77.3±3.8 25.3±10.1 56.3±7.5 77.1±9.8 97.9±2.8 1003*10-9M阿托品阻斷后 91.2±2.0 9.4±4.130.2±1254.0±16.2 76.4±17.5 97.3±13.5 10010-8M阿托品阻斷后 80 3.9±5.318.5±11.6 31.0±15.6 55.7±16.7 79.8±1295.8±9.4
實(shí)驗(yàn)結(jié)論左旋-OTS對離體虹膜括約肌表現(xiàn)明顯的濃度依賴性收縮，M受體阻滯劑阿托品能使左旋-OTS量效曲線平行右移，表明二者呈競爭性拮抗關(guān)系，其縮瞳作用可能為激動(dòng)虹膜括約肌上M受體所致。
氨甲酰膽堿作為擬膽堿藥，可用于治療青光眼，本實(shí)驗(yàn)中對離體虹膜括約肌有明顯的濃度依賴性收縮。阿托品可使量效曲線平行右移，二者有競爭性抑制關(guān)系。說明其縮瞳作用可能是激動(dòng)虹膜括約肌上的M受體所致。左旋-OTS的作用與作用機(jī)制與之相似，唯KD不同，說明作用強(qiáng)度左旋-OTS強(qiáng)于氨甲酰膽堿。
三l-OTS對水負(fù)荷高眼壓家兔眼壓的影響1、實(shí)驗(yàn)方法兔高眼壓模型的制備方法 健康新西蘭兔，兩眼外觀正常，體重2.4±0.2kg，♂♀兼用。靜注2.5％戊巴比妥鈉1.2ml/kg全身麻醉。雙眼滴入1％的卡因局部角膜麻醉。用Schiotz壓陷式眼壓計(jì)測量基礎(chǔ)眼壓。然后經(jīng)胃管向胃內(nèi)緩慢灌入37℃左右溫開水100ml/kg，水負(fù)荷后即制成兔高眼壓模型。
l-OTS滴眼對水負(fù)荷高眼壓兔眼壓的影響家兔50只，隨機(jī)分為五組，即不同濃度的l-OTS組(0.015％、0.03％、0.06％)，2％匹魯卡品組及生理鹽水對照組，每組10只兔(20只眼睛)，水負(fù)荷后即刻，雙眼分別滴入測試藥液二滴(約0.1ml)，對照組滴生理鹽水。測量藥后15、30、60、120及180min的眼壓。
資料統(tǒng)計(jì)用藥前后眼壓變化用配對t檢驗(yàn)，組間比較用團(tuán)體t檢驗(yàn)。
2、實(shí)驗(yàn)結(jié)果水負(fù)荷前，各組基礎(chǔ)眼壓值之間無明顯差異，為2.65～2.77kPa。水負(fù)荷后，對照組眼壓即明顯升高，15min時(shí)由正常時(shí)的2.65kPa最高升至4.70kPa，統(tǒng)計(jì)學(xué)上有非常顯著差別。之后眼壓逐漸下降，3h后基本恢復(fù)正常水平。各治療組在雙眼滴入藥液后眼壓仍明顯高于基礎(chǔ)值，但眼壓上升幅度明顯低于對照組。其中0.015％l-OTS組在藥后15min～60min各時(shí)點(diǎn)與對照組比較有明顯差異(P＜0.05)。而0.03％和0.06％l-OTS組在藥后15min～120min各時(shí)點(diǎn)與對照組比較有非常顯著差異(P＜0.01)。中小劑量組比較，無論從生效時(shí)間或作用強(qiáng)度均明顯優(yōu)于0.06％組(15min時(shí)P＜0.05，30min時(shí)P＜0.01)陽性藥匹魯卡品組與0.06％組比較起效時(shí)間相近但作用較強(qiáng)(60min時(shí)P＜0.05)。
水負(fù)荷后各組眼壓恢復(fù)速度作自身比較，對照組在3h眼壓基本恢復(fù)正常，而各治療組在2h即可恢復(fù)。0.03％，0.06％l-OTS與匹魯卡品組此時(shí)甚至降至正常眼壓水平以下，與水負(fù)荷前比較有顯著差異。3h各治療組均低于其基礎(chǔ)眼壓，統(tǒng)計(jì)學(xué)上有非常顯著差異。
3、實(shí)驗(yàn)結(jié)論水負(fù)荷模擬臨床的水激發(fā)試驗(yàn)，可使眼內(nèi)壓(IOP)明顯升高。該作用可持續(xù)3h。水負(fù)荷模型制作方法簡單，重復(fù)性好，與文獻(xiàn)報(bào)道相符。實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明l-OTS與陽性藥匹魯卡品均有明顯的降眼壓作用，但0.015％l-OTS作用較弱，持續(xù)時(shí)間也短。0.03％l-OTS的降眼壓作用明顯增強(qiáng)，當(dāng)劑量增加至0.06％時(shí)其作用反不及0.03％組，量效曲線呈倒U形，說明在該模型動(dòng)物中l(wèi)-OTS最佳治療濃度為0.03％，在高眼壓恢復(fù)過程中各治療組眼壓會(huì)降至基礎(chǔ)值以下，但在其它實(shí)驗(yàn)中顯示該藥對正常眼壓無降壓作用，原因不明。
雖然l-OTS與匹魯卡品滴眼后均可降低高眼壓兔的眼壓，但匹魯卡品滴眼兔無一例外的分泌大量唾液，而l-OTS未見此現(xiàn)象。
表4 l-OTS滴眼對水負(fù)荷家兔眼壓的影響

x±s，n＝20，用藥組與生理鹽水組比較*P＜0.05，**P＜0.01.四l-OTS對甲基纖維素致高眼壓家兔眼壓的影響1實(shí)驗(yàn)方法兔高眼壓模型的制備健康新西蘭兔，兩眼外觀正常，體重2.3±0.2kg，♂♀兼用。靜注2.5％戊巴比妥鈉1.2ml/kg全身麻醉。雙眼滴入1％的卡因局部角膜麻醉。用Schiotz壓陷式眼壓計(jì)測量基礎(chǔ)眼壓，然后用4號針頭沿角膜邊緣內(nèi)1mm處進(jìn)針向前房穿刺，抽取房水0.05ml，換針管注入2％CMC 0.05ml，拔出針頭用干棉球輕按數(shù)秒鐘，以防房水外漏。即制成兔高眼壓模型。
實(shí)驗(yàn)分組及用藥家兔50只，隨機(jī)分為五組，即不同濃度的l-OTS組(0.015％、0.03％、0.06％)，2％匹魯卡品組及生理鹽水對照組，每組10只兔(20只眼睛)，注入CMC后即刻，雙眼分別滴入測試藥液各二滴(約0.1ml)，對照組滴等量生理鹽水。測量藥后0.5，2，4，6，及24h的眼壓。
資料統(tǒng)計(jì)用藥前后眼壓變化用配對t檢驗(yàn)，組間比較用團(tuán)體t檢驗(yàn)。
2實(shí)驗(yàn)結(jié)果可見在制備高眼壓模型前，各組家兔基礎(chǔ)眼壓無明顯差別。當(dāng)前房內(nèi)注入CMC后對照組眼壓在整個(gè)觀察期間眼壓均明顯高于基礎(chǔ)值(P＜0.01)2h時(shí)最高值達(dá)6.75kPa，之后眼壓緩慢下降，24h后眼壓仍高于正常值。治療組眼壓雖也高于正常，但眼壓上升幅度明顯低于對照組。其中III組和IV組在藥后0.5h與對照組比較有明顯差異(P＜0.05)。2h起至24h各時(shí)間點(diǎn)治療組眼壓均明顯低于對照組，統(tǒng)計(jì)學(xué)上有非常顯著差別(P＜0.01)。2h時(shí)不同濃度的l-OTS組作用強(qiáng)度呈明顯濃度依賴性IV組作用最強(qiáng)，II組作用最弱6h時(shí)II組與III組眼壓仍高于正常，而IV組則已恢復(fù)，24h時(shí)各治療組眼壓均已恢復(fù)，而對照組眼壓仍明顯高于正常。陽性藥匹魯卡品作用與IV組l-OTS相似各時(shí)間點(diǎn)與之比較均無明顯差別。
3實(shí)驗(yàn)結(jié)論甲基纖維素(CMC)制作的高眼壓模型，方法簡單，重復(fù)性好，高眼壓作用可靠，維持時(shí)間長。實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明l-OTS與陽性藥匹魯卡品均有明顯的降眼壓作用。不同濃度的l-OTS表現(xiàn)明顯的濃度依賴性。2％匹魯卡品作用強(qiáng)度與0.06％l-OTS相似，24h時(shí)各治療組眼壓均恢復(fù)正常，但對照組眼壓仍明顯高于正常值。
表5 l-OTS滴眼對CMC高眼壓家兔的影響IOP/kPa0 0.5 2 4 6 24hI N.S2.41±0.18 5.04±1.02 6.75±1.616.03±1.56 4.54±0.813.53±0.40II 0.015％l-OTS 2.40±0.18 4.71±0.60 5.18±0.89**4.66±0.57**3.02±0.56**2.42±0.19**III 0.03％l-OTS2.33±0.10 4.59±0.62*4.45±0.72**3.77±0.49**2.67±0.51**2.30±0.25**IV 0.06％l-OTS2.45±0.30 4.56±0.68*3.92±0.49**3.18±0.40**2.42±0.24**2.36±0.17**V 2％pilocarpine 2.56±0.32 4.49±0.66*3.86±0.39**3.15±0.27**2.49±0.25**2.40±0.23**x±s，n＝20，用藥組與生理鹽水組比較*P＜0.05，**P＜0.01.
權(quán)利要求
1.一種具有如下結(jié)構(gòu)的左旋-3α-對甲苯磺酰氧基-6β-乙酰氧基莨菪烷 的醫(yī)學(xué)用途，其特征在于它具有縮瞳、降眼壓作用。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的左旋-3α-對甲苯磺酰氧基-6β-乙酰氧基莨菪烷的醫(yī)學(xué)用途，其特征在于在制備、治療青光眼藥物中應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明涉及新穎的左旋體莨菪烷衍生物左旋－3α－對甲苯磺酰氧基－6β－乙酰氧基莨菪烷，該化合物化學(xué)分子式為C
文檔編號A61P27/00GK1481810SQ03141918
公開日2004年3月17日 申請日期2003年7月29日 優(yōu)先權(quán)日2003年7月29日
發(fā)明者魏丕敬, 陳紅專, 戴建亞, 鄭培黎, 王惠寧, 楊麗敏 申請人:上海第二醫(yī)科大學(xué)