專利名稱：3－雜芳基－3,5－二氫－4－氧代－4H－噠嗪并[4,5－b]吲哚－1－乙酰胺衍生物,其制 ...的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及3-雜芳基-3，5-二氫-4-氧代-4H-噠嗪并[4，5-b]吲哚-1-乙酰胺衍生化合物。
背景技術(shù)：
已知文件WO-A-0044384中所描述的3，5-二氫噠嗪并[4，5-b]吲哚衍生化合物，具有體外的針對外周苯并二氮(benzodiazepine)受體的親和力(PBR或P位點(diǎn))。但仍需要尋找和開發(fā)顯示出良好體內(nèi)活性的產(chǎn)品。本發(fā)明就是基于這一目的，提供了一種化合物具有體內(nèi)和體外的外周苯并二氮受體親和力。
發(fā)明的概述本發(fā)明首先提供了具有下列通式(I)的化合物。
本發(fā)明還提供了通式(I)化合物的制備方法。
本發(fā)明進(jìn)一步提供可用作合成通式(I)化合物的中間體的化合物。
本發(fā)明還提供了具有通式(I)的化合物在醫(yī)藥產(chǎn)品或藥物組合物中的用途。
本發(fā)明的化合物具有通式(I)的結(jié)構(gòu) 其中X代表氫或鹵素原子；R1代表一個氫原子或一個(C1～C4)烷基，R2和R3可互相獨(dú)立地代表一個氫原子和一個(C1～C4)烷基，或R2和R3與它們所連接的氮原子一起形成一個吡咯烷基，哌啶基，嗎啉基或4-(C1～C4)烷基哌嗪基，
Het代表一個雜芳基，其為吡啶基，喹啉基，異喹啉基，嘧啶基，吡嗪基或噠嗪基類型的基團(tuán)，其上可以帶有一個或多個鹵素原子和/或一個或多個(C1～C4)烷基和/或(C1～C4)烷氧基。
本發(fā)明的化合物以堿或酸加成鹽的形式存在。這種加成鹽構(gòu)成了本發(fā)明的一部分。
這些鹽較好用藥學(xué)上可接受的酸制得，盡管適用于例如純化或分離式(I)化合物的其它酸的鹽同樣構(gòu)成本發(fā)明的一部分。
通式(I)的化合物可以水合物或溶劑化物的形式存在；也就是和一分子和更多分子數(shù)的水分子或溶劑分子結(jié)合。這些水合物和溶劑化物同樣也成為本發(fā)明的一部分。
在本發(fā)明的文本中，鹵素原子是指氟、氯、溴和碘；(C1～C4)烷基是指直鏈和支鏈的飽和脂族基，含1至4個碳原子。舉例而言可以是甲基、乙基、丙基、異丙基，丁基，異丁基和叔丁基；(C1～C4)烷氧基指帶有1至4個碳原子的氧基團(tuán)，其被如上所述烷基所取代；在本發(fā)明的通式(I)的化合物中，優(yōu)選的化合物是X代表鹵素原子；和/或R1代表一個(C1～C4)烷基；和/或R2和R3可互相獨(dú)立地代表一個(C1～C4)烷基，或R2和R3與它們所連接的氮原子一起形成一個吡咯烷基或4-(C1～C4)烷基哌嗪基；和/或Het代表一個吡啶基類型的雜芳基，其上可以帶有一個或多個鹵素原子和/或一個或多個(C1～C4)烷基和/或(C1～C4)烷氧基。
更好的是，X，R1，R2，R3和Het全為如上優(yōu)選化合物中所定義的化合物。最好的是，X是氯原子，R1是甲基。
在本發(fā)明所提供的通式(I)化合物中，舉例而言，本發(fā)明的化合物為如下所列1)7-氟-N，N，5-三甲基-4-氧代-3-(吡啶-2-基)-3，5-二氫-4H-噠嗪并[4，5-b]吲哚-1-乙酰胺2)鹽酸7-氟-N，N，5-三甲基-4-氧代-3-(吡啶-3-基)-3，5-二氫-4H-噠嗪并[4，5-b]吲哚-1-乙酰胺(1∶1)3)鹽酸7-氟-N，N，5-三甲基-4-氧代-3-(吡啶-4-基)-3，5-二氫-4H-噠嗪并[4，5-b]吲哚-1-乙酰胺(1∶1)
4)7-氯-N，N，5-三甲基-4-氧代-3-(吡啶-2-基)-3，5-二氫-4H-噠嗪并[4，5-b]吲哚-1-乙酰胺5)7-氯-N，N，5-三甲基-4-氧代-3-(吡啶-3-基)-3，5-二氫-4H-噠嗪并[4，5-b]吲哚-1-乙酰胺6)鹽酸7-氯-N，N，5-三甲基-4-氧代-3-(吡啶-3-基)-3，5-二氫-4H-噠嗪并[4，5-b]吲哚-1-乙酰胺(1∶1)7)鹽酸7-氯-N，N，5-三甲基-4-氧代-3-(吡啶-4-基)-3，5-二氫-4H-噠嗪并[4，5-b]吲哚-1-乙酰胺(1∶1)8)7-氯-N，N，5-三甲基-4-氧代-3-(6-甲基吡啶-3-基)-3，5-二氫-4H-噠嗪并[4，5-b]吲哚-1-乙酰胺9)7-氯-N，N-二乙基-5-甲基-4-氧代-3-(吡啶-3-基)-3，5-二氫-4H-噠嗪并[4，5-b]吲哚-1-乙酰胺10)鹽酸4-甲基-1-[2-(7-氯-5-甲基-3-(吡啶-3-基)-4-氧代-3，5-二氫-4H-噠嗪并[4，5-b]吲哚-1-基]乙酰-1-基]哌嗪(1∶1)11)1-[2-[7-氯-5-甲基-3-(吡啶-3-基)-4-氧代-3，5-二氫-4H-噠嗪并[4，5-b]吲哚-1-基]乙酰-1-基]吡咯烷12)鹽酸1-[2-[7-氯-5-甲基-3-(吡啶-4-基)-4-氧代-3，5-二氫-4H-噠嗪并[4，5-b]吲哚-1-基]乙酰-1-基]吡咯烷(1∶1)具通式(1)的化合物可用下列方法制備。
在本說明書的下列部分中，中間體化合物(II)，(III)，(IV)和(V)是下列流程中所示的化合物。
反應(yīng)流程 在室溫下，在溶劑(如二氯乙烷)中，在Lewis酸(如四氯化鈦)存在的條件下，使通式(II)的化合物(其中X和R1如上所定義，R′代表一個(C1～C4)烷基)經(jīng)通式為ClCOCH2CO2R″的3-氯-3-氧代丙酸酯處理(其中R″為C1-4烷基)，得到如通式(III)的二酯。
在催化劑，如4-(二甲基氨基)吡啶，的存在下，通過通式為HNR2R3作用(其中R2和R3如上定義)將通式(III)的二酯中的酮酯官能團(tuán)轉(zhuǎn)化為酮酰氨得到通式(IV)化合物。
根據(jù)第一條制備路線，在極性溶劑中，在酸存在下，通式(IV)化合物和雜芳基肼反應(yīng)，得到通式(I)的酰胺。
根據(jù)第二條制備路線，在催化劑量的酸存在下，通式(IV)的化合物用肼處理并在溶劑(如甲苯)中加熱，生成通式(V)噠嗪并吲哚化合物。最后在通式(V)噠嗪并吲哚化合物上發(fā)生N-芳基化反應(yīng)，反應(yīng)是在雜芳基鹵化物或雜芳基硼酸衍生物和金屬鹽(如銅鹽)的存在下進(jìn)行的，以生成通式(I)化合物。
上面所用的試劑均可從市場上購得，或在文獻(xiàn)中有描述，或用文獻(xiàn)所述方法或本領(lǐng)域普通技術(shù)人員已知的方法制備。
更具體地說，帶有雜芳基基團(tuán)的硼酸衍生物可以用與文獻(xiàn)(Synth.Commun.1996，26，3543和WO 9803484中公開的方法相似的方法進(jìn)行制備。
當(dāng)X為氯原子時，通式(II)原料化合物的制備在文件WO-A-0044751中有闡述。在X為氟原子的情況中，通式(II)化合物用相似的方法從6-氟吲哚-2-羧酸甲酯起始制備，其在文獻(xiàn)(J.Med.Chem.2000，43，4701)中有描述。
本發(fā)明還提供了通式(III)化合物， 其中X為一個氫或鹵素原子，R1為一個氫原子或一個(C1～C4)烷基，R′和R”，每個可獨(dú)立地為一個(C1～C4)烷基，該式(II)化合物可用作制備通式(I)化合物的合成中間體。
本發(fā)明還提供了通式(IV)化合物， 其中X為一個氫或鹵素原子，R1為一個氫原子或一個(C1～C4)烷基，R′為一個(C1～C4)烷基，R2和R3，每個可獨(dú)立地為一個氫原子或一個(C1～C4)烷基，或R2和R3與帶有這些基團(tuán)的氮原子一起形成一個吡咯烷基，哌啶基，嗎啉基或4-(C1～C4)烷基哌嗪基；該式(IV)化合物可用作制備通式(I)化合物的合成中間體。
本發(fā)明還提供了通式(V)化合物， 其中X為一個氫或鹵素原子，R1為一個氫原子或一個(C1～C4)烷基，R2和R3，每個可獨(dú)立地為一個氫原子或一個(C1～C4)烷基，或R2和R3與帶有這些基團(tuán)的氮原子一起以形成一個吡咯烷基，哌啶基，嗎啉基或4-(C1～C4)烷基哌嗪基；該式(V)化合物可用作制備通式(I)化合物的合成中間體。
下面的實施例闡述了本發(fā)明化合物的制備。這些實施例不是限制性的，只是闡述本發(fā)明。舉例的化合物的編號和隨后的列表中的化合物相對應(yīng)，該表中列明了本發(fā)明化合物的化學(xué)結(jié)構(gòu)和物理特性。元素分析，紅外光譜，核磁共振譜確認(rèn)獲得的化合物的結(jié)構(gòu)。
具體實施例方式
實施例1(化合物1)7-氟-N，N，5-三甲基-4-氧代-3-(吡啶-2-基)-3，5-二氫-4H-噠嗪并[4，5-b]吲哚-1-乙酰胺1.1.6-氟-1-甲基-1H-吲哚-2-羧酸甲酯在環(huán)境溫度下將7.9g(197mmol)NaH(預(yù)先用石油醚沖洗)和36.1g(176mmol)6-氟-1H-吲哚-2-羧酸甲酯(含10％至20％6-氟-1H-吲哚-2-羧酸乙酯)在250ml N，N-二甲基甲酰胺中的60％懸浮液在室溫下攪拌2小時。然后加入在50ml N，N-二甲基甲酰胺中的12ml(193mmol)碘代甲烷，在環(huán)境溫度下攪拌12小時。
將內(nèi)容物倒入冰/水混合物中。加入二氯甲烷，并用鹽酸(1N)中和水相。分離有機(jī)相，用水洗滌，用硫酸鈉干燥，減壓過濾并濃縮。殘渣用硅膠柱色譜純化，溶劑混合物為環(huán)己烷/二氯甲烷50/50至0/100，然后用二氯甲烷/乙酸乙酯100/0至70/30。分離得到32.7g(170mmol)6-氟-1-甲基-1H-吲哚-2-羧酸甲酯白色化合物，含10％至20％6-氟-1-甲基-1H-吲哚-2-羧酸乙酯。
1.23-[6-氟-2-(甲氧基羰基)-1-甲基-1H-吲哚-3-基]-3-氧代丙酸甲酯分批地，將6.5ml(60mmol)3-氯-3-氧代-丙酸甲酯加入6.6ml(60mmol)四氯化鈦的80ml 1，2-二氯乙烷中。此混合物在環(huán)境溫度下攪拌30分鐘。加入含5g(24.1mmol)由步驟1.1中獲得的6-氟-1-甲基-1H-吲哚-2-羧酸甲酯的溶液(含10％至20％6-氟-1-甲基-1H-吲哚-2-羧酸乙酯)并在40攝氏度下攪拌20小時。將混合物倒入冰水中，用二氯甲烷萃取。分離有機(jī)相，用水洗滌，用硫酸鈉干燥，減壓過濾并濃縮。殘渣用硅膠柱色譜純化，洗脫液為環(huán)己烷/二氯甲烷90/10至0/100，然后用二氯甲烷/乙酸乙酯100/0至50/50。得到13g糊狀固體，主要含所述化合物。在后續(xù)合成中它未經(jīng)進(jìn)一步處理即投入使用。
1.3N，N-二甲基-3-[6-氟-2-(甲氧基羰基)-1-甲基-1H-吲哚-3-基]-3-氧代丙酰胺將一股氣態(tài)二甲基胺通入13g(44.4mmol)步驟1.2中獲得的3-[6-氟-2-(甲氧基羰基)-1-甲基-1H-吲哚-3-基]-3-氧代丙酸甲酯和在80ml甲苯中的0.2g(1.63mmol)4-(N，N-二甲基)氨基吡啶的混合物中。馬上裝上頂部帶有球形燒瓶的冷凝器，并將溶液在100攝氏度下攪拌20小時?；旌衔锢鋮s至環(huán)境溫度并減壓濃縮。加入200ml二氯乙烷，水和鹽酸(1N)，分離有機(jī)相，用水洗滌，用硫酸鈉干燥，減壓過濾并濃縮。殘渣用硅膠柱色譜純化(洗脫液環(huán)己烷/二氯甲烷50/50，然后用二氯甲烷/乙酸乙酯100/0至0/100)。分離得到4.6g(14mmol)黃色固體，在后續(xù)合成中它未經(jīng)進(jìn)一步處理即投入使用。
1.47-氟-N，N，5-三甲基-4-氧代-3-(吡啶-2-基)-3，5-二氫-4H-噠嗪并[4，5-b]吲哚-1-乙酰胺將1.4g(4.1mmol)步驟1.3獲得的N，N-二甲基-3-[6-氟-2-(甲氧基羰基)-1-甲基-1H-吲哚-3-基]-3-氧代丙酰胺在40ml無水乙醇中的溶液與幾滴冰醋酸和1.4g(12.8mmol)2-吡啶肼一起加熱回流22小時。
將混合物冷卻并減壓濃縮。加入水和200ml二氯甲烷。加入NaOH溶液使pH＞10。分離有機(jī)相，用水洗滌，用硫酸鈉干燥，減壓過濾并濃縮。殘渣用硅膠柱色譜純化，溶劑混合物為二氯甲烷/乙酸乙酯100/0至0/100，然后用乙酸乙酯/甲醇100/0至90/10。再用裝有中性氧化鋁的色譜純化，溶劑混合物為二氯甲烷/乙酸乙酯100/0至0/100，然后用乙酸乙酯/甲醇100/0至90/10，得到固體，用二乙基醚洗滌。得到0.25g(0.66mmol)白色固體的化合物。
熔點(diǎn)222-223攝氏度，M+H+380實施例2(化合物6)鹽酸7-氯-N，N，5-三甲基-4-氧代-3-(吡啶-3-基)-3，5-二氫-4H-噠嗪并[4，5-b]吲哚-1-乙酰胺2.13-[6-氯-2-(甲氧基羰基)-1-甲基-1H-吲哚-3-基]-3-氧代丙酸乙酯將溶于70ml 1，2-二氯乙烷中的6.2ml(48.4mmol)3-氯-3-氧代丙酸乙酯的溶液冷卻至0攝氏度，分成小批量地加入5.3ml(48.3mmol)四氯化鈦，混合物在0攝氏度下攪拌30分鐘。加入4.3g(19.2mmol)6-氯-1-甲基-1H-吲哚-2-羧酸甲酯在35ml 1，2-二氯乙烷中的溶液，混合物在環(huán)境溫度下攪拌12小時。將它倒入冰水中并用二氯甲烷萃取，分離有機(jī)相，用水洗滌，用硫酸鈉干燥，減壓過濾并濃縮。殘渣用硅膠柱色譜純化(洗脫液環(huán)己烷/乙酸乙酯90/10至80/20)，得到黃色固體，其在庚烷然后在二異丙醚中研制。獲得2.84g(8.4mmol)化合物，其為奶油色固體。
2.23-[6-氯-2-(甲氧基羰基)-1-甲基-1H-吲哚-3-基]-N，N-二甲基-3-氧代丙酰胺將一股氣態(tài)二甲基胺通入15g(44.4mmol)步驟2.1中獲得的3-[6-氯-2-(甲氧基羰基)-1-甲基-1H-吲哚-3-基]-3-氧代丙酸乙酯和0.2g(1.63mmol)4-(N，N-二甲基)氨基吡啶在100ml甲苯中的混合物，馬上裝上頂部有球形燒瓶的冷凝器，并將混合物在100攝氏度下減壓攪拌20小時。混合物冷卻至環(huán)境溫度并減壓濃縮。殘渣用硅膠柱色譜純化(洗脫液環(huán)己烷/二氯甲烷50/50，然后用二氯甲烷/乙酸乙酯100/0至0/100)。得到3.8g黃色固體，將其在二氯甲烷/乙酸乙酯混合物中重結(jié)晶。
得到1.8g(5.3mmol)黃白色固體。
2.37-氯-N，N，5-三甲基-4-氧代-3，5-二氫-4H-噠嗪并[4，5-b]吲哚-1-乙酰胺在1.8ml(36.8mmol)單水合肼及催化劑量的p-甲苯磺酸存在下將步驟2.2中獲得的1.7g(5.2mmol)3-[6-氯-2-(甲氧基羰基)-1-甲基-1H-吲哚-3-基]-N，N-二甲基-3-氧代丙酰胺在150ml甲苯中的溶液在90攝氏度下保溫24小時。此混合物經(jīng)冷卻，經(jīng)過濾收集不溶物并用水洗滌，再用二異丙醚洗滌，再進(jìn)行減壓干燥。分離得到1.70g(5.2mmol)化合物，為白色固體。
熔點(diǎn)＞300攝氏度。
2.4鹽酸7-氯-N，N，5-三甲基-4-氧代-3-(吡啶-3-基)-3，5-二氫-4-氫-噠嗪并[4，5-b]吲哚-1-乙酰胺將0.2g(0.63mmol)步驟2.3中獲得的7-氯-N，N，5-三甲基-4-氧代-3，5-二氫-4H-噠嗪并[4，5-b]吲哚-1-乙酰胺溶于15mlN-甲基吡咯烷酮中。在環(huán)境溫度下，氬氣氛中加入0.11ml(1.4mmol)吡啶，0.19ml(1.4mmol)三乙胺，1g分子篩，0.24g(1.3mmol)醋酸銅和0.22g(1.4mmol)2-(吡啶-3-基)-1，3，2-二氧雜硼烷。反應(yīng)24小時后濾除不溶物，溶液與0.11ml(1.4mmol)吡啶，0.19ml(1.4mmol)三乙胺，1g分子篩，0.24g(1.3mmol)醋酸銅和0.22g(1.4mmol)2-(吡啶-3-基)-1，3，2-二氧雜硼烷混和。將反應(yīng)物再攪拌24小時。過濾去除不溶物，濾液經(jīng)減壓除去溶劑而濃縮。加入二氯甲烷和水。水相用二氯甲烷萃取，合并有機(jī)相并用水洗滌。其用硫酸鈉干燥，減壓過濾并濃縮。殘渣用硅膠色譜柱純化(洗脫液二氯甲烷，然后用乙酸乙酯/甲醇100/0至80/20)。所得的固體溶于二氯甲烷/甲醇混合物中，加入乙酸乙酯，并部分濃縮該混合物。過濾分離固體并用乙醇和二氯甲烷混合物進(jìn)行重結(jié)晶。得到110mg 7-氯-N，N，5-三甲基-4-氧代-3-(吡啶-3-基)-3，5-二氫-4H-噠嗪并[4，5-b]吲哚-1-乙酰胺(化合物5)，為白色固體。
熔點(diǎn)255-256攝氏度。
如下得到鹽酸鹽溶液將上述所得到的固體溶解在甲醇和二氯甲烷混合物中，加入鹽酸在2-丙醇中的5N溶液，在乙醇中重結(jié)晶后，分離得到0.09g(0.20mmol)，為白色固體混合物。
熔點(diǎn)250-252攝氏度，M+H+396。
實施例3(化合物10)鹽酸4-甲基-1-[2-(7-氯-5-甲基-4-氧代-3-(吡啶-3-基)-3，5-二氫-4H-噠嗪并[4，5-b]吲哚-1-基]乙酰-1-基]哌嗪(1∶1)3.1[3-(6-氯-2甲氧基羰基)-1-甲基-1H-吲哚-3-基]-3-氧代-1-丙基(propion-1-yl)]-4-甲基哌嗪在3.7ml(34mmol)N-甲基哌嗪和110mg(0.9mmol)4-(N，N-二甲基氨基)吡啶存在下，將2.84g(8.4mmol)實施例2、步驟2.1中得到的3-[6-氯-2-(甲氧基羰基)-1-甲基-1H-吲哚-3-基]-3-氧代丙酸乙酯在160ml甲苯中的溶液加熱回流12小時。混合物冷卻至環(huán)境溫度，加入100ml二氯甲烷，80ml水和10ml 20％氨水。分離有機(jī)相，水相用二氯甲烷萃取(100ml 2次)，合并有機(jī)相。用水洗滌，硫酸鈉干燥，減壓過濾濃縮。殘渣經(jīng)硅膠柱色譜純化(洗脫液二氯甲烷/甲醇100/0至90/10)這樣得到1.68g(4.3mmol)黃色的油。
3.24-甲基-1-[2-(7-氯-5-甲基-4-氧代-3，5-二氫-4H-噠嗪并[4，5-b]吲哚-1-基]乙酰-1-基]哌嗪在1.7ml(35mmol)單水合肼及催化劑量的對甲苯磺酸存在下，將步驟3.1中得到的1.68g(4.3mmol)[3-(6-氯-2甲氧基羰基)-1-甲基-1H-吲哚-3-基]-3-氧代-1-丙基]-4-甲基哌嗪在80ml甲苯中的溶液在90攝氏度加熱24小時。此混合物經(jīng)冷卻，過濾收集不溶物并用水、二異丙基醚洗滌，再用減壓干燥。
分離得到1.43g(3.8mmol)化合物，為白色固體。
熔點(diǎn)＞300攝氏度。
3.3鹽酸4-甲基-1-[2-(7-氯-5-甲基-4-氧代-3-(吡啶-3-基)-3，5-二氫-4H-噠嗪并[4，5-b]吲哚-1-基]乙酰-1-基]哌嗪(1∶1)將步驟3.2中得到的0.45g(1.2mmol)4-甲基-1-[2-(7-氯-5-甲基-4-氧代-3，5-二氫-4H-噠嗪并[4，5-b]吲哚-1-基]乙酰-1-基]哌嗪溶于30ml N-甲基吡咯烷中。在環(huán)境溫度下，氬氣氛中加入0.2ml(2.4mmol)吡啶，0.34ml(2.4mmol)三乙胺，0.30g分子篩，0.44g(2.4mmol)醋酸銅和0.39g(2.4mmol)2-(吡啶-3-基)-1，3，2-二氧雜硼烷。反應(yīng)24小時后濾除不溶物，溶液與0.2ml(2.4mmol)吡啶，0.34ml(2.4mmol)三乙胺，0.30g分子篩，0.44g(2.4mmol)醋酸銅和0.39g(2.4mmol)2-(吡啶-3-基)-1，3，2-二氧雜硼烷混和。反應(yīng)再攪拌進(jìn)行24小時。過濾去除不溶物，濾液經(jīng)減壓除去溶劑而濃縮。加入二氯甲烷和水。水相用二氯甲烷萃取，合并有機(jī)相并用水洗滌。其用硫酸鈉干燥，減壓濃縮。殘渣用硅膠色譜柱純化(洗脫液二氯甲烷/甲醇100/0至90/10)。得到白色的固體。如下制得其鹽酸鹽，將上述所得到的固體溶解在2-丙醇和甲醇的混合物中，加入鹽酸在2-丙醇中的0.1N溶液，在2-丙醇和甲醇混合物中重結(jié)晶后，分離得到0.34g(0.70mmol)化合物，為白色固體熔點(diǎn)287攝氏度(分解)，M+H+451。
實施例4(化合物8)7-氯-N，N，5-三甲基-4-氧代-3-(6-甲基吡啶-3-基)-3，5-二氫-4H-噠嗪并[4，5-b]吲哚-1-乙酰胺將0.4g(1.25mmol)實施例2步驟2.3中得到的7-氯-N，N，5-三甲基-4-氧代-3，5-二氫-4H-噠嗪并[4，5-b]吲哚-1-乙酰胺溶于45ml N-甲基吡咯烷酮中，在環(huán)境溫度下，氬氣氛中加入0.2ml(2.5mmol)吡啶，0.35ml(2.5mmol)三乙胺，0.40g分子篩，0.45g(2.5mmol)醋酸銅和0.80g(3.6mmol)4，4，5，5-四甲基-2-(6-甲基吡啶-3-基)-1，3，2-二氧雜硼烷。反應(yīng)24小時后，溶液與0.2ml(2.5mmol)吡啶，0.35ml(2.5mmol)三乙胺，0.40g分子篩，0.45g(2.5mmol)醋酸銅和0.80g(3.6mmol)4，4，5，5-四甲基-2-(6-甲基吡啶-3-基)-1，3，2-二氧雜硼烷混合。反應(yīng)再攪拌進(jìn)行24小時。過濾去除不溶物，濾液經(jīng)減壓除去溶劑而濃縮。加入二氯甲烷和水。水相用二氯甲烷萃取，合并有機(jī)相并用水洗滌。其用硫酸鈉干燥，減壓過濾并濃縮。殘渣用硅膠色譜柱純化(洗脫液二氯甲烷/甲醇100/0至80/20)。得到的固體在異丙醇和甲醇混合物中重結(jié)晶后，分離得到0.12g(0.29mmol)化合物，為白色固體熔點(diǎn)253～255攝氏度，M+H+410下表列明了本發(fā)明中的一些化合物的化學(xué)結(jié)構(gòu)和物理特性在這些表格中“鹽”的一欄里，“HCl”是指鹽酸鹽，“-”是指化合物是堿的形式。在后面也注明了酸堿的摩爾比?？s寫Dec表明在所給定的溫度時，化合物已分解了。
表 本發(fā)明的化合物形成的制劑經(jīng)測試顯示有作為治療活性物質(zhì)的優(yōu)點(diǎn)。
本發(fā)明的化合物還顯示出水溶性，其能提高體內(nèi)的活性。
Ro5-4864和外周苯并二氮受體(PBR或P位點(diǎn))結(jié)合的研究測定本發(fā)明化合物對于BPR或p位點(diǎn)(苯并二氮外周型結(jié)合位點(diǎn))的親和力。
在[3H]Ro5-4864存在下孵育大鼠腎細(xì)胞膜時，可選擇性標(biāo)記p位點(diǎn)受體。在與這些受體親和力的體外研究中，本發(fā)明化合物作為研究對象。
所用的動物是雄性SD大鼠(Iffa Cerdo)，體重180至300克(mg)。斷頭后，將腎剝離，在4攝氏度下用Polytron勻漿機(jī)將組織勻漿，在6/10最高速度下作用2分鐘，緩沖液為35倍體積的50mM Na2HPO4磷酸鹽緩沖液，用Na2HPO4將pH調(diào)至7.5，用紗布過濾細(xì)胞膜勻漿，并用10倍體積的緩沖液稀釋。
將100微升細(xì)胞膜勻漿與濃度為0.5nM的[3H]Ro5-4864(比強(qiáng)度70～90Ci/mmol，新英格蘭核子公司)一起孵育，用含待測化合物的緩沖液將終體積調(diào)為1ml。
在0攝氏度下孵育3小時后，用Whatman GF/B過濾器過濾收集細(xì)胞膜，用4.5ml冷(0攝氏度)的孵育緩沖液洗滌兩次。過濾器截留的放射性活性用液體閃爍儀測定。
對于待測化合物的每一濃度，均進(jìn)行[3H]Ro5-4864結(jié)合的抑制百分率的測定，并進(jìn)行IC50(抑制50％比結(jié)合力的濃度)的測定。本發(fā)明中最好的化合物的IC50介于1nM～200nM之間。
因此，本發(fā)明化合物就是對外周苯并二氮受體有親和力的配體。
親神經(jīng)性活件的研究4日齡大鼠面神經(jīng)切斷后運(yùn)動神經(jīng)元存活的測試在未發(fā)育的大鼠的面神經(jīng)受損害后，面神經(jīng)的運(yùn)動神經(jīng)元因凋亡而發(fā)生神經(jīng)元死亡。用組織學(xué)和神經(jīng)元計數(shù)法的方法來評價神經(jīng)元的存活。
未發(fā)育的4日齡的大鼠用戊巴比妥麻醉(3mg/kg i.p.)。在莖突乳突孔出口處暴露并切斷右頰的面神經(jīng)。蘇醒后，幼小的大鼠被送回到它們的媽媽處，治療7天，每日給藥一次或兩次，口腹或腹膜內(nèi)注射，劑量為1～10mg/kg。損傷后7天，動物被斷頭。其腦在-40攝氏度異戊烷中冰凍。面神經(jīng)用冷凍切割機(jī)切成10微米的切片。運(yùn)動神經(jīng)元用甲苯基紫染色再用Histo軟件(BiocomTM)計數(shù)。
在這個模型中，本發(fā)明的化合物提高神經(jīng)元生存10～30％。
本次測試的結(jié)果表明本發(fā)明的化合物是有促進(jìn)神經(jīng)再生的功能的。
因此，本發(fā)明化合物可用于制造藥物產(chǎn)品。
因此，根據(jù)本發(fā)明的另一方面，本發(fā)明還提供了含有通式(I)或其與藥學(xué)上可接受的酸形成的加成鹽或通式(I)化合物的水合物或溶劑化物的醫(yī)藥用產(chǎn)品。
這些醫(yī)藥產(chǎn)品可用于治療，尤其是用于預(yù)防和/或治療多種類型的外周神經(jīng)疾病，如創(chuàng)傷性或缺血型神經(jīng)疾病，感染性、酒精性、藥物性或遺傳性神經(jīng)疾病，以及運(yùn)動神經(jīng)元病癥，如脊柱萎縮癥和肌萎縮性(脊髓)側(cè)索硬化。這些醫(yī)藥用產(chǎn)品還被發(fā)現(xiàn)用于治療中樞神經(jīng)系統(tǒng)的神經(jīng)退化疾病，既可以是急性的(如腦血管意外以及顱損傷和脊髓損傷)，也可以是慢性的(如自身免疫疾病(多發(fā)性硬化)阿爾茨海默病和帕金森病和任何其他一些被認(rèn)為施用神經(jīng)營養(yǎng)因子具有治療作用的疾病)。
根據(jù)本發(fā)明的化合物還可以用于治療急性或慢性腎功能不全，腎小球腎炎，糖尿病腎病，缺血性心臟病和心臟功能不全，心肌梗死，下肢缺血，冠狀動脈血管痙攣，心絞痛，和心臟瓣膜相關(guān)的疾病，炎性心臟疾病，心臟毒性藥物造成的副作用或心臟手術(shù)后的副作用，動脈粥樣硬化及其血栓栓塞并發(fā)癥，再狹窄，移植排斥，或與平滑肌細(xì)胞不正確的增殖或不正確的遷移相關(guān)的疾病。
此外，文獻(xiàn)中的最近數(shù)據(jù)表明，外周苯二氮受體在調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖和癌癥化過程中可能起到重要的作用。通常，與正常組織相比，在多種類型的腫瘤和癌癥中，觀察到外周苯二氮受體的密度上升。
在人星形細(xì)胞瘤中，外周苯二氮受體的表達(dá)程度與腫瘤的惡性程度、增殖指數(shù)和病人的存活相關(guān)。在人腦瘤中，外周苯二氮受體數(shù)量的增加被用作醫(yī)學(xué)成像的診斷指征和作為偶聯(lián)物的治療靶目標(biāo)，其中該偶聯(lián)物由苯二氮受體的配體和細(xì)胞增殖抑制藥物構(gòu)成。在卵巢癌和乳房癌中也觀察到高密度的苯二氮受體。關(guān)于后者，已表明外周苯二氮受體的表達(dá)程度與腫瘤的發(fā)展可能性有關(guān)；此外，外周苯二氮受體激動劑的存在，會刺激哺乳動物癌細(xì)胞系的生長。
所有的這些結(jié)果，提示外周苯二氮受體在腫瘤化過程中發(fā)揮有害的功能，這提供了尋找合成配體的有關(guān)基礎(chǔ)，而該配體對外周苯二氮受體是特異的并能夠阻斷其效應(yīng)。
本化合物還因此可用于治療腫瘤和癌癥。
外周苯二氮受體也在皮膚中存在，這樣，根據(jù)本發(fā)明使用的化合物可以用于預(yù)防或治療皮膚的應(yīng)激(stresses)。
皮膚的應(yīng)激是指會引起損傷(尤其是對表皮的損傷)的多種狀況，而并不管引起這些應(yīng)激的因子是什么。對機(jī)體而言，這些因子可以是外部的和/或內(nèi)部的，如化學(xué)因子或自由基因子，或還有外部的，如紫外線輻射。因此，根據(jù)本發(fā)明使用的化合物可用于預(yù)防和對抗皮膚的刺激，干燥斑，紅斑，感覺遲鈍(disesthesic sensations)，感覺發(fā)熱，皮膚和/或粘膜騷癢，或老化，還可以用于皮膚疾病，如銀屑病、癢疹疾病、皰疹、光皮膚病(photodermatoses)、特應(yīng)性皮炎、接觸性皮炎、苔癬、騷癢、蟲咬、纖維變性和其他膠原化膿性疾病，免疫性疾病和其他皮膚性癥狀，如濕疹。
本發(fā)明的化合物還可以用于預(yù)防和治療慢性炎性疾病，尤其是類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎根據(jù)另一方面，本發(fā)明還提供了含至少一種通式(I)化合物為活性物質(zhì)的藥物組合物。這些藥物組合物含有一份有效劑量的至少一種本發(fā)明的化合物(其形式為堿、藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑化物或水合物)，和可選的至少一種藥學(xué)上可接受的賦形劑。所述的賦形劑是根據(jù)劑型和所需的給藥方法，從常規(guī)賦形劑中選出，這些都是有經(jīng)驗的工作人員熟知的。
在本發(fā)明用于口服、舌下、皮下、肌內(nèi)、靜脈內(nèi)、表面局部、病灶局部或動脈給藥的藥物組合物中，上述通式(I)的活性成分或其鹽、溶劑化物或水合物，如果合適，可以用單位給藥劑型，作為一種與至少一種常規(guī)藥物賦形劑相混的混合物形式，施用于動物和人類，從而預(yù)防或治療上述失調(diào)和疾病。
單位給藥劑型可以是，例如片劑、膠囊、顆粒劑、粉劑、口服的或可注射的溶液或混懸液、透皮貼劑，用于舌下、頰面、氣管內(nèi)、眼內(nèi)、鼻內(nèi)給藥形式或通過吸入、局部、透皮、皮下、肌內(nèi)或靜脈給藥形式施用的劑型。對于表面局部用藥，可以是霜劑、凝膠、軟膏、洗液或洗眼劑。這些藥物制劑是根據(jù)所述領(lǐng)域常規(guī)方法進(jìn)行制備。
所述單位劑型的劑量是保證每日施用量為0.001-20mg活性成分/千克體重，依劑型而定。
也可能有適宜用較高或較低的劑量的特殊情況；這樣的劑量沒有超出本發(fā)明的范圍。根據(jù)常規(guī)的實踐，對于每個患者的合適劑量是醫(yī)生依據(jù)給藥方式、病人的體重和反應(yīng)而確定的。
根據(jù)另一方面，本發(fā)明還提供了一種治療上述病癥的方法，包括向患者施用有效劑量的本發(fā)明化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或水合物或溶劑化物。
權(quán)利要求
1.通式(I)的化合物， 其中X代表氫或鹵素原子；R1代表氫原子或(C1～C4)烷基，R2和R3可互相獨(dú)立地代表氫原子或(C1～C4)烷基，或R2和R3與它們所連接的氮原子一起形成一個吡咯烷基，哌啶基，嗎啉基或4-(C1～C4)烷基哌嗪基，和Het代表一個雜芳基，其為吡啶基，喹啉基，異喹啉基，嘧啶基，吡嗪基或噠嗪基形式的基團(tuán)，其上可以帶有一個或多個鹵素原子和/或一個或多個(C1～C4)烷基和/或(C1～C4)烷氧基，它以堿，酸加成鹽，或者溶劑化物或水合物的形式存在。
2.如權(quán)利要求1所述的化合物，其特征為X代表鹵素原子。
3.如權(quán)利要求1或2所述的化合物，其特征為R1代表(C1～C4)烷基。
4.如權(quán)利要求1至3中任一項所述的化合物，其特征為R2和R3可互相獨(dú)立地代表(C1～C4)烷基，或R2和R3與它們所連接的氮原子一起形成一個吡咯烷基或4-(C1～C4)烷基哌嗪基。
5.如權(quán)利要求1至4中任一項所述的化合物，其特征為Het代表為吡啶基形式的雜芳基，其上可以帶有一個或多個鹵素原子和/或一個或多個(C1～C4)烷基和/或(C1～C4)烷氧基。
6.如權(quán)利要求1至5中任一項所述的化合物，其特征為X為氯原子，R1為甲基。
7.通式(I)化合物的制備方法， 其中X代表氫或鹵素原子；R1代表氫原子或(C1～C4)烷基，R2和R3可互相獨(dú)立地代表氫原子和(C1～C4)烷基，或R2和R3與它們所連接的氮原子一起形成一個吡咯烷基，哌啶基，嗎啉基或4-(C1～C4)烷基哌嗪基，和Het代表一個雜芳基，其為吡啶基，喹啉基，異喹啉基，嘧啶基，吡嗪基或噠嗪基形式的基團(tuán)，其上可以帶有一個或多個鹵素原子和/或一個或多個(C1～C4)烷基和/或(C1～C4)烷氧基，其特征在于在酸存在時，在極性溶劑中使通式(IV)的化合物 其中X，R1，R2和R3如上所定義，R′為(C1～C4)烷基，和雜芳基肼進(jìn)行反應(yīng)。
8.如權(quán)利要求7所述的方法，其特征在于通式(IV)的化合物， 其中X，R1，R2，R3和R′如上所定義，是在催化劑，如4-(二甲基氨基)吡啶，的存在下，通過通式(III)化合物 其中X，R1和R′如上所定義，R”為一個(C1～C4)烷基，與通式HNR2R3的胺進(jìn)行反應(yīng)制得的，其中R2和R3如上定義。
9.通式(I)化合物的制備方法， 其中X代表氫或鹵素原子；R1代表氫原子或(C1～C4)烷基，R2和R3可互相獨(dú)立地代表氫原子或(C1～C4)烷基，或R2和R3與它們所連接的氮原子一起形成一個吡咯烷基，哌啶基，嗎啉基或4-(C1～C4)烷基哌嗪基，和Het代表一個雜芳基，其為吡啶基，喹啉基，異喹啉基，嘧啶基，吡嗪基或噠嗪基形式的基團(tuán)，其上可以帶有一個或多個鹵素原子和/或一個或多個(C1～C4)烷基和/或(C1～C4)烷氧基，所述方法包括如下步驟在通式(V)化合物上進(jìn)行N-雜芳基化反應(yīng)， 其中X，R1，R2和R3如上所定義，反應(yīng)是在雜芳基鹵，或雜芳基硼酸衍生物和金屬鹽，如銅鹽，的存在下進(jìn)行的。
10.如權(quán)利要求9所述的方法，其特征在于通式(V)化合物 其中X，R1，R2和R3如上所定義，是在催化量的酸的存在下使通式(IV)化合物 其中X，R1，R2，R3如上所定義，R′為(C1～C4)烷基，與肼在溶劑，如甲苯，中加熱進(jìn)行反應(yīng)而得到的。
11.通式(III)化合物， 其中X為一個氫原子或鹵素原子R1為一個氫原子或一個(C1～C4)烷基R′和R”，每個相互獨(dú)立地為一個(C1～C4)烷基。
12.通式(IV)化合物， 其中X代表氫或鹵素原子；R1代表一個氫原子或一個(C1～C4)烷基，R′代表(C1-C4)烷基；R2和R3可互相獨(dú)立地代表氫原子或(C1～C4)烷基，或R2和R3與它們所連接的氮原子一起形成一個吡咯烷基，哌啶基，嗎啉基或4-(C1～C4)烷基哌嗪基。
13.通式(V)化合物， 其中X代表氫或鹵素原子；R1代表一個氫原子或一個(C1～C4)烷基，R2和R3可互相獨(dú)立地代表氫原子或(C1～C4)烷基，或R2和R3與它們所連接的氮原子一起形成一個吡咯烷基，哌啶基，嗎啉基或4-(C1～C4)烷基哌嗪基。
14.如權(quán)利要求1～6中任一項所述的化合物，或其藥學(xué)上可接受的鹽，或其水合物或溶劑化物，用作醫(yī)藥產(chǎn)品。
15.一種藥物組合物，其特征是它含有至少一種根據(jù)權(quán)利要求1～6中任一項所述的通式(I)化合物，或其藥學(xué)上可接受的鹽，水合物，溶劑化物，其任選地和至少一種藥學(xué)上可接受的賦形劑相組合。
全文摘要
本發(fā)明提供通式(I)化合物，其中X為氫或鹵素原子；R
文檔編號A61P9/10GK1656099SQ03812222
公開日2005年8月17日 申請日期2003年4月2日 優(yōu)先權(quán)日2002年4月3日
發(fā)明者J·弗羅伊森特, B·馬拉寶特, F·馬古特, F·普齊 申請人:沙諾費(fèi)－阿方蒂