專利名稱：全溶干花豆及其抗應激功能的制作方法
技術領域：
本發(fā)明的干花豆粉提取方法不同于傳統(tǒng)的中藥提取方法。
干花豆屬蝶形花科其種名為干花豆(Fardia Caulifloua Hemsl)；主要分布廣東、廣西、云南等華南地區(qū)。據(jù)說，民間作為滋補食品已有400-500年的歷史。本發(fā)明對干花豆提取方法獨特，先將干花豆根干燥粉碎成60目，用低50℃以下熱水提取400目篩網(wǎng)過濾，濾液減壓濃縮，這樣保證活性蛋白、蛋白多糖以及其他生物活性物質(zhì)不會變性，干燥后的干花豆粉100％溶解20-25℃常水中，可制成各種劑型的保健食品，例如片劑、膠囊、軟膠囊、口服液、飲品等。
本發(fā)明對用獨特方法提取的干花豆粉與人參水煎液對照組生理鹽水進行比較，進行抗疲勞、抗寒冷缺氧、抗高溫缺氧、抗低壓(高海拔)缺氧、抗常壓缺氧、小鼠斷頭耐缺氧等實驗，本發(fā)明發(fā)現(xiàn)全溶解干花豆粉與人參同樣具有非常顯著的抗應激功能。
1.全溶解干花豆粉的提取方法實施例1將干花豆根10kg洗凈，晾干，烤干(60℃以下)，粉碎成60目，過篩，加入100升無離子水加熱攪拌至45℃不超過50℃，5分鐘后用400目尼龍布離心甩濾。重復上述操作2次，將3次濾液合并薄膜蒸餾，內(nèi)溫不超過60℃，外溫不超過80℃，濃縮略顯粘稠狀轉入烘箱在80℃以下烘干，粉碎，過80目篩網(wǎng)，包裝1kg/袋(密封不漏氣)。見附

圖1。
2.干花豆粉安全評價抗應激的動物實驗(參見中國專利申請?zhí)?31377696)3.干花豆粉(Fardia Cauliflora Hemsl Powder，縮寫號為FCHP)對ICR小白鼠的抗應激功能實驗以人參作陽性對照實驗組。
3.1 FCHP對小白鼠游泳的抗疲勞實驗
表3.1-1 FCHP水溶液對小鼠游泳時間的影響(X±SD)
***P＜0.013.1.1 注意3.1.1.1 最好是小鼠單只游泳，如果是2只以上同時游泳，應注意觀察，不使小鼠彼此靠近，否則會影響實驗結果。
3.1.1.2 水溫如升高到28-30℃和小鼠負重較輕(5％體重)均會使小鼠游泳時間明顯延長。
3.2 FCHP對小鼠常壓缺氧實驗3.2.1 原理缺氧對機體是一種劣性刺激，影響機體各種代謝，特別是影響機體的氧化供能，最終會導致機體的心腦等重要器官缺氧供能不足而死亡。FCHP和人參都可以提高機體的血氧利用率、降低機體耗氧量。同時，F(xiàn)CHP可擴張血管(特別是冠脈和軟腦膜血管)，改善微循環(huán)，增加供氧量，從而改善機體缺氧狀態(tài)。顯示FCHP大補元氣，氣血益生之補益功效。本實驗以小鼠在常壓缺氧條件下呼吸停止死亡為指標，研究FCHP的耐缺氧作用。
3.2.2 材料動物小鼠。器材200ml磨口廣口瓶、秒表。藥品及試劑FCHP水溶液0.1g/ml，鈉石灰(或等量氫氧化鈉和碳酸鈣)、凡士林。
3.2.3 方法取20只小鼠分別稱重、編號，按體重性別均分為2組。給藥組小鼠每只腹腔注射FCHP和人參水溶液3g/kg，注后立即計時。對照組小鼠每只腹腔注射等容量生理鹽水。注后30分鐘將小鼠放入盛有15g鈉石灰的廣口瓶內(nèi)(每瓶只放1只小鼠)，用凡士林涂抹瓶口蓋嚴，使之不漏氣，立即重新計時。以呼吸停止為指標，觀察小鼠因缺氧而死亡的時間。與對照組比較進行數(shù)理統(tǒng)計，測其顯著性。
3.2.4 結果FCHP可顯著延長小鼠在常壓缺氧條件下的存活時間。說明FCHP有增強小鼠耐用常壓缺氧能力之功效(表3.2.1)表3.2-1FCHP水溶液對小鼠耐常壓缺氧作用(X±SD)
***P＜0.013.3 FCHP對小鼠抗減壓缺氧的作用3.3.1 原理空氣內(nèi)氧分壓隨氣壓降低而降低，所以動物在低壓缺氧時會加速各組織器官缺氧。FCHP作用原理見表3.3-1。
3.3.2 動物小鼠。器材玻璃平衡瓶(1000ml的玻璃瓶)、秒表，玻璃干燥器，抽氣泵。藥品及試劑FCHP水溶液0.1g/ml，鈉石灰、凡士林。
3.3.3 方法按圖2裝好減壓裝置。取20只小鼠(雌雄各半)分別稱重、編號，按體重性別均分為2組。給藥組小鼠每只腹腔注射FCHP和人參水溶液3g/kg，注后立即計時。對照組小鼠每只腹腔注射等容量生理鹽水。注后30分鐘將給藥組和對照組小鼠各5只放入盛有鈉石灰的玻璃干燥器內(nèi)，打開活塞A，關閉活塞B和C，使用機械抽氣泵和平衡瓶、氣壓表相通。開動抽氣泵當氣壓降至26.7kPa(200mmHg)時關閉活塞A，并停止抽氣。打開活塞B使干燥器、平衡瓶和氣壓表相通。以呼吸停止為小鼠死亡指標。待干燥器內(nèi)小鼠死亡半數(shù)時，打開活塞C使干燥器、平衡瓶與大氣相通。分別統(tǒng)計給藥組和對照組的小鼠死亡數(shù)。然后再用給藥組和對照組各剩余的5只小鼠重復上述實驗。最后統(tǒng)計給藥組和對照組小鼠的總死亡數(shù)，計算給藥組和對照組小鼠存活百分率，并用X2測其顯著性。(見說明書附圖2)3.3.4結果FCHP可顯著提高減壓缺氧環(huán)境中小鼠存活百分率，即FCHP有明顯增強小鼠耐減壓缺氧能力之功效(表3.3-1)表3.3-1 FCHP水溶液對小鼠抗低壓缺氧作用
3.3.5 附注小鼠減壓耐缺氧實驗，亦可采用熱氣球由地面升空的方法進行。如將小鼠放在低壓艙內(nèi)，以每分鐘1000米的速度使熱氣球上升到10000米以上高空(氣壓低于26.7kPa(200mmHg))進行減壓耐缺氧實驗。這樣更符合人在高海拔地區(qū)生活的實際情況。另外，本實驗也可用測量動物減壓缺氧半數(shù)死亡時間來評價補益藥對動物耐減壓缺氧能力的影響。
3.4 FCHP對小鼠的抗寒作用3.4.1 原理寒冷是六淫之一，對機體是一種有害刺激，是一種病因。機體可通過神經(jīng)-內(nèi)分泌系統(tǒng)等一系列應激反應驅(qū)逐寒邪維持體溫恒定。當持續(xù)寒冷刺激時，使神經(jīng)-內(nèi)分泌系統(tǒng)功能衰竭，邪盛正衰則體溫隨環(huán)境溫度降低。體內(nèi)氧化還原酶系活性明顯降低，機體腦和心臟等重要器官氧化供能不足就會死亡。FCHP和人參一樣大補元氣，能恢復衰竭的神經(jīng)-內(nèi)分泌系統(tǒng)功能，提高機體對寒冷刺激的反應性，增強機體氧化分解產(chǎn)熱供能過程，而適應寒冷環(huán)境。本實驗以動物在寒冷環(huán)境中的存活時間、存活百分率為指標。
3.4.2 材料動物小鼠。器材冰箱、秒表等。藥品FCHP水溶液和人參水煎液各0.2g/ml。
3.4.3 方法取ICR小白鼠20只，雌雄各半，分別稱重、編號，按體重性別隨機均分2組。給藥組小鼠每只灌胃人參水煎液和FCHP水溶液6g/kg，灌后立即計時。對照組小鼠每只灌胃等容量飲用水。灌胃后30分鐘將小鼠分別放入一5±1℃冰箱內(nèi)，并重新計時。2小時后將小鼠取出，統(tǒng)計各組小鼠存活數(shù)，計算各組小鼠存活百分率。與對照組比較進行t檢驗，測其顯著性。
3.4.4 結果FCHP水溶液可顯著提高小鼠在寒冷中的存活百分率有扶正驅(qū)寒功效。(表3.4-1)
表3.4-1 FCHP水溶液對小鼠抗寒作用
***p＜0.013.4.4.1 注意1、冰箱內(nèi)溫度必須控制在-5℃左右。2、小鼠放入冰箱時應每籠放一只小鼠，以防小鼠互相取暖影響實驗結果。
3.5 FCHP對小鼠的高溫抗缺氧作用3.5.1 原理環(huán)境高溫屬熱邪，熱邪犯內(nèi)使動物各種代謝加強而耗損津血致陰虛，陰虛生內(nèi)火使動物體溫升高。動物體溫持續(xù)高熱近45℃時，體內(nèi)各種酶(蛋白質(zhì))變性失活，臟腑功能衰竭，表現(xiàn)為動物呼吸、循環(huán)等功能停止而死亡。FCHP和人參一樣既可大補元氣，主補五臟，又可生津益血營養(yǎng)臟腑，改善心腦等功能器官的生理功能，延長動物在高溫環(huán)溫中的存活時間，提高存活率。顯示出FCHP能增強動物耐高溫能力。
3.5.2 材料動物小鼠。器材恒溫箱、秒表。藥品FCHP水溶液和人參水煎液各0.1g/ml。
3.5.3 方法取小鼠24只，雌雄各半，分別稱重、編號，按體重性別隨機均分2組。實驗時給藥組和對照組小鼠各取3只，給藥組小鼠每只腹腔注射人參水煎液和FCHP水溶液3g/kg，對照組小鼠每只腹腔注射等容量飲用水。注后30分鐘將小鼠放入250ml錐形瓶密封后置于45±1℃的恒溫槽內(nèi)，立即計時并密切觀察。以呼吸停止為指標，計算小鼠半數(shù)死亡時間，取出恒溫槽內(nèi)全部小鼠，計算各組存活百分率，與對照組比較，用x2測其顯著性。
3.5.4 結果FCHP水溶液可顯著提高小鼠在45℃環(huán)境中的存活率，顯示出FCHP水溶液可明顯增強小鼠耐高溫能力。(表6.1)表3.5-1 FCHP水溶液對小鼠抗高溫缺氧作用
***p＜0.013.5.4.1 注意1、恒溫槽的溫度應恒定在45±1℃，否則會影響實驗結果。2、因要觀察小鼠在恒溫槽內(nèi)半數(shù)死亡時間，故每次放入恒溫槽內(nèi)的小鼠數(shù)不宜過多。
3.6 FCHP對小鼠斷頭耐缺氧的影響3.6.1 實驗方法ICR小鼠52只，隨機分組給藥方法同前。
3.6.2 實驗時間各組連續(xù)灌胃15天，于末次給藥后1小時，將小鼠逐個斷頭，立即按秒表記錄小鼠斷頭后至張口喘氣停止時間作為耐缺氧指標，用T檢驗比較各組與正常對照組的差異。
3.6.3 實驗結果見表3.6-1表3.6-1 FCHP對小鼠斷頭后耐缺氧時間的影響(n＝13X±SD)
與正常對照組比較*P＜0.05，**P＜0.01。
3.6.4 實驗結果討論FCHP的實驗結果表明，小劑量能明顯延長小鼠斷頭張口喘氣時間，而大劑量有明顯的延長趨勢，說明FCHP能增加小鼠的腦血流量和供氧量。
權利要求
1.本發(fā)明提取方法獨特用低于50℃的熱水(無離子水)將干花豆根莖重量比為粉碎成80目1∶250-300(水)，分3次溶解用400目篩網(wǎng)過濾；
2.根據(jù)權利要求1所述，將濾液進行薄膜蒸餾或減壓蒸餾，水浴加熱不得超過80℃；
3.根據(jù)權利要求1所述，其濾液具有非常顯著的抗應激功能；
4.根據(jù)權利要求3所述，抗應激功能包括抗疲勞、抗寒冷、抗高溫缺氧、抗低壓缺氧、抗常壓缺氧以及小鼠斷頭耐缺氧等用途。
全文摘要
本發(fā)明涉及的保健食品與醫(yī)藥領域中的抗應激功能，本品是從天然干花豆根莖中用獨特的生物技術提取的全溶解的干花豆原粉，對人體具有抗應激功能，無任何毒副作用。本發(fā)明還適用于生產(chǎn)片劑、膠囊、保健飲品，特別適合制作抗疲勞的運動飲料的廠家。
文檔編號A61P43/00GK1611228SQ20031010165
公開日2005年5月4日 申請日期2003年10月28日 優(yōu)先權日2003年10月28日
發(fā)明者丁鑑 申請人:丁鑑