專利名稱：全溶石蓮花粉及其抗應(yīng)激功能的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明的石蓮花粉提方法不同于傳統(tǒng)的中藥提取方法。
石蓮花屬景天科其種名為石蓮花(Echeuaria glauca)；主要分布廣東、廣西、云南等華南地區(qū)。據(jù)說，民間作為滋補(bǔ)食品已有近百年的歷史。本發(fā)明對石蓮花提取方法獨(dú)特，先將鮮石蓮花葉莖、根粉碎成漿狀，用低60℃以下熱水提取400目篩網(wǎng)過濾，濾液減壓濃縮，這樣保證活性蛋白、蛋白多糖以及其他生物活性物質(zhì)不會變性，干燥后的石蓮花粉100％溶解20-25℃常水中，可制成各種劑型的保健食品，例如片劑、膠囊、軟膠囊、口服液、飲品等。
本發(fā)明對用獨(dú)特方法提取的石蓮花粉與人參水煎液對照組生理鹽水進(jìn)行比較，進(jìn)行抗疲勞、抗寒冷缺氧、抗高溫缺氧、抗低壓(高海拔)缺氧、抗常壓缺氧、小鼠斷頭耐缺氧等實(shí)驗(yàn)，本發(fā)明發(fā)現(xiàn)全溶解石蓮花粉與人參同樣具有非常顯著的抗應(yīng)激功能。
1.全溶解石蓮花粉的提取方法實(shí)施例1將鮮野生石蓮花根10kg洗凈，晾干，粉碎成漿狀，加入50升無離子水加熱攪拌至60℃不超過70℃，5分鐘后用400目尼龍布離心甩濾。重復(fù)上述操作2次，將3次濾液合并薄膜蒸餾，內(nèi)溫不超過60℃，外溫不超過80℃，濃縮略顯粘稠狀轉(zhuǎn)入烘箱在70℃以下烘干，粉碎，過80目篩網(wǎng)，包裝1kg/袋(密封不漏氣)。
2.石蓮花粉安全評價抗應(yīng)激的動物實(shí)驗(yàn)(參見中國專利申請?zhí)?71002851)見附

圖1。
3.石蓮花粉(Echeuaria glauca powder，縮寫號為EGP)對ICR小白鼠的抗應(yīng)激功能實(shí)驗(yàn)以人參作陽性對照實(shí)驗(yàn)組。
3.1 EGP對小白鼠游泳的抗疲勞實(shí)驗(yàn)
表3.1-1 EGP水溶液對小鼠游泳時間的影響(X±SD)
***P＜0.013.1.1 注意3.1.1.1 最好是小鼠單只游泳，如果是2只以上同時游泳，應(yīng)注意觀察，不使小鼠彼此靠近，否則會影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
3.1.1.2 水溫如升高到28-30℃和小鼠負(fù)重較輕(5％體重)均會使小鼠游泳時間明顯延長。
3.2 EGP對小鼠常壓缺氧實(shí)驗(yàn)3.2.1 原理缺氧對機(jī)體是一種劣性刺激，影響機(jī)體各種代謝，特別是影響機(jī)體的氧化供能，最終會導(dǎo)致機(jī)體的心腦等重要器官缺氧供能不足而死亡。EGP和人參都可以提高機(jī)體的血氧利用率、降低機(jī)體耗氧量。同時，EGP可擴(kuò)張血管(特別是冠脈和軟腦膜血管)，改善微循環(huán)，增加供氧量，從而改善機(jī)體缺氧狀態(tài)。顯示EGP大補(bǔ)元?dú)?，氣血益生之補(bǔ)益功效。本實(shí)驗(yàn)以小鼠在常壓缺氧條件下呼吸停止死亡為指標(biāo)，研究EGP的耐缺氧作用。
3.2.2 材料動物小鼠。器材200ml磨口廣口瓶、秒表。藥品及試劑EGP水溶液0.1g/ml，鈉石灰(或等量氫氧化鈉和碳酸鈣)、凡士林。
3.2.3 方法取20只小鼠分別稱重、編號，按體重性別均分為2組。給藥組小鼠每只腹腔注射EGP和人參水溶液3g/kg，注后立即計(jì)時。對照組小鼠每只腹腔注射等容量生理鹽水。注后30分鐘將小鼠放入盛有15g鈉石灰的廣口瓶內(nèi)(每瓶只放1只小鼠)，用凡士林涂抹瓶口蓋嚴(yán)，使之不漏氣，立即重新計(jì)時。以呼吸停止為指標(biāo)，觀察小鼠因缺氧而死亡的時間。與對照組比較進(jìn)行數(shù)理統(tǒng)計(jì)，測其顯著性。
3.2.4 結(jié)果EGP可顯著延長小鼠在常壓缺氧條件下的存活時間。說明EGP有增強(qiáng)小鼠耐用常壓缺氧能力之功效(表3.2-1)表3.2-1 EGP水溶液對小鼠耐常壓缺氧作用(X±SD)
***P＜0.013.3 EGP對小鼠抗減壓缺氧的作用3.3.1 原理空氣內(nèi)氧分壓隨氣壓降低而降低，所以動物在低壓缺氧時會加速各組織器官缺氧。EGP作用原理見表3.3-1。
3.3.2 動物小鼠。器材玻璃平衡瓶(1000ml的玻璃瓶)、秒表，玻璃干燥器，抽氣泵。藥品及試劑EGP水溶液0.1g/ml，鈉石灰、凡士林。
3.3.3 方法按圖2裝好減壓裝置。取20只小鼠(雌雄各半)分別稱重、編號，按體重性別均分為2組。給藥組小鼠每只腹腔注射EGP和人參水溶液3g/kg，注后立即計(jì)時。對照組小鼠每只腹腔注射等容量生理鹽水。注后30分鐘將給藥組和對照組小鼠各5只放入盛有鈉石灰的玻璃干燥器內(nèi)，打開活塞A，關(guān)閉活塞B和C，使用機(jī)械抽氣泵和平衡瓶、氣壓表相通。開動抽氣泵當(dāng)氣壓降至26.7kPa(200mmHg)時關(guān)閉活塞A，并停止抽氣。打開活塞B使干燥器、平衡瓶和氣壓表相通。以呼吸停止為小鼠死亡指標(biāo)。待干燥器內(nèi)小鼠死亡半數(shù)時，打開活塞C使干燥器、平衡瓶與大氣相通。分別統(tǒng)計(jì)給藥組和對照組的小鼠死亡數(shù)。然后再用給藥組和對照組各剩余的5只小鼠重復(fù)上述實(shí)驗(yàn)。最后統(tǒng)計(jì)給藥組和對照組小鼠的總死亡數(shù)，計(jì)算給藥組和對照組小鼠存活百分率，并用X2測其顯著性。(見說明書附圖2)3.3.4 結(jié)果EGP可顯著提高減壓缺氧環(huán)境中小鼠存活百分率，即EGP有明顯增強(qiáng)小鼠耐減壓缺氧能力之功效(表3.3-1)表3.3-1 EGP水溶液對小鼠抗低壓缺氧作用
3.3.5 附注小鼠減壓耐缺氧實(shí)驗(yàn)，亦可采用熱氣球由地面升空的方法進(jìn)行。如將小鼠放在低壓艙內(nèi)，以每分鐘1000米的速度使熱氣球上升到10000米以上高空(氣壓低于26.7kPa(200mmHg))進(jìn)行減壓耐缺氧實(shí)驗(yàn)。這樣更符合人在高海拔地區(qū)生活的實(shí)際情況。另外，本實(shí)驗(yàn)也可用測量動物減壓缺氧半數(shù)死亡時間來評價補(bǔ)益藥對動物耐減壓缺氧能力的影響。
3.4 EGP對小鼠的抗寒作用3.4.1 原理寒冷是六淫之一，對機(jī)體是一種有害刺激，是一種病因。機(jī)體可通過神經(jīng)-內(nèi)分泌系統(tǒng)等一系列應(yīng)激反應(yīng)驅(qū)逐寒邪維持體溫恒定。當(dāng)持續(xù)寒冷刺激時，使神經(jīng)-內(nèi)分泌系統(tǒng)功能衰竭，邪盛正衰則體溫隨環(huán)境溫度降低。體內(nèi)氧化還原酶系活性明顯降低，機(jī)體腦和心臟等重要器官氧化供能不足就會死亡。EGP和人參一樣大補(bǔ)元?dú)猓芑謴?fù)衰竭的神經(jīng)-內(nèi)分泌系統(tǒng)功能，提高機(jī)體對寒冷刺激的反應(yīng)性，增強(qiáng)機(jī)體氧化分解產(chǎn)熱供能過程，而適應(yīng)寒冷環(huán)境。本實(shí)驗(yàn)以動物在寒冷環(huán)境中的存活時間、存活百分率為指標(biāo)。
3.4.2 材料動物小鼠。器材冰箱、秒表等。藥品EGP水溶液和人參水煎液各0.2g/ml。
3.4.3 方法取ICR小白鼠20只，雌雄各半，分別稱重、編號，按體重性別隨機(jī)均分2組。給藥組小鼠每只灌胃人參水煎液和EGP水溶液6g/kg，灌后立即計(jì)時。對照組小鼠每只灌胃等容量飲用水。灌胃后30分鐘將小鼠分別放入-5±1℃冰箱內(nèi)，并重新計(jì)時。2小時后將小鼠取出，統(tǒng)計(jì)各組小鼠存活數(shù)，計(jì)算各組小鼠存活百分率。與對照組比較進(jìn)行t檢驗(yàn)，測其顯著性。
3.4.4 結(jié)果EGP水溶液可顯著提高小鼠在寒冷中的存活百分率有扶正驅(qū)寒功效。(表3.4-1)表3.4-1 EGP水溶液對小鼠抗寒作用
***p＜0.01
3.4.4.1 注意1、冰箱內(nèi)溫度必須控制在-5℃左右。2、小鼠放入冰箱時應(yīng)每籠放一只小鼠，以防小鼠互相取暖影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
3.5 EGP對小鼠的高溫抗缺氧作用3.5.1 原理環(huán)境高溫屬熱邪，熱邪犯內(nèi)使動物各種代謝加強(qiáng)而耗損津血致陰虛，陰虛生內(nèi)火使動物體溫升高。動物體溫持續(xù)高熱近45℃時，體內(nèi)各種酶(蛋白質(zhì))變性失活，臟腑功能衰竭，表現(xiàn)為動物呼吸、循環(huán)等功能停止而死亡。EGP和人參一樣既可大補(bǔ)元?dú)?，主補(bǔ)五臟，又可生津益血營養(yǎng)臟腑，改善心腦等功能器官的生理功能，延長動物在高溫環(huán)溫中的存活時間，提高存活率。顯示出EGP能增強(qiáng)動物耐高溫能力。
3.5.2 材料動物小鼠。器材恒溫箱、秒表。藥品EGP水溶液和人參水煎液各0.1g/ml。
3.5.3 方法取小鼠24只，雌雄各半，分別稱重、編號，按體重性別隨機(jī)均分2組。實(shí)驗(yàn)時給藥組和對照組小鼠各取3只，給藥組小鼠每只腹腔注射人參水煎液和EGP水溶液3g/kg，對照組小鼠每只腹腔注射等容量飲用水。注后30分鐘將小鼠放入250ml錐形瓶密封后置于45±1℃的恒溫槽內(nèi)，立即計(jì)時并密切觀察。以呼吸停止為指標(biāo)，計(jì)算小鼠半數(shù)死亡時間，取出恒溫槽內(nèi)全部小鼠，計(jì)算各組存活百分率，與對照組比較，用x2測其顯著性。
3.5.4 結(jié)果EGP水溶液可顯著提高小鼠在45℃環(huán)境中的存活率，顯示出EGP水溶液可明顯增強(qiáng)小鼠耐高溫能力。(表3.5-1)
表3.5-1 EGP水溶液對小鼠抗高溫缺氧作用
***p＜0.013.5.4.1 注意1、恒溫槽的溫度應(yīng)恒定在45±1℃，否則會影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。2、因要觀察小鼠在恒溫槽內(nèi)半數(shù)死亡時間，故每次放入恒溫槽內(nèi)的小鼠數(shù)不宜過多。
3.6 EGP對小鼠斷頭耐缺氧的影響3.6.1 實(shí)驗(yàn)方法ICR小鼠52只，隨機(jī)分組給藥方法同前。
3.6.2 實(shí)驗(yàn)時間各組連續(xù)灌胃15天，于末次給藥后1小時，將小鼠逐個斷頭，立即按秒表記錄小鼠斷頭后至張口喘氣停止時間作為耐缺氧指標(biāo)，用T檢驗(yàn)比較各組與正常對照組的差異。
3.6.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表3.6-1表3.6-1 EGP對小鼠斷頭后耐缺氧時間的影響(n＝13X±SD)
與正常對照組比較*P＜0.05，**P＜0.01。
3.6.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果討論EGP的實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，小劑量能明顯延長小鼠斷頭張口喘氣時間，而大劑量有明顯的延長趨勢，說明EGP能增加小鼠的腦血流量和供氧量。
權(quán)利要求
1.本發(fā)明提取方法獨(dú)特用低于60℃的熱水(無離子水)將鮮石蓮花葉、莖、根按重量比粉碎成80目1∶150-200(水)，分3次溶解用400目篩網(wǎng)過濾；
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述，將濾液進(jìn)行薄膜蒸餾或減壓蒸餾，水浴加熱不得超過90℃；
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述，其濾液具有非常顯著的抗應(yīng)激功能；
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述，抗應(yīng)激功能包括抗疲勞、抗寒冷、抗高溫缺氧、抗低壓缺氧、抗常壓缺氧以及小鼠斷頭后抗及缺氧等用途。
全文摘要
本發(fā)明涉及保健食品與醫(yī)藥領(lǐng)域中的抗應(yīng)激功能，本品是從野生石蓮花根莖、葉中用獨(dú)特的生物技術(shù)提取的全溶解的石蓮花粉，對人體具有抗應(yīng)激功能，無任何毒副作用。本發(fā)明還適用于生產(chǎn)片劑、膠囊、保健飲品，特別適合制作抗疲勞的運(yùn)動飲料的廠家。
文檔編號A61P43/00GK1611229SQ20031010165
公開日2005年5月4日 申請日期2003年10月28日 優(yōu)先權(quán)日2003年10月28日
發(fā)明者丁鑑 申請人:丁鑑