專利名稱：一種治療結(jié)核病的藥物組合物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及中藥梓木草和夏枯草，具體地說(shuō)，是以梓木草和夏枯草的提取物治療結(jié)核病。
背景技術(shù)：
第四次全國(guó)結(jié)核病流行病學(xué)抽樣調(diào)查結(jié)果報(bào)告全國(guó)有4億多人感染了結(jié)核菌，每年因結(jié)核病死亡的人數(shù)達(dá)15萬(wàn)。目前，我國(guó)結(jié)核病流行形勢(shì)十分嚴(yán)峻，其特點(diǎn)為高感染率，高患病率，高死亡率，高耐藥率，低逆降率，農(nóng)村疫情高于城市，青壯年結(jié)核病患病和死亡比例高。
淋巴結(jié)結(jié)核是人體感染結(jié)核菌后發(fā)生在淋巴系統(tǒng)的結(jié)核病，其特點(diǎn)為病程長(zhǎng)，經(jīng)久不愈和愈后易復(fù)發(fā)。因此，淋巴結(jié)結(jié)核的防治工作，是控制消滅結(jié)核病的重要課題。
雖然西藥治療結(jié)核病有效，但是其毒副作用，尤其是對(duì)人體的實(shí)質(zhì)臟器肝、腎功能的嚴(yán)重?fù)p害，已被公認(rèn)，其發(fā)生率為12.3-54.5％，聯(lián)合用藥毒副作用更大。
近年來(lái)，結(jié)核菌的耐藥性，特別是耐多藥病例的增多也是結(jié)核病重新抬頭的因素之一，已引起全球的關(guān)注。
結(jié)核分支桿菌初始耐藥率為18.6％，繼發(fā)耐藥率為46.5％，按初治菌陽(yáng)患病率107/10萬(wàn)，復(fù)治菌陽(yáng)患病率52.6/10萬(wàn)推算，在全國(guó)200萬(wàn)菌陽(yáng)肺結(jié)核患者中，有結(jié)核分支桿菌耐藥患者55.5萬(wàn)，即全國(guó)四分之一以上菌陽(yáng)肺結(jié)核患者為耐藥患者。對(duì)兩種主要抗結(jié)核藥物異煙肼和利福平的耐藥率高，兩藥的初始耐藥率分別為11.0％和10.3％，繼發(fā)耐藥率分別高達(dá)31.0％和29.5％。高耐藥率給結(jié)核患者的治療帶來(lái)很大困難，也是導(dǎo)致結(jié)核病流行的一個(gè)因素。
根據(jù)《中藥大詞典》《新華本草綱要》記載梓木草(Lithospermum zollingeriDC)為紫草科植物梓木草的全草。藥源分布廣泛，主產(chǎn)地在華東地區(qū)，梓木草又名地仙桃、琉璃草。其味甘、辛溫，有溫中健胃，消腫止痛的功用。用于胃寒痛、胃漲反酸、吐血、跌打損傷等癥。
夏枯草(Prunella vulgaris)屬唇形科，藥源廣布于我國(guó)各地，全草入藥，性寒，味苦辛，功能清肝火、散郁結(jié)，主治瘰疬、癭瘤、乳癰、乳癌、肺癆、黃疸、頭痛眩暈、目珠疼痛、筋骨疼痛等病癥，并有降血壓作用。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種對(duì)結(jié)核病治療效果好，耐藥性小的中藥組合物的提取物及其制法。
本發(fā)明的技術(shù)方案如下一種治療結(jié)核病的藥物組合物，它由下列質(zhì)量組分的藥材所得的提取物組成梓木草10份，夏枯草2～10份。
上述治療結(jié)核痛的藥物組合物，優(yōu)選的質(zhì)量組分是梓木草10份，夏枯草2.5～3.5份。
一種上述治療結(jié)核病的藥物組合物的制法取梓木草10份，夏枯草2～10份，用6～10倍藥材質(zhì)量的50％-90％乙醇回流提取2～3次，每次提取0.5～2小時(shí)，過(guò)濾，合并濾液，回收乙醇至相對(duì)密度1.20-1.40(40-60℃熱測(cè))，噴霧干燥，制粒，即得本發(fā)明的治療結(jié)核病的藥物組合物。
梓木草有健脾化痰、消腫止痛的功用，其味甘、辛溫。對(duì)梓木草的藥效學(xué)試驗(yàn)證實(shí)該藥能使結(jié)核病豚鼠體重降低百分率明顯減小，頸部腫大淋巴結(jié)數(shù)目明顯減少，還可減輕脾、肺、肝的病變程度；病理檢查發(fā)現(xiàn)，該藥可使脾、肺、肝、淋巴結(jié)的干酪樣壞死發(fā)生率降低；并能減少脾、肺、肝、淋巴結(jié)結(jié)核桿菌培養(yǎng)的活菌單位數(shù)目。體外抑菌試驗(yàn)結(jié)果該藥對(duì)人型結(jié)核桿菌H37RV標(biāo)準(zhǔn)菌株，牛型結(jié)核桿菌，草分歧桿菌均有不同程度的抑菌和殺菌作用。
急性毒性試驗(yàn)，給藥小鼠的LD50為14.09±2.12g/kg，相當(dāng)于人體用量的163倍。
本發(fā)明人以中醫(yī)理論為指導(dǎo)，在梓木草方劑中加入辛涼藥物夏枯草，完善配伍，得到本發(fā)明的藥物組合物，用其治療淋巴結(jié)結(jié)核，在臨床試驗(yàn)中，現(xiàn)已治愈3萬(wàn)多人次，其中屬疑難重癥及結(jié)核耐多藥病例約1萬(wàn)多人次，療效顯著。特別是對(duì)于陰虛火旺證的患者，本發(fā)明的藥物組合物有獨(dú)特的療效。
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例1.梓木草乙醇提取工藝參數(shù)優(yōu)選條件的確定1.1正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)選取醇濃度、醇用量、提取時(shí)間、提取次數(shù)四個(gè)因素進(jìn)行試驗(yàn)，檢測(cè)指標(biāo)為總提取物，找出相對(duì)顯著因素進(jìn)行工藝優(yōu)選。
表1.1因素水平表A B C D因素水平 醇濃度％醇用量倍提取時(shí)間h提取次數(shù)次1 606 1.0 12 758 1.5 23 90102.0 3表1.2 La(34)交試驗(yàn)表及結(jié)果試驗(yàn)總提取物序號(hào) A B C D g/100g1 1 1 1 1 8.162 1 2 2 2 15.103 1 3 3 3 17.274 2 1 2 3 13.355 2 2 3 1 9.906 2 3 1 2 11.687 3 1 3 2 7.388 3 2 1 3 8.999 3 3 2 1 5.46總 K140.53 28.89 28.83 23.52提 K234.93 33.99 33.91 34.16物 K321.83 34.41 34.55 39.61R 18.70 5.525.7216.09
表1.3 總提取物方差表方差來(lái)源 離差平方和 自由度方差F值P值SA61.40 2 30.70 9.76SB6.29 2 3.145SC6.54 2 3.271.04SD44.64 2 22.32 7.101.2正交試驗(yàn)樣品的制備分別稱取梓木草150g，按正交試驗(yàn)表(表1)各行所列條件制備樣品，用70％乙醇定容至500ml。
1.3總提取物的測(cè)定上述樣品各取20ml，水浴蒸干，105℃恒溫干燥3小時(shí)，移至干燥器中冷卻30分鐘，迅速稱重。
1.4結(jié)果見(jiàn)表1.2、1.3。
1.5數(shù)據(jù)分析對(duì)總提取物的影響以提取次數(shù)和醇濃度對(duì)其影響較大。醇濃度越高，總提物含量越低。
1.6結(jié)論確定梓木草醇提取的優(yōu)選條件為70％乙醇10倍量回流提取三次，每次1.5小時(shí)。
實(shí)施例2.夏枯草提取工藝參數(shù)優(yōu)選條件的確定2.1供試品提取方法(1)30％乙醇提取稱取夏枯草5g，加20倍量乙醇回流提取二次，每次1.5小時(shí)，過(guò)濾，合并濾液，調(diào)整體積至100ml。
(2)50％乙醇提取稱取夏枯草5g，加20倍量乙醇回流提取二次，每次1.5小時(shí)，過(guò)濾，合并濾液，調(diào)整體積至100ml。
(3)70％乙醇提取稱取夏枯草5g，加20倍量乙醇回流提取二次，每次1.5小時(shí)，過(guò)濾，合并濾液，調(diào)整體積至100ml。
(4)90％乙醇提取稱取夏枯草5g，加20倍量乙醇回流提取二次，每次1.5小時(shí)，過(guò)濾，合并濾液，調(diào)整體積至100ml。
(5)水提取稱取夏枯草5g，加20倍量水煎煮二次，每次1.5小時(shí)，過(guò)濾，合并濾液，調(diào)整體積至100ml。
2.2.指標(biāo)測(cè)定(1)總提取物的測(cè)定分別取夏枯草30％、50％、70％、90％乙醇提取、水煎煮樣品各10ml，水浴蒸干，105℃恒溫干燥3小時(shí)，移至干燥器中冷卻30分鐘，迅速稱重。
(2)熊果酸含量測(cè)定分別取夏枯草30％、50％、70％、90％乙醇提取、水煎煮樣品各50ml，水浴蒸干，用95％乙醇定容至5ml，用高效液相色譜法測(cè)定熊果酸含量。
2.3.結(jié)果見(jiàn)表2.1表2.1夏枯草不同提取方法比較試驗(yàn)方法 總提取物％熊果酸含量mg/g30％乙醇提 4.160.1150％乙醇提 5.051.3270％乙醇提 4.922.8190％乙醇提 2.753.08水提5.920.122.4.數(shù)據(jù)分析與結(jié)論實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，總提取物水＞50％乙醇＞70％乙醇＞30％乙醇＞90％乙醇；熊果酸含量90％乙醇＞70％乙醇＞50％乙醇＞水＞30％乙醇，因此，擬選用50％以上的乙醇先提取。
原料準(zhǔn)備梓術(shù)草，除去雜質(zhì)，略洗，切小段，干燥，供提取用；夏枯草，除去雜質(zhì)，曬干，供提取用。
實(shí)施例3.本發(fā)明的治療結(jié)核病的藥物組合物的制備取梓木草3000克，夏枯草900克，加70％乙醇39000克，回流提取二次，每次回流1.5小時(shí)，過(guò)濾，合并濾液，減壓蒸餾，回收乙醇，濃縮至相對(duì)密度為1.2(40℃)，噴霧干燥，制粒。即得本發(fā)明的藥物組合物。
實(shí)施例4.本發(fā)明的治療結(jié)核病的藥物組合物的制備取梓木草3000克，夏枯草600克，加70％乙醇21600克，回流提取三次，每次回流0.5小時(shí)，過(guò)濾，合并濾液，減壓蒸餾，回收乙醇，濃縮至相對(duì)密度為1.2(60℃)，噴霧干燥，制粒。即得本發(fā)明的藥物組合物。
實(shí)施例5.本發(fā)明的治療結(jié)核病的藥物組合物的制備取梓木草3000克，夏枯草3000克，加50％乙醇48000克，回流提取三次，每次回流0.5小時(shí)，過(guò)濾，合并濾液，減壓蒸餾，回收乙醇，濃縮至相對(duì)密度為1.4(40℃)，噴霧干燥，制粒，即得本發(fā)明的藥物組合物。
實(shí)施例6.本發(fā)明的治療結(jié)核病的藥物組合物的制備取梓木草3000克，夏枯草900克，加90％乙醇29000克，回流提取三次，每次回流2小時(shí)，過(guò)濾，合并濾液，減壓蒸餾，回收乙醇，濃縮至相對(duì)密度為1.4(40℃)，噴霧干燥，制粒，即得本發(fā)明的藥物組合物。
實(shí)施例7.本發(fā)明的治療結(jié)核病藥物組合物與抗結(jié)核中藥優(yōu)福寧對(duì)照療效觀察診斷標(biāo)準(zhǔn)參照1995年國(guó)家中醫(yī)藥管理局發(fā)布實(shí)施的中醫(yī)病證(瘰疬病)診斷療效標(biāo)準(zhǔn)制定。
納入標(biāo)準(zhǔn)本組研究對(duì)象為住院患者中，確診為淋巴結(jié)結(jié)核并符合中醫(yī)辯證者。
排除標(biāo)準(zhǔn)年齡18歲以下或65歲以上者；妊娠或哺乳期婦女；合并有心血管、肝腎和造血系統(tǒng)等嚴(yán)重原發(fā)性疾病或精神病患者。
病例分組共觀察200例，平均年齡35歲；平均病程3年；發(fā)病部位分別為頸部、腋下、腹股溝、縱隔、腸系膜淋巴結(jié)。初治病例80例，復(fù)治病例120例。上述病例按住院順序分層隨機(jī)、雙盲分為瘰疬寧組，優(yōu)福寧組。兩組性別、年齡、病程、發(fā)病部位、辨證分型各項(xiàng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理P＞0.25，有可比性。
治療方法規(guī)格每粒0.35g，每次6粒，每日2次，口服，連續(xù)給藥，3個(gè)月為1個(gè)療程。本發(fā)明的治療結(jié)核病藥物組合物按實(shí)施例3制備，由南京市中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院制劑室提供，批號(hào)990108；優(yōu)福寧由南京同仁堂制藥廠生產(chǎn)，批號(hào)990530。
觀察指標(biāo)安全性觀察T、P、R、BP每天記錄；血、尿、便常規(guī)，心、肝、腎功能檢查，治療前、治療后各查1次。不良反應(yīng)或毒副作用隨時(shí)記錄。
療效性觀察潮熱、盜汗等全身癥狀，每天記錄1次；局部腫塊直徑，竇道深度，每周記錄1次；血沉、PPD試驗(yàn)、B超、竇道造影、CT，治療前、后各1次。病理檢查記錄1次。
治療結(jié)果療效評(píng)定參照1995年國(guó)家中醫(yī)藥管理局發(fā)布實(shí)施的中醫(yī)病證(瘰疬病)診斷療效標(biāo)準(zhǔn)制定。療效比較見(jiàn)表7.1表7.1 本發(fā)明藥物、優(yōu)福寧治療淋巴結(jié)核療效觀察組別 證型 例數(shù) 痊愈好轉(zhuǎn)未愈 總有效率本 氣滯痰凝證 54 48* 3 3* 94.44*發(fā) 陰虛火旺證 24 20 2 2 91.67明 氣血兩虛證 22 18 2 2 90.91優(yōu) 氣滯痰凝證 55 37 10 8 85.45福 陰虛火旺證 23 10 7 6 73.91寧 氣血兩虛證 22 11 4 7 68.18合計(jì) 本發(fā)明組 100 86* 7 7 93.00*優(yōu)福寧組 100 58 21 21 79.00*P＜0.01治療后本發(fā)明組及優(yōu)福寧組患者血、尿、便常規(guī)檢查，心、肝、腎功能檢查，均未見(jiàn)異常。均未發(fā)現(xiàn)其他不良反應(yīng)。
隨訪結(jié)果200例患者均隨訪1年，本發(fā)明組無(wú)復(fù)發(fā)，優(yōu)福寧組有2例復(fù)發(fā)。
實(shí)施例8.本發(fā)明的治療結(jié)核病的藥物組合物與抗結(jié)核西藥對(duì)照療效觀察臨床資料診斷標(biāo)準(zhǔn)參照1997年國(guó)家衛(wèi)生部發(fā)布的《中藥新藥臨床研究指導(dǎo)原則》。
納入標(biāo)準(zhǔn)本組納入研究對(duì)象為瘰疬科住院患者，經(jīng)臨床和實(shí)驗(yàn)檢查確診的淋巴結(jié)結(jié)核患者。
排除標(biāo)準(zhǔn)年齡18歲以下或65歲以上者；妊娠或哺乳期婦女；對(duì)本藥過(guò)敏者；合并有心血管、肝腎和造血系統(tǒng)等嚴(yán)重原發(fā)性疾病者和精神病患者。
病例分組共觀察450例，平均年齡40.21±8.46歲；平均病程3.21±2.14年；患病部位分別為頸部、腋下、腹股溝、縱膈、腸系膜淋巴結(jié)。序號(hào)A為本發(fā)明藥物組合物組，序號(hào)B為本發(fā)明藥物組合物+異煙肼組，序號(hào)C為異煙肼+乙胺丁醇組。所觀察病例按住院順序分層隨機(jī)，分為A組B組C組。
A組性別男64例，女86例。年齡18-40歲73例，41-65歲77例。病情初期90例，釀膿破潰期60例。初治病例55例，復(fù)治病例95例。B組性別男65例，女85例。年齡18-40歲73例，41-65歲77例。病情初期91例，釀膿破潰期59例。初治病例55例，復(fù)治病例95例。C組性別男63例，女87例，年齡18-40歲74例，41-65歲76例。病情初期92例，釀膿破潰期58例。初治病例56例，復(fù)治病例94例。兩組在性別、年齡、病情等方面比較，無(wú)明顯差異(P＞0.25)，有可比性。
治療方法藥物本發(fā)明的治療結(jié)核病的藥物組合物，每粒0.35g，按實(shí)施例4制備，由南京市中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院制劑室提供，批號(hào)20000805。異煙肼片，每片0.1g。浙江醫(yī)藥股份有限公司新昌制藥廠生產(chǎn)，批號(hào)20001013。鹽酸乙胺丁醇片劑，每片0.25g；由杭州民生藥廠生產(chǎn)，批號(hào)20001006。
方法A組本發(fā)明藥物組合物；B組本發(fā)明藥物組合物合用異煙肼；C組異煙肼合用乙胺丁醇。本發(fā)明藥物組合物每次5粒，每日2次，口服。異煙肼片每次0.3g，每日1次，口服。乙胺丁醇片每次0.75g，每日1次，口服。療程三個(gè)月。
管理所有藥品由專人保管，藥品保管人根據(jù)指定醫(yī)師的專門處方取藥。
倫理本發(fā)明藥物組合物經(jīng)過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證明其安全、有效，自1969年開(kāi)始臨床應(yīng)用至今，自愿接受該方法治療的患者中，臨床觀察未發(fā)現(xiàn)毒副作用。
觀測(cè)項(xiàng)目安全性觀測(cè)T、P、R、BP每天記錄；血、尿、便常規(guī)，心電圖、肝腎功能檢查，治療前、后各查一次。不良反應(yīng)和毒副反應(yīng)均仔細(xì)記錄，并判定不良反應(yīng)與治療藥物密切相關(guān)性。如出現(xiàn)嚴(yán)重毒副反應(yīng)，須立即中止，及時(shí)報(bào)告并予以治療。
療效性觀測(cè)全身癥狀潮熱、盜汗等全身癥狀，每天記錄1次。局部腫塊直徑，竇道深度，每周記錄1次。化驗(yàn)血沉、PPD試驗(yàn)、B超檢查、竇道造影、CT，治療前、后備一次。病理檢查記錄一次。
治療結(jié)果療效評(píng)定依據(jù)國(guó)家衛(wèi)生部發(fā)布的《中藥新藥臨床研究指導(dǎo)原則》制訂。
初期臨床治愈腫塊消退、全身癥狀消失，化驗(yàn)指標(biāo)正常，隨訪3個(gè)月無(wú)復(fù)發(fā)。
顯效腫塊縮小1/2，數(shù)量減少1/2，化驗(yàn)指標(biāo)正常。
有效腫塊縮小或數(shù)量減少不足1/2，化驗(yàn)指標(biāo)有所改善。
無(wú)效治療后腫塊大小及數(shù)量無(wú)改善，或已釀膿，或破潰，有竇道形成。
釀膿破潰期臨床治愈腫塊消退或破潰創(chuàng)面痊愈，全身中毒癥狀消失，化驗(yàn)指標(biāo)正常，隨訪3個(gè)月無(wú)復(fù)發(fā)。
顯效腫塊縮小和數(shù)量減少，膿腔縮小均在1/2以上，全身癥狀消失，化驗(yàn)指標(biāo)正常。
有效腫塊縮小或數(shù)量減少，膿腔縮小在1/2以下，全身癥狀減輕，化驗(yàn)指標(biāo)有所改善。
無(wú)效局部癥狀無(wú)改善。
療效比較見(jiàn)表8.1。
表8.1三組治療淋巴結(jié)結(jié)核療效比較組別 分期 例數(shù) 臨床治愈顯效有效 無(wú)效A組 初期90 6714 6 3釀膿破潰期 60 3412 9 5初期91 6813 6 4B組釀膿破潰期 59 3212 10 5初期92 6411 5 12C組釀膿破潰期 58 2910 9 10表8.1顯示，A組初期患者愈顯率90.00％，釀膿破潰期愈顯率76.67％，合計(jì)愈顯率84.67％；B組初期患者愈顯率89.01％，釀膿破潰期愈顯率74.58％，合計(jì)愈顯率83.33％；C組初期患者愈顯率81.52％，釀膿破潰期愈顯率67.24％，合計(jì)愈顯率76.00％。A、B組比較無(wú)顯著性差異，A組與C組、B組與C組比較，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
安全性觀察治療后，A組血、尿、便常規(guī)檢查，心電圖、肝腎功能檢查均未見(jiàn)異常。B、C組有14例肝功能轉(zhuǎn)氨酶輕度增高。
實(shí)施例9.本發(fā)明的治療結(jié)核病的藥物組合物對(duì)淋巴結(jié)結(jié)核患者細(xì)胞免疫力的影響材料與方法診斷依據(jù)參照1994年國(guó)家中醫(yī)藥管理局發(fā)布的中醫(yī)病證(瘰疬病)診斷療效標(biāo)準(zhǔn)制定。
病例選擇本組研究對(duì)象為住院患者中，符合診斷標(biāo)準(zhǔn)的400例患者，經(jīng)檢查無(wú)心、肝、腎疾患，PPD1μ試驗(yàn)強(qiáng)陽(yáng)性、血沉增快，均經(jīng)細(xì)胞學(xué)檢查或病理切片證實(shí)為結(jié)核，按住院順序分層隨機(jī)分為本發(fā)明組、優(yōu)福寧組、西藥組。
藥物及用法本發(fā)明的藥物組合物膠囊，按實(shí)施例5制備，由南京市中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院提供(批號(hào)990126)；優(yōu)福寧膠囊(批號(hào)990121)。兩組均為每日2次，每次6粒，口服異煙肼0.3，1/日、利福平0.45，1/日。療程三個(gè)月，采用雙盲、組間相互對(duì)照法。
觀察指標(biāo)PPD試驗(yàn)皮下注射110/次，人型結(jié)核菌素純蛋白衍生物(即PPD。北京高科技生命科學(xué)技術(shù)開(kāi)發(fā)公司提供)。72小時(shí)測(cè)量局部紅腫硬結(jié)直徑。
PHA淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)、CD3+(總T淋巴細(xì)胞)、CD4+(T輔助/誘導(dǎo)細(xì)胞)、CD8+(抑制/殺傷功能的T細(xì)胞)、CD4+/CD8+.
IL-2、IL-2R血標(biāo)本處理取空腹靜脈血3ml經(jīng)離心后，取上清液分裝。置-20℃以下保存?zhèn)溆谩?br> 檢測(cè)指標(biāo)采用雙抗體夾心ABC-ELISA法檢測(cè)血清IL-2、IL-2R水平。(試劑盒購(gòu)于上海森雄科技實(shí)業(yè)有限公司)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理檢測(cè)數(shù)據(jù)以X±S表示。結(jié)果分析采用統(tǒng)計(jì)學(xué)t檢驗(yàn)。
觀察結(jié)果PPD試驗(yàn)結(jié)果本發(fā)明組治療前患者局部紅腫直徑為13.0±2.7mm，硬結(jié)或水皰發(fā)生率為85％，治療后患者局部紅腫直徑10.8±2.9mm，硬結(jié)發(fā)生率0。治療前后比較有非常顯著性差異。給藥后兩組間比較有顯著性差異。見(jiàn)表9.1。
表9.1治療前后淋巴結(jié)結(jié)核患者PPD試驗(yàn)反應(yīng)比較(X±S)組別 例數(shù) 局部紅腫直徑(mm) 硬結(jié)或水泡發(fā)生率(％)給藥前 給藥后 給藥前給藥后本發(fā)明組 100 13.0±2.710.8±2.9**Δ 850優(yōu)福寧組 100 13.0±2.911.9±3.2* 850治療前后比較*P＜0.05 **P＜0.01 治療后兩組間比較ΔP＜0.05T淋巴細(xì)胞亞群患者外周血淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率(LTT)，CD3+，CD4+細(xì)胞百分率CD4+/CD8+比值均降低，治療后各項(xiàng)指標(biāo)均上升至正常。治療前后比較有非常顯著性差異，給藥后兩組間比較有顯著性差異。見(jiàn)表9.2。
表9.2 治療前后淋巴結(jié)結(jié)核患者外周血T淋巴細(xì)胞亞群變化(％，X±S)組別 例數(shù) LTT CD3+CD4+CD8+CD4+/CD8+正常人 10064.8±5.2 62.8±6.7 41.4±6.6 25.5±5.8 1.6±0.6前 10062.5±6.2 58.1±7.2 37.8±5.8 27.0±5.6 1.4±0.4本發(fā)明組后 10066.1±5.3Δ** 62.7±6.7Δ* 41.8±5.4Δ** 26.1±5.3 1.6±0.7*前 10062.1±4.3 58.3±7.1 37.9±5.5 27.1±5.2 1.4±0.5優(yōu)福寧組后 10064.2±5.1* 60.5±6.8* 40.1±5.7** 26.7±5.9 1.5±0.3治療前后比較*p＜0.05，**p＜0.01治療前后兩組間比較ΔP＜0.05。
細(xì)胞因子瘰疬寧組與西藥組治療前比較無(wú)顯著差異，治療后IL-2有顯著差異，瘰疬寧組治療前后比較也有顯著差異，p＜0.05。見(jiàn)表9.3。
表9.3抗結(jié)核治療前后患者血清IL-2、IL-2R水平的變化(X±S，PG/L)組 別例數(shù)治療前IL-2 IL-2R 治療后IL-2IL-2R瘰疬寧組 100206.09±6.32 173.08±4.12 251.93±5.89* 187.54±4.96西藥組100205.16±6.34 182.53±4.25 198.04±5.45181.34±4.58*p＜0.05分析與討論淋巴結(jié)結(jié)核，中醫(yī)稱之為“瘰疬”。起病多因六淫、瘵蟲(chóng)所傷或因七情之變；勞逸失度等，導(dǎo)致臟腑氣機(jī)逆亂，肝失疏泄，橫逆犯脾，脾失健運(yùn)，水濕內(nèi)停，聚而成痰、阻塞經(jīng)絡(luò)而致病。病變?cè)缙诙酁楦斡籼的?，久則郁而化火傷陰，陰虛火旺；后期多為氣血兩虛。故其治法以健脾和中，化痰解郁，消腫散結(jié)為主。
本發(fā)明的藥物組合物是以紫草科植物梓木草和唇形科植物夏枯草提取而成，具有健脾化痰、消腫散結(jié)的作用。在臨床取得了滿意的療效，總有效率93.00％，與優(yōu)福寧組比較，有非常顯著的差異(P＜0.01)。未發(fā)現(xiàn)不良反應(yīng)及毒副作用。
臨床試驗(yàn)通過(guò)450例淋巴結(jié)結(jié)核患者的隨機(jī)陽(yáng)性對(duì)照，平行組觀察的臨床研究，再一次證實(shí)，本發(fā)明的治療結(jié)核病的藥物組合物加異煙肼的治療，愈顯率83.33％，高于異煙肼加乙胺丁醇治療，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05)。且發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明治療組無(wú)毒副作用，治療后各項(xiàng)理化檢查均正常，而異煙肼+乙胺丁醇組有14例肝功能轉(zhuǎn)氨酶輕度增高。本發(fā)明的治療結(jié)核病的藥物組合物治療淋巴結(jié)結(jié)核有效、安全。
結(jié)核病的發(fā)病與免疫功能互為因果，當(dāng)機(jī)體免疫功能減弱時(shí)，可導(dǎo)致內(nèi)源性感染復(fù)發(fā)而發(fā)病，進(jìn)一步抑制免疫功能，復(fù)治結(jié)核患者往往由于治療不合理、用藥不規(guī)則、細(xì)菌產(chǎn)生耐藥等原因使病變遷延、反復(fù)。
20世紀(jì)80年代以來(lái)，結(jié)核病發(fā)病率呈回升趨勢(shì)，其中機(jī)體免疫功能受損或低下是主要原因之一。結(jié)核分枝桿菌是一種胞內(nèi)的寄生菌，宿主抗結(jié)核分枝桿菌以細(xì)胞免疫為主，輔助性T淋巴細(xì)胞(helper Tcell，TH)亞群及其所分泌的細(xì)胞因子在抗結(jié)核免疫中占有重要地位。
生理情況下，內(nèi)源性IL-2主要由T細(xì)胞產(chǎn)生。靜止期T細(xì)胞可分為幼稚T細(xì)胞和記憶T細(xì)胞2類，兩者均可產(chǎn)生IL-2。在成熟期T細(xì)胞亞群中，CD4+T細(xì)胞(Th)和CD8+T細(xì)胞產(chǎn)生IL-2的動(dòng)力學(xué)有所不同。CD4+細(xì)胞中的Th1細(xì)胞可長(zhǎng)期大量地產(chǎn)生IL-2，Th2細(xì)胞則不產(chǎn)生IL-2；CD8+T細(xì)胞只能小量的產(chǎn)生IL-2。
作用T細(xì)胞的增殖過(guò)程由于IL-2的發(fā)現(xiàn)，人們對(duì)T細(xì)胞增殖過(guò)程有了新的認(rèn)識(shí)。T細(xì)胞的生長(zhǎng)可分成2個(gè)步驟。第一步是識(shí)別抗原或絲裂原上的決定簇，提供了免疫學(xué)特異性的基礎(chǔ)。在這個(gè)過(guò)程中抗原或絲裂原有2個(gè)作用，即1、T細(xì)胞表達(dá)IL-2受體，獲得對(duì)IL-2的反應(yīng)性；2、抗原使Th細(xì)胞產(chǎn)生和釋放IL-2。第二步則是IL-2與高親和力的受體結(jié)合，使某一分化階段的T細(xì)胞增殖，細(xì)胞進(jìn)入S時(shí)相，最后細(xì)胞分裂。
IL-2R的高表達(dá)水平僅在淋巴細(xì)胞受特異性抗原刺激后的很短時(shí)間，以后受體表達(dá)而下降，盡管此時(shí)尚有高濃度的IL-2存在。
IL-2誘導(dǎo)細(xì)胞因子產(chǎn)生純化激活的T細(xì)胞加入IL-2以后可以引起多種細(xì)胞學(xué)功能，其中之一是促進(jìn)多種細(xì)胞因子的產(chǎn)生，如IFN-r、IL-3、IL-4、IL-5、IL-6等。
對(duì)T細(xì)胞及非T細(xì)胞的作用IL-2主要增強(qiáng)CD8+T細(xì)胞的生長(zhǎng)，亦可增強(qiáng)CD4+Th細(xì)胞及幾種CD8+Ts細(xì)胞的生長(zhǎng)。
結(jié)核桿菌進(jìn)入人體后，首先遇到的是中性粒細(xì)胞，但不能將其殺死，結(jié)果細(xì)菌不僅能存在，且可隨細(xì)胞的游動(dòng)而轉(zhuǎn)移至體內(nèi)其他部位。T細(xì)胞在細(xì)菌侵入后受抗原刺激而增殖分化，成為致敏淋巴細(xì)胞。致敏淋巴細(xì)胞在再次接觸抗原時(shí)，釋放多種淋巴因子，其中最重要的是巨噬細(xì)胞活化因子(MAF)。活化的巨噬細(xì)胞對(duì)結(jié)核桿菌的攝取和破壞能力要比正常巨噬細(xì)胞強(qiáng)大，有利于消滅細(xì)菌。
細(xì)胞免疫強(qiáng)者可以痊愈，而細(xì)胞免疫低下者則因組織過(guò)度破壞而死亡。
因此，人體免疫功能低下時(shí)，容易感染結(jié)核桿菌。而細(xì)胞免疫力的強(qiáng)弱在結(jié)核病發(fā)生，發(fā)展與轉(zhuǎn)歸中又起著關(guān)鍵性作用，特別是T淋巴細(xì)胞的數(shù)量與功能更為重要。
人體結(jié)核病灶內(nèi)有四類不同代謝狀態(tài)的結(jié)核菌。其中一類菌體處于完全冬眠狀態(tài)，現(xiàn)有化療藥物對(duì)耐藥、體眠的結(jié)核菌株基本無(wú)效。加上淋巴結(jié)核病灶在淋巴結(jié)包膜內(nèi)，難以達(dá)到有效血藥濃度?；颊咄庵苎猅淋巴細(xì)胞及其亞群的數(shù)目均存在異常?？共∧芰Φ拖?，促使淋巴結(jié)核發(fā)生。而本發(fā)明的治療結(jié)核病的藥物組合物可通過(guò)激發(fā)免疫系統(tǒng)，促使吞噬細(xì)胞變成活性吞噬細(xì)胞，增強(qiáng)T淋巴細(xì)胞的數(shù)量與功能，分泌細(xì)胞因子，配合藥物殺死休眠的頑固結(jié)核菌，改善治療效果。
通過(guò)多年的臨床實(shí)踐及研究證實(shí)，本發(fā)明的治療結(jié)核病的藥物組合物治療結(jié)核與化學(xué)藥物比較，有明顯的優(yōu)勢(shì)。
權(quán)利要求
1.一種治療結(jié)核病的藥物組合物，其特征是它由下列質(zhì)量組分的藥材所得的提取物組成梓木草10份，夏枯草2-10份。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的治療結(jié)核病的藥物組合物，其質(zhì)量組分是梓木草10份，夏枯草2.5-3.5份。
3.一種權(quán)利要求上述治療結(jié)核病的藥物組合物的制法，其特征是取梓木草、夏枯草，用6～10倍藥材質(zhì)量的50％-90％乙醇回流提取2～3次，每次提取0.5～2小時(shí)，過(guò)濾，合并濾液，回收乙醇至相對(duì)密度1.20-1.40(40-60℃熱測(cè))，噴霧干燥，制粒，即得本發(fā)明的治療結(jié)核病的藥物組合物。
全文摘要
一種治療結(jié)核病的藥物組合物，其特征是它由下列質(zhì)量組分的藥材所得的提取物組成梓木草10份，夏枯草2－10份。本藥物組合物的制法是取梓木草、夏枯草，用6～10倍藥材質(zhì)量的50％－90％乙醇回流提取2～3次，每次提取0.5～2小時(shí)，過(guò)濾，合并濾液，回收乙醇至相對(duì)密度1.20－1.40(40－60℃熱測(cè))，噴霧干燥，制粒，即得本發(fā)明的治療結(jié)核病的藥物組合物。本發(fā)明人以中醫(yī)理論為指導(dǎo)，在梓木草方劑中加入辛涼藥物夏枯草，完善配伍，得到本發(fā)明的藥物組合物，用其治療淋巴結(jié)結(jié)核，在臨床試驗(yàn)中，現(xiàn)已治愈3萬(wàn)多人次，其中屬疑難重癥及結(jié)核耐多藥病例約1萬(wàn)多人次，療效顯著。特別是對(duì)于陰虛火旺癥的患者，本發(fā)明的藥物組合物有獨(dú)特的療效。
文檔編號(hào)A61P31/00GK1546081SQ20031010649
公開(kāi)日2004年11月17日 申請(qǐng)日期2003年12月2日 優(yōu)先權(quán)日2003年12月2日
發(fā)明者鈕曉紅, 李明吾, 蔡榕, 夏公旭 申請(qǐng)人:南京市中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院