專利名稱:一種以20(S)-人參皂苷-Rg的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域:
本發(fā)明涉及一種用于增強(qiáng)抗癌藥物療效,降低抗癌藥物毒性、預(yù)防和治療放化療引起的白細(xì)胞降低的抗癌輔助藥物,屬于癌癥治療的醫(yī)藥領(lǐng)域。
背景技術(shù):
癌癥是危害人類健康的三大疾病之一,其發(fā)病率及死亡率在某些國家已上升到第1位。因此研制抗癌藥物是廣大醫(yī)藥工作者面臨的重大課題之一。目前開發(fā)成功的很多抗癌藥物,雖然治療效果越來越好,但是因?yàn)樗幬锉旧淼亩靖弊饔锰珡?qiáng),導(dǎo)致臨床應(yīng)用受到限制。因此,目前抗癌藥物研究,一方面繼續(xù)尋找殺死癌細(xì)胞的治療藥物外,開發(fā)以增強(qiáng)抗癌藥物的療效,降低其毒副作用為主要功效的抗癌輔助藥物也越來越受到重視。
人參是一種名貴的滋補(bǔ)藥物,具有大補(bǔ)元?dú)?,?fù)脈固脫,補(bǔ)脾益肺,生津、安神等功能,在臨床上用于提高癌癥患者的機(jī)體免疫功能,預(yù)防和治療因放化療引起的白細(xì)胞降低等方面。20(S)-人參皂苷-Rg3是從人參莖葉中提取并經(jīng)轉(zhuǎn)化獲得的四環(huán)三萜類人參二醇型皂苷單體有效成分。
20(S)-人參皂苷-Rg3結(jié)構(gòu)式(R-glu-o-glu;R1-OH;R2-CH3)據(jù)報(bào)道,Rg3具有抗腫瘤、抑制新生血管生成、抗炎等作用,但關(guān)于20(S)-人參皂苷-Rg3具有增強(qiáng)抗癌藥物療效,降低抗癌藥物毒性、預(yù)防和治療放化療引起的白細(xì)胞降低及增強(qiáng)癌癥患者機(jī)體免疫功能的作用卻未見報(bào)道;盡管中國專利公開文本CN 1092204C中公開了20(S)-人參皂苷-Rg3在制備治療肺癌、黑色素瘤、S180肉瘤中的醫(yī)藥用途,我們研究卻發(fā)現(xiàn)20(S)-人參皂苷-Rg3雖然具有一定的抗癌活性,但其殺傷癌細(xì)胞的作用遠(yuǎn)不如化學(xué)合成藥,如環(huán)磷酰胺、5-氟尿嘧啶、順鉑等;同時(shí)我們也發(fā)現(xiàn)它對(duì)抗癌藥物有非常明顯的增效減毒作用,也能提高癌癥患者的機(jī)體免疫力。另外,眾多的研究顯示20(R)-人參皂苷-Rg3具有顯著的抗腫瘤活性,甚至2001年中國率先批準(zhǔn)以此為有效成分的一類新藥(中藥)“參一膠囊”試生產(chǎn)并在國內(nèi)上市,但臨床應(yīng)用發(fā)現(xiàn)其抗腫瘤作用很弱,因此,在試生產(chǎn)轉(zhuǎn)正時(shí)說明書修改為“培元固本,補(bǔ)益氣血。抑制腫瘤生長,與化療合并用藥,有助于提高原發(fā)性肺癌、肝癌的療效,可改善腫瘤患者的氣虛癥狀,提高免疫力”。即不再作為單純的抗癌藥物對(duì)待?;诖?,本發(fā)明人通過大量的實(shí)驗(yàn)研究,發(fā)明了一種以20(S)-人參皂苷-Rg3為有效成分的藥物及其在增強(qiáng)抗癌藥物療效、降低其毒性,預(yù)防和治療放化療引起的白細(xì)胞降低等方面的醫(yī)藥用途。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供了一種以20(S)-人參皂苷-Rg3為有效成分,用于增強(qiáng)抗癌藥物療效,降低抗癌藥物毒性、預(yù)防和治療放化療引起的白細(xì)胞降低的藥物。
本發(fā)明提供了一種以20(S)-人參皂苷-Rg3為有效成分的藥物在增強(qiáng)抗癌藥物療效的藥物中的應(yīng)用。
本發(fā)明提供了一種以20(S)-人參皂苷-Rg3為有效成分的藥物在降低抗癌藥物毒性的藥物中的應(yīng)用。
本發(fā)明提供了一種以20(S)-人參皂苷-Rg3為有效成分的藥物在預(yù)防和治療放化療引起的白細(xì)胞降低的藥物中的應(yīng)用。
本發(fā)明提供了一種以20(S)-人參皂苷-Rg3為有效成分的藥物在用于上述任一用途時(shí),其使用劑量范圍為1mg~2000mg,優(yōu)選劑量范圍為20mg~500mg。
本發(fā)明提供的藥物可以以口服或注射途徑給藥,注射給藥可以為靜脈注射、肌肉注射、腹腔注射、皮下注射或瘤體內(nèi)注射??诜苿┛梢詾槠瑒?、膠囊劑、丸劑、顆粒劑、滴丸、軟膠囊、懸浮液、溶液、糖漿,膠囊劑、顆粒劑、滴丸;注射用制劑可以為凍干粉針、注射用靜脈乳劑、注射液、輸液??诜苿﹥?yōu)選為片劑、膠囊劑、顆粒劑;注射用制劑優(yōu)選凍干粉針、注射用靜脈乳劑。
本發(fā)明所提供的各種藥物劑型均可以以藥學(xué)常規(guī)方法制備而成。
本發(fā)明人通過下列試驗(yàn)證實(shí)以20(S)-人參皂苷-Rg3為有效成分的藥物具有增強(qiáng)抗癌藥物療效、降低其毒性,預(yù)防和治療放化療引起的白細(xì)胞減少的作用,下面的實(shí)施例用來更詳細(xì)的說明本發(fā)明,但并不意味著本發(fā)明僅限于此。試驗(yàn)所用的20(S)-人參皂苷-Rg3由山東省天然藥物工程技術(shù)研究中心天然藥物化學(xué)研究室提供,經(jīng)HPLC檢測(cè)含量≥90%,對(duì)照品由山東省天然藥物工程技術(shù)研究中心藥物分析研究室提供。
具體實(shí)施例方式制備實(shí)施例1注射用制劑制備實(shí)施例稱取1.00g 20(S)-人參皂苷-Rg3,加入20ml正丁醇和30ml的丙二醇使皂苷完全融解,將0.15g鹽酸丁卡因、0.02g的枸櫞酸加入到40ml注射用水中,使完全溶解,并將上述水溶液加入到藥物溶液中,混合均勻;以硼砂和硼酸調(diào)節(jié)pH值為5.5±1.0;加入0.1%的針用活性炭85℃保溫30分鐘,G3垂熔玻璃漏斗過濾,0.22um的微孔濾膜過濾;濾液分裝于7ml西林瓶中,每支裝量2ml(分裝好的注射劑可以直接壓塞、壓鋁蓋成針劑;或經(jīng)凍干機(jī)凍干制成凍干粉針。)。
制備實(shí)施例2片劑制備實(shí)施例稱取10.00g 20(S)-人參皂苷-Rg3,加入淀粉90克,混勻、過篩,得混合粉;乙醇水溶液作粘合劑,制適宜軟材,18目篩制粒,60℃烘箱干燥2小時(shí),16目尼龍篩整粒,加入硬脂酸鎂,混勻,壓片,片重約100mg/片。
試驗(yàn)例1 20(S)-人參皂苷-Rg3體內(nèi)抑瘤實(shí)驗(yàn)1、試驗(yàn)材料1.1藥物及試劑注射用20(S)-人參皂苷-Rg3,山東省天然藥物工程技術(shù)研究中心制劑室提供,批號(hào)20020525,20mg/ml,5ml/支。環(huán)磷酰胺,上海華聯(lián)制藥有限公司生產(chǎn),批號(hào)000205。
1.2動(dòng)物昆明種小鼠,5~8周齡,體重18~22g,山東省天然藥物工程技術(shù)研究中心動(dòng)物中心提供,合格證號(hào)魯動(dòng)(質(zhì))字20010603。雌雄兼用,每批實(shí)驗(yàn)采用同一性別。C57BL/6純系小鼠,5~8周齡,體重18~22g,中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物繁育場(chǎng)提供,合格證號(hào)SCX11-00-0006。
1.3細(xì)胞株小鼠肝癌H22、小鼠宮頸癌U14、小鼠黑色素瘤B16、小鼠Lewis肺癌,購自中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院北京藥物研究所。
1.4血象分析儀AITAIKE BLOOD CELL COUNTER CA-5001.5藥物配制小鼠用各藥物均用注射用生理鹽水配成相應(yīng)濃度。
2、試驗(yàn)內(nèi)容H22肝癌和U14宮頸癌接種取于昆明鼠腹腔內(nèi)接種傳代七天的上述荷瘤小鼠,消毒腹部皮膚后,抽取腹水,加入三倍體積的注射用生理鹽水稀釋,消毒鼠腋下皮膚,每只小鼠于腋下注射瘤細(xì)胞懸液0.2ml,各瘤株分別接種50只小鼠。
B16黑色素瘤和Lewis肺癌接種取已接種10天的Lewis肺癌、生長狀態(tài)良好的小鼠,脫頸處死,用酒精消毒皮膚后,剝?nèi)∧[瘤組織,加入五倍重量的生理鹽水后用組織勻漿器研磨成勻漿,100目滅菌不銹鋼網(wǎng)過濾。消毒每只小鼠左側(cè)腋皮膚,接種瘤液0.2ml。各瘤株分別接種50只小鼠。
接瘤后第二天隨機(jī)分為如下5組并給藥溶劑對(duì)照組給予等量輔料的生理鹽水溶液陽性藥對(duì)照給予環(huán)磷酰胺20mg/kg藥物小劑量組給予20(S)-人參皂苷-Rg33.75mg/kg藥物中劑量組給予20(S)-人參皂苷-Rg37.5mg/kg藥物劑大劑量組給予20(S)-人參皂苷-Rg315mg/kg連續(xù)靜脈給藥10天,末次給藥后24小時(shí)處死小鼠,剝?nèi)×鼋M織稱重。計(jì)算抑瘤率。
數(shù)據(jù)用X±SD表示,以t檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。
3、試驗(yàn)結(jié)果3.1 20(S)-人參皂苷-Rg3對(duì)小鼠H22肝癌生長的抑制作用結(jié)果表明,20(S)-人參皂苷-Rg3對(duì)小鼠H22肝癌生長呈劑量依賴性抑制作用,給藥組與溶劑對(duì)照組具有顯著性差異(大劑量和中劑量組P<0.01;低劑量組P<0.05);20(S)-人參皂苷-Rg3各組小鼠體重與溶劑對(duì)照組比較,無顯著性差異,環(huán)磷酰胺組小鼠體重與溶劑對(duì)照組比較,有顯著性差異結(jié)果見表1。
表1.20(S)-人參皂苷-Rg3對(duì)小鼠H22肝癌生長的抑制作用
與溶劑對(duì)照組比較**,P<0.01;*,P<0.05;與環(huán)磷酰胺組比較##,P<0.01;#,P<0.053.2 20(S)-人參皂苷-Rg3對(duì)小鼠U14宮頸癌生長的抑制作用結(jié)果表明,20(S)-人參皂苷-Rg3對(duì)小鼠U14宮頸癌生長呈劑量依賴性抑制作用,給藥組與溶劑對(duì)照組具有顯著性差異(大劑量和中劑量組P<0.01;低劑量組P<0.05);20(S)-人參皂苷-Rg3各組小鼠體重與溶劑對(duì)照組比較,無顯著性差異,環(huán)磷酰胺組小鼠體重與溶劑對(duì)照組比較,有顯著性差異結(jié)果見表2。
表2.20(S)-人參皂苷-Rg3對(duì)小鼠U14宮頸癌生長的抑制作用
與溶劑對(duì)照組比較*,P<0.05;**,P<0.01;與環(huán)磷酰胺組比較##,P<0.01。
3.3 20(S)-人參皂苷-Rg3對(duì)小鼠Lewis肺癌生長的抑制作用結(jié)果表明,20(S)-人參皂苷-Rg3對(duì)小鼠Lewis肺癌生長呈劑量依賴性抑制作用,給藥組與溶劑對(duì)照組具有顯著性差異(大劑量和中劑量組P<0.01;低劑量組P<0.05);20(S)-人參皂苷-Rg3各組小鼠體重與溶劑對(duì)照組比較,無顯著性差異,環(huán)磷酰胺組小鼠體重與溶劑對(duì)照組比較,有顯著性差異結(jié)果見表3。
表3 20(S)-人參皂苷-Rg3對(duì)小鼠Lewis肺癌生長的抑制作用
與溶劑對(duì)照組比較*,P<0.05;**,P<0.01;與環(huán)磷酰胺組比較##,P<0.01。
3.4 20(S)-人參皂苷-Rg3對(duì)小鼠B16黑色素瘤生長的抑制作用結(jié)果表明,20(S)-人參皂苷-Rg3對(duì)小鼠Lewis肺癌生長呈劑量依賴性抑制作用,給藥組與溶劑對(duì)照組具有顯著性差異(大劑量和中劑量組P<0.01;低劑量組P<0.05);20(S)-人參皂苷-Rg3各組小鼠體重與溶劑對(duì)照組比較,無顯著性差異,環(huán)磷酰胺組小鼠體重與溶劑對(duì)照組比較,有顯著性差異結(jié)果見表4。
表4 20(S)-人參皂苷-Rg3對(duì)小鼠B16黑色素瘤生長的抑制作用
與溶劑對(duì)照組比較*,P<0.05;**,P<0.01;與環(huán)磷酰胺組比較##,P<0.01。
試驗(yàn)例2 20(S)-人參皂苷-Rg33對(duì)化療藥物的增效作用1、試驗(yàn)材料 同試驗(yàn)例12、試驗(yàn)內(nèi)容用小鼠H22肝癌和Lewis肺癌建立小鼠體內(nèi)移植性腫瘤模型,按如下組別分組及給藥溶劑對(duì)照組給予等量輔料的生理鹽水溶液環(huán)磷酰胺小劑量組給予環(huán)磷酰胺5mg/kg環(huán)磷酰胺小劑量+藥物小劑量組給予環(huán)磷酰胺5+20(S)-人參皂苷-Rg33.75mg/kg環(huán)磷酰胺小劑量+藥物大劑量組給予環(huán)磷酰胺5+20(S)-人參皂苷-Rg315mg/kg環(huán)磷酰胺大劑量組給予環(huán)磷酰胺10mg/kg環(huán)磷酰胺大劑量+藥物小劑量組給予環(huán)磷酰胺10+20(S)-人參皂苷-Rg33.75mg/kg環(huán)磷酰胺大劑量+藥物大劑量組給予環(huán)磷酰胺10+20(S)-人參皂苷-Rg315mg/kg環(huán)磷酰胺大劑量+藥物注射高劑量組給予環(huán)磷酰胺10+20(S)-人參皂苷-Rg3150mg/kg環(huán)磷酰胺大劑量+藥物口服高劑量組給予環(huán)磷酰胺10+20(S)-人參皂苷-Rg3300mg/kg給藥方法如前所述。末次給藥后脫頸椎處死小鼠,取瘤并稱重,比較單用環(huán)磷酰胺5mg/kg和10mg/kg治療與20(S)-人參皂苷-Rg33.75mg/kg和人參皂苷-Rg315mg/kg合用治療各組的抑瘤率,觀察20(S)-人參皂苷-Rg3增效作用。
數(shù)據(jù)用X±SD表示,以t檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。
3、試驗(yàn)結(jié)果3.1 20(S)-人參皂苷-Rg3對(duì)環(huán)磷酰胺治療小鼠H22肝癌的增效作用結(jié)果表明,環(huán)磷酰胺5mg/kg劑量組抑瘤率為23.8%,而加用3.75mg/kg和15mg/kg 20(S)-人參皂苷-Rg3后,明顯提高了環(huán)磷酰胺的抑瘤效果。環(huán)磷酰胺10mg/kg對(duì)H22肝癌抑瘤率為32.2%,加用3.75mg/kg、15mg/kg、150mg/kg、口服3000mg/kg20(S)-人參皂苷-Rg3后,明顯提高了環(huán)磷酰胺的抑瘤效果,結(jié)果見表5。
表5 環(huán)磷酰胺與20(S)-人參皂苷-Rg3聯(lián)合應(yīng)用對(duì)小鼠H22肝癌生長的抑制作用級(jí)別劑量(mg/kg)瘤重(g)抑瘤率(%)溶劑對(duì)照組 2.46±0.68環(huán)磷酰胺5 1.87±0.49 23.8環(huán)磷酰胺10 1.67±0.51*32.2環(huán)磷酰胺+Rg35+3.75 1.33±0.51**# 45.9環(huán)磷酰胺+Rg35+15 1.18±0.34**## 52.0環(huán)磷酰胺+Rg310+3.751.05±0.28**# 57.2環(huán)磷酰胺+Rg310+15 0.83±0.36**## 66.3環(huán)磷酰胺+Rg310+150 0.53±0.30**## 78.5環(huán)磷酰胺+口服Rg310+300 0.73±0.37**## 70.3與溶劑對(duì)照組比較**,P<0.01;*,P<0.05。與環(huán)磷酰胺組比較##,P<0.01。
3.1 20(S)-人參皂苷-Rg3對(duì)環(huán)磷酰胺治療小鼠Lewis肺癌的增效作用結(jié)果表明,環(huán)磷酰胺5mg/kg劑量組抑瘤率為22.2%,而加用3.75mg/kg和15mg/kg 20(S)-人參皂苷-Rg3后,明顯提高了環(huán)磷酰胺的抑瘤效果。環(huán)磷酰胺10mg/kg對(duì)H22肝癌抑瘤率為34.4%,加用3.75mg/kg、15mg/kg、15mg/kg 20(S)-人參皂苷-Rg3后,明顯提高了環(huán)磷酰胺的抑瘤效果,結(jié)果見表6。
表6 環(huán)磷酰胺與20(S)-人參皂苷-Rg3聯(lián)合應(yīng)用對(duì)小鼠Lewis生長的抑制作用級(jí)別劑量(mg/kg) 瘤重(g)抑瘤率(%)溶劑對(duì)照組1.93±0.55環(huán)磷酰胺5 1.50±0.35 22.2環(huán)磷酰胺101.26±0.34*34.4環(huán)磷酰胺+Rg35+3.751.19±0.22**# 38.5環(huán)磷酰胺+Rg35+15 1.05±0.32**## 45.3環(huán)磷酰胺+Rg310+3.75 0.89±0.33**# 54.0環(huán)磷酰胺+Rg310+15 0.73±0.24**## 62.1環(huán)磷酰胺+Rg310+1500.56±0.28**## 71.0環(huán)磷酰胺+口服Rg310+3000.67±0.32**## 65.3與溶劑對(duì)照組比較**,P<0.01;*,P<0.05。與環(huán)磷酰胺組比較##,P<0.01。
以上結(jié)果提示,環(huán)磷酰胺5mg/kg為治療小鼠H22肝癌及Lewis肺癌的無效劑量,環(huán)磷酰胺10mg/kg劑量組為治療肝癌H22和Lewis肺癌的有效劑量,20(S)-人參皂苷-Rg3與其聯(lián)合應(yīng)用后可明顯提高其抑瘤率,聯(lián)合治療組與相應(yīng)劑量環(huán)磷酰胺組比較有顯著性差別(P<0.05)。表明20(S)-人參皂苷-Rg3具有明顯的增效作用。
試驗(yàn)例3 20(S)-人參皂苷-Rg3的降低抗癌藥物毒性作用1、試驗(yàn)材料 同試驗(yàn)例12、試驗(yàn)內(nèi)容用小鼠H22肝癌和Lewis肺癌建立小鼠體內(nèi)移植性腫瘤模型,按如下組別分組及給藥溶劑對(duì)照組給予等量輔料的生理鹽水溶液環(huán)磷酰胺小劑量組給予環(huán)磷酰胺10mg/kg環(huán)磷酰胺小劑量+藥物小劑量組給予環(huán)磷酰胺10+20(S)-人參皂苷-Rg33.75mg/kg環(huán)磷酰胺小劑量+藥物大劑量組給予環(huán)磷酰胺10+20(S)-人參皂苷-Rg315mg/kg環(huán)磷酰胺大劑量組給予環(huán)磷酰胺10mg/kg環(huán)磷酰胺大劑量+藥物小劑量組給予環(huán)磷酰胺20+20(S)-人參皂苷-Rg33.75mg/kg環(huán)磷酰胺大劑量+藥物大劑量組給予環(huán)磷酰胺20+20(S)-人參皂苷-Rg315mg/kg環(huán)磷酰胺大劑量+藥物高劑量組給予環(huán)磷酰胺20+20(S)-人參皂苷-Rg3150mg/kg環(huán)磷酰胺大劑量+藥物口服高劑量組給予環(huán)磷酰胺10+20(S)-人參皂苷-Rg3300mg/kg給藥方法如前所述。比較單用環(huán)磷酰胺10mg/kg和20mg/kg治療同與20(S)-人參皂苷-Rg33.75mg/kg、Rg315mg/kg、Rg3150mg/kg、口服Rg3300mg/kg聯(lián)合應(yīng)用治療各組之間動(dòng)物體重、胸腺指數(shù)和脾指數(shù),用血象分析儀計(jì)數(shù)外周血白細(xì)胞,比較各組間白細(xì)胞數(shù)。
數(shù)據(jù)用X±SD表示,以t檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。
3、試驗(yàn)結(jié)果在小鼠H22肝癌和Lewis肺癌腫瘤模型中,環(huán)磷酰胺20mg/kg劑量組在抑瘤的同時(shí),也見體重、免疫器官臟器指數(shù)及白細(xì)胞數(shù)均明顯下降(P<0.01)。與人參皂苷合用后可明顯改善由抗環(huán)磷酰胺所致小鼠體重降低、白細(xì)胞下降及免疫器官萎縮,提高小鼠胸腺及脾臟臟器指數(shù)(見表7、8)。表明20(S)-人參皂苷-Rg3可明顯降低由環(huán)磷酰胺所致毒副作用。表7 20(S)-人參皂苷-Rg3對(duì)環(huán)磷酰胺在治療小鼠H22肝癌中的減毒作用級(jí)別 劑量(mg/kg) 胸腺指數(shù) 體重(g)脾指數(shù) WBC(×109)溶劑對(duì)照組 25.52±6.87 29.2±2.7 25.91±4.80 8.88±2.57環(huán)磷酰胺 2012.40±4.25**24.0±2.5**10.10±2.60**4.25±1.82**環(huán)磷酰胺+Rg3 10+3.75 14.80±3.77# 26.4±2.0# 16.30±2.26# 6.90±3.03#環(huán)磷酰胺+Rg3 10+15 19.80±3.52##27.9±2.8##19.00±5.09##8.02±3.09##環(huán)磷酰胺+Rg3 10+15021.80±3.48##28.9±2.8##21.08±5.29##8.52±2.79##環(huán)磷酰胺+口服Rg3 10+30020.30±3.28##28.5±2.6##20.08±4.29##8.12±2.69##與溶劑對(duì)照組比較**,P<0.01;*,P<0.05。與環(huán)磷酰胺組比較#,P<0.05;##,P<0.01。
表8 20(S)-人參皂苷-Rg3對(duì)環(huán)磷酰胺在治療小鼠Lewis肺癌中的減毒作用級(jí)別劑量(mg/kg)胸腺指數(shù) 體重(g)脾指數(shù) WBC(×109/L)溶劑對(duì)照組 24.22±6.89 29.5±2.5 26.91±4.46 9.08±2.29環(huán)磷酰胺20 12.00±4.37**24.3±2.0**10.30±2.31**4.45±1.89**環(huán)磷酰胺+Rg310+3.7515.80±3.01# 26.7±1.7# 15.30±4.52# 7.10±2.96#環(huán)磷酰胺+Rg310+15 19.75±3.52##28.2±2.9##19.20±5.13##8.22±3.02##環(huán)磷酰胺+Rg310+150 21.75±3.32##29.2±2.7##21.20±5.23##8.62±2.02##環(huán)磷酰胺+口服Rg310+300 20.10±3.18##28.7±2.2##20.18±4.39##8.10±2.59##與溶劑對(duì)照組比較**,P<0.01;*,P<0.05。與環(huán)磷酰胺組比較#,P<0.05;##,P<0.01。
試驗(yàn)例4 20(S)-人參皂苷-Rg3對(duì)X射線照射荷瘤小鼠的減毒作用1、試驗(yàn)材料 同試驗(yàn)例12、試驗(yàn)內(nèi)容照射條件應(yīng)用Philips深部X線治療機(jī)照射,電壓220V,電流10mA.。動(dòng)物置于塑料盒內(nèi)進(jìn)行全身照射劑量率0.287Gy/min,靶皮距50cm,總劑量4Gy,溶劑對(duì)照組1給予假照射。
試驗(yàn)步驟H22肝癌接種取于昆明鼠腹腔內(nèi)接種傳代七天的上述荷瘤小鼠,消毒腹部皮膚后,抽取腹水,加入三倍體積的注射用生理鹽水稀釋,消毒鼠腋下皮膚,每只小鼠于腋下注射瘤細(xì)胞懸液0.2ml,分別接種70只小鼠。
接瘤后第二天隨機(jī)分為如下5組并給藥溶劑對(duì)照組1給予等量輔料的生理鹽水溶液溶劑對(duì)照組2給予等量輔料的生理鹽水溶液藥物小劑量組給予20(S)-人參皂苷-Rg33.75mg/kg藥物中劑量組給予20(S)-人參皂苷-Rg37.5mg/kg藥物大劑量組給予20(S)-人參皂苷-Rg315mg/kg藥物注射高劑量組給予20(S)-人參皂苷-Rg3150mg/kg藥物口服高劑量組給予20(S)-人參皂苷-Rg3300mg/kg在給藥第6天進(jìn)行除溶劑對(duì)照組1外均進(jìn)行X射線照射,放射劑量為每鼠總劑量4Gy,繼續(xù)給藥,于放射后第4天取血測(cè)WBC數(shù)。
數(shù)據(jù)用X±SD表示,以t檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。
3、試驗(yàn)結(jié)果由表9可見用4Gy總劑量的X射線全身照射的小鼠,經(jīng)過20(S)-人參皂苷-Rg3,在第10天20(S)-人參皂苷-Rg33.75mg/kg、7.5mg/kg、15mg/kg、150mg/kg、口服300mg/kg可抑制因放射所致的小鼠白細(xì)胞降低。提示,20(S)-人參皂苷-Rg3具有明顯抗輻射作用,有助于增強(qiáng)荷瘤小鼠自身的免疫功能,提高其防御能力。
表9.20(S)-人參皂苷-Rg3對(duì)X射線照射荷瘤小鼠的減毒作用組別 劑量(mg/kg) WBC(×109/L)溶劑對(duì)照組1 ----7.41±1.59溶劑對(duì)照組2 ----1.81±0.87**3.753.15±1.56#Rg3 7.5 5.59±3.02##15 6.39±2.01##150 6.52±1.13##口服Rg3 300 6.41±1.91##*,p<0.05,p<0.01;表示與溶劑對(duì)照組1比較,**;#p<0.05,##p<0.01;表示與溶劑對(duì)照組2比較試驗(yàn)例5 20(S)-人參皂苷-Rg3的急性毒性試驗(yàn)1、試驗(yàn)材料 同試驗(yàn)例12、試驗(yàn)內(nèi)容取小鼠50只,體重18~22g,雌雄各半,隨機(jī)分5組,劑量為312.5mg/kg、250mg/kg、200mg/kg、160mg/kg、128mg/kg,給藥方式靜脈注射,給藥體積0.4ml/20g,給藥后小鼠1小時(shí)出現(xiàn)死亡,觀察小鼠7天總的死亡情況,LD50值用寇氏改進(jìn)法計(jì)算。
3、試驗(yàn)結(jié)果由表10可見,結(jié)果劑量組為312.5mg/kg全部死亡,劑量組為250mg/kg死亡8只,劑量組為200mg/kg死亡3只,、劑量組為160mg/kg、128mg/kg未出現(xiàn)死亡。LD50(95%的可信限)218.7±28.6mg/kg。表1020(S)-人參皂苷-Rg3的急性毒性試驗(yàn)劑量死亡數(shù) 死亡率312.5mg/kg 10 1250mg/kg80.8200mg/kg30.3160mg/kg00128mg/kg00
權(quán)利要求
1.一種以20(S)-人參皂苷-Rg3為有效成分,用于增強(qiáng)抗癌藥物療效,降低抗癌藥物毒性、預(yù)防和治療放化療引起的白細(xì)胞降低的藥物。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的藥物,其由20(S)-人參皂苷-Rg3和藥學(xué)上可接受的載體組成。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的藥物,其可以以口服或注射途徑給藥,注射給藥可以為靜脈注射、肌肉注射、腹腔注射、皮下注射或瘤體內(nèi)注射。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的藥物,口服制劑可以為片劑、膠囊劑、丸劑、顆粒劑、滴丸、軟膠囊、懸浮液、溶液、糖漿,膠囊劑、顆粒劑、滴丸;注射用制劑可以為凍干粉針、注射用靜脈乳劑、注射液、輸液。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的藥物,口服制劑優(yōu)選為片劑、膠囊劑、顆粒劑;注射用制劑優(yōu)選凍干粉針、注射用靜脈乳劑。
6.20(S)-人參皂苷-Rg3在制備具有增強(qiáng)抗癌藥物療效、降低抗癌藥物毒性、預(yù)防和治療放化療引起的白細(xì)胞降低的藥物中的應(yīng)用。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的應(yīng)用,其使用劑量范圍為1mg~2000mg。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的應(yīng)用,優(yōu)選劑量范圍為20mg~500mg。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種以20(S)-人參皂苷-Rg
文檔編號(hào)A61K31/7028GK1623553SQ20031011443
公開日2005年6月8日 申請(qǐng)日期2003年12月6日 優(yōu)先權(quán)日2003年12月6日
發(fā)明者蔣王林, 田京偉, 王超云, 傅風(fēng)華, 王振華 申請(qǐng)人:山東綠葉天然藥物研究開發(fā)有限公司