專利名稱：注射用冠心寧及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于藥品領(lǐng)域，涉及一種以植物生藥丹參和川芎為原料的注射用冠心寧凍干粉針的制備方法。
背景技術(shù)：
目前市售的冠心寧注射液是由丹參和川芎為原料，二者混合后，水煎醇沉進(jìn)行有效成分提取后制備的水針劑，雖然臨床上是確有療效的純中藥急癥復(fù)合活性成分，用于治療心腦血管疾病、冠心病、心絞痛、心衰、高血壓、缺血性腦血管病、慢性肝炎等疾病，還可活血化淤，通心養(yǎng)脈，但冠心寧注射液存在提取工藝不科學(xué)，有效成分提取不全，產(chǎn)品質(zhì)量控制難度大，制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)低且不完善等不足之處；此外，冠心寧注射液的藥物濃度低，臨床用量大(每次用量50-100ml)，且冠心寧注射液的運(yùn)輸、儲存也均不方便。據(jù)文獻(xiàn)報道(黃熙等，川芎伍用丹參煎劑對川芎嗪藥物動力學(xué)的影響，中國中西醫(yī)結(jié)合雜志，1994，14(5)288-291)川芎的主要有效成分之一為川芎嗪，具有擴(kuò)張冠脈，增加冠脈流量，降低耗氧等廣泛的生物活性，但川芎丹參共煎液在大鼠體內(nèi)的川芎嗪血藥濃度明顯低于川芎單煎液，可能是川芎丹參共煎影響了川芎嗪的提取。另有學(xué)者發(fā)現(xiàn)川芎的主要有效成分如阿魏酸、腺苷等，采用煎煮法的提取率低，而乙醇回流和超聲法提取時，兩者的提取率明顯提高(孫沂等，川芎藥材的HPCE-FP方法學(xué)研究，中國中藥雜志，2003，28(2)167-171)。目前市售的冠心寧注射液僅采用丹參和川芎二者混合后，水煎醇沉進(jìn)行有效成分提取，顯然難將有效成分提取完全，并且此工藝均無二者的醇提成分；由于是將丹參和川芎混合后提取，成分過于復(fù)雜，中間體控制難度較大；現(xiàn)行的冠心寧注射液質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中僅對丹參的主要成分原兒茶醛進(jìn)行定量，缺乏對川芎主要有效部位的定量指標(biāo)；此外，冠心寧注射液的穩(wěn)定性也較差，長期儲存后，顏色會變深，并產(chǎn)生沉淀。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種提取工藝更先進(jìn)、科學(xué)，有效成分提取更完全，制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)更高，質(zhì)量可控并且穩(wěn)定性好，藥物濃度高，便于運(yùn)輸、儲存和使用的注射用冠心寧凍干粉針劑的制備方法。
本發(fā)明注射用冠心寧的制作工藝如下藥材丹參和川芎分別經(jīng)揀選、洗凈、烘干、粉碎成片狀或細(xì)粒狀。
丹參先采用20～50倍乙醇回流提取3～4次，每次2～3小時，用薄層層析法控制提取終點(diǎn)，得丹參有效成分提取液A；再將乙醇回流提取過的丹參用10～20倍的水煎煮2～4次，每次40～80分鐘，合并煎液，濾過，濾液濃縮后進(jìn)行醇沉，使含醇量達(dá)75％～85％，每次醇沉后均冷藏放置，然后取上清液濾過，濾液與上述提取液A合并，冷藏，取上清液濾過，濾液濃縮至稠膏狀后，加水沉淀處理，過濾，然后取上清液濾過，即得丹參有效部位提取液B，供配液使用；川芎先采用20～50倍70％～90％乙醇超聲提取3～4次，每次1～3小時，提取液合并后冷藏過夜，取上清液濾過，濾液濃縮至稠膏狀后，加水沉淀處理，過夜，然后取上清液濾過，即得川芎有效成分提取液C；再將乙醇超聲提取過的川芎用10～20倍水煎煮2～4次，每次30～50分鐘，合并煎液，濾過，濾液濃縮至稠膏狀后加入乙醇進(jìn)行醇沉，使含醇量達(dá)75％～85％，濾過，合并濾液，回收乙醇并濃縮至稠膏狀，然后加水，攪勻，冷藏，濾過，濾液加適量活性碳煮沸20～40分鐘，稍冷，過濾至澄明，即得川芎有效部位提取液D；將川芎有效成分提取液C與D合并，濾過，即得川芎有效部位提取液E，供配液使用；將上述所得的有效部位提取液B和E混合均勻，即得注射用冠心寧所用植物生藥的有效成分提取液，向有效成分提取液中按每毫升加入賦形劑0.01～0.2克，攪拌，溶解，濾過，并加注射用水適量，再調(diào)節(jié)PH值至4～8，即得注射用冠心寧凍干制劑所用植物生藥的有效成分混合液；將凍干所用植物生藥的有效成分混合液按每瓶定量分裝后，未封口放入凍干箱的金屬盤內(nèi)，并將溫度降低至-30℃～-50℃，迅速將裝有制劑的金屬盤放入凍干箱內(nèi)，維持2～7小時，然后使箱內(nèi)的真空度為0.1～0.5Pa，再將擱板升溫，并控制在共熔點(diǎn)-1℃～-3℃以下，保持10～20小時，最后升溫至35℃～40℃，并保持一定時間，使制劑溫度與擱板溫度重合，放入無菌的過濾氣體，控制制劑的含水量在1～5％，迅速封口即可。
冷凍干燥過程中可選擇的最佳物理?xiàng)l件是首先將擱板降溫至-30℃，維持3小時，然后使凍干箱內(nèi)的真空度為0.2Pa，將擱板升溫并嚴(yán)格控制在-2℃，保持18小時，將擱板升溫至40℃放入無菌氣體后，控制制劑的含水量為2％。
本發(fā)明所述的注射用冠心寧凍干粉針劑中每毫升凍干粉針劑中含相當(dāng)于原生藥量丹參2.0-8.0g、川芎2.0-8.0g；每毫升注射用冠心寧含主要有效成份原兒茶醛不少于0.5mg，含川芎嗪不少于0.1mg。
臨床用于治療心腦血管疾病、冠心病、心絞痛、心衰、高血壓、缺血性腦血管病、慢性肝炎等疾病，療效更顯著，未引起不良反應(yīng)。本發(fā)明涉及的提取工藝與現(xiàn)有技術(shù)相比，具有植物生藥丹參和川芎有效成分提取更完全，提取工藝質(zhì)量可控，制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)更高，并且凍干粉針劑的穩(wěn)定性要比注射液好，注射用冠心寧藥物濃度高，便于運(yùn)輸、儲存和使用。用本方法制備的注射用冠心寧處于中藥注射劑的先進(jìn)水平。藥理實(shí)驗(yàn)表明與現(xiàn)有的冠心寧注射液比較，用本方法制備的注射用冠心寧能更有效降低肺動脈壓，加強(qiáng)心肌收縮功能，改善缺氧狀態(tài)，從而降低心臟負(fù)荷，使心衰得到有效糾正(有效率超過90％)，并能明顯提高機(jī)體對缺氧的耐受力，且毒性小，無明顯的刺激性。
本發(fā)明所述注射用冠心寧“含量測定”方法如下(1)原兒茶醛的含量測定方法色譜條件與系統(tǒng)試用性試驗(yàn) 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-水-冰醋酸(9-11∶80-100∶0.45-0.6)為流動相；檢測波長為280nm。理論板數(shù)按原兒茶醛計算，應(yīng)不低于1500。
對照品溶液的制備 精密稱取在105℃干燥至恒重的原兒茶醛對照品20mg，置100ml量瓶中，加流動相至刻度，搖勻。精密量取2ml，置10ml量瓶中，加流動相至刻度，搖勻，即得(每1ml中含原兒茶醛0.04mg)。
測定法 精密量取本品5ml，置100ml量瓶中，加流動相至刻度，搖勻。精密量取10μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另取對照品溶液，同法測定，按外標(biāo)法以峰面積計算，即得。
本品每1ml含丹參提取物以原兒茶醛(C7H6O3)計，應(yīng)不少于0.5mg。
(2)川芎嗪的含量測定方法色譜條件與系統(tǒng)試用性試驗(yàn) 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-水-冰醋酸(30-50∶50-70∶0.4-0.6)為流動相；檢測波長為293nm。理論板數(shù)按鹽酸川芎嗪計算，應(yīng)不低于1500。
對照品溶液的制備 精密稱取在105℃干燥至恒重的鹽酸川芎嗪對照品25mg，置50ml量瓶中，加流動相至刻度，搖勻。精密量取1ml，置10ml量瓶中，加流動相至刻度，搖勻，即得(每1ml中含鹽酸川芎嗪0.05mg)。
測定法 精密量取本品1ml，置100ml量瓶中，加流動相至刻度，搖勻。精密量取10μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另取對照品溶液，同法測定，按外標(biāo)法以峰面積計算，即得。
本品每1ml含川芎提取物以川芎嗪(C8H12N2)計，應(yīng)不少于0.1mg。
實(shí)驗(yàn)例1丹參與川芎有效成分提取工藝的篩選文獻(xiàn)報道冠心寧注射液中丹參與川芎有效成分的提取是將丹參和川芎混合后，水煎醇沉進(jìn)行有效成分提取。這種提取工藝的不足之處是對川芎有效成分的提取有影響，二者混合后提取，成分過于復(fù)雜，中間體控制難度大，有效成分提取不全，川芎的主要有效成分如阿魏酸、腺苷等，采用水煎醇沉法的提取率低。為此，本實(shí)驗(yàn)對丹參與川芎有效成分提取最佳工藝條件進(jìn)行了比較研究，現(xiàn)總結(jié)如下樣品的制備(1)乙醇回流提取結(jié)合水煎醇沉法提取丹參有效成分稱丹參2kg，采用20倍乙醇回流提取3次，每次2.5小時，用薄層層析法控制提取終點(diǎn)，得丹參有效成分提取液A；再將乙醇回流提取過的丹參分別用20倍的水煎煮三次，每次60分鐘，合并煎液，濾過，濾液濃縮后進(jìn)行兩次醇沉，第一次使含醇量達(dá)75％，第二次使含醇量達(dá)85％，每次醇沉后均冷藏放置，然后取上清液濾過，濾液與上述提取液A合并，冷藏，取上清液濾過，濾液濃縮至稠膏狀后，加水至450ml沉淀處理，過夜，然后取上清液濾過，即得丹參藥用組分提取液B。
(2)乙醇超聲提取結(jié)合水煎醇沉法提取川芎有效成分稱川芎2kg，采用10倍80％乙醇超聲提取3次，每次2小時，提取液合并后冷藏過夜，取上清液濾過，濾液濃縮至稠膏狀后，加水沉淀處理，過夜，然后取上清液濾過，即得川芎有效成分提取液C；再將乙醇超聲提取過的川芎分別用20倍水煎煮三次，每次40分鐘，合并煎液，濾過，濾液濃縮至稠膏狀后加入乙醇進(jìn)行兩次醇沉，第一次使含醇量達(dá)75％，第二次使含醇量達(dá)85％，濾過，合并濾液，回收乙醇并濃縮至稠膏狀，然后加水，攪勻，冷藏，濾過，濾液加3％活性碳煮沸30分鐘，稍冷，過濾至澄明，即得川芎藥用組分提取液D；將川芎有效成分提取液C與D合并，加入注射用水至450ml，濾過，即得川芎藥用組分提取液E。
(3)丹參與川芎有效成分提取混合液的制備將上述所得的丹參與川芎藥用組分提取液B和E混合均勻，然后加水至1000ml，即得注射用冠心寧所用植物生藥的有效成分提取液。
(4)水煎醇沉法提取丹參與川芎有效成分混合液按照冠心寧注射液(WS3-B-3267-98)所述的制備方法制備丹參與川芎有效成分混合液。具體做法是稱取丹參與川芎各2kg，混合后加20倍水煎煮三次，第一次120分鐘，第二、三次各90分鐘，合并煎液，濾過，濾液濃縮至約2000ml后，加入乙醇進(jìn)行兩次醇沉，第一次使含醇量達(dá)75％，第二次使含醇量達(dá)85％，濾過，合并濾液，回收乙醇并濃縮至稠膏狀，然后加水至1000ml，冷藏，濾過，即得冠心寧注射液所用植物生藥的有效成分提取液。
每處理重復(fù)3次，實(shí)驗(yàn)結(jié)果(見表1)表明以原兒茶醛和川芎嗪計算，丹參與川芎單獨(dú)提取工藝，即先采用乙醇回流結(jié)合水煎醇沉提取丹參有效成分，再采用乙醇超聲結(jié)合水煎醇沉提取川芎有效成分，最后將二者混合，該單獨(dú)提取工藝所得原兒茶醛和川芎嗪的量均明顯高于水煎醇沉法混合提取工藝所得的量。
表1 提取工藝對原兒茶醛和川芎嗪量的影響原兒茶醛(mg/ml) 川芎嗪(mg/ml)1 2 3 1 2 3單獨(dú)提取工藝0.530.670.650.180.250.26混合提取工藝0.310.350.340.030.01未測出實(shí)驗(yàn)例2賦形劑的選擇向上述單獨(dú)提取工藝所得的藥用組分提取液中加入不同種類的賦形劑，經(jīng)冷凍干燥制成凍干粉針劑的外觀結(jié)果，見表2。
表2不同賦形劑的影響右旋糖酐 葡萄糖甘露醇水解明膠蔗糖乳糖外觀指標(biāo)0.05 較好0.05一般0.05 最佳0.05一般0.05萎縮0.05一般0.05 0.05 較好0.050.05一般0.05 0.05較好每處理重復(fù)3次，表2表明選用甘露醇為最佳賦形劑。
實(shí)驗(yàn)例3與原有的冠心寧注射液質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的比較本發(fā)明所述注射用冠心寧比原有的冠心寧注射液的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)有提高，其“含量測定”項(xiàng)下對比如表3表3 “含量測定”方法與指標(biāo)的比較方法 指標(biāo)冠心寧注射液 HPLC法原兒茶醛不少于0.3mg/ml原兒茶醛不少于0.5mg/ml注射用冠心寧 HPLC法川芎嗪不少于0.1mg/ml實(shí)施例1本發(fā)明冠心寧凍干粉針的制備方法處方組成丹參 20kg川芎 20kg甘露醇 1kg注射用水適量制成 10000ml制備方法藥材的提取與精制1、丹參經(jīng)揀選、洗凈、烘干、粉碎成細(xì)粒狀，稱取粉碎成細(xì)粒狀的丹參20kg，然后加25倍乙醇回流提取3次，每次2.5小時，用薄層層析法控制提取終點(diǎn)，得丹參有效成分提取液A；再將乙醇回流提取過的丹參用20倍的水煎煮三次，每次60分鐘，合并煎液，濾過，濾液濃縮后進(jìn)行兩次醇沉，第一次使含醇量達(dá)75％，第二次使含醇量達(dá)85％，每次醇沉后均冷藏放置，然后取上清液濾過，濾液與上述提取液A合并，冷藏，取上清液濾過，濾液濃縮至稠膏狀后，加水至4500ml沉淀處理，過夜，然后取上清液濾過，即得丹參有效部位提取液B，供配液使用。
2、川芎經(jīng)揀選、洗凈、烘干、粉碎成細(xì)粒狀，稱取粉碎成細(xì)粒狀的川芎20kg，先采用20倍80％乙醇超聲提取3次，每次2小時，提取液合并后冷藏過夜，取上清液濾過，濾液濃縮至稠膏狀后，加水沉淀處理，過夜，然后取上清液濾過，即得川芎有效成分提取液C；再將乙醇超聲提取過的川芎用10倍水煎煮三次，每次40分鐘，合并煎液，濾過，濾液濃縮至稠膏狀后加入乙醇進(jìn)行兩次醇沉，第一次使含醇量達(dá)75％，第二次使含醇量達(dá)85％，濾過，合并濾液，回收乙醇并濃縮至稠膏狀，然后加水，攪勻，冷藏，濾過，濾液加適量活性碳煮沸30分鐘，稍冷，過濾至澄明，即得川芎有效部位提取液D；將川芎有效成分提取液C與D合并，加入注射用水至4500ml，濾過，即得川芎有效部位提取液E，供配液使用。
3、將上述所得的有效部位提取液B和E混合均勻，即得注射用冠心寧所用植物生藥的有效成分提取液9000ml，向有效成分提取液中按每毫升加入甘露醇0.1克，攪拌，溶解，濾過，并加注射用水至10000ml，再調(diào)節(jié)PH值至6.8，即得注射用冠心寧凍干所用植物生藥的有效成分混合液。
冷凍干燥將上述注射用冠心寧凍干所用植物生藥的有效成分混合液按每瓶10ml分裝后，未封口放入與凍干箱尺寸相應(yīng)的金屬盤內(nèi)，對凍干箱進(jìn)行滅菌處理，并將其擱板的溫度降低至-30℃，迅速將裝有制劑的金屬盤放入凍干箱內(nèi)，維持2小時，然后對凍干箱進(jìn)行真空處理，使箱內(nèi)的真空度為0.2Pa，再將擱板升溫，并嚴(yán)格控制在共熔點(diǎn)-2℃以下，保持12小時，最后升溫至40℃，并保持一定時間，使制劑溫度與擱板溫度重合，放入無菌的過濾氣體，控制制劑的含水量在2％，迅速封口即可。
實(shí)施例2本發(fā)明冠心寧凍干粉針的制備方法處方組成丹參 30kg川芎 30kg甘露醇 0.5kg葡萄糖 0.5kg注射用水適量制成 10000ml制備方法藥材的提取與精制1、丹參經(jīng)揀選、洗凈、烘干、粉碎成細(xì)粒狀，稱取粉碎成細(xì)粒狀的丹參30kg，然后加25倍乙醇回流提取4次，每次2.5小時，用薄層層析法控制提取終點(diǎn)，得丹參有效成分提取液A；再將乙醇回流提取過的丹參用20倍的水煎煮三次，每次60分鐘，合并煎液，濾過，濾液濃縮后進(jìn)行兩次醇沉，第一次使含醇量達(dá)75％，第二次使含醇量達(dá)85％，每次醇沉后均冷藏放置，然后取上清液濾過，濾液與上述提取液A合并，冷藏，取上清液濾過，濾液濃縮至稠膏狀后，加水至4500ml沉淀處理，過夜，然后取上清液濾過，即得丹參有效部位提取液B，供配液使用。
2、川芎經(jīng)揀選、洗凈、烘干、粉碎成細(xì)粒狀，稱取粉碎成細(xì)粒狀的川芎30kg，先采用25倍80％乙醇超聲提取3次，每次2小時，提取液合并后冷藏過夜，取上清液濾過，濾液濃縮至稠膏狀后，加水沉淀處理，過夜，然后取上清液濾過，即得川芎有效成分提取液C；再將乙醇超聲提取過的川芎用15倍水煎煮三次，每次40分鐘，合并煎液，濾過，濾液濃縮至稠膏狀后加入乙醇進(jìn)行兩次醇沉，第一次使含醇量達(dá)75％，第二次使含醇量達(dá)85％，濾過，合并濾液，回收乙醇并濃縮至稠膏狀，然后加水，攪勻，冷藏，濾過，濾液加適量活性碳煮沸30分鐘，稍冷，過濾至澄明，即得川芎有效部位提取液D；將川芎有效成分提取液C與D合并，加入注射用水至4500ml，濾過，即得川芎有效部位提取液E，供配液使用。
3、將上述所得的有效部位提取液B和E混合均勻，即得注射用冠心寧所用植物生藥的有效成分提取液9000ml，向有效成分提取液中加入甘露醇0.5kg(相當(dāng)于每毫升含甘露醇0.05克)，葡萄糖0.5kg(0.05g/ml)，攪拌，溶解，濾過，并加注射用水至10000ml，再調(diào)節(jié)PH值至6.8，即得注射用冠心寧凍干所用植物生藥的有效成分混合液。
冷凍干燥將上述注射用冠心寧凍干所用植物生藥的有效成分混合液按每瓶10ml分裝后，未封口放入與凍干箱尺寸相應(yīng)的金屬盤內(nèi)，對凍干箱進(jìn)行滅菌處理，并將其擱板的溫度降低至-30℃，迅速將裝有制劑的金屬盤放入凍干箱內(nèi)，維持3小時，然后對凍干箱進(jìn)行真空處理，使箱內(nèi)的真空度為0.2Pa，再將擱板升溫，并嚴(yán)格控制在共熔點(diǎn)-2℃以下，保持20小時，最后升溫至40℃，并保持一定時間，使制劑溫度與擱板溫度重合，放入無菌的過濾氣體，控制制劑的含水量在2％，迅速封口即可。
實(shí)施例3本發(fā)明冠心寧凍干粉針的制備方法處方組成丹參30kg川芎40kg甘露醇 0.5kg注射用水適量制成10000ml制備方法藥材的提取與精制1、丹參經(jīng)揀選、洗凈、烘干、粉碎成細(xì)粒狀，稱取粉碎成細(xì)粒狀的丹參30kg，先采用20倍乙醇回流提取3次，每次2小時，用薄層層析法控制提取終點(diǎn)，得丹參有效成分提取液A；再將乙醇回流提取過的丹參用10倍的水煎煮2次，每次60分鐘，合并煎液，濾過，濾液濃縮后進(jìn)行二次醇沉，使含醇量達(dá)75％，每次醇沉后均冷藏放置，然后取上清液濾過，濾液與上述提取液A合并，冷藏，取上清液濾過，濾液濃縮至稠膏狀后，加水至4500ml沉淀處理，過濾，然后取上清液濾過，即得丹參有效部位提取液B，供配液使用；
2、川芎經(jīng)揀選、洗凈、烘干、粉碎成細(xì)粒狀，稱取粉碎成細(xì)粒狀的丹參30kg，采用20倍80％乙醇超聲提取3次，每次2小時，提取液合并后冷藏過夜，取上清液濾過，濾液濃縮至稠膏狀后，加水沉淀處理，過夜，然后取上清液濾過，即得川芎有效成分提取液C；再將乙醇超聲提取過的川芎用10倍水煎煮3次，每次40分鐘，合并煎液，濾過，濾液濃縮至稠膏狀后加入乙醇醇沉，使含醇量達(dá)75％，濾過，合并濾液，回收乙醇并濃縮至稠膏狀，然后加水，攪勻，冷藏，濾過，濾液加適量活性碳煮沸30分鐘，稍冷，過濾至澄明，即得川芎有效部位提取液D；將川芎有效成分提取液C與D合并，加入注射用水至4500ml，濾過，即得川芎有效部位提取液E，供配液使用；3、將上述所得的有效部位提取液B和E混合均勻，即得注射用冠心寧所用植生藥的有效成分提取液，向有效成分提取液中按每毫升加入甘露醇0.05克，攪拌，溶解，濾過，并加注射用水至10000ml，再調(diào)節(jié)PH值至6.8，即得注射用冠心寧凍干所用植物生藥的有效成分混合液，冷凍干燥將上述凍干所用植物生藥的有效成分混合液按每瓶10ml分裝后，未封口放入凍干箱的金屬盤內(nèi)，并將溫度降低至-30℃，迅速將裝有制劑的金屬盤放入凍干箱內(nèi)，維持2小時，然后使箱內(nèi)的真空度為0.1Pa，再將擱板升溫，并控制在共熔點(diǎn)-1℃以下，保持12小時，最后升溫至35℃，并保持一定時間，使制劑溫度與擱板溫度重合，放入無菌的過濾氣體，控制制劑的含水量在4％，迅速封口即可。
實(shí)施例4本發(fā)明冠心寧凍干粉針的制備方法處方組成丹參 40kg川芎 40kg甘露醇 0.5kg葡萄糖 0.5kg注射用水適量制成 10000ml
制備方法藥材的提取與精制1、丹參經(jīng)揀選、洗凈、烘干、粉碎成細(xì)粒狀，稱取粉碎成細(xì)粒狀的丹參40kg，先采用30倍乙醇回流提取4次，每次2.5小時，用薄層層析法控制提取終點(diǎn)，得丹參有效成分提取液A；再將乙醇回流提取過的丹參用20倍的水煎煮3次，每次80分鐘，合并煎液，濾過，濾液濃縮后兩次醇沉，使含醇量達(dá)85％，每次醇沉后均冷藏放置，然后取上清液濾過，濾液與上述提取液A合并，冷藏，取上清液濾過，濾液濃縮至稠膏狀后，加水至4500ml沉淀處理，過濾，然后取上清液濾過，即得丹參有效部位提取液B，供配液使用；2、川芎經(jīng)揀選、洗凈、烘干、粉碎成細(xì)粒狀，稱取粉碎成細(xì)粒狀的川芎40kg采用25倍90％乙醇超聲提取4次，每次3小時，提取液合并后冷藏過夜，取上清液濾過，濾液濃縮至稠膏狀后，加水沉淀處理，過夜，然后取上清液濾過，即得川芎有效成分提取液C；再將乙醇超聲提取過的川芎用15倍水煎煮4次，每次50分鐘，合并煎液，濾過，濾液濃縮至稠膏狀后加入乙醇醇沉，使含醇量達(dá)85％，濾過，合并濾液，回收乙醇并濃縮至稠膏狀，然后加水，攪勻，冷藏，濾過，濾液加適量活性碳煮沸40分鐘，稍冷，過濾至澄明，即得川芎有效部位提取液D；將川芎有效成分提取液C與D合并，加入注射用水至4500ml，濾過，即得川芎有效部位提取液E，供配液使用；3、將上述所得的有效部位提取液B和E混合均勻，即得注射用冠心寧所用植物生藥的有效成分提取液，向有效成分提取液中按每毫升加入甘露醇0.1g，葡萄糖0.1g，攪拌，溶解，濾過，并加注射用水，再調(diào)節(jié)PH值至8，即得注射用冠心寧凍干所用植物生藥的有效成分混合液，冷凍干燥制成凍干粉針。
冷凍干燥將上述凍干所用植物生藥的有效成分混合液按每瓶10ml分裝后，未封口放入凍干箱的金屬盤內(nèi)，并將溫度降低至-50℃，迅速將裝有制劑的金屬盤放入凍干箱內(nèi)，維持5小時，然后使箱內(nèi)的真空度為0.4Pa，再將擱板升溫，并控制在共熔點(diǎn)-3℃以下，保持20小時，最后升溫至38℃，并保持一定時間，使制劑溫度與擱板溫度重合，放入無菌的過濾氣體，控制制劑的含水量在3％，迅速封口即可。
實(shí)施例5本發(fā)明冠心寧凍干粉針的含量測定方法(1)原兒茶醛的含量測定方法色譜條件與系統(tǒng)試用性試驗(yàn) 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-水-冰醋酸(10∶90∶0.5)為流動相；檢測波長為280nm。理論板數(shù)按原兒茶醛計算，應(yīng)不低于1500。
對照品溶液的制備 精密稱取在105℃干燥至恒重的原兒茶醛對照品20mg，置l00ml量瓶中，加流動相至刻度，搖勻。精密量取2ml，置10ml量瓶中，加流動相至刻度，搖勻，即得(每1ml中含原兒茶醛0.04mg)。
測定法 精密量取本品5ml，置100ml量瓶中，加流動相至刻度，搖勻。精密量取10μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另取對照品溶液，同法測定，按外標(biāo)法以峰面積計算，即得。
本品每1ml含丹參提取物以原兒茶醛(C7H6O3)計，應(yīng)不少于0.5mg。
(2)川芎嗪的含量測定方法色譜條件與系統(tǒng)試用性試驗(yàn) 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-水-冰醋酸(40∶60∶0.5)為流動相；檢測波長為293nm。理論板數(shù)按鹽酸川芎嗪計算，應(yīng)不低于1500。
對照品溶液的制備 精密稱取在105℃干燥至恒重的鹽酸川芎嗪對照品25mg，置50ml量瓶中，加流動相至刻度，搖勻。精密量取1ml，置10ml量瓶中，加流動相至刻度，搖勻，即得(每1ml中含鹽酸川芎嗪0.05mg)。
測定法 精密量取本品1ml，置100ml量瓶中，加流動相至刻度，搖勻。精密量取10μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另取對照品溶液，同法測定，按外標(biāo)法以峰面積計算，即得。
本品每1ml含川芎提取物以川芎嗪(C8H12N2)計，應(yīng)不少于0.1mg。
權(quán)利要求
1.一種治療冠心病的凍干粉針的制備方法，其特征在于該方法為用植物生藥丹參和川芎的有效部位加賦形劑經(jīng)冷凍干燥制備凍干粉針。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的治療冠心病的凍干粉針的制備方法，其特征在于該方法中賦形劑采用右旋糖酐、水解明膠、甘露醇、蔗糖、乳糖、葡萄糖或它們的混合物。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的治療冠心病的凍干粉針的制備方法，其特征在于該方法為丹參先采用20～50倍乙醇回流提取3～4次，每次2～3小時，用薄層層析法控制提取終點(diǎn)，得丹參有效成分提取液A；再將乙醇回流提取過的丹參用10～20倍的水煎煮2～4次，每次40～80分鐘，合并煎液，濾過，濾液濃縮后進(jìn)行醇沉，使含醇量達(dá)75％～85％，醇沉后冷藏放置，然后取上清液濾過，濾液與上述提取液A合并，冷藏，取上清液濾過，濾液濃縮至稠膏狀后，加水沉淀處理，然后取上清液濾過，即得丹參有效部位提取液B，供配液使用；川芎先采用20～50倍70％～90％乙醇超聲提取3～4次，每次1～3小時，提取液合并后冷藏過夜，取上清液濾過，濾液濃縮至稠膏狀后，加水沉淀處理，過夜，然后取上清液濾過，即得川芎有效成分提取液C；再將乙醇超聲提取過的川芎用10～20倍水煎煮2～4次，每次30～50分鐘，合并煎液，濾過，濾液濃縮至稠膏狀后加入乙醇進(jìn)行醇沉，使含醇量達(dá)75％～85％，濾過，合并濾液，回收乙醇并濃縮至稠膏狀，然后加水，攪勻，冷藏，濾過，濾液加適量活性碳煮沸20～40分鐘，稍冷，過濾至澄明，即得川芎有效部位提取液D；將川芎有效成分提取液C與D合并，濾過，即得川芎有效部位提取液E，供配液使用；將上述所得的有效部位提取液B和E混合均勻，即得注射用冠心寧所用植物生藥的有效成分提取液，向有效成分提取液中按每毫升加入賦形劑0.01～0.2克，攪拌，溶解，濾過，并加注射用水適量，再調(diào)節(jié)PH值至4～8，即得注射用冠心寧凍干制劑所用植物生藥的有效成分混合液，冷凍干燥制成凍干粉針。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的治療冠心病的凍干粉針的制備方法，其特征在于該方法為丹參先采用20倍乙醇回流提取3次，每次2小時，用薄層層析法控制提取終點(diǎn)，得丹參有效成分提取液A；再將乙醇回流提取過的丹參用10倍的水煎煮2次，每次60分鐘，合并煎液，濾過，濾液濃縮后進(jìn)行醇沉，含醇量達(dá)75％，醇沉后冷藏放置，然后取上清液濾過，濾液與上述提取液A合并，冷藏，取上清液濾過，濾液濃縮至稠膏狀后，加水沉淀處理，然后取上清液濾過，即得丹參有效部位提取液B，供配液使用；川芎先采用20倍80％乙醇超聲提取3次，每次2小時，提取液合并后冷藏過夜，取上清液濾過，濾液濃縮至稠膏狀后，加水沉淀處理，過夜，然后取上清液濾過，即得川芎有效成分提取液C；再將乙醇超聲提取過的川芎用10倍水煎煮3次，每次40分鐘，合并煎液，濾過，濾液濃縮至稠膏狀后加入乙醇醇沉，使含醇量達(dá)75％，濾過，合并濾液，回收乙醇并濃縮至稠膏狀，然后加水，攪勻，冷藏，濾過，濾液加適量活性碳煮沸30分鐘，稍冷，過濾至澄明，即得川芎有效部位提取液D；將川芎有效成分提取液C與D合并，加入注射用水，濾過，即得川芎有效部位提取液E，供配液使用；將上述所得的有效部位提取液B和E混合均勻，即得注射用冠心寧所用植物生藥的有效成分提取液，向有效成分提取液中按每毫升加入甘露醇0.05克，攪拌，溶解，濾過，并加注射用水，再調(diào)節(jié)PH值至6.8，即得注射用冠心寧凍干所用植物生藥的有效成分混合液，冷凍干燥制成凍干粉針。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的治療冠心病的凍干粉針的制備方法，其特征在于該方法為丹參先采用30倍乙醇回流提取4次，每次2.5小時，用薄層層析法控制提取終點(diǎn)，得丹參有效成分提取液A；再將乙醇回流提取過的丹參用20倍的水煎煮3次，每次80分鐘，合并煎液，濾過，濾液濃縮后兩次醇沉，使含醇量達(dá)85％，每次醇沉后均冷藏放置，然后取上清液濾過，濾液與上述提取液A合并，冷藏，取上清液濾過，濾液濃縮至稠膏狀后，加水沉淀處理，然后取上清液濾過，即得丹參有效部位提取液B，供配液使用；川芎先采用25倍90％乙醇超聲提取4次，每次3小時，提取液合并后冷藏過夜，取上清液濾過，濾液濃縮至稠膏狀后，加水沉淀處理，過夜，然后取上清液濾過，即得川芎有效成分提取液C；再將乙醇超聲提取過的川芎用15倍水煎煮4次，每次50分鐘，合并煎液，濾過，濾液濃縮至稠膏狀后加入乙醇醇沉，使含醇量達(dá)85％，濾過，合并濾液，回收乙醇并濃縮至稠膏狀，然后加水，攪勻，冷藏，濾過，濾液加適量活性碳煮沸40分鐘，稍冷，過濾至澄明，即得川芎有效部位提取液D；將川芎有效成分提取液C與D合并，加入注射用水，濾過，即得川芎有效部位提取液E，供配液使用；將上述所得的有效部位提取液B和E混合均勻，即得注射用冠心寧所用植物生藥的有效成分提取液，向有效成分提取液中按每毫升加入甘露醇0.1g，葡萄糖0.1g，攪拌，溶解，濾過，并加注射用水，再調(diào)節(jié)PH值至8，即得注射用冠心寧凍干所用植物生藥的有效成分混合液，冷凍干燥制成凍干粉針。
6.根據(jù)權(quán)利要求3、4或5所述的治療冠心病的凍干粉針的制備方法，其特征在于該方法中所述的冷凍干燥方法為將凍干所用植物生藥的有效成分混合液按每瓶定量分裝后，未封口放入凍干箱的金屬盤內(nèi)，并將溫度降低至-30℃～-50℃，迅速將裝有制劑的金屬盤放入凍干箱內(nèi)，維持2～7小時，然后使箱內(nèi)的真空度為0.1～0.5Pa，再將擱板升溫，并控制在共熔點(diǎn)-1℃～-3℃以下，保持10～20小時，最后升溫至35℃～40℃，并保持一定時間，使制劑溫度與擱板溫度重合，放入無菌的過濾氣體，控制制劑的含水量在1～5％，迅速封口即可。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的冷凍干燥方法，其特征在于該冷凍干燥方法為將上述凍干所用植物生藥的有效成分混合液按每瓶定量分裝后，未封口放入凍干箱的金屬盤內(nèi)，并將溫度降低至-30℃，迅速將裝有制劑的金屬盤放入凍干箱內(nèi)，維持2小時，然后使箱內(nèi)的真空度為0.1Pa，再將擱板升溫，并控制在共熔點(diǎn)-1℃以下，保持12小時，最后升溫至35℃，并保持一定時間，使制劑溫度與擱板溫度重合，放入無菌的過濾氣體，控制制劑的含水量在4％，迅速封口即可。
8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的冷凍干燥方法，其特征在于該冷凍干燥方法為將凍干所用植物生藥的有效成分混合液按每瓶定量分裝后，未封口放入凍干箱的金屬盤內(nèi)，并將溫度降低至-50℃，迅速將裝有制劑的金屬盤放入凍干箱內(nèi)，維持5小時，然后使箱內(nèi)的真空度為0.4Pa，再將擱板升溫，并控制在共熔點(diǎn)-3℃以下，保持20小時，最后升溫至38℃，并保持一定時間，使制劑溫度與擱板溫度重合，放入無菌的過濾氣體，控制制劑的含水量在3％，迅速封口即可。
9.根據(jù)權(quán)利要求6所述的治療冠心病的凍干粉針的制備方法，其特征在于冷凍干燥過程中可選擇的最佳物理?xiàng)l件是首先將擱板降溫至-35℃，維持3小時，然后使凍干箱內(nèi)的真空度0.2Pa，將擱板升溫并嚴(yán)格控制在-2℃，保持18小時，將擱板升溫至40℃放入無菌氣體后，控制制劑的含水量為2％。
10.一種治療冠心病的凍干粉針的質(zhì)量控制方法，其特征在于是該方法為原兒茶醛的含量測定方法色譜條件與系統(tǒng)試用性試驗(yàn) 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-水-冰醋酸(9-11∶80-100∶0.45-0.6)為流動相；檢測波長為280nm；理論板數(shù)按原兒茶醛計算，應(yīng)不低于1500；對照品溶液的制備 精密稱取在105℃干燥至恒重的原兒茶醛對照品20mg，置100ml量瓶中，加流動相至刻度，搖勻；精密量取2ml，置10ml量瓶中，加流動相至刻度，搖勻，即得(每1ml中含原兒茶醛0.04mg)；測定法 精密量取本品5ml，置100ml量瓶中，加流動相至刻度，搖勻；精密量取10μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另取對照品溶液，同法測定，按外標(biāo)法以峰面積計算，即得；川芎嗪的含量測定方法色譜條件與系統(tǒng)試用性試驗(yàn) 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-水-冰醋酸(30-50∶50-70∶0.4-0.6)為流動相；檢測波長為293nm；理論板數(shù)按鹽酸川芎嗪計算，應(yīng)不低于1500；對照品溶液的制備 精密稱取在105℃干燥至恒重的鹽酸川芎嗪對照品25mg，置50ml量瓶中，加流動相至刻度，搖勻；精密量取1ml，置10ml量瓶中，加流動相至刻度，搖勻，即得(每1ml中含鹽酸川芎嗪0.05mg)；測定法 精密量取本品1ml，置100ml量瓶中，加流動相至刻度，搖勻；精密量取10μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另取對照品溶液，同法測定，按外標(biāo)法以峰面積計算，即得。
11.根據(jù)權(quán)利要求10所述的治療冠心病的凍干粉針的質(zhì)量控制方法，其特征在于是該方法為原兒茶醛的含量測定方法色譜條件與系統(tǒng)試用性試驗(yàn) 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-水-冰醋酸(10∶90∶0.5)為流動相；檢測波長為280nm；理論板數(shù)按原兒茶醛計算，應(yīng)不低于1500；對照品溶液的制備 精密稱取在105℃干燥至恒重的原兒茶醛對照品20mg，置100ml量瓶中，加流動相至刻度，搖勻；精密量取2ml，置10ml量瓶中，加流動相至刻度，搖勻，即得(每1ml中含原兒茶醛0.04mg)；測定法 精密量取本品5ml，置100ml量瓶中，加流動相至刻度，搖勻；精密量取10μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另取對照品溶液，同法測定，按外標(biāo)法以峰面積計算，即得；川芎嗪的含量測定方法色譜條件與系統(tǒng)試用性試驗(yàn) 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-水-冰醋酸(40∶60∶0.5)為流動相；檢測波長為293nm；理論板數(shù)按鹽酸川芎嗪計算，應(yīng)不低于1500；對照品溶液的制備 精密稱取在105℃干燥至恒重的鹽酸川芎嗪對照品25mg，置50ml量瓶中，加流動相至刻度，搖勻；精密量取1ml，置10ml量瓶中，加流動相至刻度，搖勻，即得(每1ml中含鹽酸川芎嗪0.05mg)；測定法 精密量取本品1ml，置100ml量瓶中，加流動相至刻度，搖勻；精密量取10μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另取對照品溶液，同法測定，按外標(biāo)法以峰面積計算，即得。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種注射用冠心寧凍干粉針劑型的制備方法，該方法是用植物生藥丹參和川芎的有效部位加賦形劑經(jīng)攪拌，溶解，濾過，并加注射用水及調(diào)節(jié)pH值制備凍干粉針劑的先進(jìn)工藝，其中丹參有效部位采用乙醇回流與水煎煮相結(jié)合的提取方法，川芎有效部位采用超聲提取與水煎煮提取相結(jié)合的方法。本發(fā)明還公開了一種該凍干粉針劑型的質(zhì)量控制方法。本發(fā)明與現(xiàn)有的同類水針劑相比，注射用冠心寧凍干粉針劑具有有效部位提取工藝更科學(xué)、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)更高、藥效更好、穩(wěn)定性更好、并且運(yùn)輸、儲存和使用更方便的優(yōu)點(diǎn)。
文檔編號A61P9/04GK1634208SQ200310122469
公開日2005年7月6日 申請日期2003年12月25日 優(yōu)先權(quán)日2003年12月25日
發(fā)明者李亞平, 任武賢, 李亞政, 馮偉, 馬曉軍 申請人:山西亞寶藥業(yè)集團(tuán)股份有限公司, 中國科學(xué)院上海藥物研究所