專(zhuān)利名稱(chēng)：免疫抑制多肽的制備及應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種天然免疫抑制多肽的制備及應(yīng)用，尤其涉及一種采用過(guò)敏原致敏乳牛，誘發(fā)其免疫系統(tǒng)產(chǎn)生免疫抑制多肽，并從其分泌的牛奶中分離提取活性多肽，應(yīng)用于各類(lèi)過(guò)敏癥患者，以降低其過(guò)敏癥狀和體征。
發(fā)明技術(shù)背景過(guò)敏癥是一種常見(jiàn)病、多發(fā)病，其致病的原因是過(guò)敏原所致的變態(tài)反應(yīng)，過(guò)敏原多種多樣，包括各種植物花粉、蜂毒、塵埃，以及各種類(lèi)型動(dòng)物旦白等。很多過(guò)敏原是屬于動(dòng)物旦白或多肽，比碳水化合物和脂肪更容易引起過(guò)敏反應(yīng)。
目前治療過(guò)敏癥的主要方法是盡量避免接觸過(guò)敏原和對(duì)過(guò)敏癥狀和體征進(jìn)行治療，前者有時(shí)不容易實(shí)現(xiàn)，而后者并不能防止過(guò)敏再次發(fā)生。
系統(tǒng)脫敏療法是一種較為有效的治療過(guò)敏癥的方法，首先通過(guò)系統(tǒng)測(cè)試尋找過(guò)敏原的類(lèi)型及方式，用已找出的過(guò)敏原作脫敏劑，從非常小的劑量開(kāi)始，逐次增量注射，使機(jī)體產(chǎn)生免疫耐受性，達(dá)到脫敏目的。經(jīng)此療法治療的病人，體內(nèi)可產(chǎn)生大量特異性IgG封閉抗體，可阻斷抗原與IgE抗體的結(jié)合，降低介質(zhì)細(xì)胞的敏感性，從而起到治療作用。盡管這種免疫治療方法對(duì)某些過(guò)敏癥患者有一定療效，但是具體實(shí)施有很多危險(xiǎn)和困難，首先，讓患者接觸過(guò)敏原是非常危險(xiǎn)的，可能引發(fā)嚴(yán)重的變態(tài)反應(yīng)而危及生命，所以，系統(tǒng)脫敏療法需要在非常專(zhuān)業(yè)的專(zhuān)家指導(dǎo)下進(jìn)行，其次，尋找過(guò)敏原的過(guò)程十分復(fù)雜，并非每個(gè)患者都能找到明確的過(guò)敏原，而且脫敏過(guò)程漫長(zhǎng)，通常需2～3年時(shí)間，費(fèi)用昂貴。
現(xiàn)代研究證實(shí)，通過(guò)修飾過(guò)敏原致敏過(guò)敏癥患者，在不引發(fā)過(guò)敏癥發(fā)作的情況下，同樣可以起到系統(tǒng)脫敏療法的效果。美國(guó)專(zhuān)利(4469677)公布的技術(shù)中介紹了通過(guò)某些特定的酶將過(guò)敏原旦白質(zhì)酶解為多肽后，能夠安全地用于脫敏療法，既能達(dá)到抑制過(guò)敏反應(yīng)又不會(huì)引發(fā)過(guò)敏癥發(fā)作，這些經(jīng)過(guò)修飾的、已脫除致敏性的過(guò)敏原采用口服方式，能起到誘發(fā)“免疫耐受”的效果，可以理想地用于過(guò)敏癥治療。但是，由于過(guò)敏原種類(lèi)繁多，而不同種類(lèi)過(guò)敏原經(jīng)過(guò)酶解產(chǎn)生的多肽，作為致敏原誘發(fā)不同種類(lèi)的過(guò)敏反應(yīng)，所產(chǎn)生的免疫抑制作用較弱，在普及推廣過(guò)程中受到限制。
進(jìn)一步研究證實(shí)，在過(guò)敏原致敏的乳牛的牛奶中，含有該過(guò)敏原的多肽，這種多肽具有明確的抑制免疫反應(yīng)的功效，能誘發(fā)過(guò)敏癥患者產(chǎn)生免疫耐受而不會(huì)引發(fā)過(guò)敏反應(yīng)。
本發(fā)明所需解決的技術(shù)問(wèn)題是，通過(guò)選擇合適的過(guò)敏原致敏健康乳牛，從致敏乳牛分泌的牛奶中制備免疫抑制多肽。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明解決其技術(shù)問(wèn)題所采用的技術(shù)方案是，選擇合適的過(guò)敏原制備單獨(dú)或復(fù)合過(guò)敏原疫苗，采用多種途徑和方式致敏健康乳牛，從致敏乳牛分泌的牛奶中通過(guò)生物分離、提取和純化的方式制備免疫抑制多肽制劑，應(yīng)用于治療各類(lèi)過(guò)敏癥患者。
本發(fā)明的技術(shù)特征是，被選擇作為過(guò)敏原的物質(zhì)，是引起和誘發(fā)人類(lèi)過(guò)敏癥的主要過(guò)敏原，包括但不限于各類(lèi)植物花粉如各類(lèi)花、草花粉；各種動(dòng)物的分泌液和毒液如蛇毒、蜂毒；各種食物過(guò)敏原如各類(lèi)動(dòng)物旦白、海魚(yú)、海蝦、海生植物等，各種粉塵如石棉、灰塵、媒塵、石英塵等。
本發(fā)明的技術(shù)特征是，既可選擇單獨(dú)一種過(guò)敏原制備致敏疫苗，也可以選擇多種過(guò)敏原混合制備復(fù)合致敏疫苗，選擇作為致敏疫苗的任何過(guò)敏原，必須能夠誘發(fā)過(guò)敏反應(yīng)，否則，應(yīng)選擇其他過(guò)敏原。制備復(fù)合致敏疫苗時(shí)，可以將多種過(guò)敏原混懸在等量的無(wú)菌生理鹽水內(nèi)制備混懸液，在接種動(dòng)物前必須經(jīng)過(guò)嚴(yán)格滅菌程序，可以采用高溫滅菌、紫外燈滅菌等多種已知的滅菌方式，在滅菌同時(shí)，不能改變過(guò)敏原的生物結(jié)構(gòu)。
本發(fā)明的技術(shù)特征是，應(yīng)選擇健康的乳牛，接種前應(yīng)全面檢查乳牛的健康狀態(tài)，包括結(jié)核菌素試驗(yàn)，任何懷疑的致病乳牛都不應(yīng)被選擇，由于免疫細(xì)胞處理外來(lái)過(guò)敏原是處于免疫反應(yīng)的最早階段，因此，在采用過(guò)敏原致敏乳牛后應(yīng)盡早和及時(shí)收集含有免疫抑制多肽的牛奶，通常在接種過(guò)敏原后24小時(shí)～1周內(nèi)。為了獲得足夠的免疫抑制多肽，重復(fù)接種過(guò)敏原是必須的，通常應(yīng)每周～每2周接種一次過(guò)敏原。
本發(fā)明的技術(shù)特征是，接種過(guò)敏原的途徑及方式是多種多樣的，包括但不限于口服、灌腸、肌肉內(nèi)注射、皮下注射、腹腔內(nèi)注射等，最佳接種方式是肌肉內(nèi)注射，為了提高免疫抑制多肽的產(chǎn)生，有時(shí)可以采用聯(lián)合接種方式，如口服加肌肉注射的方式。
本發(fā)明的技術(shù)特征是，從免疫接種乳牛的牛奶中制備免疫抑制多肽的方法是，采用離心方式脫脂后，分裝或噴霧干燥，成為含有免疫抑制多肽的牛奶或奶粉，也可以離心脂脫后，直接用超濾設(shè)備和分子量為10,000D的超微濾膜直接濃縮后制備免疫抑制多肽的濃縮液，或噴霧干燥制備干粉，為了制備純度更高的產(chǎn)品，還可以在離心脫脂后，用HCL等酸劑調(diào)PH至4.7～4.8，加熱35℃～45℃約30分鐘，使酪旦白凝固后用離心方式或過(guò)濾方法除去酪旦白，然后用分子量為40,000的超微濾膜進(jìn)行分離，收集上清液后用分子量為5000的超微濾膜濃縮后冷凍干燥或噴霧干燥成粉，以獲得高純度活性多肽制劑。
本發(fā)明的技術(shù)特征是，采用本發(fā)明方法制備的免疫抑制的多肽制劑中，主要含有經(jīng)修飾的、已脫除致敏性的過(guò)敏原多肽，這些多肽類(lèi)物質(zhì)是由各種過(guò)敏原進(jìn)入母牛體內(nèi)，產(chǎn)生免疫反應(yīng)，通過(guò)各種酶的分解而變成具有免疫抑制作用的多肽。制備的免疫抑制多肽制劑，給過(guò)敏癥患者口服后可以誘發(fā)免疫耐受，抑制免疫反應(yīng)及過(guò)敏反應(yīng)，消除或減輕過(guò)敏癥狀和體征。
本發(fā)明的技術(shù)特征是，本發(fā)明方法制備的具有免疫抑制作用多肽制劑，主要采用口服方式使用，可以是以牛奶或奶粉形式服用，也可以是與其他輔料或輔劑制備成沖劑、顆粒劑、散劑、片劑、膠囊劑、口服液、含片、咀嚼片或與油性輔料制備軟膠囊等多種形式，還可以作為食品添加到各種食品中，如酸奶、果凍、布丁、奶酪、餅干等，或者添加到各類(lèi)飲料中成為咖啡、茶等。
本發(fā)明的技術(shù)特征是，本發(fā)明方式制備的免疫抑制多肽制劑是一種口服形式的脫敏物質(zhì)，是一種天然的口服脫敏疫苗，可以作為脫敏療法的重要組成成份，以這種免疫抑制多肽為基礎(chǔ)的脫敏療法無(wú)需專(zhuān)家指導(dǎo)，無(wú)需注射，沒(méi)有疼痛，價(jià)格低廉，可以暴露過(guò)敏原引發(fā)免疫耐受反應(yīng)，又不會(huì)導(dǎo)致過(guò)敏癥的發(fā)生。
這種在致敏乳牛中被誘發(fā)，經(jīng)酶解處理、已脫除致敏性的過(guò)敏原多肽較未經(jīng)處理的過(guò)敏原應(yīng)用于臨床時(shí)更安全可靠，它所誘發(fā)的免疫反應(yīng)是非過(guò)敏性的、具有免疫抑制作用的免疫耐受過(guò)程，有助于治療過(guò)敏癥，而且在系統(tǒng)脫敏過(guò)程中不會(huì)發(fā)生嚴(yán)重的過(guò)敏反應(yīng)或變態(tài)反應(yīng)。
任何類(lèi)型和形式的過(guò)敏原，只要能引起宿主的免疫反應(yīng)，都可以作為致敏的過(guò)敏原疫苗，經(jīng)宿主體內(nèi)免疫反應(yīng)后，，產(chǎn)生具有免疫抑制作用的多肽，因此，任何新形式的特異性過(guò)敏原，均可以采用這種方法，制備相應(yīng)的免疫抑制多肽，用于某種已明確過(guò)敏原的過(guò)敏癥患者的系統(tǒng)脫敏治療，應(yīng)用這種系統(tǒng)脫敏治療的免疫抑制多肽不會(huì)引起嚴(yán)重的變態(tài)反應(yīng)，不會(huì)產(chǎn)生危險(xiǎn)，可以誘發(fā)特異性免疫耐受，從而治療特定過(guò)敏癥，而對(duì)于未明確過(guò)敏原的過(guò)敏癥患者，則可以采用含有多種非致敏性過(guò)敏原多肽的方法，抑制可能發(fā)生的多種過(guò)敏原構(gòu)成的過(guò)敏癥。
在應(yīng)用過(guò)敏原疫苗致敏乳牛時(shí)，并不需要引發(fā)或維持其體內(nèi)的高敏感免疫狀態(tài)，也不需要其產(chǎn)生足夠的免疫球旦白，僅需要注射足夠劑量的過(guò)敏原，讓其體內(nèi)免疫細(xì)胞有足夠的時(shí)間處理過(guò)敏原變成一種具有免疫抑制作用的并存在于牛奶中的多肽形式。
本發(fā)明的技術(shù)特征是，制備免疫抑制多肽制劑，應(yīng)該同時(shí)采用多種過(guò)敏原制備的疫苗致敏多頭乳牛，并收集多頭乳牛的牛奶，制備含有多種非致敏性過(guò)敏原多肽制劑，不同的乳牛含有不同的基因特征，對(duì)過(guò)敏原產(chǎn)生的免疫反應(yīng)各不相同，產(chǎn)生的免疫抑制多肽種類(lèi)也各不相同，而產(chǎn)生的多種類(lèi)型多肽可以采用層析方法進(jìn)行監(jiān)測(cè)、分離和提純，并進(jìn)行成份分析和品質(zhì)監(jiān)管。
本發(fā)明的有益效果是，與現(xiàn)有技術(shù)相比本發(fā)明利用哺乳類(lèi)動(dòng)物有機(jī)體免疫系統(tǒng)和多種活性酶來(lái)分解過(guò)敏原變成免疫抑制多肽，無(wú)需根據(jù)特定的過(guò)敏原選擇特定的生物酶，而是通過(guò)采用多種過(guò)敏原組成的復(fù)合抗原疫苗，制備含有多種類(lèi)型、具有免疫抑制作用的多肽，可以適用于多種類(lèi)型的過(guò)敏癥患者使用，在應(yīng)用于系統(tǒng)脫敏療法時(shí)，無(wú)需檢測(cè)致敏的特異性抗原，不會(huì)引起嚴(yán)重的變態(tài)反應(yīng)和過(guò)敏癥狀，安全可靠，屬于天然食品。
具體實(shí)施例方式
下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說(shuō)明實(shí)例1制備復(fù)合過(guò)敏原疫苗，接種乳牛，收獲含活性多肽牛奶采購(gòu)下列商品化抗原抽提物，重量容積以1∶100方式混合配制，混合配制薄型鏈格孢霉(Alternaria tenuis)10ml、黑曲霉(Aspergillus niger)10ml、白色念球菌(Moniliaalbicans)10ml、絲狀菌旦白(Hormodendrum hordei)10ml、小羊肉(Lambs quarter)10ml、塵埃(House dust)10ml、蠕蟲(chóng)(Helminthosporium)10ml、俄羅斯薊(Russian thistle)、草種(Careless weed)10ml、多刺藜(Spiny pigweed)10ml、普通艾屬植物(mugwort)10ml、細(xì)長(zhǎng)豚草(Ragweed，slender)10ml、南方豚草(Ragweed，southern)10ml、人工豚草(Ragweed，false)10ml、短豚草(Ragweed，short)10ml、大豚草(Ragweed，giant)10ml、紅根藜(Pigweed，redroot)10ml、須發(fā)癬菌(Trichophyton mentag)10ml、鼠尾草(Goldenrod)10ml、帕麥爾氏制劑(Palmer’s Amaranth)10ml、大草原撒爾維亞的葉(Sage，prairie)10ml、彎孢霉菌(Curvularia sp.)10ml、芽霉菌(Pullularia pullulans)10ml、白霉菌(Mucor Plumbeus)10ml、念珠狀鐮刀菌(Fusarium moniliforme)10ml、混合土(GsMold Mix 2#)30ml、拾種混合樹(shù)葉(GS 10 Tree Mix)30ml、酒曲霉菌(Rhizopusnigricans)30ml，上述溶液混合，加等量生理鹽水稀釋?zhuān)款^健康乳牛每次肌肉注射5ml，每?jī)芍苤貜?fù)注射一次，在注射后24小時(shí)收集牛奶。
實(shí)施例2從致敏乳牛的牛奶中制備免疫抑制多肽收集致敏乳牛分泌的牛奶20升，采用脂肪分離機(jī)去脂，去脂牛奶采用分子量為10,000的超微濾膜進(jìn)行過(guò)濾分離，最終得到12升分離過(guò)濾液，直接冷藏或冷凍干燥制備干粉。
實(shí)施例3應(yīng)用于過(guò)敏癥患者的臨床驗(yàn)證隨機(jī)選取24位過(guò)敏癥患者，每天服用實(shí)施例2制備的凍干粉8g，用溫水沖服，持續(xù)三個(gè)月，83.8％患者主訴過(guò)敏癥狀明顯改善，包括充血癥狀好轉(zhuǎn)，頭痛減輕，呼吸狀態(tài)改善，癢的癥狀減輕，腫脹減輕，咳嗽好轉(zhuǎn)等，通常在服用制劑一個(gè)月起出現(xiàn)癥狀緩解表現(xiàn)。
權(quán)利要求
1.本發(fā)明涉及一種天然免疫抑制多肽的制備及應(yīng)用，尤其涉及一種采用過(guò)敏原致敏乳牛，誘發(fā)其免疫系統(tǒng)產(chǎn)生免疫抑制多肽，并從其分泌的牛奶中分離提取活性多肽，應(yīng)用于各類(lèi)過(guò)敏癥患者，以降低其過(guò)敏癥狀和體征，其特征是，選擇合適的過(guò)敏原制備單獨(dú)或復(fù)合過(guò)敏原疫苗，采用多種途徑和方式致敏健康乳牛，從致敏乳牛分泌的牛奶中通過(guò)生物分離、提取和純化的方式制備免疫抑制多肽制劑，應(yīng)用于治療各類(lèi)過(guò)敏癥患者。
2.按照權(quán)利要求1所述的方法，本發(fā)明的技術(shù)特征是，被選擇作為過(guò)敏原的物質(zhì)，是引起和誘發(fā)人類(lèi)過(guò)敏癥的主要過(guò)敏原，包括但不限于各類(lèi)植物花粉如各類(lèi)花、草花粉；各種動(dòng)物的分泌液和毒液如蛇毒、蜂毒；各種食物過(guò)敏原如各類(lèi)動(dòng)物旦白、海魚(yú)、海蝦、海生植物等，各種粉塵如石棉、灰塵、媒塵、石英塵等。
3.按照權(quán)利要求1所述的方法，本發(fā)明的技術(shù)特征是，既可選擇單獨(dú)一種過(guò)敏原制備致敏疫苗，也可以選擇多種過(guò)敏原混合制備復(fù)合致敏疫苗，選擇作為致敏疫苗的任何過(guò)敏原，必須能夠誘發(fā)過(guò)敏反應(yīng)，否則，應(yīng)選擇其他過(guò)敏原。制備復(fù)合致敏疫苗時(shí)，可以將多種過(guò)敏原混懸在等量的無(wú)菌生理鹽水內(nèi)制備混懸液，在接種動(dòng)物前必須經(jīng)過(guò)嚴(yán)格滅菌程序，可以采用高溫滅菌、紫外燈滅菌等多種已知的滅菌方式，在滅菌同時(shí)，不能改變過(guò)敏原的生物結(jié)構(gòu)。
4.按照權(quán)利要求1所述的方法，本發(fā)明的技術(shù)特征是，應(yīng)選擇健康的乳牛，接種前應(yīng)全面檢查乳牛的健康狀態(tài)，包括結(jié)核菌素試驗(yàn)，任何懷疑的致病乳牛都不應(yīng)被選擇，由于免疫細(xì)胞處理外來(lái)過(guò)敏原是處于免疫反應(yīng)的最早階段，因此，在采用過(guò)敏原致敏乳牛后應(yīng)盡早和及時(shí)收集含有免疫抑制多肽的牛奶，通常在接種過(guò)敏原后24小時(shí)～1周內(nèi)。為了獲得足夠的免疫抑制多肽，重復(fù)接種過(guò)敏原是必須的，通常應(yīng)每周～每2周接種一次過(guò)敏原。
5.按照權(quán)利要求1所述的方法，本發(fā)明的技術(shù)特征是，接種過(guò)敏原的途徑及方式是多種多樣的，包括但不限于口服、灌腸、肌肉內(nèi)注射、皮下注射、腹腔內(nèi)注射等，最佳接種方式是肌肉內(nèi)注射，為了提高免疫抑制多肽的產(chǎn)生，有時(shí)可以采用聯(lián)合接種方式，如口服加肌肉注射的方式。
6.按照權(quán)利要求1所述的方法，本發(fā)明的技術(shù)特征是，從免疫接種乳牛的牛奶中制備免疫抑制多肽的方法是，采用離心方式脫脂后，分裝或噴霧干燥，成為含有免疫抑制多肽的牛奶或奶粉，也可以離心脂脫后，直接用超濾設(shè)備和分子量為10,000D的超微濾膜直接濃縮后制備免疫抑制多肽的濃縮液，或噴霧干燥制備干粉，為了制備純度更高的產(chǎn)品，還可以在離心脫脂后，用HCL等酸劑調(diào)PH至4.7～4.8，加熱35℃～45℃約30分鐘，使酪旦白凝固后用離心方式或過(guò)濾方法除去酪旦白，然后用分子量為40,000的超微濾膜進(jìn)行分離，收集上清液后用分子量為5000的超微濾膜濃縮后冷凍干燥或噴霧干燥成粉，以獲得高純度活性多肽制劑。
7.按照權(quán)利要求1所述的方法，本發(fā)明的技術(shù)特征是，采用本發(fā)明方法制備的免疫抑制的多肽制劑中，主要含有經(jīng)修飾的、已脫除致敏性的過(guò)敏原多肽，這些多肽類(lèi)物質(zhì)是由各種過(guò)敏原進(jìn)入母牛體內(nèi)，產(chǎn)生免疫反應(yīng)，通過(guò)各種酶的分解而變成具有免疫抑制作用的多肽。制備的免疫抑制多肽制劑，給過(guò)敏癥患者口服后可以誘發(fā)免疫耐受，抑制免疫反應(yīng)及過(guò)敏反應(yīng)，消除或減輕過(guò)敏癥狀和體征。
8.按照權(quán)利要求1所述的方法，本發(fā)明的技術(shù)特征是，本發(fā)明方法制備的具有免疫抑制作用多肽制劑，主要采用口服方式使用，可以是以牛奶或奶粉形式服用，也可以是與其他輔料或輔劑制備成沖劑、顆粒劑、散劑、片劑、膠囊劑、口服液、含片、咀嚼片或與油性輔料制備軟膠囊等多種形式，還可以作為食品添加到各種食品中，如酸奶、果凍、布丁、奶酪、餅干等，或者添加到各類(lèi)飲料中成為咖啡、茶等。
9.按照權(quán)利要求1所述的方法，本發(fā)明的技術(shù)特征是，本發(fā)明方式制備的免疫抑制多肽制劑是一種口服形式的脫敏物質(zhì)，是一種天然的口服脫敏疫苗，可以作為脫敏療法的重要組成成份，以這種免疫抑制多肽為基礎(chǔ)的脫敏療法無(wú)需專(zhuān)家指導(dǎo)，無(wú)需注射，沒(méi)有疼痛，價(jià)格低廉，可以暴露過(guò)敏原引發(fā)免疫耐受反應(yīng)，又不會(huì)導(dǎo)致過(guò)敏癥的發(fā)生。
10.按照權(quán)利要求1所述的方法，本發(fā)明的技術(shù)特征是，制備免疫抑制多肽制劑，應(yīng)該同時(shí)采用多種過(guò)敏原制備的疫苗致敏多頭乳牛，并收集多頭乳牛的牛奶，制備含有多種非致敏性過(guò)敏原多肽制劑，不同的乳牛含有不同的基因特征，對(duì)過(guò)敏原產(chǎn)生的免疫反應(yīng)各不相同，產(chǎn)生的免疫抑制多肽種類(lèi)也各不相同，而產(chǎn)生的多種類(lèi)型多肽可以采用層析方法進(jìn)行監(jiān)測(cè)、分離和提純，并進(jìn)行成份分析和品質(zhì)監(jiān)管。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種天然免疫抑制多肽的制備及應(yīng)用，尤其涉及一種采用過(guò)敏原致敏乳牛，誘發(fā)其免疫系統(tǒng)產(chǎn)生免疫抑制多肽，并從其分泌的牛奶中分離提取活性多肽，應(yīng)用于各類(lèi)過(guò)敏癥患者，以降低其過(guò)敏癥狀和體征，其特征是，選擇合適的過(guò)敏原制備單獨(dú)或復(fù)合過(guò)敏原疫苗，采用多種途徑和方式致敏健康乳牛，從致敏乳牛分泌的牛奶中通過(guò)生物分離、提取和純化的方式制備免疫抑制多肽制劑，應(yīng)用于治療各類(lèi)過(guò)敏癥患者。
文檔編號(hào)A61K35/20GK1557836SQ200410015849
公開(kāi)日2004年12月29日 申請(qǐng)日期2004年1月15日 優(yōu)先權(quán)日2004年1月15日
發(fā)明者高春平 申請(qǐng)人:高春平