專利名稱：復方甘草酸單銨粉針制劑及其制備方法
技術(shù)領域：
本發(fā)明涉及一種復方甘草酸單銨粉針制劑及其制備方法，屬于藥品的技術(shù)領域。
背景技術(shù)：
甘草酸單銨通過作用于激素受體，影響離子通道，激活或抑制酶活性，調(diào)節(jié)物質(zhì)代謝，調(diào)節(jié)膽堿能神經(jīng)的興奮性，具有腎上腺皮質(zhì)激素樣作用而無其副作用，抗炎抗變態(tài)反應明顯，并有抗病毒、免疫調(diào)節(jié)、保護膜結(jié)構(gòu)、抗?jié)兒徒獐d作用；針對病毒性肝炎，甘草酸單銨有皮質(zhì)激素樣作用，能提高肝炎病人血清氫化可的松的濃度，降低慢性肝炎患者血清及外周單個核細胞中白介素-6和腫瘤壞死因子，減輕免疫病理反應，促進肝功能恢復，清除癥狀，縮小肝脾腫大，降酶快，退黃疸顯著，且有抗肝纖維化作用，是治療病毒性肝炎療效好的藥物。對其他疾病亦有良好的治療作用，例如流行性乙型腦炎、腎病綜合征出血熱急性腎功能衰竭、銀屑病、溶血性貧血、預防嗎啡硬膜外術(shù)后鎮(zhèn)痛并發(fā)癥、肺結(jié)核、潰瘍性結(jié)腸炎、帶狀皰疹、過敏性紫癜、再生障礙性貧血等，。目前市場上有水針制劑銷售，但是我們發(fā)現(xiàn)這種水針制劑在制備過程中需加熱滅菌，特別容易造成藥物分解破壞，長期貯存易分解變質(zhì)，影響用藥的安全性；而且由于封針抽取注入大輸液的中間環(huán)節(jié)，容易交叉污染。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的在于提供一種療效顯著且質(zhì)量穩(wěn)定的復方甘草酸單銨粉針制劑及其制備方法，將其制成無菌分裝粉針、凍干粉針可以提高藥物的穩(wěn)定性，避免中間環(huán)節(jié)，使污染的機率下降，使其更加安全有效并能方便運輸；以解決現(xiàn)有技術(shù)存在的問題。本發(fā)明的技術(shù)方案是這樣實現(xiàn)的它用甘草酸單銨，加適量無菌注射用水和適量輔料制備成粉針制劑或者是凍干粉針制劑。準確的說按照重量配比計算它由1～3g甘草酸單銨、15～25g甘氨酸、1～2g L-半胱氨酸鹽酸鹽、1～3g無水亞硫酸鈉、0.85％氯化鈉溶液適量、1.0mol/L的氫氧化鈉溶液適量，加無菌注射用水至1000ml制備成粉針制劑或者是凍干粉針制劑。優(yōu)選處方為它用2g甘草酸單銨、20g甘氨酸、1.5g L-半胱氨酸鹽酸鹽、2g無水亞硫酸鈉、0.85％氯化鈉溶液適量、1.0mol/L的氫氧化鈉溶液適量，加無菌注射用水至1000ml制備成粉針制劑或者是凍干粉針制劑。本發(fā)明的制備方法是取甘草酸單銨，加入為600ml的注射用水，攪拌至完全溶解；加入甘氨酸、L-半胱氨酸鹽酸鹽、無水亞硫酸鈉，攪拌使溶解，加水至1000ml，用1.0mol/L的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH至6.0～7.0；另加入處方量活性炭0.02％(w/v)(經(jīng)115-120℃活化2h)，置于不銹鋼容器中，在80℃保溫攪拌吸附30分鐘，粗濾，脫炭；用0.45μm和0.22μm組成的復合濾膜過濾至澄明，無菌分裝，預凍6小時、干燥30小時，即得。本發(fā)明的制備方法還可以是取甘草酸單銨，加入為600ml的注射用水，攪拌至完全溶解；加入甘氨酸、L-半胱氨酸鹽酸鹽、無水亞硫酸鈉，攪拌使溶解，加水至1000ml，用1.0mol/L的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH至6.0～7.0；另加入處方量活性炭0.02％(w/v)(經(jīng)115-120℃活化2h)，置于不銹鋼容器中，在80℃保溫攪拌吸附30分鐘，粗濾，脫炭；用0.45μm和0.22μm組成的復合濾膜過濾至澄明，噴霧干燥或在有機溶媒中重結(jié)晶，分裝，密封即得。。
與現(xiàn)有技術(shù)相比本發(fā)明選用無菌分裝粉針劑、凍干粉針劑，避免了由于封針抽取注入大輸液的中間環(huán)節(jié)，杜絕了這一用藥過程中的交叉污染，使污染的機率下降；而且粉針劑更有利于復方甘草酸單銨的穩(wěn)定，在制備過程中不加熱滅菌，不會造成藥物分解破壞，長期貯存不易分解變質(zhì)，提高了用藥的安全性。冷凍干燥工藝的關鍵是必須確保干燥后的固體物結(jié)晶均勻，色澤一致，固體支架基本上保持原來的體積，并有足夠的強度，本申請人在研制過程中發(fā)現(xiàn)冷凍時間的選擇、凍干前溶液pH值范圍、活性炭用量均直接影響本產(chǎn)品的質(zhì)量；例如活性炭的用量用量少不能除熱原，用量大則主藥的損失嚴重；而常規(guī)預凍時間為2～5小時，但是本申請人通過實驗發(fā)現(xiàn)本產(chǎn)品不能預凍5小時以下；凍干前溶液如果不調(diào)pH值所得的產(chǎn)品pH值偏低，刺激性強。本申請人通過大量實驗研究發(fā)現(xiàn)預凍6小時，干燥30小時，凍干前溶液pH值為6.0～7.0、活性炭的用量0.02％時所得產(chǎn)品質(zhì)地疏松，加水后才能迅速溶解恢復到藥液原有的特性；含水量低，不易氧化，有利于產(chǎn)品長期貯存；劑量準確，外觀優(yōu)良；穩(wěn)定性好，安全性高，療效顯著。
本申請人進行了一系列實驗，可以證明本發(fā)明制劑療效可靠，制備方法可行實驗例1抗CCL4肝損傷的實驗研究動物昆明種小白鼠40只，雌雄兼用，體重(25±10)g，將實驗用小鼠分為4組，每組10只。肝損傷小鼠模型的制備小鼠30只，用0.2％CCL4油溶液腹腔注射，每10g體重用量為0.1mL，每3天1次，連續(xù)2次。所有小鼠隨機分為3組，每組10只，肝損傷同時分別給予①空白對照組生理鹽水0.02ml(g·d)，灌胃，連續(xù)6天。②用藥組用本發(fā)明制劑0.02ml(g·d)灌胃，連續(xù)6天。③陽性對照組用聯(lián)苯雙酯0.2mg(g·d)灌胃，連續(xù)6天。另取10只小鼠作為正常組，以色拉油0.01ml(g·d)腹腔注射，每3天1次，連續(xù)2次，并用生理鹽水0.02ml(g·d)灌胃，連續(xù)6天。測定方法給藥后第7天，將小白鼠斷頭取血，采用貝克曼CX9全自動生化分析儀測定血清ALT及AST，同時立即取肝臟稱濕重，求出肝指數(shù)。，肝臟病理檢查將肝組織用甲醛固定，染色，光鏡(400倍放大率)下肉眼觀察肝細胞病理學改變。肝損傷程度判斷標準用“+”表示輕度肝損傷，肝損傷面積在13以內(nèi)；用“++”表示中度肝損傷，肝損傷面積在13～23之間；用“+++”表示重度肝損傷，肝損傷面積大于2/3。為便于進行量化分析將“-”計為0分，“+”計為1分，“++”計為2分，“+++”計為3分。
對肝損傷小鼠生化指標的影響組別動物數(shù)ALT(IUL) AST(IUL) 肝指數(shù)正常組 1045.15±10.61 140.05±12.34 45.16±3.23空白對照組 10225.34±8.12 326.72±31.47 57.42±5.10用藥組 10122.14±10.24 233.17±26.28 47.05±6.31陽性對照組 10124.56±8.25 220.28±44.61 47.50±5.52各組小鼠肝組織的病理改變組別 n 肝細胞變性 肝細胞壞死 匯管區(qū)炎癥 中央靜脈淤血- + ++ +++ - + ++ +++ - + ++ +++ - + ++ +++正常組103 5 0 06 2 0 04 5 00 2 5 2 0空白對照組100 0 2 70 0 0 90 0 28 0 0 3 7用藥組100 3 2 22 2 2 30 4 60 1 3 3 1陽性對照組101 4 3 13 2 3 20 4 50 2 4 4 0各組小鼠肝組織的病理改變程度分析組別 n 肝細胞變性 肝細胞壞死 匯管區(qū)炎癥 中央靜脈淤血正常組100.6±0.50.2±0.40.6±0.71.0±0.2空白對照組102.7±0.23.1±0.22.9±0.42.7±0.3用藥組101.5±0.21.4±0.81.5±0.21.3±1.3陽性對照組101.6±1.21.4±1.41.6±0.71.2±2.4實驗表明，本發(fā)明粉針劑制劑療效好。
實驗例2對流行性乙型腦炎病毒感染小鼠的影響40只2～3周齡小白鼠15～21g，試驗共分4組，每組10只，感染病毒為JEV P3株，病毒感染對照組、正常小鼠對照組、復方甘草酸單銨水針劑對照組、本發(fā)明治療組。實驗當日小鼠腦內(nèi)接種20μL含105JEV的RPMI1640液，正常小鼠不作任何處理。接種病毒后2h，復方甘草酸單銨水針劑對照組、治療組用藥組腹腔內(nèi)注射10μg，連續(xù)治療3d。對小鼠發(fā)病時間的影響將病毒接種至小鼠開始抽搐之間的時間定為發(fā)病時間，腹腔注射不同的藥，對發(fā)病時間有明顯的影響。
組別 鼠數(shù) 每日劑量 發(fā)病時間(h)(只) (μg)最短 最長 平均時間病毒感染對照組10-65104 85.4±20.1正常小鼠對照組10-- --水針劑對照組 10595280 158.4±57.6本發(fā)明治療組 10598295 160.4±43.2實驗表明，本發(fā)明制劑療效好，不低于復方甘草酸單銨水針劑。
實驗例3對再生障礙性貧血小鼠造血細胞的影響實驗動物昆明種小鼠40只，雌性，12周齡，體重25～30g；模型制備參照相關文獻給予馬利蘭腹腔注射復制慢性再障模型，每周一次，共10周；動物分組及給藥隨機選取10只小鼠為正常對照組(簡稱正常組)；其余30只待造模成功后再隨機分為3組再障模型組(簡稱模型組)、復方甘草酸單銨水針劑對照組(簡稱對照組)、本發(fā)明治療組。對照組灌服復方甘草酸單銨水針，每日用藥劑量為4mg/kg，本發(fā)明治療組灌服本發(fā)明制劑，每日用藥劑量為4mg/kg，模型組及正常組以等體積蒸餾水灌胃。每日一次，連續(xù)20天。對再障模型小鼠骨髓有核細胞(MNC)計數(shù)的影響末次給藥后，禁食不禁水12小時，每只小鼠取一側(cè)股骨(右側(cè))，用0.4mol/L冰醋酸液沖出骨髓細胞并計數(shù)，即為一根股骨中的有核細胞數(shù)。對再障模型小鼠外周血的影響給藥結(jié)束后，禁食不禁水12小時后，尾靜脈取血，計數(shù)紅細胞(RBC)、白細胞(WBC)、血小板(PLT)，測量血紅蛋白(Hb)含量，同時涂片經(jīng)瑞氏染色后，油鏡下計數(shù)網(wǎng)織紅細胞(RET)。
對再障小鼠骨髓有核細胞數(shù)的影響組別 藥物 MNC(×107股骨)正常組 - 2.20±0.45模型組 - 1.45±0.20對照組 4mg/kg1.90±0.75治療組 4mg/kg1.85±0.36對再障小鼠外周血的影響組別 WBC(×109L)RBC(×109L) Hb(g/L)PLT(×109L) RET(％)正常組14.45±5.60 8.85±0.16148±13162.3±21.54.08±1.35模型組6.13±2.23 6.86±0.71124±1292.4±20.6 3.11±1.37對照組14.02±3.67 7.56±1.15135±11143.0±23.53.72±1.08治療組14.13±5.72 7.60±2.34137±15144.4±27.03.90±1.12實驗表明，本發(fā)明制劑療效好，不低于復方甘草酸單銨水針劑。
實驗例4預凍時間的選擇預凍時間(h) 澄明度 成型性2差 欠佳3差 欠佳4差 欠佳5澄明欠佳6澄明成型實驗表明，預凍時間6小時所得的產(chǎn)品質(zhì)量好。
實驗例5干燥時間的選擇按照冷凍干燥工藝，先將樣品溶液進行預凍處理，時間為3～5小時，在低于共熔點溫度下進行干燥，干燥時間約為30小時，為了既能保證干燥質(zhì)量，又能節(jié)約時間，我們對干燥時間分別為25小時、30小時和35小時進行試驗，結(jié)果如下干燥時間(h) 水分％253.10302.55352.60實驗表明，干燥25小時水分含量較高，30小時干燥結(jié)果和35小時干燥結(jié)果差不多，在生產(chǎn)上為節(jié)約時間，我們選擇干燥30小時。
實驗例6凍干前溶液pH值范圍的篩選①PH值 4.5 5.0 5.5 6.0 7.0 7.5外觀性狀深黃色 淡黃色 淡黃色 類白色 類白色 類白色溶解性 澄清 澄清 澄清 澄清 澄清 渾濁有關物質(zhì)％ 0.2150.2500.2600.2650.2801.02②凍干原液PH值 粉針PH值不調(diào) 3.56.06.17.07.0實驗表明，在pH值在6.0以下是外觀性狀明顯改變而7.0以上有關物質(zhì)明顯增多，凍干前后PH值基本不變，通過上面的試驗，確定pH值為6.0～7.0。
實驗例7活性炭用量的選擇
①含量測定不同濃度活性炭對復方甘草酸單銨的吸附活性炭用量％(W/V) 吸收度 平均復方甘草酸單銨含量(％)第一次第二次第三次0.01 0.391 0.390 0.392 0.391 100.50.02 0.365 0.366 0.364 0.365 99.00.03 0.330 0.332 0.333 0.332 88.5實驗表明，在配制注射用復方甘草酸單銨過程中，活性炭對甘草酸單銨有較強的吸附作用，并且隨著活性炭用量的增加，甘草酸單銨含量逐漸降低。
②澄明度檢查取各樣品各5瓶，分別加入水溶解成0.1g/ml的溶液。
照《衛(wèi)生部澄明度檢查細則和判斷標準》依法檢查，結(jié)果見下表。
不同用量的活性炭對澄明度的影響活性炭的用量(w/v) 0.01％ 0.02％0.03％不合格瓶數(shù)30 0實驗表明，本處方中加入活性炭的用量是0.03％，在澄明度檢查時合格，從中可見加入的活性炭用量越小，甘草酸單銨的含量就越高。經(jīng)試驗確定本處方中所用的活性炭的用量是0.02％(w/v，經(jīng)115℃-120℃活化2h)，可起到吸附雜質(zhì)和熱原的作用，又可減少對主藥的吸附量，從而降低生產(chǎn)成本。
實驗例8影響因素試驗①高溫試驗取樣品50瓶，于60℃溫度下放置10天，于第5天和第10天取樣，按穩(wěn)定性重點考察項目外觀色澤、甘草酸單銨含量、有關物質(zhì)等進行檢測，結(jié)果見表。
粉針水針0天 5天 10天0天5天10天外觀色澤類白色疏 類白色疏 類白色疏 無色 無色 無色松塊狀固體松塊狀固體 松塊狀固體澄清溶液 澄清溶液 澄清溶液含量(％)99.9 99.8 99.5 99.6 99.4 98.7有關物質(zhì)％ 0.197 0.3300.325 0.195 0.354 0.365②強光照射試驗取樣品50瓶，于照度為4500lx±500lx的條件下放置10天，于第5天和第10天取樣，按穩(wěn)定性重點考察項目外觀色澤、甘草酸單銨含量、有關物質(zhì)等進行檢測，結(jié)果見表。
粉針 水針0天 5天 10天0天 5天10天外觀色澤類白色疏 類白色疏 類白色疏 無色 無色 無色松塊狀固體 松塊狀固體 松塊狀固體 澄清溶液 澄清溶液 澄清溶液含量(％)100.599.8 99.6 99.4 99.0 98.5有關物質(zhì)％ 0.1900.2010.2210.196 0.234 0.250③高濕試驗取樣品50瓶，開口置于相對濕度90％+5％的環(huán)境下放置10天，于第5天和第10天取樣，按穩(wěn)定性重點考察項目外觀色澤、甘草酸單銨含量、有關物質(zhì)等進行檢測，結(jié)果見表。
粉針 水針0天 5天 10天0天 5天 10天外觀色澤類白色疏 類白色疏 類白色疏 無色 無色 無色松塊狀固體 松塊狀固體 松塊狀固體 澄清溶液 澄清溶液 澄清溶液含量(％)100.699.8 99.6 99.8 99.4 98.7有關物質(zhì)％ 0.1900.3210.3430.196 0.356 0.378實驗表明，本發(fā)明制劑較水針劑穩(wěn)定性好，質(zhì)量穩(wěn)定。
具體的實施方式本發(fā)明的實施例1取甘草酸單銨1g，加入為600ml的注射用水，攪拌至完全溶解；加入甘氨酸15g、L-半胱氨酸鹽酸鹽1g、無水亞硫酸鈉1g，攪拌使溶解，加水至1000ml，用1.0mol/L的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH至6.0～7.0；另加入處方量活性炭0.02％(w/v)(經(jīng)115-120℃活化2h)，置于不銹鋼容器中，在80℃保溫攪拌吸附30分鐘，粗濾，脫炭；用0.45μm和0.22μm組成的復合濾膜過濾至澄明，無菌分裝，預凍6小時、干燥30小時，即得。使用方法一日二次，每次10ml，肌注。
本發(fā)明的實施例2取甘草酸單銨3g，加入為600ml的注射用水，攪拌至完全溶解；加入甘氨酸25g、L-半胱氨酸鹽酸鹽2g、無水亞硫酸鈉3g，攪拌使溶解，加水至1000ml，用1.0mol/L的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH至6.0～7.0；另加入處方量活性炭0.02％(w/v)(經(jīng)115-120℃活化2h)，置于不銹鋼容器中，在80℃保溫攪拌吸附30分鐘，粗濾，脫炭；用0.45μm和0.22μm組成的復合濾膜過濾至澄明，無菌分裝，預凍6小時、干燥30小時，即得。
本發(fā)明的實施例3取甘草酸單銨2g，加入為600ml的注射用水，攪拌至完全溶解；加入甘氨酸20g、L-半胱氨酸鹽酸鹽1.5g、無水亞硫酸鈉2g，攪拌使溶解，加水至1000ml，用1.0mol/L的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH至6.0～7.0；另加入處方量活性炭0.02％(w/v)(經(jīng)115-120℃活化2h)，置于不銹鋼容器中，在80℃保溫攪拌吸附30分鐘，粗濾，脫炭；用0.45μm和0.22μm組成的復合濾膜過濾至澄明，噴霧干燥，分裝，密封即得。
本發(fā)明的實施例4取甘草酸單銨2g，加入為600ml的注射用水，攪拌至完全溶解；加入甘氨酸20g、L-半胱氨酸鹽酸鹽1.5g、無水亞硫酸鈉2g，攪拌使溶解，加水至1000ml，用1.0mol/L的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH至6.0～7.0；另加入處方量活性炭0.02％(w/v)(經(jīng)115-120℃活化2h)，置于不銹鋼容器中，在80℃保溫攪拌吸附30分鐘，粗濾，脫炭；用0.45μm和0.22μm組成的復合濾膜過濾至澄明，在有機溶媒中重結(jié)晶，分裝，密封即得。
權(quán)利要求
1.一種復方甘草酸單銨粉針制劑，其特征在于它用甘草酸單銨加適量無菌注射用水和輔料制備而成。
2.按照權(quán)利要求1所述的復方甘草酸單銨粉針制劑，其特征在于按照重量配比它由1～3g甘草酸單銨、15～25g甘氨酸、1～2g L-半胱氨酸鹽酸鹽、1～3g無水亞硫酸鈉、0.85％氯化鈉溶液適量、1.0mol/L的氫氧化鈉溶液適量，加無菌注射用水至1000ml制備而成。
3.按照權(quán)利要求1或2所述的復方甘草酸單銨粉針制劑，其特征在于具體的說，按照重量計算它由2g甘草酸單銨、20g甘氨酸、1.5g L-半胱氨酸鹽酸鹽、2g無水亞硫酸鈉、0.85％氯化鈉溶液適量、1.0mol/L的氫氧化鈉溶液適量，加無菌注射用水至1000ml制備而成。
4.按照權(quán)利要求1、2或3所述的復方甘草酸單銨粉針制劑，其特征在于所述粉針制劑包括粉針制劑或者是凍干粉針制劑
5.如權(quán)利要求1-4所述的復方甘草酸單銨粉針制劑的制備方法，其特征在于取甘草酸單銨，加入600ml的注射用水，攪拌至完全溶解；再加入甘氨酸、L-半胱氨酸鹽酸鹽、無水亞硫酸鈉，攪拌使溶解，加水至1000ml，用1.0mol/L的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH至6.0～7.0；另加入處方量活性炭0.02％(w/v)經(jīng)115-120℃活化2小時，置于不銹鋼容器中，在80℃保溫攪拌吸附30分鐘，粗濾，脫炭；用0.45μm和0.22μm組成的復合濾膜過濾至澄明，無菌分裝，預凍6時、干燥30小時，即得。
6.按照權(quán)利要求5所述的復方甘草酸單銨粉針制劑的制備方法，其特征在于取甘草酸單銨，加入為600ml的注射用水，攪拌至完全溶解；加入甘氨酸、L-半胱氨酸鹽酸鹽、無水亞硫酸鈉，攪拌使溶解，加水至1000ml，用1.0mol/L的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH至6.0～7.0；另加入處方量活性炭0.02％(w/v)經(jīng)115-120℃活化2小時，置于不銹鋼容器中，在80℃保溫攪拌吸附30分鐘，粗濾，脫炭；用0.45μm和0.22μm組成的復合濾膜過濾至澄明，噴霧干燥或在有機溶媒中重結(jié)晶，分裝，密封即得。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種復方甘草酸單銨粉針制劑及其制備方法，它由甘草酸單銨、甘氨酸、L－半胱氨酸鹽酸鹽、無水亞硫酸鈉、氯化鈉溶液適量、氫氧化鈉溶液適量，加無菌注射用水制備成粉針制劑或者是凍干粉針制劑，本發(fā)明選用無菌分裝粉針劑、凍干粉針劑，避免了由于封針抽取注入大輸液的中間環(huán)節(jié)，杜絕了這一用藥過程中的交叉污染，使污染的機率下降；而且粉針劑更有利于復方甘草酸單銨的穩(wěn)定，在制備過程中不加熱滅菌，不會造成藥物分解破壞，長期貯存不易分解變質(zhì)，提高了用藥的安全性，產(chǎn)品可以長期貯存；劑量準確，外觀優(yōu)良；穩(wěn)定性好，安全性高，療效顯著。
文檔編號A61K31/56GK1582945SQ20041002278
公開日2005年2月23日 申請日期2004年6月9日 優(yōu)先權(quán)日2004年6月9日
發(fā)明者于文勇 申請人:貴陽云巖西創(chuàng)藥物科技開發(fā)有限公司