專利名稱：一種從螻蛄中提取的抗腫瘤有效部位及制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及中藥制藥領(lǐng)域，具體涉及從螻蛄中提取的抗腫瘤有效部位及制備方法。
背景技術(shù)：
螻蛄(Gryllotalpa africana Pal.de Beauvois)，為我國一傳統(tǒng)的中藥。據(jù)《中藥大辭典》記載，螻蛄性味咸，寒，主要作用為利水，通便，治水腫，石淋，小便不利，瘰疬，癰腫惡瘡。臨床使用方法為取螻蛄去盡頭、爪、翼，置鍋內(nèi)以文火焙焦，研成細末。每日2錢，分3次用開水或米湯送服，5～7天為一個療程。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題在于開發(fā)螻蛄的新的藥用部位，提供一種從螻蛄中提取的具有抗腫瘤活性的有效部位。
本發(fā)明公開的螻蛄抗腫瘤有效部位是將螻蛄整蟲粉碎后，用醇溶液提取，再用低極性有機溶劑進行萃取獲得的提取物。
經(jīng)動物抗腫瘤實驗證明，該提取物對小鼠肝癌H22實體瘤、小鼠肉瘤S180(實體型)和小鼠Lewis肺癌有明顯的抑制作用。劑量從0.1至1g/kg時，其抑瘤作用逐漸增強。1g/kg劑量時抑瘤作用平均分別達37.87％、44.30％、57.94％。三批實驗結(jié)果重復(fù)性好，統(tǒng)計分析表明，該提取物各劑量組的作用與對照組之間差異非常顯著(P＜0.01)。對移植于裸鼠的人體肝癌QGY的抑瘤率分別達32.95％、54.55％、70.45％對人體胃癌MKN45的抑瘤分別為37.67％、34.25％、46.58％。對人體骨髓瘤KM3的抑瘤率分別達40.56％、58.34％、67.78％對人體白血病K562的抑瘤分別為35.28％、39.46％、61.15％。
本發(fā)明所要解決的另一技術(shù)問題在于公開上述從螻蛄中提取的抗腫瘤有效部位的制備方法。
本發(fā)明公開的從螻蛄中提取的抗腫瘤有效部位的制備方法包括下列步驟1、螻蛄整蟲粉碎；2、用生藥量1～10倍醇溶液提??；3、合并提取液，回收溶劑后的殘留物加入生藥量1～10倍的水溶解，用生藥量1～10倍的低極性有機溶劑萃取；4、萃取液回收溶劑后即得有效部位。
本發(fā)明所述的醇溶液選自濃度為10～90％的甲醇，乙醇，丙醇及丁醇，醇溶液提取的方法包括浸出(浸漬)法，滲漉法，加熱回流法。
本發(fā)明所述低極性有機溶劑選自各種規(guī)格的汽油，乙醚，各種規(guī)格的石油醚。
本發(fā)明所要解決的再一技術(shù)問題在于公開上述從螻蛄中提取的有效部位在制備治療抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。
用本發(fā)明方法獲得的螻蛄有效部位其抗腫瘤的范圍包括小鼠肝癌H22實體瘤，小鼠肉瘤S180(實體型)，小鼠Lewis肺癌，骨髓瘤，白血病，胃癌。
本發(fā)明獲得的螻蛄有效部位可與藥用輔料制成各種醫(yī)學(xué)上可接受的制劑形式，用于上述腫瘤的治療。
用本發(fā)明螻蛄中提取的有效部位進行藥效學(xué)試驗、急性毒性、一般藥理學(xué)和長期毒性試驗一、對小鼠肝癌H22、S180肉瘤、Lewis肺癌對人體骨髓瘤KM3對人體白血病K562和移植于裸鼠的人體腫瘤的療效1、試驗樣品名稱長動提供單位上海醫(yī)藥工業(yè)研究院批號20030322-A，20030322-B，20030322-C性狀提取物呈棕褐色2、陽性對照藥物名稱環(huán)磷酰胺(CTX)生產(chǎn)單位上海華聯(lián)制藥有限公司批號010703規(guī)格200mg/瓶配制方法用生理鹽水配制成溶液3、試驗動物品系昆明種小鼠來源由本院動物房提供合格證號滬動合證字107號體重19-21g性別雌雄兼用，同批實驗同一性別。
每組動物數(shù)10只4、移植性腫瘤小鼠肝癌H22(腹水型)，S180肉瘤(腹水型)、Lewis肺癌、骨髓瘤KM3、白血病K562保種維持。
5、試驗方法取生長良好的小鼠腫瘤，用生理鹽水稀釋成(1-2)×107cell/ml濃度的細胞懸液，每只小鼠腋皮下接種0.2ml，隨機分組，設(shè)生理鹽水組、CTX組(30mg/kg)，長動設(shè)3個劑組，分別為0.1、0.1和1g/kg，給藥體積為0.5ml/20g體重。接種后次日起給藥，連續(xù)經(jīng)口灌胃7天。接種后10～14日脫頸處死動物，稱體重后解剖取瘤塊，稱瘤重，計算抑瘤率。實驗重復(fù)三批。
6、試驗結(jié)果該部分的抗腫瘤的藥效實驗顯示，對小鼠肝癌H22實體瘤有明顯的抑制作用，劑量從0.1、0.5、1g/kg時，其抑瘤作用逐漸增強，三批實驗平均抑瘤率分別達41.15、55.97、68.63％三批實驗結(jié)果重復(fù)性好，統(tǒng)計分析表明，該部位各劑組的抑瘤作用與對照組之間的差異非常顯著(P＜0.01)。
該部位對小鼠肉瘤S180實體瘤亦有明顯的抑制作用，劑量從0.1、0.5、1g/kg時，其抑瘤作用逐漸增強，三批實驗平均抑瘤率分別達45.01、54.53、68.95％。三批實驗結(jié)果重復(fù)性好，統(tǒng)計分析表明，該部位各劑量組的抑瘤作用與對照組之間的差異非常顯著(P＜0.01)。
該部位對小鼠肝癌Lewis肺瘤同樣具有明顯的抑制作用，劑量從0.1、0.5、1g/kg時，其抑瘤作用逐漸增強，三批實驗平均抑瘤率分別達37.87、44.30、57.94％。三批實驗結(jié)果重復(fù)性好，統(tǒng)計分析表明，該部位各劑量組的抑瘤作用與對照組之間的差異非常顯著(P＜0.01)。
該部位對移植于裸鼠的人體肝癌QGY、人體胃癌MKN45在見瘤(接種約7天)后工始給藥具有明顯的抑瘤作用，劑量從0.1、0.5、1g/kg時，對人體肝癌QGY的抑瘤率分別達32.95、54.55、70.45％，對人體胃癌MKN45的抑瘤率分別為37.67、34.25、46.58％。對人體骨髓瘤KM3的抑瘤率分別達40.56％、58.34％、67.78％對人體白血病K562的抑瘤分別為35.28％、39.46％、61.15％。
該部位抗腫瘤藥效實驗的對照組為環(huán)磷酰胺(CTX)(0.03g/kg)。
二、毒理試驗1、本發(fā)明螻蛄有效部位的小鼠急性毒性實驗結(jié)果顯示，小鼠給藥后各組動物無明顯異常，未發(fā)生死亡；觀察其終止時處死全部存活動物進行解剖，巨檢也未見明顯異常變化。其小鼠口服給藥，雄性小鼠的LD50＞10g/kg，雌性小鼠的LD50＞10g/kg。
2、SD大鼠口服三個月長期毒性實驗結(jié)果表明，對一般癥狀(動物的活動、體重、精神狀態(tài)、糞便等)、血液學(xué)、血清生化、尿常規(guī)、系統(tǒng)尸檢等檢查均未見與藥物有關(guān)的明顯毒性反應(yīng)。給藥3個月停藥3周血液學(xué)、血清生化、尿常規(guī)、系統(tǒng)尸檢及臟器系數(shù)等檢查均未見與藥物有關(guān)的明顯毒性反應(yīng)。
上述試驗證明，本發(fā)明從螻蛄中提取的有效部位安全無毒，且有明顯的抗腫瘤作用。
具體實施例方式實施例1、生藥粉末加5倍量的95％乙醇回流提取1小時，過濾后的殘渣加4倍量的95％乙醇回流提取1小時，過濾，4倍量再重復(fù)提取一次合并三次濾液，60℃，700mmHg回收乙醇，濃縮至近無乙醇味，加水至生藥重量的0.8倍，加等量的石油醚(60°～90℃)萃取，回收石油醚層后的粗提物，得率約為20％。
實施例2生藥粉末加5倍量的85％乙醇回流提取1.5小時，過濾后的殘渣加4倍量的85％乙醇回流提取1小時，過濾，4倍量再重復(fù)提取一次合并三次濾液，60℃，700mmHg回收乙醇，濃縮至近無乙醇味，加水至生藥重量的1.0倍，加等量的石油醚(30°～60℃)萃取，回收石油醚層后的粗提物，得率約為20％。
實施列3、處方螻蛄提取物0.2g(實施例1制得)淀粉0.01g乳糖0.5g微晶纖維素0.5g硬脂酸鎂0.02g滑石粉0.01將上述成分混合均勻制成顆粒過20～80目篩，于40～80℃干燥，壓片即得。
實施列4制劑處方螻蛄提取物0.3g(實施例2制得)淀粉0.01g乳糖0.4g微晶纖維素0.5g硬脂酸鎂0.02g滑石粉0.03g將上述成分混合均勻制成顆粒過20～80目篩，于40～80℃干燥，裝入0～3號膠囊，即得。
實施例5處方螻蛄提取物0.5g聚乙二醇0.7g植物油0.09g抗氧化劑0.02g將上述組分混勻，裝入軟膠囊即得。
權(quán)利要求
1.一種從螻蛄中提取的有效部位，其特征在于所述的有效部位是將螻蛄整蟲粉碎后，用醇溶液提取，再用低極性有機溶劑進行萃取獲得的提取物。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的從螻蛄中提取的有效部位的制備方法，其特征在于所述的制備方法包括下列步驟1)螻蛄整蟲粉碎；2)用生藥量1～10倍醇溶液提取；3)合并提取液，回收溶劑后的殘留物加入生藥量1～10倍的水溶解，用生藥量1～10倍的低極性有機溶劑萃取；4)萃取液回收溶劑后即得有效部位。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的從螻蛄中提取的有效部位的制備方法，其特征在于其中所述的醇溶液選自濃度為10～90％的甲醇，乙醇，丙醇及丁醇。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的從螻蛄中提取的有效部位的制備方法，其特征在于其中所述的醇溶液提取的方法選自浸漬法，滲漉法和加熱回流法。
5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的從螻蛄中提取的有效部位的制備方法，其特征在于其中所述的低極性有機溶劑選自各種規(guī)格的汽油，乙醚和各種規(guī)格的石油醚。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的從螻蛄中提取的有效部位在制備治療抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的從螻蛄中提取的有效部位在制備治療抗腫瘤藥物中的應(yīng)用，其中的腫瘤包括肝癌，肉瘤實體瘤，Lewis肺癌，骨髓瘤，白血病和胃癌。
全文摘要
本發(fā)明涉及從螻蛄中提取的抗腫瘤有效部位及制備方法。所述的有效部位是將螻蛄整蟲粉碎后，用醇溶液提取，再用低極性有機溶劑進行萃取后獲得。該有效部位具有顯著的抗腫瘤活性，可用于制備治療抗腫瘤藥物。
文檔編號A61K35/64GK1582970SQ20041002516
公開日2005年2月23日 申請日期2004年6月15日 優(yōu)先權(quán)日2004年6月15日
發(fā)明者侯健 申請人:上海澳隆科技發(fā)展有限公司, 侯健, 孔德云, 戴啟明, 李玉富, 王國平