專利名稱：測定血液中葡萄糖的方法和檢測條的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種在樣品中測定待分析物的量的方法和檢測條。尤其是，本發(fā)明涉及測定血液中葡萄糖的量的方法以及在這樣的方法中所采用的樣品檢測條。
背景技術(shù)：
對各種類型液體中的化學(xué)和生化成分進(jìn)行定量對于醫(yī)學(xué)來說變得越來越重要，特別是對于有顏色的含水生物液體例如全血和尿液，以及生物衍生物例如血漿和血清。該能力在測定有害物質(zhì)、麻醉劑、治療藥物的作用影響時(shí)以及在診斷中都是十分重要的。在一些應(yīng)用中，人能夠在實(shí)驗(yàn)室環(huán)境之外完成檢測并得到快速而精確的結(jié)果是很重要的。例如，糖尿病患者需要在一天之中幾次檢測他們自己血液樣品中的葡萄糖從而調(diào)控他們的飲食和藥物。其檢測結(jié)果必須快速而精確。
測定血液中葡萄糖的檢測試劑盒對于本領(lǐng)域技術(shù)人員來說是已知的。這樣的檢測試劑盒通常包括一個(gè)檢測條，在檢測條上包含一種或更多在葡萄糖存在時(shí)發(fā)生反應(yīng)從而在檢測條上引起顏色變化的化學(xué)物質(zhì)。檢測條上的顏色變化可通過已知的光學(xué)檢測方法來檢測。雖然可以檢測的變化有樣品的吸收率，透射率或反射率，但是用于葡萄糖測定通常采用的是反射率的變化。一般來說，當(dāng)樣品中葡萄糖濃度升高時(shí)，檢測條將產(chǎn)生更濃的顏色或變得更暗。較暗的檢測條將產(chǎn)生較低的反射率，因此較低的反射率將顯示出樣品中含有較多的葡萄糖。
血液樣品中紅細(xì)胞的存在會通過在進(jìn)行葡萄糖讀取時(shí)向探測器反射與之相同的波長的光，或通過阻斷光的透射以使得對應(yīng)于葡萄糖的顏色發(fā)展情況不能被讀取，或通過光的散射而干擾反射率的讀取。這樣，一些檢測試劑盒要求在將樣品施加到檢測條之前要將樣品中的紅細(xì)胞過濾或裂解。
涉及血液中葡萄糖比色測定的一系列專利包括US4935346，US5049487，US5049394，US5179005以及US5304468，它們?nèi)哭D(zhuǎn)讓給了加利福尼亞州芒廷維市的生命掃描有限公司，在此全部引入作為參考。其中公開的方法包括從一個(gè)惰性雙面多孔基質(zhì)的表面上進(jìn)行反射率的讀取。基質(zhì)包含一種試劑，當(dāng)待分析的液體被施加到第一表面上并在基質(zhì)上移動至第二表面時(shí)該試劑與待分析物反應(yīng)生成光吸收性反應(yīng)產(chǎn)物。為了補(bǔ)償紅細(xì)胞比容變化的干擾和由對應(yīng)于給定的葡萄糖濃度所產(chǎn)生的顏色層析引起的變化，第二表面反射率的檢測采用兩個(gè)獨(dú)立的波長。由穿過惰性基質(zhì)的液體濕潤了第二表面而引起的反射率的起始下降觸發(fā)定時(shí)電路。該方法不需要從血清或血漿中分離紅細(xì)胞。
轉(zhuǎn)讓給Boehringer Mannheim GmbH的標(biāo)題為“采用PQQ依賴型脫氫酶比色測定待分析物的方法”的美國專利US5487708公開了一種待分析物的比色測定方法，該方法利用PQQ依賴型脫氫酶的氧化作用在電子受體存在的情況下從富電子的芳香族亞硝基化合物中通過使亞硝基化合物還原為亞氨基化合物并通過檢測顏色的形成而測定亞氨基化合物。
標(biāo)題為“具有降低的紅細(xì)胞比容敏感性的血液葡萄糖檢測條”的美國專利US5789255也轉(zhuǎn)讓給了生命掃描有限公司，在此引入作為參考。該專利公開了一種試劑檢測條，它包含各向異性的膜，在樣品面具有相對大的孔徑而在檢測面具有相對小的孔徑。檢測樣品被施加于樣品面并通過膜到達(dá)檢測面，而相對大的紅細(xì)胞被從血液樣品中過濾出來。膜上充滿了檢測試劑，該試劑包含能與葡萄糖和氧氣反應(yīng)從而產(chǎn)生過氧化氫的成分，能與過氧化氫反應(yīng)的顏色指示劑以及能減少紅細(xì)胞對葡萄糖濃度檢測影響的丙烯酸聚合物。丙烯酸聚合物被認(rèn)為具有相對高的分子量并且能影響樣品的粘度和流動。
在這些采用光學(xué)檢測方法的檢測葡萄糖的先有方法中，已經(jīng)認(rèn)識到檢測系統(tǒng)必須調(diào)整以使得反射表面不透明。已知的是反應(yīng)表面越不透明，對紅細(xì)胞的存在就越不敏感。在一些這樣的方法中，不透明性是通過在基質(zhì)的反射表面摻入散射核來調(diào)節(jié)的。這樣的已知散射核包括二氧化鈦，硅藻土，金屬粉末，礦物以及這些和其他材料的各種組合物。其他已知能影響不透明性的因素包括孔徑尺寸，孔結(jié)構(gòu)以及支持基質(zhì)的表面面積。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的之一是提供一種不需要從全血樣品中分離或裂解紅細(xì)胞的液體樣品檢測方法。
本發(fā)明的又一個(gè)目的是提供這樣一種使用非常少量的，特別是小于1微升的液體樣品就能進(jìn)行檢測的方法。
本發(fā)明的另一目的是提供這樣一種對從樣品到樣品的紅細(xì)胞比容的變化不敏感的檢測方法。
本發(fā)明還有一個(gè)目的是提供一種適合用于本發(fā)明方法中的檢測條。
上述目的都體現(xiàn)在本發(fā)明中，其中測定樣品中葡萄糖的方法包括采用一個(gè)雙面檢測條，在該檢測條中采用了一種或更多聚合物來改變進(jìn)行光學(xué)讀取的表面的不透明性。在優(yōu)選的實(shí)施例中，聚合物也可以通過將檢測試劑保持在反應(yīng)點(diǎn)和/或讀取點(diǎn)而控制反應(yīng)產(chǎn)物的層析。根據(jù)本發(fā)明，在全血樣品中測定葡萄糖濃度的方法包括(a)提供一個(gè)具有樣品面和反應(yīng)面的檢測條，檢測條適合于在樣品面上接受樣品并將它輸送給反應(yīng)面，所述檢測條載有檢測試劑，而所述的檢測試劑包括變化顏色來指示樣品中存在葡萄糖的顏色指示劑系統(tǒng)，所述的檢測條進(jìn)一步包含至少施加于反應(yīng)面上的聚合物，所述的聚合物提高了檢測條反應(yīng)面的不透明性；(b)施加血液樣品至檢測條的樣品面；以及(c)檢測反應(yīng)面的顏色變化從而測定血液中葡萄糖的濃度。
檢測條優(yōu)選含有由選自聚醚砜和改性聚醚砜的材料制成的多孔膜。一種或更多施加于多孔膜的聚合物優(yōu)選地選自丙烯酸膠乳聚合物和聚苯乙烯硫酸鈉。
附圖簡述結(jié)合附圖本發(fā)明將更容易理解，其中

圖1A是根據(jù)本發(fā)明制造的檢測條的透視圖；圖1B是根據(jù)本發(fā)明制造的檢測條可替換實(shí)施例的分解圖；圖1C是適合用于本發(fā)明的檢測條的另一個(gè)可替換實(shí)施例的分解圖；圖2是根據(jù)本發(fā)明制備的檢測條檢測水溶液和全血中葡萄糖時(shí)采用具有大和小孔徑的膜所取得的結(jié)果圖；圖3顯示的是根據(jù)本發(fā)明的毛細(xì)管填充形式的檢測條對于水溶液和全血中不同濃度葡萄糖作出的響應(yīng)；圖4顯示的是根據(jù)本發(fā)明制成的檢測條上不同端點(diǎn)的響應(yīng)，在該檢測條上的反應(yīng)化學(xué)物呈條帶狀分布。
發(fā)明詳述本發(fā)明的方法包括測定樣品中的葡萄糖，其中通過已知的步驟即將樣品放置在檢測條的第一面上，允許樣品中的任何葡萄糖與檢測條中的試劑反應(yīng)，以及在樣品穿過檢測條后對檢測條的反面進(jìn)行光學(xué)檢測。根據(jù)本發(fā)明，檢測條上具有一種或更多聚合物，它們能夠以某種方式改變檢測條的不透明度以使得葡萄糖的測定對于樣品中存在的紅細(xì)胞更加不敏感。在圖1A-C的每一幅圖中，層的厚度是為了清楚的示例而不代表檢測條產(chǎn)品中層的實(shí)際厚度。
圖1A是適合用于本發(fā)明的方法中的檢測條10的透視圖。如圖1A所示，檢測條10包含一個(gè)與多孔膜11連接的手柄13。由于本發(fā)明的方法不需要在進(jìn)行光學(xué)檢測之前從樣品中過濾掉紅細(xì)胞，所以檢測條中X、Y、Z方向上孔的結(jié)構(gòu)可以是不變的，當(dāng)然也可以采用具有各向異性孔徑尺寸梯度的膜。多孔膜11具有一個(gè)第一面12，它被稱為檢測面或樣品面，以及一個(gè)第二面14，它被稱為反應(yīng)面。樣品通過手柄13中的洞17被沉積到多孔膜11的檢測面12上。樣品穿過膜的孔到達(dá)多孔膜11的反應(yīng)面14。隨后，將反應(yīng)面14的光學(xué)檢測值例如反射率與葡萄糖濃度關(guān)聯(lián)起來從而確定樣品中存在的葡萄糖量。
根據(jù)本發(fā)明，多孔膜11的反應(yīng)面14采用檢測試劑組合物16來處理，該組合物包含一個(gè)能改變顏色從而指示樣品中葡萄糖存在的顏色指示劑系統(tǒng)，試劑組合物16還進(jìn)一步包含能影響多孔膜11的反應(yīng)面14的不透明性的聚合物。試劑組合物16所包含的聚合物可以通過諸如浸漬、涂覆和剝離(stripping)等方式施加到檢測條上。在如圖1A所示的實(shí)施例中，組合物作為涂層16施加在檢測條10的反應(yīng)面14上。在另一個(gè)實(shí)施例中，組合物首先通過例如浸漬的方式而施加到面12，穿過檢測條而在面14上重新構(gòu)建。那些本領(lǐng)域技術(shù)人員可以優(yōu)化組合物應(yīng)用過程的參數(shù)來實(shí)現(xiàn)預(yù)期的包括聚合物的組合物層16。試劑組合物中的聚合物也能影響待分析物在檢測條上的層析。可以通過已知的方式在組合物16上添加一個(gè)光學(xué)上清晰的窗口18，包括采用層壓壓合手段或采用壓力敏感粘合劑19粘合。窗口18可以由聚酯或任何其他光學(xué)上合適的材料制成。
圖1B顯示的是根據(jù)本發(fā)明所制造的檢測條的一個(gè)可替換實(shí)施例。在這個(gè)實(shí)施例中，檢測條20包含手柄13，從手柄上切割出一個(gè)洞15。圓盤25包含帶有一個(gè)樣品面22和一個(gè)反應(yīng)面24的多孔膜21。被施加到反應(yīng)面24的檢測試劑組合物26包含能改變顏色從而指示出樣品中葡萄糖存在的顏色指示劑系統(tǒng)，以及改變多孔膜21的反應(yīng)面24不透明性的聚合物。圓盤25適合安放在洞15中，光學(xué)上清晰的窗口28被施加在圓盤25以及手柄13的接受部分?？梢钥吹剑@個(gè)實(shí)施例與圖1A中的實(shí)施例或前述的先有專利例如US5789255中所顯示和描述的現(xiàn)有裝置相比需要較少的處理后的多孔膜材料?？梢韵氲降氖菆A盤25可以呈條狀或其他合適的幾何形狀。
圖1C顯示了適合用于本發(fā)明的檢測條的又一個(gè)實(shí)施例。在這個(gè)實(shí)施例中，檢測條30包含手柄33。條帶35包含具有一個(gè)樣品面32和一個(gè)反應(yīng)面34的多孔膜31。多孔膜31的反應(yīng)面34上提供有組合物36，該組合物含有檢測試劑，而檢測試劑中包含能改變顏色從而指示樣品中葡萄糖存在的顏色指示劑系統(tǒng)和能改變多孔膜31的反應(yīng)面34不透明性的聚合物。帶有毛細(xì)通道38的間隔物37通過粘合劑而施加到檢測條33的一部分和條帶35上，這樣一來毛細(xì)通道38就排列在條帶35的一部分上。蓋子以任意的方式放置在間隔物37上以便于防止儀器被污染。窗口布置在檢測條的相反一面上。
在所示出的每個(gè)實(shí)施例中，多孔膜支持著試劑組合物，該組合物在葡萄糖存在時(shí)發(fā)生反應(yīng)而產(chǎn)生能夠被光學(xué)檢測器檢測的反應(yīng)產(chǎn)物從而實(shí)現(xiàn)定量測定葡萄糖。反應(yīng)的化學(xué)類型既可以是還原反應(yīng)也可以是氧化反應(yīng)。適合用于本發(fā)明的還原化學(xué)體系可以是，例如PQQ-GDH或NAD-依賴型GDH體系。己糖激酶還原體系與葡萄糖氧化酶氧化體系一樣也可以使用。對于NAD依賴型GDH體系來說，合適的介質(zhì)包括而不限于那些在US5520786中所公開的內(nèi)容。這樣的介質(zhì)包括選自取代或非取代3-苯基亞氨基-3H-吩噻嗪和3-苯基亞氨基-3H-吩噁嗪的化合物。合適的指示劑包括但不限于WST-4以及在US5126275和US5322680中所公開的一般的2-噻唑基四唑鹽類化合物。前述的每項(xiàng)專利轉(zhuǎn)讓給了本發(fā)明的受讓人，在此全部引入作為參考。
在本項(xiàng)工作的過程中，發(fā)現(xiàn)US5520786中所報(bào)道的用于電極基的NAD依賴型GDH體系中的介質(zhì)也可以用于如上所述的光基NAD依賴型GDH體系和光基PQQ-GDH還原體系中。至少由于兩個(gè)理由使得這個(gè)結(jié)果令人感到驚奇。首先，介質(zhì)對于不同的酶是特異性的。不是所有在NAD-GDH體系中工作的介質(zhì)都能在PQQ-GDH體系中正常工作。其次，US5520786所公開的介質(zhì)是有顏色的。雖然這在如US5520786所公開的電極基體系中不成問題，但是人們可以預(yù)測到這些介質(zhì)不能被用在如這里所公開的光基體系中。然而申請人發(fā)現(xiàn)，由于這些介質(zhì)在反應(yīng)過程中從有色變成無色，因此它們并不干擾在末端點(diǎn)的檢測。本領(lǐng)域技術(shù)人員可以想象得到一般優(yōu)選的是檢測顏色的產(chǎn)生，這樣能給出較好的檢測精度，但是顏色的消失也是能夠檢測的。這樣，采用帶有US5520786所公開的介質(zhì)的PQQ-GDH還原體系是在本發(fā)明的范圍之內(nèi)的，并且除此之外本文還公開了采用一種或更多聚合物來控制不透明性。適合于這樣的體系的指示劑包括四唑指示劑例如WST-4，可以從Dojindo實(shí)驗(yàn)室得到，或者是四唑鹽指示劑例如上述的US5126275和US5322680所公開的那些。
適合用于本發(fā)明方法中的多孔膜材料包括商品化材料例如多孔聚醚砜膜，如那些來自Pall公司的以Supor和Presense商標(biāo)名出售的材料；以及改性多孔聚醚砜膜，例如來自Pall公司的以Predator商標(biāo)名出售的材料。那些本領(lǐng)域技術(shù)人員將會認(rèn)識到其他的多孔膜也可以作為本發(fā)明檢測條中的膜。
適合用作施加于膜上的聚合物材料包括，舉例來說，丙烯酸膠乳聚合物例如來自UnionCarbide公司的以UCAR商標(biāo)名出售的材料，聚苯乙烯硫酸鈉聚合物例如來自Polysciences公司的材料，以及其組合物。
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例1根據(jù)本發(fā)明所制備的檢測條對水溶液和全血中葡萄糖的劑量響應(yīng)通過小孔和大孔的檢測條膜同時(shí)確定。多孔膜采用買自Pall公司的Supor牌聚醚砜膜，具有0.2和5.0微米的均勻(各向同性)孔徑。每個(gè)多孔膜采用含有如表1所示組分的試劑對膜的光滑反應(yīng)面進(jìn)行浸漬處理。
表1

膜在高速氣流烘箱中40-50℃下至少干燥5分鐘。膜被切割成圓盤狀并適合于以上結(jié)合圖1B中實(shí)施例描述的檢測條。采用來自AdhesivesResearch的Arcare7843壓力敏感粘合劑將透明的聚酯薄膜窗口施加到涂覆過的反應(yīng)面。檢測條采用反應(yīng)面朝下來定向。隨后，500納升或者是葡萄糖水溶液或者是摻入葡萄糖的全血檢測樣品被施加到檢測條中每個(gè)圓盤的粗糙的樣品面。葡萄糖溶液用0.15M的HEPES鈉調(diào)節(jié)pH至7.5。水溶液和全血樣品中的葡萄糖濃度為0mg/dL，50mg/dL，100mg/dL，250mg/dL以及600mg/dL。全血樣品被摻入至可顯示的水平并且采用Yellow Springs公司的2300型STAT Plus葡萄糖檢測器來檢測血漿葡萄糖。在每個(gè)樣品檢測條上每個(gè)樣品溶液重復(fù)檢測兩次。每個(gè)檢測條在680nm處的反射率采用2002年4月19日申請的共同未決專利S.N.60/373583中所描述的儀器在透明的聚酯薄膜窗口處進(jìn)行檢測。這個(gè)儀器采用了直徑大約為0.030英寸的小閱讀面積反射率讀取探頭。所檢測的反射率值R通過公式K/S＝(1-R)2/2R而轉(zhuǎn)化成K/S線性曲線。如圖2所示，每個(gè)水平的葡萄糖所檢測到的反射率對于水溶液和全血，以及對于檢測圓盤的不同孔徑尺寸來說都是基本上相同的，這表明對于根據(jù)本發(fā)明制成的檢測條來說劑量響應(yīng)基本上既不依賴于膜的孔徑尺寸也不依賴于樣品中是否存在全血。
實(shí)施例2本實(shí)施例證明了當(dāng)樣品的施加方式采用如圖1C所示的側(cè)面流動毛細(xì)管形式而不是上述實(shí)施例1中所采用的流動通過技術(shù)時(shí)浸漬試劑膜技術(shù)是可行的。來自Pall公司“Presense”商標(biāo)牌的0.8微米孔徑聚醚砜膜的樣品采用實(shí)施例1中所描述的方法進(jìn)行處理。處理好的膜的條帶以圖1C所示的方式被裝配在毛細(xì)管流動檢測條上。每個(gè)檢測條上添加了600-800納升的樣品，樣品為葡萄糖水溶液或者是在40％紅細(xì)胞比容的全血中的葡萄糖樣品。水溶液樣品中葡萄糖的濃度為0，50，100，250和500mg/dL。全血樣品中的葡萄糖濃度換算成血漿值為0，50，100，200，400和600mg/dL。
在680nm處的反射率采用實(shí)施例1中所描述的儀器在30-秒端點(diǎn)檢測，檢測值采用如上所述方式線性化。結(jié)果如圖3所示?？梢钥吹綄τ谙鄳?yīng)的水溶液和全血樣品所得到的結(jié)果，產(chǎn)生的線形曲線具有基本上相同的斜率和截距，這說明采用本發(fā)明的檢測條所獲得的反射率值不依賴于全血樣品中的紅細(xì)胞比容。
實(shí)施例3檢測條采用Pall公司Presense牌的0.8微米孔徑聚醚砜多孔膜材料制備。所用的試劑組合物如表1所示。試劑組合物在多孔膜反應(yīng)面上的施加方式是通過剝離(stripping)而不是浸漬。隨后，檢測條通過Arcare7843壓力敏感粘合劑而固定上透明的聚酯窗口，檢測條帶有成薄片狀并與試劑的條帶層合，如同上述實(shí)施例1中所述。檢測條通過使反應(yīng)面朝下而定向。500納升摻有葡萄糖的全血檢測樣品隨后被施加至每個(gè)檢測條粗糙的樣品面上。
葡萄糖全血樣品使用Yellow Springs公司的檢測器測定為血漿葡萄糖值為0，50，100，200，400和600mg/dL。在每個(gè)樣品檢測條上每個(gè)樣品溶液重復(fù)檢測兩次。
每個(gè)檢測條的反射率采用實(shí)施例1中所述的具有直徑大約為0.030英寸的小閱讀面積反射率讀取探頭的儀器在680nm處進(jìn)行檢測。所檢測的反射率值R通過公式K/S＝(1-R)2/2R而轉(zhuǎn)化成K/S線性曲線。反射率的檢測在10，20，30和40秒進(jìn)行。結(jié)果如圖4所示?？梢钥吹剿鶛z測到的反射率與全血樣品中葡萄糖的劑量成正比并且在整個(gè)葡萄糖濃度范圍可以獲得迅速而穩(wěn)定的端點(diǎn)，這說明剝離可以產(chǎn)生根據(jù)本發(fā)明的有效的檢測條。
實(shí)施例4本實(shí)施例說明在US5520786中所報(bào)道的在光基PQQ-GDH還原體系中的介質(zhì)的可用性。制備如下試劑表2

將大約為1微升的等份試劑組合物放置到預(yù)先切割好的由0.8微米厚的Presence牌聚醚砜膜以及0.2和5.0微米厚的Supor牌聚醚砜膜構(gòu)成的檢測條上。在室溫下空氣干燥后，加入500nL等份的0，50，200mg/dL的葡萄糖水溶液樣品。顏色發(fā)生改變，同樣地可以觀察到顏色的均勻性和顏色改變的速度。可以觀察到對于葡萄糖樣品的可見的劑量響應(yīng)。含有0.1％Silwet L-7600表面活性劑的類似配方并且最終配方的pH為近似7.0的等份樣品也被放置在微升試管中(即，小體積，50微米路徑長度)，并且可以觀察到加入0至500mg/dL全血葡萄糖的劑量響應(yīng)?？梢杂^察到大約25-5％反射率的范圍。這些結(jié)果說明3-(3，5-二羧基苯基亞氨基)-3H-吩噻嗪對于PQQ-GDH法測定水溶液和全血樣品中的葡萄糖來說是有效的介質(zhì)。
實(shí)施例5本實(shí)施例說明在本發(fā)明上下文中的NAD依賴型體系中采用例如那些在US5126275和US5322680中所公開的四唑鹽類指示劑的可行性。除了以40mM的2-(4-二氟甲基-5-氯噻唑-2-基)-3-[2-(3-三甲基氨丙氧基)苯基]-5-(3，4-亞甲二氧基苯基)四唑二甲基硫酸鹽四唑鹽指示劑取代了WST-4四唑鹽之外，試劑按實(shí)施例1表1所描述的來制備。試劑組合物被用來涂覆0.8微米Presense牌聚醚砜膜的光滑面并隨后裝配至毛細(xì)管填充形式中。對0至600mg/dL全血葡萄糖的劑量響應(yīng)被大約30至10％反射率來體現(xiàn)。
可以意識到的是這里所公開的方法和檢測條在葡萄糖測定系統(tǒng)中比先有技術(shù)具有明顯的優(yōu)勢。這些先有葡萄糖測定系統(tǒng)一般都要求采用兩個(gè)不同的波長對樣品進(jìn)行光學(xué)讀取以便于修正樣品中紅細(xì)胞(紅細(xì)胞比容)所帶來的干擾。本檢測條提供的結(jié)果不依賴于膜的孔徑尺寸，而且基本上不依賴于樣品中的紅細(xì)胞比容。由于本系統(tǒng)基本上不依賴于紅細(xì)胞比容，就不需要用兩個(gè)不同的波長檢測反射率，也無需采用修正系數(shù)。這就意味著采用本發(fā)明的系統(tǒng)的光學(xué)檢測裝置可以比先有系統(tǒng)更加簡單并且更加廉價(jià)，因?yàn)樗恍枰惶坠鈱W(xué)系統(tǒng)而不是兩套。本發(fā)明的系統(tǒng)也不需要復(fù)雜的算法來調(diào)節(jié)紅細(xì)胞比容或?qū)游?。本發(fā)明也不需要先有系統(tǒng)中的用來調(diào)節(jié)反射表面不透明性的散射核。同樣地，由于樣品不需要進(jìn)行任何預(yù)步驟來分離紅細(xì)胞，因此可以采用更小體積的樣品，典型的為大約1微升或更小。上面對本發(fā)明進(jìn)行了描述和舉例說明。本領(lǐng)域技術(shù)人應(yīng)該認(rèn)識到本發(fā)明在不超出本發(fā)明的精神和保護(hù)范圍的情況下可以有其它的修改和變化。
權(quán)利要求
1.一種測定全血樣品中葡萄糖濃度的方法，該方法包括(a)提供具有一個(gè)樣品面和一個(gè)反應(yīng)面的檢測條，該檢測條適合于在樣品面上接受樣品并將它輸送至反應(yīng)面，所述的檢測條載有檢測試劑，所述的檢測試劑包含能改變顏色來指示樣品中葡萄糖存在的顏色指示劑系統(tǒng)，所述的檢測條還至少在反應(yīng)面上帶有一種聚合物，所述聚合物提高檢測條反應(yīng)面的不透明性，(b)將血液樣品施加至檢測條的樣品面，以及，(c)測定檢測面的顏色變化從而確定血液中葡萄糖的濃度。
2.權(quán)利要求1的方法，其中所述的聚合物選自丙烯酸膠乳聚合物、聚苯乙烯硫酸鈉聚合物和它們的組合。
3.權(quán)利要求1的方法，其中所述的多孔膜是由選自聚醚砜和改性聚醚砜的材料制成的。
4.權(quán)利要求1的方法，其中檢測試劑包括選自PQQ-GDH體系、NAD依賴型GDH體系、己糖激酶還原體系以及葡萄糖氧化酶氧化體系的化學(xué)體系。
5.權(quán)利要求1的方法，其中指示劑系統(tǒng)選自四唑化合物和四唑鹽化合物。
6.權(quán)利要求5的方法，其中指示劑系統(tǒng)包含2-噻唑基四唑鹽化合物。
7.權(quán)利要求1的方法，其中試劑包含的介質(zhì)化合物選自取代或非取代的3-苯基亞氨基-3H-吩噻嗪和3-苯基亞氨基-3H-吩噁嗪。
8.權(quán)利要求1的方法，其中所述檢測條中的微孔孔徑范圍是大約0.2至5.0微米。
9.權(quán)利要求8的方法，其中所述檢測條是各向同性的。
10.權(quán)利要求8的方法，其中所述檢測條是各向異性的。
11.一種用于檢測包含紅細(xì)胞的全血樣品中葡萄糖濃度的檢測條，包括(a)具有一個(gè)樣品面和一個(gè)反應(yīng)面的多孔膜，該膜適合于在樣品面上接受樣品并將它輸送至反應(yīng)面，(b)由膜負(fù)載著的檢測試劑，所述檢測試劑包含能改變顏色來指示樣品中葡萄糖存在的顏色指示劑系統(tǒng)，以及(c)至少在膜的反應(yīng)面上的一種聚合物，所述聚合物提高膜的反應(yīng)面的不透明性。
12.權(quán)利要求11的檢測條，其中所述聚合物選自丙烯酸膠乳聚合物、聚苯乙烯硫酸鈉聚合物、及其組合。
13.權(quán)利要求11的檢測條，其中所述多孔膜是由選自聚醚砜和改性聚醚砜的材料制成。
14.權(quán)利要求1 1的檢測條，其中檢測試劑包含選自PQQ-GDH體系，NAD依賴型GDH體系，已糖激酶還原體系以及葡萄糖氧化酶氧化體系的化學(xué)體系。
15.權(quán)利要求11的檢測條，其中指示劑系統(tǒng)選自四唑化合物和四唑鹽化合物。
16.權(quán)利要求15的檢測條，其中指示劑系統(tǒng)包含2-噻唑基四唑鹽化合物。
17.權(quán)利要求11的檢測條，其中試劑包含的介質(zhì)化合物選自取代或非取代的3-苯基亞氨基-3H-吩噻嗪和3-苯基亞氨基-3H-吩噁嗪。
18.權(quán)利要求11的檢測條，其中所述檢測條中的微孔孔徑范圍是大約0.2至5.0微米。
19.權(quán)利要求18的檢測條，其中所述檢測條是各向同性的。
20.權(quán)利要求18的檢測條，其中所述檢測條是各向異性的。
全文摘要
用于檢測全血中葡萄糖濃度的試劑檢測條，它至少在一面上具有能提高其不透明度的聚合物，從而降低了紅細(xì)胞比容對葡萄糖測定的影響。
文檔編號A61B5/00GK1527045SQ200410033020
公開日2004年9月8日 申請日期2004年2月3日 優(yōu)先權(quán)日2003年2月4日
發(fā)明者K·L·馬福爾特, K L 馬福爾特 申請人:拜爾健康護(hù)理有限責(zé)任公司