專利名稱：一種抗癌藥物組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及抗癌藥物組合物，屬于藥物技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
實體腫瘤的治療主要包括手術(shù)、放療及化療等方法。在所用的各種化療藥物中，亞硝脲類抗癌藥物的作用效果較為明顯，已廣泛應(yīng)用于多種惡性腫瘤。然而，進一步研究發(fā)現(xiàn)，許多腫瘤細(xì)胞內(nèi)的DNA修復(fù)功能在治療之后明顯增加。后者常導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞對亞硝脲類抗癌藥物的耐受性的增強，其結(jié)果是治療失敗。
最近發(fā)現(xiàn)，滅活或抑制細(xì)胞內(nèi)的DNA修復(fù)蛋白能夠增強部分腫瘤細(xì)胞對化療的敏感性(參見多蘭等“O6-芐基鳥嘌呤類似物對人腫瘤細(xì)胞對烷化劑的細(xì)胞毒敏感性的作用”《癌癥研究》51期3367-3372頁(1991年)(Dolan et al.，Cancer Res.，51，3367-3372，1991))。然而，腫瘤間質(zhì)中的血管、結(jié)締組織、基質(zhì)蛋白、纖微蛋白及膠原蛋白等不僅為腫瘤細(xì)胞的生長提供了支架及必不可少的營養(yǎng)物質(zhì)，還影響了化療藥物在腫瘤周圍及腫瘤組織內(nèi)的滲透和擴散(參見尼提等“細(xì)胞外間質(zhì)的狀況對實體腫瘤內(nèi)藥物運轉(zhuǎn)的影響”《癌癥研究》60期2497-503頁(2000年)(Netti PA，Cancer Res.2000，60(9)2497-503)。由于實體腫瘤過度膨脹性增生，其間質(zhì)壓力、組織彈性壓力、流體壓力及間質(zhì)的粘稠度均較其周圍正常組織為高，因此，常規(guī)化療，難于腫瘤局部形成有效藥物濃度(參見孔慶忠等“瘤內(nèi)放置順鉑加系統(tǒng)卡莫司汀治療大鼠腦腫瘤”《外科腫瘤雜志》69期76-82頁(1998年)(Kong Q et al.，J Surg Oncol.1998 Oct；69(2)76-82)，單純提高給藥劑量又受到全身反應(yīng)的限制。
決定治療效果的主要因素是腫瘤局部的藥物濃度以及腫瘤細(xì)胞對藥物的敏感程度。而腫瘤間質(zhì)中的血管、結(jié)締組織、基質(zhì)蛋白、纖微蛋白及膠原蛋白等不僅為腫瘤細(xì)胞的生長提供了支架及必不可少的營養(yǎng)物質(zhì)，還影響了化療藥物在腫瘤周圍及腫瘤組織內(nèi)的滲透和擴散。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明針對現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種抗癌藥物組合物。
本發(fā)明抗癌藥物組合物，包括抗癌有效成分和藥用輔料，抗癌有效成分為嘧啶類似物及其衍生物0.01-70％亞硝脲類抗癌藥物0.00-50％以上均為重量百分比，其中嘧啶類似物及其衍生物除能抑制腫瘤生長外，還能增加腫瘤細(xì)胞對亞硝脲類抗癌藥物的敏感性。
嘧啶類似物及其衍生物為，但不限于，2，4，5-三氨基-6-芐氧基嘧啶(2，4，5-triamino-6-benzyloxypyrimidine)、2，4-二氨基-6-芐氧基-5-亞硝基嘧啶(2，4-diamino-6-benzyloxy-5-nitrosopyrimidine)、2，4-二氨基-6-芐氧基-5-硝基嘧啶(2，4-diamino-6-benzyloxy-5-nitropyrimidine)、2，4-二氨基-6-芐氧基-5-溴基嘧啶(2，4-diamino-6-benzyloxy-5-bromopyrimidine)、2-氨基-4-芐氧基-5-硝基嘧啶(2-Amino-4-benzyloxy-5-nitropyrimidine)、2-氨基-4-芐氧基-6-甲基-5-硝基嘧啶(2-Amino-4-benzyloxy-6-methyl-5-nitropyrimidine)、2，4-二氨基-6-芐氧基-s-三嗪(2，4-Diamino-6-benzyloxy-s-triazine)、2-氨基-O4-芐基喋啶(2-amino-O4-benzylpteridine)、2-氨基-O4-芐基-6，7-二甲喋啶(2-amino-O4-benzyl-6，7-dimethylpteridine)、2-氨基-O4-芐基-6-羥甲基喋啶(2-amino-O4-benzyl-6-hydroxymethylpteridine)、2-氨基-O4-芐基喋啶-6-羧酸(2-amino-O4-benzylpteridine-6-carboxylic acid)，2-氨基-O4-芐基-6-甲酰喋啶(2-amino-O4-benzyl-6-formylpteridine)、O4-芐基葉酸(O4-benzylfolic acid)、5-碘-2’-脫氧鳥苷(5-Iodo-2′-deoxyuridine)、5-溴-2’-脫氧鳥苷(5-bromo-2′-deoxyuridine)、4-氨基-6-芐基氧-5-硝基嘧啶(4-amino-6-benzyloxy-5-nitropyrimidine)、2-氨基-4-芐氧基-5-硝基嘧啶(2-amino-4-benzyloxy-5-nitropyrimidine)、2-氨基-4-芐氧基-6-甲基-5-硝基嘧啶(2-amino-4-benzyloxy-6-methyl-5-nitropyrimidine)、2，4-二氨基-6-芐氧基嘧啶(2，4-diamino-6-benzyloxypyrimidine)、N2-2-氨基-4-氯-5-硝基嘧啶(2-Amino-4-chloro-5-nitropyrimidine)、2-氨基-6-氯-8-三氟甲基嘧啶(2-Amino-6-chloro-8-trifluoromethylpurine)的一種或多種。
嘧啶類似物及其衍生物優(yōu)選O4-芐基葉酸、2，4，5-三氨基-6-芐氧基嘧啶、2，4-二氨基-6-芐氧基-5-亞硝基嘧啶、2，4-二氨基-6-芐氧基-5-溴基嘧啶、2-氨基-4-芐氧基-5-硝基嘧啶、2-氨基-4-芐氧基-6-甲基-5-硝基嘧啶、2，4-二氨基-6-芐氧基-s-三嗪、2-氨基-O4-芐基喋啶的一種或多種。
可選用的亞硝脲類藥物為，但不限于，阿雌莫司汀(Alestramustine)、鏈佐星(streptozotocin，STZ)、阿莫司汀(Atrimustine)、氨莫司汀(Ambamustine)、尼莫司汀(ACNU，Nimustine)、苯達莫司汀(Bendamustine)、二硫莫司汀(Ditiomustine)、波呋莫司汀(Bofumustine)、卡莫司汀(卡氮芥、BCNU、carmustine)、依莫司汀(Elmustine)、依考莫司汀(Ecomustine)、加莫司汀(Galamustine，GCNU)、福莫司汀(Fotemustine)、雌莫司汀(Estramustine)、合莫司汀(hemustine，heCNU)、奈莫司汀(Pentamustine，Neptamustine)、甘露莫司汀(Mannomustine，MCNU)、洛莫司汀(lomustine，CCNU，環(huán)己亞硝脲，羅氮芥)、甲基洛莫司汀(methyl-CCNU)、司莫司汀(Semustine、甲環(huán)亞硝脲、Me-CCNU)、雷莫司汀(Ranimustine)、潑尼莫司汀(Prednimustine)、烏拉莫司汀(Uramustine，Uracil Mustard)、薩莫司汀(SarCNU)、牛磺莫司汀(Tauromustine)、他莫司汀(Tallimustine)及螺莫司汀(Spiromustine)等。
以上亞硝脲類藥物還包括其鹽，如，但不限于，硫酸鹽、磷酸鹽、鹽酸鹽、乳糖酸鹽、醋酸鹽、天冬酸鹽、硝酸鹽、枸櫞酸鹽、嘌呤或嘧啶鹽、琥珀酸鹽及馬來酸鹽等。
上述亞硝脲類藥物及其鹽可單選或多選。以鏈佐星、尼莫司汀、卡莫司汀、雌莫司汀、司莫司汀、洛莫司汀、甲基洛莫司汀和薩莫司汀為優(yōu)選。
亞硝脲類抗癌藥物在組合物中的含量可從0-99.99％，以1％-50％為佳，以2％-30％為最佳，而嘧啶類似物及其衍生物在組合物中所占的比例也因具體情況而定，可從0.01％-99.99％，以0.01％-70％為佳，以2％-20％為最佳。以上均為重量百分比。
本發(fā)明抗癌藥物組合物的有效成分優(yōu)選為a)5-30％的O4-芐基葉酸；b)5-30％的2，4-二氨基-6-芐氧-s-三嗪；或c)5-30％的O6-芐基鳥嘧啶。
以上均為重量百分比。
本發(fā)明抗癌藥物組合物的有效成分優(yōu)選為d)5-30％的O4-芐基葉酸與5-20％的鏈佐星、尼莫司汀、卡莫司汀、雌莫司汀、司莫司汀、洛莫司汀、甲基洛莫司汀或薩莫司汀的組合；e)5-30％的2，4-二氨基-6-芐氧-s-三嗪與5-20％的鏈佐星、尼莫司汀、卡莫司汀、雌莫司汀、司莫司汀、洛莫司汀、甲基洛莫司汀或薩莫司汀的組合；或f)5-30％的O6-芐基鳥嘧啶與5-20％的鏈佐星、尼莫司汀、卡莫司汀、雌莫司汀、司莫司汀、洛莫司汀、甲基洛莫司汀或薩莫司汀的組合。
以上均為重量百分比。
藥用輔料包括下列之一或其組合(1)生物相容性多聚物，包括生物可降解的或生物不可降解的多聚物及其混合物或共聚物，(2)水溶性低分子化合物，或/和(3)用于實現(xiàn)針劑和緩釋劑等藥物劑型的合適的添加劑及賦型劑。
上述生物可降解的多聚物包括天然的和/或合成的多聚物。合成的多聚物如，但不限于，聚酐類、聚羥基酸、聚酯(polyesters)、聚酰胺(polyamides)、聚原酸酯(polyorthoesters)、聚磷腈(polyphosphazenes)、對羧苯基丙烷(p-CPP)、葵二酸(sebacic acid)等；天然的多聚物如，但不限于，蛋白質(zhì)及多糖，包括透明質(zhì)酸、膠原蛋白、明膠、白蛋白等。
上述聚酐類可選用，但不限于，芳香聚酐、脂肪族聚酐；其中芳香聚酐將解較慢，熔點高，有機溶劑中溶解度低，然而，芳香聚酐與脂肪族聚酐的共聚物卻較為理想(美國專利4757128)。其中的代表物是聚苯丙生(對羧苯基丙烷(p-CPP)與葵二酸(SA)的共聚物)，而對羧苯基丙烷為芳香聚酐，葵二酸則是一個芳香二酸與一個脂肪二酸的共聚物?？蛇x用的其它芳香或脂肪族聚酐的共聚物在其它美國專利中已有詳細(xì)描述(US4857311；4888176；4789724)。
上述聚羥基酸可選用，但不限于，聚乳酸(PLA)、聚乙醇酸(PGA)、聚乳酸(PLA)與聚乙醇酸的混合物、乙醇酸和羥基羧酸的共聚物(PLGA)；當(dāng)PLA和PLGA混合時，其含量重量百分比分別為0.1-99.9％和99.9-0.1％。聚乳酸的分子量可為，但不限于，5000-100,000，但以10,000-50000為優(yōu)選，以10,000-20000為最優(yōu)選；聚乙醇酸的分子量可為，但不限于，5000-100,000，但以10,000-50000為優(yōu)選，以10,000-20000為最優(yōu)選；以上聚羥基酸可單選或多選。當(dāng)單選時，以聚乳酸(PLA)或羥基羧酸和乙醇酸的共聚物(PLGA)為優(yōu)選，共聚物的分子量可為，但不限于，1000-100,000，但以10,000-50000為優(yōu)選；以10,000-20000為最優(yōu)選；當(dāng)多選時，以高分子多聚物或不同高分子多聚物組成的復(fù)合多聚物或共聚物為優(yōu)選，以含不同分子量聚乳酸或葵二酸的復(fù)合多聚物或共聚物為最優(yōu)選，如，但不限于，分子量為5000到10000的聚乳酸與分子量為20000到50000的聚乳酸混合、分子量為10000到20000的聚乳酸與分子量為30000到80000的PLGA混合、分子量為5000到10000的聚乳酸與葵二酸混合、分子量為30000到80000的PLGA與葵二酸混合。
上述生物不可降解的多聚物包括，但不限于有機硅聚合物、乙烯乙酸乙烯酯共聚物(Ethelene-vinyl acetate copolymer，EVAc)、聚丙烯腈(polyacrylonitriles)，聚氨基甲酸酯(polyurethanes)及聚磷腈(polyphosphazenes)等。組合物可通過直接擴散的方式將有效成分釋放出來。
為調(diào)節(jié)藥物釋放速度或改變本發(fā)明抗癌藥物組合物的其它特性，可以改變聚合物的單體成分或分子量、添加或調(diào)節(jié)藥用輔料的組成及配比，添加水溶性低分子化合物，如，但不限于，各種糖和鹽等。其中糖可為，但不限于，木糖醇、低聚糖及甲殼素等，其中鹽可為但不限于，鉀鹽和鈉鹽等。
本發(fā)明抗癌藥物組合物所用的藥用輔料可為上述藥用輔料中的任何一種或多種物質(zhì)，但以水溶性高分子聚合物為主選，在各種高分子聚合物中，以聚乳酸、葵二酸、含聚乳酸或葵二酸的高分子多聚物的混合物或共聚物為首選，混合物和共聚物可選自，但不限于，PLGA、乙醇酸和羥基羧酸的混合物、葵二酸與芳香聚酐或脂肪族聚酐的混合物或共聚物。乙醇酸和羥基羧酸的共混比例是10/90-90/10(重量)，最好是25/75-75/25(重量)。共混的方法是任意的。乙醇酸和羥基羧酸共聚時的含量分別為重量百分比10-90％和90-10％。芳香聚酐的代表物是對羧苯基丙烷(p-CPP)，葵二酸與對羧苯基丙烷(p-CPP)共聚時的含量分別為重量百分比10-90％和90-10％，共混重量比是10/90-90/10，最好是重量比25/75-75/25。
藥用輔料在《藥用輔料大全》(第123頁，四川科學(xué)技術(shù)出版社1993年出版，羅明生和高天惠主編)中已有詳細(xì)描述。另外，中國專利(申請?zhí)?6115937.5；91109723.6；9710703.3；01803562.0)及美國發(fā)明專利(專利號5,651,986)也列舉了某些藥用輔料。包括充填劑、增溶劑、吸收促進劑、成膜劑、膠凝劑、制(或致)孔劑、賦型劑或阻止劑。以上藥用輔料有的具有多重作用，因此有的同種物質(zhì)被列為不同的類別。本發(fā)明抗實體腫瘤組合物可選用的支持物可為上述藥用輔料中的任何一種或多種物質(zhì)，并不完全根據(jù)其分類或定義來限制組合物的技術(shù)特征。
抗癌藥物組合物的有效成分可均勻地包裝于整個藥用輔料中，也可包裝于載體支持物中心或其表面；可通過直接擴散或經(jīng)多聚物降解的方式或如此兩種方式將有效成分釋放。除此之外，抗癌藥物組合物的有效成分也可均勻地包裝于脂質(zhì)體中，或以現(xiàn)有技術(shù)方法制成微球。
本發(fā)明的特點在于所用的藥用輔料除高分子聚合物外，還含有上述任意一種或多種其它藥用輔料。添加的藥用輔料統(tǒng)稱為添加劑。添加劑可根據(jù)其功能分為充填劑、致孔劑、賦型劑、分散劑、等滲劑、保存劑、阻止劑、增溶劑、吸收促進劑、成膜劑、膠凝劑等。
藥用輔料還可為流質(zhì)，如，但不限于芝麻油、混懸液、蒸餾水、生理沖液、以及半固態(tài)物質(zhì)，如(但不限于)果凍、糊劑、軟膏等，上述藥用輔料適用于含或不含添加劑的組合物。
本發(fā)明抗癌藥物組合物可制成多種劑型。如，但不限于，針劑、渾懸液、軟膏、膠囊及緩釋劑等；呈各種形狀，如，但不限于，顆粒樣、片狀、球形、塊狀、針狀、棒狀及模狀。在各種劑型中，以體內(nèi)緩慢釋放劑為主。上述劑型和形狀適用于含或不含添加劑的組合物。
由于本發(fā)明抗癌藥物組合物可使常規(guī)化療、免疫治療、高熱治療、光化學(xué)治療、電療、生物治療、激素治療、磁療、超聲治療、放療及基因治療等方法的作用效果加強。因此在局部緩慢釋放的同時可與上述非手術(shù)療法合用，從而使其抗癌效果進一步加強。
當(dāng)與上述非手術(shù)療法合用時，本發(fā)明抗癌藥物組合物可與非手術(shù)療法同時應(yīng)用，也可在非手術(shù)療法實施前幾天內(nèi)應(yīng)用，其目的在于盡可能增強腫瘤的敏感性。嘧啶類似物及其衍生物對亞硝脲類抗癌藥物有明顯的增效作用，從而為根治各種人體及動物原發(fā)和轉(zhuǎn)移實體腫瘤提供一種更有效的新的方法，具有非常高的臨床應(yīng)用價值及顯著的經(jīng)濟和社會效益。
給藥途徑本發(fā)明抗癌藥物組合物可經(jīng)各種途徑應(yīng)用，如經(jīng)脈、動脈、皮下、肌肉、皮內(nèi)、腔內(nèi)、瘤內(nèi)、瘤周等。給藥途徑取決于多種因素，為于腫瘤所在部位獲有效濃度，藥物可經(jīng)其它多種途徑給予，如選擇性地動脈灌注，腔內(nèi)灌注(intracavitary)，腹腔(intraperitoneal)或胸腔(intrapleural)及椎管內(nèi)給藥。在多種途徑中，以局部給藥，如以選擇性動脈、瘤內(nèi)、瘤周注射為主，以瘤內(nèi)、瘤周或瘤腔緩慢釋放的形式為優(yōu)選，如可選用可種緩釋泵及緩釋膠囊或體內(nèi)緩釋植入劑。
當(dāng)抗癌藥物組合物的有效成分為嘧啶類似物及其衍生物時，該抗癌藥物組合物以局部給藥為主，如以選擇性動脈、瘤內(nèi)、瘤周注射為主，以瘤內(nèi)、瘤周或瘤腔緩慢釋放的形式為優(yōu)選。
給藥劑量抗癌藥物的用量取決于很多因素，如，但不限于，腫瘤體積、病人體重、給藥方式、病情進展情況及治療反應(yīng)。但其原則是能夠降低腫瘤細(xì)胞對DNA的修復(fù)能力，增加化療等療法的作用效果。嘧啶類似物及其衍生物的有效劑量為0.01-80毫克/公斤體重，以1-50毫克/公斤體重為理想，以2-10毫克/公斤體重為最理想。嘧啶類似物及其衍生物在組合物中所占的重量比因具體情況而定，可從0.01％-99.99％，以1％-70％為佳，以2％-20％為最佳。
當(dāng)局部應(yīng)用時，其血中濃度維持在較低水平，而瘤內(nèi)濃度維持在較高水平。
當(dāng)嘧啶類似物及其衍生物與亞硝脲類抗癌藥物聯(lián)合應(yīng)用時，二者的重量比可為1∶9到9∶1，而亞硝脲類抗癌藥物的有效劑量為0.01-200毫克/公斤體重，以1-30毫克/公斤體重為理想，以2-20毫克/公斤體重為最理想。
本發(fā)明抗癌藥物組合物可以用于制備治療人的各種實體腫瘤，包括起源于大腦、中樞神經(jīng)系統(tǒng)、腎臟、肝、膽囊、頭頸部、口腔、甲狀腺、皮膚、黏膜、腺體、血管、骨組織、淋巴結(jié)、肺臟、食管、胃、乳腺、胰腺、眼睛、鼻煙部、子宮、卵巢、子宮內(nèi)膜、子宮頸、前列腺、膀胱、結(jié)腸、直腸的原發(fā)或轉(zhuǎn)移的癌或肉瘤或癌肉瘤的藥物。
本發(fā)明抗癌藥物組合物也可以用于治療寵物及動物的各種實體腫瘤，當(dāng)用于治療寵物及動物的各種實體腫瘤時，本發(fā)明抗癌藥物組合物的有效成份最好選用種屬特異性的物質(zhì)。
本發(fā)明抗癌藥物組合物中還可加入其它藥用成分，如，但不限于，抗菌素、止疼藥、抗凝藥、止血藥等。以上藥用成分可單選或多選，可加入到含或不含添加劑的組合物，其含量因具體需要而定。
將上述有效成分包裝于藥用輔料中，然后局部應(yīng)用。該組合物可經(jīng)各種途徑給藥，以局部給藥，如選擇性動脈注射和直接瘤體內(nèi)注射為佳，其中又以局部緩慢釋放為最佳。當(dāng)局部應(yīng)用時，本發(fā)明抗癌藥物組合物可直接置于原發(fā)或轉(zhuǎn)移的實體腫瘤周圍或瘤體內(nèi)，也可直接置于原發(fā)或轉(zhuǎn)移的實體腫瘤全部或部分切除后所形成的腔內(nèi)。
本發(fā)明抗癌藥物組合物主要成份以生物可容性物質(zhì)為支持物，故不引起異物反應(yīng)。支持物體內(nèi)放置后可降解吸收，故不再手術(shù)取出。因在腫瘤局部釋放所含藥物，從而選擇性地提高并延長局部藥物濃度，同時可降低由常規(guī)途徑給藥所造成的全身毒性反應(yīng)。
抗癌藥物組合物可制成各種形狀，其中有效成份的含量因不同需要而定?？蓮闹亓?.1％-99.9％，以1％-80％為佳，以5％-40％為最佳。該抗癌藥物組合物可制成各種劑型，如，但不限于，針劑、渾懸液、軟膏、膠囊、及植入緩釋劑等；呈各種形狀，如，但不限于，顆粒樣、片狀、球形、塊狀、針狀、棒狀及模樣；可經(jīng)各種途徑給藥，以動脈途徑為佳，腫瘤體內(nèi)直接放置為最佳。本發(fā)明的最佳劑型為生物可容性、可降解吸收的植入緩釋劑，可因不同臨床需要而制成各種形狀。其主要成份的包裝方法和步驟在美國專利中(US5651986)已有詳細(xì)描述，包括若干種制備緩釋制劑的方法如，但不限于，(i)把載體支持物粉末與藥物混合然后壓制成植入劑，即所謂的混合法；(ii)把載體支持物熔化，與待包裝的藥物相混合，然后固體冷卻，即所謂的熔融法；(iii)把載體支持物溶解于溶劑中，把待包裝的藥物溶解或分散于聚合物溶液中，然后蒸發(fā)溶劑，乾燥，即所謂的溶解法。其中溶解法可用以微球的制造，其方法是任意的，抗癌藥物組合物也可包裝脂質(zhì)體中。
本發(fā)明抗癌藥物組合物制備技術(shù)的特點在于將嘧啶類似物及其衍生物和亞硝脲類抗癌藥物單獨或聯(lián)合包裝于藥用輔料中，按照比例將有效成份和藥用輔料溶解，待充份混勻之后乾燥。待乾燥后立即成形并消毒分裝。
以上嘧啶類似物及其衍生物能夠不同程度的抑制或降低腫瘤細(xì)胞DNA修復(fù)酶的活性，本發(fā)明的體內(nèi)外實驗發(fā)現(xiàn)其對亞硝脲類抗癌藥物的明顯增效作用。當(dāng)二者聯(lián)合局部應(yīng)用，尤其是局部放置，不僅能夠克服全身給藥帶來的毒性反應(yīng)，而且解決了腫瘤局部藥物濃度過低以及細(xì)胞對藥物的敏感性問題。
試驗一、嘧啶類似物及其衍生物和亞硝脲類抗癌藥物的體外抑瘤作用。
所用的腫瘤細(xì)胞包括9L、C6、胃腺上皮癌(SA)、骨腫瘤(BC)、乳腺癌(BA)、肺癌(LH)、甲狀腺乳頭狀腺癌(PAT)、肝癌等。將以下嘧啶類似物及其衍生物及亞硝脲類抗癌藥物按10ug/ml濃度加到體外培養(yǎng)24小時的各種腫瘤細(xì)胞中，繼續(xù)培養(yǎng)48小時后計數(shù)細(xì)胞總數(shù)。其腫瘤生長抑制效果見表1所示。
表1瘤細(xì)胞 TBP BCNU TBP ACNU TBP CCNUTBP GCNUTBP+BCNU +ACNU +CCNU +GCNU9L 60％ 64％ 92％ 66％ 98％64％90％66％90％C6 62％ 68％ 94％ 60％ 98％64％96％62％98％SA 60％ 60％ 86％ 56％ 92％60％86％56％92％BC 54％ 62％ 96％ 54％ 84％54％94％56％84％BA 54％ 62％ 92％ 62％ 82％52％98％62％82％LH 64％ 48％ 92％ 62％ 92％68％90％64％92％PAT 56％ 58％ 94％ 66％ 98％66％94％66％96％注解TBP2，4，5-三氨基-6-芐氧基嘧啶；BCNU、ACNU、CCNU、GCNU分別為卡莫司汀、尼莫司汀、洛莫司汀和加莫司汀，均為亞硝脲類抗癌藥物。
試驗二、嘧啶類似物及其衍生物和亞硝脲類抗癌藥物的體外抑瘤作用。
用試驗一中所用的腫瘤細(xì)胞，將以下嘧啶類似物及其衍生物及亞硝脲類抗癌藥物按10ug/ml濃度加到體外培養(yǎng)24小時的各種腫瘤細(xì)胞中，繼續(xù)培養(yǎng)48小時后計數(shù)細(xì)胞總數(shù)。其腫瘤生長抑制效果見表2所示。
表2瘤細(xì)胞 DBNPAl DBNPAt DBNPAm DBNPBe DBNP+Al +At +Am +Be9L 60％64％92％66％98％64％90％60％90％C6 62％66％96％60％98％64％66％50％94％SA 56％60％88％58％90％68％66％58％92％BC 54％56％94％54％84％64％60％64％86％BA 57％52％96％62％80％68％58％66％82％LH 62％66％90％68％90％50％62％60％90％PAT 54％66％96％66％98％56％64％66％98％注解DBNP2，4-二氨基-6-芐氧基-5-亞硝基嘧啶；Al阿雌莫司汀、At阿莫司汀、Am氨莫司汀、Be苯達莫司汀，其中阿雌莫司汀、阿莫司汀、氨莫司汀、苯達莫司汀均為亞硝脲類抗癌藥物。
試驗三、嘧啶類似物及其衍生物和亞硝脲類抗癌藥物的體外抑瘤作用。
用試驗一中所用的腫瘤細(xì)胞，將以下抗癌藥物按10ug/ml濃度加到體外培養(yǎng)24小時的各種腫瘤細(xì)胞中，繼續(xù)培養(yǎng)48小時后計數(shù)細(xì)胞總數(shù)。其腫瘤生長抑制效果見表3所示。
表3瘤細(xì)胞 DBBP Di DBBPBo DBBPEl DBBPEc DBBP+Di +Bo +El +Ec9L 60％ 64％92％66％98％64％90％56％90％C6 62％ 66％96％60％98％64％66％60％94％SA 56％ 60％88％58％90％68％66％58％92％
BC 54％ 56％ 94％ 54％84％64％60％64％86％BA 57％ 52％ 96％ 62％80％68％58％66％82％LH 62％ 66％ 90％ 68％90％50％62％60％90％PAT 54％ 66％ 96％ 66％98％56％64％66％98％注解DBBP2，4-二氨基-6-芐氧基-5-溴基嘧啶；Bo波呋莫司??；El依莫司汀；Ec依考莫司汀。其中二硫莫司汀、波呋莫司汀、依莫司汀及依考莫司汀均為亞硝脲類抗癌藥物。
試驗四、嘧啶類似物及其衍生物和亞硝脲類抗癌藥物的體外抑瘤作用。
用試驗一中所用的腫瘤細(xì)胞，將以下抗癌藥物按10ug/ml濃度加到體外培養(yǎng)24小時的各種腫瘤細(xì)胞中，繼續(xù)培養(yǎng)48小時后計數(shù)細(xì)胞總數(shù)。其腫瘤生長抑制效果見表4所示。
表4瘤細(xì)胞 ABNPFo ABNPEs ABNPHe ABNPNe ABNP+Fo +Es +He +Ne9L 57％58％96％68％88％68％88％56％82％C6 52％76％96％62％98％64％96％60％90％SA 46％60％88％58％90％68％86％48％95％BC 58％66％94％54％84％60％86％54％88％BA 57％58％96％68％88％68％88％76％82％LH 60％68％98％68％90％50％92％70％92％PAT 55％66％96％68％98％58％94％66％96％注解ABNP2-氨基-4-芐氧基-5-硝基嘧啶；Fo福莫司汀；Es雌莫司??；He合莫司??；Ne奈莫司汀。其中福莫司汀、雌莫司汀、合莫司汀和奈莫司汀均為亞硝脲類抗癌藥物。
試驗五、嘧啶類似物及其衍生物和亞硝脲類抗癌藥物的體外抑瘤作用。
用試驗一中所用的腫瘤細(xì)胞，將以下抗癌藥物按10ug/ml濃度加到體外培養(yǎng)24小時的各種腫瘤細(xì)胞中，繼續(xù)培養(yǎng)48小時后計數(shù)細(xì)胞總數(shù)。其腫瘤生長抑制效果見表5所示。
表5瘤細(xì)胞 ABMNMa ABMNMet ABMNSe ABMNRa ABMN+Ma +Met+Se +Ra9L 68％64％92％67％96％65％94％64％94％C6 62％66％96％60％98％64％96％60％94％SA 56％60％88％58％90％68％86％58％92％BC 54％56％96％54％84％64％92％64％86％BA 57％52％96％62％80％68％98％86％82％LH 62％66％90％66％90％50％92％60％90％PAT 56％66％96％66％98％56％94％59％96％
注解ABMN2-氨基-4-芐氧基-6-甲基-5-硝基嘧啶；Ma甘露莫司汀；Met甲基洛莫司??；Se司莫司??；Ra雷莫司汀。其中甘露莫司汀、甲基洛莫司汀、司莫司汀及雷莫司汀均為亞硝脲類抗癌藥物。
試驗六、嘧啶類似物及其衍生物和亞硝脲類抗癌藥物的體外抑瘤作用。
用試驗一中所用的腫瘤細(xì)胞，將以下抗癌藥物按10ug/ml濃度加到體外培養(yǎng)24小時的各種腫瘤細(xì)胞中，繼續(xù)培養(yǎng)48小時后計數(shù)細(xì)胞總數(shù)。其腫瘤生長抑制效果見表6所示。
表6瘤細(xì)胞 DBT Pr DBT Ur DBT Ta DBT Sp DBT+Pr +Ur +Ta +Sp9L 57％52％96％62％80％68％88％66％82％C6 62％66％96％60％98％64％86％60％94％SA 56％60％88％58％90％68％86％58％92％BC 54％56％94％54％84％64％90％64％86％BA 57％52％96％62％80％68％88％66％82％LH 62％66％90％68％90％50％92％60％90％PAT 54％66％96％66％98％56％94％66％98％注解DBT2，4-二氨基-6-芐氧基-s-三嗪；Pr潑尼莫司汀；Ur烏拉莫司?。籘a他莫司?。籗p螺莫司汀。其中潑尼莫司汀、烏拉莫司汀、他莫司汀及螺莫司汀均為亞硝脲類抗癌藥物。
以上試驗結(jié)果表明，所用嘧啶類似物及其衍生物和各種亞硝脲類抗癌藥物在該濃度時對體外培養(yǎng)腫瘤細(xì)胞生長均有明顯的抑制作用，但二者合用時具有明顯的增效作用。
試驗七、嘧啶類似物及其衍生物和亞硝脲類抗癌藥物的體內(nèi)抑瘤作用。
以大白鼠為試驗對象，將2×105個腫瘤細(xì)胞皮下注射于其季肋部，待腫瘤生長14天后將其分為以下10組(見表7)。第一組為對照，第2到10組為治療組，其中，第2組為2-氨基-O4-芐基-6，7-二甲喋啶(ABDP)，第3到6組分別為BCNU(卡莫司汀)、ACNU、CCNU及雌莫司汀。第7到10組分別為ABDP與BCNU、ACNU、CCNU及雌莫司的聯(lián)合。所有藥物均經(jīng)瘤內(nèi)注射，劑量為5mg/kg。治療后第30天測量腫瘤體積大小，比較治療效果(見表7)。
表7試驗組(n) 所受治療 腫瘤體積(cm3) P值1(6) 對照 89.5±22cm32(6) ABDP 66±5cm3＜0.053(6) ACNU 54±2cm3＜0.014(6) BCNU 44±3.6cm3＜0.015(6) CCNU 50±3.4cm3＜0.016(6) 雌莫司汀 46±3.8cm3＜0.01
7(6) ABDP+ACNU30±3.6cm3＜0.0018(6) ABDP+BCNU30±3.6cm3＜0.0019(6) ABDP+CCNU22±3.6cm3＜0.00110(6) ABDP+雌莫司汀28±3.6cm3＜0.001注解2-氨基-O4-芐基-6，7-二甲喋啶(ABDP)為亞硝脲類抗癌藥物增效劑，而BCNU、ACNU、CCNU及雌莫司汀均為亞硝脲類抗癌藥物。
試驗八、嘧啶類似物及其衍生物和亞硝脲類抗癌藥物的體內(nèi)抑瘤作用。
以大白鼠為試驗對象，將2×105個腫瘤細(xì)胞皮下注射于其季肋部，待腫瘤生長14天后將其分為以下10組(見表8)。第1組為對照，第2到10組為治療組，其中，第2組為嘧啶類似物；第3到6組分別為亞硝脲類抗癌藥物。第7到10組分別為嘧啶類似物及不同亞硝脲類抗癌藥物的聯(lián)合。所有藥物均經(jīng)瘤內(nèi)放置，劑量為5mg/kg。治療后第30天測量腫瘤體積大小，比較治療效果(見表8)。
表8試驗組(n) 所受治療 腫瘤體積(cm3)P值1(6)對照 80.5±33cm32(6)ABHP 50±5.2cm3＜0.053(6)福莫司汀 42±2.3cm3＜0.014(6)司莫司汀 42±3.4cm3＜0.015(6)?；悄就?4±3.4cm3＜0.016(6)螺莫司汀 44±3.8cm3＜0.017(6)ABHP+福莫司汀 22±3.6cm3＜0.0018(6)ABHP+司莫司汀 20±3.6cm3＜0.0019(6)ABHP+牛磺莫司汀 22±3.8cm3＜0.00110(6) ABHP+螺莫司汀 28±3.8cm3＜0.001備注2-氨基-O4-芐基-6-羥甲基喋啶(ABHP)為嘧啶類似物及其衍生物，屬亞硝脲類抗癌藥物增效劑，而福莫司汀、司莫司汀、?；悄就〖奥菽就【鶠閬喯蹼孱惪拱┧幬铩?br>
結(jié)果表明，與對照組相比，嘧啶類似物(第2組)及亞硝脲類抗癌藥物(第3到6組)單獨應(yīng)用均有明顯抑瘤作用(P＜0.05)。而聯(lián)合應(yīng)用(第7到10組)具有明顯的增效作用(P＜0.001)。類似增效作用還見于其它嘧啶類似物及其衍生物和與其它亞硝脲類抗癌藥物的聯(lián)合。
試驗九、局部應(yīng)用嘧啶類似物及其衍生物對亞硝脲類抗癌藥物的增效作用。
以大白鼠為試驗對象，將2×105個腫瘤細(xì)胞皮下注射于其季肋部，待腫瘤生長14天后將其分為以下10組(見表7)。第一組為對照，第2到10組為治療組，其中，第2組為2-氨基-O4-芐基-6-甲酰喋啶(ABFP)，第3到6組分別為BCNU(卡莫司汀)、ACNU、CCNU及雌莫司汀。第7到10組分別為ABFP與BCNU、ACNU、CCNU及雌莫司的聯(lián)合。BCNU(卡莫司汀)、ACNU、CCNU及雌莫司汀。嘧啶類似物及其衍生物經(jīng)瘤內(nèi)放置，而亞硝脲類抗癌藥物于一天后經(jīng)腹腔注射，所有藥物劑量均為5mg/kg。治療后第30天測量腫瘤體積大小，比較治療效果(見表9)。
表9試驗組(n)所受治療 腫瘤體積(cm3)P值1(6) 對照 90±13cm32(6) ABFP 64±2.3cm3＜0.053(6) ACNU 42±2.3cm3＜0.014(6) BCNU 33±3.4cm3＜0.015(6) CCNU 34±4cm3＜0.016(6) 雌莫司汀 32±3cm3＜0.017(6) ABFP+ACNU 24±3.6cm3＜0.0018(6) ABFP+BCNU 28±3.4cm3＜0.0019(6) ABFP+CCNU 20±3.6cm3＜0.00110(6)ABFP+雌莫司汀 16±3.6cm3＜0.001備注ABFP2-氨基-O4-芐基-6-甲酰喋啶，為嘧啶類似物及其衍生物，屬亞硝脲類抗癌藥物增效劑，而BCNU、ACNU、CCNU及雌莫司汀均為亞硝脲類抗癌藥物。
試驗七到九的結(jié)果表明，與對照組相比，嘧啶類似物及其衍生物(第2組)及亞硝脲類抗癌藥物(第3到6組)單獨應(yīng)用均有一定的抑瘤作用(P＜0.05)。然而聯(lián)合應(yīng)用(第7到10組)具有明顯的增效作用(P＜0.001)。類似增效作用還見于其它嘧啶類似物及其衍生物與其它亞硝脲類抗癌藥物的聯(lián)合。
試驗十、嘧啶類似物及其衍生物對O6-烷基鳥嘌呤-DNA-甲基轉(zhuǎn)移酶的抑制作用如上所述，腫瘤細(xì)胞內(nèi)DNA修復(fù)酶如O6-甲基鳥嘌呤-DNA-甲基轉(zhuǎn)移酶(也可稱烷基轉(zhuǎn)移酶)的增高是其對亞硝脲類抗癌藥物產(chǎn)生耐受性的主要原因，因此，檢測化合物對該酶活力的影響可以用來篩選亞硝脲類抗癌藥物增效劑。本實驗以肺癌細(xì)胞為試驗對象，用甲基轉(zhuǎn)移酶診斷藥盒對實施例一到九中的嘧啶類似物及其衍生物進行測定。體外培養(yǎng)24小時的各種腫瘤細(xì)胞中加入相應(yīng)含藥多聚物，使藥物濃度為5mM/ml，繼續(xù)培養(yǎng)48小時后檢測對甲基轉(zhuǎn)移酶活力的抑制作用。抑制效果(％)見表10所示。
表10甲基轉(zhuǎn)移酶抑制劑 甲基轉(zhuǎn)移酶抑制率(％)2，4，5-三氨基-6-芐氧基嘧啶 802，4-二氨基-6-芐氧基-5-亞硝基嘧啶802，4-二氨基-6-芐氧基-5-硝基嘧啶 842，4-二氨基-6-芐氧基-5-溴基嘧啶 802-氨基-4-芐氧基-5-硝基嘧啶 802-氨基-4-芐氧基-6-甲基-5-硝基嘧啶882，4-二氨基-6-芐氧基-s-三嗪 882-氨基-O4-芐基喋啶 882-氨基-O4-芐基-6，7-二甲喋啶 84
2-氨基-O4-芐基-6-羥甲基喋啶902-氨基-O4-芐基喋啶-6-羧酸 862-氨基-O4-芐基-6-甲酰喋啶 82O4-芐基葉酸925-碘-2’-脫氧鳥(嘧啶核)苷 485-溴-2’-脫氧鳥苷 484-氨基-6-芐基氧-5-硝基嘧啶 682-氨基-4-芐氧基-5-硝基嘧啶 682-氨基-4-芐氧基-6-甲基-5-硝基嘧啶 702，4-二氨基-6-芐氧基嘧啶 80N2-2-氨基-4-氯-5-硝基嘧啶 602-氨基-6-氯-8-三氟甲基嘧啶 62由上表可以看出，所試藥物對甲基轉(zhuǎn)移酶均有明顯抑制作用，其中2，4，5-三氨基-6-芐氧基嘧啶、2，4-二氨基-6-芐氧基-5-亞硝基嘧啶、2，4-二氨基-6-芐氧基-5-硝基嘧啶、2，4-二氨基-6-芐氧基-5-溴基嘧啶、2-氨基-4-芐氧基-5-硝基嘧啶、2-氨基-4-芐氧基-6-甲基-5-硝基嘧啶、2，4-二氨基-6-芐氧基-s-三嗪、2-氨基-O4-芐基喋啶、2-氨基-O4-芐基-6，7-二甲喋啶、2-氨基-O4-芐基-6-羥甲基喋啶、2-氨基-O4-芐基喋啶-6-羧酸、2-氨基-O4-芐基-6-甲酰喋啶、O4-芐基葉酸等的作用尤為明顯，均在80％以上。以多種其它腫瘤細(xì)胞(包括CNS-1、C6、9L、胃腺上皮癌(SA)、骨腫瘤(BC)、乳腺癌(BA)、甲狀腺乳頭狀腺癌(PAT)、肝癌、胰腺癌、腎癌及食管癌等)為試驗對象得出類似結(jié)果。其它嘧啶類似物及其衍生物，尤其是O4-芐基鳥嘧啶類似物、5-取代的2，4-二氨基-6-芐氧嘧啶(5-substituted 2，4-diamino-6-benzyloxypyrimidines)及O6-芐基鳥嘧啶類似物、4(6)-取代的2-氨基-5-硝基芐氧嘧啶(2-amino-5-nitro-6(4)-benzyloxypyrimidine)衍生物，其代表物如2，4-二氨基-6-芐氧-s-三嗪(2，4-diamino-6-benzyloxy-s-triazine)等均有較為明顯的作用。
總之，上述所列的各種嘧啶類似物及其衍生物抑制甲基轉(zhuǎn)移酶的活性。實驗結(jié)果也表明本發(fā)明中的嘧啶類似物及其衍生物對所列亞硝脲類抗癌藥物及其類似物的增效作用。因此，本發(fā)明所述的抗癌復(fù)合物的有效成分為任意一種(或多種)嘧啶類似物及其衍生物和/或任意一種(或多種)亞硝脲類抗癌藥物及其類似物的聯(lián)合或單獨包裝。含有以上有效成分的抗癌藥物組合物可制成任意劑型或形狀，但以緩慢釋放劑型為優(yōu)選。
本發(fā)明抗癌藥物組合物的制備方法如下1.將稱重的藥用輔料放入容器中，加一定量的有機溶劑溶解均勻，有機溶劑的量不嚴(yán)格限定，以充分溶解為宜。
2.加入稱重之抗癌有效成份重新?lián)u勻?？拱┯行С煞菖c藥用輔料的用量比例因具體要求而定。
3.去除有機溶劑。真空干燥或低溫干燥法均可。
4.將干燥后的固體組合物根據(jù)需要制成各種形狀。
5.分裝后射線滅菌(射線劑量因體積而異)備用。也可用其它方法滅菌。
本發(fā)明加工成抗癌藥物組合物通過以下實施例進一步加以說明，但不限于此。
具體實施方式
實施例1.
將90mg分子量為10000的聚乳酸(PLA)放入容器中，加100毫升二氯甲烷，溶解混勻后，加入10mgO4-芐基葉酸，重新?lián)u勻后真空干燥去除有機溶劑。將干燥后的固體組合物立即成形，分裝后射線滅菌，得含重量百分比10％O4-芐基葉酸、的抗癌復(fù)合物。該抗癌藥物組合物在體外生理鹽水中的釋藥時間為15-20天，在小鼠皮下的釋藥時間為30-40天左右。
實施例2.
加工成抗癌藥物組合物的方法與實施例1相同，所不同的是其中的抗癌有效成分為(a)1-50％2-氨基-O4-芐基-6-甲酰喋啶、2，4，5-三氨基-6-芐氧基嘧啶、2，4-二氨基-6-芐氧基-5-亞硝基嘧啶、2，4-二氨基-6-芐氧基-5-硝基嘧啶、2，4-二氨基-6-芐氧基-5-溴基嘧啶；或者(b)1-50％2-氨基-4-芐氧基-5-硝基嘧啶、2-氨基-4-芐氧基-6-甲基-5-硝基嘧啶、2，4-二氨基-6-芐氧基-s-三嗪、2-氨基-O4-芐基喋啶、2-氨基-O4-芐基-6，7-二甲喋啶；或者(c)1-50％2-氨基-O4-芐基-6-羥甲基喋啶、5-碘-2’-脫氧鳥(嘧啶核)苷、5-溴-2’-脫氧鳥苷、4-氨基-6-芐基氧-5-硝基嘧啶、2-氨基-4-芐氧基-5-硝基嘧啶、2-氨基-4-芐氧基-6-甲基-5-硝基嘧啶；或者(d)1-50％2，4-二氨基-6-芐氧基嘧啶、N2-2-氨基-4-氯-5-硝基嘧啶、2-氨基-O4-芐基喋啶-6-羧酸和2-氨基-6-氯-8-三氟甲基嘧啶二甲胺四環(huán)素、O-羥基胺、O-甲基羥基胺或O-δ-氨氧丁基羥基胺。
以上均為重量百分比。
實施例3.
將90mg乙烯乙酸乙烯酯共聚物(EVAc)放入容器中，加100毫升二氯甲烷，溶解混勻后，加入10mgO4-芐基葉酸，重新?lián)u勻后真空干燥去除有機溶劑。將干燥后的固體組合物立即成形，分裝后射線滅菌，得含重量百分比10％O4-芐基葉酸的抗癌藥物組合物。該抗癌藥物組合物在體外生理鹽水中的釋藥時間為18-25天，在小鼠皮下的釋藥時間為28-45天左右。
實施例4.
加工成抗癌藥物組合物的方法與實施例3相同，所不同的是其中的抗癌有效成分為(a)1-50％的2-氨基-O4-芐基-6-甲酰喋啶、2，4，5-三氨基-6-芐氧基嘧啶、2，4-二氨基-6-芐氧基-5-亞硝基嘧啶、2，4-二氨基-6-芐氧基-5-硝基嘧啶、2，4-二氨基-6-芐氧基-5-溴基嘧啶；或者(b)1-50％的2-氨基-4-芐氧基-5-硝基嘧啶、2-氨基-4-芐氧基-6-甲基-5-硝基嘧啶、2，4-二氨基-6-芐氧基-s-三嗪、2-氨基-O4-芐基喋啶、2-氨基-O4-芐基-6，7-二甲喋啶；或者(c)1-50％的2-氨基-O4-芐基-6-羥甲基喋啶、5-碘-2’-脫氧鳥(嘧啶核)苷、5-溴-2’-脫氧鳥苷、4-氨基-6-芐基氧-5-硝基嘧啶、2-氨基-4-芐氧基-5-硝基嘧啶、2-氨基-4-芐氧基-6-甲基-5-硝基嘧啶；或者(d)1-50％的2，4-二氨基-6-芐氧基嘧啶、N2-2-氨基-4-氯-5-硝基嘧啶、2-氨基-O4-芐基喋啶-6-羧酸和2-氨基-6-氯-8-三氟甲基嘧啶二甲胺四環(huán)素、O-羥基胺、O-甲基羥基胺或O-δ-氨氧丁基羥基胺。
以上均為重量百分比。
實施例5.
將90mg聚苯丙生(對羧苯基丙烷(p-CPP)∶葵二酸(SA)為30∶70)放入容器中，加100毫升二氯甲烷，溶解混勻后，加入10mgO4-芐基葉酸，重新?lián)u勻后真空干燥去除有機溶劑。將干燥后的固體組合物立即成形，分裝后射線滅菌，得含重量百分比10％O4-芐基葉酸的抗癌藥物組合物。該抗癌藥物組合物在體外生理鹽水中的釋藥時間為15-25天，在小鼠皮下的釋藥時間為28-42天左右。
實施例6.
加工成抗癌藥物組合物的方法與實施例5相同，所不同的是其中的抗癌有效成分為(a)1-50％的2-氨基-O4-芐基-6-甲酰喋啶、2，4，5-三氨基-6-芐氧基嘧啶、2，4-二氨基-6-芐氧基-5-亞硝基嘧啶、2，4-二氨基-6-芐氧基-5-硝基嘧啶、2，4-二氨基-6-芐氧基-5-溴基嘧啶；或者(b)1-50％的2-氨基-4-芐氧基-5-硝基嘧啶、2-氨基-4-芐氧基-6-甲基-5-硝基嘧啶、2，4-二氨基-6-芐氧基-s-三嗪、2-氨基-O4-芐基喋啶、2-氨基-O4-芐基-6，7-二甲喋啶；或者(c)1-50％的2-氨基-O4-芐基-6-羥甲基喋啶、5-碘-2’-脫氧鳥(嘧啶核)苷、5-溴-2’-脫氧鳥苷、4-氨基-6-芐基氧-5-硝基嘧啶、2-氨基-4-芐氧基-5-硝基嘧啶、2-氨基-4-芐氧基-6-甲基-5-硝基嘧啶；或者(d)1-50％的2，4-二氨基-6-芐氧基嘧啶、N2-2-氨基-4-氯-5-硝基嘧啶、2-氨基-O4-芐基喋啶-6-羧酸和2-氨基-6-氯-8-三氟甲基嘧啶二甲胺四環(huán)素、O-羥基胺、O-甲基羥基胺或O-δ-氨氧丁基羥基胺。
以上均為重量百分比。
實施例7.
加工成抗癌藥物組合物的方法與實施例1、3或5相同，所不同的是其中的藥用輔料為(a)乙醇酸和羥基羧酸的共聚物(PLGA)，起分子量為5000-15000、15000-25000、25000-35000、35000-45000或45000-55000；(b)聚苯丙生，其中葵二酸(SA)∶對羧苯基丙烷(p-CPP)重量比為9∶1、8∶2、7∶3、6∶4、5∶5、4∶6、3∶7、2∶8或1∶9；或(c)乙烯乙酸乙烯酯共聚物(EVAc)，其重量百分比為60-99％。
實施例8.
將80mg分子量為10000的PLGA放入容器中，加100毫升二氯甲烷，溶解混勻后，加入10mgO4-芐基葉酸和10mg卡莫司汀，重新?lián)u勻后真空干燥去除有機溶劑。將干燥后的固體組合物立即成形，分裝后射線滅菌，得到含重量百分比10％O4-芐基葉酸和10％卡莫司汀抗癌藥物組合物。該抗癌藥物組合物在體外生理鹽水中的釋藥時間為14-21天，在小鼠皮下的釋藥時間為28-40天左右。
實施例9.
加工成抗癌藥物組合物的方法與實施例8相同，但其中的抗癌有效成分為(a)1-30％的鏈佐星或尼莫司汀與1-40％的2-氨基-O4-芐基-6-甲酰喋啶、2，4，5-三氨基-6-芐氧基嘧啶、2，4-二氨基-6-芐氧基-5-亞硝基嘧啶、2，4-二氨基-6-芐氧基-5-硝基嘧啶或2，4-二氨基-6-芐氧基-5-溴基嘧啶的組合；或者(b)1-30％的鏈佐星或尼莫司汀與1-40％的2-氨基-4-芐氧基-5-硝基嘧啶、2-氨基-4-芐氧基-6-甲基-5-硝基嘧啶、2，4-二氨基-6-芐氧基-s-三嗪、2-氨基-O4-芐基喋啶或2-氨基-O4-芐基-6，7-二甲喋啶的組合；或者(c)1-30％的鏈佐星或尼莫司汀與1-40％的2-氨基-O4-芐基-6-羥甲基喋啶、5-碘-2’-脫氧鳥(嘧啶核)苷、5-溴-2’-脫氧鳥苷、4-氨基-6-芐基氧-5-硝基嘧啶、2-氨基-4-芐氧基-5-硝基嘧啶或2-氨基-4-芐氧基-6-甲基-5-硝基嘧啶的組合；或者(d)1-30％的鏈佐星或尼莫司汀與1-40％的2，4-二氨基-6-芐氧基嘧啶、N2-2-氨基-4-氯-5-硝基嘧啶、2-氨基-O4-芐基喋啶-6-羧酸和2-氨基-6-氯-8-三氟甲基嘧啶二甲胺四環(huán)素、O-羥基胺、O-甲基羥基胺或O-δ-氨氧丁基羥基胺的組合。
以上均為重量百分比。
實施例10.
加工成抗癌藥物組合物的方法與實施例8相同，但其中的抗癌有效成分為(a)1-30％的卡莫司汀或雌莫司汀與1-40％的2-氨基-O4-芐基-6-甲酰喋啶、2，4，5-三氨基-6-芐氧基嘧啶、2，4-二氨基-6-芐氧基-5-亞硝基嘧啶、2，4-二氨基-6-芐氧基-5-硝基嘧啶或2，4-二氨基-6-芐氧基-5-溴基嘧啶的組合；或者(b)1-30％的卡莫司汀或雌莫司汀與1-40％的2-氨基-4-芐氧基-5-硝基嘧啶、2-氨基-4-芐氧基-6-甲基-5-硝基嘧啶、2，4-二氨基-6-芐氧基-s-三嗪、2-氨基-O4-芐基喋啶或2-氨基-O4-芐基-6，7-二甲喋啶的組合；或者(c)1-30％的卡莫司汀或雌莫司汀與1-40％的2-氨基-O4-芐基-6-羥甲基喋啶、5-碘-2’-脫氧鳥(嘧啶核)苷、5-溴-2’-脫氧鳥苷、4-氨基-6-芐基氧-5-硝基嘧啶、2-氨基-4-芐氧基-5-硝基嘧啶或2-氨基-4-芐氧基-6-甲基-5-硝基嘧啶的組合；或者(d)1-30％的卡莫司汀或雌莫司汀與1-40％的2，4-二氨基-6-芐氧基嘧啶、N2-2-氨基-4-氯-5-硝基嘧啶、2-氨基-O4-芐基喋啶-6-羧酸和2-氨基-6-氯-8-三氟甲基嘧啶二甲胺四環(huán)素、O-羥基胺、O-甲基羥基胺或O-δ-氨氧丁基羥基胺的組合。
以上均為重量百分比。
實施例11.
加工成抗癌藥物組合物的方法與實施例8相同，但其中的抗癌有效成分為(a)1-30％的司莫司汀、洛莫司汀、甲基洛莫司汀或薩莫司汀與1-40％的2-氨基-O4-芐基-6-甲酰喋啶、2，4，5-三氨基-6-芐氧基嘧啶、2，4-二氨基-6-芐氧基-5-亞硝基嘧啶、2，4-二氨基-6-芐氧基-5-硝基嘧啶或2，4-二氨基-6-芐氧基-5-溴基嘧啶的組合；或者(b)1-30％的司莫司汀、洛莫司汀、甲基洛莫司汀或薩莫司汀與1-40％的2-氨基-4-芐氧基-5-硝基嘧啶、2-氨基-4-芐氧基-6-甲基-5-硝基嘧啶、2，4-二氨基-6-芐氧基-s-三嗪、2-氨基-O4-芐基喋啶或2-氨基-O4-芐基-6，7-二甲喋啶的組合；或者(c)1-30％的司莫司汀、洛莫司汀、甲基洛莫司汀或薩莫司汀與1-40％的2-氨基-O4-芐基-6-羥甲基喋啶、5-碘-2’-脫氧鳥(嘧啶核)苷、5-溴-2’-脫氧鳥苷、4-氨基-6-芐基氧-5-硝基嘧啶、2-氨基-4-芐氧基-5-硝基嘧啶或2-氨基-4-芐氧基-6-甲基-5-硝基嘧啶的組合；或者(d)1-30％的司莫司汀、洛莫司汀、甲基洛莫司汀或薩莫司汀與1-40％的2，4-二氨基-6-芐氧基嘧啶、N2-2-氨基-4-氯-5-硝基嘧啶、2-氨基-O4-芐基喋啶-6-羧酸和2-氨基-6-氯-8-三氟甲基嘧啶二甲胺四環(huán)素、O-羥基胺、O-甲基羥基胺或O-δ-氨氧丁基羥基胺的組合。
以上均為重量百分比。
實施例12.
加工成抗癌藥物組合物的方法與實施例8相同，但其中的抗癌有效成分為(a)1-30％的O4-芐基葉酸與1-40％的阿雌莫司汀、阿莫司汀、氨莫司汀、苯達莫司汀、二硫莫司汀、波呋莫司汀、依莫司汀、依考莫司汀、二硫氮芥、加莫司汀、福莫司汀、合莫司汀、奈莫司汀、甘露莫司汀、雷莫司汀、潑尼莫司汀、烏拉莫司汀、?；悄就?、他莫司汀或螺莫司汀的組合；或者(b)1-30％的2，4-二氨基-6-芐氧-s-三嗪與1-40％的阿雌莫司汀、阿莫司汀、氨莫司汀、苯達莫司汀、二硫莫司汀、波呋莫司汀、依莫司汀、依考莫司汀、二硫氮芥、加莫司汀、福莫司汀、合莫司汀、奈莫司汀、甘露莫司汀、雷莫司汀、潑尼莫司汀、烏拉莫司汀、牛磺莫司汀、他莫司汀或螺莫司汀的組合；或者(c)1-30％的O6-芐基鳥嘧啶與1-40％的阿雌莫司汀、阿莫司汀、氨莫司汀、苯達莫司汀、二硫莫司汀、波呋莫司汀、依莫司汀、依考莫司汀、二硫氮芥、加莫司汀、福莫司汀、合莫司汀、奈莫司汀、甘露莫司汀、雷莫司汀、潑尼莫司汀、烏拉莫司汀、?；悄就?、他莫司汀或螺莫司汀的組合。
以上均為重量百分比。
實施例13.
加工成抗癌藥物組合物的方法與實施例8相同，但其抗癌有效成分為；a)5-30％O4-芐基葉酸，或b)5-20％O4-芐基葉酸+5-20％卡莫司汀，或c)5-20％O4-芐基葉酸+5-20％尼莫司汀，或d)5-20％O4-芐基葉酸+5-20％洛莫司汀，或e)5-20％O4-芐基葉酸+5-20％薩莫司汀，或f)5-20％O4-芐基葉酸+5-20％甲基洛莫司汀，或
g)5-20％O4-芐基葉酸+5-20％鏈佐星，或h)5-20％O4-芐基葉酸+5-20％雌莫司汀，或i)5-20％O4-芐基葉酸+5-20％司莫司汀。
以上均為重量百分比。
實施例14.
加工成抗癌藥物組合物的方法與實施例8相同，但其有效成分為a)5-30％2，4-二氨基-6-芐氧-s-三嗪，或b)5-20％2，4-二氨基-6-芐氧-s-三嗪+5-20％卡莫司汀，或c)5-20％2，4-二氨基-6-芐氧-s-三嗪+5-20％尼莫司汀，或d)5-20％2，4-二氨基-6-芐氧-s-三嗪+5-20％洛莫司汀，或e)5-20％2，4-二氨基-6-芐氧-s-三嗪+5-20％薩莫司汀，或f)5-20％2，4-二氨基-6-芐氧-s-三嗪+5-20％甲基洛莫司汀，或g)5-20％2，4-二氨基-6-芐氧-s-三嗪+5-20％鏈佐星，或h)5-20％2，4-二氨基-6-芐氧-s-三嗪+5-20％雌莫司汀，或i)5-20％2，4-二氨基-6-芐氧-s-三嗪+5-20％司莫司汀。
以上均為重量百分比。
實施例15.
加工成抗癌藥物組合物的方法與實施例8相同，但其有效成分為；a)5-30％O6-芐基鳥嘧啶，或b)5-20％O6-芐基鳥嘧啶+5-20％卡莫司汀，或c)5-20％O6-芐基鳥嘧啶+5-20％尼莫司汀，或d)5-20％O6-芐基鳥嘧啶+5-20％洛莫司汀，或e)5-20％O6-芐基鳥嘧啶+5-20％薩莫司汀，或f)5-20％O6-芐基鳥嘧啶+5-20％甲基洛莫司汀，或g)5-20％O6-芐基鳥嘧啶+5-20％鏈佐星，或h)5-20％O6-芐基鳥嘧啶+5-20％雌莫司汀，或i)5-20％O6-芐基鳥嘧啶+5-20％司莫司汀。
以上均為重量百分比。
試驗十一、不同抗癌藥物組合物體外釋放特性比較將上述實施例13中的含藥復(fù)合物放在室溫生理鹽水中浸泡，測不同時間藥物釋放量，并計算累計釋放百分?jǐn)?shù)(％)。見表11所示。
表11
試驗十二、不同抗癌藥物組合物體內(nèi)釋放特性比較將上述實施例13中的含藥復(fù)合物防于小白鼠皮下，定時取出測藥物含量，根據(jù)剩余藥物量，并計算累計釋放百分?jǐn)?shù)(％)。見表12所示。
表12
由表11可以看出，所試不同藥物體外釋放無明顯差異，第一天釋放20％左右，第14天釋放85-90。
由12上表可以看出，所試不同藥物體內(nèi)釋放也無明顯差異，第一天釋放10％左右，第28天釋放98％以上。但體內(nèi)外釋放卻有明顯差異，體外釋放較體內(nèi)釋放為快。在體內(nèi)可維持一個月，二體外則15天左右。
由于本發(fā)明所用的嘧啶類似物及其衍生物對亞硝脲類抗癌藥物增敏具有普遍意義，且體內(nèi)外釋放較為緩慢且平穩(wěn)，所以，本發(fā)明抗癌藥物組合物中嘧啶類似物及其衍生物的選擇為任意的，同樣亞硝脲類抗癌藥物及嘧啶類似物及其衍生物的聯(lián)合也是任意的?？拱┧幬锝M合物可用現(xiàn)有的方法制成各種劑型及形狀，但以緩慢釋放劑為優(yōu)選。以上實施例僅用于說明，而并非局限本發(fā)明的應(yīng)用。
權(quán)利要求
1.一種抗癌藥物組合物，包括抗癌有效成分和藥用輔料，其特征在于抗癌有效成分為，均為重量百分比嘧啶類似物及其衍生物0.01-70％亞硝脲類抗癌藥物0.00-50％。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述之抗癌藥物組合物，其特征在于所述嘧啶類似物及其衍生物選自2-氨基-O4-芐基-6-甲酰喋啶、O4-芐基葉酸、2，4，5-三氨基-6-芐氧基嘧啶、2，4-二氨基-6-芐氧基-5-亞硝基嘧啶、2，4-二氨基-6-芐氧基-5-硝基嘧啶、2，4-二氨基-6-芐氧基-5-溴基嘧啶、2-氨基-4-芐氧基-5-硝基嘧啶、2-氨基-4-芐氧基-6-甲基-5-硝基嘧啶、2，4-二氨基-6-芐氧基-s-三嗪、2-氨基-O4-芐基喋啶、2-氨基-O4-芐基-6，7-二甲喋啶、2-氨基-O4-芐基-6-羥甲基喋啶、5-碘-2’-脫氧鳥(嘧啶核)苷、5-溴-2’-脫氧鳥苷、4-氨基-6-芐基氧-5-硝基嘧啶、2-氨基-4-芐氧基-5-硝基嘧啶、2-氨基-4-芐氧基-6-甲基-5-硝基嘧啶、2，4-二氨基-6-芐氧基嘧啶、N2-2-氨基-4-氯-5-硝基嘧啶、2-氨基-O4-芐基喋啶-6-羧酸、2-氨基-6-氯-8-三氟甲基嘧啶的一種或多種。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述之抗癌藥物組合物，其特征在于亞硝脲類抗癌藥物選自阿雌莫司汀、鏈佐星、阿莫司汀、氨莫司汀、尼莫司汀、苯達莫司汀、二硫莫司汀、波呋莫司汀、卡莫司汀、依莫司汀、依考莫司汀、二硫氮芥、加莫司汀、福莫司汀、雌莫司汀、合莫司汀、奈莫司汀、甘露莫司汀、洛莫司汀、甲基洛莫司汀、司莫司汀、雷莫司汀、潑尼莫司汀、烏拉莫司汀、薩莫司汀、?；悄就?、他莫司汀或螺莫司汀中的一種或多種。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述之抗癌藥物組合物，其特征在于抗癌有效成分為a)5-30％的O4-芐基葉酸；b)5-30％的2，4-二氨基-6-芐氧-s-三嗪；或c)5-30％的O6-芐基鳥嘧啶；以上均為重量百分比。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述之抗癌藥物組合物，其特征在于抗癌有效成分為d)5-30％的O4-芐基葉酸與5-20％的鏈佐星、尼莫司汀、卡莫司汀、雌莫司汀、司莫司汀、洛莫司汀、甲基洛莫司汀或薩莫司汀的組合；e)5-30％的2，4-二氨基-6-芐氧-s-三嗪與5-20％的鏈佐星、尼莫司汀、卡莫司汀、雌莫司汀、司莫司汀、洛莫司汀、甲基洛莫司汀或薩莫司汀的組合；或f)5-30％的O6-芐基鳥嘧啶與5-20％的鏈佐星、尼莫司汀、卡莫司汀、雌莫司汀、司莫司汀、洛莫司汀、甲基洛莫司汀或薩莫司汀的組合；以上均為重量百分比。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述之抗癌藥物組合物，其特征在于藥用輔料選自生物可容性可降解吸收的高分子多聚物及其混合物或共聚物。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述之抗癌藥物組合物，其特征在于，藥用輔料選自聚乳酸、聚乙醇酸和羥基乙酸的共聚物、乙烯乙酸乙烯酯共聚物、對羧苯基丙烷葵二酸共聚物以及其混合物或共聚物。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述之抗癌藥物組合物，其特征在于該抗癌藥物組合物瘤內(nèi)或瘤周放置。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述之抗癌藥物組合物，其特征在于亞硝脲類抗癌藥物的有效劑量為0.01-50毫克/公斤體重，嘧啶類似物及其衍生物的有效劑量為0.01-50毫克/公斤體重。
10.權(quán)利要求1所述之抗癌藥物組合物的應(yīng)用，用于制備治療起源于人及動物大腦、中樞神經(jīng)系統(tǒng)、腎臟、肝、膽囊、頭頸部、口腔、甲狀腺、皮膚、粘膜、腺體、血管、骨組織、淋巴結(jié)、肺臟、食管、胃、乳腺、胰腺、眼睛、鼻咽部、子宮、卵巢、子宮內(nèi)膜、子宮頸、前列腺、膀胱、結(jié)腸或直腸的原發(fā)或繼發(fā)的癌、肉瘤或癌肉瘤的藥物。
全文摘要
一種抗癌藥物組合物。抗癌有效成分為嘧啶類似物及其衍生物，還含有亞硝脲類抗癌藥物。其中嘧啶類似物及其衍生物主要以緩釋的形式包裝于藥用輔料中，用于破壞腫瘤細(xì)胞內(nèi)的DNA修復(fù)功能，進而降低其對亞硝脲類抗癌藥物的耐受性，而藥用輔料主要為生物可容性可降解吸收的高分子多聚物，在其降解吸收的過程中能將抗癌藥物緩慢釋放于腫瘤局部，因此在明顯降低其全身毒性反應(yīng)的同時還可于腫瘤局部維持有效藥物濃度。腫瘤局部放置該組合物不僅能夠降低亞硝脲類抗癌藥物和/或嘧啶類似物及其衍生物的全身毒性反應(yīng)，同時還能選擇性地提高腫瘤局部的藥物濃度，增強化療藥物及放射治療等非手術(shù)療法的治療效果。
文檔編號A61P35/00GK1628853SQ200410035929
公開日2005年6月22日 申請日期2004年10月14日 優(yōu)先權(quán)日2004年10月14日
發(fā)明者孔慶忠 申請人:孔慶忠