專利名稱：調(diào)節(jié)雌激素受體的化合物和方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明廣義上涉及雌激素拮抗劑和激動(dòng)劑、抑制細(xì)胞因子的化合物、以及有關(guān)藥物組合物和方法。
背景技術(shù)：
雌激素對雌性和雄性中的組織具有廣泛作用。這些生物學(xué)效應(yīng)的多數(shù)是有利的，包括維持骨密度、心血管保護(hù)作用、中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)機(jī)能，和保護(hù)器官系統(tǒng)不受衰老的影響。然而，除了積極作用以外，雌激素在乳腺和子宮內(nèi)膜中也是使癌癥危險(xiǎn)性增高的有效生長因子。
迄今為止，雌激素被假定為與細(xì)胞內(nèi)單一雌激素受體(ER)結(jié)合。正如下面所討論的，當(dāng)?shù)诙NER(ER-β)被克隆(將原來的ER稱作ER-α)，并且當(dāng)發(fā)現(xiàn)了調(diào)節(jié)ER反應(yīng)的輔因子時(shí)，極大改變了這種簡單的觀點(diǎn)。配體可以結(jié)合兩種不同的ER，其在組織特異性輔激活劑和/或輔阻遇子存在下結(jié)合基因調(diào)節(jié)區(qū)中的雌激素效應(yīng)元件或其他轉(zhuǎn)錄因子。根據(jù)ER信號的復(fù)雜性，以及ER-α和β及其輔因子的組織特異性表達(dá)，目前認(rèn)識到ER配體可以成為雌激素激動(dòng)劑和拮抗劑以組織特異性方式模擬雌激素的正效應(yīng)或阻斷雌激素的負(fù)效應(yīng)。因此導(dǎo)致對全新類型的藥物的發(fā)現(xiàn)，此類藥物稱作選擇性雌激素受體調(diào)節(jié)劑或SERM。這些藥物對預(yù)防和/或治療癌癥和骨質(zhì)疏松癥，以及心血管疾病和神經(jīng)變性疾病如阿耳茨海默氏病具有顯著效果。
骨吸收疾病，例如骨質(zhì)疏松癥，是影響廣大人群的衰弱性疾病，并且該疾病只能得到有限的治療。譬如，在美國年齡50歲的人群中，骨質(zhì)疏松癥影響著約50％的女性，和約10％的男性。在患有骨質(zhì)疏松癥的個(gè)體中，骨質(zhì)損失的增加導(dǎo)致骨骼易碎，其后果為骨折的危險(xiǎn)性增高。其他骨吸收疾病，如佩吉特病和轉(zhuǎn)移性骨癌，呈現(xiàn)出類似癥狀。
骨骼是一種含有數(shù)種不同細(xì)胞種類的活組織。在健康個(gè)體中，由成骨細(xì)胞產(chǎn)生的骨質(zhì)的量與破骨細(xì)胞所排除或吸收的骨質(zhì)量保持平衡。在患有骨吸收疾病的個(gè)體中，這兩種細(xì)胞的機(jī)能不平衡?；蛟S這種不平衡的最常見的實(shí)例是絕經(jīng)后婦女所經(jīng)歷的骨吸收快速增高。所述加速的骨損失歸咎于和絕經(jīng)有關(guān)的雌激素缺失。然而，人們討論雌激素的缺失如何導(dǎo)致骨吸收增強(qiáng)的機(jī)理已有很長時(shí)間。
目前，研究人員提出，骨吸收細(xì)胞因子如白介素-1(IL-1)和腫瘤壞死因子(TNF)的增加可能對絕經(jīng)后骨損失負(fù)責(zé)(Kimble等，.J.Biol.Chem.2-128890-28897，1996)，并且這些細(xì)胞因子的抑制劑可以在卵巢切除后嚙齒動(dòng)物中部分減少骨損失(Pacifici，J.BoneMiner Res.111043-1051，1996)。此外，據(jù)報(bào)導(dǎo)稱雌激素的中止導(dǎo)致鼠骨髓和骨細(xì)胞IL-6分泌的增加(Girasole等，J.Clin.Invest.89883-891，1992；Jilka等，Science 25 788-91，1992；Kimble等，Eiidocrinology 1363054-3061，1995，Passseri等，Endocrinology 133822-828，1993)，抗IL-6的抗體可以抑制存在于雌激素減少小鼠中增加破骨細(xì)胞前體(Girasole等，如上)，并且缺乏IL-6的轉(zhuǎn)基因小鼠中在卵巢切除后不會(huì)出現(xiàn)骨損失(Poli等，EMBO J.131189-1196，1994).
現(xiàn)有減緩骨損失的治療方法一般包括化合物如雌激素、二膦酸鹽、降鈣素或雷洛昔酚的給藥。然而，這些化合物一般用于長期治療，并且具有不良的副作用。此外，所述治療通常針對破骨細(xì)胞的活性，而不是其形成。譬如，雌激素引起破骨細(xì)胞的編程性死亡，而降鈣素導(dǎo)致破骨細(xì)胞萎縮并且自骨表面剝離(Hughes等，Nat.Med.21132-1136，1996；(Jilka等，Exp.Hematol.23500-506，1995)。同樣地，二膦酸鹽可以降低破骨細(xì)胞活性，改變其形態(tài)并且提高破骨細(xì)胞的編程性死亡(Parfitt等，J.Bone Miner 11150-159，1996；Suzuki等，Endocrinology 1374685-4690，1996)。
還認(rèn)為細(xì)胞因子在多種癌癥中起重要作用。譬如，在前列腺癌的情況中，研究人員已經(jīng)顯示出IL-6是一種自分泌/旁分泌生長因子(Seigall等，Cancer Res.507786，1999)，可以加強(qiáng)腫瘤的存活(Okamoto等，C’ancer Res.5-141-146，1997)，并且中和IL-6抗體減少細(xì)胞增殖(Okamoto等，Endocrinology 1385071-5073，1997；Borsellino等，Proc.Annu.Meet.Am.Assoc.Cancer Res.37A2801，1996)。報(bào)導(dǎo)IL-6的類似結(jié)果是有關(guān)于多發(fā)性骨髓瘤(Martinez-Maza等，Res.Immunol.143764-769，1992；Kawano等，Blood 73517-526，1989；Zhang等，Blond 411-13，1989；Garrett等，Bone 20515-520，1997；和Klein等，Blood，81198-12-4，1991)、腎細(xì)胞癌(Koo等，Cancer Immunol.3597-105，1992；Tsukamoto等，J.Urol.1481778-1782，1992；和Weissglas等，Endocrinology 13818791885，1997)，和子宮頸癌(Estuce等，Gynecol.Oncol.5015-19，1993；Tartour等，CancerRes.546243-6248，1994；和Iglesias等，Am.J.Pathology146944-952，1995)。
此外，IL-6也被認(rèn)為參與關(guān)節(jié)炎，特別是佐劑-、膠原-和抗原誘發(fā)的關(guān)節(jié)炎(Alonzi等，J.Exp.Med.187146-148，1998；Ohshima等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 958222-8226，1998；和Leisten等，Clin.Immunol.Immunopathol 56108-115，1990)，和有報(bào)導(dǎo)IL-6抗體用于關(guān)節(jié)炎的治療(Wendling等，J.Rheumatol.20259-262，1993)。此外，雌激素在小鼠中已顯示出誘導(dǎo)試驗(yàn)自身免疫性腦脊髓炎和膠原誘導(dǎo)性關(guān)節(jié)炎的抑制(Jansson等，Neuroimmunol.53203-207，1994).
如上所述，早期假設(shè)雌激素結(jié)合細(xì)胞內(nèi)單一雌激素受體(ER)，引起構(gòu)象改變，導(dǎo)致由熱休克蛋白釋放并且使受體作為二聚體與多種基因啟動(dòng)區(qū)內(nèi)的雌激素效應(yīng)元件結(jié)合。此外，藥理學(xué)家通常確信非甾類小分子配體和雌激素競爭結(jié)合ER，在其中雌激素受體表達(dá)的各個(gè)組織內(nèi)起拮抗劑或激動(dòng)劑的作用。因此，所述配體傳統(tǒng)上被分為單純拮抗劑或激動(dòng)劑。這不再被認(rèn)為是正確的。
而是，目前已知雌激素通過基因表達(dá)調(diào)節(jié)細(xì)胞藥理學(xué)，并且雌激素作用由雌激素受體介導(dǎo)。如上所述，通常存在兩種雌激素受體，ER-α和ER-β。雌激素受體對于基因調(diào)節(jié)的效應(yīng)可以通過ER與雌激素效應(yīng)元件(ERE)的直接結(jié)合-“經(jīng)典途徑”(Jeltsch等，Nulcleic AcidsRes.151401-1414，1987；Bodine等，Endocrinology 1392048-2057，1998)、ER與其他轉(zhuǎn)錄因子如NF-κB、C/EBP-β或AP-1的結(jié)合-“非經(jīng)典途徑”(Stein等，Mol.Cell Biol.154971-4979，1995，Paech等，Science 2771508-1510，1997；Duan等，Endocrinology1391981-1990，1998)、和通過包括離子通道受體的非基因組作用(Watters等，Endocrinology 1384030-4033，1997；Improta-Brears等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 964686-4691，1999；Gu等，Endocrinology 140660-666，1999；Beyer等，Eux.J.Neurosci.10255-262，1998)介導(dǎo)。
最近幾年內(nèi)的發(fā)展顯示，ER與輔激活劑(例如，SRC-1，CBP和SRA)和輔抑制子(例如，SMRT和N-CoR)有關(guān)聯(lián)，其還一組織特異性和配體特異性方式調(diào)節(jié)ER的轉(zhuǎn)錄活性。此外，現(xiàn)有證據(jù)提示，多數(shù)調(diào)節(jié)基因的雌激素不具有經(jīng)典雌激素效應(yīng)元件。在這樣的情況中，ER和決定這些基因的調(diào)節(jié)的轉(zhuǎn)錄因子相互作用。由ER調(diào)節(jié)其活性的已知轉(zhuǎn)錄因子包括，例如AP-I、NF-κB、C/EBP和Sp-1。
基于ER信號的復(fù)雜性，以及不同類型的表達(dá)ER及其輔因子的組織，目前認(rèn)為ER配體不能再簡單地劃分為單純拮抗劑或激動(dòng)劑。因此，人們創(chuàng)造了術(shù)語“選擇性雌激素受體調(diào)節(jié)劑”(SERM)。SERM類與ER結(jié)合，但可以在不同組織中并且對于不同基因充當(dāng)雌激素的激動(dòng)劑或拮抗劑。譬如，兩種最熟知的被認(rèn)為是SERM類物質(zhì)的藥物是他莫昔芬和雷洛昔芬。有關(guān)這兩種化合物以及其他目前正在開發(fā)的SERM類物質(zhì)的研究已經(jīng)證實(shí)，SERM類物質(zhì)對其受體的親和性在許多情況中與其生物活性無關(guān)。所以，傳統(tǒng)上用于篩選新的ER調(diào)節(jié)劑的配體結(jié)合實(shí)驗(yàn)無法區(qū)別出組織選擇性和激動(dòng)劑/拮抗劑的行為。
最近，第二種雌激素受體ER-β業(yè)已被識別和克隆(Katzenellenbo gen和Korach Endocrinology 138，861-2(1997)；Kuiper等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 93，5925-5930，1996；Mosselman等，F(xiàn)EBS Lett.392，49-53，1996).ER-β和重新命名為ER-α的經(jīng)典ER在配體結(jié)合域和羧基末端反式激活域中具有明顯不同的氨基酸序列(～56％的氨基酸同一性)，并且在其氨基末端反式激活域中只有20％的同源性。這暗示著一些配體可以對一種受體具有比對另一受體更高的親和性。此外，受體的依賴于配體的構(gòu)象改變，和與輔因子之間的相互作用，將使信號配體的生物作用非常不同。換言之，對于ER-α而言為激動(dòng)劑的配體對于ER-β可能是非常良好的拮抗劑。這種行為的實(shí)例按Paech等所述(Science 277，1508-1510，1997)。該文章中稱，雌激素在ER-α存在下激活A(yù)P-1位點(diǎn)，但在ER-β存在下抑制同一位點(diǎn)。相反，雷洛昔芬(Eli Lilly & Co)和他莫昔芬和ICI-182，780(Zeneca Pharmaceuticals)通過ER-β刺激AP-1位點(diǎn)，但在ER-α的存在下抑制這個(gè)位點(diǎn)。另一實(shí)例由Sun等公開(Endocrinology 140，800-4，1999)。該文章中報(bào)導(dǎo)，四氫的R，R-對映體是ER-α的激動(dòng)劑，但完全拮抗ER-β，而其S，S-對映體對于兩種受體來說皆為激動(dòng)劑。
此外，由于缺乏良好的ER-β抗體，根據(jù)多數(shù)通過RT-PCR或就地雜交所作的分析，ER-α和ER-β兩者具有重疊和不同的組織分布。然而，這些結(jié)果中的一些有爭議，這歸因于測量ER所用的方法、分析所用的物種(大鼠、小鼠、人)和/或分離初級細(xì)胞的分化狀態(tài)。組織經(jīng)常同時(shí)表達(dá)ER-α和ER-β，但受體定位在不同的細(xì)胞類型中。此外，一些組織(如腎臟)排他性地含有ER-α，而其他組織(如子宮、腦下垂體和附睪)顯示出非常優(yōu)勢的ER-α(Couse等，Endcorinology 138，4613-4621，1997；Kuiper等，Endocrinology 138，863-870，1997)。相反，表達(dá)高水平ER-β的組織包括前列腺、睪丸、卵巢和腦部的某些區(qū)域(Brandenberger等，J.Clin.Endocrinol.Metab.83，1025-8，1998；Enmark等.J.Clinic.Endocrinol.Metabol.82，4258-4265，1997；Laflamme等.J.Neurobiol.36，357-78，1998；Sar § Welsch，Endocrinology 140，963-71，1999；Shughrue等，Endocrinology 138，5649-52，1997a；Shughrue等，J.Comp.Neurol.388，507-25，1997b).
ER-α(Korach，Science 266，1524-1527，1994)和ER-β(Krege等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 95，15677-82，1998)剔除(knockout)小鼠的開發(fā)進(jìn)一步證實(shí)了ER-β在不同組織中具有不同的功能。譬如，ER-α剔除小鼠(雄性和雌性)為不育小鼠，雌性表現(xiàn)出無性感受性而雄性不具有典型的雄性攻擊行為(Cooke等，Biol.Reprod.59，470-5，1998；Das等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 94，12786-12791，1997；Korach，1994；Ogawa等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 94，1476-81，1997；Rissman等，Endocrinology138，507-10，1997a；Rissman等，Horm.Behav.31，232-243，1997b)。此外，這些動(dòng)物的腦部仍然以與野生動(dòng)物相似的模式對雌激素產(chǎn)生反應(yīng)(Shughrue等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 94，11008-12，1997c)，并且雌激素仍然抑制機(jī)械損害引起的血管損傷(lafrati等，Nature Med.3，545-8，1997)。相反，缺乏ER-β的小鼠發(fā)育發(fā)育正常，有生育性并且表現(xiàn)出正常性行為，但具有比野生型小鼠更少和較小的衰退(Krege等，1998)，其具有正常的乳腺發(fā)育并且泌乳正常。生育性的降低相信是卵巢效能減弱的后果，ER-β在卵巢中是ER的優(yōu)勢形式，局部化在成熟卵泡的卵泡細(xì)胞內(nèi)。
總之，具有雌激素拮抗劑和激動(dòng)劑作用的化合物早已被認(rèn)為在多種雌激素血管疾病的治療中具有顯著的藥學(xué)效用，包括涉及腦、骨骼、心血管系統(tǒng)、皮膚、毛囊、免疫系統(tǒng)、膀胱和前列腺的疾病(Barkhem等，Mol.Pharmacol.54，105-12，1998；Farhat等，F(xiàn)ASEB J.10，615-624，1996.Gustafsson，Chem.Biol.2，508-11，1998；Sun等，1999；Tremblay等，Endocrinology 139，111-118，1998；Turner等，Endocrinology 139，3712-20，1998)。此外，業(yè)已公開了多種乳腺和非乳腺癌細(xì)胞表達(dá)ER，可以為特異性雌激素拮抗劑充當(dāng)靶向組織.(Brandenberger等，1998；Clinton和Hua，Crit.Rev.Oncol.Hematol.25，1-9，1997；Hata等，Oncology 55 Suppl 1，35-44，1998；Rohlff等，Prostate 37，51-9，1998；Simpson等，J SteroidBiochemmol Biol 64，137-45，1998；Yamashita等，Oncolog 55Suppl 1，17-22，1998)。
近年來，開發(fā)了許多與ER相互作用的甾類和非甾類化合物。譬如，他莫昔芬最初開發(fā)成為抗雌激素并且用于治療乳腺癌，但最新發(fā)現(xiàn)其在子宮、骨骼和心血管系統(tǒng)中充當(dāng)部分雌激素激動(dòng)劑。雷洛昔芬是被提議為SERM的另一種化合物，并且業(yè)已被批準(zhǔn)用于治療骨質(zhì)疏松癥。
他莫昔芬 雷洛昔芬雷洛昔芬的類似物也已見報(bào)導(dǎo)(Grese等，J.Med.Chem.40146-167，1997)。
至于香豆素類化合物，已經(jīng)提出多種結(jié)構(gòu)，包括下列Roa等，Synthesis 887-888，1981，Buu-Hoi等Org.Chem.191548-1552，1954，Gupta等，Indian J.Exp.Biol.23638-640，1985；PCT申請公開號WO 96/31206；Verma等，Indian J.Chem.32B239-243，1993；Lednicer等，.J.Med.Chem.8725-726，1965；Micheli等，Steroids 5321-335，1962；Brandt等，Int.J.Quantum ChemistryQuantum Biol.Symposia 13155-165，1986；Wani等，J.Med.Chem.18982-985，1975；Pollard等，Steroids11897-907，1968。
因此，該技術(shù)領(lǐng)域普遍需要雌激素拮抗劑和激動(dòng)劑，和更具體的說是需要抑制細(xì)胞因子、特別是IL-6的化合物，包括含有這些化合物的藥物組合物以及有關(guān)其應(yīng)用的方法。本發(fā)明實(shí)現(xiàn)了這些要求，并且提供了其他相關(guān)優(yōu)越性。

發(fā)明內(nèi)容
簡單而言，本發(fā)明-般性地涉及雌激素拮抗劑和/或激動(dòng)劑，包括含有它們的藥物組合物，乙基治療雌激素相關(guān)性疾病的方法。所述疾病在下文中作更具體討論，并且廣義上包括(但不限于)肥胖、乳腺癌、骨質(zhì)疏松癥、子宮內(nèi)膜異位、心血管疾病、前列腺癌、絕經(jīng)綜合征、脫發(fā)(禿頭)、II型糖尿病、阿耳茨海默氏病、尿失禁、胃腸(GI)道疾病、精子發(fā)生、損傷后的血管保護(hù)、子宮內(nèi)膜異位、學(xué)習(xí)和記憶、CNS效應(yīng)、血脂水平、痤瘡、白內(nèi)障、多毛癥、其它實(shí)體癌(例如結(jié)腸、肺、卵巢、黑素瘤、CNS，和腎)、多發(fā)性骨髓瘤和淋巴瘤。
在更加具體的實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及抑制細(xì)胞因子如白介素-6(IL-6)的化合物和治療有關(guān)疾病的方法，以及含有一種或多種本發(fā)明化合物的藥物組合物。在本申請中，治療與細(xì)胞因子水增高有關(guān)的疾病包括(但不限于)治療癌癥、關(guān)節(jié)炎和骨吸收性疾病的方法，特別是在骨質(zhì)疏松癥中減少破骨細(xì)胞的形成和/或阻斷細(xì)胞因子產(chǎn)生。
本發(fā)明的化合物具有下面通式結(jié)構(gòu)(I)
其中R1、R2、R3、n和p在下文中詳細(xì)定義，包括其立體異構(gòu)體、前藥和藥學(xué)可接受鹽。
如上所述，本發(fā)明的化合物在廣泛的治療和預(yù)防應(yīng)用中具有實(shí)用性，可以用來治療多種與骨吸收有關(guān)的疾病，以及用于治療癌癥和關(guān)節(jié)炎。所述方法包括向需要其的動(dòng)物(包括人體)施用有效量的本發(fā)明化合物，優(yōu)選藥物組合物的形式。
在另一實(shí)施方式中，公開了通過使細(xì)胞和/或組織與有效量的結(jié)構(gòu)(I)的化合物接觸調(diào)節(jié)表達(dá)ER的細(xì)胞和/或組織的方法。在一個(gè)實(shí)施方式中，所述細(xì)胞和/或組織是骨骼、膀胱、子宮、卵巢、前列腺、睪丸、附睪、胃腸(GI)道、腎臟、乳腺、心臟、血管壁、免疫系統(tǒng)、肺、眼、腦垂體、海馬或下丘腦。
在另一實(shí)施方式中，本發(fā)明公開了治療雌激素相關(guān)性疾病的方法，該方法通過給需要其的溫血?jiǎng)游锸┯糜行Я康慕Y(jié)構(gòu)(I)的化合物，該化合物配制為適合動(dòng)物給藥的異位組合物。在代表性實(shí)施方式中，雌激素相關(guān)性疾病為乳腺癌、骨質(zhì)疏松癥、子宮內(nèi)膜異位、動(dòng)脈粥樣硬化、心血管疾病、高膽固醇血癥、前列腺肥大、肥胖、前列腺癌、絕經(jīng)綜合征、II型糖尿病、阿耳茨海默氏病、尿失禁、GI道疾病、精子發(fā)生、損傷后的血管保護(hù)、子宮內(nèi)膜異位、學(xué)習(xí)和記憶、CNS效應(yīng)、血脂水平、痤瘡、多毛癥、其它實(shí)體癌(例如結(jié)腸、肺、卵巢、黑素瘤、CNS和腎)、多發(fā)性骨髓瘤、淋巴瘤、前列腺癌、肥胖、熱潮紅、白內(nèi)障、皮膚效應(yīng)、心境波動(dòng)、失憶、和/或與接觸環(huán)境化學(xué)物質(zhì)或天然激素失衡有關(guān)的不良生殖作用。
本發(fā)明的上述和其它方面將在參考下列詳細(xì)說明和附圖更加清楚。最后，本發(fā)明提出了多篇參考文獻(xiàn)，它們更加詳細(xì)地說明了本發(fā)明的某一方面，并且在此全文引入作為參考。


圖1A和1B舉例說明了本發(fā)明代表性化合物分別抑制IL-6和GM-CSF的生產(chǎn)的活性。
圖2舉例說明了本發(fā)明代表性化合物抑制類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎滑膜細(xì)胞中IL-6生產(chǎn)的活性。
圖3舉例說明了本發(fā)明代表性化合物抑制乳腺癌增生的活性。
圖4舉例說明本發(fā)明代表性化合物抑制前列腺癌細(xì)胞系的活性。
具體實(shí)施例方式
如上所述，本發(fā)明一般性地涉及雌激素拮抗劑和激動(dòng)劑，并且涉及抑制細(xì)胞因子(就是由細(xì)胞產(chǎn)生的改變該細(xì)胞或其它細(xì)胞的功能的蛋白質(zhì))、特別是白介素-6(IL-6)的化合物。本發(fā)明的化合物具有下面的通用結(jié)構(gòu)(I) 包括其立體異構(gòu)體、前藥和藥學(xué)可接受鹽，其中n是0、1、2、3或4；p是0、1或2；R1是未取代或取代C6-12芳基、C7-12芳烷基、C3-12雜環(huán)或C4-16雜環(huán)烷基；
R2是NRaRb，其中Ra和Rb獨(dú)立地為氫、C1-8烷基、C6-12芳基或雜環(huán)，和其中Ra和Rb至多被三個(gè)獨(dú)立選自C1-6烷基、鹵素、C1-6烷氧基、羥基和羧基的取代基任選取代；或R2是以下結(jié)構(gòu)的雜環(huán) 其中m1和m2獨(dú)立地是0、1或2，和m1和m2不同時(shí)為0，A是CH2、O、S或NH，Z表示0、1、2或3個(gè)雜環(huán)取代基，選自鹵素、C1-8烷基、C6-12芳基、C7-12芳烷基、C3-12雜環(huán)或C4-16雜環(huán)烷基；并且其中雜環(huán)上的任何氫原子可以與該雜環(huán)的相鄰原子上的氫原子一起構(gòu)成雙鍵；R3是氫、R4、C(＝O)R4、C(＝O)OR4、CONHR4、CONR4R5或SO2NR5R5；R4和R5獨(dú)立地為C1-8烷基、C6-12芳基、C7-12芳烷基或含有至多兩個(gè)選自O(shè)、NR6和S(O)q的雜原子的5-或6-元雜環(huán)，其中上述各基團(tuán)被1至3個(gè)獨(dú)立選自R7的取代基任選取代，和q為0、1或2；R6是氫或C1-4烷基；和R7是氫、鹵素、羥基、C1-6烷基、C1-4烷氧基、C1-4酰氧基、C1-4硫基、C1-4烷基亞硫?；?、C1-4烷基磺?；?羥基)C1- 4烷基、C6-12芳基、C7-12芳烷基、COOH、CN、CONHOR8、SO2NHR8、C1-4烷基氨基、C1-4二烷基氨基、NHSO2R8、NO2、C1-4烷基氨基、NO2或5-或6-元雜環(huán)，其中各自出現(xiàn)的R8獨(dú)立地是C1-6烷基。
在此所用的“C6-12芳基”是含有6至12個(gè)碳原子的芳族部分。在一種實(shí)施方式中，C6-12芳基選自(但不限于)苯基、四氫萘基和萘基。
“C7-12芳烷基”是含有7至12個(gè)碳原子并且同時(shí)具有脂族和芳族單元的芳烴，在一種實(shí)施方式中，C7-12芳烷基選自(但不限于)芐基、乙基芐基(即-(CH2)2苯基)、丙基芐基和異丁基芐基。
“C3-12雜環(huán)”是其環(huán)由多于一種的原子構(gòu)成并且含有3至12個(gè)碳原子的化合物，包括(但不限于)吡咯基、呋喃基、噻吩基、咪唑基、噁唑基、噻唑基、吡唑基、吡咯烷基、吡啶基、嘧啶基和嘌呤基。
“C4-16雜環(huán)烷基”是含有與C1-8烷基相連的C3-12雜環(huán)的化合物。
“C1-8烷基”是含有1-8個(gè)碳原子的直鏈或支鏈碳鏈，包括(但不限于)甲基、乙基和正丙基。同樣地，C1-x烷基具有相同含義，但其中“x”表示小于8的碳原子數(shù)目，例如C1-6烷基。
“取代”C1-x烷基、C6-12芳基、C7-12芳烷基、C3-12雜環(huán)或C4-16雜環(huán)烷基部分是指C1-x烷基、C6-12芳基、C7-12芳烷基、C3-12雜環(huán)或C4-16雜環(huán)烷基具有至少一個(gè)被取代基取代的氫原子。
“取代基”是指選自鹵素、-OH、-R’、-OR’、-COOH、-COOR’、-COR’、-CONH2、-NH2、-NHR’、-NR’R’、-SH、-SR’、-SOOR’、-SOOH和-SOR’的部分，其中各自出現(xiàn)的R’獨(dú)立地選自未取代或取代C1-8烷基、C6-12芳基、C7-12芳烷基、C3-12雜環(huán)或C4-16雜環(huán)烷基。
“鹵素”是氟、氯、溴或碘。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方式中，雜環(huán)R2的A是CH2，m1為1，和m2是0或1，分別表示為下面的結(jié)構(gòu)(i)和(ii) 在上面的結(jié)構(gòu)(i)和(ii)中，應(yīng)注意沒有描述出氫原子，目的在于澄清一個(gè)或多個(gè)任選的Z取代基可以 位于雜環(huán)的任何原子上，并且與結(jié)構(gòu)(1)的附著點(diǎn)可以通過碳原子或氮原子。
所以，在結(jié)構(gòu)(i)和(ii)的更具體實(shí)施方式
中，其中Z存在，R2包括以下結(jié)構(gòu)(iii)至(vi)
其中Z例如是甲基。
在另一實(shí)施方式中，雜環(huán)R2的A是O或NH，m1是1，和m2是0或1，例如由下列結(jié)構(gòu)(vii)和(viii)表示 根據(jù)上面的結(jié)構(gòu)(i)和(ii)，結(jié)構(gòu)(vii)和(viii)中沒有繪出氫原子，目的在于澄清一個(gè)或多個(gè)任選的Z取代基可以位于雜環(huán)的任何原子上，并且與結(jié)構(gòu)(1)的附著點(diǎn)可以通過碳原子或氮原子。
除了上述結(jié)構(gòu)以外，雜環(huán)的任何氫原子可以與和相鄰雜環(huán)原子附著的氫原子一起構(gòu)成雙鍵。例如，對于上述結(jié)構(gòu)(vii)，相應(yīng)不飽和類似物包括下列結(jié)構(gòu)(ix)、(x)和(xi) 在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方式中，R1是未取代或取代苯基，本發(fā)明的化合物具有以下結(jié)構(gòu)(II)
其中X表示如上定義的一個(gè)或多個(gè)任選取代基，和R2、R3、n和p如上定義。
在另一實(shí)施方式中，R3是氫，由結(jié)構(gòu)(III)表示 其中R1、R2、n和p定義如上。
在結(jié)構(gòu)(II)和(III)的更加具體的實(shí)施方式中，本發(fā)明的代表性化合物具有下面的結(jié)構(gòu)(IV)
其中A、X、Z、m1、m2、n和p定義如上。
在結(jié)構(gòu)(IV)的進(jìn)一步實(shí)施方式中，m1、m2和p是1，A是CH2，任選的Z取代基不存在，和n為2，和本發(fā)明的化合物具有下面的結(jié)構(gòu)(V) 其中X表示定義如上的一個(gè)或多個(gè)任選取代基。
在一個(gè)更特定的實(shí)施方式中，X或者(a)不存在，或(b)表示單一取代基，例如對位的單一取代基。所以，本發(fā)明的代表性化合物包括(但不限于)具有下列結(jié)構(gòu)(VIa)和(Vlb)的化合物
其中結(jié)構(gòu)(VIb)中的X表示鹵素，例如氟或氯。
有機(jī)合成領(lǐng)域中的技術(shù)人員通過已知方法，比通過本申請公開的合成途徑可以制備本發(fā)明的化合物。譬如，本發(fā)明的代表性化合物可以利用下面的通用反應(yīng)路線1合成反應(yīng)路線1
反應(yīng)路線1生成如結(jié)構(gòu)(I)定義的化合物，其中R3是甲基或氫，和R2為雜環(huán)。此外，可以采用適當(dāng)取代的酚，或隨后利用有機(jī)合成領(lǐng)域中的已知技術(shù)通過羥基的轉(zhuǎn)化(當(dāng)R3＝H時(shí))，實(shí)現(xiàn)R3位上的其它取代基。同樣地，其中R2是NRaRb的結(jié)構(gòu)(I)的化合物可以利用相應(yīng)的氨基氯，RaRbN(CH2)nCl代替的雜環(huán)在反應(yīng)路線1的第二步至最后步驟中至多。
更加具體地，本發(fā)明的代表性化合物(當(dāng)R3是氫和R2為哌啶-1-基)可以通過下列反應(yīng)路線2制備反應(yīng)路線2
對于立體異構(gòu)體，結(jié)構(gòu)(I)的化合物可以具有手性中心并且可能存在消旋體、消旋混合物和各個(gè)對映異構(gòu)體或非對映異構(gòu)體。所有這些異構(gòu)體形式均屬于本發(fā)明，包括其混合物。此外，一些結(jié)構(gòu)(I)的化合物的結(jié)晶形式可能呈多晶型存在，其屬于本發(fā)明。此外，某些結(jié)構(gòu)(I)的化合物也可以與水或其它有機(jī)溶劑形成溶劑化物。所述溶劑化物同樣屬于本發(fā)明的范圍內(nèi)。
雖然不受下列理論的限制，在骨吸收疾病的背景中，可以確信本發(fā)明的化合物通過阻斷細(xì)胞因子生產(chǎn)和/或通過抑制破骨細(xì)胞的形成發(fā)揮其功能。細(xì)胞因子IL-6早已表現(xiàn)出是誘導(dǎo)破骨細(xì)胞形成的重要因子(Girasole等.見上文；Jilka等(1992)，見上文；Jilka等(1995)，見上文；Kimble等(1995)，見上文；Pacifici等，見上文；和Passeri等，見上文)。其它研究人員顯示出中和抗體、反義寡聚物或抗IL-6Sant 5拮抗劑的給予可以減少卵巢切除小鼠的小梁骨內(nèi)的破骨細(xì)胞數(shù)量(Devlin等，J.Bone Miner 13393-399，1998；Girasole等，.見上文；Jilka等(1992)，見上文；和Schiller等，Endocrinology 1384567-4571，1997)，降低人體巨細(xì)胞吸收牙本質(zhì)的能力(Ohsaki等，Endocrinology 1312229-2234，1993；和Reddy等，J.Bone Min.Res.9753-757，1994)，和減少正常人體骨髓培養(yǎng)物中破骨細(xì)胞的形成。還發(fā)現(xiàn)，通過雌激素實(shí)體和轉(zhuǎn)錄因子NF-κB和C/EBPβ的相互作用，雌激素減量調(diào)節(jié)IL-6啟動(dòng)子的活性(Stein等，Mol.Cell Biol.154971-4979，1995)。
粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GM-CSF)被建議為在破骨前體細(xì)胞的增殖中起重要作用。在人體或小鼠骨髓細(xì)胞或外周血細(xì)胞的長時(shí)間培養(yǎng)中，GM-CSF促進(jìn)破骨細(xì)胞的形成(Kurihara等，Blood741295-1302，1989；Lorenzo等，J.Cl in.lnvest.80160-164，1987；MacDonald等，J.Bone Miner 1227-233，1986；和Shinar等，Endocrino logy1728-1735，1990)。由絕經(jīng)后婦女或中止雌激素療法的婦女中分離出的骨髓細(xì)胞表達(dá)了比絕經(jīng)前婦女細(xì)胞更高的GM-CSF水平(Bismar等，.J.Clin.Endocrinol.Metab.803351-3355，1995)。GM-CSF的表達(dá)也顯示出在患有矯形植入物侵蝕的患者中與骨吸收性破骨細(xì)胞的組織分布有關(guān)(Al-Saffar等，Anatomic Pathology 105628-693，1996)。
此外，發(fā)現(xiàn)抗IL-6抗體阻斷IL-6的作用可以減少實(shí)施例8的人體骨細(xì)胞共培養(yǎng)體系中的破骨細(xì)胞樣細(xì)胞的形成。該體系包括無限增殖化人體破骨細(xì)胞和前單核細(xì)胞系U937，它們在同一組織培養(yǎng)孔內(nèi)共培養(yǎng)。在適宜的培養(yǎng)條件下，破骨細(xì)胞分泌IL-6，它對前單核細(xì)胞起作用使它們分化為破骨細(xì)胞樣細(xì)胞。所以，共培養(yǎng)體系更加貼切地反映了骨的生理環(huán)境，并且為了解化合物對阻斷IL-6的生產(chǎn)和引起破骨細(xì)胞活化和形成的功效提供了功能讀出。譬如，發(fā)現(xiàn)雌激素可以抑制實(shí)施例8的共培養(yǎng)體系中IL-6的生產(chǎn)。
而且，發(fā)現(xiàn)抗GM-CSF抗體減少破骨細(xì)胞樣細(xì)胞的形成，雌激素減少實(shí)施例8的共培養(yǎng)體系中GM-CSF的生產(chǎn)。這證明了雌激素可以通過阻斷IL-6和GM-CSF的生產(chǎn)對破骨細(xì)胞的形成和機(jī)能產(chǎn)生抑制作用。因此，阻斷IL-6和/或GM-CSF生產(chǎn)，或抑制破骨細(xì)胞形成和機(jī)能，或兩者兼具的本發(fā)明化合物適用于骨吸收性疾病的治療。
如上所述，人們確信細(xì)胞因子在多種癌癥中起重要作用。在前列腺癌的背景中，研究人員顯示出IL-6是自分泌/旁分泌生長因子(Seigall等，見上文)，可以促進(jìn)腫瘤的存活(Okamoto等(Cancer Res.1997)，見上文)，而中和IL-6抗體可以減少細(xì)胞增殖(Okomoto等(Endocrinolog.1997)，見上文；Borsellino等，見上文)。IL-6據(jù)報(bào)導(dǎo)還對多發(fā)性骨髓瘤(Maninez-Maza等，見上文；Kawano等，見上文；Zhang等，見上文；Garrett等，見上文；和Klein等，見上文)、腎細(xì)胞癌(Koo等，見上文；Tsukamoto等，見上文；和Weissglas等，見上文)，和宮頸癌(Estuce等，見上文；Tartour等，見上文；和iglesias等，見上文)起關(guān)鍵作用。
IL-6也參與關(guān)節(jié)炎，特別是佐劑-、膠原-和抗原-誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎(Alonzi等，見上文；Ohshima等，見上文；和Leisten等，見上文)，抗IL-6抗體據(jù)報(bào)導(dǎo)可用于關(guān)節(jié)炎的治療(Wendling等，見上文)。此外，雌激素在小鼠中顯示出引起試驗(yàn)型自免疫腦脊髓炎和膠原誘導(dǎo)性關(guān)節(jié)炎的抑制(Jansson等，見上文)。
因此，本發(fā)明的其它實(shí)施方式包括治療一般性骨細(xì)胞疾病的方法，包括(但不限于)骨質(zhì)疏松癥、轉(zhuǎn)移性骨癌和高鈣血癥、矯形植入物導(dǎo)致的溶骨損害、佩吉特氏病，和與甲狀旁腺機(jī)能亢進(jìn)有關(guān)的骨損傷。與IL-6有關(guān)的其它疾病包括多種癌癥和關(guān)節(jié)炎。代表性癌癥為乳腺癌、前列腺癌、結(jié)腸癌、子宮內(nèi)膜癌、多發(fā)性骨髓瘤、腎細(xì)胞癌和宮頸癌。關(guān)節(jié)炎性疾病包括佐劑-、膠原-和抗原-誘發(fā)性關(guān)節(jié)炎，特別是類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎。
此外，本發(fā)明的化合物也可以作為雌激素拮抗劑和/或激動(dòng)劑，并且在廣泛的雌激素相關(guān)性疾病的治療中具有可利用性。在本申請中，治療包括雌激素相關(guān)性疾病的治療和/或預(yù)防。所以，本發(fā)明的化合物可以作為治療和/或預(yù)防試劑給藥。雌激素“激動(dòng)劑”是指結(jié)合ER并模擬雌激素在一種或多種組織內(nèi)的作用的化合物，而“拮抗劑”是指結(jié)合ER并且阻斷雌激素在一種或多種組織中的作用。而且，術(shù)語“雌激素相關(guān)性疾病”包括任何與雌激素、選擇性雌激素選擇性受體(SERM)或ER的水平升高或降低有關(guān)的疾病。在本申請中，ER包括ER-α和/或ER-β，以及具有與ER顯著同源性的同種型、突變和蛋白質(zhì)。
所以，本發(fā)明的化合物也可以應(yīng)用在治療雌激素相關(guān)性疾病的方法中，包括(但不限于)乳腺癌、骨質(zhì)疏松癥、子宮內(nèi)膜異位、心血管疾病、高膽固醇血癥、前列腺肥大、前列腺癌、肥胖、熱潮紅、皮膚效應(yīng)、心境波動(dòng)、失憶、前列腺癌、絕經(jīng)綜合征、脫發(fā)(禿頂)、II型糖尿病、阿耳茨海默氏病、尿失禁、胃腸道疾病、精子發(fā)生、損傷后的血管保護(hù)、子宮內(nèi)膜異位、學(xué)習(xí)和記憶、CNS效應(yīng)、血脂水平、痤瘡、白內(nèi)障、多毛癥、其它實(shí)體癌(例如結(jié)腸、肺、卵巢、黑素瘤、CNS和腎)、多發(fā)性骨髓瘤、淋巴瘤和接觸環(huán)境化學(xué)品或天然激素失衡有關(guān)的不良生殖作用。
是雌激素激動(dòng)劑的本發(fā)明化合物適用于口服避孕；緩解絕經(jīng)綜合征；預(yù)防先兆性或習(xí)慣性流產(chǎn)，減輕痛經(jīng)；減少機(jī)能障礙性子宮出血；減輕子宮內(nèi)膜異位；有助于流產(chǎn)發(fā)育；治療痤瘡；減少婦女體毛的過度生長(多毛癥)；預(yù)防和治療心血管疾??；預(yù)防和治療動(dòng)脈粥樣硬化；預(yù)防和治療骨質(zhì)疏松癥；治療良性前列腺肥大和前列腺癌肥胖；和抑制分娩后泌乳。這些試劑也對血脂水平有益，因此可以有效治療和預(yù)防高膽固醇血癥。為雌激素拮抗劑的那些本發(fā)明化合物在例如乳腺和卵巢組織中是有效的抗雌激素，因此適用于乳腺和卵巢癌的治療和預(yù)防。
本發(fā)明的方法包括給需要其的動(dòng)物施用足夠治療感興趣疾病或病癥量的結(jié)構(gòu)(I)的化合物，或含義一種或多種所述化合物的藥物組合物。至此，術(shù)語“治療”(或有關(guān)術(shù)語“治愈”和“療法”)是指所述化合物，通常與適宜的釋放載體或試劑結(jié)合，對沒有表現(xiàn)出疾病或病癥的征兆(例如，預(yù)防或防止性給藥)或表現(xiàn)出疾病或病癥的跡象(例如，治愈或治療給藥)的動(dòng)物的給藥。此外，短語“有效量”是指化合物在指定時(shí)間后產(chǎn)生預(yù)期效應(yīng)的劑量。譬如在骨吸收性疾病的背景中，有效量在骨質(zhì)中的結(jié)果明顯不同于用安慰劑治療的動(dòng)物。同樣地，對于癌癥和關(guān)節(jié)炎，有效量是足夠?qū)Π┬曰蜿P(guān)節(jié)炎性組織產(chǎn)生預(yù)期作用的量。
本發(fā)明的方法包括施用有效量的結(jié)構(gòu)(I)的化合物或其鹽作為活性成分。結(jié)構(gòu)(I)的化合物的藥學(xué)可接受鹽通常是常用的無毒鹽，例如與有機(jī)酸(例如，甲酸、乙酸、三氟乙酸、檸檬酸、馬來酸、酒石酸、甲磺酸、苯磺酸或甲苯磺酸)、無機(jī)酸(例如，鹽酸、氫溴酸、硫酸或磷酸)和氨基酸(例如，天門冬氨酸或谷氨酸)形成的鹽?；瘜W(xué)領(lǐng)域的普通技術(shù)人員通過已知方法可以制備這些鹽。
本發(fā)明的化合物可以經(jīng)口服或腸胃外以常規(guī)制劑形式施用給動(dòng)物(包括人體)，所述常規(guī)的制劑形式例如是膠囊、微囊、片劑、顆粒劑、粉末、錠劑、丸劑、栓劑、注射劑、混懸液和糖漿劑。適合的制劑可以通過普通方法利用常規(guī)有機(jī)或無機(jī)添加劑制成，例如賦形劑(例如，蔗糖、淀粉、甘露糖醇、山梨糖醇、乳糖、葡萄糖、纖維素、滑石、磷酸鈣或碳酸鈣)、粘合劑(例如，纖維素、甲基纖維素、羥甲基纖維素、聚乙烯吡咯烷酮、明膠、阿拉伯膠、聚乙二醇、蔗糖或淀粉)、崩解劑(例如，淀粉、羧甲基纖維素、羥丙基淀粉、低取代羥丙基纖維素、碳酸氫鈉、磷酸鈣或檸檬酸鈣)、潤滑劑(例如，硬脂酸鎂、輕質(zhì)無水硅酸、滑石或十二烷基硫酸鈉)、矯味劑(例如，檸檬酸、薄荷醇、甘氨酸或橘子粉)、防腐劑(例如，苯甲酸鈉、亞硫酸氫鈉、對羥基苯甲酸甲酯或?qū)αu基苯甲酸丙酯)、穩(wěn)定劑(例如，檸檬酸、檸檬酸鈉或乙酸)、助懸劑(例如，甲基纖維素、聚乙烯吡咯烷酮或硬脂酸鋁)、分散劑(例如，羥丙基甲基纖維素)、稀釋劑(例如水)，和基質(zhì)蠟(例如，可可脂、白發(fā)生率或聚乙二醇)?；钚猿煞衷谒幬锝M合物中量可以是產(chǎn)生預(yù)期治療作用的水平；例如口服和腸胃外給藥的單位劑量中約0.1mg至100mg。
活性成分通常每天給藥1至4次，在人體患者中單位劑量為0.1mg至100mg，但上述劑量可以根據(jù)患者的年齡、體重和臨床情況和給藥類型作適當(dāng)變化。人體患者中的優(yōu)選劑量為0.25mg至25mg。優(yōu)選每天給藥1次。
藥物化學(xué)家應(yīng)認(rèn)識到具有一個(gè)或多個(gè)可利用羥基的生理活性化合物常常采取藥學(xué)可接受酯的形式給藥。文獻(xiàn)涉及此類化合物，例如雌二醇，提供了多種此類酯的實(shí)例。可以相信這些酯類化合物在體內(nèi)被代謝裂解，實(shí)際藥物還是羥基化合物本身。制藥領(lǐng)域公認(rèn)提供適當(dāng)選擇酯基可以調(diào)控化合物作用的速率和持續(xù)時(shí)間。
至此，前藥也屬于本發(fā)明的范圍內(nèi)。前藥是與載體共價(jià)鍵合并且在該前藥給予患者后在體內(nèi)釋放出結(jié)構(gòu)(I)的化合物。一般以一定方式通過修飾官能團(tuán)制備前藥，所述修飾或者通過常規(guī)操作或者在體內(nèi)裂解，生成母體化合物。前藥包括，例如本發(fā)明的化合物，其中羥基(當(dāng)R3＝H)與任意基團(tuán)鍵合，當(dāng)對患者給藥時(shí)，裂解成為羥基。
本發(fā)明的化合物的藥學(xué)可接受酸加成鹽可以由化合物自身組成，或由其任意的酯組成，包括藥物化學(xué)家常用的藥學(xué)可接受鹽。譬如，鹽可以與無機(jī)或有機(jī)酸形成，例如鹽酸、氫溴酸、氫碘酸；磺酸，包括如萘磺酸、甲磺酸和甲苯磺酸類；硫酸、硝酸、磷酸、酒石酸、焦硫酸、偏磷酸、琥珀酸、甲酸、苯二甲酸、乳酸等，更優(yōu)選鹽酸、檸檬酸、苯甲酸、馬來酸、乙酸和丙酸。給藥常常優(yōu)選酸加成鹽形式的本發(fā)明化合物，因?yàn)槭┯玫乃幬镏薪?jīng)常帶有堿性基團(tuán)。
如上所述，本發(fā)明的化合物經(jīng)常是以酸加成鹽的形式給藥。有機(jī)化學(xué)中通常是，使本發(fā)明的化合物與適宜的酸、如上述酸反應(yīng)生成上述鹽。這些鹽在適當(dāng)溫度下以高收率快速生成，并且常常只需在合成的最終步驟中由適當(dāng)?shù)乃嵝韵礈旆蛛x出化合物來制得。將成鹽酸溶于適當(dāng)有機(jī)溶劑，或含水有機(jī)溶劑，如烷醇、酮或酯。另一方面，如果希望本發(fā)明的化合物成為堿的形式，按照常規(guī)實(shí)踐，由堿性最終洗滌步驟分離出化合物。制備鹽酸鹽的典型技術(shù)是將有機(jī)酸溶于適當(dāng)溶劑中并且完全干燥該溶液，如用分子篩，隨后向其通入氯化氫氣體。
本發(fā)明的化合物對人體的給藥劑量可在相當(dāng)寬的范圍內(nèi)變化，主治醫(yī)師可以進(jìn)行調(diào)整。應(yīng)注意當(dāng)其以鹽的形式、如月桂酸鹽給藥時(shí)化合物的劑量必須進(jìn)行調(diào)整，其成鹽部分具有適宜的分子量。化合物的優(yōu)選給藥率的一般范圍是約0.05mg/天至約100mg/天。優(yōu)選給藥率范圍是約0.25mg/天至25mg/天。當(dāng)然，化合物的日劑量常常分成部分、在一天的不同時(shí)間給藥。然而，在任何指定情況中，化合物的給藥量應(yīng)取決于多種因素，如活性成分的溶解度、所用制劑和給藥途徑。
本發(fā)明的化合物的給藥途徑并不重要。已知所述化合物由消化道吸收，因此出于方便的原因常常優(yōu)選化合物經(jīng)口服給藥。然而，化合物同樣可以經(jīng)皮有效給藥，如果在指定情況中，或作為栓劑由直腸吸收。
本發(fā)明的化合物通常是以藥物組合物給藥，由于所述化合物的操作，它們是本發(fā)明的重要和新的實(shí)施方式。所有常用裂隙的組合物均可以采用，包括片劑、咀嚼片、膠囊、溶液、腸胃外溶液、錠劑、栓劑和混懸液。組合物配制為含有日劑量或日劑量合理部分的劑量單位，其可以為單一片劑或膠囊，或常規(guī)體積的液體。
任何化合物可以很容易地配制成片劑、膠囊等；優(yōu)選由水溶性鹽、如鹽酸鹽制備溶液。通常，所有組合物按照制藥化學(xué)領(lǐng)域中的已知方法制備。通過使化合物與適當(dāng)稀釋劑混合并且將適量的混合物填充在膠囊中可以制備膠囊劑。常規(guī)稀釋劑包括惰性粉狀物質(zhì)，如許多不同類型的淀粉，粉狀纖維素，尤其是結(jié)晶和微晶纖維素，糖如果糖、甘露糖醇和蔗糖，谷粉和類似可食用粉末。
片劑可以通過直接壓縮、通過濕法造粒、通過干粉造粒制備。其制劑常常將稀釋劑、粘合劑、潤滑劑和崩解劑與所述化合物摻混。典型的稀釋劑包括，例如不同種類的淀粉、乳糖、甘露糖醇、高嶺土、磷酸或硫酸鈣、無機(jī)鹽如氯化鈉和粉狀糖。粉狀纖維素衍生物也適用。典型的片劑粘合劑是例如淀粉、明膠和糖(如乳糖、果糖、葡萄糖等)的物質(zhì)。天然和合成樹膠也適合，包括阿拉伯膠、藻酸鹽、甲基纖維素、聚乙烯吡咯烷酮等。聚乙二醇、乙基纖維素和蠟也可以作為粘合劑。
潤滑劑通常是片劑制劑中防止片劑和沖頭粘著在沖模內(nèi)所必需的。潤滑劑選自光滑固體，例如滑石、硬脂酸鎂和鈣、硬脂酸和氫化植物油。片劑崩解劑是當(dāng)濕潤時(shí)溶脹使片劑破碎并且釋放出化合物的物質(zhì)。它們包括淀粉、粘土、纖維素、藻酸和樹膠。更具體地，玉米和土豆淀粉、甲基纖維素、瓊脂、皂土、木纖維素、防止天然海綿、陽離子交換樹脂、藻酸、瓜耳膠、柑橘果肉和羧甲基纖維素，例如可以采用十二烷基硫酸鈉。片劑常常用蔗糖作為矯味劑和密封劑包衣，或用成膜保護(hù)劑包衣，改變片劑的溶解特性。在制劑中利用大量的宜味物質(zhì)如甘露糖醇，化合物也可以配制為咀嚼片，這在所屬領(lǐng)域易于公知技術(shù)。
當(dāng)希望化合物作為栓劑給藥時(shí)，采用典型基質(zhì)?？煽芍瑸閭鹘y(tǒng)栓劑基質(zhì)，其可以通過加入蠟改性，略微提高其熔點(diǎn)。廣泛采用水混溶性栓劑基質(zhì)，特別包括不同分子量的聚乙二醇。
利用適當(dāng)制劑可以延遲或持續(xù)化合物的效應(yīng)。譬如，可以制備化合物的可緩慢溶解的顆粒并且混合在片劑或膠囊中，或成為緩釋可植入裝置。提高制備若干溶解速率不同的顆粒并且將顆粒的混合物填充到膠囊中可以改進(jìn)技術(shù)。片劑和膠囊可以用在預(yù)定時(shí)間內(nèi)耐溶解的薄膜包衣。腸胃外制劑也可以是長效的，通過將化合物溶于或懸浮在油性或乳化載體中使其僅在血清中緩慢分散。
下列實(shí)施例舉例說明但不限定本發(fā)明。
實(shí)施例概括地說，實(shí)施例1-7涉及本發(fā)明代表性化合物的合成。實(shí)施例8公開了用于分析化合物阻斷IL-6生產(chǎn)的能力的人體骨細(xì)胞共培養(yǎng)體系。實(shí)施例9公開了本發(fā)明的代表性化合物在實(shí)施例8的人體骨共培養(yǎng)體系中的活性。實(shí)施例9-16進(jìn)一步提供了顯示本發(fā)明代表性化合物活性的試驗(yàn)數(shù)據(jù)。
實(shí)施例12-(4-羥基芐基丙酮)-5-甲氧基苯酚 向3-甲氧基苯酚(50g，0.40mol)、4-羥基苯基乙酸(71g，0.46mol)和ZnCl2(174g，1.28mol)加入POCl3(100ml，1.6mol)。該混合物在65℃下攪拌2小時(shí)，傾入冰水(2L)并且攪拌直至冰溶化。傾析澄清上清液，殘余物用水(1L)漂洗，在EtOAc和水之間分配。有機(jī)層用鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，過濾和濃縮。所得油通過層析純化(SiO2，20％EtOAc/正己烷)提供2-(4-羥基芐基丙酮)-5-甲氧基苯酚(34.1g，33％收率)，為白色固體；mp 137-140℃。
實(shí)施例22-(4-三異丙基甲硅烷氧基芐基丙酮)-5-甲氧基苯酚 向2-(4-羥基芐基丙酮)-5-甲氧基苯酚(10g，0.038mole)、NEt3(6ml，0.042mole)在CH2Cl2(50ml)中的混合物加入三異丙基甲硅烷基氯(9ml，0.042mole)。該混合物攪拌22小時(shí)，濃縮，殘余物在EtOAc和H2O之間分配。有機(jī)層用NaOH(1N)、HCI(1N)和鹽水洗滌。將有機(jī)層干燥(MgSO4)，過濾和濃縮。殘余物用正己烷處理得到2-(4-三異丙基甲硅烷氧基芐基丙酮)-5-甲氧基苯酚(6.2g，38％收率)，為白色固體；mp 66-68℃。
實(shí)施例33-苯基-4-(4-羥基芐基)-7-甲氧基香豆素 向2-(4-三異丙基甲硅烷氧基芐基丙酮)-5-甲氧基苯酚(4g，9.6mmole)、K2CO3(4g，29mmole)在CH3CN(50ml)中的混合物加入苯基乙酰氯(2.3ml，14mmole)。該混合物在回流下攪拌22小時(shí)，傾入H2O(0℃)(500ml)，用EtOAc(2x)提取。將有機(jī)層干燥(MgSO4)，過濾和濃縮。殘余物與Et2O攪拌，過濾所得固體并且重結(jié)晶(EtOH)，得到3-苯基-4-(4-羥基芐基)-7-甲氧基香豆素(0.88g，15％收率)為白色固體；mp 235-236℃。
實(shí)施例43-苯基-4-[4-(2-{哌啶-1-基})乙氧基]-芐基-7-甲氧基香豆素
3-苯基-4-(4-羥基芐基)-7-甲氧基香豆素(0.50g，1.39mmoles)、K2CO3(0.58g，4.18mmoles)、2-氯乙基哌啶鹽酸鹽(0.41g，2.22mmoles)和丙酮(50ml)在回流下加熱6小時(shí)。濃縮溶劑，令固體在EtOAc和H2O之間分配。有機(jī)層用NaOH(1N)、鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，過濾和濃縮。殘余物與HCl(20％存在于EtOAc中)攪拌，過濾固體，得到3-苯基-4-[4-(2-{哌啶-1-基})乙氧基]芐基-7-甲氧基香豆素(0.57g，87％收率)；mp 171-172℃。
實(shí)施例53-苯基-4-[4-(2-{哌啶-1-基})乙氧基]-芐基-7-羥基香豆素 3-苯基-4-[4-(2-{哌啶-1-基})乙氧基]-芐基-7-甲氧基香豆素(0.10g，0.20mmole)、HOAc(冰)(15ml)和HBr(48％，15ml)的混合物回流48小時(shí)。該混合物在EtOAc(120ml)和NaOH(1N，120mol)之間分配，水層用EtOAc洗滌。隨后酸化水層(濃HCI，pH1-2)，過濾，得到3-苯基-4-[4-(2-{哌啶-1-基})乙氧基]-芐基-7-羥基香豆素(0.88g，99％收率)；mp 160-161℃。
實(shí)施例63-(4-氟苯基)-4-[4-(1-甲基哌啶-3-氧基)]-芐基-7-羥基香豆素
3-(4-氟苯基)-4-[(4-羥基苯基)甲基]-7-甲氧基-2H-色烯-2-酮(0.27g，0.72mmole)在3ml CH2Cl2中的溶液用3-羥基-1-甲基哌啶(0.42g，3.6mmol)、三苯基膦(0.94g，3.6mmol)和偶氮二甲酸二乙酯(0.65g，3.6mmol)處理。反應(yīng)混合物在25℃下攪拌8小時(shí)，隨后減壓下濃縮。粗產(chǎn)物溶于4ml的1∶1 HBr(48％，水溶液)和冰乙酸的溶液。所得溶液在90℃下加熱12小時(shí)。濃縮反應(yīng)混合物，所得殘余物用10ml飽和NaHCO3水溶液中和。含水混合物用CH2Cl2(3×15ml)提取，將合并的有機(jī)層干燥(MgSO4)，隨后減壓下濃縮。通過閃式色譜(SiO2，CH2C2/MeOH，10∶1)純化后分離出產(chǎn)物(106mg，32％)。
另外，3-(4-氟苯基)-4-[(4-羥基苯基)甲基]-7-甲氧基-2H-色烯-2-酮與下列對映體(a)或(b)之一、在PPh3和偶氮二甲酸二乙酯(DEAD)的存在下反應(yīng)，隨后與HBr/HOAc反應(yīng)，得到相應(yīng)的對映體產(chǎn)物。
實(shí)施例7其它代表性化合物利用上述方法，制備表I中的化合物。
表I代表性化合物

苯環(huán)的4位，除非另外說明 苯環(huán)的3位實(shí)施例8人骨細(xì)胞共培養(yǎng)體系按照上述方法進(jìn)行由正常成年股骨的破骨細(xì)胞自沒有代謝骨疾病癥狀的患者的增殖(Kung Sutherland等，OsteoporosisInternational 5335-343，1995；Wong等，J Bone Miner5803-813，1990)。清除骨碎片上粘著的組織和血液，在含有Ham氏F12的培養(yǎng)基中培養(yǎng)4周，所述培養(yǎng)基中補(bǔ)充有28mM HEPES，pH7.4、10％FCS、1.1mM CaCl2、2mM谷酰胺和1％抗生素-抗真菌劑。融合后，收獲細(xì)胞并且用含有耐新霉素基因的逆轉(zhuǎn)錄病毒載體(pLXSN)和人體乳頭瘤病毒(HPV18)E6和E7同源基因(concogene)無限增殖化(International Journal of Oncology 6167-174，1995)。在含有G418(600g/ml)的培養(yǎng)基中挑選無限增殖化破骨細(xì)胞。
人體U937單細(xì)胞系(由市售細(xì)胞通過連續(xù)稀釋克隆)保持在含有10％FCS和1％抗生素-抗真菌劑的RPMI 1640培養(yǎng)基中。
共培養(yǎng)體系建立如下。將人體破骨細(xì)胞鋪板在96孔皿內(nèi)，密度達(dá)到5×104個(gè)細(xì)胞/孔。存在于RPMI培養(yǎng)基中的U937細(xì)胞(5×104個(gè)細(xì)胞/孔)覆蓋在破骨細(xì)胞上。用100nM PMA誘導(dǎo)破骨細(xì)胞樣細(xì)胞的形成。為了測定化合物或中和抗體對IL-6(Sigma)和GM-CSF(Pharmingen)對于破骨細(xì)胞樣細(xì)胞的形成的影響，在加入PMA之前30分鐘加入化合物或抗體。96小時(shí)后停止培養(yǎng)并且進(jìn)行組織化學(xué)或免疫組織化學(xué)分析。
實(shí)施例9代表性化合物在人骨共培養(yǎng)中的活性在實(shí)施例8的人骨共培養(yǎng)體系中分析實(shí)施例5的化合物(即表1的化合物1)并且測定出對于IL-6和GM-CSF的IC50分別為10nM和38nM。
實(shí)施例10代表性化合物對HOB細(xì)胞中IL-6和GM-CSF生產(chǎn)的作用將人體破骨細(xì)胞(HOB)鋪板在96孔皿內(nèi)使其在常規(guī)HOB培養(yǎng)基(Ham氏F12，補(bǔ)充有28mM HEPES，pH7.4、10％FCS、1.1mM CaCl2、2mM谷酰胺和1％抗生素-抗真菌劑)中的密度為7×103個(gè)細(xì)胞/孔。次日，細(xì)胞用化合物1或載體(0.2％DMSO)處理30分鐘，隨后聯(lián)合加入IL-1β(1ng/ml)和TNF-α(10ng/ml)。培養(yǎng)持續(xù)18至24小時(shí)。利用市售ELISA試劑盒(Endogen，Cambridge，MA)測定培養(yǎng)基中IL-6和GM-CSF水平。該試驗(yàn)的結(jié)果如圖1A中所示的IL-6抑制作用，和圖IB中所示的GM-CSF抑制作用。這些附圖還呈現(xiàn)己烯雌酚(DES)和雷洛昔芬的比較數(shù)據(jù)。
實(shí)施例11代表性化合物對RA細(xì)胞內(nèi)IL-6生產(chǎn)的作用將原發(fā)性類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎滑膜細(xì)胞鋪板在96孔皿中使其在無酚紅DMEM中的密度為8×103細(xì)胞/孔，該DMEM中補(bǔ)充有2mM谷酰胺、1％抗生素-抗真菌劑和10％炭提FCS。次日，細(xì)胞用化合物1或載體(0.2％DMSO)處理30分鐘，隨后聯(lián)合加入IL-1β(2ng/ml)和TNF-α(2ng/ml)。培養(yǎng)持續(xù)18至24小時(shí)。利用如上所述的市售EndogenELISA試劑盒測定培養(yǎng)基中的IL-6。試驗(yàn)的結(jié)果如圖2所示，并且比較DES和雷洛昔芬的活性。
實(shí)施例12代表性化合物對乳腺癌細(xì)胞增生的作用將MCF-7乳腺癌細(xì)胞鋪板在24孔皿內(nèi)使其在無酚紅DMEMF-12(1∶1)培養(yǎng)基中的密度為5×103個(gè)細(xì)胞/孔，該培養(yǎng)基中含有1％抗生素、0.05％β-巰基乙醇、0.01％乙醇胺、0.42ng/ml亞硒酸鈉和5％炭提FCS。次日加入化合物1和載體(0.2％DMSO)，并且每隔48小時(shí)更新培養(yǎng)基。9天后停止培養(yǎng)，利用Cyquant試劑盒(MolecularProbes，Eugene，OR)分析增殖作用。該試驗(yàn)的結(jié)果如圖3所示，包括他莫昔芬和雷洛昔芬以及它們與雌二醇的聯(lián)合形式的對比數(shù)據(jù)。
實(shí)施例13代表性化合物對前列腺癌細(xì)胞增殖的作用將DU-145前列腺癌細(xì)胞鋪板在96孔皿內(nèi)，使其在無酚紅MEMEagles培養(yǎng)基中的密度為2×103細(xì)胞/孔，該培養(yǎng)基中含有Earles’平衡鹽、1％抗生素-抗真菌劑、2mM谷氨酰胺、0.1mM非必需氨基酸、1mM丙酮酸鈉和10％炭提FCS。次日加入化合物1和載體(0.2％DMSO)，并且每隔48小時(shí)更新培養(yǎng)基。5天后停止培養(yǎng)，利用上述Cyquant試劑盒分析增殖作用。該試驗(yàn)的結(jié)果如圖4所示，具有DES的對比數(shù)據(jù)。
實(shí)施例14固相ER結(jié)合試驗(yàn)在固相3H-雌激素競爭性試驗(yàn)中評估與人體雌激素受體(ER-α和ER-β)的結(jié)合，采用McGuire，Cancer-Res.384289-4291，1978所述方法。簡單而言，把人重組ER-α(15nM)或ER-β(50nM)固定在96孔微量滴定平板。室溫下在與30nM3H-雌二醇1小時(shí)的競爭中評價(jià)試驗(yàn)化合物和ER的結(jié)合作用。該試驗(yàn)的結(jié)果如表2所示，是至少3個(gè)不同試驗(yàn)的平均值。并行測試參比化合物，其作為各試驗(yàn)的整體組成部分用來確保所得結(jié)果的有效性。
表2固相ER結(jié)合Ki(nM)受體 化合物I 他莫昔芬 雷洛昔芬 鹽酸雌二醇試驗(yàn) (鹽酸鹽)檸檬酸鹽ER-α 1.4 72 0.40.8ER-β 7.3 173 13 2.5
發(fā)現(xiàn)他莫昔芬、雷洛昔芬和雌二醇的結(jié)合數(shù)據(jù)與已公開文獻(xiàn)中有關(guān)這些化合物的數(shù)值相適應(yīng)。將化合物1(HCI鹽的形式)和ER-α和ER-β的結(jié)合與17β-雌二醇、他莫昔芬檸檬酸鹽和雷洛昔芬·HCl的結(jié)合作比較?；衔颪o.1以高親和力(類似于雌二醇)結(jié)合ER-α和ER-β。發(fā)現(xiàn)對ER-β的親和力略微低于對ER-α的親和力，這對于多數(shù)ER配體是典型的。
實(shí)施例15子宮傾向如本發(fā)明所述，希望所述化合物起選擇性雌激素受體調(diào)節(jié)劑或SERM的作用。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方式中，SERM并沒有表現(xiàn)出在識別試驗(yàn)中所評估的子宮傾向，例如未成熟大鼠子宮生物鑒定(Robertson等，Biol.Reprod.54183-196，1996；Medlock等，Biol.Reprod.561239-1244，1997；Martel等，Endocrinology 1392486-2492，1998；Hyder等，Cancer Cells 120165-171，1997)，和卵巢切除大鼠子宮生物測定(Sato等，F(xiàn)ASEB J.10905-912，1996；Ruenitz等，Bone 23537-542，1998；Luo等，Endocrinology139；2645-2656，1998；Ke等，Bone 2031-39，1997)。這些試驗(yàn)同時(shí)測定特定化合物對子宮濕重和干重的影響，并且提供組織學(xué)數(shù)據(jù)。
化合物1與雌激素和雷洛昔芬-HCl并行在3天齡未成熟大鼠子宮生物鑒定中利用皮下(s.c.)給藥(Medlock等，見上文)進(jìn)行對比試驗(yàn)。雌激素使子宮重量提高4.5倍，其為已公開文獻(xiàn)的數(shù)值(Ashby等，Regul.Toxicol.Pharmacol.25226-231，1997；Medlock等，見上文)。雷洛昔芬HCl在1mg/kg的劑量下引起子宮重量高達(dá)50％的增加，該結(jié)果也符合已公開的數(shù)據(jù)(Ashby等，見上文)?；衔?使子宮重量增加約30％，這與載體處理動(dòng)物(即PEG-400)沒有顯著性差異。雷洛昔芬HCl和化合物1皆表現(xiàn)出鐘形劑量反應(yīng)，這是SERM所典型的。
化合物1也與17β-雌二醇和雷洛昔芬HCl并行在28天子官生物鑒定中在卵巢切除大鼠中作對比試驗(yàn)(Ke等，見上文)。全部這三種化合物每天通過皮下注射給藥。預(yù)防由卵巢切除術(shù)引起的子宮重量損失的雌激素使子宮重量增加550％。這些結(jié)果符合已公開的數(shù)據(jù)(Grese等，Proc.Nat.Acad.Sci.USA 9414105-14110，1997；Ashby等，見上文；Ke等，見上文)。據(jù)報(bào)導(dǎo)雷洛昔芬·HCl引起子宮重量增加約70％(Grese等，見上文；Ashby等，見上文)。化合物1使子宮重量增加約40％，其明顯低于雷洛昔芬-HCl介導(dǎo)的子宮重量增加。這些結(jié)果支持了由未成熟大鼠子宮生物鑒定中獲得化合物No.1沒有表現(xiàn)出顯著子宮傾向的數(shù)據(jù)。所以，這種化合物對于預(yù)防和/或治療癌癥和骨質(zhì)疏松癥以及心血管疾病和神經(jīng)變性疾病如阿耳茨海默氏病具有顯著功效。
實(shí)施例16對比試驗(yàn)化合物1與Lednicer等，J.Med.Chem.8725-726，1965的化合物作對比試驗(yàn)。更具體地說，該參照物涉及基于香豆素的化合物，其被建議為雌激素拮抗劑。這些化合物之一(即表IV的化合物20，此后為“L-20”)具有下面的結(jié)構(gòu)化合物“L-20” 上述化合物和本發(fā)明的化合物38在實(shí)施例14的ER結(jié)合試驗(yàn)和實(shí)施例8的人骨培養(yǎng)體系中比較測試它們對IL-6的活性。這些試驗(yàn)的結(jié)果如表3所示。
表3ER結(jié)合試驗(yàn) IL-6活性ER-α(KI，μM) ER-β(KI，μM) (IC50，μM)化合物380.691.56 0.175“L-20” ＞10＞10 ＞1應(yīng)理解，雖然本發(fā)明的具體實(shí)施方式
在此以舉例為目的作了描述，在不脫離本發(fā)明的實(shí)質(zhì)和范圍下可以進(jìn)行多種改變。所以，本發(fā)明不受限制，但由下面的權(quán)利要求書限定。
權(quán)利要求
1.具有以下結(jié)構(gòu)的化合物 或其立體異構(gòu)體、前藥和藥學(xué)可接受鹽，其中n是0、1、2、3或4；p是1或2；R1是未取代或取代C6-12芳基、C7-12芳烷基、C3-12雜環(huán)或C4-16雜環(huán)烷基；R2是NRaRb，其中Ra和Rb獨(dú)立地為氫、C1-8烷基、C6-12芳基或雜環(huán)，其中Ra和Rb至多被三個(gè)獨(dú)立選自C1-6烷基、鹵素、C1-6烷氧基、羥基和羧基的取代基任選取代；或R2是以下結(jié)構(gòu)的雜環(huán) 其中m1和m2獨(dú)立地是0、1或2，和m1和m2不同時(shí)為0，A是CH2、O、S或NH，Z表示0、1、2或3個(gè)雜環(huán)取代基，其選自鹵素、C1-8烷基、C6-12芳基、C7-12芳烷基、C3-12雜環(huán)或C4-16雜環(huán)烷基；并且其中所述雜環(huán)上的任何氫原子可以與該雜環(huán)的相鄰原子上的氫原子一起構(gòu)成雙鍵；R3是氫、R4、C(＝O)R4、C(＝O)OR4、CONHR4、CONR4R5或SO2NR5R5；R4和R5獨(dú)立地為C1-8烷基、C6-12芳基、C7-12芳烷基或含有至多兩個(gè)選自O(shè)、NR6和S(O)q的雜原子的5-或6-元雜環(huán)，其中上述各基團(tuán)被1至3個(gè)獨(dú)立選自R7的取代基任選取代，和q為0、1或2；R6是氫或C1-4烷基；和R7是氫、鹵素、羥基、C1-6烷基、C1-4烷氧基、C1-4酰氧基、C1-4硫基、C1-4烷基亞硫?；1-4烷基磺?；?羥基)C1-4烷基、C6-12芳基、C7-12芳烷基、COOH、CN、CONHOR8、SO2NHR8、NH2、C1-4烷基氨基、C1-4二烷基氨基、NHSO2R8、NO2、或5-或6-元雜環(huán)，其中各自出現(xiàn)的R8獨(dú)立地為C1-6烷基。
2.權(quán)利要求1的化合物，其中R1是未取代或取代C6-12芳基。
3.權(quán)利要求2的化合物，其中R1是未取代或取代苯基。
4.權(quán)利要求3的化合物，其中R1是未取代苯基。
5.權(quán)利要求3的化合物，其中R1是取代苯基。
6.權(quán)利要求5的化合物，其中R1是4-鹵代苯基、4-甲基苯基、4-羥基苯基、4-三氟甲苯基、3-鹵代苯基、2-鹵代苯基、2，4-二鹵代苯基、3，4-二鹵代苯基，其中鹵素為氟、氯、溴或碘。
7.權(quán)利要求1的化合物，其中R1是未取代或取代雜芳基。
8.權(quán)利要求7的化合物，其中R1是取代或未取代吡啶基或硫代苯基。
9.權(quán)利要求1的化合物，其中R1是未取代或取代C7-12芳烷基。
10.權(quán)利要求9的化合物，其中R1是未取代或取代芐基。
11.權(quán)利要求1的化合物，其中R1是未取代或取代C3-12雜環(huán)或C4-16雜環(huán)烷基。
12.權(quán)利要求1的化合物，其中n是2。
13.權(quán)利要求1的化合物，其中n是0、1、3或4。
14.權(quán)利要求1的化合物，其中p是1。
15.權(quán)利要求1的化合物1，其中p是2。
16.權(quán)利要求1的化合物，其中R3是氫。
17.權(quán)利要求1的化合物，其中R3是C(＝O)(C1-8烷基)或C(＝O)(C6-12芳基)。
18.權(quán)利要求1的化合物，其中R3是C(＝O)O(C1-8烷基)、SO2NH2或CONH2。
19.權(quán)利要求1的化合物，其中R2是下列結(jié)構(gòu)的雜環(huán)
20.權(quán)利要求19的化合物，其中m1和m2為1。
21.權(quán)利要求20的化合物，其中A為CH2。
22.權(quán)利要求21的化合物，其中R2為哌啶-1-基。
23.權(quán)利要求20的化合物，其中A為0。
24.權(quán)利要求23的化合物，其中R2是嗎啉-4-基。
25.權(quán)利要求19的化合物，其中m1是1和m2是0。
26.權(quán)利要求25的化合物，其中A是CH2和R2是被0或1個(gè)Z取代基取代的咪唑啉-2-基。
27.權(quán)利要求19的化合物，其中R2是被1或1個(gè)Z取代基取代的咪唑-1-基或咪唑-2-基。
28.權(quán)利要求1的化合物，其中R2-(CH2)n-O-部分附著在苯環(huán)的4位。
29.權(quán)利要求1的化合物，其中R2-(CH2)n-O-部分附著在苯環(huán)的3位。
30.權(quán)利要求31的化合物，具有結(jié)構(gòu) 其中，(a)每一個(gè)X獨(dú)立地是鹵素或三氟甲基和(b)X出現(xiàn)在苯環(huán)的2-和4-位上，或4-位上。
31.權(quán)利要求30的化合物，具有結(jié)構(gòu) 其中X為鹵素。
32.一種藥物組合物，其中含有權(quán)利要求1的化合物以及藥學(xué)可接受載體或稀釋劑。
33.一種在有需要的動(dòng)物中抑制細(xì)胞因子的方法，包括給該動(dòng)物施用有效量的權(quán)利要求32的組合物。
34.權(quán)利要求33的方法，其中所述細(xì)胞因子為IL-6。
35.權(quán)利要求33的方法，其中所述細(xì)胞因子為GM-CSF。
36.一種在有需要的動(dòng)物中治療骨吸收性疾病的方法，包括給該動(dòng)物施用有效量的權(quán)利要求32的組合物。
37.權(quán)利要求36的方法，其中所述骨吸收性疾病為骨質(zhì)疏松癥。
38.權(quán)利要求36的方法，其中所述骨吸收性疾病為轉(zhuǎn)移骨癌、矯形植入物的溶骨損害、佩吉特氏病，或與甲狀旁腺機(jī)能亢進(jìn)有關(guān)的骨損失。
39.一種在有需要的動(dòng)物中治療與IL-6相關(guān)的疾病的方法，包括給該動(dòng)物施用有效量的的權(quán)利要求32的組合物。
40.權(quán)利要求39的方法，其中所述癌癥為乳腺癌、前列腺癌、結(jié)腸癌、子宮內(nèi)膜癌、多發(fā)性骨髓瘤、腎細(xì)胞癌或子宮頸癌。
41.一種在需要其的動(dòng)物中治療關(guān)節(jié)炎的方法，包括給該動(dòng)物施用有效量的權(quán)利要求32的組合物。
42.權(quán)利要求41的方法，其中所述關(guān)節(jié)炎為類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎。
43.一種在表達(dá)ER細(xì)胞中調(diào)節(jié)基因表達(dá)的方法，包括令該細(xì)胞和有效量的權(quán)利要求1的化合物接觸。
44.權(quán)利要求43的方法，其中ER為ER-α。
45.權(quán)利要求43的方法，其中所述細(xì)胞是骨骼、膀胱、子宮、卵巢、前列腺、睪丸、附睪、胃腸道、腎臟、乳腺、眼、心臟、血管壁、免疫系統(tǒng)、肺、腦垂體、海馬或下丘腦的細(xì)胞。
46.一種在表達(dá)ER組織中調(diào)節(jié)ER的方法，包括令該組織與有效量的權(quán)利要求1的化合物接觸。
47.權(quán)利要求46的方法，其中ER為ER-α。
48.權(quán)利要求46的方法，其中所述細(xì)胞是骨骼、膀胱、子宮、卵巢、前列腺、睪丸、附睪、胃腸道、腎臟、乳腺、眼、心臟、血管壁、免疫系統(tǒng)、肺、腦垂體、海馬或下丘腦的細(xì)胞。
49.一種治療雌激素相關(guān)性疾病的方法，包括給需要其的動(dòng)物施用有效量的權(quán)利要求32的組合物。
50.權(quán)利要求49的方法，其中所述雌激素相關(guān)性疾病為乳腺癌、骨質(zhì)疏松癥、子宮內(nèi)膜異位、心血管疾病、高膽固醇血癥、前列腺肥大、前列腺癌、肥胖、白內(nèi)障、熱潮紅、皮膚效應(yīng)、心境波動(dòng)、失憶、前列腺癌、絕經(jīng)綜合征、II型糖尿病、阿耳茨海默氏病、尿失禁、胃腸道疾病、精子發(fā)生、損傷后的血管保護(hù)、子宮內(nèi)膜異位、學(xué)習(xí)和記憶、CNS效應(yīng)、血脂水平、痤瘡、多毛癥、實(shí)體癌、多發(fā)性骨髓瘤、淋巴瘤，或與接觸環(huán)境化學(xué)品或天然激素失衡有關(guān)的不良生殖作用。
51.權(quán)利要求43的方法，其中ER為ER-β。
52.權(quán)利要求46的方法，其中ER為ER-β。
53.權(quán)利要求30的方法，其中鹵素為氟或氯。
54.權(quán)利要求33的方法，其中化合物具有以下結(jié)構(gòu) 其中，(a)每一個(gè)X獨(dú)立地是鹵素或三氟甲基和(b)X出現(xiàn)在苯環(huán)的2-和4-位上，或4-位上。
55.權(quán)利要求54的方法，其中的鹵素是氟或氯。
56.權(quán)利要求36的方法，其中化合物具有以下結(jié)構(gòu) 其中，(a)每一個(gè)X獨(dú)立地是鹵素或三氟甲基和(b)X出現(xiàn)在苯環(huán)的2-和4-位上，或4-位上。
57.權(quán)利要求56的方法，其中的鹵素是氟或氯。
58.權(quán)利要求39的方法，其中化合物具有以下結(jié)構(gòu) 其中，(a)每一個(gè)X獨(dú)立地是鹵素或三氟甲基和(b)X出現(xiàn)在苯環(huán)的2-和4-位上，或4-位上。
59.權(quán)利要求58的方法，其中的鹵素是氟或氯。
60.權(quán)利要求41的方法，其中化合物具有以下結(jié)構(gòu) 其中，(a)每一個(gè)X獨(dú)立地是鹵素或三氟甲基和(b)X出現(xiàn)在苯環(huán)的2-和4-位上，或4-位上。
61.權(quán)利要求60的方法，其中的鹵素是氟或氯。
62.權(quán)利要求43的方法，其中化合物具有以下結(jié)構(gòu) 其中，(a)每一個(gè)X獨(dú)立地是鹵素或三氟甲基和(b)X出現(xiàn)在苯環(huán)的2-和4-位上，或4-位上。
63.權(quán)利要求62的方法，其中的鹵素是氟或氯。
64.權(quán)利要求46的方法，其中化合物具有以下結(jié)構(gòu) 其中，(a)每一個(gè)X獨(dú)立地是鹵素或三氟甲基和(b)X出現(xiàn)在苯環(huán)的2-和4-位上，或4-位上。
65.權(quán)利要求64的方法，其中的鹵素是氟或氯。
66.權(quán)利要求49的方法，其中化合物具有以下結(jié)構(gòu) 其中，(a)每一個(gè)X獨(dú)立地是鹵素或三氟甲基和(b)X出現(xiàn)在苯環(huán)的2-和4-位上，或4-位上。
67.權(quán)利要求66的方法，其中的鹵素是氟或氯。
68.權(quán)利要求30的化合物，其中 代表的基團(tuán)是 或
69.權(quán)利要求54的化合物，其中 代表的基團(tuán)是 或
70.權(quán)利要求56的化合物，其中 代表的基團(tuán)是 或
71.權(quán)利要求58的化合物，其中 代表的基團(tuán)是 或
72.權(quán)利要求60的化合物，其中 代表的基團(tuán)是 或
73.權(quán)利要求62的化合物，其中 代表的基團(tuán)是 或
74.權(quán)利要求64的化合物，其中 代表的基團(tuán)是 或
75.權(quán)利要求66的化合物，其中 代表的基團(tuán)是 或
76.具有以下結(jié)構(gòu)的化合物 或其立體異構(gòu)體、前藥和藥學(xué)可接受鹽，其中n是0、1、2、3或4；p是0；R1是未取代或取代C6-12芳基、C7-12芳烷基、C3-12雜環(huán)或C4-16雜環(huán)烷基；R2是NRaRb，其中Ra和Rb獨(dú)立地為氫、C1-8烷基、C6-12芳基或雜環(huán)，其中Ra和Rb至多被三個(gè)獨(dú)立選自C1-6烷基、鹵素、C1-6烷氧基、羥基和羧基的取代基任選取代；或R2是以下結(jié)構(gòu)的雜環(huán) 其中m1和m2獨(dú)立地是0、1或2，和m1和m2不同時(shí)為0，A是CH2、O、S或NH，Z表示0、1、2或3個(gè)雜環(huán)取代基，其選自鹵素、C1-8烷基、C6-12芳基、C7-12芳烷基、C3-12雜環(huán)或C4-16雜環(huán)烷基；并且其中所述雜環(huán)上的任何氫原子可以與該雜環(huán)的相鄰原子上的氫原子一起構(gòu)成雙鍵；R3是氫、C(＝O)R4、C(＝O)OR4、CONHR4、CONR4R5或SO2NR5R5；R4和R5獨(dú)立地為C1-8烷基、C6-12芳基、C7-12芳烷基或含有至多兩個(gè)選自O(shè)、NR6和S(O)q的雜原子的5-或6-元雜環(huán)，其中上述各基團(tuán)被1至3個(gè)獨(dú)立選自R7的取代基任選取代，和q為0、1或2；R6是氫或C1-4烷基；和R7是氫、鹵素、羥基、C1-6烷基、C1-4烷氧基、C1-4酰氧基、C1-4硫基、C1-4烷基亞硫?；?、C1-4烷基磺?；?、(羥基)C1-4烷基、C6-12芳基、C7-12芳烷基、COOH、CN、CONHOR8、SO2NHR8、NH2、C1-4烷基氨基、C1-4二烷基氨基、NHSO2R8、NO2、5-或6-元雜環(huán)，其中各自出現(xiàn)的R8獨(dú)立地為C1-6烷基。
77.權(quán)利要求76的化合物，其中R1是未取代或取代C6-12芳基。
78.權(quán)利要求77的化合物，其中R1是未取代或取代苯基。
79.權(quán)利要求78的化合物，其中R1是未取代苯基。
80.權(quán)利要求78的化合物，其中R1是取代苯基。
81.權(quán)利要求80的化合物，其中R1是4-鹵代苯基、4-甲基苯基、4-羥基苯基、4-三氟苯基、3-鹵代苯基、2-鹵代苯基、2，4-二鹵代苯基、3，4-二鹵代苯基，其中鹵素為氟、氯、溴或碘。
82.權(quán)利要求76的化合物，其中R1是未取代或取代雜芳基。
83.權(quán)利要求82的化合物，其中R1是取代或未取代吡啶基或硫代苯基。
84.權(quán)利要求76的化合物，其中R1是未取代或取代C7-12芳烷基。
85.權(quán)利要求84的化合物，其中R1是未取代或取代芐基。
86.權(quán)利要求76的化合物，其中R1是未取代或取代C3-12雜環(huán)或C4-16雜環(huán)烷基。
87.權(quán)利要求76的化合物，其中n是2。
88.權(quán)利要求76的化合物，其中n是0、1、3或4。
89.權(quán)利要求76的化合物，其中R3是氫。
90.權(quán)利要求76的化合物，其中R3是C(＝O)(C1-8烷基)或C(＝O)(C6-12芳基)。
91.權(quán)利要求76的化合物，其中R3是C(＝O)O(C1-8烷基)、SO2NH2或CONH2。
92.權(quán)利要求76的化合物，其中R2是下列結(jié)構(gòu)的雜環(huán)
93.權(quán)利要求92的化合物，其中m1和m2為1。
94.權(quán)利要求93的化合物，其中A為CH2。
95.權(quán)利要求94的化合物，其中R2為哌啶-1-基。
96.權(quán)利要求93的化合物，其中A為0。
97.權(quán)利要求96的化合物，其中R2是嗎啉-4-基。
98.權(quán)利要求92的化合物，其中m1是1和m2是0。
99.權(quán)利要求98的化合物，其中A是CH2和R2是被0或1個(gè)Z取代基取代的咪唑啉-2-基。
100.權(quán)利要求92的化合物，其中R2是被1或1個(gè)Z取代基取代的咪唑-1-基或咪唑-2-基。
101.權(quán)利要求76的化合物，其中R2-(CH2)n-O-部分附著在苯環(huán)的4位。
102.權(quán)利要求76的化合物，其中R2-(CH2)n-O-部分附著在苯環(huán)的3位。
103.權(quán)利要求76的化合物，具有結(jié)構(gòu)
104.權(quán)利要求76的化合物，具有結(jié)構(gòu) 其中X表示一個(gè)或多個(gè)苯基取代基。
105.權(quán)利要求103的化合物，具有結(jié)構(gòu)
106.權(quán)利要求104的化合物，具有結(jié)構(gòu)
107.權(quán)利要求106的化合物，具有結(jié)構(gòu) 其中X為鹵素。
108.一種藥物組合物，其中含有權(quán)利要求76的化合物以及藥學(xué)可接受載體或稀釋劑。
109.一種在有需要的動(dòng)物中抑制細(xì)胞因子的方法，包括給該動(dòng)物施用有效量的權(quán)利要求108的組合物。
110.權(quán)利要求109的方法，其中所述細(xì)胞因子為IL-6。
111.權(quán)利要求109的方法，其中所述細(xì)胞因子為GM-CSF。
112.一種在表達(dá)ER細(xì)胞中調(diào)節(jié)ER-β的方法，包括令該細(xì)胞和有效量的權(quán)利要求76的化合物接觸。
113.權(quán)利要求112的方法，其中與ER-α相比，細(xì)胞優(yōu)選表達(dá)ER-β。
114.權(quán)利要求113的方法，其中所述細(xì)胞是骨骼、膀胱、子宮、卵巢、前列腺、睪丸、附睪、胃腸道、腎臟、乳腺、眼、心臟、血管壁、免疫系統(tǒng)、肺、腦垂體、海馬或下丘腦的細(xì)胞。
115.一種在表達(dá)ER組織中調(diào)節(jié)ER-β的方法，包括令該組織和有效量的權(quán)利要求76的化合物接觸。
116.權(quán)利要求115的方法，其中與ER-α相比，組織優(yōu)選表達(dá)ER-β。
117.權(quán)利要求116的方法，其中所述細(xì)胞是骨骼、膀胱、子宮、卵巢、前列腺、睪丸、附睪、胃腸道、腎臟、乳腺、眼、心臟、血管壁、免疫系統(tǒng)、肺、腦垂體、海馬或下丘腦的細(xì)胞。
118.一種治療雌激素相關(guān)疾病的方法，其中包括給予需要此種治療的動(dòng)物有效量的權(quán)利要求108的藥物組合物。
119.權(quán)利要求118的方法，其中所述雌激素相關(guān)性疾病為乳腺癌、骨質(zhì)疏松癥、子宮內(nèi)膜異位、心血管疾病、高膽固醇血癥、前列腺肥大、前列腺癌、肥胖、白內(nèi)障、熱潮紅、皮膚效應(yīng)、心境波動(dòng)、失憶、前列腺癌、絕經(jīng)綜合征、II型糖尿病、阿耳茨海默氏病、尿失禁、胃腸道疾病、精子發(fā)生、損傷后的血管保護(hù)、子宮內(nèi)膜異位、學(xué)習(xí)和記憶、CNS效應(yīng)、血脂水平、痤瘡、多毛癥、實(shí)體癌、多發(fā)性骨髓瘤、淋巴瘤，或與接觸環(huán)境化學(xué)品或天然激素失衡有關(guān)的不良生殖作用。
120.一種在有需要的動(dòng)物中治療骨吸收性疾病的方法，包括給該動(dòng)物施用有效量的權(quán)利要求108的組合物。
121.權(quán)利要求114的方法，其中所述骨吸收性疾病為骨質(zhì)疏松癥。
122.權(quán)利要求114的方法，其中所述骨吸收性疾病為轉(zhuǎn)移骨癌、矯形植入物的溶骨損害、佩吉特氏病，或與甲狀旁腺機(jī)能亢進(jìn)有關(guān)的骨損失。
123.一種在有需要的動(dòng)物中治療與IL-6相關(guān)的疾病的方法，包括給該動(dòng)物施用有效量的的權(quán)利要求108的組合物。
124.權(quán)利要求123的方法，其中所述癌癥為乳腺癌、前列腺癌、結(jié)腸癌、子宮內(nèi)膜癌、多發(fā)性骨髓瘤、腎細(xì)胞癌或子宮頸癌。
125.一種在有需要的動(dòng)物中治療關(guān)節(jié)炎的方法，包括給該動(dòng)物施用有效量的權(quán)利要求108的組合物。
126.權(quán)利要求125的方法，其中所述關(guān)節(jié)炎為類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎。
127.一種在表達(dá)ER細(xì)胞中調(diào)節(jié)基因表達(dá)的方法，包括令該細(xì)胞和有效量的權(quán)利要求76的化合物接觸。
128.權(quán)利要求127的方法，其中所述細(xì)胞是骨骼、膀胱、子宮、卵巢、前列腺、睪丸、附睪、胃腸道、腎臟、乳腺、眼、心臟、血管壁、免疫系統(tǒng)、肺、腦垂體、海馬或下丘腦的細(xì)胞。
129.權(quán)利要求76的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，其中化合物具有以下結(jié)構(gòu) 或
130.一種藥物組合物，其中含有權(quán)利要求129的化合物以及藥學(xué)可接受載體或稀釋劑。
131.一種在有需要的動(dòng)物中抑制細(xì)胞因子的方法，包括給該動(dòng)物施用有效量的權(quán)利要求130的組合物。
132.一種在表達(dá)ER細(xì)胞中調(diào)節(jié)ER的方法，包括令該細(xì)胞與有效量的權(quán)利要求130的化合物接觸。
133.一種在表達(dá)ER組織中調(diào)節(jié)ER的方法，包括令該組織與有效量的權(quán)利要求130的化合物接觸。
134.一種在有此需要的動(dòng)物中治療雌激素相關(guān)性疾病的方法，包括給需要其的動(dòng)物施用有效量的權(quán)利要求130的組合物。
135.一種在有此需要的動(dòng)物中治療骨吸收疾病的方法，包括給需要其的動(dòng)物施用有效量的權(quán)利要求130的組合物。
136.一種在有此需要的動(dòng)物中治療IL6相關(guān)的癌癥的方法，包括給需要其的動(dòng)物施用有效量的權(quán)利要求130的組合物。
137.一種在有此需要的動(dòng)物中治療關(guān)節(jié)炎的方法，包括給需要其的動(dòng)物施用有效量的權(quán)利要求130的組合物。
138.一種在表達(dá)ER細(xì)胞中調(diào)節(jié)基因表達(dá)的方法，包括令該細(xì)胞與有效量的權(quán)利要求130的組合物接觸。
全文摘要
本發(fā)明公開了通過雌激素受體(ER)調(diào)節(jié)基因表達(dá)的具有結(jié)構(gòu)I的化合物，以及含有它們的藥物組合物；其中R
文檔編號A61P25/28GK1597677SQ200410042299
公開日2005年3月23日 申請日期1999年12月30日 優(yōu)先權(quán)日1998年12月30日
發(fā)明者B·M·斯坦, D·W·安德森, L·M·加約, M·S·蘇特蘭德, M·杜布勒戴, G·I·舍夫林, A·科伊斯, S·坎蒙克胡尼, R·K·雅盧里, S·S·巴格瓦特, J·A·麥基 申請人:信號藥品公司