專利名稱：松杉靈芝蛋白多糖混合物及其制備方法與應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種蛋白多糖混合物及其制備方法與應(yīng)用，特別是涉及從松杉靈芝(Ganoderma tsugae Murrill.)中得到的一種蛋白多糖混合物及其提取方法和該蛋白多糖混合物作為注射或口服藥物活性成分的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
目前臨床上治療腫瘤疾病，主要采用三種方式手術(shù)、放療和化療，但放療、化療嚴(yán)重殺傷人體正常細(xì)胞和組織，使許多患者體質(zhì)迅速下降，甚至不能持續(xù)治療。長(zhǎng)期以來(lái)，人們?cè)诓粩鄬ふ倚碌亩拘孕　⒁至雎矢叩目拱┧幬?，并取得了一定的成效。由于腫瘤的發(fā)生和擴(kuò)散與人體的免疫功能有密切關(guān)系，因此產(chǎn)生了腫瘤免疫治療法。二十世紀(jì)中后期，發(fā)現(xiàn)了一些來(lái)源于真菌類的多糖藥物，如云芝多糖、香菇多糖、裂褶菌多糖等，它們均具有提高機(jī)體免疫力及抗腫瘤的作用。這些藥物的作用機(jī)制一方面是通過(guò)宿主中介，激活機(jī)體的各種免疫活性細(xì)胞，促進(jìn)各種淋巴因子的分泌，提高機(jī)體的抵抗力，達(dá)到吞噬和消除腫瘤細(xì)胞的作用，另一方面某些多糖，特別是蛋白-多糖對(duì)癌細(xì)胞有直接殺傷作用，其特點(diǎn)是有效劑量小，抑瘤率高，毒性很小，甚至無(wú)毒，與化療藥物共同使用還可以降低化療藥物的毒副作用。與化療相比，免疫療法沒(méi)有白血球降低，嘔吐，免疫力下降等毒副作用。
松杉靈芝(Gamoderma tsugae Murrill.)是擔(dān)子菌綱，多孔菌科，靈芝屬的一種真菌，具有悠久的民間用藥歷史，藥理活性廣泛，且毒性極小。子實(shí)體為其地上部分，包括菌蓋和菌柄，一起入藥，松杉靈芝子實(shí)體的化學(xué)成分復(fù)雜，有三萜類，核苷類，生物堿類，呋喃類，氨基酸類及微量元素等等。水溶性成分主要有多糖類，糖-蛋白類，蛋白-多糖類等等。研究表明，多糖及糖-蛋白或蛋白-多糖類復(fù)合物具有提高機(jī)體免疫功能和抗癌作用。由于多糖的來(lái)源不同，分子量大小及空間三維螺旋結(jié)構(gòu)不同，特別是與蛋白質(zhì)結(jié)合方式不同，在藥理活性方面，表現(xiàn)出較大差異。MIZUNO等人從赤芝子實(shí)體中獲得分子量為100萬(wàn)和45萬(wàn)兩種水溶性多糖，經(jīng)小鼠腹腔注射給藥，以S180瘤株做實(shí)驗(yàn)，具有顯著的抑瘤作用。李榮芷，何云慶等從赤芝中獲得分子量分別為16200，24500，35000，和40000四種多糖，該四種多糖均能顯著增加正常小鼠脾細(xì)胞IL-2的產(chǎn)生。北京醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院分離出的分子量為7100-9300的靈芝多糖能促進(jìn)TNFα、TNFγ mRNA的表達(dá)，增加TNFα、TNFγ mRNA的分泌等等。目前對(duì)赤芝(Ganoderma Lucidum)和紫芝(Ganoderma Sinersis)的研究比較多。對(duì)松杉靈芝(Ganoderma tsugae Murrill.)的研究卻罕見(jiàn)報(bào)道，其中僅有2003年臺(tái)灣國(guó)際揚(yáng)名大學(xué)在美國(guó)申報(bào)了名稱為《Polysaccharide-based extract fromganoderma，pharmaceutical use thereof，and process for preparing the same》的專利，公開(kāi)了一種獲得松杉靈芝水溶性粗提物的工藝，但該工藝只是涉及到水提醇沉和脫蛋白等步驟，得到的產(chǎn)品是松杉靈芝的初級(jí)粗制品。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種松杉靈芝蛋白多糖混合物及其制備方法和以該松杉靈芝蛋白多糖混合物為注射、口服或外用治療腫瘤藥物的活性成分。
本發(fā)明所提供的松杉靈芝蛋白多糖混合物的分子量為6000-12000道爾頓，是用包括以下步驟的方法得到的1)松杉靈芝子實(shí)體粉碎物用醇脫脂，得到藥渣；2)藥渣用去離子水提取，收集提取液；3)將提取液用醇沉淀；4)沉淀物用水溶解后進(jìn)行微濾；5)濾液經(jīng)過(guò)50-80KD(5萬(wàn)-8萬(wàn)道爾頓)的超濾膜后所得濾液用3-5KD膜超濾，膜上的截留物為上柱精制前粗品。
6)為了得到精產(chǎn)品，超濾后，最后截留物上DEAE-Sepharose(F.F.)、SepharoseCL-6B或DEAE-Cellulose(Cl-)層析柱，用去離子水洗脫，收集洗脫液，經(jīng)3-5KD膜，濃縮冷凍干燥得到蛋白多糖混合物精制品。在該精制過(guò)程中，如果采用DEAE-Sepharose(F.F.)層析柱進(jìn)行層析，一般選用3×80cm規(guī)格的層析柱，上樣速度應(yīng)為0.2-0.5ml/min，用去離子水洗脫的速度應(yīng)為2-4ml/min，如果采用SepharoseCL-6B層析柱進(jìn)行層析，一般選用3×70cm規(guī)格的層析柱，上樣速度應(yīng)為0.2-0.8ml/min，用去離子水洗脫的速度應(yīng)為1-2ml/min，如果采用DEAE-Cellulose(Cl-)層析柱進(jìn)行層析，一般選用3×75cm規(guī)格的層析柱，上樣速度應(yīng)為0.25ml/min，用去離子水作流動(dòng)相洗脫柱子的速度應(yīng)為2-4ml/min。
在提取松杉靈芝蛋白多糖混合物的過(guò)程中，所述用于松杉靈芝子實(shí)體脫脂的醇為75-95％的乙醇或甲醇，乙醇或甲醇的重量為所述松杉靈芝子實(shí)體粉碎物重量的6-12倍(8-10倍最好)，脫脂在70-80℃條件下進(jìn)行，回流提取2-3小時(shí)，重復(fù)3-6次；所述藥渣用去離子水提取，收集提取液中，去離子水的重量是所述松杉靈芝子實(shí)體粉碎物重量的10-30倍(15-25倍最好)，于90-100℃(98-100℃最好)，間歇攪拌，提取2-3小時(shí)，重復(fù)3-7次，提取液濃縮至所述松杉靈芝子實(shí)體粉碎物重量的7-12倍；所述將提取液用醇沉淀，是向提取液中加入乙醇或甲醇使其終濃度達(dá)到75-85％，邊加邊攪拌，在4-10℃低溫下放置，離心(8000rpm，15min)得到沉淀；所述微濾進(jìn)行至少二次，濾膜的孔徑第一次為10μm，如果進(jìn)行二次，濾膜的孔徑分別是10μm、3μm為宜，如果進(jìn)行三次，濾膜的孔徑分別是10μm、5μm和1μm為宜。
實(shí)驗(yàn)證明，以本發(fā)明的方法制備的松杉靈芝蛋白多糖混合物為活性成分的藥物具有明顯的抑制腫瘤的作用以及提高免疫功能作用。
本發(fā)明的藥物一般制成粉針劑，也可以制成注射液、片劑、粒劑、膠囊、口服液、膏劑、霜?jiǎng)┑榷喾N形式。上述各種劑型的藥物均可以按照藥學(xué)領(lǐng)域的常規(guī)方法制備。
以本發(fā)明的方法制備的松杉靈芝蛋白多糖混合物是一種奶白色或黃白色的片狀物，質(zhì)輕，易溶于水，純度高，粘度較小，易于選用各種劑型，給藥方便。
實(shí)驗(yàn)表明，本發(fā)明的藥物抑瘤率高，毒性極小，經(jīng)動(dòng)物整體實(shí)驗(yàn)研究表明，急性毒理LD50未測(cè)出，測(cè)得最大(注射給藥)耐受量125mg/kg(小鼠)，基本無(wú)毒，具有廣闊的應(yīng)用前景。
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例1、制備松杉靈芝蛋白-多糖混合物稱取松杉靈芝子實(shí)體粉100克，加80％乙醇1升，75-78℃加熱回流2小時(shí)，重復(fù)3次，過(guò)濾，向藥渣中加去離子水2升，加熱煮沸，間隔攪拌，每次提取3小時(shí)，重復(fù)5次，過(guò)濾，合并提取液，濃縮至體積為0.5-1升，冷至室溫，加無(wú)水乙醇2.5升，邊加邊攪拌，4℃放置澄清，離心(7000-8000rpm，15min)，取沉淀加水溶解后，10μm和1μm微濾，取濾液，然后超濾過(guò)80KD，取濾液，再用3KD膜進(jìn)行超濾，所得截留物濃縮，冷凍干燥，獲得松杉靈芝蛋白-多糖混合物。
實(shí)施例2、制備松杉靈芝蛋白-多糖混合物稱取松杉靈芝子實(shí)體粉100克，加80％甲醇1.5升，80℃加熱回流3小時(shí)，重復(fù)5次，過(guò)濾，向藥渣中加去離子水4升，加熱煮沸，間隔攪拌，每次提取3小時(shí)，重復(fù)6次，過(guò)濾，合并濾液，濃縮至體積1升，冷卻，加無(wú)水甲醇4升，邊加邊攪拌，4℃放置澄清，離心(7000-8000rpm，15min)，沉淀溶入水，經(jīng)10μm、5μm和1μm微濾，取濾液經(jīng)過(guò)超濾膜80KD，取濾液，再用3KD膜進(jìn)行超濾，所得截留物濃縮，冷凍干燥，獲得松杉靈芝蛋白-多糖混合物。
實(shí)施例3、制備松杉靈芝蛋白-多糖混合物稱取50kg松杉靈芝子實(shí)體碎粉于提取罐中，加入450升90％乙醇，攪拌下，于78℃回流提取，每次2小時(shí)，重復(fù)3次，回收乙醇，藥渣加水1000升，加熱至100℃，提取3小時(shí)，重復(fù)5次，過(guò)濾，濾液合并，濃縮至體積為250升，在攪拌下，加入5倍體積無(wú)水乙醇，置4℃低溫處，澄清，離心(7000-8000rpm，15min)，沉淀用去離子水溶解，通過(guò)10μm微濾、1μm微濾，然后再經(jīng)過(guò)80KD超濾之后，用3KD膜濃縮，冷凍干燥得松杉靈芝蛋白-多糖混合物。
實(shí)施例4、制備松杉靈芝蛋白-多糖混合物精品將實(shí)施例1中得到的松杉靈芝蛋白-多糖混合物溶于去離子水后，上已平衡好的DEAE-Cellulose(Cl-)柱(3×75cm)，上樣流速為0.25ml/min，然后用去離子水作流動(dòng)相洗脫柱子，洗脫速度4ml/min，收集流出液，以紫外檢測(cè)器檢測(cè)，用記錄儀記錄流出曲線，流出液通過(guò)3KD膜，濃縮后冷凍干燥，得松杉靈芝蛋白-多糖混合物。
實(shí)施例5、制備松杉靈芝蛋白-多糖混合物精品將實(shí)施例3中得到的松杉靈芝蛋白-多糖混合物溶于去離子水后，上已平衡好的Sepharose-CL6B柱(3×70cm)，上樣流速為0.6ml/min，然后用去離子水作流動(dòng)相洗脫柱子，洗脫速度1.5ml/min，收集流出液，以紫外檢測(cè)器檢測(cè)，用記錄儀記錄流出曲線，流出液通過(guò)3KD膜，濃縮后冷凍干燥，得松杉靈芝蛋白-多糖混合物。
實(shí)施例6、抑瘤作用實(shí)驗(yàn)以不同的癌細(xì)胞為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，以環(huán)磷酰胺為陽(yáng)性對(duì)照，以生理鹽水為陰性對(duì)照，研究本發(fā)明實(shí)施例1～5得到的松杉靈芝蛋白-多糖混合物對(duì)癌細(xì)胞的抑制作用，其中抑瘤率的計(jì)算方法為 實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表1和表2所示，表明松杉靈芝蛋白-多糖混合物對(duì)小鼠S180肉瘤、小鼠肝癌H22和小鼠Lewis肺癌的生長(zhǎng)均有不同程度的抑制作用對(duì)移植于裸鼠的人體腸癌LOVO、胃癌MKN45、肝癌QGY見(jiàn)瘤后開(kāi)始給藥，均具有明顯的抗腫瘤作用，量效關(guān)系明顯。
表1、松杉靈芝蛋白-多糖混合物對(duì)鼠的腫瘤生長(zhǎng)的抑制作用 表2、松杉靈芝蛋白-多糖混合物對(duì)移植于裸鼠的人體腫瘤生長(zhǎng)的抑制作用

實(shí)施例7、松杉靈芝蛋白-多糖混合物的增效作用松杉靈芝蛋白-多糖混合物(1、0.3mg/kg)合并小劑量環(huán)磷酰胺(20mg/kg)、甲氨喋呤(2mg/kg)和絲裂霉素C(1mg/kg)后，對(duì)小鼠肝癌H22的抑制作用明顯強(qiáng)于松杉靈芝蛋白-多糖混合物粉針劑或小劑量化療藥物單獨(dú)使用。按照Webb氏分?jǐn)?shù)乘積法計(jì)算證明松杉靈芝蛋白-多糖混合物粉針劑與上述藥物有協(xié)同作用。根據(jù)以下公式計(jì)算抑瘤率

合并用藥的效應(yīng)根據(jù)Webb氏分?jǐn)?shù)乘積法計(jì)算(fa)1，2＝1-[1-(fa)1][1-(fa)2](fa)1和(fa)2分別為兩藥的抑瘤率，(fa)1，2為計(jì)算的理論相加效應(yīng)。如果合并用藥的效應(yīng)大于理論相加效應(yīng)，則表示協(xié)同。
試驗(yàn)結(jié)果如表3所示，證明小劑量松杉靈芝蛋白-多糖混合物粉針劑合并小劑量化療對(duì)小鼠肝癌H22有一定的協(xié)同作用，同時(shí)與放療合并，抑瘤作用也明顯強(qiáng)于單獨(dú)放療。
表3 松杉靈芝蛋白-多糖混合物合并CTX、MTX、MMC對(duì)小鼠肝癌H22的作用

與生理鹽水組比較*P＜0.05，**P＜0.01。
實(shí)施例8、松杉靈芝蛋白-多糖混合物對(duì)免疫功能的增強(qiáng)作用1、松杉靈芝蛋白-多糖混合物對(duì)荷瘤小鼠脾淋巴細(xì)胞增殖的增強(qiáng)作用以云芝糖肽為陽(yáng)性對(duì)照，研究松杉靈芝蛋白-多糖對(duì)荷瘤小鼠脾淋巴細(xì)胞增殖的增強(qiáng)作用，結(jié)果如表4所示，表明松杉靈芝蛋白-多糖對(duì)荷瘤小鼠脾淋巴細(xì)胞的增殖具有較強(qiáng)的增強(qiáng)作用。
表4.松杉靈芝蛋白-多糖混合物對(duì)荷瘤小鼠脾淋巴細(xì)胞增殖的影響

與荷瘤組比較**P＜0.01。
2、松杉靈芝蛋白-多糖混合物能明顯激活小鼠NK細(xì)胞活性。
靶細(xì)胞的標(biāo)記取傳代后24小時(shí)生長(zhǎng)良好的YAC-1細(xì)胞，按1×106個(gè)/ml細(xì)胞懸液加3H-TdR 10uci，于37℃，5％CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)2小時(shí)，每30分鐘振蕩一次，標(biāo)記后的細(xì)胞用培養(yǎng)液洗滌3次，重懸于培養(yǎng)液中，使細(xì)胞濃度為1×102/ml。
NK細(xì)胞活性測(cè)定C57BL/6小鼠36只，每鼠腋皮下接種Lewis肺癌細(xì)胞，隨機(jī)分為6組，每組6只，即松杉靈芝蛋白-多糖混合物，云芝糖肽膠囊500mg/kg(po×7)，荷瘤對(duì)照組(生理鹽水對(duì)照組)，另設(shè)一組正常對(duì)照組。給藥結(jié)束后次日處死動(dòng)物，無(wú)菌條件下取脾，制備脾細(xì)胞，調(diào)整細(xì)胞濃度為1×106個(gè)/ml作效應(yīng)細(xì)胞，另取已培養(yǎng)24小時(shí)YAC-1細(xì)胞，調(diào)整細(xì)胞濃度為1×104個(gè)/ml作為靶細(xì)胞，以靶細(xì)胞與效應(yīng)細(xì)胞之比為1∶100的細(xì)胞加在96孔細(xì)胞培養(yǎng)板上，加入3H-TdR 0.5uci/孔，每只動(dòng)物設(shè)雙復(fù)孔，37℃，5％CO2條件下培養(yǎng)24小時(shí)后，收集細(xì)胞，測(cè)CPM值，計(jì)算特異性抑制百分率(Pi)表示NK細(xì)胞活性。結(jié)果如表5所示，表明松杉靈芝蛋白-多糖能明顯激活小鼠NK細(xì)胞活性。

表5.松杉靈芝蛋白-多糖混合物對(duì)荷瘤小鼠NK活性的影響

與生理鹽水組比較*P＜0.05，**P＜0.01。
2、松杉靈芝蛋白-多糖混合物促進(jìn)荷瘤小鼠IL-2的產(chǎn)生C57BL/6小鼠24只，每鼠腋皮下接種Lewis肺癌細(xì)胞，隨機(jī)分為4組，每組6只，即松杉靈芝蛋白-多糖，云芝糖肽膠囊，荷瘤對(duì)照組(生理鹽水對(duì)照組)，正常對(duì)照組。給藥結(jié)束后次日處死動(dòng)物，測(cè)定IL-2的產(chǎn)生情況，結(jié)果如表6所示，表明松杉靈芝蛋白-多糖能夠促進(jìn)IL-2的產(chǎn)生，同時(shí)對(duì)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞的吞噬功能也有明顯的促進(jìn)作用。
表6.松杉靈芝蛋白-多糖混合物對(duì)荷瘤小鼠產(chǎn)生IL-2的影響

權(quán)利要求
1.一種松杉靈芝蛋白多糖混合物，是分子量為6000-1.2萬(wàn)道爾頓，用包括以下步驟的方法得到的物質(zhì)1)松杉靈芝子實(shí)體粉碎物用醇脫脂，得到藥渣；2)藥渣用去離子水提取，收集提取液；3)將提取液用醇沉淀；4)沉淀物用水溶解后進(jìn)行微濾；5)濾液經(jīng)過(guò)50-80KD的超濾膜后所得濾液用3-5KD膜超濾，膜上的截留物為產(chǎn)品。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的混合物，其特征在于所述超濾后，截留物上DEAE-Sepharose(F.F.)、SepharoseCL-6B或DEAE-Cellulose(Cl-)層析柱，用去離子水洗脫，收集洗脫液，經(jīng)3-5KD膜，濃縮冷凍干燥得到產(chǎn)品。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的混合物，其特征在于所述用于松杉靈芝子實(shí)體脫脂的醇為75-95％的乙醇或甲醇，乙醇或甲醇的重量為所述松杉靈芝子實(shí)體粉碎物重量的6-12倍，脫脂在75-80℃條件下進(jìn)行，回流提取；所述藥渣用去離子水提取，收集提取液中，去離子水的重量是所述松杉靈芝子實(shí)體粉碎物重量的10-30倍，于90-100℃，間歇攪拌提取，濃縮提取液；將所述提取液用醇沉淀，是向提取液中加入乙醇或甲醇，使其終濃度達(dá)到75-85％，離心得到沉淀；所述微濾的濾膜孔徑10μm和10μm。
4.一種制備松杉靈芝蛋白多糖混合物的方法，包括以下步驟1)松杉靈芝子實(shí)體粉碎物用醇脫脂，得到藥渣；2)藥渣用去離子水提取，收集提取液；3)將提取液用醇沉淀；4)沉淀物用去離子水溶解后進(jìn)行微濾；5)濾液經(jīng)過(guò)50-80KD的超濾膜后所得濾液用3-5KD膜超濾，膜上的截留物為產(chǎn)品。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其特征在于所述超濾后，截留物上DEAE-Sepharose(F.F.)、SepharoseCL-6B或DEAE-Cellulose(Cl-)層析柱，用去離子水洗脫，收集洗脫液，經(jīng)3-5KD膜，濃縮冷凍干燥得到產(chǎn)品。
6.根據(jù)權(quán)利要求4或5所述的方法，其特征在于所述用于松杉靈芝子實(shí)體脫脂的醇為75-95％的乙醇或甲醇，乙醇或甲醇的重量為所述松杉靈芝子實(shí)體粉碎物重量的6-12倍，脫脂在75-80℃條件下進(jìn)行，回流提取2-3小時(shí)，重復(fù)3-6次。
7.根據(jù)權(quán)利要求4或5所述的方法，其特征在于所述藥渣用去離子水提取，收集提取液中，去離子水的重量是所述松杉靈芝子實(shí)體粉碎物重量的10-30倍，于90-100℃，間歇攪拌，提取2-3小時(shí)，重復(fù)3-7次，提取液濃縮至所述松杉靈芝子實(shí)體粉碎物重量的7-12倍；所述將提取液用醇沉淀，是向提取液中加入乙醇或甲醇，使其終濃度達(dá)到75-85％，邊加邊攪拌，在低溫下放置，離心得到沉淀；所述微濾進(jìn)行至少二次，濾膜的孔徑第一次為10μm，第二次為10μm。
8.一種抗腫瘤及增強(qiáng)免疫力的藥物，它的活性成分是分子量為6000-1.2萬(wàn)道爾頓，用包括以下步驟的方法得到的物質(zhì)1)松杉靈芝子實(shí)體粉碎物用醇脫脂，得到藥渣；2)藥渣用去離子水提取，收集提取液；3)將提取液用醇沉淀；4)沉淀物用水溶解后進(jìn)行微濾；5)濾液經(jīng)過(guò)50-80KD的超濾膜后所得濾液用3-5KD膜超濾，膜上的截留物為產(chǎn)品。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的藥物，其特征在于所述超濾后，截留物上DEAE-Sepharose(F.F.)、SepharoseCL-6B或DEAE-Cellulose(Cl-)層析柱，用去離子水洗脫，收集洗脫液，經(jīng)3-5KD膜，濃縮冷凍干燥得到產(chǎn)品；所述用于松杉靈芝子實(shí)體脫脂的醇為75-95％的乙醇或甲醇，乙醇或甲醇的重量為所述松杉靈芝子實(shí)體粉碎物重量的6-12倍，脫脂在75-80℃條件下進(jìn)行，回流提取；所述藥渣用去離子水提取，收集提取液中，去離子水的重量是所述松杉靈芝子實(shí)體粉碎物重量的10-30倍，于90-100℃，間歇攪拌提取，濃縮提取液；將所述提取液用醇沉淀，是向提取液中加入乙醇或甲醇，使其終濃度達(dá)到75-85％，離心得到沉淀；所述微濾的濾膜孔徑10μm和10μm。
10.根據(jù)權(quán)利要求8或9所述的藥物，其特征在于所述藥物為注射劑、口服劑或外用劑型。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了松杉靈芝蛋白多糖混合物及其制備方法與應(yīng)用，本發(fā)明的松杉靈芝蛋白多糖混合物，是分子量為6000－1.2萬(wàn)道爾頓，用包括以下步驟的方法得到的物質(zhì)1)松杉靈芝子實(shí)體粉碎物用醇脫脂，得到藥渣；2)藥渣用去離子水提取，收集提取液；3)將提取液用醇沉淀；4)沉淀物用水溶解后進(jìn)行微濾；5)濾液經(jīng)過(guò)50－80KD的超濾膜后所得濾液用3－5KD膜超濾，膜上的截留物經(jīng)DEAE－Cellulose層析分離后得蛋白多糖混合物精制品。本發(fā)明的松杉靈芝蛋白多糖混合物具有顯著的抑制腫瘤和提高機(jī)體免疫功能作用，具有廣闊的藥用價(jià)值。
文檔編號(hào)A61K38/16GK1715293SQ200410050150
公開(kāi)日2006年1月4日 申請(qǐng)日期2004年6月28日 優(yōu)先權(quán)日2004年6月28日
發(fā)明者張潔, 姜大成, 費(fèi)曉方 申請(qǐng)人:長(zhǎng)春中醫(yī)學(xué)院