專利名稱：天麻素衍生物，其制備方法，藥物組合物及其用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及天麻素衍生物，其制備方法，含有它的藥物組合物及其作為藥物的應用。具體講，本發(fā)明天麻素衍生物為4-(乙酰氧甲基)苯基吡喃葡萄糖苷，英文名為4-(Acetoxymethyl)phenylglucoside。
背景技術(shù)：
天麻素為中國傳統(tǒng)名貴藥材蘭科植物天麻中主要活性物質(zhì)，屬酚苷類化合物，具有鎮(zhèn)靜、安眠、鎮(zhèn)痛的功效，用于眩暈梅尼埃病、藥毒性眩暈、外傷性眩暈、突發(fā)性耳聾、前庭神經(jīng)元炎、椎基底動脈供血不足等；神經(jīng)痛三叉神經(jīng)痛、坐骨神經(jīng)痛、枕大神經(jīng)痛等；頭痛血管性頭痛、偏頭痛、神經(jīng)衰弱及神衰綜合征等；還可用于輔助治療癲癇等癥。天麻素的結(jié)構(gòu)為 上述結(jié)構(gòu)表明，天麻素中苷糖基和苷元中的-OH基團使其脂溶性低，不易直接透過血腦屏障。其進入體內(nèi)后，天麻素先水解生成天麻苷元，而后天麻苷元透過血腦屏障，結(jié)合到苯二氮受體，增強γ氨基丁酸受體的親和力，進而發(fā)揮中樞抑制效應，因此存在起效慢的缺點。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明人經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)通過將天麻素苯環(huán)上羥基酯化得到天麻素衍生物4-(乙酰氧甲基)苯基吡喃葡萄糖苷，則改善了天麻素的脂溶性，所得天麻素衍生物易于透過血腦屏障，且活性不低于天麻素。
本發(fā)明因此涉及式I的天麻素衍生物， 其中， 表示β型鍵。
本發(fā)明還涉及制備式I天麻素衍生物的方法，其包括將下式天麻素 與苯甲醛(PhCHO)在濃鹽酸和/或ZnCl2存在下反應，生成式2化合物
將式2化合物與醋酸反應，得式I天麻素衍生物 本發(fā)明還涉及一種藥物組合物，其包括式I天麻素衍生物及藥用輔料。
本發(fā)明還涉及式I化合物在制備藥物中用途。
根據(jù)本發(fā)明，本發(fā)明式I天麻素衍生物可由下面反應路線所示制備反應路線
在上面反應路線中，取濃鹽酸10～30ml，加入苯甲醛3～6g，機械攪拌。取天麻素3～5g，少量水溶解后用加料漏斗緩慢加入三頸瓶中。攪拌反應5～9小時后，用石油醚萃取反應液3次，收集有機相，蒸干溶劑后，加入5％醋酸，調(diào)節(jié)PH值至2～5，然后加熱至60℃保持3～8小時。用石油醚萃取反應液3次，收集有機相，回收溶劑即得，收率為45～65％。得到的產(chǎn)物經(jīng)紫外、紅外、質(zhì)譜、核磁共振測定，確定本品為4-(乙酰氧甲基)苯基吡喃葡萄糖苷，測定數(shù)據(jù)如下(相應的圖譜見附圖1～7)紫外光譜數(shù)據(jù)UV λmaxMeOH222.6nm(∈10369)，202.4nm(∈7424)；紅外光譜數(shù)據(jù)IR 3431cm-1(羥基)，1738cm-1(酯基)，1615cm-1、1575cm-1、1514cm-1、1456cm-1(苯環(huán))；質(zhì)譜數(shù)據(jù)FAB+MS(m/z，rel％)482(M+MNBA+1，9)，329(M+1，19)，328(M，30)，284(M，16)，269(M-HOAc+1，100)，166(M-Glc，23)；核磁共振(HMQC)數(shù)據(jù)130.5---7.29；117.3---7.04；101.9---4.95；66.1---5.00；62.7---3.86，3.70；核磁共振(HMBC)數(shù)據(jù)170.8---5.00，2.00；158.7---7.29，7.04，4.95；131.0---7.29，7.04，5.00；130.5---7.04；117.3---7.29；66.1---7.29；


圖1為式I化合物的紫外光譜；圖2為式I化合物的紅外光譜；圖3為式I化合物的質(zhì)譜；圖4為式I化合物的核磁共振1H譜；圖5為式I化合物的核磁共振13C譜；圖6為式I化合物的核磁共振HMBC譜；圖7為式I化合物的核磁共振HMQC譜；根據(jù)本發(fā)明，在制備本發(fā)明組合物中，通常將4-(乙酰氧甲基)苯基吡喃葡萄糖苷與藥用輔料混合，或用藥用輔料稀釋，或包封于藥用輔料內(nèi)。所述輔料可以是對4-(乙酰氧甲基)苯基吡喃葡萄糖苷起載體、賦形劑或介質(zhì)作用的固體、半固體或液體。適宜的賦形劑實例包括乳糖、右旋糖、蔗糖、山梨糖醇、甘露糖醇、淀粉、阿拉伯膠、磷酸鈣、藻酸鹽、明肢、糖漿、甲基纖維素、羥基苯甲酸甲酯和丙酯、滑石、硬脂酸鎂或油。如果必要，本發(fā)明組合物可制成緩釋或控釋制劑，以便給予病人后能提供活化成分的快速的、持續(xù)的或延遲的釋放。
根據(jù)給藥途徑，上述組合物可制劑成片劑、膠囊或混懸液供口服應用，和制成注射溶液等供非腸道應用，或制成栓劑。
具體實施例方式
下面的實施例用來進一步描述本發(fā)明，但其不意味著對本發(fā)明的任何限制。
實施例14-(乙酰氧甲基)苯基吡喃葡萄糖苷的合成在100ml三頸瓶中，加入濃鹽酸20ml，加入苯甲醛4g，機械攪拌。取天麻素3g，少量水溶解后用加料漏斗緩慢加入三頸瓶中。攪拌反應6小時后，用石油醚萃取反應液，收集有機相，蒸干溶劑后，加入5％醋酸，調(diào)節(jié)pH值至3，然后加熱至60℃保持3小時。用石油醚萃取反應液，收集有機相，蒸干溶劑，隨后上分離柱進行異構(gòu)體的拆分即得標題化合物，其鑒定數(shù)據(jù)如前述反應路線說明中給出的數(shù)據(jù)和/或附圖1-7所示。
實施例2每片含20mg4-(乙酰氧甲基)苯基吡喃葡萄糖苷的片劑制備如下4-(乙酰氧甲基)苯基吡喃葡萄糖苷20mg淀粉 210mg微晶纖維素40mg聚乙烯此咯烷酮(10％水溶液駿) 適量羧甲基淀粉鈉 14mg硬脂酸鎂 3mg總計 300mg將4-(乙酰氧甲基)苯基吡喃葡萄糖苷、淀粉和纖維素充分混合。將聚乙烯此嚏烷酮溶液與得到的粉末混合并過篩，制得的顆粒干燥并再過篩。將羧甲基淀粉鈉和硬脂酸鎂加入該顆粒中，混合后于壓片機上壓片，得每片重300mg，實施例3每囊含20mg4-(乙酰氧甲基)苯基吡喃葡萄糖苷的膠囊制備如下4-(乙酰氧甲基)苯基吡喃葡萄糖苷 20mg干淀粉 278mg硬脂酸鎂2mg總計300mg將4-(乙酰氧甲基)苯基吡喃葡萄糖苷、淀粉和硬脂酸鎂過篩，并以300mg的量填充入硬明膠膠囊中。
實施例4每支含10mg4-(乙酰氧甲基)苯基吡喃葡萄糖苷的注射液制備如下4-(乙酰氧甲基)苯基吡喃葡萄糖苷10g乙醇 80g氯化鈉9g注射用水 加至1000ml取4-(乙酰氧甲基)苯基吡喃葡萄糖苷10g，加乙醇攪拌溶解，加氯化鈉9g，加注射用水至800ml，9g氯化鈉，調(diào)節(jié)pH值為6.0～6.5；在上述溶液中加入0.1％的針用活性炭，吸附，脫炭過濾；加注射用水至1000ml；用微孔濾膜過濾至澄明，灌封；100℃濕熱滅菌20分鐘，迅速冷卻，檢驗合格，即得。
實施例5每支含10mg4-(乙酰氧甲基)苯基吡喃葡萄糖苷的凍干粉針制備如下4-(乙酰氧甲基)苯基吡喃葡萄糖苷10g乙醇 80g氯化鈉9g甘露醇適量注射用水 加至4000ml在100級以上車間里，取4-(乙酰氧甲基)苯基吡喃葡萄糖苷10g，加乙醇攪拌溶解，加氯化鈉9g，甘露醇適量，加注射用水至800ml，調(diào)節(jié)pH值為6.0～6.5，過濾；加注射用水至4000ml；用微孔濾膜過濾至澄明，分裝成每支4.0ml，冷凍干燥，蓋膠塞、軋蓋，即得每支10mg(有效成分)的冷凍干燥粉針劑檢驗合格，即得。
藥理毒理試驗一、急性毒性實驗小鼠雌雄各半，體重18-20g。
1.灌胃給藥用小鼠分組做毒性預試，給5.0％的4-(乙酰氧甲基)苯基吡喃葡萄糖苷乙醇溶液灌胃，劑量由1250-5000mg/kg，給藥后觀察7天，未見中毒及死亡現(xiàn)象。
2.靜脈注射將小鼠分組作毒性試驗，用5.0％的4-(乙酰氧甲基)苯基吡喃葡萄糖苷乙醇溶液做尾靜脈注射，劑量由2500-5000mg/kg，給藥后觀察7天，未見中毒及死亡。
二、藥理實驗1.對小鼠的鎮(zhèn)靜作用按胡崇家改良的Schlaginweit氏法(抖動籠描記法)，取小白鼠一批，體重18-20g，雌雄各半，先皮下注射苯甲酸鈉咖啡因50mg/kg，使其活動增多，30分鐘后再注射4-(乙酰氧甲基)苯基吡喃葡萄糖苷，對照組皮下注射生理鹽水、苯巴比妥鈉，觀察時間為180分鐘，以活動少于120分鐘為指標，結(jié)果見表1。結(jié)果表明4-(乙酰氧甲基)苯基吡喃葡萄糖苷具有鎮(zhèn)靜作用，且鎮(zhèn)靜作用療效呈劑量相關(guān)性。
表1.4-(乙酰氧甲基)苯基吡喃葡萄糖苷對小白鼠的鎮(zhèn)靜作用


*鎮(zhèn)靜指數(shù)＝生理鹽水組平均活動時間(分鐘)/試驗組平均活動時間(分鐘)2.抗驚厥實驗選擇致驚劑戊四唑和中樞興奮藥尼可剎米，造成小鼠驚厥模型，觀察4-(乙酰氧甲基)苯基吡喃葡萄糖苷的抗驚厥作用。其中戊四唑法為抗驚厥試驗的經(jīng)典藥理學方法。試驗結(jié)果見表2，結(jié)果表明，4-(乙酰氧甲基)苯基吡喃葡萄糖苷三個劑量組對中樞興奮劑戊四唑產(chǎn)生驚厥的動物數(shù)與比較，無顯著性差異(P＞0.05)。4-(乙酰氧甲基)苯基吡喃葡萄糖苷高劑量組小鼠死亡數(shù)與正常對照組比較，有顯著性差異(P＜0.05)。表明4-(乙酰氧甲基)苯基吡喃葡萄糖苷液能降低戊四唑所致驚厥的死亡率。
表2.4-(乙酰氧甲基)苯基吡喃葡萄糖苷對戊四唑致小鼠驚厥的影響

卡方檢驗與正常對照組比較*P＜0.054-(乙酰氧甲基)苯基吡喃葡萄糖苷抗尼可剎米致小鼠驚厥試驗。試驗結(jié)果見表3，結(jié)果表明4-(乙酰氧甲基)苯基吡喃葡萄糖苷中、低劑量能延長中樞興奮劑尼可剎米小鼠驚厥潛伏期，與正常對照組比較，有顯著性差異(P＜0.05)。4-(乙酰氧甲基)苯基吡喃葡萄糖苷對驚厥小鼠的死亡時間無影響(P＞0.05)。表明4-(乙酰氧甲基)苯基吡喃葡萄糖苷有一定抗驚厥作用。
表3.4-(乙酰氧甲基)苯基吡喃葡萄糖苷對尼可剎米至小鼠驚厥的影響X±SD

與正常組對照組比較*P＜0.05，**P＜0.01。
4-(乙酰氧甲基)苯基吡喃葡萄糖苷高劑量組能降低戊四唑所致驚厥的死亡率。4-(乙酰氧甲基)苯基吡喃葡萄糖苷中、低劑量能延長中樞興奮劑尼可剎米小鼠驚厥潛伏期，但對驚厥小鼠的死亡時間無影響。表明4-(乙酰氧甲基)苯基吡喃葡萄糖苷有一定抗驚厥作用。
3.鎮(zhèn)痛作用選擇扭體法和熱板法兩種試驗方法分別觀察4-(乙酰氧甲基)苯基吡喃葡萄糖苷對化學因素和物理因素所致疼痛的影響，實驗當天各組動物按設定劑量肌肉注射給藥1次。
扭體法試驗結(jié)果見表4，結(jié)果表明，4-(乙酰氧甲基)苯基吡喃葡萄糖苷高、中劑量小鼠的扭體次數(shù)減少，與正常對照組比較，4-(乙酰氧甲基)苯基吡喃葡萄糖苷高劑量有顯著性差異，表明4-(乙酰氧甲基)苯基吡喃葡萄糖苷有抗冰乙酸對小鼠的鎮(zhèn)痛作用。
表4.對小鼠醋酸致痛扭體次數(shù)的影響(扭體法)x±SD

與正常對照組比較*P＜0.05，**P＜0.01。
熱板法試驗結(jié)果見表5，結(jié)果表明，4-(乙酰氧甲基)苯基吡喃葡萄糖苷高、中、低劑量與正常對照組比較，均有顯著性差異，各劑量組均持續(xù)一段時間，表明4-(乙酰氧甲基)苯基吡喃葡萄糖苷有一定的鎮(zhèn)痛作用。
表5.4-(乙酰氧甲基)苯基吡喃葡萄糖苷對小鼠熱板痛閾值的影響(熱板法)x±SD


與正常對照組比較*P＜0.05，**P＜0.01。
4-(乙酰氧甲基)苯基吡喃葡萄糖苷高劑量組能減少醋酸所致的小鼠扭體次數(shù)，三個劑量組均能提高小鼠的痛閾，且有一定的時效性，有抗化學因素和物理因素引起的小鼠疼痛作用，表明4-(乙酰氧甲基)苯基吡喃葡萄糖苷有一定的鎮(zhèn)痛作用。
如上所述，本發(fā)明所述的物質(zhì)具有中樞神經(jīng)系統(tǒng)活性。本發(fā)明物質(zhì)對γ氨基丁酸受體是活性的。用于神經(jīng)系統(tǒng)病癥的治療，例如眩暈梅尼埃病、藥毒性眩暈、外傷性眩暈、突發(fā)性耳聾、前庭神經(jīng)元炎、椎基底動脈供血不足等；神經(jīng)痛三叉神經(jīng)痛、坐骨神經(jīng)痛、枕大神經(jīng)痛等；頭痛血管性頭痛、偏頭痛、神經(jīng)衰弱及神衰綜合征等；還可用于輔助治療癲癇等癥及早老性癡呆和睡眠失調(diào)。
本發(fā)明物質(zhì)在一個很寬劑量范圍內(nèi)是有效的。實際給藥劑量取決于各種因素，例如欲治療的疾病、待治療的哺乳動物的種類和大小。
權(quán)利要求
1.通式式I的天麻素衍生物 其中，
2.按照權(quán)利要求1所述的衍生物，其中R以β型鍵與糖基結(jié)合。
3.一種藥物組合物，其包括權(quán)利要求1或2的天麻素衍生物及藥用輔料。
4.權(quán)利要求1或2的天麻素衍生物在制備藥物中用途。
5.權(quán)利要求1的天麻素衍生物制備方法，其包括將下式天麻素 與苯甲醛(PhCHO)在濃鹽酸和/或ZnCl2存在下反應，生成式2化合物 將式2化合物與醋酸反應，得式I天麻素衍生物
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的物質(zhì)制備方法，其特征在于反應原料選自苯甲醛、甲醛，酸選自濃鹽酸或濃硫酸，并選擇性加入氯化鋅作為催化劑，反應時間為6小時。
7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的制備方法，其中用于調(diào)節(jié)pH的稀酸選自5％的醋酸及10％的醋酸，pH為3，加熱時間應不小于3小時，并選擇性加入氯化鋇處理。
8.權(quán)利要求4所述的用途，其中所述藥物是用于治療老年性心腦血管和腦神經(jīng)疾病的藥物。
9.按照權(quán)利要求3所述的組合物，其為口服制劑或注射劑形式。
10.權(quán)利要求9的組合物，其中口服制劑為片劑或膠囊，注射劑為注射液或粉針劑。
全文摘要
本發(fā)明涉及天麻素衍生物，其制備方法，含有它的藥物組合物及其作為藥物的應用。具體講，本發(fā)明天麻素衍生物為4－(乙酰氧甲基)苯基吡喃葡萄糖苷，英文名為4－(Acetoxymethyl)phenylglucoside。
文檔編號A61P25/00GK1737007SQ20041005693
公開日2006年2月22日 申請日期2004年8月20日 優(yōu)先權(quán)日2004年8月20日
發(fā)明者吳宏賓, 陳云建 申請人:昆明制藥集團股份有限公司