專利名稱：一種治療腦中風(fēng)的藥物組合物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種藥物組合物及其制備方法，特別是涉及一種治療腦中風(fēng)的藥物組合物及其制備方法，屬醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
清開靈注射液是經(jīng)典中藥方安宮牛黃丸經(jīng)過科學(xué)研制提純而來的一種中藥復(fù)合型針劑。它具有清熱解毒、化痰通絡(luò)、醒神開竅之功效，臨床上主要用于高熱、昏迷、中風(fēng)偏癱、急慢性肝炎、上呼吸道感染、肺炎等病癥。臨床應(yīng)用22年來，由于其療效明顯，應(yīng)用日益增多，自1992年以來連續(xù)三次被審定為全國中醫(yī)醫(yī)院急診首選必備藥品，并列為“國家中藥保護(hù)品種”。特別是近10年來，其在腦血管疾病方面的獨(dú)特療效更為臨床廣泛認(rèn)同。
但是，近年來，清開靈注射液不良反應(yīng)時(shí)常發(fā)生，有關(guān)報(bào)道也日漸增多，甚至出現(xiàn)了一些嚴(yán)重的不良反應(yīng)，導(dǎo)致患者死亡。主要不良反應(yīng)包括變態(tài)反應(yīng)(皮疹、瘙癢、剝脫性皮炎、血管神經(jīng)性水腫、過敏性休克等)，中樞神經(jīng)系統(tǒng)不良反應(yīng)(意識(shí)障礙、昏迷、抽搐、精神錯(cuò)亂等)及偶發(fā)的惡心、嘔吐、腹痛、靜脈炎、急性腎功能衰竭等。因此，改進(jìn)生產(chǎn)工藝，提高藥物純度，將無藥理作用的雜質(zhì)含量降至最低，減少不良反應(yīng)已為當(dāng)務(wù)之急。
由于清開靈注射液是一個(gè)中藥復(fù)方注射液，功效范圍廣，治療病種多，對(duì)每一味藥的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)又不清楚，工藝改進(jìn)困難。因此，針對(duì)主治病種進(jìn)行清開靈注射液組方與工藝的研究是可行途徑。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種藥物組合物；本發(fā)明的目的還在于提供一種治療腦中風(fēng)的藥物組合物及其制備方法。
本發(fā)明的目的是通過如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的本發(fā)明藥物組合物為膽酸3-9重量份、黃芩苷4-6重量份、梔子20-35重量份、珍珠母粉40-60重量份；上述藥物組合物的優(yōu)選范圍為膽酸6.5-7.4重量份、黃芩苷5.0-5.5重量份、梔子25.0-28.0重量份、珍珠母粉45.0-50.0重量份；
上述藥物組合物的優(yōu)選配比為膽酸4重量份、黃芩苷4.5重量份、梔子23重量份、珍珠母粉42重量份；膽酸8重量份、黃芩苷5.6重量份、梔子30重量份、珍珠母粉55重量份；膽酸7.4重量份、黃芩苷5.0重量份、梔子28重量份、珍珠母粉45重量份；膽酸6.5重量份、黃芩苷5.5重量份、梔子25.0重量份、珍珠母粉50.0重量份；或膽酸7重量份、黃芩苷5.3重量份、梔子26重量份、珍珠母粉48重量份。
上述藥物組合物中，所述的膽酸是由牛膽酸和異去氧膽酸按2-4∶2-4.5的比例組成；其中牛膽酸和異去氧膽酸的優(yōu)選比例范圍為3.0-3.5∶3.5-3.9；牛膽酸和異去氧膽酸的優(yōu)選配比為2.2∶3.4，3.9∶4.1或3.2∶3.8。
上述藥物組合物中，所述的黃芩苷可用黃芩苷元、去甲黃芩苷素、漢黃芩苷素或漢黃芩苷代替。
取上述藥物組合物，按藥劑學(xué)常規(guī)方法，制備成各種臨床可接受的劑型，包括但不限于如下劑型當(dāng)中的一種注射制劑、片劑、膠囊劑、噴霧劑、丸劑、顆粒劑、混懸劑、滴丸、口服液體制劑等；所述注射制劑可以是注射液、大輸液、凍干粉針、注射用片劑、混懸型注射劑等。
本發(fā)明藥物組合物的制備工藝包括如下步驟A.按處方量取牛膽酸、異去氧膽酸、黃芩苷、梔子、珍珠母粉；B.制備梔子提取液和珍珠母粉水解液，混合均勻，調(diào)PH至7，得混合提取液；C.取乙醇，調(diào)PH至11，加去氧膽酸粉使全部溶解，加入牛膽酸粉調(diào)PH至9使之全部溶解；將混合提取液混合于膽酸溶液中，得混合藥液；將混合藥液乙醇沉淀，冷藏，抽濾，回收乙醇；加注射用水，加入黃芩苷細(xì)粉，使其完全溶解，得總混合藥液；D.取總混合藥液，加入輔料，按常規(guī)制劑工藝或步驟，制成臨床可接受的劑型注射制劑、片劑、膠囊劑、噴霧劑、丸劑、顆粒劑、混懸劑、滴丸、口服液體制劑等。
如上所述的本發(fā)明藥物組合物的制備方法，其中梔子提取液可由如下方法制備
取處方量的梔子，粉碎成粗粉，照流浸膏劑項(xiàng)下的滲漉法(《中國藥典》2000年版一部附錄IO)，用6～10倍量的60％～80％乙醇滲漉，收集滲漉液，回收乙醇，濃縮至60℃下相對(duì)密度為1.10的清膏，加3～5倍量水稀釋，攪勻，0-4℃冷藏36～60小時(shí)，濾過，濾液減壓濃縮為60℃下相對(duì)密度為1.10的清膏，上活性炭柱，先用蒸餾水洗脫至洗脫液無色，再用8～12倍量60％～80％乙醇洗脫，收集洗脫液，減壓回收乙醇并濃縮，干燥，得梔子半成品；取梔子半成品用注射用水溶解，濾過；調(diào)節(jié)PH值至6.0～7.0，0-4℃冷藏12～36小時(shí)，0.45μm濾膜濾過，濾液加注射用水至溶解，用0.22μm濾膜濾過，得梔子提取液。
如上所述的本發(fā)明藥物組合物的制備方法，其中珍珠母粉水解液可由如下方法制備先配制8倍量4N的H2SO4水溶液；加入珍珠母粉，加熱至沸保持微沸6-7小時(shí)，過濾，濾渣用熱水洗滌2次，得桔紅色澄明溶液；冷卻后有白色針狀結(jié)晶體析出，再過濾，除去結(jié)晶物，得桔紅色澄清溶液；將澄清的水解液濃縮只剩相當(dāng)于原料總量的2-3倍量時(shí)冷卻，加入乙醇調(diào)至含醇量達(dá)60％，冷藏24小時(shí)；抽濾，濾液回收乙醇至無醇味，取出冷藏供配液用；如上所述的本發(fā)明藥物組合物的制備方法，其中所述的配液步驟可具體如下1、提取藥液的混合將梔子提取液、珍珠母粉水解液分別過濾，混合均勻，用10％NaOH液調(diào)PH至7，抽濾，得混合提取液；2、膽酸的溶解取為膽酸量的60倍的75％乙醇，用10％NaOH液調(diào)PH至11，加入去氧膽酸粉使全部溶解，加入牛膽酸粉調(diào)PH至9使之全部溶解；將混合提取液混合于膽酸溶液中，得混合藥液；3、混合藥液的醇處理混合藥液補(bǔ)加95％乙醇使其含醇量達(dá)到75％；用10％NaOH液調(diào)PH至7、密封冷藏2-3天抽濾，回收乙醇至無醇味，室溫放置；補(bǔ)加新鮮注射用水，調(diào)至中性至全量的4/5時(shí)，用10％NaOH液調(diào)PH至7.2，冷藏3-4天，抽濾，得澄清液體；4、黃芩苷的處理溶解及混合取約總配液體積的新鮮去離子水，用10％NaOH溶液調(diào)PH至8，加入黃芩苷細(xì)粉，用10％NaOH溶液調(diào)PH至7，使其完全溶解；將含黃芩苷溶液加入到混合藥液中，得總混合藥液。
本發(fā)明藥物組合物注射制劑的制備工藝包括如下步驟按上述制備方法制得總混合藥液，調(diào)PH至7.2，加入活性碳(0.3)水浴煮沸，趁熱過濾，濾液密封冷藏3-4天，紙漿并過濾，調(diào)PH至7.2，用G4濾球抽濾，制成注射制劑。
本發(fā)明藥物組合物滴丸制劑的制備工藝包括如下步驟按上述制備方法制得總混合藥液，調(diào)PH至7.2，加入活性碳(0.3)水浴煮沸，趁熱過濾，濾液密封冷藏3-4天，紙漿并過濾，調(diào)PH至7.2，用G4濾球抽濾，減壓濃縮、噴霧干燥成粉；將此藥粉與基質(zhì)物質(zhì)(比例為PEG4000∶硬脂酸∶石蠟∶藥粉＝3.60∶0.32∶0.08∶1.00)水浴溶化，混合均勻，用滴管在75℃下，自上而下滴入液體石蠟冷卻液中，收集滴丸用濾紙吸除冷卻劑，即得本發(fā)明藥物組合物滴丸。
本發(fā)明組合物的有效組分包括膽酸類(牛膽酸、豬膽酸和異去氧膽酸等)、黃芩苷類(黃芩苷為主，還有漢黃芩苷、野黃芩苷等)、梔子環(huán)烯醚萜類(梔子苷為主、去羥梔子苷和梔子酸等)和色素類(藏紅花素、藏紅花酸等)、結(jié)合態(tài)鈣和游離態(tài)鈣等。
用本發(fā)明技術(shù)方案所述的制備方法所制得的注射液，與清開靈注射液和改變珍珠母水解的方法后所制得注射液相比，顏色最淺，而且其總固體物量較少。采用Waster大鼠MCAT腦梗塞模型，并以清開靈注射液為對(duì)照，測(cè)定腦組織SOD、MDA、NOS含量等；結(jié)果表明，針對(duì)腦缺血損傷的治療，本發(fā)明組合物在一些指標(biāo)上與清開靈基本接近，按技術(shù)方案所述的方法制得的注射液效應(yīng)尤為明顯，在一些配比下某些方面還優(yōu)于清開靈。
根據(jù)相關(guān)實(shí)驗(yàn)，結(jié)果表明本發(fā)明所述的新的藥物組合物及其制備工藝，不僅祛除了可能導(dǎo)致不良反應(yīng)的藥味，減少了不良反應(yīng)，將無藥理作用的雜質(zhì)含量降至最低；藥物減少到四種(其中牛膽酸、異去氧膽酸合稱為膽酸)，提高了梔子提取物的精度；而且其生物效應(yīng)與原清開靈注射液對(duì)腦缺血損傷的保護(hù)效應(yīng)無顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的差別，基本保持清開靈注射液在腦缺血損傷病理過程中的腦保護(hù)作用，同時(shí)祛除了可能導(dǎo)致不良反應(yīng)的成分，達(dá)到了穩(wěn)效減毒的優(yōu)化目的。本發(fā)明藥物組合物與清開靈在藥效學(xué)上比較具有如下優(yōu)勢(shì)①本發(fā)明藥物組合物在抑制腦缺血啟動(dòng)的微血管細(xì)胞粘附過程，從而改善缺血組織微循環(huán)灌流，改善缺血缺氧狀態(tài)方面具有更顯著的優(yōu)勢(shì)；②本發(fā)明藥物組合物在減輕缺血對(duì)神經(jīng)元與血管內(nèi)皮細(xì)胞的損傷方面更為顯著。
下面實(shí)驗(yàn)例用于進(jìn)一步說明但不限于本發(fā)明。
實(shí)驗(yàn)例1 腦缺血損傷動(dòng)物模型對(duì)清開靈藥效物質(zhì)及配伍作用特征的研究利用線栓法大鼠大腦中動(dòng)脈梗塞的局灶性腦缺血再灌注模型，和反復(fù)夾閉大鼠雙側(cè)頸總動(dòng)脈不完全腦缺血損傷動(dòng)物模型，采用神經(jīng)功能缺損和死亡率整體評(píng)價(jià)，結(jié)合系列代謝性損傷指標(biāo)的生化分析，進(jìn)行了清開靈注射液藥效物質(zhì)中有效組分的篩選分析。
A.整體效應(yīng)包括膽酸、黃芩苷、梔子提取物、金銀花提取物、板蘭根提取物、珍珠母和水牛角水解液等清開靈各部分藥效物質(zhì)，均能顯著改善模型動(dòng)物的神經(jīng)功能缺損癥狀。各部分間顯示出顯著的協(xié)同作用，清開靈全方效果最為顯著。
膽酸、黃芩苷能夠降低模型動(dòng)物死亡率，其余單個(gè)部分對(duì)模型動(dòng)物死亡率的影響不顯著或有加重趨勢(shì)。各配伍組死亡率顯著下降，隨著各部分藥效物質(zhì)配伍的增多，死亡率進(jìn)一步下降，清開靈全方的死亡率為零，顯示了較好的配伍減毒增效作用。
B.抗脂質(zhì)過氧化反應(yīng)金銀花、板蘭根、珍珠母和水牛角能夠顯著提高模型動(dòng)物腦組織的SOD水平，而膽酸、黃芩苷、梔子對(duì)腦組織SOD水平無改善作用。黃芩苷與梔子配伍產(chǎn)生了顯著的提高模型動(dòng)物腦組織SOD水平的作用，其余配伍未顯示協(xié)同增效作用。板蘭根能夠顯著降低模型動(dòng)物腦組織的LPO含量，其余各藥對(duì)此均無顯著影響。但黃芩苷與梔子配伍后能夠顯著地降低腦組織LPO含量，膽酸與珍珠母、水牛角配伍后腦組織LPO含量也得到了有效的降低，梔子、板蘭根及膽酸與珍珠母、水牛角配伍均可顯著降低腦組織的LPO含量。而黃芩苷、金銀花對(duì)此脂質(zhì)過氧化反應(yīng)過程無顯著影響。
C.對(duì)腦能量代謝的影響梔子、板蘭根、珍珠母和水牛角能夠顯著降低模型動(dòng)物腦組織中鈉-鉀-ATP酶的活性，黃芩苷的作用相反，而膽酸、金銀花無顯著作用。將膽酸與珍珠母、水牛角配伍以及將黃芩苷與梔子配伍，均可削弱后者對(duì)腦組織鈉-鉀-ATP酶活性的降低作用，提示此兩組配伍對(duì)鈉-鉀-ATP酶活性均可能存在著拮抗作用。金銀花與板蘭根配伍未呈現(xiàn)明顯的協(xié)同作用。
珍珠母和水牛角對(duì)腦能荷有顯著的改善趨勢(shì)，膽酸、黃芩苷、梔子無顯著作用，金銀花、板蘭根有一定改善趨勢(shì)。珍珠母、水牛角與膽酸配伍后仍保持了原有效應(yīng)，而黃芩苷與梔子、金銀花與板蘭根配伍后對(duì)腦能荷變化仍無顯著影響，珍珠母、水牛角與黃芩苷、梔子、金銀花和板蘭根則對(duì)其原有效應(yīng)產(chǎn)生了消極影響。
D.損害性反應(yīng)指標(biāo)分析板蘭根能夠顯著降低模型動(dòng)物血漿中vWF的水平，而膽酸、黃芩苷、梔子、金銀花、珍珠母和水牛角對(duì)模型動(dòng)物vWF水平無顯著改善作用，膽酸甚至?xí)a(chǎn)生消極的影響。但是，膽酸與珍珠母、水牛角配伍，以及黃芩苷與梔子配伍，均產(chǎn)生了顯著的降低模型動(dòng)物血漿vWF水平的作用，兩組配伍具有協(xié)同作用，而金銀花與板蘭根配合則未顯現(xiàn)出顯著的協(xié)同作用，清開靈全方的效果較顯著。膽酸、黃芩苷能夠顯著降低模型動(dòng)物腦組織的NOS水平，而梔子、金銀花、板蘭根、珍珠母和水牛角對(duì)模型動(dòng)物腦組織NOS水平無改善作用。配伍作用未顯示明顯的協(xié)同作用。
上述研究結(jié)果表明清開靈注射液各組成部分對(duì)于腦缺血損傷不同病理環(huán)節(jié)的影響具有相對(duì)特異性，同時(shí)存在著有效與無效、配伍協(xié)同增效與減毒等多方面的效應(yīng)關(guān)系。
實(shí)驗(yàn)例2 應(yīng)用細(xì)胞模型對(duì)清開靈藥效物質(zhì)的篩選研究應(yīng)用培養(yǎng)的神經(jīng)元、神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞，在確定對(duì)正常培養(yǎng)細(xì)胞的無毒給藥劑量下，進(jìn)行了細(xì)胞模型的藥效物質(zhì)篩選。
A.對(duì)神經(jīng)元的影響清開靈全方在一定劑量時(shí)對(duì)神經(jīng)元有明顯的保護(hù)作用。其中的梔子、板藍(lán)根、珍珠母與水牛角水解液配伍的混液對(duì)神經(jīng)元有明顯的保護(hù)作用，促進(jìn)神經(jīng)元(SH-SY5Y)的增殖，抑制神經(jīng)元的凋亡，抑制脂質(zhì)過氧化物的產(chǎn)生，增加抗脂質(zhì)過氧化物系統(tǒng)的SOD和NOS活力，以及提高NO濃度；牛膽酸、豬膽酸、梔子、板藍(lán)根、珍珠母和水牛角水解液配伍的混液，對(duì)神經(jīng)元產(chǎn)生了明顯的毒性作用，其抑制神經(jīng)元的凋亡，抑制脂質(zhì)過氧化物的產(chǎn)生，增加自由基清除劑SOD和NOS活力，以及提高NO濃度的作用，較之梔子、板藍(lán)根、珍珠母與水牛角水解液配伍的混液有所降低。單一藥物的研究表明一定劑量時(shí)，牛膽酸、梔子對(duì)神經(jīng)元有明顯的保護(hù)作用，而豬膽酸、黃芩苷對(duì)神經(jīng)元有較高的毒性作用，但高劑量的黃芩苷對(duì)SH-SY5Y神經(jīng)元的抑制作用較低劑量組輕，低劑量的金銀花、珍珠母與水牛角水解液和大劑量板藍(lán)根對(duì)神經(jīng)元有明顯的保護(hù)作用。故不同劑量的配伍、不同組分配伍的清開靈藥效物質(zhì)可減少各單味藥的不足，并達(dá)到清開靈的最佳藥效。
B.對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞的影響清開靈全方在一定劑量時(shí)對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞有明顯的保護(hù)作用。其中梔子、板藍(lán)根、珍珠母與水牛角水解液配伍的混液對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞有明顯的保護(hù)作用，促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞(ECV304)的增殖；牛膽酸、豬膽酸、梔子、板藍(lán)根、珍珠母與水牛角水解液配伍的混液促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞增殖的作用，弱于梔子、板藍(lán)根、珍珠母與水牛角水解液的配伍作用，而毒性作用增大。單一組分的研究表明牛膽酸、黃芩苷、珍珠母與水牛角水解液有明顯促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞增殖的作用，大劑量的梔子、豬膽酸也有較強(qiáng)的促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞增殖的作用，金銀花和板藍(lán)根對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞生長有明顯的抑制作用。
C.對(duì)神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的影響清開靈全方對(duì)神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞有較明顯的抑制作用，低劑量的清開靈全液對(duì)神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的抑制作用顯著低于大劑量。其中，梔子、板藍(lán)根、珍珠母與水牛角水解液配伍的混液對(duì)神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞有顯著保護(hù)作用。牛膽酸、豬膽酸、梔子、板藍(lán)根、珍珠母與水牛角水解液配伍的混液，對(duì)神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞有顯著的抑制作用。低劑量牛膽酸、豬膽酸、黃芩苷對(duì)神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞有顯著保護(hù)作用，高劑量牛膽酸、豬膽酸、黃芩苷對(duì)神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞有較高的抑制作用。梔子、金銀花、板藍(lán)根、珍珠母與水牛角水解液，對(duì)神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞均有輕度的抑制作用。
鑒于清開靈注射液臨床不良反應(yīng)特征，首先本著保效減毒的原則，確定清開靈不良反應(yīng)與無顯著效應(yīng)的部分為水牛角、金銀花和板藍(lán)根，治療腦缺血損傷的有效組方為本發(fā)明藥物組合物。
實(shí)驗(yàn)例3 本發(fā)明藥物組合物配伍量變化的優(yōu)選研究本發(fā)明藥物組合物共四味藥物，設(shè)為四個(gè)影響因素；每味藥物設(shè)三個(gè)量級(jí)，即三個(gè)水平。故采用4因素3水平混合因素均勻設(shè)計(jì)法，取U9(3×3×3×3)表，共獲得10個(gè)組方。采用大鼠MCAT腦梗塞模型，并以清開靈注射液為對(duì)照，以與腦缺血級(jí)聯(lián)反應(yīng)密切相關(guān)的iNOS、MDA、TNF-α、IL-1β、vWF及NSE等6個(gè)效應(yīng)指標(biāo)進(jìn)行藥效觀察，綜合比較各個(gè)組方的藥理作用強(qiáng)度，并據(jù)此數(shù)值通過總分制對(duì)組方進(jìn)行尋優(yōu)。
藥效指標(biāo)效應(yīng)值組間比較的綜合優(yōu)勢(shì)分析顯示，本發(fā)明組合物所描述的比例關(guān)系均表現(xiàn)出了良好的神經(jīng)保護(hù)作用，其余用藥組或效果不明顯，或雖然在某些指標(biāo)上有改善作用，但同時(shí)在另外指標(biāo)上有比較明顯的加重?fù)p傷的作用?？偡峙抨?duì)評(píng)判時(shí)，將同一組方下各藥效指標(biāo)值進(jìn)行平均，再將同一組方的各個(gè)平均藥效指標(biāo)值求和，和數(shù)為該組方總藥理效應(yīng)值；然后，對(duì)不同組方的總藥理效應(yīng)值按照從小到大順序進(jìn)行排序，因?yàn)楦鞣N藥效指標(biāo)基本是抑制型指標(biāo)，故總藥理效應(yīng)值越小，組方越優(yōu)，結(jié)果顯示，本發(fā)明藥物組合物配伍組優(yōu)于清開靈全方組。說明在本發(fā)明藥物組合物較清開靈全方具有減毒優(yōu)勢(shì)的同時(shí)，增效作用亦比較明顯。
綜合上述兩種分析所得結(jié)果，確定了本發(fā)明藥物組合物較優(yōu)的配伍比例范圍。
實(shí)驗(yàn)例4 本發(fā)明藥物組合物對(duì)MCAO大鼠腦組織細(xì)胞粘附分子表達(dá)的影響1、本發(fā)明藥物組合物對(duì)腦缺血不同時(shí)段腦組織ICAM-1表達(dá)的影響如表1所示，腦缺血后兩個(gè)時(shí)段，模型組大鼠腦組織ICAM-1表達(dá)水平均高于假手術(shù)組(P＜0.05或0.01)。缺血12h，本發(fā)明藥物組合物組ICAM-1水平顯著低于模型組(P＜0.01)，清開靈未顯示顯著的阻抑ICAM-1高表達(dá)的作用，至腦缺血24h，清開靈及本發(fā)明藥物組合物ICAM-1表達(dá)水平與模型組比較，差別無顯著意義。顯示本發(fā)明藥物組合物可在缺血極早期發(fā)揮阻抑ICAM-1高表達(dá)的作用。
表1 缺血不同時(shí)段腦組織勻漿上清液ICAM-1表達(dá)水平(X±SD ng/ml)組別 n缺血12h 缺血24h假手術(shù)組 100.688±0.209 1.11±0.369模型組100.861±0.109△1.67±0.318△△本發(fā)明藥物組合物組100.598±0.067**1.53±0.350△△清開靈100.779±0.113 1.62±0.309△△
注與假手術(shù)組相比△P＜0.05△△P＜0.01與模型組相比 *P＜0.05**P＜0.012、本發(fā)明藥物組合物對(duì)腦缺血不同時(shí)段腦組織E-selectin表達(dá)的影響如表2所示，腦缺血后兩個(gè)時(shí)段，模型組大鼠腦組織E-selectin表達(dá)水平高于假手術(shù)組(P＜0.01或0.05)。缺血12h，本發(fā)明藥物組合物組腦組織E-selectin水平低于模型組(P＜0.01)，清開靈組未顯示顯著的阻抑表達(dá)效應(yīng)；缺血24h，與模型組比較，本發(fā)明藥物組合物組和清開靈組均顯示了顯著的阻抑表達(dá)效應(yīng)(P＜0.01或0.05)，且前者的作用優(yōu)于后者。
表2 缺血不同時(shí)段腦組織勻漿上清液E-selectin表達(dá)水平(X±SD ng/ml)組別 n缺血12h 缺血24h假手術(shù)組 1022.86±2.8913.06±2.94模型組1026.74±2.59△△16.87±4.43△本發(fā)明藥物組合物組1021.18±2.34**11.54±1.71**清開靈組 1025.27±3.72△14.28±2.97*注與假手術(shù)組相比△P＜0.05△△P＜0.01與模型組相比*P＜0.05**P＜0.01實(shí)驗(yàn)例5本發(fā)明藥物組合物對(duì)MCAO大鼠血管調(diào)節(jié)功能的影響1、本發(fā)明藥物組合物對(duì)腦缺血不同時(shí)段血漿ET-1含量的影響。
如表3所示，腦缺血12h和24h，模型組血漿ET-1含量顯著增高，與假手術(shù)組比較P＜0.05；腦缺血12h，兩個(gè)用藥組未提示有意義的生物效應(yīng)，與模型組比較P＞0.05。在腦缺血24h，本發(fā)明藥物組合物組血漿ET-1含量顯著低于模型組，P＜0.01，而清開靈在此時(shí)間仍未顯示有效作用。
表3 腦缺血不同時(shí)段血漿ET-1含量(X±SD pg/ml)組別 n 缺血12h缺血24h假手術(shù)組10142.26±18.61 150.46±22.90模型組 10159.06±7.66△174.30±25.33△本發(fā)明藥物組合物組清10162.69±24.48△129.74±21.02**△開靈組 10158.35±6.32△179.20±19.15△注與假手術(shù)組相比△P＜0.05△△P＜0.01與模型組相比*P＜0.05**P＜0.01
2、本發(fā)明藥物組合物對(duì)腦缺血不同時(shí)段血漿TXB2/6-keto-PGF1α比值的影響如表4所示，腦缺血12h和24h，模型組血漿TXB2/6-keto-PGF1α比值均顯著高于假手術(shù)組P＜0.01或0.05；缺血12h本發(fā)明藥物組合物組和清開靈組TXB2/6-keto-PGF1α比值均顯著低于模型組P＜0.01；缺血24h，本發(fā)明藥物組合物組血漿TXB2/6-keto-PGF1α比值仍顯著低于模型組P＜0.01，而清開靈組血漿TXB2/6-keto-PGF1α比值則顯著高于模型組P＜0.05，與模型組差別無顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
表4 腦缺血不同時(shí)段血漿TXB2/6-keto-PGF1α比值(X±SD)組別 n 缺血12h 缺血24h假手術(shù)組 100.350±0.091 0.366±0.083模型組100.709±0.168△△0.526±0.204△本發(fā)明藥物組合物組100.331±0.178**0.251±0.092**清開靈組 100.352±0.087**0.704±0.326△注與假手術(shù)組相比△P＜0.05△△P＜0.01與模型組相比 *P＜0.05 **P＜0.01實(shí)驗(yàn)例6本發(fā)明藥物組合物對(duì)MCAO大鼠腦組織炎癥細(xì)胞因子含量的影響1、本發(fā)明藥物組合物對(duì)缺血腦組織TNF-α含量的影響表5腦缺血不同時(shí)段腦組織勻漿TNF-α蛋白含量(X±SD pg/ml)組別 n缺血12h n 缺血24h假手術(shù)組 8 15.241±1.180 1026.624±1.823模型組9 17.459±0.261△1028.324±1.292△本發(fā)明藥物組合物組1017.747±3.114△1024.715±2.843**清開靈組 9 18.762±0.939△△1025.725±2.841*與假手術(shù)組相比△P＜0.05△△P＜0.0 1與模型組相比*P＜0.05 **P＜0.01結(jié)果表明腦缺血12h和24h小時(shí)兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)，模型組TNF-α蛋白含量均顯著高于假手術(shù)組p＜0.05，表明缺血刺激促進(jìn)了TNF-α的合成與分泌。缺血12h各給藥組與模型組比較均無顯著差異。在缺血24h，兩給藥組均顯著低于模型組p＜0.01或0.05。
2、本發(fā)明藥物組合物對(duì)缺血腦組織IL-1β含量的影響表6 腦缺血不同時(shí)段腦組織勻漿IL-1β蛋白含量(X±SD pg/ml)組別 n 缺血12hn缺血4h假手術(shù)組 8 0.121±0.021 100.191±0.023模型組 9 0.143±0.018△100.221±0.042△本發(fā)明藥物組合物組 10 0.090±0.048**100.150±0.047**梔子苷組 9 0.081±0.040**100.149±0.040**與假手術(shù)組相比△P＜0.05△△P＜0.01，與模型組相比 *P＜0.05**P＜0.01表6顯示，缺血12h和24h，模型組腦組織IL-1β含量顯著高于假手術(shù)組p＜0.05，表明缺血刺激了IL-1β的合成與分泌。而兩個(gè)用藥組對(duì)此改變均顯示了良好的阻抑作用，與模型組比較有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異p＜0.01。
實(shí)驗(yàn)例7本發(fā)明藥物組合物對(duì)MCAO大鼠腦組織血管與神經(jīng)元損傷的保護(hù)作用1、本發(fā)明藥物組合物對(duì)血漿vWF蛋白含量的影響表7 腦缺血不同時(shí)段血漿vWF含量(X±SD單位)組 別n 缺血12h n 缺血24h假手術(shù)組 8 0.028±0.008 100.024±0.007模型組9 0.062±0.017△△100.044±0.013△△本發(fā)明藥物組合物組100.055±0.023△△100.029±0.010**清開靈組 9 0.068±0.021△△100.039±0.009△與假手術(shù)組相比△P＜0.05△△P＜0.01，與模型組相比 *P＜0.05**P＜0.01表7顯示，缺血12h和24h，模型組血漿vWF含量顯著高于假手術(shù)組p＜0.01。表明缺血造成了顯著的血管內(nèi)皮細(xì)胞的損傷。缺血12h，兩用藥組與模型組比無顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。缺血24h，本發(fā)明藥物組合物組顯著低于模型組p＜0.01，而清開靈組與模型組比無顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
2、本發(fā)明藥物組合物對(duì)血清NSE含量的影響表8 腦缺血不同時(shí)段血清NSE含量(X±SD ng/ml)組 別 n缺血12h n 缺血24h假手術(shù)組 6 3.33±0.69 7 3.44±0.70模型組6 8.72±4.79△6 5.85±2.34△本發(fā)明藥物組合物組6 4.67±1.98*9 4.58±1.19△清開靈組 8 6.32±2.46△105.34±2.46△與假手術(shù)組相比△P＜0.05△△P＜0.01，與模型組相比 *P＜0.05 **P＜0.01表8顯示，腦缺血12h和24h，模型組血清NSE含量增加，與假手術(shù)組比較差異顯著，P＜0.05。在缺血12h，與模型組比較，本發(fā)明藥物組合物組血清NSE含量顯著降低，P＜0.05。而清開靈組血清NSE含量顯著高于假手術(shù)組P＜0.05，與模型組比較無顯著降低。延至缺血24h，與模型組比較，兩用藥組血清NSE含量均無顯著降低。
實(shí)施例1本發(fā)明膠囊劑的制備膽酸400g 黃芩苷450g 梔子2300g 珍珠母粉4200g按常規(guī)方法制備成膠囊劑。
實(shí)施例2本發(fā)明噴霧劑的制備膽酸740g 黃芩苷500g 梔子2800g 珍珠母粉4500g按常規(guī)方法制備成噴霧劑。
實(shí)施例3本發(fā)明滴丸的制備膽酸800g 黃芩苷560g 梔子3000g 珍珠母粉5500g按常規(guī)方法制備成滴丸。
實(shí)施例4本發(fā)明口服液體制劑的制備膽酸650g 黃芩苷550g 梔子2500g 珍珠母粉5000g按常規(guī)方法制備成口服液體制劑。
實(shí)施例5本發(fā)明注射用片劑的制備膽酸700g 黃芩苷530g 梔子2600g 珍珠母粉4800g按常規(guī)方法制備成注射用片劑。
實(shí)施例6本發(fā)明注射液的制備牛膽酸350g 異去氧膽酸350g 黃芩苷550g
梔子2500g 珍珠母粉5000g按常規(guī)方法制成注射液。
實(shí)施例7本發(fā)明凍干粉針劑的制備牛膽酸480g異去氧膽酸400g黃芩苷450g梔子3300g 珍珠母粉4300g按常規(guī)方法制備成凍干粉針劑。
實(shí)施例8本發(fā)明顆粒劑的制備牛膽酸370g異去氧膽酸400g黃芩苷570g梔子2400g 珍珠母粉5600g按常規(guī)方法制備成顆粒劑。
實(shí)施例9本發(fā)明片劑的制備牛膽酸150g異去氧膽酸150g黃芩苷510g梔子2800g 珍珠母粉4500g按常規(guī)方法制備成片劑。
實(shí)施例10本發(fā)明混懸劑的制備牛膽酸350g異去氧膽酸350g黃芩苷500g梔子2700g 珍珠母粉5000g按常規(guī)方法制備成混懸劑。
實(shí)施例11本發(fā)明注射液的制備A.取牛膽酸350g異去氧膽酸390g黃芩苷500g梔子2800g 珍珠母粉4500g按下述方法制成100升注射液。
B.梔子提取液、珍珠母粉水解液的制備取處方量的梔子，粉碎成粗粉，用8倍量的70％乙醇滲漉，收集滲漉液，回收乙醇，濃縮至60℃下相對(duì)密度為1.10的清膏，加4倍量水稀釋，攪勻，0-4℃冷藏48小時(shí)，濾過，濾液減壓濃縮為60℃下相對(duì)密度為1.10的清膏，上活性炭柱，先用蒸餾水洗脫至洗脫液無色，再用10倍量70％乙醇洗脫，收集洗脫液，減壓回收乙醇并濃縮，干燥，得梔子半成品；取梔子半成品用注射用水溶解，濾過；調(diào)節(jié)PH值至6.0～7.0，0-4℃冷藏24小時(shí)，0.45μm濾膜濾過，濾液加注射用水至溶解，用0.22μm濾膜濾過，得梔子提取液；先配制8倍量4N的H2SO4水溶液，再稱取珍珠母粉在不斷攪拌下慢慢加入(注意不斷攪拌，勿使藥液溢出)，加熱至沸保持微沸6-7小時(shí)，(不斷補(bǔ)加煮沸的去離子水)過濾，濾渣用少量熱水洗滌2次，得桔紅色澄明溶液；放冷后有白色針狀結(jié)晶體析出，再過濾，除去結(jié)晶物，得桔紅色澄清溶液；將澄清的水解液濃縮只剩相當(dāng)于原料總量的2-3倍量時(shí)冷卻，加入乙醇調(diào)至含醇量達(dá)60％冷藏24小時(shí)；抽濾，濾液回收乙醇至無醇味，取出冷藏供配液用。
C.配液1、提取藥液的混合將梔子提取液、珍珠母粉水解液分別過濾，混合均勻，用10％NaOH液調(diào)PH至7，抽濾，得混合提取液；2、膽酸的溶解量取75％乙醇(約為膽酸量的60倍)用10％NaOH液調(diào)PH至11，加入去氧膽酸粉使全部溶解，加入牛膽酸粉調(diào)PH至9使之全部溶解；將混合提取液混合于膽酸溶液中，得混合藥液；3、混合藥液的醇處理量取混合藥液補(bǔ)加95％乙醇使其含醇量達(dá)到75％；用10％NaOH液調(diào)PH至7、密封冷藏2-3天抽濾，回收乙醇至無醇味，室溫放置；補(bǔ)加新鮮注射用水，調(diào)至中性至全量的4/5時(shí)，用10％NaOH液調(diào)PH至7.2，冷藏3-4天，紙漿并抽濾，應(yīng)得澄清液體；4、黃芩苷的處理溶解及混合量取約總配液體積的新鮮去離子水，用10％NaOH液調(diào)PH至8，加入黃芩素細(xì)粉，用10％NaOH液調(diào)PH至7，使其完全溶解；將含黃芩苷溶液加入到混合藥液中，得總混合藥液。
D.總混合藥液的處理調(diào)總混合藥液PH至7.2，加入活性碳(0.3)水浴煮沸，趁熱過濾，濾液密封冷藏3-4天，紙漿并過濾，調(diào)PH至7.2，用G4濾球抽濾備灌封用；按藥劑學(xué)常規(guī)方法制備成注射液，10ml/支，0.09克/ml，靜脈注射20-40ml/日。
實(shí)施例12本發(fā)明注射液(大輸液)的制備A.取牛膽酸390g 異去氧膽酸410g黃芩苷560g梔子3000g 珍珠母粉5500g按下述方法制成100升注射大輸液。
B.梔子提取液、珍珠母粉水解液的制備取處方量的梔子，粉碎成粗粉，用6倍量的70％乙醇滲漉，收集滲漉液，回收乙醇，濃縮至60℃下相對(duì)密度為1.10的清膏，加5倍量水稀釋，攪勻，0-4℃冷藏36小時(shí)，濾過，濾液減壓濃縮為60℃下相對(duì)密度為1.10的清膏，上活性炭柱，先用蒸餾水洗脫至洗脫液無色，再用10倍量70％乙醇洗脫，收集洗脫液，減壓回收乙醇并濃縮，干燥，得梔子半成品；取梔子半成品用注射用水溶解，濾過；調(diào)節(jié)PH值至6.0～7.0，0-4℃冷藏36小時(shí)，0.45μm濾膜濾過，濾液加注射用水至溶解，用0.22μm濾膜濾過，得梔子提取液；先配制8倍量4N的H2SO4水溶液；再稱取珍珠母粉在不斷攪拌下慢慢加入(注意不斷攪拌，勿使藥液溢出)，加熱至沸保持微沸6-7小時(shí)，(不斷補(bǔ)加煮沸的去離子水)過濾，濾渣用少量熱水洗滌2次，得桔紅色澄明溶液，放冷后有白色針狀結(jié)晶體析出，再過濾，除去結(jié)晶物，得桔紅色澄清溶液；將澄清的水解液濃縮只剩相當(dāng)于原料總量的2-3倍量時(shí)冷卻，加入乙醇調(diào)至含醇量達(dá)60％冷藏24小時(shí)；抽濾，濾液回收乙醇至無醇味，取出冷藏供配液用。
C.配液1、提取藥液的混合將梔子提取液、珍珠母粉水解液分別過濾，混合均勻；用10％NaOH液調(diào)PH至7，抽濾，得混合提取液；2、膽酸的溶解量取75％乙醇(約為膽酸量的60倍)用10％NaOH液調(diào)PH至11，加入去氧膽酸粉使全部溶解，此時(shí)PH～9，加入牛膽酸粉調(diào)PH至9使之全部溶解；將混合提取液混合于膽酸溶液中，得混合藥液；3、混合藥液的醇處理量取混合藥液補(bǔ)加95％乙醇使其含醇量達(dá)到75％；用10％NaOH液調(diào)PH至7、密封冷藏2-3天抽濾，回收乙醇至無醇味，室溫放置；補(bǔ)加新鮮注射用水，調(diào)至中性至全量的4/5時(shí)，用10％NaOH液調(diào)PH至7.2，冷藏3-4天，紙漿并抽濾，應(yīng)得澄清液體；4、黃芩苷的處理溶解及混合量取約總配液體積的新鮮去離子水，用10％NaOH液調(diào)PH至8，加入黃芩素細(xì)粉，用10％NaOH液調(diào)PH至7，使其完全溶解；將含黃芩苷溶液加入到混合藥液中，得總混合藥液。
D.總混合藥液的處理調(diào)總混合藥液PH至7.2，加入活性碳(0.3)水浴煮沸，趁熱過濾，濾液密封冷藏3-4天，紙漿并過濾，調(diào)PH至7.2，用G4濾球抽濾備灌封用；取總混合藥液，按常規(guī)方法制備成大輸液。
實(shí)施例13本發(fā)明膠囊劑的制備A.取牛膽酸200g異去氧膽酸200g黃芩苷450g梔子2300g 珍珠母粉4200gB.梔子提取液、珍珠母粉水解液的制備取處方量的梔子，粉碎成粗粉，用6倍量的70％乙醇滲漉，收集滲漉液，回收乙醇，濃縮至60℃下相對(duì)密度為1.10的清膏，加5倍量水稀釋，攪勻，0-4℃冷藏36小時(shí)，濾過，濾液減壓濃縮為60℃下相對(duì)密度為1.10的清膏，上活性炭柱，先用蒸餾水洗脫至洗脫液無色，再用10倍量70％乙醇洗脫，收集洗脫液，減壓回收乙醇并濃縮，干燥，得梔子半成品；取梔子半成品用注射用水溶解，濾過；調(diào)節(jié)PH值至6.0～7.0，0-4℃冷藏36小時(shí)，0.45μm濾膜濾過，濾液加注射用水至溶解，用0.22μm濾膜濾過，得梔子提取液；先配制8倍量4N的H2SO4水溶液；再稱取珍珠母粉在不斷攪拌下慢慢加入(注意不斷攪拌，勿使藥液溢出)，加熱至沸保持微沸6-7小時(shí)，(不斷補(bǔ)加煮沸的去離子水)過濾，濾渣用少量熱水洗滌2次，得桔紅色澄明溶液；放冷后有白色針狀結(jié)晶體析出，再過濾，除去結(jié)晶物，得桔紅色澄清溶液；將澄清的水解液濃縮只剩相當(dāng)于原料總量的2-3倍量時(shí)冷卻，加入乙醇調(diào)至含醇量達(dá)60％冷藏24小時(shí)；抽濾，濾液回收乙醇至無醇味，取出冷藏供配液用。
C.配液1、提取藥液的混合將梔子提取液、珍珠母粉水解液分別過濾，混合均勻；用10％NaOH液調(diào)PH至7，抽濾，得混合提取液；2、膽酸的溶解量取75％乙醇(約為膽酸量的60倍)用10％NaOH液調(diào)PH至11，加入去氧膽酸粉使全部溶解，此時(shí)PH～9，加入牛膽酸粉調(diào)PH至9使之全部溶解；將混合提取液混合于膽酸溶液中，得混合藥液；3、混合藥液的醇處理量取混合藥液補(bǔ)加95％乙醇使其含醇量達(dá)到75％；用10％NaOH液調(diào)PH至7、密封冷藏2-3天抽濾，回收乙醇至無醇味，室溫放置；補(bǔ)加新鮮注射用水，調(diào)至中性至全量的4/5時(shí)，用10％NaOH液調(diào)PH至7.2，冷藏3-4天，紙漿并抽濾，應(yīng)得澄清液體；4、黃芩苷的處理溶解及混合量取約總配液體積的新鮮去離子水，用10％NaOH液調(diào)PH至8，加入黃芩素細(xì)粉，用10％NaOH液調(diào)PH至7，使其完全溶解；將含黃芩苷溶液加入到混合藥液中，得總混合藥液。
D.總混合藥液的處理將總混合藥液減壓濃縮、噴霧干燥成粉，灌裝于空芯膠囊中，制備成硬膠囊。
實(shí)施例14本發(fā)明噴霧劑的制備A.取牛膽酸350g異去氧膽酸350g黃芩苷530g梔子2600g 珍珠母粉4800gB.梔子提取液、珍珠母粉水解液的制備取處方量的梔子，粉碎成粗粉，用10倍量的70％乙醇滲漉，收集滲漉液，回收乙醇，濃縮至60℃下相對(duì)密度為1.10的清膏，加3倍量水稀釋，攪勻，0-4℃冷藏60小時(shí)，濾過，濾液減壓濃縮為60℃下相對(duì)密度為1.10的清膏，上活性炭柱，先用蒸餾水洗脫至洗脫液無色，再用8倍量70％乙醇洗脫，收集洗脫液，減壓回收乙醇并濃縮，干燥，得梔子半成品；取梔子半成品用注射用水溶解，濾過；調(diào)節(jié)PH值至6.0～7.0，0-4℃冷藏12小時(shí)，0.45μm濾膜濾過，濾液加注射用水至溶解，用0.22μm濾膜濾過，得梔子提取液；先配制8倍量4N的H2SO4水溶液；再稱取珍珠母粉在不斷攪拌下慢慢加入(注意不斷攪拌，勿使藥液溢出)，加熱至沸保持微沸6-7小時(shí)，(不斷補(bǔ)加煮沸的去離子水)過濾，濾渣用少量熱水洗滌2次，得桔紅色澄明溶液，放冷后有白色針狀結(jié)晶體析出，再過濾，除去結(jié)晶物，得桔紅色澄清溶液；將澄清的水解液濃縮只剩相當(dāng)于原料總量的2-3倍量時(shí)冷卻，加入乙醇調(diào)至含醇量達(dá)60％冷藏24小時(shí)；抽濾，濾液回收乙醇至無醇味，取出冷藏供配液用。
C.配液1、提取藥液的混合將梔子提取液、珍珠母粉水解液分別過濾，混合均勻；用10％NaOH液調(diào)PH至7，抽濾，得混合提取液；2、膽酸的溶解量取75％乙醇(約為膽酸量的60倍)用10％NaOH液調(diào)PH至11，加入去氧膽酸粉使全部溶解，此時(shí)PH～9，加入牛膽酸粉調(diào)PH至9使之全部溶解；將混合提取液混合于膽酸溶液中，得混合藥液；3、混合藥液的醇處理量取混合藥液補(bǔ)加95％乙醇使其含醇量達(dá)到75％；用10％NaOH液調(diào)PH至7、密封冷藏2-3天抽濾，回收乙醇至無醇味，室溫放置；補(bǔ)加新鮮注射用水，調(diào)至中性至全量的4/5時(shí)，用10％NaOH液調(diào)PH至7.2，冷藏3-4天，紙漿并抽濾，應(yīng)得澄清液體；4、黃芩苷的處理溶解及混合量取約總配液體積的新鮮去離子水，用10％NaOH液調(diào)PH至8，加入黃芩素細(xì)粉，用10％NaOH液調(diào)PH至7，使其完全溶解；將含黃芩苷溶液加入到混合藥液中，得總混合藥液。
D.總混合藥液的處理調(diào)總混合藥液PH至7.2，加入活性碳(0.3)水浴煮沸，趁熱過濾，濾液密封冷藏3-4天，紙漿并過濾，調(diào)PH至7.2，用G4濾球抽濾備灌封用；取總混合藥液，制備成注射液；將注射液減壓濃縮至1/2量，每10ml灌裝于微型噴霧瓶中；制備成噴霧劑5000支，日用量為3-5ml。
實(shí)施例15本發(fā)明滴丸的制備A.取牛膽酸300g 異去氧膽酸350g 黃芩苷550g梔子2500g 珍珠母粉5000gB.梔子提取液、珍珠母粉水解液的制備取處方量的梔子，粉碎成粗粉，，用8倍量的70％乙醇滲漉，收集滲漉液，回收乙醇，濃縮至60℃下相對(duì)密度為1.10的清膏，加4倍量水稀釋，攪勻，0-4℃冷藏48小時(shí)，濾過，濾液減壓濃縮為60℃下相對(duì)密度為1.10的清膏，上活性炭柱，先用蒸餾水洗脫至洗脫液無色，再用10倍量70％乙醇洗脫，收集洗脫液，減壓回收乙醇并濃縮，干燥，得梔子半成品；取梔子半成品用注射用水溶解，濾過；調(diào)節(jié)PH值至6.0～7.0，0-4℃冷藏24小時(shí)，0.45μm濾膜濾過，濾液加注射用水至溶解，用0.22μm濾膜濾過，得梔子提取液；先配制8倍量4N的H2SO4水溶液；再稱取珍珠母粉在不斷攪拌下慢慢加入(注意不斷攪拌，勿使藥液溢出)，加熱至沸保持微沸6-7小時(shí)，(不斷補(bǔ)加煮沸的去離子水)過濾，濾渣用少量熱水洗滌2次，得桔紅色澄明溶液；放冷后有白色針狀結(jié)晶體析出，再過濾，除去結(jié)晶物，得桔紅色澄清溶液；將澄清的水解液濃縮只剩相當(dāng)于原料總量的2-3倍量時(shí)冷卻，加入乙醇調(diào)至含醇量達(dá)60％冷藏24小時(shí)；抽濾，濾液回收乙醇至無醇味，取出冷藏供配液用。
C.配液1、提取藥液的混合將梔子提取液、珍珠母粉水解液分別過濾，混合均勻；用10％NaOH液調(diào)PH至7，抽濾，得混合提取液；2、膽酸的溶解量取75％乙醇(約為膽酸量的60倍)用10％NaOH液調(diào)PH至11，加入去氧膽酸粉使全部溶解，此時(shí)PH～9，加入牛膽酸粉調(diào)PH至9使之全部溶解；將混合提取液混合于膽酸溶液中，得混合藥液；3、混合藥液的醇處理
量取混合藥液補(bǔ)加95％乙醇使其含醇量達(dá)到75％；用10％NaOH液調(diào)PH至7、密封冷藏2-3天抽濾，回收乙醇至無醇味，室溫放置；補(bǔ)加新鮮注射用水，調(diào)至中性至全量的4/5時(shí)，用10％NaOH液調(diào)PH至7.2，冷藏3-4天，紙漿并抽濾，應(yīng)得澄清液體；4、黃芩苷的處理溶解及混合量取約總配液體積的新鮮去離子水，用10％NaOH液調(diào)PH至8，加入黃芩素細(xì)粉，用10％NaOH液調(diào)PH至7，使其完全溶解；將含黃芩苷溶液加入到混合藥液中，得總混合藥液。
D.總混合藥液的處理調(diào)總混合藥液PH至7.2，加入活性碳(0.3)水浴煮沸，趁熱過濾，濾液密封冷藏3-4天，紙漿并過濾，調(diào)PH至7.2，用G4濾球抽濾備灌封用；將總混合藥液減壓濃縮、噴霧干燥成粉；將此藥粉與基質(zhì)物質(zhì)(比例為PEG4000∶硬脂酸∶石蠟∶藥粉＝3.60∶0.32∶0.08∶1.00)水浴溶化，混合均勻，用內(nèi)徑1.69mm，外徑3.81mm的滴管在75℃下以48粒/min左右的滴速，自上而下滴入液體石蠟冷卻液中，收集滴丸用濾紙吸除冷卻劑即得；制備成滴丸。
實(shí)施例16本發(fā)明凍干粉針的制備A.取牛膽酸300g異去氧膽酸430g黃芩苷510g梔子2800g 珍珠母粉4500g按下述方法制成凍干粉針。
B.梔子提取液、珍珠母粉水解液的制備取處方量的梔子，粉碎成粗粉，用8倍量的70％乙醇滲漉，收集滲漉液，同收乙醇，濃縮至60℃下相對(duì)密度為1.10的清膏，加4倍量水稀釋，攪勻，0-4℃冷藏48小時(shí)，濾過，濾液減壓濃縮為60℃下相對(duì)密度為1.10的清膏，上活性炭柱，先用蒸餾水洗脫至洗脫液無色，再用10倍量70％乙醇洗脫，收集洗脫液，減壓回收乙醇并濃縮，干燥，得梔子半成品；取梔子半成品用注射用水溶解，濾過；調(diào)節(jié)PH值至6.0～7.0，0-4℃冷藏24小時(shí)，0.45μm濾膜濾過，濾液加注射用水至溶解，用0.22μm濾膜濾過，得梔子提取液；先配制8倍量4N的H2SO4水溶液，再稱取珍珠母粉在不斷攪拌下慢慢加入(注意不斷攪拌，勿使藥液溢出)，加熱至沸保持微沸6-7小時(shí)，(不斷補(bǔ)加煮沸的去離子水)過濾，濾渣用少量熱水洗滌2次，得桔紅色澄明溶液；放冷后有白色針狀結(jié)晶體析出，再過濾，除去結(jié)晶物，得桔紅色澄清溶液；將澄清的水解液濃縮只剩相當(dāng)于原料總量的2-3倍量時(shí)冷卻，加入乙醇調(diào)至含醇量達(dá)60％冷藏24小時(shí)；抽濾，濾液回收乙醇至無醇味，取出冷藏供配液用。
C.配液1、提取藥液的混合將梔子提取液、珍珠母粉水解液分別過濾，混合均勻；用10％NaOH液調(diào)PH至7，抽濾，得混合提取液；2、膽酸的溶解量取75％乙醇(約為膽酸量的60倍)用10％NaOH液調(diào)PH至11，加入去氧膽酸粉使全部溶解，此時(shí)PH～9，加入牛膽酸粉調(diào)PH至9使之全部溶解；將混合提取液混合于膽酸溶液中，得混合藥液；3、混合藥液的醇處理量取混合藥液補(bǔ)加95％乙醇使其含醇量達(dá)到75％；用10％NaOH液調(diào)PH至7、密封冷藏2-3天抽濾，回收乙醇至無醇味，室溫放置；補(bǔ)加新鮮注射用水，調(diào)至中性至全量的4/5時(shí)，用10％NaOH液調(diào)PH至7.2，冷藏3-4天，紙漿并抽濾，應(yīng)得澄清液體；4、黃芩苷的處理溶解及混合量取約總配液體積的新鮮去離子水，用10％NaOH液調(diào)PH至8，加入黃芩素細(xì)粉，用10％NaOH液調(diào)PH至7，使其完全溶解；將含黃芩苷溶液加入到混合藥液中，得總混合藥液。
D.總混合藥液的處理調(diào)總混合藥液PH至7.2，加入活性碳(0.3)水浴煮沸，趁熱過濾，濾液密封冷藏3-4天，紙漿并過濾，調(diào)PH至7.2，經(jīng)冷凍干燥制成凍干粉針。
實(shí)施例17本發(fā)明口服液體制劑的制備A.取牛膽酸200g異去氧膽酸400g黃芩苷500g梔子2700g 珍珠母粉5000gB.梔子提取液、珍珠母粉水解液的制備取處方量的梔子，粉碎成粗粉，用6倍量的70％乙醇滲漉，收集滲漉液，回收乙醇，濃縮至60℃下相對(duì)密度為1.10的清膏，加5倍量水稀釋，攪勻，0-4℃冷藏36小時(shí)，濾過，濾液減壓濃縮為60℃下相對(duì)密度為1.10的清膏，上活性炭柱，先用蒸餾水洗脫至洗脫液無色，再用10倍量70％乙醇洗脫，收集洗脫液，減壓回收乙醇并濃縮，干燥，得梔子半成品；取梔子半成品用注射用水溶解，濾過；調(diào)節(jié)PH值至6.0～7.0，0-4℃冷藏36小時(shí)，0.45μm濾膜濾過，濾液加注射用水至溶解，用0.22μm濾膜濾過，得梔子提取液；先配制8倍量4N的H2SO4水溶液；再稱取珍珠母粉在不斷攪拌下慢慢加入(注意不斷攪拌，勿使藥液溢出)，加熱至沸保持微沸6-7小時(shí)，(不斷補(bǔ)加煮沸的去離子水)過濾，濾渣用少量熱水洗滌2次，得桔紅色澄明溶液；放冷后有白色針狀結(jié)晶體析出，再過濾，除去結(jié)晶物，得桔紅色澄清溶液；將澄清的水解液濃縮只剩相當(dāng)于原料總量的2-3倍量時(shí)冷卻，加入乙醇調(diào)至含醇量達(dá)60％冷藏24小時(shí)；抽濾，濾液回收乙醇至無醇味，取出冷藏供配液用。
C.配液1、提取藥液的混合將梔子提取液、珍珠母粉水解液分別過濾，混合均勻；用10％NaOH液調(diào)PH至7，抽濾，得混合提取液；2、膽酸的溶解量取75％乙醇(約為膽酸量的60倍)用10％NaOH液調(diào)PH至11，加入去氧膽酸粉使全部溶解，此時(shí)PH～9，加入牛膽酸粉調(diào)PH至9使之全部溶解；將混合提取液混合于膽酸溶液中，得混合藥液；3、混合藥液的醇處理量取混合藥液補(bǔ)加95％乙醇使其含醇量達(dá)到75％；用10％NaOH液調(diào)PH至7、密封冷藏2-3天抽濾，回收乙醇至無醇味，室溫放置；補(bǔ)加新鮮注射用水，調(diào)至中性至全量的4/5時(shí)，用10％NaOH液調(diào)PH至7.2，冷藏3-4天，紙漿并抽濾，應(yīng)得澄清液體；4、黃芩苷的處理溶解及混合量取約總配液體積的新鮮去離子水，用10％NaOH液調(diào)PH至8，加入黃芩素細(xì)粉，用10％NaOH液調(diào)PH至7，使其完全溶解；將含黃芩苷溶液加入到混合藥液中，得總混合藥液。
D.總混合藥液的處理調(diào)總混合藥液PH至7.2，加入活性碳(0.3)水浴煮沸，趁熱過濾，濾液密封冷藏3-4天，紙漿并過濾，調(diào)PH至7.2，用G4濾球抽濾備灌封用；將總混合藥液按常規(guī)方法制備成口服液體制劑。
實(shí)施例18本發(fā)明注射用片劑的制備A.取牛膽酸320g異去氧膽酸480g黃芩苷470g梔子3000g 珍珠母粉4000gB.梔子提取液、珍珠母粉水解液的制備取處方量的梔子，粉碎成粗粉，用8倍量的70％乙醇滲漉，收集滲漉液，回收乙醇，濃縮至60℃下相對(duì)密度為1.10的清膏，加4倍量水稀釋，攪勻，0-4℃冷藏48小時(shí)，濾過，濾液減壓濃縮為60℃下相對(duì)密度為1.10的清膏，上活性炭柱，先用蒸餾水洗脫至洗脫液無色，再用10倍量70％乙醇洗脫，收集洗脫液，減壓回收乙醇并濃縮，干燥，得梔子半成品；取梔子半成品用注射用水溶解，濾過；調(diào)節(jié)PH值至6.0～7.0，0-4℃冷藏24小時(shí)，0.45μm濾膜濾過，濾液加注射用水至溶解，用0.22μm濾膜濾過，得梔子提取液；先配制8倍量4N的H2SO4水溶液；再稱取珍珠母粉在不斷攪拌下慢慢加入(注意不斷攪拌，勿使藥液溢出)，加熱至沸保持微沸6-7小時(shí)，(不斷補(bǔ)加煮沸的去離子水)過濾，濾渣用少量熱水洗滌2次，得桔紅色澄明溶液；放冷后有白色針狀結(jié)晶體析出，再過濾，除去結(jié)晶物，得桔紅色澄清溶液；將澄清的水解液濃縮只剩相當(dāng)于原料總量的2-3倍量時(shí)冷卻，加入乙醇調(diào)至含醇量達(dá)60％冷藏24小時(shí)；抽濾，濾液回收乙醇至無醇味，取出冷藏供配液用。
C.配液1、提取藥液的混合將梔子提取液、珍珠母粉水解液分別過濾，混合均勻；用10％NaOH液調(diào)PH至7，抽濾，得混合提取液；2、膽酸的溶解
量取75％乙醇(約為膽酸量的60倍)用10％NaOH液調(diào)PH至11，加入去氧膽酸粉使全部溶解，此時(shí)PH～9，加入牛膽酸粉調(diào)PH至9使之全部溶解；將混合提取液混合于膽酸溶液中，得混合藥液；3、混合藥液的醇處理量取混合藥液補(bǔ)加95％乙醇使其含醇量達(dá)到75％；用10％NaOH液調(diào)PH至7、密封冷藏2-3天抽濾，回收乙醇至無醇味，室溫放置；補(bǔ)加新鮮注射用水，調(diào)至中性至全量的4/5時(shí)，用10％NaOH液調(diào)PH至7.2，冷藏3-4天，紙漿并抽濾，應(yīng)得澄清液體；4、黃芩苷的處理溶解及混合量取約總配液體積的新鮮去離子水，用10％NaOH液調(diào)PH至8，加入黃芩素細(xì)粉，用10％NaOH液調(diào)PH至7，使其完全溶解；將含黃芩苷溶液加入到混合藥液中，得總混合藥液。
D.總混合藥液的處理將總混合濃縮，按常規(guī)方法制備成注射用片劑。
權(quán)利要求
1.一種藥物組合物，其特征在于是由如下重量份的原料藥制成膽酸3-9重量份 黃芩苷4-6重量份梔子20-35重量份 珍珠母粉40-60重量份。
2.如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于是由如下重量份的原料藥制成膽酸6.5-7.4重量份 黃芩苷5.0-5.5重量份梔子25.0-28.0重量份 珍珠母粉45.0-50.0重量份。
3.如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于是由如下重量份的原料藥制成膽酸4重量份 黃芩苷4.5重量份梔子23重量份 珍珠母粉42重量份。
4.如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于是由如下重量份的原料藥制成膽酸8重量份 黃芩苷5.6重量份梔子30重量份 珍珠母粉55重量份。
5.如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于是由如下重量份的原料藥制成膽酸7.4重量份 黃芩苷5.0重量份梔子28重量份 珍珠母粉45重量份。
6.如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于是由如下重量份的原料藥制成膽酸6.5重量份 黃芩苷5.5重量份梔子25重量份 珍珠母粉50.0重量份。
7.如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于是由如下重量份的原料藥制成膽酸7重量份 黃芩苷5.3重量份梔子26重量份 珍珠母粉48重量份。
8.如權(quán)利要求1-7所述的任意一種藥物組合物，其特征在于所述的膽酸是由牛膽酸和異去氧膽酸按2-4∶2-4.5的比例組成。
9.如權(quán)利要求8所述的藥物組合物，其特征在于所述的膽酸是由牛膽酸和異去氧膽酸按3.0-3.5∶3.5-3.9的比例組成。
10.如權(quán)利要求8所述的藥物組合物，其特征在于所述的膽酸是由牛膽酸和異去氧膽酸按2.2∶3.4的比例組成。
11.如權(quán)利要求8所述的藥物組合物，其特征在于所述的膽酸是由牛膽酸和異去氧膽酸按3.9∶4.1的比例組成。
12.如權(quán)利要求8所述的藥物組合物，其特征在于所述的膽酸是由牛膽酸和異去氧膽酸按3.2∶3.8的比例組成。
13.如權(quán)利要求1-7所述的任意一種藥物組合物，其特征在于其中的黃芩苷可用黃芩苷元、去甲黃芩苷素、漢黃芩苷素或漢黃芩苷代替。
14.如權(quán)利要求8所述的藥物組合物，其特征在于其中的黃芩苷可用黃芩苷元、去甲黃芩苷素、漢黃芩苷素或漢黃芩苷代替。
15.如權(quán)利要求9-12所述的任意一種藥物組合物，其特征在于其中的黃芩苷可用黃芩苷元、去甲黃芩苷素、漢黃芩苷素或漢黃芩苷代替。
16.如權(quán)利要求1、2、3、4、5、6、7、9、10、11、12或14所述的任意一種藥物組合物，其特征在于按常規(guī)方法制備成臨床可接受的劑型注射制劑、片劑、膠囊劑、噴霧劑、丸劑、顆粒劑、混懸劑、滴丸、口服液體制劑。
17.如權(quán)利要求8所述的藥物組合物，其特征在于按常規(guī)方法制備成臨床可接受的劑型注射制劑、片劑、膠囊劑、噴霧劑、丸劑、顆粒劑、混懸劑、滴丸、口服液體制劑。
18.如權(quán)利要求13所述的藥物組合物，其特征在于按常規(guī)方法制備成臨床可接受的劑型注射制劑、片劑、膠囊劑、噴霧劑、丸劑、顆粒劑、混懸劑、滴丸、口服液體制劑。
19.如權(quán)利要求15所述的藥物組合物，其特征在于按常規(guī)方法制備成臨床可接受的劑型注射制劑、片劑、膠囊劑、噴霧劑、丸劑、顆粒劑、混懸劑、滴丸、口服液體制劑。
20.如權(quán)利要求8所述的藥物組合物的制備方法，其特征在于該方法包括如下步驟A.按處方量取牛膽酸、異去氧膽酸、黃芩苷、梔子、珍珠母粉；B.制備梔子提取液和珍珠母粉水解液，混合均勻，調(diào)PH至7，得混合提取液；C.取乙醇，調(diào)PH至11，加去氧膽酸粉使全部溶解，加入牛膽酸粉調(diào)PH至9使之全部溶解；將混合提取液混合于膽酸溶液中，得混合藥液；將混合藥液乙醇沉淀，冷藏，抽濾，回收乙醇；加注射用水，加入黃芩苷細(xì)粉，使其完全溶解，得總混合藥液；D.取總混合藥液，加入輔料，按常規(guī)制劑工藝或步驟，制成注射制劑、片劑、膠囊劑、噴霧劑、丸劑、顆粒劑、混懸劑、滴丸或口服液體制劑。
21.如權(quán)利要求20所述的藥物組合物的制備方法，其特征在于其中梔子提取液的制備方法為取處方量的梔子，粉碎成粗粉，用6～10倍量的60％～80％乙醇滲漉，收集滲漉液，回收乙醇，濃縮至60℃下相對(duì)密度為1.10的清膏，加3～5倍量水稀釋，攪勻，0-4℃冷藏36～60小時(shí)，濾過，濾液減壓濃縮為60℃下相對(duì)密度為1.10的清膏，上活性炭柱，先用蒸餾水洗脫至洗脫液無色，再用8～12倍量60％～80％乙醇洗脫，收集洗脫液，減壓回收乙醇并濃縮，干燥，得梔子半成品；取梔子半成品用注射用水溶解，濾過；調(diào)節(jié)PH值至6.0～7.0，0-4℃冷藏12～36小時(shí)，0.45μm濾膜濾過，濾液加注射用水至溶解，用0.22μm濾膜濾過，得梔子提取液。
22.如權(quán)利要求21所述的藥物組合物的制備方法，其特征在于其中梔子提取液的制備方法為取處方量的梔子，粉碎成粗粉，用8倍量的70％乙醇滲漉，收集滲漉液，回收乙醇，濃縮至60℃下相對(duì)密度為1.10的清膏，加4倍量水稀釋，攪勻，0-4℃冷藏48小時(shí)，濾過，濾液減壓濃縮為60℃下相對(duì)密度為1.10的清膏，上活性炭柱，先用蒸餾水洗脫至洗脫液無色，再用10倍量70％乙醇洗脫，收集洗脫液，減壓回收乙醇并濃縮，干燥，得梔子半成品；取梔子半成品用注射用水溶解，濾過；調(diào)節(jié)PH值至6.0～7.0，0-4℃冷藏24小時(shí)，0.45μm濾膜濾過，濾液加注射用水至溶解，用0.22μm濾膜濾過，得梔子提取液。
23.如權(quán)利要求20、21或22所述的藥物組合物的制備方法，其特征在于其中珍珠母粉水解液的制備方法為先配制8倍量4N的H2SO4水溶液；加入珍珠母粉，加熱至沸保持微沸6-7小時(shí)，過濾，濾渣用熱水洗滌2次，得桔紅色澄明溶液；冷卻后有白色針狀結(jié)晶體析出，再過濾，除去結(jié)晶物，得桔紅色澄清溶液；將澄清的水解液濃縮只剩相當(dāng)于原料總量的2-3倍量時(shí)冷卻，加入乙醇調(diào)至含醇量達(dá)60％，冷藏24小時(shí)；抽濾，濾液回收乙醇至無醇味，取出冷藏供配液用。
24.如權(quán)利要求9-12所述的任意一種藥物組合物的制備方法，其特征在于該方法包括如下步驟A.按處方量取牛膽酸、異去氧膽酸、黃芩苷、梔子、珍珠母粉；B.制備梔子提取液和珍珠母粉水解液，混合均勻，調(diào)PH至7，得混合提取液；C.取乙醇，調(diào)PH至11，加去氧膽酸粉使全部溶解，加入牛膽酸粉調(diào)PH至9使之全部溶解；將混合提取液混合于膽酸溶液中，得混合藥液；將混合藥液乙醇沉淀，冷藏，抽濾，回收乙醇；加注射用水，加入黃芩苷細(xì)粉，使其完全溶解，得總混合藥液；D.取總混合藥液，加入輔料，按常規(guī)制劑工藝或步驟，制成注射制劑、片劑、膠囊劑、噴霧劑、丸劑、顆粒劑、混懸劑、滴丸或口服液體制劑。
25.如權(quán)利要求24所述的藥物組合物的制備方法，其特征在于其中梔子提取液的制備方法為取處方量的梔子，粉碎成粗粉，用6～10倍量的60％～80％乙醇滲漉，收集滲漉液，回收乙醇，濃縮至60℃下相對(duì)密度為1.10的清膏，加3～5倍量水稀釋，攪勻，0-4℃冷藏36～60小時(shí)，濾過，濾液減壓濃縮為60℃下相對(duì)密度為1.10的清膏，上活性炭柱，先用蒸餾水洗脫至洗脫液無色，再用8～12倍量60％～80％乙醇洗脫，收集洗脫液，減壓回收乙醇并濃縮，干燥，得梔子半成品；取梔子半成品用注射用水溶解，濾過；調(diào)節(jié)PH值至6.0～7.0，0-4℃冷藏12～36小時(shí)，0.45μm濾膜濾過，濾液加注射用水至溶解，用0.22μm濾膜濾過，得梔子提取液。
26.如權(quán)利要求25所述的藥物組合物的制備方法，其特征在于其中梔子提取液的制備方法為取處方量的梔子，粉碎成粗粉，用8倍量的70％乙醇滲漉，收集滲漉液，回收乙醇，濃縮至60℃下相對(duì)密度為1.10的清膏，加4倍量水稀釋，攪勻，0-4℃冷藏48小時(shí)，濾過，濾液減壓濃縮為60℃下相對(duì)密度為1.10的清膏，上活性炭柱，先用蒸餾水洗脫至洗脫液無色，再用10倍量70％乙醇洗脫，收集洗脫液，減壓回收乙醇并濃縮，干燥，得梔子半成品；取梔子半成品用注射用水溶解，濾過；調(diào)節(jié)PH值至6.0～7.0，0-4℃冷藏24小時(shí)，0.45μm濾膜濾過，濾液加注射用水至溶解，用0.22μm濾膜濾過，得梔子提取液。
27.如權(quán)利要求24所述的藥物組合物的制備方法，其特征在于其中珍珠母粉水解液的制備方法為先配制8倍量4N的H2SO4水溶液；加入珍珠母粉，加熱至沸保持微沸6-7小時(shí)，過濾，濾渣用熱水洗滌2次，得桔紅色澄明溶液；冷卻后有白色針狀結(jié)晶體析出，再過濾，除去結(jié)晶物，得桔紅色澄清溶液；將澄清的水解液濃縮只剩相當(dāng)于原料總量的2-3倍量時(shí)冷卻，加入乙醇調(diào)至含醇量達(dá)60％，冷藏24小時(shí)；抽濾，濾液回收乙醇至無醇味，取出冷藏供配液用。
28.如權(quán)利要求8所述的藥物組合物的制備方法，其特征在于該方法包括如下步驟A.按處方量取牛膽酸、異去氧膽酸、黃芩苷、梔子、珍珠母粉；B.取處方量的梔子，粉碎成粗粉，用8倍量的70％乙醇滲漉，收集滲漉液，回收乙醇，濃縮至60℃下相對(duì)密度為1.10的清膏，加4倍量水稀釋，攪勻，0-4℃冷藏48小時(shí)，濾過，濾液減壓濃縮為60℃下相對(duì)密度為1.10的清膏，上活性炭柱，先用蒸餾水洗脫至洗脫液無色，再用10倍量70％乙醇洗脫，收集洗脫液，減壓回收乙醇并濃縮，干燥，得梔子半成品；取梔子半成品用注射用水溶解，濾過；調(diào)節(jié)PH值至6.0～7.0，0-4℃冷藏24小時(shí)，0.45μm濾膜濾過，濾液加注射用水至溶解，用0.22μm濾膜濾過，得梔子提取液；先配制8倍量4N的H2SO4水溶液；加入珍珠母粉，加熱至沸保持微沸6-7小時(shí)，過濾，濾渣用熱水洗滌2次，得桔紅色澄明溶液；冷卻后有白色針狀結(jié)晶體析出，再過濾，除去結(jié)晶物，得桔紅色澄清溶液；將澄清的水解液濃縮只剩相當(dāng)于原料總量的2-3倍量時(shí)冷卻，加入乙醇調(diào)至含醇量達(dá)60％，冷藏24小時(shí)；抽濾，濾液回收乙醇至無醇味，取出冷藏供配液用；C.將梔子提取液、珍珠母粉水解液分別過濾，混合均勻，用10％NaOH液調(diào)PH至7，抽濾，得混合提取液；取為膽酸量60倍的75％乙醇，用10％NaOH液調(diào)PH至11，加入去氧膽酸粉使全部溶解，加入牛膽酸粉調(diào)PH至9使之全部溶解；將混合提取液混合于膽酸溶液中，得混合藥液；混合藥液補(bǔ)加95％乙醇使其含醇量達(dá)到75％；用10％NaOH液調(diào)PH至7、密封冷藏2-3天抽濾，回收乙醇至無醇味，室溫放置；補(bǔ)加新鮮注射用水，調(diào)至中性至全量的4/5時(shí)，用10％NaOH液調(diào)PH至7.2，冷藏3-4天，抽濾，得澄清液體；取總配液體積的新鮮去離子水，用10％NaOH液調(diào)PH至8，加入黃芩苷細(xì)粉，用10％NaOH液調(diào)PH至7，使其完全溶解；將含黃芩苷溶液加入到混合藥液中，得總混合藥液；D.調(diào)總混合藥液PH至7.2，加入活性碳水浴煮沸，趁熱過濾，濾液密封冷藏3-4天，紙漿并過濾，調(diào)PH至7.2，用G4濾球抽濾備灌封用，制成注射制劑。
29.如權(quán)利要求9-12所述的任意一種藥物組合物的制備方法，其特征在于該方法包括如下步驟A.按處方量取牛膽酸、異去氧膽酸、黃芩苷、梔子、珍珠母粉；B.取處方量的梔子，粉碎成粗粉，用6倍量的70％乙醇滲漉，收集滲漉液，回收乙醇，濃縮至60℃下相對(duì)密度為1.10的清膏，加5倍量水稀釋，攪勻，0-4℃冷藏36小時(shí)，濾過，濾液減壓濃縮為60℃下相對(duì)密度為1.10的清膏，上活性炭柱，先用蒸餾水洗脫至洗脫液無色，再用10倍量70％乙醇洗脫，收集洗脫液，減壓回收乙醇并濃縮，干燥，得梔子半成品；取梔子半成品用注射用水溶解，濾過；調(diào)節(jié)PH值至6.0～7.0，0-4℃冷藏36小時(shí)，0.45μm濾膜濾過，濾液加注射用水至溶解，用0.22μm濾膜濾過，得梔子提取液；先配制8倍量4N的H2SO4水溶液；加入珍珠母粉，加熱至沸保持微沸6-7小時(shí)，過濾，濾渣用熱水洗滌2次，得桔紅色澄明溶液；冷卻后有白色針狀結(jié)晶體析出，再過濾，除去結(jié)晶物，得桔紅色澄清溶液；將澄清的水解液濃縮只剩相當(dāng)于原料總量的2-3倍量時(shí)冷卻，加入乙醇調(diào)至含醇量達(dá)60％，冷藏24小時(shí)；抽濾，濾液回收乙醇至無醇味，取出冷藏供配液用；C.將梔子提取液、珍珠母粉水解液分別過濾，混合均勻，用10％NaOH液調(diào)PH至7，抽濾，得混合提取液；取為膽酸量60倍的75％乙醇，用10％NaOH液調(diào)PH至11，加入去氧膽酸粉使全部溶解，加入牛膽酸粉調(diào)PH至9使之全部溶解；將混合提取液混合于膽酸溶液中，得混合藥液；混合藥液補(bǔ)加95％乙醇使其含醇量達(dá)到75％；用10％NaOH液調(diào)PH至7、密封冷藏2-3天抽濾，回收乙醇至無醇味，室溫放置；補(bǔ)加新鮮注射用水，調(diào)至中性至全量的4/5時(shí)，用10％NaOH液調(diào)PH至7.2，冷藏3-4天，抽濾，得澄清液體；取總配液體積的新鮮去離子水，用10％NaOH液調(diào)PH至8，加入黃芩苷細(xì)粉，用10％NaOH液調(diào)PH至7，使其完全溶解；將含黃芩苷溶液加入到混合藥液中，得總混合藥液；D.調(diào)總混合藥液PH至7.2，加入活性碳水浴煮沸，趁熱過濾，濾液密封冷藏3-4天，紙漿并過濾，調(diào)PH至7.2，用G4濾球抽濾備灌封用，制成注射制劑。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種藥物組合物及其制備方法，該組合物由牛膽酸、異去氧膽酸、黃芩苷、梔子、珍珠母制成，先制備梔子提取液和珍珠母粉水解液，再加異去氧膽酸粉和牛膽酸粉調(diào)pH得混合藥液；將混合藥液經(jīng)醇沉后，加入黃芩苷細(xì)粉，經(jīng)調(diào)pH等工藝，得總混合藥液；再取總混合藥液制備成各種制劑。本發(fā)明改進(jìn)了梔子提取工藝，形成以梔子苷為主要組分的半成品。在保持清開靈注射液治療腦栓塞類疾病生物效應(yīng)的前提下，基本消除原存在的不良反應(yīng)，達(dá)到了穩(wěn)效減毒的目的，可用于治療腦栓塞、腦出血類疾病的新藥開發(fā)。
文檔編號(hào)A61P9/10GK1602893SQ20041005801
公開日2005年4月6日 申請(qǐng)日期2004年8月6日 優(yōu)先權(quán)日2004年8月6日
發(fā)明者王永炎, 李澎濤, 潘彥舒, 徐雅, 謝利軍 申請(qǐng)人:北京中醫(yī)藥大學(xué)