專利名稱：帶有抗 DNA lgM－DNA 復(fù)合物的植入裝置及制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種基因遞送體系，屬于醫(yī)療材料領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
臨床基因治療存在的共同問題是體內(nèi)基因轉(zhuǎn)染的效率低，轉(zhuǎn)基因在體內(nèi)的表達時間不夠長，達不到臨床治療效果。目前基因治療方面存在的主要問題是不能將核酸有效地靶向運送至體內(nèi)細胞以得到基因的高效表達。心血管內(nèi)基因治療的特殊性還在于很難把基因?qū)Ｒ恍赃f送到血管組織中的病灶處而不進入血液循環(huán)系統(tǒng)，例如，采用球囊導(dǎo)管向血管內(nèi)灌注轉(zhuǎn)基因病毒的懸浮液，研究表明，灌注到血管中的病毒顆粒大部分隨血液進入全身循環(huán)系統(tǒng)，最后被阻留在肝和肺中，很難在冠脈病灶局部血管中達到有效的基因濃度，此外病毒在體內(nèi)器官中的廣泛擴散，潛伏著致命的全身毒副作用，無論安全性還是有效性都不符合臨床應(yīng)用要求。雖然目前有許多載體系統(tǒng)在研究和試用，但是沒有一個載體可以達到導(dǎo)向、高效地把基因?qū)塍w內(nèi)的靶細胞。不少臨床治療方案失敗原因是使用不合要求的載體。注射裸DNA的效果不佳，使用合成高分子或生物大分子包覆DNA的方法也存在各種缺陷，如與高分子接觸的細胞發(fā)生過度增殖。將質(zhì)粒DNA包埋在明膠海棉中植入骨中可成功地轉(zhuǎn)入核酸，但大部分的DNA在短時間內(nèi)(＜1小時)逃逸。其它的DNA運載體系包括包載核酸的的微球和納米粒子，都存在遞送效率的問題。因此缺乏高效、局部的基因?qū)胂到y(tǒng)是基因治療面臨的主要技術(shù)難關(guān)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是克服現(xiàn)有技術(shù)中的不足，提供一種帶有抗DNA抗體(IgM)-DNA復(fù)合物的植入裝置。
本發(fā)明的第二個目的是提供一種帶有抗DNA IgM-DNA復(fù)合物的植入裝置的制備方法。
本發(fā)明的技術(shù)方案概述如下一種帶有抗DNA IgM-DNA復(fù)合物的植入裝置，包括基架，所述基架為血管支架或人工心瓣膜，在所述基架上設(shè)置有帶有巰基的膠原膜，所述膠原膜上設(shè)置有抗DNA IgM，所述抗DNA IgM連接有DNA。
種帶有抗DNA IgM-DNA復(fù)合物的植入裝置的制備方法，包括如下步驟(1)帶有巰基的膠原膜或明膠膜包覆的基架的制備①配制含碳化二亞胺類交聯(lián)劑的混合液向pH為6～8的重量百分比濃度為0.1～0.5％的膠原溶液或明膠溶液中加入碳化二亞胺類交聯(lián)劑，混勻，所述加入碳化二亞胺類交聯(lián)劑的重量為膠原重量或明膠重量的1～20％；②基架涂覆取步驟①制得的混合溶液鋪在基架上，所述基架為血管支架或人工心瓣膜，30～50℃，放置10～100分鐘，干燥，所述涂覆的次數(shù)為5～15次之一，得到膠原膜包覆的基架或明膠膜包覆的基架；③在基架表面偶聯(lián)N-琥珀酰亞胺-3-(2-吡啶二硫代)-丙酸酯將步驟②制得的基架投入到重量百分比為1～5％的N-琥珀酰亞胺-3-(2-吡啶二硫代)-丙酸酯的溶液中，所述N-琥珀酰亞胺-3-(2-吡啶二硫代)-丙酸酯的英文縮寫為SPDP，所述SPDP溶液中的溶劑為溶劑A，所述溶劑A為1∶1體積比的二甲基亞砜和1倍磷酸緩沖液，15～40℃反應(yīng)1～24小時，使SPDP化學偶聯(lián)在基架表面上；④還原取出步驟③制成的基架，用1倍磷酸緩沖液漂洗后，投入到重量百分比為0.05～2％的二硫蘇糖醇的1倍磷酸緩沖液的溶液中，15～40℃，反應(yīng)10～240分鐘，得到帶有巰基的膠原膜或明膠膜包覆的基架，用1倍磷酸緩沖液沖洗干凈；(2)抗DNA IgM與SPDP的偶聯(lián)①將SPDP溶于所述溶劑A中，使每毫升溶液中含有0.5～20毫克SPDP；②取抗DNA IgM，加入到步驟①制成的溶液中，使抗DNA IgM與SPDP的重量比為1∶0.1～1，在15～37℃反應(yīng)0.5～20小時，通過一根填有5～20ml D-葡聚糖的塑料脫鹽柱，以1倍磷酸緩沖液為平衡液，除去未反應(yīng)的SPDP，收集連接了SPDP的抗DNA IgM組分；(3)將抗DNA IgM固定在基架上取步驟(1)制得的帶有巰基的膠原膜或明膠膜包覆的基架，放入重量百分比濃度為0.005～0.05％的連接了SPDP的抗DNA IgM組分中，15～37℃下反應(yīng)1～24小時，用1倍磷酸緩沖液沖洗基架，去除未結(jié)合上的抗DNA IgM。
(4)將核酸通過抗體結(jié)合在基架上取步驟(3)得到的帶有抗DNA IgM的基架，投入到重量百分比為0.5～5％的核酸的1倍磷酸緩沖液的溶液中，37℃反應(yīng)30～240分鐘，用磷酸緩沖液沖洗，去除未結(jié)合的核酸，即得到一種帶有抗DNA IgM-DNA復(fù)合物的植入裝置，4℃保存在磷酸緩沖液中備用。
所述的碳化二亞胺類交聯(lián)劑為1-(3-二甲氨基丙基)乙基碳二亞胺或N′ N-二環(huán)己基碳二亞胺或N′N-二異丙基碳二亞胺。
本發(fā)明的一種帶有抗DNA IgM-DNA復(fù)合物的植入裝置，可以特異性有效地將核酸完整地運送至哺乳動物靶部位并保留在該部位，而使基因?qū)Ｒ恍耘c靶細胞結(jié)合而不向全身擴散，對人體安全無毒性，同時又能誘導(dǎo)基因高效轉(zhuǎn)染和可控表達。


圖1為帶有鼠單克隆抗小牛DNA抗體IgM-含表達綠色熒光蛋白的質(zhì)?；虻暮怂釓?fù)合物的血管支架在細胞中轉(zhuǎn)染并表達的結(jié)果。
圖2為不帶有鼠單克隆抗小牛DNA抗體IgM的對照血管支架在細胞中轉(zhuǎn)染并表達的結(jié)果。
具體實施例方式
下面結(jié)合具體實施例對本發(fā)明作進一步地說明實施例1一種帶有抗DNA IgM-DNA復(fù)合物的植入裝置的制備方法，包括如下步驟(1)帶有巰基的膠原膜包覆的基架(血管支架)的制備
①配制含碳化二亞胺類交聯(lián)劑的混合液向pH為6的重量百分比濃度為0.3％的膠原溶液中加入1-(3-二甲氨基丙基)乙基碳二亞胺，混勻，1-(3-二甲氨基丙基)乙基碳二亞胺的重量為膠原重量的10％；②基架涂覆取步驟①制得的混合溶液鋪在血管支架上，30℃，放置50分種，干燥，如此涂覆5次，得到膠原膜包覆的血管支架；③在基架表面偶聯(lián)N-琥珀酰亞胺-3-(2-吡啶二硫代)-丙酸酯將步驟②制得的血管支架投入到重量百分比為1％的N-琥珀酰亞胺-3-(2-吡啶二硫代)-丙酸酯(SPDP)的溶液中，所述SPDP溶液中的溶劑為溶劑A，所述溶劑A為1∶1體積比的二甲基亞砜和1倍磷酸緩沖液，40℃反應(yīng)1小時，使SPDP化學偶聯(lián)在血管支架表面上；④還原取出步驟③制成的血管支架，用1倍磷酸緩沖液漂洗后，投入到重量百分比為0.05％的二硫蘇糖醇的1倍磷酸緩沖液的溶液中，15℃，反應(yīng)240分鐘，得到帶有巰基的膠原膜包覆的血管支架，用1倍磷酸緩沖液沖洗干凈；(2)抗DNA IgM與SPDP的偶聯(lián)①將SPDP溶于所述溶劑A中即1∶1體積比的二甲基亞砜和1倍磷酸緩沖液，使每毫升溶液中含有0.5毫克SPDP；②取鼠單克隆抗小牛DNA抗體IgM，加入到步驟①制成的溶液中，使鼠單克隆抗小牛DNA抗體IgM與SPDP的重量比為1∶1，在15℃反應(yīng)20小時，通過一根填有5ml D-葡聚糖的塑料脫鹽柱，以1倍磷酸緩沖液為平衡液，除去未反應(yīng)的SPDP，收集連接了SPDP的抗DNA IgM組分；(3)將抗DNA IgM固定在基架上取步驟(1)制得的帶有巰基的膠原膜包覆的血管支架，放入重量百分比濃度為0.005％的連接了SPDP的抗DNA IgM組分中，稀釋用的溶劑是1倍磷酸緩沖液，15℃下反應(yīng)24小時，用1倍磷酸緩沖液沖洗血管支架去除未結(jié)合上的抗DNA IgM；(4)將表達綠色熒光蛋白的質(zhì)?；虻暮怂釓?fù)合物通過抗體結(jié)合在基架上取步驟(3)得到的帶有抗DNA IgM的血管支架，投入到重量百分比為1％的含綠色熒光蛋白表達基因質(zhì)粒的核酸的1倍磷酸緩沖液的溶液中，37℃反應(yīng)240分鐘，用磷酸緩沖液沖洗去除未結(jié)合的核酸，即得到一種帶有抗DNA IgM-表達綠色熒光蛋白的質(zhì)?；虻暮怂釓?fù)合物的植入裝置，4℃保存在磷酸緩沖液中備用。
實施例2一種帶有抗DNA IgM-DNA復(fù)合物的植入裝置的制備方法，包括如下步驟(1)帶有巰基的明膠膜包覆的基架(人工心瓣膜)的制備①配制含碳化二亞胺類交聯(lián)劑的混合液向pH為7的重量百分比濃度為0.1％的明膠溶液中加入N′N-二環(huán)己基碳二亞胺，混勻，N′N-二環(huán)己基碳二亞胺的重量為明膠重量的1％；②基架涂覆取步驟①制得的混合溶液鋪在聚氨酯人工心瓣膜上，40℃，放置10分鐘，干燥，如此涂覆15次，得到明膠膜包覆的聚氨酯人工心瓣膜；③在基架表面偶聯(lián)N-琥珀酰亞胺-3-(2-吡啶二硫代)-丙酸酯將步驟②制得的人工心瓣膜投入到重量百分比為5％的N-琥珀酰亞胺-3-(2-吡啶二硫代)-丙酸酯(SPDP)的溶液中，所述SPDP溶液中的溶劑為溶劑A，所述溶劑A為1∶1體積比的二甲基亞砜和1倍磷酸緩沖液，15℃反應(yīng)24小時，使SPDP化學偶聯(lián)在人工心瓣膜表面上；④還原取出步驟③制成的人工心瓣膜，用1倍磷酸緩沖液漂洗后，投入到重量百分比為1％的二硫蘇糖醇的1倍磷酸緩沖液的溶液中，25℃，反應(yīng)100分鐘，得到帶有巰基的明膠膜包覆的人工心瓣膜，用1倍磷酸緩沖液沖洗干凈；(2)抗DNA IgM與SPDP的偶聯(lián)①將SPDP溶于所述溶劑A中，使每毫升溶液中含有10毫克SPDP；②取鼠單克隆抗兔DNA抗體IgM，加入到步驟①制成的溶液中，使抗DNA IgM與SPDP的重量比為1∶0.5，在37℃反應(yīng)0.5小時，通過一根填有10ml D-葡聚糖的塑料脫鹽柱，以1倍磷酸緩沖液為平衡液，除去未反應(yīng)的SPDP，收集連接了SPDP的抗DNA IgM組分；(3)將抗DNA IgM固定在基架上取步驟(1)制得的帶有巰基的明膠膜包覆的人工心瓣膜，放入重量百分比濃度為0.05％的連接了SPDP的抗DNA IgM組分中，稀釋用的溶劑是1倍磷酸緩沖液，37℃下反應(yīng)1小時，用1倍磷酸緩沖液沖洗基架去除未結(jié)合上的抗DNA IgM；(4)將核酸通過抗體結(jié)合在基架上取步驟(3)得到的帶有抗DNA IgM的基架，投入到重量百分比為0.5％的核酸的1倍磷酸緩沖液的溶液中，37℃反應(yīng)30分鐘，用磷酸緩沖液沖洗去除未結(jié)合的核酸，即得到一種帶有抗DNA IgM-DNA復(fù)合物的植入裝置，4℃保存在磷酸緩沖液中備用。
實施例3一種帶有抗DNA IgM-DNA復(fù)合物的植入裝置的制備方法，包括如下步驟(1)帶有巰基的膠原膜包覆的基架(血管支架)的制備①配制含碳化二亞胺類交聯(lián)劑的混合液向pH為8的重量百分比濃度為0.5％的膠原溶液中加入N′N-二異丙基碳二亞胺，混勻，N′N-二異丙基碳二亞胺的重量為膠原重量的20％；②基架涂覆取步驟①制得的混合溶液鋪在血管支架上，50℃，放置100分鐘，干燥，如此涂覆10次，得到膠原膜包覆的血管支架；③在基架表面偶聯(lián)N-琥珀酰亞胺-3-(2-吡啶二硫代)-丙酸酯將步驟②制得的血管支架投入到重量百分比為3％的N-琥珀酰亞胺-3-(2-吡啶二硫代)-丙酸酯(SPDP)的溶液中，SPDP溶液中的溶劑為溶劑A，溶劑A為1∶1體積比的二甲基亞砜和1倍磷酸緩沖液，25℃反應(yīng)10小時，使SPDP化學偶聯(lián)在血管支架表面上；④還原取出步驟③制成的血管支架，用1倍磷酸緩沖液漂洗后，投入到重量百分比為2％的二硫蘇糖醇的1倍磷酸緩沖液的溶液中，40℃，反應(yīng)10分鐘，得到帶有巰基的膠原膜包覆的血管支架，用1倍磷酸緩沖液沖洗干凈；(2)抗DNA IgM與SPDP的偶聯(lián)①將SPDP溶于所述溶劑A中，使每毫升溶液中含有20毫克SPDP；②取鼠單克隆抗羊DNA抗體IgM，加入到步驟①制成的溶液中，使抗DNA IgM與SPDP的重量比為1∶0.1，在25℃反應(yīng)10小時，通過一根填有20ml D-葡聚糖的塑料脫鹽柱，以1倍磷酸緩沖液為平衡液，除去未反應(yīng)的SPDP，收集連接了SPDP的抗DNA IgM組分；(3)將抗DNA IgM固定在基架上取步驟(1)制得的帶有巰基的膠原膜包覆的血管支架，放入重量百分比濃度為0.01％的連接了SPDP的抗DNA IgM組分中，稀釋用的溶劑是1倍磷酸緩沖液，27℃下反應(yīng)12小時，用1倍磷酸緩沖液沖洗基架去除未結(jié)合上的抗DNA IgM；(4)將核酸通過抗體結(jié)合在基架上取步驟(3)得到的帶有抗DNA IgM的基架，投入到重量百分比為5％的核酸的1倍磷酸緩沖液的溶液中，37℃反應(yīng)120分鐘，用磷酸緩沖液沖洗去除未結(jié)合的核酸，即得到一種帶有抗DNA IgM-DNA復(fù)合物的植入裝置，4℃保存在磷酸緩沖液中備用。
實施例4一種帶有抗DNA IgM-DNA復(fù)合物的植入裝置的制備方法，包括如下步驟(1)帶有巰基的明膠膜包覆的基架(人工心瓣膜)的制備①配制含碳化二亞胺類交聯(lián)劑的混合液向pH為7的重量百分比濃度為0.1％的明膠溶液中加入N′N-二環(huán)己基碳二亞胺，混勻，N′N-二環(huán)己基碳二亞胺的重量為明膠重量的1％；②基架涂覆取步驟①制得的混合溶液鋪在聚氨酯人工心瓣膜上，40℃，放置10分鐘，干燥，如此涂覆15次，得到明膠膜包覆的聚氨酯人工心瓣膜；③在基架表面偶聯(lián)N-琥珀酰亞胺-3-(2-吡啶二硫代)-丙酸酯；將步驟②制得的人工心瓣膜投入到重量百分比為5％的N-琥珀酰亞胺-3-(2-吡啶二硫代)-丙酸酯(SPDP)的溶液中，所述SPDP溶液中的溶劑為溶劑A，所述溶劑A為1∶1體積比的二甲基亞砜和1倍磷酸緩沖液，15℃反應(yīng)24小時，使SPDP化學偶聯(lián)在人工心瓣膜表面上；④還原取出步驟③制成的人工心瓣膜，用1倍磷酸緩沖液漂洗后，投入到重量百分比為1％的二硫蘇糖醇的1倍磷酸緩沖液的溶液中，25℃，反應(yīng)100分鐘，得到帶有巰基的明膠膜包覆的人工心瓣膜，用1倍磷酸緩沖液沖洗干凈；(2)抗DNA IgM與SPDP的偶聯(lián)①將SPDP溶于所述溶劑A中，使每毫升溶液中含有10毫克SPDP；②取人化的抗DNA抗體IgM，加入到步驟①制成的溶液中，使抗DNA IgM與SPDP的重量比為1∶0.5，在37℃反應(yīng)0.5小時，通過一根填有5ml D-葡聚糖的塑料脫鹽柱，以1倍磷酸緩沖液為平衡液，除去未反應(yīng)的SPDP，收集連接了SPDP的抗DNA IgM組分；(3)將抗DNA IgM固定在基架上取步驟(1)制得的帶有巰基的明膠膜包覆的人工心瓣膜，放入重量百分比濃度為0.05％的連接了SPDP的抗DNA IgM組分中，稀釋用的溶劑是1倍磷酸緩沖液，37℃下反應(yīng)1小時，用1倍磷酸緩沖液沖洗基架去除未結(jié)合上的抗DNA IgM；(4)將核酸通過抗體結(jié)合在基架上取步驟(3)得到的帶有抗DNA IgM的基架，投入到重量百分比為0.5％的核酸的1倍磷酸緩沖液的溶液中，37℃反應(yīng)30分鐘，用磷酸緩沖液沖洗去除未結(jié)合的核酸，即得到一種帶有抗DNA IgM-DNA復(fù)合物的植入裝置，4℃保存在磷酸緩沖液中備用。
實施例5由實施例1制備的帶有鼠單克隆抗小牛DNA抗體IgM的血管支架的細胞轉(zhuǎn)染試驗為了使血管支架三維結(jié)構(gòu)均被覆細胞，首先將本發(fā)明實施例1制備的血管支架在1×106A10細胞(大鼠血管平滑肌細胞)懸液中37℃孵育1小時，然后置于35mm細胞培養(yǎng)皿，加入1×105A10細胞懸液，于72小時后在倒置熒光顯微鏡下觀察結(jié)果。見圖1，圖2。
圖1為含帶有鼠單克隆抗小牛DNA抗體IgM的血管支架細胞轉(zhuǎn)染結(jié)果。在圖中可見，在血管支架上附著大量表達綠色熒光蛋白的細胞，而血管支架外的細胞未見綠色熒光蛋白表達。
圖2為在制備過程中有(1)(2)(4)的步驟，沒有步驟(3)的血管支架，細胞轉(zhuǎn)染實驗的步驟也同樣，結(jié)果，僅有極少量細胞表達綠色熒光蛋白。
權(quán)利要求
1.一種帶有抗DNA IgM-DNA復(fù)合物的植入裝置，包括基架，所述基架為血管支架或人工心瓣膜，其特征是在所述基架上設(shè)置有帶有巰基的膠原膜，所述膠原膜上設(shè)置有抗DNAIgM，所述抗DNA IgM連接有DNA。
2.一種帶有抗DNA IgM-DNA復(fù)合物的植入裝置的制備方法，其特征是包括如下步驟(1)帶有巰基的膠原膜或明膠膜包覆的基架的制備①配制含碳化二亞胺類交聯(lián)劑的混合液向pH為6～8的重量百分比濃度為0.1～0.5％的膠原溶液或明膠溶液中加入碳化二亞胺類交聯(lián)劑，混勻，所述加入碳化二亞胺類交聯(lián)劑的重量為膠原重量或明膠重量的1～20％；②基架涂覆取步驟①制得的混合溶液鋪在基架上，所述基架為血管支架或人工心瓣膜，30～50℃，放置10～100分鐘，干燥，所述涂覆的次數(shù)為5～15次之一，得到膠原膜包覆的基架或明膠膜包覆的基架；③在基架表面偶聯(lián)N-琥珀酰亞胺-3-(2-吡啶二硫代)-丙酸酯將步驟②制得的基架投入到重量百分比為1～5％的N-琥珀酰亞胺-3-(2-吡啶二硫代)-丙酸酯的溶液中，所述N-琥珀酰亞胺-3-(2-吡啶二硫代)-丙酸酯的英文縮寫為SPDP，所述SPDP溶液中的溶劑為溶劑A，所述溶劑A為1∶1體積比的二甲基亞砜和1倍磷酸緩沖液，15～40℃反應(yīng)1～24小時，使SPDP化學偶聯(lián)在基架表面上；④還原取出步驟③制成的基架，用1倍磷酸緩沖液漂洗后，投入到重量百分比為0.05～2％的二硫蘇糖醇的1倍磷酸緩沖液的溶液中，15～40℃，反應(yīng)10～240分鐘，得到帶有巰基的膠原膜或明膠膜包覆的基架，用1倍磷酸緩沖液沖洗干凈；(2)抗DNA IgM與SPDP的偶聯(lián)①將SPDP溶于所述溶劑A中，使每毫升溶液中含有0.5～20毫克SPDP；②取抗DNA IgM，加入到步驟①制成的溶液中，使抗DNA IgM與SPDP的重量比為1∶0.1～1，在15～37℃反應(yīng)0.5～20小時，通過一根填有5～20ml D-葡聚糖的塑料脫鹽柱，以1倍磷酸緩沖液為平衡液，除去未反應(yīng)的SPDP，收集連接了SPDP的抗DNA IgM組分；(3)將抗DNA IgM固定在基架上取步驟(1)制得的帶有巰基的膠原膜或明膠膜包覆的基架，放入重量百分比濃度為0.005～0.05％的連接了SPDP的抗DNA IgM組分中，15～37℃下反應(yīng)1～24小時，用1倍磷酸緩沖液沖洗基架，去除未結(jié)合上的抗DNA IgM。(4)將核酸通過抗體結(jié)合在基架上取步驟(3)得到的帶有抗DNA IgM的基架，投入到重量百分比為0.5～5％的核酸的1倍磷酸緩沖液的溶液中，37℃反應(yīng)30～240分鐘，用磷酸緩沖液沖洗，去除未結(jié)合的核酸，即得到一種帶有抗DNA IgM-DNA復(fù)合物的植入裝置，4℃保存在磷酸緩沖液中備用。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種帶有抗DNA IgM-DNA復(fù)合物的植入裝置的制備方法，其特征在于所述的碳化二亞胺類交聯(lián)劑為1-(3-二甲氨基丙基)乙基碳二亞胺或N′ N-二環(huán)己基碳二亞胺或N′N-二異丙基碳二亞胺。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種帶有抗DNA IgM－DNA復(fù)合物的植入裝置及制備方法，帶有抗DNAIgM－DNA復(fù)合物的植入裝置包括血管支架或人工心瓣膜，在血管支架或人工瓣膜上設(shè)置有帶有巰基的膠原膜，膠原膜上設(shè)置有抗DNA IgM，抗DNA IgM連接有DNA，制備方法是(1)帶有巰基的膠原膜包覆的基架的制備；(2)抗DNA IgM與SPDP的偶聯(lián)；(3)將抗DNA IgM固定在基架上；(4)將核通過抗體結(jié)合在基架上，本發(fā)明的植入裝置，可以特異性有效地將核酸完整地運送至哺乳動物靶部位并保留在該部位，而使基因?qū)Ｒ恍耘c靶細胞結(jié)合而不向全身擴散，對人體安全無毒性，同時又能誘導(dǎo)基因高效轉(zhuǎn)染和可控表達。
文檔編號A61M29/00GK1634597SQ200410072318
公開日2005年7月6日 申請日期2004年10月12日 優(yōu)先權(quán)日2004年10月12日
發(fā)明者宋存先, 冷希崗, 孫洪范, 金旭, 王滿燕 申請人:中國醫(yī)學科學院生物醫(yī)學工程研究所