專利名稱：對化學(xué)性肝損傷有輔助保護(hù)作用的保健膠囊及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于保健品的技術(shù)領(lǐng)域，更具體地說，本發(fā)明涉及一種對化學(xué)性肝損傷有輔助保護(hù)作用的保健膠囊。
背景技術(shù)：
隨著人類社會的不斷發(fā)展，人們的生活水平、思想觀念也在不斷的提高和更新，既要享受生活，又要顧及身體健康成為共識。酒作為全世界范圍內(nèi)大到國事活動，小至居家生活不可缺少的一種食品飲料，在給人們生活帶來快樂的同時，因飲酒而造成對身體的損傷(主要為化學(xué)性肝損傷)不勝枚舉。在現(xiàn)有技術(shù)具有對化學(xué)性肝損傷有輔助保護(hù)作用的保健品中，普遍存在原料繁多和制備方法復(fù)雜，適應(yīng)范圍較小等缺點。例如，2004年5月26日授權(quán)的中國專利CN1150937C公開的中藥組合物，具有治療化學(xué)性肝損傷作用，但是它所用的原料較多，制備方法復(fù)雜。2003年5月14日公開的中國專利申請CN1416842A公開的一種具有護(hù)肝作用的復(fù)合劑及制備方法，比前一個專利更為復(fù)雜。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明為了解決上述使用原料多，工藝復(fù)雜，適應(yīng)范圍小的缺點，提出一種以五味子、葛根和甲殼素為原料的保健膠囊及其制備方法。
具體技術(shù)方案如下。
一種對化學(xué)性肝損傷有輔助保護(hù)作用的保健膠囊，由下述重量份的原料制成五味子0.1～0.25份，甲殼素1～2.5份，葛根0.1～0.4份。
本發(fā)明的保健膠囊優(yōu)選由下述重量份的原料制成五味子0.17份，甲殼素1.67份，葛根0.25份。
本發(fā)明的保健膠囊的制備方法，包括以下步驟(1)將葛根和五味子粉碎，過20目篩；(2)在葛根和五味子中加入葛根和五味子重量之和的4～6倍重量的質(zhì)量百分比濃度為50％的乙醇，在95℃的溫度下回流0.5～1.5小時，用400目的過濾機(jī)以3000rpm的轉(zhuǎn)速過濾，得到提取液，再重復(fù)提取和過濾2次，合并提取液；(3)將合并的提取液減壓濃縮至相對密度為1.35時，得到浸膏；(4)將浸膏放在烤箱，在60～80℃烘烤3～4天，得到干浸膏；(5)將干浸膏粉碎，過100目篩，得到浸膏粉；(6)將步驟(5)得到的浸膏粉和甲殼素混合均勻，分裝得到本發(fā)明的膠囊。
本發(fā)明的保健膠囊的功效成分和含量每100g中含有0.68g的總黃酮和0.076g的五味子甲素。
適宜人群是有化學(xué)性肝損傷危險者。不適宜人群是少年兒童。
使用方法和用量每日3次，每次1粒，0.5g/粒。
保質(zhì)期24個月。
本發(fā)明的保健膠囊對化學(xué)性肝損傷有輔助保護(hù)作用。
五味子的主要成分為五味子素，能明顯降低肝炎引起谷丙轉(zhuǎn)氨酶活力升高，并對肝細(xì)胞具有保護(hù)作用，近年來研究發(fā)現(xiàn)其中有一種中間體聯(lián)苯雙酯具有明顯降低SGPT作用，而且能明顯增強(qiáng)肝臟的解毒功能，影響肝藥酶的活性。
葛根為豆科植物或苷葛藤的根，前者主要產(chǎn)于湖南、河南、浙江、四川等地，后者主要產(chǎn)于廣西、廣東等地。功效解肌退熱、生津、透疹、升陽止瀉等作用，在抗炎免疫作用中，葛根湯能明顯增強(qiáng)小鼠肝、脾巨噬細(xì)胞對炭粒攝取功能，對羊紅細(xì)胞誘發(fā)的小鼠遲發(fā)型足跖腫脹反應(yīng)具有抑制作用。葛根可刺激小鼠抗體的產(chǎn)生，使抗體分泌量增加，與對照組相比有非常顯著性差異(P＜0.01)，同時用藥組對淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化和巨噬細(xì)胞吞噬率有明顯促進(jìn)作用，與對照組相比有非常顯著性差異(P＜0.01)，說明葛根對小鼠非特異性免疫功能明顯增強(qiáng)。
甲殼素可提高肌體的免疫力，在體內(nèi)能直接活化巨噬細(xì)胞，自然殺傷細(xì)胞，攻擊腫瘤細(xì)胞、B淋巴細(xì)胞、T淋巴細(xì)胞的活性，增強(qiáng)肌體的免疫監(jiān)視功能，消除體內(nèi)的有毒有害因子，利用肌體自己的免疫力戰(zhàn)勝體內(nèi)各種致病因子，抑制腫瘤，強(qiáng)化肝功能，有利于脂質(zhì)代謝而保護(hù)肝臟不發(fā)生脂肪肝，與干擾素并用可促進(jìn)肝類病毒抗體的產(chǎn)生，而有利于防治肝炎。
本發(fā)明的保健酒委托湖南省疾病預(yù)防控制中心進(jìn)行了檢驗，證實具有以下功能和特點。
本發(fā)明的保健膠囊對化學(xué)性肝損傷有輔助保護(hù)功能。
1材料和方法1.1樣品本發(fā)明膠囊，人體口服劑量為3粒/天/成人，體重按60kg計算，折合劑量為0.025g/kg·bw。
1.2實驗動物和環(huán)境中南大學(xué)實驗動物學(xué)部提供的清潔級昆明種小鼠(批準(zhǔn)證號為湖南省醫(yī)動字第20-011號)50只，雄性，體重18～22g。實驗期間實驗環(huán)境溫度23～25℃，濕度50～58％。
1.3劑量選擇與受試物給予方式設(shè)三個劑量組，分別為0.125、0.250、0.750g/kg·Bw(分別相當(dāng)于人體推薦劑量的5、10、30倍)，取本發(fā)明的保健膠囊內(nèi)物用蒸餾水配制所需濃度，灌胃量為0.2ml/10gBW。同時設(shè)空白對照組和乙醇肝損傷模型對照組。
1.4主要儀器與試劑722分光光度計、加樣器、恒溫水浴鍋、離心機(jī)、混懸器、組織勻漿器丙二醛(MDA)、還原型谷胱甘肽(GSH)測試盒由南京建成生物工程研究所提供，甘油三酯(TG)測試盒由北京中生生物技術(shù)有限公司提供。
1.5實驗方法1.5.1各劑量組灌胃給予受試物，空白對照組和模型對照給予蒸餾水，連續(xù)30天，每天一次。第30天各劑量組和模型對照組灌胃給予50％乙醇，(12ml/kgBW)造成急性肝損傷模型，1小時后各劑量組再灌胃給予受試物，空白對照組和模型對照組給予蒸餾水。禁食16小時處死動物，取小鼠肝臟左葉用10％甲醛固定，恒冷低溫切片，蘇丹III染色，做病理組織學(xué)檢查；另取肝臟用生理鹽水制成10％的肝勻漿，檢測肝組織中丙二醛(MDA)、還原型谷胱甘肽(GSH)、甘油三酯(TG)的含量。
1.5.2乙醇中毒小鼠肝臟病理組織學(xué)變化與評分標(biāo)準(zhǔn)對每張病理切片全面進(jìn)行觀察(不遺漏任何視野)，觀察脂肪滴在肝臟的分步、范圍和面積，并根據(jù)脂肪改變程度進(jìn)行量化，按“-(0分)、+(1分)、++(2分)、+++(3分)、++++(4分)”量化積分。
1.6實驗數(shù)據(jù)統(tǒng)計各劑量組與模型對照組比較用Spss軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析，先對數(shù)據(jù)進(jìn)行方差齊性檢驗，若方差齊，采用單因素方差分析進(jìn)行總體比較，發(fā)現(xiàn)差異再用Dunnett法進(jìn)行多個劑量與一個對照組均數(shù)間的兩兩比較。若方差不齊則對原始數(shù)據(jù)進(jìn)行適當(dāng)?shù)淖兞哭D(zhuǎn)換，滿足方差齊性檢驗后，用轉(zhuǎn)換后數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計；若變量轉(zhuǎn)換后仍未達(dá)到方差齊的目的，改用鐵和檢驗進(jìn)行統(tǒng)計，發(fā)現(xiàn)總體比較有差異，則采用不要求方差齊性的Tamhane’s T2檢驗進(jìn)行兩兩比較，模型對照組與空白對照組比較采用t檢驗。
1.7結(jié)果判定肝組織中丙二醛(MDA)、還原型谷胱甘肽(GSH)、甘油三酯(TG)三項檢測指標(biāo)結(jié)果陽性，或肝組織中丙二醛(MDA)、還原型谷胱甘肽(GSH)、甘油三酯(TG)三項指標(biāo)中任兩項指標(biāo)陽性和病理檢測結(jié)果陽性，可判定受試樣品對化學(xué)肝損傷具有輔助保護(hù)功能。
2結(jié)果2.1本發(fā)明保健膠囊對動物體重的影響以0.125g/kgBW、0.250g/kgBW、0.750g/kgBW劑量的本發(fā)明保健膠囊內(nèi)容物給小鼠經(jīng)口灌胃30天，各劑量組體重與空白對照組比較，差異均無顯著性(P＞0.05)。
表1本發(fā)明的保健膠囊對動物體重的影響(x±SD)

2.2本發(fā)明的保健膠囊對肝組織中MDA、GSH、TG的影響由表2、3、4可見模型對照組的MDA、TG均高于空白對照組，模型對照組的GSH低于空白對照組，差異均有顯著性(p＜0.01)。本發(fā)明保健膠囊內(nèi)容物0.750g/kgBW劑量組的MDA和0.250g/kgBW、0.750g/kgBW劑量組的TG均低于模型對照組，差異均有顯著性(p＜0.01)。各劑量組的GSH與模型對照組比較，差異均無顯著性(p＞0.05)表2保健膠囊內(nèi)容物對小鼠肝組織中丙二醛(MDA)的影響(x±SD)

**與空白對照組比較，P＜0.01；＝＝與模型對照組比較，P＜0.01
表3保健膠囊內(nèi)容物對小鼠肝組織中還原型谷胱甘肽(GSH)的影響(x±SD)

表4保健膠囊內(nèi)容物對小鼠肝組織中甘油三酯(TG)的影響(x±SD)

**與空白對照組比較，P＜0.01；＝＝與模型對照組比較，P＜0.012.3本發(fā)明的保健膠囊對肝組織中病理檢查的影響由表5可見，模型對照組肝臟脂肪改變的程度高于空白對照組，差異有顯著性(p＜0.01)；膠囊內(nèi)容物0.250g/kgBW、0.750g/kgBW劑量組肝臟脂肪改變的程度明顯低于模型對照組，差異均有顯著性(P＜0.05)
表5保健膠囊內(nèi)容物對小鼠肝組織脂肪改變程度的影響(x±SD)

**與空白對照組比較，P＜0.01；＝＝與模型對照組比較，P＜0.01；＝與模型對照組比較，P＜0.053小結(jié)0.125g/kgBW、0.250g/kgBW、0.750g/kgBW劑量的本發(fā)明保健膠囊內(nèi)容物給小鼠經(jīng)口灌胃30天后，以乙醇造成急性性肝損傷模型。受試物對小鼠體重?zé)o明顯影響。保健膠囊內(nèi)容物0.750g/kgB.W劑量組的MDA和0.250g/kgBW、0.750g/kgBW劑量組的TG均低于模型對照組，差異均有顯著性(p＜0.01)。保健膠囊內(nèi)容物0.250g/kgBW、0.750g/kgBW劑量組肝臟脂肪改變的程度明顯低于模型對照組，差異均有顯著性(p＜0.05)。該送檢樣品對化學(xué)性肝損傷具有輔助保護(hù)功能。
本發(fā)明的保健膠囊具有無毒安全特性。
1急性經(jīng)口LD50結(jié)果表明，對雌雄小鼠的急性經(jīng)口LD50均大于21500mg/kg·bw，屬無毒物。
2三項遺傳毒性試驗結(jié)果表明，Ames試驗、小鼠骨髓嗜多染紅細(xì)胞微核試驗、小鼠精子畸形試驗均為陰性。
330天喂養(yǎng)試驗結(jié)果表明，以0.63mg/kg·bw、1.25mg/kg·bw、2.5mg/kg·bw劑量的本發(fā)明的保健膠囊內(nèi)容物給大鼠經(jīng)口灌胃30天，試驗期間動物生長發(fā)育良好，各劑量組體重、增重、食物利用率、血常規(guī)指標(biāo)、臟器/體重比值與對照組比較，無顯著性差異(P＞0.05)。大體解剖和組織病理檢查未見與樣品有關(guān)的異常改變。提示本發(fā)明的膠囊對大鼠各項觀察指標(biāo)未產(chǎn)生明顯毒副作用。
具體實施例方式
下面以實施例的方式進(jìn)一步解釋本發(fā)明，但本發(fā)明不局限于實施例。
實施例1(1)將0.25kg葛根和0.17kg五味子粉碎，過20目篩；(2)在葛根和五味子中加入9.20kg的質(zhì)量百分比濃度為50％的乙醇，在95℃的溫度下回流1小時，用400目的過濾機(jī)以3000rpm的轉(zhuǎn)速過濾，得到提取液，再重復(fù)提取和過濾2次，合并提取液；(3)將合并的提取液減壓濃縮至相對密度為1.35時，得到浸膏；(4)將浸膏放在烤箱，在70℃烘烤3天，得到干浸膏；(5)將干浸膏粉碎，過100目篩，得到浸膏粉；(6)將步驟(5)得到的浸膏粉和1.67kg甲殼素混合均勻，分裝得到本發(fā)明的膠囊。
實施例2(1)將0.4kg葛根和0.25kg五味子粉碎，過20目篩；(2)在葛根和五味子中加入5.5kg的質(zhì)量百分比濃度為50％的乙醇，在95℃的溫度下回流1.5小時，用400目的過濾機(jī)以3000rpm的轉(zhuǎn)速過濾，得到提取液，再重復(fù)提取和過濾2次，合并提取液；(3)將合并的提取液減壓濃縮至相對密度為1.35時，得到浸膏；(4)將浸膏放在烤箱，在80℃烘烤3天，得到干浸膏；(5)將干浸膏粉碎，過100目篩，得到浸膏粉；(6)將步驟(5)得到的浸膏粉和1kg甲殼素混合均勻，分裝得到本發(fā)明的膠囊。
實施例3(1)將0.1kg葛根和0.1kg五味子粉碎，過20目篩；(2)在葛根和五味子中加入11kg的質(zhì)量百分比濃度為50％的乙醇，在95℃的溫度下回流1小時，用400目的過濾機(jī)以3000rpm的轉(zhuǎn)速過濾，得到提取液，再重復(fù)提取和過濾2次，合并提取液；
(3)將合并的提取液減壓濃縮至相對密度為1.35時，得到浸膏；(4)將浸膏放在烤箱，在60℃烘烤3～4天，得到干浸膏；(5)將干浸膏粉碎，過100目篩，得到浸膏粉；(6)將步驟(5)得到的浸膏粉和2.5kg甲殼素混合均勻，分裝得到本發(fā)明的膠囊。
權(quán)利要求
1.一種對化學(xué)性肝損傷有輔助保護(hù)作用的保健膠囊，其特征在于它由下述重量份的原料制成五味子0.1～0.25份，甲殼素1～2.5份，葛根0.1～0.4份。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的保健膠囊，其特征在于它由下述重量份的原料制成五味子0.17份，甲殼素1.67份，葛根0.25份。
3.一種權(quán)利要求1所述的保健膠囊的制備方法，其特征在于它包括以下步驟(1)將葛根和五味子粉碎，過20目篩；(2)在葛根和五味子中加入葛根和五味子重量之和的4～6倍重量的質(zhì)量百分比濃度為50％的乙醇，在95℃的溫度下回流0.5～1.5小時，用400目的過濾機(jī)以3000rpm的轉(zhuǎn)速過濾，得到提取液，再重復(fù)提取和過濾2次，合并提取液；(3)將合并的提取液減壓濃縮至相對密度為1.35時，得到浸膏；(4)將浸膏放在烤箱，在60～80℃烘烤3～4天，得到干浸膏；(5)將干浸膏粉碎，過100目篩，得到浸膏粉；(6)將步驟(5)得到的浸膏粉和甲殼素混合均勻，分裝得到本發(fā)明的膠囊。
全文摘要
本發(fā)明公開的對化學(xué)性肝損傷有輔助保護(hù)作用的保健膠囊及其制備方法屬于保健品的技術(shù)領(lǐng)域，為了解決現(xiàn)有技術(shù)中該類保健品的使用原料多，工藝復(fù)雜，適應(yīng)范圍小的問題，采用五味子、甲殼素和葛根為原料制成保健膠囊，并且公開了其制備方法，動物試驗證實本發(fā)明的保健膠囊可以有效地對化學(xué)性肝損傷有輔助保護(hù)作用。
文檔編號A61K9/48GK1616061SQ200410080509
公開日2005年5月18日 申請日期2004年9月30日 優(yōu)先權(quán)日2004年9月30日
發(fā)明者張 林 申請人:張 林