專利名稱：用于眼用緩釋制劑的輔料、含有該輔料的藥物及制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種用于眼用緩釋制劑的輔料，具體地，是涉及一種以卡波姆、羥丙甲基纖維素為主要原料制備而成的輔料，本發(fā)明還涉及含有該輔料的藥物組合物及其制備方法。
背景技術(shù)：
目前在臨床上用于治療眼部感染的藥物中最為常用的兩種劑型為溶液劑和眼膏劑。溶液型滴眼液，其作用原理是滴入眼睛后隨淚液分泌進(jìn)行藥物的傳遞，其特點(diǎn)是分布均勻，但由于結(jié)膜囊淚液不停的分泌及從鼻淚管迅速排除，使其在結(jié)膜囊內(nèi)滯留時(shí)間很短，因此眼內(nèi)生物利用度很低。需頻繁給藥以維持正常藥物濃度，給病人帶來(lái)很大不便，且給藥次數(shù)的增多大大增加了引起交叉感染的可能性。眼膏劑療效較持久，可達(dá)到緩釋功效，但由于使用輔料和工藝方法的限制使其難以實(shí)現(xiàn)均勻給藥，且使用不方便。因此，改進(jìn)眼科用藥劑型，研制發(fā)明方便實(shí)用的長(zhǎng)效控緩釋成為目前國(guó)內(nèi)外研究的方向。
氧氟沙星(Ofloxacin)是繼諾氟沙星后研制的療效更高、療程更短、耐受性更好的第三代喹諾酮類抗菌藥，鹽酸左旋氧氟沙星為氧氟沙星的左旋活性本體，與氧氟沙星相比，鹽酸左旋氧氟沙星具有水溶性高、抑菌作用強(qiáng)、毒副作用低，臨床療效高，不易產(chǎn)生耐藥性等特點(diǎn)，特別對(duì)葡萄球菌屬、痤瘡丙酸桿菌等引起的眼科感染癥及眼瞼炎、麥粒腫等有良好的療效。氧氟沙星滴眼液已廣泛針對(duì)眼部感染的主要致病菌，顯示很強(qiáng)的抗菌活性，其作用具有抗菌譜廣、療效好、不良反應(yīng)小的特點(diǎn)。目前市售的鹽酸左旋氧氟沙星滴眼液為溶液型滴眼液，藥物在眼內(nèi)滯留時(shí)間短，生物利用度低，需頻繁給藥，易污染。專利文獻(xiàn)CN1374085A公開(kāi)了“左旋氧氟沙星外用及眼用凝膠制劑”，該凝膠制劑以殼聚糖為凝膠基質(zhì)，主藥鹽酸左旋氧氟沙星含量高。體外為凝膠，凝膠狀態(tài)不穩(wěn)定，制劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)可控性差，使用方法為每次少量涂于下結(jié)膜囊內(nèi)，它不是一次性的而是多劑量，多次反復(fù)使用，涂抹中藥物易被污染；且由于涂抹于下結(jié)膜囊內(nèi)，難以實(shí)現(xiàn)均勻給藥，造成用藥不定量和涂抹不均勻，使用不方便，且易造成浪費(fèi)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的技術(shù)方案是提供一種用于眼用緩釋制劑的輔料，它是由卡波姆、羥丙甲基纖維素為主要原料制備而成的眼用緩釋制劑輔料。本發(fā)明還提供了含有該眼用緩釋制劑輔料的藥物組合物及其制備方法。
本發(fā)明提供了一種用于眼用緩釋制劑的輔料，它主要是由卡波姆、羥丙甲基纖維素為原料制成的眼用緩釋制劑。
所述眼用制劑常用的輔料是等滲調(diào)節(jié)劑為氯化鈉、硼砂；防腐劑為尼泊金乙酯、苯乙醇、杜滅芬、硼酸、雙氯苯雙胍己烷或氯化苯甲烴胺；pH調(diào)節(jié)劑為碳酸鹽緩沖液、磷酸鹽緩沖液、硼酸鹽緩沖液、氫氧化鈉；注射用水。pH調(diào)節(jié)時(shí)可選用1M的氫氧化鈉。
其中，所述的卡波姆是卡波姆940、934、941、974P NF優(yōu)選為卡波姆974P NF；所述的羥丙甲基纖維是羥丙甲基纖維素E50LV。所述的卡波姆974P NF與羥丙甲基纖維素E50LV，其重量配比為1∶(2～20)，卡波姆與羥丙甲基纖維素混合的重量體積百分比為1.1％～2.5％w/v。
進(jìn)一步地，所述的卡波姆974PNF與羥丙甲基纖維素E50LV，其重量配比為1∶5，卡波姆與羥丙甲基纖維素混合的重量體積百分比為1.80％w/v。
本發(fā)明還提供了一種眼用藥物組合物，它是由治療眼部疾病的主藥為活性成分，加上所述的眼用緩釋制劑制備而成的眼用緩釋制劑。所述的主藥是指發(fā)揮治療眼部疾病功效的藥物，可能是單一化合物、組合物或原藥材。
進(jìn)一步地，所述的眼用緩釋制劑為滴眼液。其中，所述的滴眼液的pH值為5.5～6.5。
其中，所述的主藥為鹽酸左旋氧氟沙星、左旋氧氟沙星、更昔洛韋氟康唑或阿昔洛韋一種或其混合。
進(jìn)一步地，所述的主藥為鹽酸左旋氧氟沙星。其中，它是由下述重量體積w/v百分比的原料制備而成的眼用緩釋制劑鹽酸左旋氧氟沙星0.15％～0.60％、卡波姆974P NF 0.1～0.5％、羥丙甲基纖維素E50LV 1.0％～2.0％、磷酸氫二鈉0.2～0.3％、磷酸二氫鈉0.3～0.6％、氯化鈉0.4～0.6％、尼泊金乙酯0.02～0.04％，余量為水。
更進(jìn)一步地，它是由下述重量體積w/v百分比的原料制備而成的眼用緩釋制劑鹽酸左旋氧氟沙星0.5％、卡波姆974P NF 0.3％、羥丙甲基纖維素E50LV 1.5％、磷酸氫二鈉0.25％、磷酸二氫鈉0.5％、氯化鈉0.5％、尼泊金乙酯0.03％，余量為水。
本發(fā)明還提供了該眼用藥物組合物的制備方法，它包括如下步驟a、將卡波姆加入注射用水溶脹；b、將主藥與a步驟所得的溶脹物與眼用制劑常用的輔料溶于注射用水中，混合均勻，加入氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH值，經(jīng)檢驗(yàn)合格后滅菌分裝，即得。
采用本發(fā)明眼用緩釋制劑的輔料制備的滴眼液，在使用前為澄明液體，采用定量泵滴頭包裝，患者使用時(shí)方便，藥物滴入眼內(nèi)均勻分布后形成凝膠臨床使用時(shí)由眼部生理環(huán)境的作用，轉(zhuǎn)變?yōu)槟z劑，使藥物長(zhǎng)時(shí)間緩慢釋放。
大多數(shù)滴眼液的pH值通常與人淚液的pH值相同，偏堿性，pH值在7.3～7.5之間，若pH值不當(dāng)，可引起對(duì)眼部的刺激，增加淚液的分泌，導(dǎo)致藥物被沖洗流失，甚至損傷角膜。本發(fā)明眼用緩釋制劑的輔料制備的滴眼液的pH值為5.5～6.5，偏酸性，是由于本發(fā)明采用原位膠化技術(shù)制備滴眼液，使該藥物劑型在酸性條件下為溶液形式，藥液滴入眼中均勻分布后在眼部特有的生理環(huán)境作用下受淚液的pH影響，形成凝膠，覆蓋于眼球表面，且不影響眼睛的正常視覺(jué)，藥物緩慢釋放，達(dá)到長(zhǎng)效緩釋的作用并可以減少使用中對(duì)制劑本身的污染。
通過(guò)藥理學(xué)、藥效學(xué)臨床驗(yàn)證均表明使用該工藝制備的本發(fā)明藥物對(duì)于提高藥物的使用效果、內(nèi)在質(zhì)量，增加制劑的穩(wěn)定性，減少藥物對(duì)眼睛的刺激，效果顯著。
本發(fā)明藥物，若主藥為鹽酸左旋氧氟沙星時(shí)，其主藥含量小，質(zhì)量穩(wěn)定，能夠在較長(zhǎng)時(shí)間內(nèi)保持有效藥物濃度，生物利用度高，對(duì)眼的刺激性小，減少給藥頻率，其制備工藝科學(xué)，制劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)可控性高，定量使用，使用方便，在生產(chǎn)中由于最終制劑為溶液劑涉及的配料、灌裝等流通過(guò)程可以相對(duì)減少浪費(fèi)，易形成工業(yè)生產(chǎn)，降低生產(chǎn)成本，為臨床提供一種新的用藥選擇。
顯然，根據(jù)本發(fā)明的上述內(nèi)容，按照本領(lǐng)域的普通技術(shù)知識(shí)和慣用手段，在不脫離本發(fā)明上述基本技術(shù)思想前提下，還可以做出其它多種形式的修改、替換或變更。
以下通過(guò)實(shí)施例形式的具體實(shí)施方式
，對(duì)本發(fā)明的上述內(nèi)容再作進(jìn)一步的詳細(xì)說(shuō)明。但不應(yīng)將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于以下的實(shí)例。凡基于本發(fā)明上述內(nèi)容所實(shí)現(xiàn)的技術(shù)均屬于本發(fā)明的范圍。


圖1鹽酸左旋氧氟沙星標(biāo)準(zhǔn)溶液標(biāo)準(zhǔn)曲線20.2％鹽酸左旋氧氟沙星緩釋滴眼液給藥后房水濃度—時(shí)間曲線圖30.3％鹽酸左旋氧氟沙星普通滴眼液給藥后房水濃度—時(shí)間曲線圖40.2％鹽酸左旋氧氟沙星緩釋滴眼液給藥后平均房水濃度—時(shí)間曲線圖50.3％鹽酸左旋氧氟沙星普通滴眼液給藥后平均房水濃度—時(shí)間曲線
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例1本發(fā)明滴眼液的制備原料鹽酸左旋氧氟沙星5.0g、卡波姆974P NF3.0g、羥丙甲基纖維素E50LV 15.0g、磷酸氫二鈉2.5g、磷酸二氫鈉5.0g、氯化鈉5.0g、尼泊金乙酯0.3g、1M氫氧化鈉適量、注射用水加至1000ml；步驟1.取磷酸氫二鈉及磷酸二氫鈉及羥丙甲基纖維素，溶于350ml注射用水中，不停攪拌，形成透明溶液，備用；。
2.取卡波姆加入到300ml注射用水中溶脹，待溶漲完全后，加入到上述步驟1的物料中，不停攪拌，形成溶液A；3.取鹽酸左旋氧氟沙星、氯化鈉加入到100ml注射用水中，不停攪拌，溶解后，形成淡黃色透明溶液，備用；4.取尼泊金乙酯加入到100ml注射用水中，至完全溶解，并攪拌均勻，加入到上述步驟3的物料中，形成溶液B；5.將溶液A與溶液B混合均勻后，加入氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH值至5.5～6.5，過(guò)濾，自濾器上加注射用水至1000ml。滅菌，取樣檢測(cè)含量和pH，合格后，無(wú)菌分裝，每瓶5ml。
實(shí)施例2原料鹽酸左旋氧氟沙星5.0g、卡波姆974P NF1.0g、羥丙甲基纖維素E50LV 15.0g、磷酸氫二鈉2.5g、磷酸二氫鈉5.0g、氯化鈉5.0g、尼泊金乙酯0.3g、1M氫氧化鈉適量、注射用水加至1000ml；步驟同實(shí)施例1。
實(shí)施例3原料鹽酸左旋氧氟沙星5.0g、卡波姆974P NF5.0g、羥丙甲基纖維素E50LV 15.0g、磷酸氫二鈉2.5g、磷酸二氫鈉5.0g、氯化鈉5.0g、尼泊金乙酯0.3g、1M氫氧化鈉適量、注射用水加至1000ml；步驟同實(shí)施例1。
實(shí)施例4原料鹽酸左旋氧氟沙星5.0g、卡波姆974P NF3.0g、羥丙甲基纖維素E50LV 10.0g、磷酸氫二鈉2.5g、磷酸二氫鈉5.0g、氯化鈉5.0g、尼泊金乙酯0.3g、1M氫氧化鈉適量、注射用水加至1000ml；步驟同實(shí)施例1。
實(shí)施例5原料鹽酸左旋氧氟沙星5.0g、卡波姆974P NF3.0g、羥丙甲基纖維素E50LV 20.0g、磷酸氫二鈉2.5g、磷酸二氫鈉5.0g、氯化鈉5.0g、尼泊金乙酯0.3g、1M氫氧化鈉適量、注射用水加至1000ml；步驟同實(shí)施例1。
實(shí)施例6原料鹽酸左旋氧氟沙星2.9g、卡波姆974P NF4.2g、羥丙甲基纖維素E50LV 15.8g、磷酸氫二鈉2.8g、磷酸二氫鈉5.6g、氯化鈉6.0g、尼泊金乙酯0.38g、1M氫氧化鈉適量、注射用水加至1000ml；步驟同實(shí)施例1。
實(shí)施例7原料鹽酸左旋氧氟沙星1.6g、卡波姆974P NF2.1g、羥丙甲基纖維素E50LV 13.5g、磷酸氫二鈉2.1g、磷酸二氫鈉3.2g、氯化鈉4.1g、尼泊金乙酯0.21g、1M氫氧化鈉適量、注射用水加至1000ml；步驟同實(shí)施例1。
實(shí)施例8原料鹽酸左旋氧氟沙星2.2g、卡波姆940 3.5g、羥丙甲基纖維素E50LV 14.0g、磷酸氫二鈉2.5g、磷酸二氫鈉5.0g、氯化鈉4.5g、尼泊金乙酯0.32g、1M氫氧化鈉適量、注射用水加至1000ml；步驟同實(shí)施例1。
實(shí)施例9原料鹽酸左旋氧氟沙星2.3g、卡波姆934 2.8g、羥丙甲基纖維素E50LV 15.0g、磷酸氫二鈉2.8g、磷酸二氫鈉5.6g、氯化鈉5.0g、尼泊金乙酯0.3g、1M氫氧化鈉適量、注射用水加至1000ml；步驟同實(shí)施例1。
實(shí)施例10原料鹽酸左旋氧氟沙星2.0g、卡波姆974P NF3.0g、羥丙甲基纖維素E50LV 15.0g、磷酸氫二鈉2.5g、磷酸二氫鈉5.0g、氯化鈉5.0g、尼泊金乙酯0.3g、1M氫氧化鈉適量、注射用水加至1000ml；實(shí)施例11原料更昔洛韋2.5g、卡波姆934 3.5g、羥丙甲基纖維素E50LV 13.0g、磷酸氫二鈉2.5g、磷酸二氫鈉5.0g、氯化鈉5.0g、尼泊金乙酯0.25g、1M氫氧化鈉適量、注射用水加至1000ml；實(shí)施例12原料阿昔洛韋1.8g、卡波姆941 4.2g、羥丙甲基纖維素E50LV 17.0g、磷酸氫二鈉2.5g、磷酸二氫鈉5.0g、氯化鈉5.0g、尼泊金乙酯0.32g、1M氫氧化鈉適量、注射用水加至1000ml；
實(shí)施例13原料氟康唑2.3g、卡波姆974P NF 3.0g、羥丙甲基纖維素E50LV 15.0g、磷酸氫二鈉2.5g、磷酸二氫鈉5.0g、氯化鈉5.0g、尼泊金乙酯0.3g、1M氫氧化鈉適量、注射用水加至1000ml；實(shí)施例14提供最佳配比實(shí)驗(yàn)通過(guò)對(duì)上述實(shí)施例1～5以成品的澄明度、pH值、原位凝膠形成能力及鹽酸左旋氧氟沙星含量為指標(biāo)，對(duì)不同的原料處方進(jìn)行考察和評(píng)價(jià)。
表1不同處方質(zhì)量考察結(jié)果

由表8-2結(jié)果可見(jiàn)，按實(shí)施例1至5制備的樣品中，鹽酸左旋氧氟沙星的含量、pH、澄明度均符合規(guī)定，從膠凝能力來(lái)看，實(shí)施例2和實(shí)施例4分別因?yàn)榭ú泛土u丙甲基纖維素的濃度過(guò)低而無(wú)法在人工淚液中形成凝膠，實(shí)施例1、3、5則可以形成。
將實(shí)施例1、3、5作為研究處方，進(jìn)一步考察凝膠形成后隨淚液流動(dòng)分散的能力，發(fā)現(xiàn)處方3、5分別因?yàn)榭ú泛土u丙甲基纖維素的濃度過(guò)高而難以在凝膠形成后隨淚液流動(dòng)均勻分散，故選定實(shí)施例1作為本發(fā)明的的最優(yōu)選原料組方。
實(shí)施例14鹽酸左旋氧氟沙星的測(cè)定方法使用高效液相色譜法(《中國(guó)藥典》2000年版二部附錄V D)測(cè)定本發(fā)明藥物中鹽酸左旋氧氟沙星含量。
色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，0.05mol/L枸櫞酸-乙腈(體積比79∶21)(用三乙胺調(diào)節(jié)pH值至4.0)為流動(dòng)相，流速為1.2ml/min，檢測(cè)波長(zhǎng)為293nm。理論塔板數(shù)按鹽酸左旋氧氟沙星峰計(jì)算應(yīng)不低于2000。
鹽酸左旋氧氟沙星精密量取實(shí)施例1至例6制得的本發(fā)明藥物適量，用流動(dòng)相定量稀釋制成每1ml中含鹽酸左旋氧氟沙星0.1mg的溶液，作為供試品溶液；另取鹽酸左旋氧氟沙星對(duì)照品適量，用流動(dòng)相定量稀釋制成每1ml中含鹽酸左旋氧氟沙星0.1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。精密量取供試品溶液和對(duì)照品溶液各10μl，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖，按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，即得，計(jì)算結(jié)果為鹽酸左旋氧氟沙星的重量體積百分比為0.15％～0.60％w/v。
以下通過(guò)藥效學(xué)試驗(yàn)證明本發(fā)明的有益效果。
試驗(yàn)例1本發(fā)明藥物滴眼液的臨床前藥代動(dòng)力學(xué)試驗(yàn)1、儀器和試藥(1)分析儀器Waters HPLC色譜系統(tǒng)(515泵，916二極管陣列檢測(cè)器，Millennium工作站，美國(guó)Waters公司)。XW-80A旋渦混合器(上海醫(yī)科大學(xué)儀器廠)，80-2B臺(tái)式離心機(jī)(上海安亭科學(xué)儀器廠)。
(2)實(shí)驗(yàn)藥品a、標(biāo)準(zhǔn)藥品鹽酸左旋氧氟沙星化學(xué)對(duì)照品(批號(hào)20020327)，由南陽(yáng)普康集團(tuán)衡育制藥有限責(zé)任公司生產(chǎn)。
b、試驗(yàn)制劑本發(fā)明藥物緩釋滴眼液試驗(yàn)，由實(shí)施例1制備(自制；規(guī)格5ml鹽酸左旋氧氟沙星10mg；)c、對(duì)照制劑鹽酸左旋氧氟沙星普通滴眼液對(duì)照制劑(生產(chǎn)單位正大福瑞達(dá)制藥有限公司生產(chǎn)；規(guī)格5ml；鹽酸左旋氧氟沙星15mg；批號(hào)20020623)d、化學(xué)試劑乙腈為德國(guó)Merck公司生產(chǎn)的色譜純?cè)噭?，水為二次蒸餾水。
測(cè)試方法高效液相色譜法2、試驗(yàn)方法考查(1)組織樣品的采取給藥時(shí)，將家兔固定在兔箱內(nèi)，輕輕拉開(kāi)下眼瞼使之與眼球成袋狀，用微量取樣器滴入0.2％鹽酸左旋氧氟沙星緩釋滴眼液試驗(yàn)制劑50μl，或0.3％鹽酸左旋氧氟沙星普通滴眼液對(duì)照制劑50μl，再輕輕放下眼瞼，使藥物不會(huì)溢出。
在給藥后10、20、30、60、90、120、180、240、360、480min取樣。在每個(gè)時(shí)間點(diǎn)各取一組家兔，用生理鹽水沖洗結(jié)膜囊后，立即抽取房水100μl。所有樣品都儲(chǔ)存于-20℃以備提取測(cè)定。
(2)房水樣品的預(yù)處理取房水100μl，加磷酸鹽緩沖液(pH＝7.4)200μl混勻，加二氯甲烷1ml振蕩1min，3000rpm離心10min，取有機(jī)層，轉(zhuǎn)移至5ml尖底離心管，50℃，空氣流下吹干備用。
HPLC進(jìn)樣時(shí)，加流動(dòng)相500μl至離心管中，旋渦溶解完全，3000rpm離心2min后，取20μl注入高效液相色譜儀中進(jìn)樣分析。
(3)色譜分離條件DAB ODS色譜柱(OHG 4240-92C18填料，5μm，4.6mmid×25cm)，柱溫為室溫。流動(dòng)相為0.05mol/l枸櫞酸溶液—乙腈(79∶21)，使用三乙胺調(diào)節(jié)pH至4.0；流速為1.2ml/min；進(jìn)樣體積20μl。
(4)鹽酸左旋氧氟沙星的房水標(biāo)準(zhǔn)曲線制備鹽酸左旋氧氟沙星標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制精密稱取鹽酸左旋氧氟沙星標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照品25.0mg，置于50ml量瓶中，加0.1mol/l稀鹽酸溶解并定容，精密吸取1.0ml于10ml量瓶中，以磷酸鹽緩沖液(pH＝7.4)稀釋至刻度，搖勻，即得50.0μg/ml的標(biāo)準(zhǔn)貯備液。精密吸取標(biāo)準(zhǔn)貯備液一定量，分別以磷酸鹽緩沖液(pH＝7.4)稀釋定容至六個(gè)10ml量瓶中，配成濃度為0.1，0.2，0.5，1.0，2.0和10.0μg/ml的標(biāo)準(zhǔn)溶液。見(jiàn)圖1。
(5)房水中鹽酸左旋氧氟沙星的標(biāo)準(zhǔn)曲線制備精密吸取50μl空白房水，精密加入不同濃度的鹽酸左旋氧氟沙星標(biāo)準(zhǔn)溶液50μl，配制成含鹽酸左旋氧氟沙星為0.05，0.1，0.25，0.5，1.0和5.0μg/ml的標(biāo)準(zhǔn)房水樣品。按上述房水樣品提取方法操作，并進(jìn)行色譜分析。以峰面積A和濃度C進(jìn)行線性回歸，得標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為A＝-35.2+8996.63C(r＝0.9999，n＝5)，線性范圍0.05～5.0μg/ml。本法測(cè)定房水中鹽酸左旋氧氟沙星的最低檢測(cè)濃度為0.02μg/ml，最低檢測(cè)限為0.2ng。
(6)、分析方法的回收率考察配制0.05μg/ml、0.5μg/ml、5.0μg/ml低、中、高三種不同濃度的鹽酸左旋氧氟沙星標(biāo)準(zhǔn)房水樣品，按上述房水樣品預(yù)處理步驟操作，房水樣品中鹽酸左旋氧氟沙星色譜峰面積代入標(biāo)準(zhǔn)曲線方程，通過(guò)測(cè)得量與加入量的比值求得相對(duì)回收率，結(jié)果列于表2。
表2鹽酸左旋氧氟沙星房水樣品高效液相色譜法測(cè)定回收率試驗(yàn)(n＝6)

平均回收率為102.6％；平均RSD為4.06％(7)、分析方法的精密度試驗(yàn)按房水樣品標(biāo)準(zhǔn)曲線測(cè)定方法配制0.05μg/ml、0.5μg/ml、5.0μg/ml低、中、高三種不同濃度的鹽酸左旋氧氟沙星房水樣品，按上述房水樣品預(yù)處理步驟同法操作，測(cè)定日間和日內(nèi)相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差，結(jié)果見(jiàn)表3。
表3鹽酸左旋氧氟沙星房水樣品色譜法測(cè)定精密度試驗(yàn)(n＝6)

(8)、方法學(xué)小結(jié)建立的房水樣品中鹽酸左旋氧氟沙星高效液相色譜測(cè)定方法，房水內(nèi)源性物質(zhì)均不干擾樣品峰，平均回收率102.6％，日間和日內(nèi)相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差小于7.87％，房水中鹽酸左旋氧氟沙星的最低檢測(cè)濃度為0.02μg/ml，最低檢測(cè)限為0.2ng。線性范圍為0.05～5.0μg/ml。說(shuō)明該方法符合樣品的分析要求，可以用于鹽酸左旋氧氟沙星緩釋滴眼液的臨床前藥代動(dòng)力學(xué)研究。
3、鹽酸左旋氧氟沙星緩釋滴眼液的臨床前藥代動(dòng)力學(xué)試驗(yàn)(1)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)采用自身對(duì)照、交叉實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)。50只家兔隨機(jī)分為10組，每組5只10眼。每組先后隨機(jī)給予試驗(yàn)制劑或?qū)φ罩苿?。交叉給藥的間隔清洗期為3d。
(2)給藥方法給藥時(shí)，將家兔固定在兔箱內(nèi)，輕輕拉開(kāi)下眼瞼使之與眼球成袋狀，用微量取樣器滴入隨機(jī)選擇的試驗(yàn)制劑或?qū)φ罩苿?0μl，再輕輕放下眼瞼，使藥物不會(huì)溢出。
取樣時(shí)間給藥后10、20、30、60、90、120、180、240、360、480min取樣。在每個(gè)時(shí)間點(diǎn)各取一組家兔，用生理鹽水沖洗結(jié)膜囊后，立即抽取房水100μl。按房水預(yù)處理方法操作，測(cè)定房水中鹽酸左旋氧氟沙星濃度。
(3)數(shù)據(jù)分析a、藥動(dòng)學(xué)參數(shù)計(jì)算tmax、Cmax采用實(shí)測(cè)值；其他藥動(dòng)學(xué)參數(shù)采用3P87軟件計(jì)算。以左鹽酸旋氧氟沙星普通滴眼液對(duì)照制劑為參比，計(jì)算自制的鹽酸左旋氧氟沙星緩釋滴眼液試驗(yàn)制劑的相對(duì)生物利用度，其計(jì)算公式為F＝(AUC試驗(yàn)·D對(duì)照/AUC對(duì)照·D試驗(yàn))×100％。
b、生物等效性評(píng)價(jià)生物等效性評(píng)價(jià)采用自身對(duì)照、交叉實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的三因素方差分析和配對(duì)資料t檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。對(duì)兩制劑的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)Cmax、AUC0～∞/D進(jìn)行三因素方差分析和配對(duì)資料t檢驗(yàn)(α＝0.05)。
(4)實(shí)驗(yàn)結(jié)果a、房水濃度—時(shí)間數(shù)據(jù)采用高效液相色譜法測(cè)定了10組50只健康家兔分別給予0.2％鹽酸左旋氧氟沙星緩釋滴眼液和0.3％鹽酸左旋氧氟沙星普通滴眼液后的房水鹽酸左旋氧氟沙星濃度，其中房水濃度時(shí)間數(shù)據(jù)分別見(jiàn)表3～4和圖2～3。圖4和圖5為10組50只健康家兔分別給予0.2％鹽酸左旋氧氟沙星緩釋滴眼液和0.3％鹽酸左旋氧氟沙星普通滴眼液后的平均房水濃度—時(shí)間曲線，可見(jiàn)鹽酸左旋氧氟沙星試驗(yàn)制劑和對(duì)照制劑在健康白色家兔眼內(nèi)的吸收和消除過(guò)程基本呈線性動(dòng)力學(xué)特征。結(jié)果見(jiàn)表4、表5。
表410組健康家兔0.2％鹽酸左旋氧氟沙星緩釋滴眼液給藥后不同時(shí)間的房水濃度(μg/ml)

表510組健康家兔0.3％鹽酸左旋氧氟沙星普通滴眼液給藥后不同時(shí)間的房水濃度(μg/ml)

采用3P87軟件估算的0.2％鹽酸左旋氧氟沙星緩釋滴眼液和0.3％鹽酸左旋氧氟沙星普通滴眼液給藥后的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)分別列于表6和表7。
表60.2％鹽酸左旋氧氟沙星緩釋滴眼液給藥后的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)

表70.3％鹽酸左旋氧氟沙星普通滴眼液給藥后的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)

(3)鹽酸左旋氧氟沙星緩釋滴眼液的相對(duì)生物利用度及生物等效性評(píng)價(jià)為了計(jì)算鹽酸左旋氧氟沙星緩釋滴眼液的相對(duì)生物利用度及評(píng)價(jià)生物等效性，鹽酸左旋氧氟沙星緩釋滴眼液試驗(yàn)制劑和鹽酸左旋氧氟沙星普通滴眼液對(duì)照制劑的AUC比較計(jì)算結(jié)果列于表8。由表8可見(jiàn)，以正大福瑞達(dá)制藥有限公司生產(chǎn)的鹽酸左旋氧氟沙星普通滴眼液對(duì)照制劑為參比，自制的鹽酸左旋氧氟沙星緩釋滴眼液的相對(duì)生物利用度為179.99±6.98％。
表80.2％鹽酸左旋氧氟沙星緩釋滴眼液和0.3％鹽酸左旋氧氟沙星普通滴眼液AUC0～τ/D比較

將鹽酸左旋氧氟沙星緩釋滴眼液試驗(yàn)制劑和鹽酸左旋氧氟沙星普通滴眼液對(duì)照制劑給藥后的Cmax、AUC0～τ/D分別對(duì)數(shù)轉(zhuǎn)換后進(jìn)行方差分析和配對(duì)資料t檢驗(yàn)(α＝0.05)。
表90.2％本發(fā)明藥物緩釋滴眼液和0.3％鹽酸左旋氧氟沙星普通滴眼液的lnCmax方差分析

表100.2％本發(fā)明藥物緩釋滴眼液和0.3％鹽酸左旋氧氟沙星普通滴眼液的ln(AUC0～τ/D)方差分析

表110.2％本發(fā)明藥物緩釋滴眼液和0.3％鹽酸左旋氧氟沙星普通滴眼液的Cmax配對(duì)t檢驗(yàn)

試驗(yàn)制劑生物等效性合格，試驗(yàn)品與對(duì)照品等效。
表120.2％本發(fā)明藥物緩釋滴眼液和0.3％鹽酸左旋氧氟沙星普通滴眼液的AUC0～τ/D配對(duì)t檢驗(yàn)

試驗(yàn)制劑生物等效性不合格。試驗(yàn)品效價(jià)較高方差分析及配對(duì)資料t檢驗(yàn)結(jié)果表明，研制的鹽酸左旋氧氟沙星緩釋滴眼液與市售鹽酸左旋氧氟沙星普通滴眼液相比，房水濃度上升緩慢，濃度變化平穩(wěn)，釋藥時(shí)間較長(zhǎng)，達(dá)峰時(shí)間明顯延遲，單位劑量峰濃度顯著降低，具有所設(shè)計(jì)的緩釋釋藥特征。單位劑量面積法(AUC)判定，0.2％鹽酸左旋氧氟沙星緩釋滴眼液試驗(yàn)制劑的吸收程度高于0.3％鹽酸左旋氧氟沙星普通滴眼液對(duì)照制劑。
4、結(jié)論10組50只健康家兔隨機(jī)交叉給予自制的鹽酸左旋氧氟沙星緩釋滴眼液試驗(yàn)制劑和鹽酸左旋氧氟沙星普通滴眼液對(duì)照制劑后，以鹽酸左旋氧氟沙星普通滴眼液為參比，鹽酸左旋氧氟沙星緩釋滴眼液試驗(yàn)制劑的相對(duì)生物利用度為179.99±6.98％。藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)Cmax、tmax、t1/2、MRT、AUC0～τ、AUC0～∞分別為1.08±0.10μg/ml和1.17±0.07μg/ml、30.00±11.55min和23.00±4.83min、109.61±19.00min和57.45±5.34min、232.56±35.73min和100.79±7.10min、178.72±5.26μg·min/ml和99.42±4.57μg·min/ml、212.41±12.73μg·min/ml和109.09±5.30μg·min/ml。試驗(yàn)結(jié)果表明，研制的0.2％鹽酸左旋氧氟沙星緩釋滴眼液與0.3％市售鹽酸左旋氧氟沙星普通滴眼液相比，房水濃度上升緩慢，濃度變化平穩(wěn)，釋藥時(shí)間較長(zhǎng)，達(dá)峰時(shí)間明顯延遲，單位劑量峰濃度顯著降低，具有所設(shè)計(jì)的緩釋釋藥特征。將鹽酸左旋氧氟沙星緩釋滴眼液試驗(yàn)制劑和鹽酸左旋氧氟沙星普通滴眼液對(duì)照制劑給藥后的Cmax、AUC0～τ/D分別對(duì)數(shù)轉(zhuǎn)換后進(jìn)行方差分析和配對(duì)資料t檢驗(yàn)(α＝0.05)。結(jié)果顯示Cmax無(wú)顯著性差異(α＝0.05)，而AUC0～τ/D有顯著性差異(α＝0.05)，進(jìn)一步對(duì)Cmax、AUC0～τ/D進(jìn)行配對(duì)資料t檢驗(yàn)，結(jié)果顯示鹽酸左旋氧氟沙星緩釋滴眼液試驗(yàn)制劑的吸收程度高于鹽酸左旋氧氟沙星普通滴眼液對(duì)照制劑，自制鹽酸左旋氧氟沙星緩釋滴眼液的Cmax有所降低，tmax有所延長(zhǎng)，試驗(yàn)制劑具有緩釋特征。說(shuō)明研制的0.2％鹽酸左旋氧氟沙星緩釋滴眼液主要是通過(guò)控釋制劑工藝來(lái)控制有效成分的釋放，從而減緩鹽酸左旋氧氟沙星的眼內(nèi)吸收，以滿足臨床治療長(zhǎng)效、安全的目的。
通過(guò)藥理學(xué)、藥效學(xué)試驗(yàn)表明使用卡波姆、羥丙甲基纖維素與藥學(xué)上常用的眼用制劑輔料為原料制備的本發(fā)明藥物眼用緩釋制劑對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員并非顯而易見(jiàn)，本發(fā)明藥物眼用緩釋制劑為液態(tài)澄明液體，定量使用，成膜效果好，主藥鹽酸左旋氧氟沙星用量小，生物利用度高，內(nèi)在質(zhì)量可控，增加制劑的穩(wěn)定性，減少藥物對(duì)眼睛的刺激，效果顯著，充分說(shuō)明本發(fā)明提供的以卡波姆、羥丙甲基纖維素制備的眼用制劑輔料制備的眼用緩釋制劑是一種安全、有效的用藥途徑，在上述輔料不變的情況下，選用其它眼用主藥，均能達(dá)到較好的緩釋功效，為臨床提供了一種新的用藥方式。
權(quán)利要求
1.一種用于眼用緩釋制劑的輔料，其特征在于它主要是由卡波姆、羥丙甲基纖維素為原料制成的眼用緩釋制劑。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于眼用緩釋制劑的輔料，其特征在于所述的卡波姆是卡波姆974P NF；所述的羥丙甲基纖維是羥丙甲基纖維素E50LV。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的用于眼用緩釋制劑的輔料，其特征在于所述的卡波姆974PNF與羥丙甲基纖維素E50LV，其重量配比為1∶(2～20)，卡波姆與羥丙甲基纖維素混合后重量占眼用制劑總體積的重量體積百分比為1.1％～2.5％w/v。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的用于眼用緩釋制劑的輔料，其特征在于所述的卡波姆974PNF與羥丙甲基纖維素E50LV，其重量配比為1∶5，卡波姆與羥丙甲基纖維素混合后重量占眼用制劑總體積的重量體積百分比為1.80％w/v。
5.一種眼用藥物組合物，它是由治療眼部疾病的主藥為活性成分，加上權(quán)利要求1～4任一項(xiàng)所述的眼用緩釋制劑制備而成的眼用緩釋制劑。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的眼用藥物組合物，其特征在于所述的眼用緩釋制劑為滴眼液。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的眼用藥物組合物，其特征在于所述的滴眼液的pH值為5.5～6.5。
8.根據(jù)權(quán)利要求5所述的眼用藥物組合物，其特征在于所述的主藥為鹽酸左旋氧氟沙星、更昔洛韋、左旋氧氟沙星、氟康唑或阿昔洛韋一種或其混合。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的眼用藥物組合物，其特征在于所述的主藥為鹽酸左旋氧氟沙星。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的眼用藥物組合物，其特征在于它是由下述重量體積w/v百分比的原料制備而成的眼用緩釋制劑鹽酸左旋氧氟沙星0.15％～0.60％、卡波姆974PNF 0.1～0.5％、羥丙甲基纖維素E50LV 1.0％～2.0％、磷酸氫二鈉0.2～0.3％、磷酸二氫鈉0.3～0.6％、氯化鈉0.4～0.6％、尼泊金乙酯0.02～0.04％，余量為水。
11.根據(jù)權(quán)利要求10所述的眼用藥物組合物，其特征在于它是由下述重量體積w/v百分比的原料制備而成的眼用緩釋制劑鹽酸左旋氧氟沙星0.5％、卡波姆974PNF 0.3％、羥丙甲基纖維素E50LV 1.5％、磷酸氫二鈉0.25％、磷酸二氫鈉0.5％、氯化鈉0.5％、尼泊金乙酯0.03％，余量為水。
12.一種制備權(quán)利要求5所述的眼用藥物組合物的方法，它包括如下步驟a、將卡波姆加入注射用水溶脹；b、將主藥與a步驟所得的溶脹物與眼用制劑常用的輔料溶于注射用水中，混合均勻，加入氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH值，經(jīng)檢驗(yàn)合格后滅菌分裝，即得。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種用于眼用緩釋制劑的輔料，它主要是卡波姆、羥丙甲基纖維素為原料制備的眼用制劑輔料。本發(fā)明藥物中若以鹽酸左旋氧氟沙星為主藥，主藥含量小，質(zhì)量穩(wěn)定，能夠在較長(zhǎng)時(shí)間內(nèi)保持有效藥物濃度，生物利用度高，對(duì)眼的刺激性小，減少給藥頻率，其制備工藝科學(xué)，制劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)可控性高，定量使用，使用方便，生產(chǎn)成本低，為臨床提供一種新的用藥選擇。
文檔編號(hào)A61K31/5375GK1785431SQ20041008143
公開(kāi)日2006年6月14日 申請(qǐng)日期2004年12月9日 優(yōu)先權(quán)日2004年12月9日
發(fā)明者陽(yáng)向波, 謝永平, 張媛 申請(qǐng)人:成都三明藥物研究所