專利名稱：一枝蒿有效部位制劑的樹(shù)脂處理方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種用樹(shù)脂處理一枝蒿有效部位制劑的方法。
背景技術(shù)：
一枝蒿Artemisia rupestris L.的干燥全草。七、八月采割、曬干。本品全長(zhǎng)10-50厘米。根和根莖圓柱形，土黃色至灰褐色，長(zhǎng)帶少數(shù)短須根，斷面淺黃色。莖單一或數(shù)個(gè)，于根莖處彎曲，直徑1.5-3厘米，幼枝和花枝上部密被短絨毛，老枝或枝的下部光滑，有不顯著的細(xì)條紋，表面常為紫紅色，斷面白色，中空。功能與主治清熱解毒，健胃消食，祛風(fēng)活血。用于感冒、過(guò)敏、食積、蛇傷、瘡癤。
病毒性肝炎、肝損傷是損害人類健康的疾病，其中病毒性肝炎是嚴(yán)重危害人類健康的全球性傳染病，病人預(yù)后差，大多數(shù)病人轉(zhuǎn)為慢性，可能發(fā)展成肝硬化等。病毒性肝炎引起的肝損傷主要由機(jī)體免疫應(yīng)答反應(yīng)所介導(dǎo)，當(dāng)病毒激活機(jī)體免疫系統(tǒng)后，產(chǎn)生致敏淋巴細(xì)胞和特異性抗體，特別是病毒特異性細(xì)胞毒性T細(xì)胞。它們不但能與體內(nèi)病毒起反應(yīng)而加以殺滅，而且也因受病毒感染的肝細(xì)胞表面帶有病毒抗原而引起肝損傷，導(dǎo)致肝細(xì)胞變性腫脹和壞死。目前，對(duì)于這類病中西醫(yī)療效不十分令人滿意。例如，西藥干擾素對(duì)肝炎病毒消除有一定療效，但經(jīng)臨床效果不理想，不能殺滅病毒，而且用藥時(shí)間長(zhǎng)，藥費(fèi)較高。中成藥類在治療病毒性肝炎和保肝方面各有所不同，有的中藥偏重于清熱解毒，有的著重于活血化淤，有的滋補(bǔ)肝腎等，這些藥物都各有其不足。臨床久服苦寒藥物，可傷脾腎，減少食欲、消化及吸收。另外，許多藥物必須在肝臟內(nèi)進(jìn)行氧化、分解、排泄，有的也可直接導(dǎo)致肝臟損害，反而對(duì)肝病痊愈不利。
處理一枝蒿有效部位的方法很多，本發(fā)明是在CN2004100083763的基礎(chǔ)上通過(guò)另一種用樹(shù)脂處理方法制備一枝蒿有效部位，再將所得的口服固體劑型和液體劑型產(chǎn)品用于治療病毒性肝炎疾病。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的在于，提供一種用樹(shù)脂處理方法制備一枝蒿有效部位，該方法是將一枝蒿全草粉碎成粉末，用乙醇提取，即得一枝蒿乙醇浸膏待用，將浸膏用乙酸乙酯溶解，得到乙酸乙酯部位，用氫氧化鈉處理得到一枝蒿浸膏的堿性水溶液；采用常規(guī)方法將大孔樹(shù)脂進(jìn)行預(yù)處理；將預(yù)處理后的樹(shù)脂浸泡在一枝蒿浸膏的堿性水溶液中或?qū)㈩A(yù)處理后的樹(shù)脂浸泡在一枝蒿浸膏的乙醇溶液中，蒸餾水洗滌大孔樹(shù)脂至無(wú)色，再用乙醇或丙酮洗脫，濃縮，真空干燥制成口服固體劑型和液體劑型產(chǎn)品。該制劑用于治療病毒性肝炎和各類肝損傷的口服藥，具有劑量小，療效高，經(jīng)動(dòng)物試驗(yàn)及臨床觀察無(wú)毒副作用，治療總有效率為91.0％。
本發(fā)明所述的一枝蒿有效部位制劑的樹(shù)脂處理方法，按下例步驟進(jìn)行a、首先將一枝蒿全草粉碎成粉末，用60％-95％的乙醇提取，即得一枝蒿乙醇浸膏待用，將浸膏用乙酸乙酯溶解，得到乙酸乙酯部位，用3％-12％氫氧化鈉處理得到一枝蒿浸膏的堿性水溶液；b、采用常規(guī)方法將大孔樹(shù)脂進(jìn)行預(yù)處理，將乙醇濕法裝柱，95％乙醇柱上流動(dòng)沖洗至乙醇液與水混合，其比例為1∶5，不呈白色渾濁為止，再用大量蒸餾水洗去乙醇，至水中無(wú)乙醇味即可；c、稱取預(yù)處理后的樹(shù)脂浸泡在一枝蒿浸膏的堿性水溶液中，時(shí)間24小時(shí)，濾去溶液，蒸餾水洗滌大孔樹(shù)脂至無(wú)色，再用乙醇或丙酮洗脫，濃縮，真空干燥制成口服固體劑型和液體劑型產(chǎn)品；或稱取預(yù)處理后的樹(shù)脂浸泡在一枝蒿浸膏的95％或70％乙醇溶液中，時(shí)間24小時(shí)，濾去溶液，蒸餾水洗滌大孔樹(shù)脂至無(wú)色，再用乙醇或丙酮洗脫，濃縮，真空干燥制成口服固體劑型和液體劑型。
一枝蒿是維吾爾醫(yī)常用藥材，文獻(xiàn)報(bào)道一枝蒿全草含有黃酮類、酮酸類、氨基酸、甙類、多糖類、揮發(fā)油、多肽、生物堿等化合物。本發(fā)明分析了一枝蒿有效成分，并在此基礎(chǔ)上進(jìn)行了一枝蒿有效部位制劑的保肝作用、治療免疫性肝炎、抗氧化、抗過(guò)敏作用研究及誘導(dǎo)人肝癌細(xì)胞凋亡時(shí)p53與Bcl基因的表達(dá)等實(shí)驗(yàn)研究，并采用電子順磁共振方法檢測(cè)一枝蒿有效部位制劑對(duì)O2-°、OH°的抑制作用，旨在闡明該藥防治疾病的科學(xué)內(nèi)涵。
本發(fā)明所述的一枝蒿有效部位制劑的制備方法，利用該方法研制出的一枝蒿有效部位制劑進(jìn)行的體外試驗(yàn)如下一枝蒿有效部2.15細(xì)胞對(duì)HbsAg、HbeAg及HBV DNA的抑制作用(1)一枝蒿有效部對(duì)2.2.15細(xì)胞培養(yǎng)的毒性一枝蒿有效部加入2.2.15細(xì)胞中培養(yǎng)8天，以細(xì)胞病變?yōu)橹笜?biāo)，兩批實(shí)驗(yàn)平均半數(shù)中毒濃度TC50為426ug/ml，最大無(wú)毒濃度TC0為5ug/ml。
(2)一枝蒿有效部在2.2.15細(xì)胞培養(yǎng)內(nèi)對(duì)HBsAg和HBeAg分泌的抑制作用一枝蒿有效部在2.2.15細(xì)胞中培養(yǎng)8天，最大無(wú)毒濃度5ug/ml對(duì)HBsAg無(wú)明顯抑制作用，對(duì)HBeAg無(wú)抑制作用。
(3)一枝蒿有效部在2.2.15細(xì)胞培養(yǎng)內(nèi)對(duì)HBV DNA的抑制作用一枝蒿有效部在2.2.15細(xì)胞中培養(yǎng)8天，最大無(wú)毒濃度5ug/ml對(duì)HBV DNA的平均抑制率為43.9±8.7％；陽(yáng)性藥1μM的拉米夫定(3TC)對(duì)HBV DNA的抑制率為63.9±0.8％。表1表1.一枝蒿有效部對(duì)2.2.15細(xì)胞對(duì)HBsAg、HBeAg及HBV DAN的抑制作用

體內(nèi)試驗(yàn)如下一枝蒿有效部位在鴨體內(nèi)對(duì)鴨乙型肝炎病毒感染的治療效果一枝蒿AR是由新疆藥物研究所研制的抗肝炎藥物，為驗(yàn)證其效果，在鴨乙型肝炎病毒感染鴨體內(nèi)進(jìn)行治療試驗(yàn)，觀察其是否抑制鴨乙型肝炎病毒。實(shí)驗(yàn)采用一日齡北京鴨靜脈注射鴨乙型肝炎病毒，7天后開(kāi)始給鴨口服一枝蒿AR3個(gè)劑量組，第一批試驗(yàn)0.25、0.5、1.0g/kg，1天2次，給藥10天(Bid×10)，第二批和第三批試驗(yàn)提高劑量，為1.0、2.0、4.0g/kg，1天2次，給藥10天(Bid×10)。觀察藥物對(duì)鴨的毒性和鴨血清鴨乙型肝炎病毒DNA(DHBV-DNA)的影響，以拉米夫定為陽(yáng)性對(duì)照藥。
實(shí)驗(yàn)表明，一枝蒿AR大劑量組4.0g/kg口服，1天2次10天，無(wú)毒性。按配對(duì)統(tǒng)計(jì)分析，T10顯示可重復(fù)的統(tǒng)計(jì)意義差別；成組抑制率統(tǒng)計(jì)分析，在第二批實(shí)驗(yàn)中，T5，T10及P3均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義差別，但第三批實(shí)驗(yàn)中，T10之P值＜10％未能達(dá)＜5％的顯著意義。4.0g/kg組，配對(duì)統(tǒng)計(jì)分析，在第一批實(shí)驗(yàn)，給藥后第5，10天，均顯示統(tǒng)計(jì)學(xué)意義差別；按成組抑制率統(tǒng)計(jì)分析，T10有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義差別。但在第二批及第三批實(shí)驗(yàn)中兩種統(tǒng)計(jì)分析方法，均未能顯示統(tǒng)計(jì)學(xué)意義差別。2.0g/kg組，第二批實(shí)驗(yàn)中，第10天(T10)的配對(duì)統(tǒng)計(jì)分析，有顯著意義差別，但未能重復(fù)。1.0g/kg組，無(wú)抑制作用。拉米夫定對(duì)照組，有顯著效果，說(shuō)明實(shí)驗(yàn)可信。
提示一枝蒿AR在4.0g/kg組對(duì)鴨乙型肝炎病毒感染有治療效果。
結(jié)論1.一枝蒿有效部位在2.2.15細(xì)胞中培養(yǎng)8天，結(jié)果，一枝蒿有效部位，在最大無(wú)毒濃度5ug/ml對(duì)HBV DNA的平均抑制率為43.9±8.7％，陽(yáng)性藥1μM的拉米夫定(3TC)對(duì)HBV DNA的抑制率為63.8±08％。
2.一枝蒿有效部4.0g/kg組，配對(duì)統(tǒng)計(jì)分析，在第一批實(shí)驗(yàn)，給藥后第5，10天，均顯示統(tǒng)計(jì)學(xué)意義差別；2.0g/kg組，第二批實(shí)驗(yàn)中，第10天(T10)的配對(duì)統(tǒng)計(jì)分析，有顯著意義差別，但未能重復(fù)。1.0g/kg組，無(wú)抑制作用。拉米夫定對(duì)照組，有顯著效果，說(shuō)明實(shí)驗(yàn)可信。提示一枝蒿AR在4.0g/kg組對(duì)鴨乙型肝炎病毒感染有治療效果。
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例1a、首先將一枝蒿全草粉碎成粉末，用60％的乙醇提取，即得一枝蒿乙醇浸膏待用，將浸膏用乙酸乙酯溶解，得到乙酸乙酯部位，用3％氫氧化鈉處理得到一枝蒿浸膏的堿性水溶液；b、采用常規(guī)方法將大孔樹(shù)脂進(jìn)行預(yù)處理，將乙醇濕法裝柱，95％乙醇柱上流動(dòng)沖洗至乙醇液與水混合，其比例為1∶5，不呈白色渾濁為止，再用大量蒸餾水洗去乙醇，至水中無(wú)乙醇味即可；c、稱取預(yù)處理后的樹(shù)脂浸泡在一枝蒿浸膏的堿性水溶液中，時(shí)間24小時(shí)，濾去溶液，蒸餾水洗滌大孔樹(shù)脂至無(wú)色，再用乙醇洗脫，濃縮，真空干燥制成口服固體劑型和液體劑型產(chǎn)品。該制劑用于治療病毒性肝炎和各類肝損傷的口服藥。
實(shí)施例2a、首先將一枝蒿全草粉碎成粉末，用75％的乙醇提取，即得一枝蒿乙醇浸膏待用，將浸膏用乙酸乙酯溶解，得到乙酸乙酯部位，用8％氫氧化鈉處理得到一枝蒿浸膏的堿性水溶液；b、采用常規(guī)方法將大孔樹(shù)脂進(jìn)行預(yù)處理，將乙醇濕法裝柱，95％乙醇柱上流動(dòng)沖洗至乙醇液與水混合，其比例為1∶5，不呈白色渾濁為止，再用大量蒸餾水洗去乙醇，至水中無(wú)乙醇味即可；c、稱取預(yù)處理后的樹(shù)脂浸泡在一枝蒿浸膏的95％乙醇溶液中，時(shí)間24小時(shí)，濾去溶液，蒸餾水洗滌大孔樹(shù)脂至無(wú)色，再用丙酮洗脫，濃縮，真空干燥制成口服固體劑型和液體劑型產(chǎn)品。該制劑用于治療病毒性肝炎和各類肝損傷的口服藥。
實(shí)施例3a、首先將一枝蒿全草粉碎成粉末，用95％的乙醇提取，即得一枝蒿乙醇浸膏待用，將浸膏用乙酸乙酯溶解，得到乙酸乙酯部位，用12％氫氧化鈉處理得到一枝蒿浸膏的堿性水溶液；b、采用常規(guī)方法將大孔樹(shù)脂進(jìn)行預(yù)處理，將乙醇濕法裝柱，95％乙醇柱上流動(dòng)沖洗至乙醇液與水混合，其比例為1∶5，不呈白色渾濁為止，再用大量蒸餾水洗去乙醇，至水中無(wú)乙醇味即可；c、稱取預(yù)處理后的樹(shù)脂浸泡在一枝蒿浸膏的堿性水溶液中，時(shí)間24小時(shí)，濾去溶液，蒸餾水洗滌大孔樹(shù)脂至無(wú)色，再用丙酮洗脫，濃縮，真空干燥制成口服固體劑型和液體劑型產(chǎn)品。該制劑用于治療病毒性肝炎和各類肝損傷的口服藥。
實(shí)施例4a、首先將一枝蒿全草粉碎成粉末，用90％的乙醇提取，即得一枝蒿乙醇浸膏待用，將浸膏用乙酸乙酯溶解，得到乙酸乙酯部位，用10％氫氧化鈉處理得到一枝蒿浸膏的堿性水溶液；b、采用常規(guī)方法將大孔樹(shù)脂進(jìn)行預(yù)處理，將乙醇濕法裝柱，95％乙醇柱上流動(dòng)沖洗至乙醇液與水混合，其比例為1∶5，不呈白色渾濁為止，再用大量蒸餾水洗去乙醇，至水中無(wú)乙醇味即可；c、稱取預(yù)處理后的樹(shù)脂浸泡在一枝蒿浸膏的95％乙醇溶液中，時(shí)間24小時(shí)，濾去溶液，蒸餾水洗滌大孔樹(shù)脂至無(wú)色，再用乙醇洗脫，濃縮，真空干燥制成口服固體劑型和液體劑型產(chǎn)品。該制劑用于治療病毒性肝炎和各類肝損傷的口服藥。
權(quán)利要求
1.一種一枝蒿有效部位制劑的樹(shù)脂處理方法，其特征在于按下例步驟進(jìn)行a、首先將一枝蒿全草粉碎成粉末，用60％-95％的乙醇提取，即得一枝蒿乙醇浸膏待用，將浸膏用乙酸乙酯溶解，得到乙酸乙酯部位，用3％-12％氫氧化鈉處理得到一枝蒿浸膏的堿性水溶液；b、采用常規(guī)方法將大孔樹(shù)脂進(jìn)行預(yù)處理，將乙醇濕法裝柱，95％乙醇柱上流動(dòng)沖洗至乙醇液與水混合，其比例為1∶5，不呈白色渾濁為止，再用大量蒸餾水洗去乙醇，至水中無(wú)乙醇味即可；c、稱取預(yù)處理后的樹(shù)脂浸泡在一枝蒿浸膏的堿性水溶液中，時(shí)間24小時(shí)，濾去溶液，蒸餾水洗滌大孔樹(shù)脂至無(wú)色，再用乙醇或丙酮洗脫，濃縮，真空干燥制成口服固體劑型和液體劑型產(chǎn)品；或稱取預(yù)處理后的樹(shù)脂浸泡在一枝蒿浸膏的95％或70％乙醇溶液中，時(shí)間24小時(shí)，濾去溶液，蒸餾水洗滌大孔樹(shù)脂至無(wú)色，再用乙醇或丙酮洗脫，濃縮，真空干燥制成口服固體劑型和液體劑型。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種一枝蒿有效部位制劑的樹(shù)脂處理方法，該方法是將一枝蒿全草粉碎成粉末，用乙醇提取，即得一枝蒿乙醇浸膏待用，將浸膏用乙酸乙酯溶解，得到乙酸乙酯部位，用氫氧化鈉處理得到一枝蒿浸膏的堿性水溶液；將預(yù)處理后的樹(shù)脂浸泡在一枝蒿浸膏的堿性水溶液中或?qū)㈩A(yù)處理后的樹(shù)脂浸泡在一枝蒿浸膏的乙醇溶液中，蒸餾水洗滌大孔樹(shù)脂至無(wú)色，再用乙醇或丙酮洗脫，濃縮，真空干燥制成口服固體劑型和液體劑型產(chǎn)品。該制劑用于治療病毒性肝炎和各類肝損傷的口服藥，具有劑量小，療效高，經(jīng)動(dòng)物試驗(yàn)及臨床觀察無(wú)毒副作用，治療總有效率為91.0％。
文檔編號(hào)A61P39/00GK1788744SQ20041010423
公開(kāi)日2006年6月21日 申請(qǐng)日期2004年12月17日 優(yōu)先權(quán)日2004年12月17日
發(fā)明者斯拉甫·艾白 申請(qǐng)人:斯拉甫·艾白