專利名稱：一種治療急慢性中耳炎的滴耳劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于一種治療急慢性中耳炎的滴耳劑，特別是關(guān)于用生物制劑和中藥混合制成的治療急慢性中耳炎的滴耳劑。
背景技術(shù)：
急慢性中耳炎是中耳粘膜的化膿性炎癥疾病，為臨床上常見疾病，多發(fā)生在小兒及青壯年。急性中耳炎是因致病菌如鏈球菌、葡萄球菌、肺炎球菌等侵入中耳而發(fā)生的炎癥，如果急性期治療不及時，可導(dǎo)致慢性中耳炎癥。
中耳炎的發(fā)病機理總結(jié)如下①中耳負(fù)壓學(xué)說這種學(xué)說認(rèn)為中耳炎是由于多種原因引起中耳負(fù)壓狀態(tài)，繼而粘膜水腫、滲出，導(dǎo)致中耳積液。咽鼓管功能不良、中耳粘膜氣體交換功能不良及乳突氣化不良、中耳的清潔功能障礙等因素都可引起中耳負(fù)壓；②感染學(xué)說中耳腔的感染和炎癥是中耳炎的主要病因。常見的有細(xì)菌感染和病毒感染。致病細(xì)菌中常見的有流感嗜血桿菌、肺炎鏈球菌、卡他布蘭漢球菌、β-溶血性鏈球菌、金黃色葡萄球菌等；常見的致病病毒有腺病毒、巨細(xì)胞病毒、呼吸道合胞病毒等。③中耳為一獨立的免疫防御系統(tǒng)。由于中耳積液中炎性介質(zhì)的存在，并可檢出細(xì)菌的特異性抗體和免疫復(fù)合物，以及補體系統(tǒng)的出現(xiàn)，提示中耳炎可能是一種免疫介導(dǎo)的病理過程。④神經(jīng)能性炎癥機制學(xué)說中耳炎癥或中耳積液刺激中耳感覺神經(jīng)C類無髓鞘纖維，導(dǎo)致炎性介質(zhì)釋放，促進(jìn)血管的滲出和粘膜腺體的分泌。總之，分泌性中耳炎的成因可能并非是一種因素作用，而是多種因素相互作用的結(jié)果。祖國傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)認(rèn)為此病多為風(fēng)邪襲肺，經(jīng)氣痞塞，肺氣不宣致水道不通，濕濁停聚耳竅所致。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是制成一種治療急慢性中耳炎的滴耳劑，它采用生物制劑與中藥的結(jié)合，該藥物的特點是從西醫(yī)、中醫(yī)兩種理論系統(tǒng)出發(fā)，針對各自提出的病理機理，辯證施治，達(dá)到標(biāo)本兼治的功效。
本發(fā)明的技術(shù)方案是設(shè)計一種治療急慢性中耳炎的滴耳劑，其特征是它的主要成分包括α-甘露聚糖肽20-50％、芳香開竅類中藥50-80％。
所述的藥物還包括有α-甘露聚糖肽20-50％、芳香開竅類中藥10-70％、清熱解毒類中藥10-50％。
所述的藥物還包括有α-甘露聚糖肽20-50％、芳香開竅類中藥10-50％、清熱解毒類中藥10-30％、活血化瘀類中藥10-40％。
所述的藥物還包括有α-甘露聚糖肽20-50％、芳香開竅類中藥10-30％、清熱解毒類中藥10-20％、活血化瘀類中藥10-30％、消腫利水、燥濕殺蟲類中藥10-30％。
所述的藥物還包括有α-甘露聚糖肽20-50％、芳香開竅類中藥10-30％、清熱解毒類中藥10-20％、活血化瘀類中藥10-30％、消腫利水、燥濕殺蟲類中藥10-30％、氟哌酸1-5％。
所述的藥物還包括有α-甘露聚糖肽20-50％、芳香開竅類中藥10-30％、清熱解毒類中藥10-20％、活血化瘀類中藥10-30％、消腫利水、燥濕殺蟲類中藥10-30％、氟哌酸1-5％、強的松3-5％。
所述的芳香開竅類中藥有麝香、蘇合香、菖蒲、牛黃、冰片；所述的清熱解毒類中藥有川連、黃芩、虎杖、錦燈籠、山豆根、土茯苓、白蘚皮、紅藤、半邊蓮、龍葵、穿心蓮、馬齒莧、白頭翁、魚腥草、紫花地丁、蒲公英、金銀花、連翹、板藍(lán)根、半支蓮；所述的活血化瘀類中藥有三葉、蒼術(shù)、藏紅花、桃仁、益母草、三棱、乳香、郁金、丹參、牛膝、水蛭、皂角刺、穿山甲、酸棗仁、元胡、紅花、姜黃、雞血藤、川芎、珍珠母、紫參；所述的消腫利水、燥濕殺蟲類中藥有路路通、石葦、海金沙、冬葵子、冬瓜皮、木通、滑石、車前子、澤瀉、赤小豆、金錢草、通草、薏苡仁、茵陳、豬苓、防己、木瓜、海風(fēng)藤、千年健、五加皮、威靈仙。
所述的藥物1000g中含α-甘露聚糖肽300g、麝香100g、蘇合香200g、菖蒲200g、牛黃100g、冰片100g。
所述的藥物1000g中含α-甘露聚糖肽300g、麝香50g、蘇合香100g、菖蒲100g、牛黃50g、冰片50g、川連30g、黃芩10g、虎杖10g、錦燈籠10g、山豆根30g、土茯苓20g、白蘚皮10g、紅藤20g、半邊蓮10g、龍葵10g、穿心蓮10g、馬齒莧30g、白頭翁15g、魚腥草25g、紫花地丁25g、蒲公英30g、金銀花20g、連翹10g、板藍(lán)根15g、半支蓮10g。
所述的藥物1000g中含α-甘露聚糖肽250g、麝香30g、蘇合香80g、菖蒲80g、牛黃30g、冰片30g、川連10g、黃芩10g、虎杖10g、錦燈籠5g、山豆根15g、土茯苓10g、白蘚皮10g、紅藤10g、半邊蓮10g、龍葵10g、穿心蓮10g、馬齒莧15g、白頭翁10g、魚腥草15g、紫花地丁15g、蒲公英10g、金銀花10g、連翹10g、板藍(lán)根10g、半支蓮10g、三葉20g、蒼術(shù)20g、藏紅花10g、桃仁20g、益母草20g、三棱10g、乳香20g、郁金20g、丹參20g、牛膝10g、水蛭10g、皂角刺15g、穿山甲10g、酸棗仁10g、元胡10g、紅花10g、姜黃15g、雞血藤10g、川芎5g、珍珠母10g、紫參10g。
所述的藥物1000g中含α-甘露聚糖肽200g、麝香30g、蘇合香40g、菖蒲40g、牛黃20g、冰片20g、川連5g、黃芩5g、虎杖10g、錦燈籠5g、山豆根10g、土茯苓10g、白蘚皮5g、紅藤5g、半邊蓮5g、龍葵5g、穿心蓮10g、馬齒莧10g、白頭翁10g、魚腥草10g、紫花地丁10g、蒲公英10g、金銀花10g、連翹5g、板藍(lán)根10g、半支蓮10g、三葉10g、蒼術(shù)10g、藏紅花10g、桃仁15g、益母草10g、三棱5g、乳香10g、郁金10g、丹參15g、牛膝10g、水蛭10g、皂角刺10g、穿山甲10g、酸棗仁10g、元胡10g、紅花10g、姜黃15g、雞血藤10g、川芎5g、珍珠母10g、紫參10g、路路通10g、石葦10g、海金沙10g、冬葵子10g、冬瓜皮10g、木通10g、滑石15g、車前子20g、澤瀉15g、赤小豆25g、金錢草20g、通草10g、薏苡仁10g、茵陳15g、豬苓10g、防己10g、木瓜20g、海風(fēng)藤15g、千年健10g、五加皮10g、威靈仙10g。
所述的藥物1000g中含α-甘露聚糖肽220g、麝香30g、蘇合香20g、菖蒲20g、牛黃20g、冰片20g、川連5g、黃芩5g、虎杖10g、錦燈籠5g、山豆根10g、土茯苓10g、白蘚皮5g、紅藤5g、半邊蓮5g、龍葵5g、穿心蓮10g、馬齒莧10g、白頭翁10g、魚腥草10g、紫花地丁10g、蒲公英10g、金銀花10g、連翹5g、板藍(lán)根10g、半支蓮10g、三葉10g、蒼術(shù)10g、藏紅花10g、桃仁15g、益母草10g、三棱5g、乳香10g、郁金10g、丹參15g、牛膝10g、水蛭10g、皂角刺10g、穿山甲10g、酸棗仁10g、元胡10g、紅花10g、姜黃15g、雞血藤10g、川芎5g、珍珠母10g、紫參10g、路路通10g、石葦10g、海金沙10g、冬葵子10g、冬瓜皮10g、木通10g、滑石15g、車前子10g、澤瀉15g、赤小豆25g、金錢草20g、通草10g、薏苡仁10g、茵陳15g、豬苓10g、防己10g、木瓜20g、海風(fēng)藤15g、千年健10g、五加皮15g、威靈仙10g、氟哌酸25g。
所述的藥物1000g中含α-甘露聚糖肽200g、麝香30g、蘇合香20g、菖蒲20g、牛黃20g、冰片20g、川連5g、黃芩5g、虎杖10g、錦燈籠5g、山豆根10g、土茯苓10g、白蘚皮5g、紅藤5g、半邊蓮5g、龍葵5g、穿心蓮10g、馬齒莧10g、白頭翁10g、魚腥草10g、紫花地丁10g、蒲公英10g、金銀花10g、連翹5g、板藍(lán)根10g、半支蓮10g、三葉10g、蒼術(shù)10g、藏紅花10g、桃仁15g、益母草10g、三棱5g、乳香10g、郁金10g、丹參15g、牛膝10g、水蛭10g、皂角刺10g、穿山甲10g、酸棗仁10g、元胡10g、紅花10g、姜黃15g、雞血藤10g、川芎5g、珍珠母10g、紫參10g、路路通10g、石葦10g、海金沙10g、冬葵子10g、冬瓜皮10g、木通10g、滑石15g、車前子10g、澤瀉15g、赤小豆15g、金錢草15g、通草10g、薏苡仁10g、茵陳15g、豬苓10g、防己10g、木瓜20g、海風(fēng)藤15g、千年健10g、五加皮10g、威靈仙10g、氟哌酸25g、強的松40g。
本發(fā)明的特點是α-甘露聚糖肽是一種生物反應(yīng)調(diào)節(jié)劑，能調(diào)節(jié)機體過高或過低的免疫反應(yīng)，使之處于免疫平衡狀態(tài)，還能增強機體的抗感染能力；氟哌酸為廣譜、高效抗菌藥物，對大腸桿菌屬、綠膿桿菌、革蘭氏陽性菌有較強的抗菌作用；強的松有抗炎、抗過敏的作用，減少炎性滲出和積液；茯苓、菖蒲具有芳香開竅，祛濕辟穢，驅(qū)邪除痰之功效，對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌有抑制作用，并能擴張血管，改善微循環(huán)，促進(jìn)炎癥吸收；川連、黃芩有清熱解毒，消腫利水，燥濕殺蟲，并有較強的抑菌作用；三葉、蒼術(shù)具有清熱解毒燥濕，活血化瘀，健脾益氣等作用。
具體實施例方式
由于本發(fā)明將α-溶血鏈球菌菌種搭載返回式太空飛行器(宇宙飛船或返回式衛(wèi)星)，利用太空中微(零)重力、宇宙射線、交變磁場、高真空、高熱深冷等因素的綜合作用，使菌株的DNA雙鏈結(jié)構(gòu)斷裂，基因組發(fā)生重排，從而產(chǎn)生新的菌株。返回地面后，對經(jīng)過太空搭載的菌株進(jìn)行培養(yǎng)和篩選，通過研究其形態(tài)特征、培養(yǎng)特征、生理生化反應(yīng)、代謝產(chǎn)物、遺傳性狀及蛋白表達(dá)、遺傳穩(wěn)定性、中試生產(chǎn)指標(biāo)等內(nèi)容，優(yōu)選出其中的正變異、遺傳特性穩(wěn)定的菌種，經(jīng)培養(yǎng)發(fā)酵后得到治療潰瘍性結(jié)腸炎的藥物。該菌種已經(jīng)在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心保藏，編號為CGMCCNo.1082。
特別是α-溶血鏈球菌D33菌株經(jīng)太空搭載誘變，地面上的篩選、分離和純化后，選育出發(fā)酵單位更高、所分泌的甘露聚糖肽含量更高的高產(chǎn)、優(yōu)質(zhì)菌株T33株。通過中國科學(xué)院微生物研究所對T33菌株及D33菌株的全細(xì)胞蛋白SDS-聚丙烯酰胺凝膠(SDS-PAGE)分析和菌株的基因組DNA限制性酶切分析(RFLP/PFGE)比較，可以證明空間誘變及地面篩選出的T33菌株其基因有變異。該突變菌株在遺傳上穩(wěn)定，有較強的生產(chǎn)適應(yīng)性，由其發(fā)酵產(chǎn)生的甘露聚糖肽含量提高，多肽含量比國家標(biāo)準(zhǔn)(80％)提高3至5倍，西安市藥品檢驗所送樣測定達(dá)到271.6％，發(fā)酵含量比對照組產(chǎn)物含量平均高出三倍以上。該菌種經(jīng)過神舟系列飛船航天搭載太空誘變，由北京中科院微生物所和西北大學(xué)生物系對菌種進(jìn)一步篩選培養(yǎng)育種形成遺傳性質(zhì)穩(wěn)定，變異特征明顯的高產(chǎn)高效菌種。該菌種每發(fā)酵單位中α-太空誘變菌種生產(chǎn)的甘露聚糖肽含量提高了幾倍以上。(見附件材料1陜西省科學(xué)技術(shù)廳陜西省科學(xué)技術(shù)成果鑒定證書材料附件材料2太空誘變菌種生產(chǎn)的甘露聚糖肽生產(chǎn)菌株經(jīng)“神舟三號”飛船搭載公證書。
附件材料3太空誘變菌種生產(chǎn)的甘露聚糖肽生產(chǎn)菌株經(jīng)“神舟三號”飛船搭載返回地面篩選報告附件材料4中國科學(xué)院微生物所關(guān)于“神舟三號”飛船搭載太空誘變菌種生產(chǎn)的甘露聚糖肽生產(chǎn)菌株與地面對照菌的形態(tài)生理生化鑒定報告書附件材料5中國科學(xué)院微生物所關(guān)于“神舟三號”飛船搭載太空誘變菌種生產(chǎn)的甘露聚糖肽生產(chǎn)菌株與地面對照菌的SDS-PAGE及RFLP/PFGE分析鑒定報告書附件材料6陜西省藥品檢驗所“神舟三號”太空誘變菌種生產(chǎn)的甘露聚糖肽口服液檢測報告附件材料7科技查新報告復(fù)印件附件材料8中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心保藏菌種保藏受理通知書)菌種選育在α-溶血鏈球菌生長規(guī)律的基礎(chǔ)上，選定較合適生長時期的菌種，采用平皿生長的菌落、浸入其它物質(zhì)中的菌懸液、帶菌的砂土等方法，于2002年3月25日搭載“神舟三號”宇宙飛船。在太空軌道(近地點高度200公里、遠(yuǎn)地點高度350公里)進(jìn)行了6天零18小時的在軌飛行。太空的特殊條件主要體現(xiàn)為微重力、高真空、高輻射、交變磁場等特殊環(huán)境。在外層空間飛行的菌種被置于一個與地球上的生態(tài)環(huán)境完全不同的環(huán)境中，主要包括來自磁場俘獲的電子、質(zhì)子及低能重粒子；來自銀河系的宇宙射線如質(zhì)子、粒子及更重的高能重粒子；來自太陽磁暴的質(zhì)子及重粒子等。這些粒子作用于微生物細(xì)胞核中的DNA雙鏈結(jié)構(gòu)，可導(dǎo)致雙鏈斷裂。微重力、高真空環(huán)境可使DNA的堿基序列發(fā)生重組，即基因組的重組和變異。變異后產(chǎn)生的新菌株，其形態(tài)特征、培養(yǎng)特征、生理生化反應(yīng)、代謝產(chǎn)物、遺傳性狀及蛋白表達(dá)、中試生產(chǎn)指標(biāo)等均會發(fā)生不同程度的變化。在宇宙飛船返回地面后，經(jīng)過進(jìn)一步篩選，僅優(yōu)選出其中0.2％的正變異且遺傳特性穩(wěn)定的菌株，經(jīng)培育制成生產(chǎn)菌種。這種經(jīng)航天搭載誘變后選育出的菌種已經(jīng)在在2003年12月29日由中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心保藏，編號為CGMCCNo.1082。
實驗及中試生產(chǎn)結(jié)果表明，經(jīng)空間誘變后的新型太空菌種在遺傳特性上穩(wěn)定，有較強的生產(chǎn)適應(yīng)性，由其發(fā)酵產(chǎn)生的甘露聚糖肽含量提高，多肽含量比國家標(biāo)準(zhǔn)(80％)提高3至5倍，西安市藥品檢驗所送樣測定達(dá)到271.6％，發(fā)酵含量比對照組產(chǎn)物含量平均高出三倍以上，發(fā)酵周期大大縮短。
制備方法太空誘變菌種生產(chǎn)甘露聚糖肽的制備過程本發(fā)明所述的太空誘變菌種生產(chǎn)的甘露聚糖肽是由以下方法制備太空菌種制備---一級發(fā)酵---二級發(fā)酵-----發(fā)酵液提純，最終生產(chǎn)出甘露聚糖肽。
①太空菌種制備以經(jīng)過空間誘變育種精心選育的α-溶血鏈球菌作為生產(chǎn)菌種。
A.斜面種子培養(yǎng)基牛肉膏0.5％，酵母膏0.6％，蛋白胨0.5％，葡萄糖0.4％，氯化鈉0.5％，瓊脂3％，綿羊血8％；pH7.4。
斜面種子培養(yǎng)基滅菌溫度121℃，時間30分鐘，蒸汽壓力0.12Mpa。
啟封菌種冷凍管，用無菌肉湯培養(yǎng)基稀釋，在無菌條件下接入血斜面，接種后置38℃恒溫培養(yǎng)30小時。
B.肉湯種子培養(yǎng)基牛肉膏0.5％，酵母膏0.6％，蛋白胨0.5％，葡萄糖0.4％，氯化鈉0.5％；pH7.4。
肉湯種子培養(yǎng)基滅菌溫度121℃，時間30分鐘，蒸汽壓力0.12Mpa。
將培養(yǎng)好的斜面菌種在無菌條件下按9％接種量，接入肉湯種子培養(yǎng)基內(nèi)，38℃恒溫培養(yǎng)30小時。
②發(fā)酵過程發(fā)酵培養(yǎng)基牛肉膏0.4％，酵母膏0.5％，蛋白胨0.5％，葡萄糖0.4％，氯化鈉0.5％。
發(fā)酵培養(yǎng)基滅菌溫度121℃，時間30分鐘，蒸汽壓力0.12Mpa。
A.一級發(fā)酵罐將優(yōu)良的肉湯菌種在無菌條件下按10％接種量，接入一級種子罐，在29℃恒溫培養(yǎng)30小時，罐壓不超過0.02Mpa，通氣量以能翻動培養(yǎng)液為宜，連續(xù)充分?jǐn)嚢琛?br> B.二級發(fā)酵罐將一級發(fā)酵培養(yǎng)液在無菌條件下按20％接種量，接入發(fā)酵罐，在29℃恒溫培養(yǎng)70小時，罐壓不0.02Mpa，滅活放罐。滅活采用加溫使發(fā)酵液溫度達(dá)到100℃，保溫60分鐘，冷卻靜置。
③提取過程a、發(fā)酵液進(jìn)行濃縮，使?jié)饪s液體積與發(fā)酵液體積比控制在1∶15-1∶20或酌情而定。
b、發(fā)酵液的濃縮液加入80-99％乙醇，體積量比控制在1∶1.5-1∶5.5或酌情而定。充分?jǐn)嚢桁o置后，離心去除上清液，沉淀用蒸餾水溶解，調(diào)pH5.0，得到溶解液并將溶解液靜置。
c、再將溶解液離心去除雜質(zhì)得到上清液，準(zhǔn)確量取清液體積，按上清液體積計算出所需乙醇量，調(diào)pH值，將乙醇緩慢加入到上清液中，并充分?jǐn)嚢?，靜置后離心去除上清液得到沉淀物。
d、沉淀物再用蒸餾水溶解，調(diào)pH，離心，上清液再加乙醇沉淀。這樣的工藝反復(fù)操作至中間檢測合格為止，得到的沉淀物為太空誘變菌種生產(chǎn)的甘露聚糖肽粗品。真空干燥3-8小時，即得到太空誘變菌種生產(chǎn)的甘露聚糖肽產(chǎn)品。
上述方法得到的產(chǎn)品的檢驗[性狀]本品為白色或微黃色無定形粉末；無臭、無味。
本品在水中易溶，在乙醇、氯仿及丙酮中不溶。
比旋度取本品，精密稱定，加水溶解并稀釋成每1ml中約含10mg的溶液，依法測定(中國藥典2000年版二部附錄vIE)，比旋度為+70℃至+80℃。
1、取本品10mg，加水0.5ml使溶解，加a-萘酚乙醇溶液(5-100)1ml，搖勻，沿管壁緩緩加硫酸0.5ml，數(shù)分鐘后，界面呈紫紅色。
2、取本品，加水制成每1ml中含1mg的溶液，取約10ul點于濾紙上，晾干，用無水乙醇固定，置高硝酸溶液(取高碘酸1.2g，加水30ml溶解后。加0.2mol/L醋酸鈉溶液1.5ml與乙醇100ml，混勻即得。置暗處保存，可使用數(shù)月)中浸泡5分鐘，取出，用70％乙醇溶液沖洗，置還原液(取碘化鉀5g，硫代硫酸鈉5g，加水100ml使溶解，再加乙醇150ml、2mol/L鹽酸液2.5ml，隨加隨攪拌，臨用時配)中浸泡5分鐘，取出，用70％乙醇溶液沖洗，置品紅業(yè)硫酸試液中浸泡約30分鐘，取出，用焦亞硫酸鈉溶液(取焦亞硫酸鈉0.4g，加鹽酸1ml，加水溶解使成100ml，即得)，沖洗，晾干，在濾紙片點樣處應(yīng)呈紫紅色。
3、取供試品和對照品適量，分別加氯化鈉注射液制成每1ml中含1mg的溶液作為供試品溶液和對照品溶液，按甘露聚糖肽免疫原性測定法試驗，供試品和對照品管應(yīng)均無溶血發(fā)生。
1、酸度取本品，加水制成每1ml中含10mg的溶液，依法測定(中國藥典2000年版二部附錄VIH)，pH值應(yīng)為3.0-5.0。
2、吸收度取本品，加水制成每1ml中含0.4mg的溶液，照分光光度法(中國藥典2000年版二部附錄VIA)，在260nm的波長處，其吸收度不得大于0.25，在280nm的波長處，其吸收度不得大于0.20。
3、總氮量取本品，照氮測定法(中國藥典2000年版二部附錄VIID第二法)測定。按干燥品計算，含總氮量應(yīng)為0.8-2.0％。
4、免疫原性取供試品和對照品適量，分別加氯化鈉注射液制成每1ml中含10mg的溶液，再分別用磷酸鹽緩沖液制成1∶2、1∶4、1∶8、1∶16、1∶32、1∶64、1∶128、1∶256的稀釋液作為供試品溶液和對照品溶液，依法檢查(附甘露聚糖肽免疫原性測定法)，供試品不溶血管的最低濃度應(yīng)不得高于對照品相應(yīng)濃度的一倍以上。
5、干燥失重 取本品，在105℃干燥至恒重，減失重量不得過5.0％(中國藥典2000年版二部附錄VIIIL)。
6、重金屬取本品，在1.0g，依法檢查(中國藥典2000年版VIIIH)含重金屬不得過百萬分之二十。
7、異常毒性取本品，加氯化鈉注射液制成每1ml中含0.5mg的溶液，依法檢查(中國藥典2000年版附錄XIC)。按靜脈注射法給藥，應(yīng)符合規(guī)定(供注射用)。
1.對照品溶液的制備精密稱取經(jīng)105℃干燥至恒重的D-甘露糖對照品0.1g置100ml量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度。搖勻；精密量取5ml，置100ml的量瓶中，加水至刻度，搖勻.每1ml中含甘露糖50ug。
2.供試品溶液備取本品適量，精密稱定，加水溶解制成每1ml中含40ug的溶液。
3.標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備精密稱取對照品溶液0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0ml，分別置具塞試管中，各加水至1.0ml，再加3％苯酚溶液1.0ml，搖勻，沖入硫酸4.5ml，搖勻，放置于室溫，以0管為空白。照分光光度法(中國藥典2000年版二部附錄IVA)在490nm的波長處測定吸收度。以甘露糖ug數(shù)對相應(yīng)的吸收度，計算回歸方程。
4.測定法精密量取供試品溶液1.0ml，照標(biāo)準(zhǔn)曲線制備項下自“再加3％苯酚溶液1.0ml”起，依法操作，測定吸收度，由回歸方程計算甘露糖的含量。
甘露聚糖肽免疫原性測定法(補體結(jié)合法)；1、試液A.酸鹽緩沖液(pH7.2)取氯化鈉8.5g、磷酸氫二鈉0.565g及磷酸二氫鉀0.135g，加水至1000ml使其溶解，加10％硫酸鎂溶液1ml，搖勻。
B.1％羊紅細(xì)胞懸液羊血紅細(xì)胞的制備由綿羊頸靜脈無菌采血于盛有等量阿氏液(取葡萄糖20.5g、枸椽酸鈉8.0g、氯化鈉4.2g，枸椽酸5.5g，加水至1000ml使溶解，100℃滅菌30分鐘)的無菌容器中，4℃保存。
1％羊血紅細(xì)胞懸液的制備取上述羊血紅細(xì)胞適量，用氯化鈉注射液洗滌三次，每次離心5分鐘(2000轉(zhuǎn)/分)，取壓積羊血紅細(xì)胞，用氯化鈉注射液制成1％羊血紅細(xì)胞懸液。取懸液，用氯化鈉注射液稀釋20倍制成供試品溶液，另取等量懸液加水稀釋20倍作為空白溶液，照分光光度法(中國藥典2000年版二部附錄IVA)，在541nm的波長處測定，其吸收度應(yīng)為0.65-0.70，如超出限度應(yīng)調(diào)節(jié)1％羊紅細(xì)胞懸液的濃度。
C.溶血素及致敏羊血紅細(xì)胞溶血素的制備取上述壓積羊血紅細(xì)胞，用氯化鈉注射液制成25％羊血紅細(xì)胞懸液.取家兔1只，靜脈注射上述羊血紅細(xì)胞懸液，每日一次，共七次，前三次3ml，后三次5ml，末次注射后七日采血。分離血清，56℃.30分鐘滅活，分裝，0℃以下保存。
溶血素單位的測定取溶血素適量，加磷酸鹽緩沖液分別制成1∶1000、1∶2000、1∶3000、1∶4000、1∶5000、1∶6000、1∶7000、1∶8000、1∶9000、1∶10000的稀釋液，各取0.1ml置試管中，加1％羊血細(xì)胞懸液0.1ml，搖勻，加稀釋度為1∶30的豚鼠血清(補體)0.2ml及磷酸鹽緩沖液0.2ml，搖勻，37℃保溫30分鐘，完全溶血管的最高稀釋度為1單位溶血素。
致敏羊血紅細(xì)胞的制備 臨用前，將2％的羊血紅細(xì)胞懸液與2單位溶血索等體積混合，37℃保溫15分鐘即得。
補體取三只以上的豚鼠，心臟采血，離心分離血清，0℃以下保存。
補體單位的測定 取補體適量，加磷酸鹽緩沖液，分別制成1∶40、1∶60、1∶80、1∶100、1∶120、1∶140、1∶160、1∶180的稀釋液，各取0.2ml置試管中，加0.2ml磷酸鹽緩沖液，搖勻，37℃保溫30分鐘后，分別加致敏羊血紅細(xì)胞0.2ml，搖勻，37℃再保溫30分鐘。完全溶血管的最高稀釋度為1單位的補體。
抗體取甘露聚糖肽對照品適量，加氯化鈉注射液制成每1ml中含10mg的對照品溶液免疫家兔，隔日采用耳靜脈注射對照品溶液一次。第一次注射0.2ml，第二次至第五次各注射0.5ml，第六次至第十次各注射1.0ml，第十一次至第十五次各注射2.0ml，末次注射后三日采血，離心分離血清，56℃下30分鐘滅活，分裝，0℃以下保存(臨用前，需56℃30分鐘再次滅活)。
抗體單位的測定取抗體適量，加磷酸鹽緩沖液分別制成1∶2、1∶4、1∶8、1∶16、1∶32.1∶64、1∶128的稀釋液，各取0.1ml置試管中，加甘露聚糖肽對照品溶液0.1ml及2單位補體0.2ml，搖勻，于4-8℃放置4小時以上，置37℃保溫30分鐘，不溶血管的最高稀釋度為1單位抗體。同時設(shè)抗原(不加抗體，以0.1ml磷酸鹽緩沖液代替)、抗體(不加抗原，以0.1ml磷酸鹽緩沖液代替)、補體(不加抗原，抗體，以0.2ml磷酸鹽緩沖液代替)對照管，以上三種對照管應(yīng)全溶血；另設(shè)的致敏羊血紅細(xì)胞(不加抗原、抗體和補體，以0.4ml磷酸鹽緩沖液代替)對照管應(yīng)不溶血。
2、免疫原性測定法取甘露驟糖肽對照品與供試品適量，照藥品項下的規(guī)定制成不同濃度的對照品溶液和供試品溶液，各取0.1ml置試管中，加入2單位抗體0.1ml及2單位補體0.2ml.搖勻，于4-8℃放置4小時以上，置37℃保溫30分鐘，加入致敏羊血紅細(xì)胞0.2ml，搖勻，37℃再保溫30分鐘。觀察各管的溶血情況，不溶血管的最低濃度代表甘露聚糖肽的免疫原性。同時設(shè)抗原(不加抗體，以0.1ml磷酸鹽緩沖液代替)、抗體(不加抗原，以0.1ml磷酸鹽緩沖液代替)、補體(不加抗原、抗體、以0.2ml磷酸鹽緩沖液代替)對照管，以上三種對照管應(yīng)全溶血另設(shè)的致敏羊血紅細(xì)胞(不加抗原、抗體和補體，以0.4ml磷酸鹽緩沖液代替)對照管應(yīng)不溶血。
實施例1取上述α-甘露聚糖肽300g、麝香100g、蘇合香200g、菖蒲200g、牛黃100g、冰片100g。
制備時將以上中藥濃煎三次→合并煎液→濃縮→醇沉→過濾→與α-甘露聚糖肽300g混勻→質(zhì)檢→分裝成每支10ml?！善反龣z合格后→入庫。具體生產(chǎn)工藝按中華人民共和國藥典2000版一部滴耳劑的制備工藝(國家藥典委員會編，化學(xué)工業(yè)出版社出版)其它實施例與實施例1生產(chǎn)過程完全相同，只是組方成分不同。
實施例2的成分組方是每藥物1000g中α-甘露聚糖肽500mg，氟哌酸500mg，強的松25mg，茯苓120g，菖蒲120g，川連120g，黃芩150g，三葉120g，蒼術(shù)150g。
實施例3組方成分是每藥物1000g中含α-甘露聚糖肽300g、麝香50g、蘇合香100g、菖蒲100g、牛黃50g、冰片50g、川連30g、黃芩10g、虎杖10g、錦燈籠10g、山豆根30g、土茯苓20g、白蘚皮10g、紅藤20g、半邊蓮10g、龍葵10g、穿心蓮10g、馬齒莧30g、白頭翁15g、魚腥草25g、紫花地丁25g、蒲公英30g、金銀花20g、連翹10g、板藍(lán)根15g、半支蓮10g。
實施例4組方成分是每藥物1000g中含α-甘露聚糖肽250g、麝香30g、蘇合香80g、菖蒲80g、牛黃30g、冰片30g、川連10g、黃芩10g、虎杖10g、錦燈籠5g、山豆根15g、土茯苓10g、白蘚皮10g、紅藤10g、半邊蓮10g、龍葵10g、穿心蓮10g、馬齒莧15g、白頭翁10g、魚腥草15g、紫花地丁15g、蒲公英10g、金銀花10g、連翹10g、板藍(lán)根10g、半支蓮10g、三葉20g、蒼術(shù)20g、藏紅花10g、桃仁20g、益母草20g、三棱10g、乳香20g、郁金20g、丹參20g、牛膝10g、水蛭10g、皂角刺15g、穿山甲10g、酸棗仁10g、元胡10g、紅花10g、姜黃15g、雞血藤10g、川芎5g、珍珠母10g、紫參10g。
實施例5組方成分是每藥物1000g中含α-甘露聚糖肽200g、麝香30g、蘇合香40g、菖蒲40g、牛黃20g、冰片20g、川連5g、黃芩5g、虎杖10g、錦燈籠5g、山豆根10g、土茯苓10g、白蘚皮5g、紅藤5g、半邊蓮5g、龍葵5g、穿心蓮10g、馬齒莧10g、白頭翁10g、魚腥草10g、紫花地丁10g、蒲公英10g、金銀花10g、連翹5g、板藍(lán)根10g、半支蓮10g、三葉10g、蒼術(shù)10g、藏紅花10g、桃仁15g、益母草10g、三棱5g、乳香10g、郁金10g、丹參15g、牛膝10g、水蛭10g、皂角刺10g、穿山甲10g、酸棗仁10g、元胡10g、紅花10g、姜黃15g、雞血藤10g、川芎5g、珍珠母10g、紫參10g、路路通10g、石葦10g、海金沙10g、冬葵子10g、冬瓜皮10g、木通10g、滑石15g、車前子20g、澤瀉15g、赤小豆25g、金錢草20g、通草10g、薏苡仁10g、茵陳15g、豬苓10g、防己10g、木瓜20g、海風(fēng)藤15g、千年健10g、五加皮10g、威靈仙10g。
實施例6組方成分是每藥物1000g中含α-甘露聚糖肽220g、麝香30g、蘇合香20g、菖蒲20g、牛黃20g、冰片20g、川連5g、黃芩5g、虎杖10g、錦燈籠5g、山豆根10g、土茯苓10g、白蘚皮5g、紅藤5g、半邊蓮5g、龍葵5g、穿心蓮10g、馬齒莧10g、白頭翁10g、魚腥草10g、紫花地丁10g、蒲公英10g、金銀花10g、連翹5g、板藍(lán)根10g、半支蓮10g、三葉10g、蒼術(shù)10g、藏紅花10g、桃仁15g、益母草10g、三棱5g、乳香10g、郁金10g、丹參15g、牛膝10g、水蛭10g、皂角刺10g、穿山甲10g、酸棗仁10g、元胡10g、紅花10g、姜黃15g、雞血藤10g、川芎5g、珍珠母10g、紫參10g、路路通10g、石葦10g、海金沙10g、冬葵子10g、冬瓜皮10g、木通10g、滑石15g、車前子10g、澤瀉15g、赤小豆25g、金錢草20g、通草10g、薏苡仁10g、茵陳15g、豬苓10g、防己10g、木瓜20g、海風(fēng)藤15g、千年健10g、五加皮15g、威靈仙10g、氟哌酸25g。
實施例7組方成分是每藥物1000g中含α-甘露聚糖肽200g、麝香30g、蘇合香20g、菖蒲20g、牛黃20g、冰片20g、川連5g、黃芩5g、虎杖10g、錦燈籠5g、山豆根10g、土茯苓10g、白蘚皮5g、紅藤5g、半邊蓮5g、龍葵5g、穿心蓮10g、馬齒莧10g、白頭翁10g、魚腥草10g、紫花地丁10g、蒲公英10g、金銀花10g、連翹5g、板藍(lán)根10g、半支蓮10g、三葉10g、蒼術(shù)10g、藏紅花10g、桃仁15g、益母草10g、三棱5g、乳香10g、郁金10g、丹參15g、牛膝10g、水蛭10g、皂角刺10g、穿山甲10g、酸棗仁10g、元胡10g、紅花10g、姜黃15g、雞血藤10g、川芎5g、珍珠母10g、紫參10g、路路通10g、石葦10g、海金沙10g、冬葵子10g、冬瓜皮10g、木通10g、滑石15g、車前子10g、澤瀉15g、赤小豆15g、金錢草15g、通草10g、薏苡仁10g、茵陳15g、豬苓10g、防己10g、木瓜20g、海風(fēng)藤15g、千年健10g、五加皮10g、威靈仙10g、氟哌酸25g、強的松40g。
本發(fā)明所述治療急慢性中耳炎滴耳劑的局部刺激試驗選2.5-3.0kg健康家兔6只，局部應(yīng)用該滴耳劑，其中3只一次性大劑量接觸，觀察并記錄24h、72h后局部的反應(yīng)現(xiàn)象。結(jié)果表明用藥24h、72h后未見發(fā)紅、發(fā)疹、水皰等局部刺激反應(yīng)，說明本發(fā)明所述治療急慢性中耳炎滴耳劑無急性刺激反應(yīng)；另外3只每日三次，每次小劑量接觸，持續(xù)10天后觀察，仍未見皮膚發(fā)紅、發(fā)疹、水皰等局部刺激反應(yīng)，說明本發(fā)明所述治療急慢性中耳炎滴耳劑無慢性累積性刺激反應(yīng)。該滴耳劑是絕對安全，無任何不良反應(yīng)的。
動物藥效學(xué)研究1對豚鼠化膿性中耳炎的治療試驗1.1試驗材料1.1.1試驗動物健康豚鼠(鼓膜正常，耳廓反射良好)，體重400-600g，雌雄兼用，共2000只。由西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院實驗動物中心提供。
1.1.2菌種金黃色葡萄球菌ATCC-25923，綠膿桿菌ATCC-27853，由西安交通大學(xué)第一附屬醫(yī)院細(xì)菌室提供。
1.1.3供試樣品耳炎靈市售藥品；α-甘露聚糖肽、本發(fā)明所述第一至六種滴耳劑由本公司提供。
1.1.4麻醉劑5％鹽酸氯胺酮注射液上海第一制藥廠生產(chǎn)。
1.2試驗方法1.2.1細(xì)菌接種分別取金葡菌和綠膿桿菌，在試驗前2天接種于斜面瓊脂培養(yǎng)基上，經(jīng)37℃培養(yǎng)24小時，用白金耳環(huán)將細(xì)菌接種到液體培養(yǎng)基內(nèi)，經(jīng)37℃培養(yǎng)16小時，取出置冰箱(4℃)保存?zhèn)溆?。試驗感染時用生理鹽水將菌液稀釋至1010CFU/L。
1.2.2中耳腔感染豚鼠按0.06/kg靜脈注射鹽酸氯胺酮麻醉，在耳根部去毛，用4號針頭穿過鼓膜向左耳腔內(nèi)注入0.15ml金葡菌液或綠膿桿菌液。
1.2.3感染評價及動物分組感染24小時(金葡菌)和16小時(綠膿桿菌)后，動物耳腔內(nèi)有膿液，鼓膜明顯充血、紅腫，細(xì)菌培養(yǎng)確證為原接種菌者作為急性化膿性中耳炎模型。
選擇金葡菌和綠膿桿菌感染成功的豚鼠各90只，隨機分為9組，每組10只動物。即空白對照組不含藥物成分的滴耳劑α-甘露聚糖肽治療組α-甘露聚糖肽滴耳耳炎靈治療組耳炎靈滴耳本發(fā)明所述第一種滴耳劑治療組第一種滴耳劑滴耳本發(fā)明所述第二種滴耳劑治療組第二種滴耳劑滴耳本發(fā)明所述第三種滴耳劑治療組第三種滴耳劑滴耳本發(fā)明所述第四種滴耳劑治療組第四種滴耳劑滴耳本發(fā)明所述第五種滴耳劑治療組第五種滴耳劑滴耳本發(fā)明所述第六種滴耳劑治療組第六種滴耳劑滴耳1.2.4治療方法充分清拭豚鼠左外耳道，滴藥約0.3ml，使藥液充滿外耳道，頭側(cè)左耳向上，耳浴10分鐘，一天2次，連續(xù)給藥一周，給藥第7天觀察中耳炎癥反應(yīng)變化并做中耳腔滲出物的細(xì)菌培養(yǎng)。
1.2.5療效評價用消毒濕棉簽采集豚鼠中耳腔分泌物或涂擦原病灶，然后接種到斜面瓊脂培養(yǎng)基中，37℃培養(yǎng)18小時，鏡下觀察，試驗結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)處理，與空白對照組比較有顯著性差異為有效，無差異為無效。
1.3試驗結(jié)果金黃色葡萄球菌感染的豚鼠，經(jīng)7天治療后，客觀所見本發(fā)明所述的六種滴耳劑組的炎癥反應(yīng)均明顯好轉(zhuǎn)或痊愈，干耳，基本無分泌物；α-甘露聚糖肽治療組和耳炎靈治療組的炎癥反應(yīng)也有所好轉(zhuǎn)，偶有分泌物滲出；空白對照組治療后情況同治療前，無明顯改善。細(xì)菌檢出情況見表1本發(fā)明所述的六種滴耳劑組經(jīng)治療后細(xì)菌全部陰轉(zhuǎn)；α-甘露聚糖肽治療組和耳炎靈治療組治療后細(xì)菌得到一定程度的抑制，但未完全陰轉(zhuǎn)；空白對照組則無變化。由此可見，本發(fā)明所述的六種滴耳劑對金葡菌有顯著的抑制作用，同時對金葡菌引起的炎癥反應(yīng)療效顯著；單用α-甘露聚糖肽和耳炎靈對金葡菌有一定的抑制作用，但療效一般，同時對金葡菌引起的炎癥反應(yīng)的改善不徹底，療效明顯低于本發(fā)明所述的六種滴耳劑。
表1金葡菌感染治療前后細(xì)菌檢出結(jié)果組別感染菌動物數(shù)治療前細(xì)菌數(shù) 治療7d后細(xì)菌數(shù)空白對照組 金葡菌1010 10α-甘露聚糖肽治療組 金葡菌1010 4耳炎靈治療組金葡菌1010 3本發(fā)明所述第一種滴耳劑治療組金葡菌1010 0本發(fā)明所述第二種滴耳劑治療組金葡菌1010 0本發(fā)明所述第三種滴耳劑治療組金葡菌1010 0本發(fā)明所述第四種滴耳劑治療組金葡菌1010 0本發(fā)明所述第五種滴耳劑治療組金葡菌1010 0本發(fā)明所述第六種滴耳劑治療組金葡菌1010 0綠膿桿菌感染的豚鼠，經(jīng)7天治療后，客觀所見本發(fā)明所述的六種滴耳劑組的炎癥反應(yīng)均明顯好轉(zhuǎn)或痊愈，干耳，基本無分泌物；α-甘露聚糖肽治療組和耳炎靈治療組的炎癥反應(yīng)也有所好轉(zhuǎn)，偶有分泌物滲出；空白對照組治療后情況同治療前，無明顯改善。細(xì)菌檢出情況見表2本發(fā)明所述的六種滴耳劑組經(jīng)治療后細(xì)菌全部陰轉(zhuǎn)；α-甘露聚糖肽治療組和耳炎靈治療組治療后細(xì)菌得到一定程度的抑制，但未完全陰轉(zhuǎn)；空白對照組則無變化。由此可見，本發(fā)明所述的六種滴耳劑對綠膿桿菌有顯著的抑制作用，同時對綠膿桿菌引起的炎癥反應(yīng)療效顯著；單用α-甘露聚糖肽和耳炎靈對綠膿桿菌有一定的抑制作用，但療效一般，同時對綠膿桿菌引起的炎癥反應(yīng)的改善不徹底，療效明顯低于本發(fā)明所述的六種滴耳劑。
表2綠膿桿菌感染治療前后細(xì)菌檢出結(jié)果組別感染菌 動物數(shù) 治療前細(xì)菌數(shù)治療7d后細(xì)菌數(shù)空白對照組 綠膿桿菌10 10 10α-甘露聚糖肽治療組 綠膿桿菌10 10 3耳炎靈治療組綠膿桿菌10 10 3本發(fā)明所述第一種滴耳劑治療組綠膿桿菌10 10 0本發(fā)明所述第二種滴耳劑治療組綠膿桿菌10 10 0
本發(fā)明所述第三種滴耳劑治療組綠膿桿菌1010 0本發(fā)明所述第四種滴耳劑治療組綠膿桿菌1010 0本發(fā)明所述第五種滴耳劑治療組綠膿桿菌1010 0本發(fā)明所述第六種滴耳劑治療組綠膿桿菌1010 02對巴豆油所致小鼠耳廓腫脹的影響試驗2.1試驗材料2.1.1受試物本發(fā)明所述第一至六種滴耳劑由本公司提供。
2.1.2動物及飼養(yǎng)條件NIH小鼠，普通級。由西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院實驗動物中心提供。實驗室溫度25-27℃，相對濕度65％-80％。
2.1.3藥物及試劑耳炎靈市售藥品。α-甘露聚糖肽由本公司提供。巴豆油混合致炎劑由西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院藥理室配制。
2.1.4儀器MP120-2型電子天平上海經(jīng)二天平儀器廠。
2.2試驗方法取雄性小鼠90只，體重20-23g，隨機分為9組，具體同上。將藥液0.1ml均勻涂于各鼠左耳廓兩面，30min后均以2％巴豆油混合致炎劑0.1ml涂于各鼠左耳廓兩面以致炎。致炎后每隔30min同法給藥1次。致炎后4h處死小鼠，剪下左、右耳廓，用直徑8mm的打孔器在相對應(yīng)的部位分別打下左、右圓耳片，稱重，以左耳片重減去右耳片重作為腫脹度，與空白對照組比較，作組間t檢驗。
2.3試驗結(jié)果(表3)表3本試驗所述各種治療方法對巴豆油所致小鼠耳腫脹的影響結(jié)果(X±S)組別動物數(shù)腫脹度(mg)空白對照組 108.92±2.27α-甘露聚糖肽治療組 108.03±2.17耳炎靈治療組107.96±1.68本發(fā)明所述第一種滴耳劑治療組106.53±2.07*本發(fā)明所述第二種滴耳劑治療組106.37±2.12*本發(fā)明所述第三種滴耳劑治療組106.25±1.14*本發(fā)明所述第四種滴耳劑治療組106.20±1.69*本發(fā)明所述第五種滴耳劑治療組106.12±1.38*本發(fā)明所述第六種滴耳劑治療組106.10±1.75*注與空白對照組相比*P＜0.05
表3數(shù)據(jù)表明本發(fā)明所述六種滴耳劑治療后，腫脹度小于空白對照組，差異有顯著性意義，而α-甘露聚糖肽治療組和耳炎靈治療組的耳腫脹度較空白對照組有所降低，但差異無顯著性。提示本發(fā)明所述六種滴耳劑對巴豆油所致小鼠耳廓腫脹有顯著的抑制作用。
本發(fā)明所述治療急慢性中耳炎滴耳劑的動物藥效學(xué)研究實驗分三組進(jìn)行，每組10只家兔。α-甘露聚糖肽治療組(A組)中耳炎兔子模型+α-甘露聚糖肽滴耳(10ml10mg)，每日三次，每次2滴，連用5天；耳炎靈治療組(B組)中耳炎兔子模型+耳炎靈滴耳，每日三次，每次2滴，連用5天；本發(fā)明所述滴耳劑治療組(C組)中耳炎兔子模型+本發(fā)明所述滴耳劑滴耳，每日三次，每次2滴，連用5天。結(jié)果顯示C組家兔精神狀態(tài)良好，反應(yīng)靈敏，食欲增強從用藥前的100g左右增加到用藥后的400g左右，體溫從用藥前的39.51±1.38℃恢復(fù)至37.94±1.61℃，耳道無充血滲出，鼓膜活動度好，無內(nèi)陷；A組和B組家兔精神狀態(tài)一般，反應(yīng)略顯遲鈍，食欲增加不明顯，每日進(jìn)食量約為150g左右，體溫仍偏高，持續(xù)在39.06±2.43℃左右，耳道充血滲出稍有改善，鼓膜內(nèi)陷。以上實驗結(jié)果表明本發(fā)明所述滴耳劑對急慢性中耳炎的治療效果明顯優(yōu)于α-甘露聚糖肽和耳炎靈。
本發(fā)明所述治療急慢性中耳炎滴耳劑的療效驗證李某，男，10歲，右耳脹悶堵塞感，聽力減退，耳內(nèi)有水動感，纏綿不愈幾近2年。查鼓膜完整，內(nèi)陷呈灰黃色，電測聽示右耳傳導(dǎo)性耳聾，氣導(dǎo)40-45db，行鼓膜抽液有黃色液體，診斷為慢性中耳炎。曾作咽鼓管吹張，用抗菌素消炎，局部理療等，短期內(nèi)有一定效果，但不久又復(fù)發(fā)如初。予本發(fā)明所述滴耳劑滴耳，每日三次，每次2滴，連用10天(2個療程)。患者自覺輕松，右耳脹悶堵塞感消失，聽力恢復(fù)正常，鼓膜完整，鼓膜內(nèi)無滲出液，電測聽示氣導(dǎo)恢復(fù)至15db以下。繼續(xù)滴10天以鞏固療效，終使頑疾告愈，隨訪2年無復(fù)發(fā)。
本發(fā)明所述治療急慢性中耳炎滴耳劑的臨床療效統(tǒng)計本研究共收集42例門診分泌性中耳炎患者，男30例，女12例；年齡8-60歲，平均34歲；病程最長1年，最短1周，平均約半年。主要癥狀不同程度聽力減退，耳內(nèi)閉塞感；伴耳鳴者15例，伴耳痛者13例。局部檢查雙側(cè)耳道無分泌物，鼓膜內(nèi)陷；可見液平面者19例，經(jīng)鼓膜穿刺抽出液體者23例，電測聽顯示均有不同程度傳導(dǎo)性耳聾，其中3例作鼓膜切開術(shù)，1例作鼓膜置管術(shù)。所有患者應(yīng)用本發(fā)明所述滴耳劑進(jìn)行治療，每日三次，每次2滴，連用10天。療效判定標(biāo)z準(zhǔn)顯效自覺癥狀消失，聽力恢復(fù)正常，鼓膜正常，活動度佳，電測聽顯示氣導(dǎo)恢復(fù)至正常范圍即低于15db；有效自覺癥狀明顯減輕，聽力恢復(fù)，鼓膜活動尚好，電測聽示氣導(dǎo)20-30db之內(nèi)；無效自覺癥狀無變化，局部檢查與服藥前相同。結(jié)果42例患者中顯效28例，占66.7％；有效13例，占31％；無效1例，占2.4％。統(tǒng)計總有效率為97.6％。
經(jīng)過收集大量用藥患者病歷資料深入研究，歸納總結(jié)，證實該中西藥復(fù)方滴耳劑具有清除和抑制細(xì)菌、病毒的感染，增強機體的抵抗力，減少血管充血、滲出，減少腺體分泌，平衡和協(xié)調(diào)中耳的免疫功能，減少炎性介質(zhì)的釋放，恢復(fù)中耳壓力。
權(quán)利要求
1.一種治療急慢性中耳炎的滴耳劑，其特征是它的主要成分包括α-甘露聚糖肽20-50％、芳香開竅類中藥50-80％。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種治療急慢性中耳炎的滴耳劑，其特征是藥物還包括有α-甘露聚糖肽20-50％、芳香開竅類中藥10-70％、清熱解毒類中藥10-50％。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種治療急慢性中耳炎的滴耳劑，其特征是所述的藥物還包括有α-甘露聚糖肽20-50％、芳香開竅類中藥10-50％、清熱解毒類中藥10-30％、活血化瘀類中藥10-40％。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種治療急慢性中耳炎的滴耳劑，其特征是所述的藥物還包括有α-甘露聚糖肽20-50％、芳香開竅類中藥10-30％、清熱解毒類中藥10-20％、活血化瘀類中藥10-30％、消腫利水、燥濕殺蟲類中藥10-30％。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種治療急慢性中耳炎的滴耳劑，其特征是所述的藥物還包括有α-甘露聚糖肽20-50％、芳香開竅類中藥10-30％、清熱解毒類中藥10-20％、活血化瘀類中藥10-30％、消腫利水、燥濕殺蟲類中藥10-30％、氟哌酸1-5％。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種治療急慢性中耳炎的滴耳劑，其特征是所述的藥物還包括有α-甘露聚糖肽20-50％、芳香開竅類中藥10-30％、清熱解毒類中藥10-20％、活血化瘀類中藥10-30％、消腫利水、燥濕殺蟲類中藥10-30％、氟哌酸1-5％、強的松3-5％。
7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種治療急慢性中耳炎的滴耳劑，其特征是所述的芳香開竅類中藥有麝香、蘇合香、菖蒲、牛黃、冰片；所述的清熱解毒類中藥有川連、黃芩、虎杖、錦燈籠、山豆根、土茯苓、白蘚皮、紅藤、半邊蓮、龍葵、穿心蓮、馬齒莧、白頭翁、魚腥草、紫花地丁、蒲公英、金銀花、連翹、板藍(lán)根、半支蓮；所述的活血化瘀類中藥有三葉、蒼術(shù)、藏紅花、桃仁、益母草、三棱、乳香、郁金、丹參、牛膝、水蛭、皂角刺、穿山甲、酸棗仁、元胡、紅花、姜黃、雞血藤、川芎、珍珠母、紫參；所述的消腫利水、燥濕殺蟲類中藥有路路通、石葦、海金沙、冬葵子、冬瓜皮、木通、滑石、車前子、澤瀉、赤小豆、金錢草、通草、薏苡仁、茵陳、豬苓、防己、木瓜、海風(fēng)藤、千年健、五加皮、威靈仙。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種治療急慢性中耳炎的滴耳劑，其特征是所述的藥物1000g中含α-甘露聚糖肽300g、麝香100g、蘇合香200g、菖蒲200g、牛黃100g、冰片100g。
9.根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種治療急慢性中耳炎的滴耳劑，其特征是所述的藥物1000g中含α-甘露聚糖肽220g、麝香30g、蘇合香20g、菖蒲20g、牛黃20g、冰片20g、川連5g、黃芩5g、虎杖10g、錦燈籠5g、山豆根10g、土茯苓10g、白蘚皮5g、紅藤5g、半邊蓮5g、龍葵5g、穿心蓮10g、馬齒莧10g、白頭翁10g、魚腥草10g、紫花地丁10g、蒲公英10g、金銀花10g、連翹5g、板藍(lán)根10g、半支蓮10g、三葉10g、蒼術(shù)10g、藏紅花10g、桃仁15g、益母草10g、三棱5g、乳香10g、郁金10g、丹參15g、牛膝10g、水蛭10g、皂角刺10g、穿山甲10g、酸棗仁10g、元胡10g、紅花10g、姜黃15g、雞血藤10g、川芎5g、珍珠母10g、紫參10g、路路通10g、石葦10g、海金沙10g、冬葵子10g、冬瓜皮10g、木通10g、滑石15g、車前子10g、澤瀉15g、赤小豆25g、金錢草20g、通草10g、薏苡仁10g、茵陳15g、豬苓10g、防己10g、木瓜20g、海風(fēng)藤15g、千年健10g、五加皮15g、威靈仙10g、氟哌酸25g。
10.根據(jù)權(quán)利要求6所述的一種治療急慢性中耳炎的滴耳劑，其特征是所述的藥物1000g中含α-甘露聚糖肽200g、麝香30g、蘇合香20g、菖蒲20g、牛黃20g、冰片20g、川連5g、黃芩5g、虎杖10g、錦燈籠5g、山豆根10g、土茯苓10g、白蘚皮5g、紅藤5g、半邊蓮5g、龍葵5g、穿心蓮10g、馬齒莧10g、白頭翁10g、魚腥草10g、紫花地丁10g、蒲公英10g、金銀花10g、連翹5g、板藍(lán)根10g、半支蓮10g、三葉10g、蒼術(shù)10g、藏紅花10g、桃仁15g、益母草10g、三棱5g、乳香10g、郁金10g、丹參15g、牛膝10g、水蛭10g、皂角刺10g、穿山甲10g、酸棗仁10g、元胡10g、紅花10g、姜黃15g、雞血藤10g、川芎5g、珍珠母10g、紫參10g、路路通10g、石葦10g、海金沙10g、冬葵子10g、冬瓜皮10g、木通10g、滑石15g、車前子10g、澤瀉15g、赤小豆15g、金錢草15g、通草10g、薏苡仁10g、茵陳15g、豬苓10g、防己10g、木瓜20g、海風(fēng)藤15g、千年健10g、五加皮10g、威靈仙10g、氟哌酸25g、強的松40g。
全文摘要
本發(fā)明屬于一種治療急慢性中耳炎的滴耳劑，特別是關(guān)于一種生物制劑和中藥混合制成的治療急慢性中耳炎的滴耳劑，其特征是它的主要成分包括α－甘露聚糖肽20－50％、芳香開竅類中藥50－80％。藥物還包括有α－甘露聚糖肽20－50％、芳香開竅類中藥10－70％、清熱解毒類中藥10－50％。所述的藥物還包括有α－甘露聚糖肽20－50％、芳香開竅類中藥10－50％、清熱解毒類中藥10－30％、活血化瘀類中藥10－40％。這種治療急慢性中耳炎的滴耳劑采用生物制劑與中藥的結(jié)合，該藥物的特點是從西醫(yī)、中醫(yī)兩種理論系統(tǒng)出發(fā)，針對各自提出的病理機理，辨證施治，達(dá)到標(biāo)本兼治的功效。
文檔編號A61P27/00GK1663605SQ200410104429
公開日2005年9月7日 申請日期2004年12月19日 優(yōu)先權(quán)日2003年12月31日
發(fā)明者趙恒 申請人:趙恒