專(zhuān)利名稱(chēng)：基本上不含水的生物粘附性液體組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及有機(jī)組合物。更具體地，本發(fā)明涉及一種能夠在使用時(shí)增稠和/或粘附到表面上的液體組合物；該表面尤其是表皮或黏膜表面，但也不排除其他表面。
背景技術(shù)：
在醫(yī)藥中，藻酸鹽組合物用來(lái)例如減輕回流性食管炎的后果。但是，這些組合物盡管有利，但是它們不能粘附在食管的黏膜表面上。
US-B-6391294公開(kāi)了一種藥用的聚合物質(zhì)，在水存在下，經(jīng)陰離子聚合物和陽(yáng)離子聚合物的反應(yīng)，在體表就地形成這種聚合物質(zhì)。所述聚合物可以作為獨(dú)立的多個(gè)組合物或在非水性載體中的單一組合物施用，然后一起就地反應(yīng)。
國(guó)際藥學(xué)雜志(International Journal of Pharmaceutics)，238卷，2002年，第123-132頁(yè)描述了藻酸鹽水溶液在食管內(nèi)作為生物黏合劑的應(yīng)用。
如果提供一種能在目標(biāo)體表區(qū)域內(nèi)增稠和/或能粘附在所述區(qū)域上的組合物，這將是有利的。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的第一個(gè)方面提供一種用于粘附到表面上的液體組合物，該組合物包含懸浮在水溶性液體稀釋劑中的水溶脹性聚合物顆粒，其中，所述液體稀釋劑基本上不含水，或包含不足以完全溶脹所述聚合物顆粒的量的水，其中，所述聚合物顆粒不同時(shí)包括陰離子聚合物顆粒和陽(yáng)離子聚合物顆粒。
盡管所述組合物可以用在家庭中，但是優(yōu)選所述組合物用于與體表粘附。所述水溶性液體稀釋劑優(yōu)選為藥用的稀釋劑。在優(yōu)選方案中，所述組合物為治療組合物。
下面的說(shuō)明是用于治療用途的本發(fā)明的組合物。隨后將描述非治療性的用途。下文中提及的該組合物的性質(zhì)，例如顆粒性質(zhì)、可使用的稀釋劑類(lèi)型、可使用的合適的陰離子聚合物等等，也適用于非治療性用途。
因此，本發(fā)明的組合物是顆粒懸浮液的形式。在使用前這些顆粒在組合物中仍然是顆粒，優(yōu)選基本上沒(méi)有溶脹。它們的尺寸差距很大，從肉眼可見(jiàn)的尺寸到顯微鏡下才可看見(jiàn)的尺寸。該懸浮液可以是均相分散液的形式。例如在即將施用前，該組合物可以與水在體外混合(例如在玻璃杯中)。另外，它也可以與水在體內(nèi)混合，例如在口腔(唾液提供水)內(nèi)混合。不論以何種方式輸送，水將使聚合物顆粒溶脹，使它們凝結(jié)，從而增加該組合物的黏度，并使它們的至少一部分粘附在體表上。所述顆粒不須具有任何水溶性，但是在優(yōu)選實(shí)施方案中，它們可部分或完全溶解在水中。但是，在所有實(shí)施方案中，水將使事先保存在無(wú)水或少水環(huán)境中的顆粒溶脹。
優(yōu)選地，這種粘附層可防止或減輕發(fā)炎或損傷。通過(guò)在受損的體表外部提供屏障，使其避免進(jìn)一步發(fā)炎或損傷，從而使體表愈合。
備選地或另外地，粘附層可促進(jìn)活性藥劑經(jīng)體表吸收?；钚运巹┛梢院驮摻M合物配制在一起或單獨(dú)施用。使用時(shí)，活性藥劑可以作為涂層的一部分存在，也可以單獨(dú)存在但是通過(guò)該粘附層而被吸收。
體表可以是表皮的表面。表皮的表面可以是任何外部的表面皮膚。受損的皮膚可以是起泡、被火燒傷、發(fā)炎、化膿、曬傷或被叮咬的皮膚。
體表可以是黏膜表面。黏膜表面可以是任何內(nèi)部的體表。其例子包括口(包括舌)、鼻、眼、喉、食管、胃、陰道和直腸。
體表可以是被撕裂或切割表面，例如暴露在外的受到損傷或其他外傷的肌肉表面。
本發(fā)明的組合物可以當(dāng)作加濕或軟化皮膚的組合物，或作為護(hù)發(fā)素或脫毛組合物。
本發(fā)明的組合物可以是牙科組合物，例如假牙固定劑。
當(dāng)本發(fā)明的組合物和唾液中的水混合時(shí)，該組合物優(yōu)選粘附在胃腸道的表面，優(yōu)選食管，最優(yōu)選下部食管。但是，它可以粘附在不同的表面上，例如口腔或喉嚨的表面，用來(lái)減輕例如口腔潰瘍或咽喉炎。
優(yōu)選地，從與水混合到達(dá)到有利的溶脹程度之間的間隔在1～60秒鐘的范圍內(nèi)，最優(yōu)選2～30秒鐘。
合適的聚合物優(yōu)選為水溶脹性、無(wú)毒和在稀釋劑中不溶脹的聚合物。
合適地，所述聚合物可以為陰離子、陽(yáng)離子和非離子聚合物?？梢允褂眠@些聚合物的混合物，但例外的是，陰離子和陽(yáng)離子聚合物的復(fù)合配方是不利的，因?yàn)樗鼈冎g會(huì)發(fā)生相互作用。因此下列物質(zhì)可以合適地用作任何所給配方中的聚合物●僅為陰離子聚合物。這是特別優(yōu)選的配方。在此定義下，可以使用混合的陰離子聚合物，但是優(yōu)選僅使用一種陰離子聚合物。
●僅為非離子聚合物。這是優(yōu)選配方。在此定義下，可以使用混合的非離子聚合物，但是優(yōu)選僅使用一種非離子聚合物。
●僅為陽(yáng)離子聚合物。這是優(yōu)選配方。在此定義下，可以使用混合的陽(yáng)離子聚合物，但是優(yōu)選僅使用一種陽(yáng)離子聚合物。
●陰離子聚合物和非離子聚合物。在此定義下，可以使用混合的陰離子聚合物和/或混合的非離子聚合物，但是優(yōu)選僅使用一種陰離子聚合物和一種非離子聚合物。
●陽(yáng)離子聚合物和非離子聚合物。在此定義下，可以使用混合的陽(yáng)離子聚合物和/或混合的非離子聚合物，但是優(yōu)選僅使用一種陽(yáng)離子聚合物和一種非離子聚合物。
合適的陰離子聚合物的例子在例如US-B-6391294中給出。優(yōu)選的陰離子聚合物包括透明質(zhì)酸的水溶性鹽、藻酸鹽(例如堿金屬和堿土金屬的藻酸鹽，例如藻酸鈉、藻酸鉀、藻酸鈣和藻酸鎂)、黃原膠、阿拉伯膠、果膠；衍生為酸性的聚糖類(lèi)，優(yōu)選含糖醛酸的物質(zhì)，例如透明質(zhì)酸或蘋(píng)婆酸；角叉菜膠鹽和聚乳酸和水溶性纖維素衍生物(例如羧甲基纖維素鈉)。
本發(fā)明使用的更優(yōu)選的陰離子聚合物是水溶脹性的藻酸的鹽(即藻酸鹽)和水溶脹性的纖維素衍生物的鹽，優(yōu)選水溶性的藻酸的鹽和水溶性的纖維素衍生物的鹽。
合適的陽(yáng)離子聚合物的例子在例如US-B-6391294中給出。合適的陽(yáng)離子聚合物包括殼聚糖鹽(例如氯化殼聚糖、乙酸殼聚糖)、二乙基氨基乙基葡聚糖、軟骨素鹽、聚賴(lài)氨酸、膚質(zhì)素(dermatan)和角蛋白。
合適的非離子聚合物的例子包括纖維素衍生物(例如甲基纖維素、羥乙基丙基纖維素、羥丙基甲基纖維素、羥丙基纖維素)和淀粉以及淀粉衍生物。
所述聚合物顆粒在未溶脹狀態(tài)優(yōu)選具有30～500微米的平均粒徑，特別是50～200微米，尤其是90～125微米。在制備本發(fā)明的組合物之前，為了測(cè)定平均粒徑，它們可經(jīng)篩分分級(jí)。
基于組合物的總重量，該組合物優(yōu)選包含2～90重量％的所述聚合物顆粒，更優(yōu)選5～70重量％，再優(yōu)選20～60重量％，最優(yōu)選30～50重量％的所述聚合物顆粒。
此處的“水”包括含水液體，例如唾液。
當(dāng)然，非水性液體本身應(yīng)當(dāng)為藥用的。優(yōu)選的非水性液體包含一元醇、多元醇、糖醇和糖多元醇，或由上述物質(zhì)組成。
合適的一元醇包括乙醇和異丙醇。
合適的多元醇包括丙三醇、二元醇、聚亞烷基二醇或它們的混合物。合適的二元醇例如為丙二醇。合適的聚亞烷基二醇為聚乙二醇(PEG)，優(yōu)選分子量至少100，優(yōu)選至少200的聚乙二醇。優(yōu)選其分子量最高為1000，更優(yōu)選最高為700，最優(yōu)選最高為400。
合適的糖多元醇是氫化的葡萄糖漿(LYCASIN(注冊(cè)商標(biāo)))。
藥用的液體稀釋劑優(yōu)選基本上不含水，基于組合物的總重量，例如含水量低于1重量％，或優(yōu)選低于0.5重量％。最優(yōu)選它是無(wú)水的。
備選地，藥用的液體稀釋劑包含一些水。為了控制陰離子聚合物顆粒的溶脹性，使其在需要的位置達(dá)到最優(yōu)效果，這是有利的。例如，在組合物中摻入一些水將使顆粒溶脹到一定程度，但是基本上不凝結(jié)。當(dāng)包括部分預(yù)溶脹顆粒的組合物被咽下并與唾液混合時(shí)，與沒(méi)有部分預(yù)溶脹時(shí)的顆粒相比，該顆粒將更快地凝結(jié)和形成屏障膜。比喻來(lái)說(shuō)，它們可認(rèn)為是“預(yù)處理的(primed)”。
在這些實(shí)施方案中，所述組合物應(yīng)含有足以“預(yù)處理”該顆粒的一部分水，但不能比這更多；在施用之前，希望該組合物沒(méi)有顯著增稠。水的最佳比例依賴(lài)于組合物的其它組分，特別是液體稀釋劑。一般地，基于稀釋劑的重量，所述液體稀釋劑可含有10～70重量％的水。
當(dāng)液體稀釋劑是丙三醇時(shí)，基于稀釋劑(即丙三醇)的重量，它可含有最高20重量％的水，優(yōu)選10～20重量％的水。
當(dāng)液體稀釋劑是簡(jiǎn)單的二元醇，優(yōu)選丙二醇時(shí)，基于稀釋劑(即二元醇)的重量，它可含有最高50重量％的水，優(yōu)選10～50重量％的水，最優(yōu)選25～50重量％的水。
當(dāng)液體稀釋劑是聚亞烷基二醇，例如聚乙二醇時(shí)，基于稀釋劑(即聚亞烷基二醇)的重量，它可含有最高60重量％的水，優(yōu)選10～60重量％的水，最優(yōu)選30～60重量％的水。但是，當(dāng)稀釋劑是聚乙二醇400時(shí)，其上限優(yōu)選為稀釋劑重量的60重量％，當(dāng)它是聚乙二醇200時(shí)，其上限優(yōu)選是40重量％。
稀釋劑(包括有水存在的情況)的希爾德布蘭德(Hildebrand)溶解度參數(shù)優(yōu)選為至少15(Jcm-3)1/2，優(yōu)選至少20(Jcm-3)1/2。
稀釋劑(包括有水存在的情況)的希爾德布蘭德溶解度參數(shù)優(yōu)選不大于35(Jcm-3)1/2，優(yōu)選不大于31(Jcm-3)1/2。
特別當(dāng)某種活性劑對(duì)發(fā)炎或受損的體表有效，例如對(duì)胃回流引起的食管發(fā)炎有效時(shí)，或當(dāng)需要使某種活性劑通過(guò)粘附的組合物穿過(guò)皮膚被吸收到血液中時(shí)，所述組合物也可以包含這種活性劑。合適的活性劑包括止痛劑、消炎劑和解熱劑(例如對(duì)乙酰氨基酚、布洛芬、萘普生、二氯芬酸、酮洛芬、水楊酸膽堿、芐達(dá)明、丁丙諾啡、氫化可的松、倍他米松)、減充血?jiǎng)?例如偽麻黃堿、苯福林、羥甲唑啉、丁芐唑啉)、礦物鹽(例如葡萄糖酸鋅、乙酸鋅)、止咳劑(例如右美沙芬、可待因、pholocodine)、祛痰劑(例如愈創(chuàng)甘油醚、N-乙酰半胱氨酸、溴芐環(huán)己銨)、防腐劑(例如三氯生、氯二甲苯酚、氯化十六烷基吡啶鎓、氯化苯甲烷銨、戊間甲酚、hexylresourcinol、二氯苯甲醇、苯甲醇、地喹氯銨、磺胺嘧啶銀)、心血管藥(例如三硝基甘油)、局部麻醉劑(例如利多卡因、苯佐卡因)、細(xì)胞保護(hù)劑(例如生胃酮、硫糖鋁、堿式水楊酸鉍)、抗?jié)儎?例如碳酸鈣、碳酸氫鈉、三硅酸鎂、氫氧化鎂鋁、西咪替丁、雷尼替丁、尼扎替丁、法莫替丁、奧美拉唑、泮托拉唑)、抗組胺劑(例如氯雷他定、特非那定、苯海拉明、氯苯那敏、曲普利啶、阿伐斯汀)、止吐劑(例如丙氯拉嗪、舒馬曲坦)、腸道調(diào)節(jié)劑(例如地芬諾酯、洛哌丁胺、番瀉甙)、抗真菌劑(例如克霉唑)、抗生素(例如鐮孢真菌素、短桿菌素)和制牛皮癬劑(例如地蒽酚、鈣泊三醇)?？梢园ㄒ环N或一種以上的試劑。
可以簡(jiǎn)單地將本發(fā)明的組合物粘附在體表上來(lái)治療體表的疾病。但是，用于食管表面的情況下，它另外起治療胃腸痙攣的作用，例如回流食管炎、胃炎、消化不良或消化性潰瘍。因此，在本發(fā)明的這方面，該組合物還可以包含碳酸氫鹽和選擇性包括藻酸鹽交聯(lián)劑，使到達(dá)胃的組合物形成回流抑制“筏”。對(duì)于這種用途的特別優(yōu)選的實(shí)施方案可以包括本發(fā)明的組合物以及碳酸鈣和碳酸氫鈉，并將其配制成可飲用的制劑。
本發(fā)明的第二個(gè)方面提供一種治療患者的方法，該方法使用上述的本發(fā)明的組合物，并將其粘附到患者的體表?？梢圆捎眠@種方法來(lái)例如防止或緩解體表的病狀。備選地或另外地，可以采用這種方法來(lái)為患者透皮給藥。
本發(fā)明還提供了聚合物顆粒在制備本文所述組合物中的應(yīng)用，所述組合物用于治療需要進(jìn)行預(yù)防性或恢復(fù)性處理的體表，或用于活性藥劑的透皮給藥。
通過(guò)將各組分混合在一起直到得到均勻混合物，特別是得到均勻的分散體，由此來(lái)制備本發(fā)明的組合物。
本發(fā)明的非治療性用途是得益于以下事實(shí)的用途組合物具有低的初始黏度，用水稀釋時(shí)變成較高黏度的液體，優(yōu)選該液體具有粘附在目標(biāo)表面上的傾向。本發(fā)明的組合物可用于家庭清潔組合物。例如，將該組合物裝入一個(gè)裝置中，周期性地將第一個(gè)發(fā)明組合物以未稀釋和非黏性的形式釋放到抽水馬桶中。該組合物可沿抽水馬桶自由地向下流到水中，在水中該組合物增稠，并粘附在水線以下的衛(wèi)生潔具上，在此發(fā)揮清潔作用。當(dāng)聚合物是藻酸鹽時(shí)，因?yàn)樵逅猁}的強(qiáng)螯合作用，它可防止或除去水垢。
在另一個(gè)非治療方案中，本發(fā)明的組合物是用于物品清洗機(jī)的封裝組合物的一部分。封裝材料可以是透水性的，當(dāng)吸入水時(shí)，囊內(nèi)的聚合物溶脹使囊破裂，從而將內(nèi)容物釋放到物品清洗機(jī)中。然后釋放出聚合物，并可粘附在物品清洗機(jī)內(nèi)的硬表面上。因此它對(duì)物品清洗機(jī)的表面具有清洗或預(yù)防結(jié)垢的作用。
現(xiàn)在參照下列實(shí)施例進(jìn)一步描述本發(fā)明。


圖1表示單個(gè)藻酸鹽顆粒在甘油內(nèi)的溶脹。
圖2顯示了溶脹行為隨用人工唾液進(jìn)行稀釋時(shí)的變化。
圖3表示溶脹速率和稀釋劑稀釋之間的關(guān)系對(duì)每個(gè)稀釋劑是不同的。
圖4希爾德布蘭德溶解度參數(shù)與80重量％的載體稀釋時(shí)的模擬溶脹速率的關(guān)系。
圖5希爾德布蘭德溶解度參數(shù)與表現(xiàn)出顆粒溶脹所必需的稀釋程度的關(guān)系。
圖6顯示了懸浮在稀釋劑中的藻酸鹽顆粒被置于食管黏膜上時(shí)，其溶脹面積的變化。
圖7顯示稀釋劑的選擇對(duì)施用到食管黏膜上的藻酸鹽總量的影響。
圖8顯示藻酸鈉在食管黏膜上的保留隨沖洗時(shí)間增加的變化。
圖9為“蠕動(dòng)試管”生物粘附測(cè)試系統(tǒng)設(shè)備。
圖10顯示在沖洗前進(jìn)行5次初始蠕動(dòng)波動(dòng)之后，從食管流出的施用到食管黏膜上的藻酸鹽總量的百分比。
圖11顯示在沖洗后仍然保留在黏膜表面上藻酸鹽占給藥到食管的藻酸鹽總量的百分比。
圖12顯示稀釋劑的選擇對(duì)藻酸鹽在食管的上、中和下部3個(gè)區(qū)域內(nèi)的保留的影響。
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例1在這些實(shí)施例中，目的是評(píng)估下列影響
●人工唾液稀釋劑稀釋對(duì)藻酸鹽顆粒溶脹速率的影響。
●稀釋劑組合物的選擇對(duì)藻酸鹽顆粒溶脹速率的影響。
原料

儀器尼康Labophot光學(xué)顯微鏡，該顯微鏡與COHU High Performance CCD照相機(jī)相連，該照相機(jī)通過(guò)接口連接到圖像分析軟件Image Proplus 4.1版(美國(guó)馬里蘭州的Media Cybernetics，經(jīng)銷(xiāo)商為英國(guó)伯克郡finchampstead的Datacell Ltd.)。
渦旋混合器VM20，英國(guó)Bucks的Chiltem Scientific。
Thoma血細(xì)胞計(jì)數(shù)器計(jì)數(shù)盒，深度0.1mm，0.0025mm2，英格蘭Hawksley。
方法人工唾液的制備按照以下配方制備人工唾液在水中加入5mM的碳酸氫鈉、7.36mM的氯化鈉、20mM的氯化鉀、6.6mM的一水合磷酸二氫鈉、1.5mM的二水合氯化鈣。
目測(cè)單個(gè)顆粒的溶脹將單個(gè)藻酸鹽顆粒(90～125μm)放在血細(xì)胞計(jì)數(shù)器計(jì)數(shù)盒的中心，使用蓋玻片蓋上，用Blu-Tack(英國(guó)萊斯特，Bostick公司)使蓋玻片兩側(cè)負(fù)重。在該室的前面靠近蓋玻片處注射15μL的水化液體(人工唾液稀釋劑DMMB)。在室表面和蓋玻片之間的毛細(xì)作用力吸取界面之間的流體，從而浸漬該單個(gè)顆粒。隨著藻酸鹽顆粒的水化，由于DMMB和溶解性藻酸鹽絡(luò)合時(shí)顏色從藍(lán)色變化到紫色，所以可劃出凝膠層。由于顏色的變化，這意味著可以用光學(xué)顯微鏡(尼康Labophot)沿二維方向觀察顆粒的徑向溶脹。圖像分析軟件(Image Proplus 4.1版，美國(guó)MediaCybernetics)在預(yù)定時(shí)間后捕獲圖像，用溶脹區(qū)域的軟件測(cè)定法計(jì)算顆粒的徑向溶脹程度。
使用血細(xì)胞計(jì)數(shù)器計(jì)數(shù)盒的基本原理是保證溶脹的固定體積。蓋玻片和室表面之間的距離是設(shè)計(jì)為精確到100μm，因此可以捕獲90～125μm的篩分的藻酸鹽顆粒，同時(shí)限制軸向溶脹。因此，溶脹將沿徑向發(fā)生，可以使用圖像分析法根據(jù)二維圖像計(jì)算溶脹程度。
制備水化流體使用水化流體水化血細(xì)胞計(jì)數(shù)器計(jì)數(shù)盒內(nèi)的藻酸鹽顆粒。為了測(cè)定稀釋劑的選擇和有人工唾液的稀釋劑的稀釋對(duì)顆粒溶脹的影響，制備多個(gè)稀釋劑人工唾液溶液(0～100重量％)。測(cè)定下列稀釋劑●甘油●70∶30(重量)甘油∶丙二醇●40∶60(重量)甘油∶丙二醇●丙二醇●聚乙二醇200●聚乙二醇400將1，9-二甲基亞甲藍(lán)(DMMB)加到水化流體(稀釋劑人工唾液混合物)中。DMMB是與溶劑化的藻酸鈉絡(luò)合的陽(yáng)離子染料，所產(chǎn)生的從藍(lán)色到紫色的顏色變化描繪出溶脹顆粒的凝膠層。水化流體內(nèi)的稀釋劑濃度決定了DMMB的加入量(350～1490μM)。DMMB的加入量是觀測(cè)所需要的最小濃度。
結(jié)果和討論圖1表示單個(gè)藻酸鹽顆粒在甘油內(nèi)的溶脹，圖2顯示了溶脹行為隨著用人工唾液進(jìn)行稀釋時(shí)的變化。在100％的稀釋劑(即0重量％的稀釋劑稀釋)中，藻酸鹽顆粒不溶脹，顆粒面積沒(méi)有隨時(shí)間變化。但是，隨著使用有人工唾液的甘油的稀釋增加而使該藻酸鹽顆粒水化，從標(biāo)準(zhǔn)化的面積對(duì)時(shí)間的梯度計(jì)算得到的溶脹速率增加(圖1和2)。
從圖1和2所示的結(jié)果明顯地看到，藻酸鹽顆粒溶脹速率和有人工唾液的甘油的遞增稀釋之間的關(guān)系可以認(rèn)為具有兩個(gè)主要特點(diǎn)。首先，該關(guān)系可以用初始階段來(lái)描述其特征。初始階段表示在進(jìn)行一系列稀釋劑稀釋時(shí)，懸浮的藻酸鹽顆粒保持未溶脹的狀態(tài)。第二，在稀釋的臨界水平超出了初始階段，隨其后的稀釋(激活階段)溶脹速率增加。
圖3表示溶脹速率和稀釋劑稀釋之間的關(guān)系對(duì)每個(gè)稀釋劑是不同的。
不同的稀釋劑顯示出以下方面的差異在超過(guò)初始階段所需要的稀釋水平的差異，即顆粒開(kāi)始溶脹所必需的稀釋劑稀釋水平的差異；以及進(jìn)入激活階段時(shí)溶脹速率對(duì)進(jìn)一步稀釋的敏感性的差異?？梢郧宄乜吹?，藻酸鹽顆粒在約25重量％的甘油人工唾液中開(kāi)始溶脹。但是，在聚乙二醇400中，需要使用人工唾液將該稀釋劑稀釋至60重量％來(lái)引發(fā)溶脹。
這六種稀釋劑給出了稀釋時(shí)溶脹速率的范圍，并且提供了引發(fā)溶脹所需要的稀釋劑稀釋程度的控制方法。
蒸發(fā)焓是將純液體轉(zhuǎn)化為氣體所需要的能量。在將液體轉(zhuǎn)化為氣體時(shí)，必需徹底解離液體的單個(gè)分子，因此蒸發(fā)焓是將液體分子結(jié)合在一起的范德華力大小的直接量度。
在溶劑和溶質(zhì)混合時(shí)，溶質(zhì)必須以類(lèi)似蒸發(fā)的方法斷開(kāi)溶劑分子之間的范德華相互作用。因此，溶劑的蒸發(fā)焓作為溶劑分子間范德華相互作用力量度，可以提供溶解行為的指標(biāo)。特定溶劑的溶解行為可用希爾德布蘭德溶解度參數(shù)(δ)表示，該參數(shù)由內(nèi)聚能密度的平方根計(jì)算。
希爾德布蘭德溶解度參數(shù)(δ)＝(ΔE/V)0.5(ΔE/V)＝內(nèi)聚能密度因此，溶劑的希爾德布蘭德溶解度參數(shù)給出了溶劑分子間范德華力的量度，可被用來(lái)衡量多種溶劑的溶解行為。
在這項(xiàng)工作內(nèi)容中，用來(lái)溶脹藻酸鹽顆粒的溶劑是下列6種稀釋劑●甘油●丙二醇●70∶30(重量)甘油∶丙二醇的混合物●40∶60(重量)甘油∶丙二醇的混合物●聚乙二醇200●聚乙二醇400據(jù)認(rèn)為，稀釋劑的希爾德布蘭德溶解度參數(shù)對(duì)于本發(fā)明很關(guān)鍵。這可以用基團(tuán)貢獻(xiàn)方法計(jì)算(參見(jiàn)Sperling，L.H.，物理聚合物科學(xué)簡(jiǎn)介(Introduction to physical polymer science)，2001年第3版，Wiley；CowieJ.M.G，聚合物化學(xué)家和現(xiàn)代材料的物理(polymer chemists and physics ofmodem materials)，1991年第2版，格拉斯哥Blackie)。
計(jì)算下表所示的每種稀釋劑的希爾德布蘭德溶解度參數(shù)。

每種稀釋劑的希爾德布蘭德溶解度參數(shù)提供了單個(gè)稀釋劑分子之間內(nèi)聚力的量度，并且看起來(lái)似乎可以用希爾德布蘭德溶解度參數(shù)來(lái)理解顆粒溶脹速率和載體稀釋程度之間的關(guān)系。
圖4和圖5反映了希爾德布蘭德溶解度參數(shù)與80重量％的載體稀釋時(shí)的模擬溶脹速率的關(guān)系，以及與表現(xiàn)出顆粒溶脹所必需的稀釋程度的關(guān)系。
實(shí)施例2這些實(shí)施例研究稀釋劑的選擇對(duì)施用到食管黏膜上的懸浮藻酸鹽顆粒的影響。
實(shí)施例1的結(jié)果表明，當(dāng)組合物進(jìn)入上部胃腸道時(shí)，稀釋劑被黏膜表面上的唾液稀釋?zhuān)瑧腋〉脑逅猁}將開(kāi)始溶脹。溶脹的藻酸鹽和黏膜表面之間的接觸將導(dǎo)致形成覆蓋組織表面的溶脹的生物粘附性膜。懸浮的顆粒在黏膜和組合物之間的界面的溶脹是形成生物粘附層的關(guān)鍵。
為了理解稀釋劑的選擇對(duì)藻酸鹽顆粒在組合物和黏膜界面上的溶脹行為的影響，需要能顯示生物粘附性膜在黏膜表面上形成時(shí)的微觀結(jié)構(gòu)。
儀器“放大鏡”—指Cool Snap專(zhuān)業(yè)數(shù)碼相機(jī)，附帶到尼康A(chǔ)F微型尼卡60mm f/2.8D鏡頭，經(jīng)Cool Snap專(zhuān)業(yè)PCI界面卡連接到奔騰PIII 1GHz PC上。使用Image ProPlus 4.1版(美國(guó)馬里蘭州的Media Cybemetics，經(jīng)銷(xiāo)商為英國(guó)伯克郡finchampstead的Datacell Ltd.)進(jìn)行圖像分析。
Thoma血細(xì)胞計(jì)數(shù)器計(jì)數(shù)盒，深度0.1mm，0.0025mm2，英格蘭Hawksley。
方法組織黏膜的制備將豬宰殺后立即將新鮮的食管收集在磷酸鹽緩沖鹽水中，加冰運(yùn)輸。在宰殺1小時(shí)內(nèi)解剖除去肌肉組織，剩下清潔的上皮組織管道。用氰基丙烯酸酯黏合劑(Super GlueLoctite(愛(ài)爾蘭)公司)將25mm×50mm的組織片粘附在顯微鏡載玻片上，在40ml的0.9％重量/體積的NaCl中水化1分鐘，在人工唾液中沖洗，然后置于顯微鏡下。
制劑的制備制備下列每個(gè)含有濃度為1.9mM的DMMB的稀釋劑。
●甘油●丙二醇●聚乙二醇200●聚乙二醇400●70∶30(重量/重量)甘油∶丙二醇的混合物●40∶60(重量/重量)甘油∶丙二醇的混合物然后使用每種溶液制備40重量％的藻酸鈉的懸浮液。該溶液的制備方法是，稱(chēng)出合適量的稀釋劑和藻酸鹽，然后在玻璃瓶中用刮鏟混合這兩種原料。
將制劑施用到組織黏膜通過(guò)將藻酸鹽懸浮液填充至血細(xì)胞計(jì)數(shù)器載玻片的開(kāi)口計(jì)數(shù)盒內(nèi)，然后將其倒置在組織表面上，從而將所述制劑施用至組織表面。血細(xì)胞計(jì)數(shù)器載玻片可保證均勻的單層懸浮液鋪展在組織表面上。
圖像捕獲和分析使用所述放大鏡觀測(cè)懸浮的藻酸鹽顆粒的溶脹。顯微鏡可被描述為連接到數(shù)碼相機(jī)上的放大鏡頭，界面到能捕獲數(shù)碼圖像的PC上，從而顯示生物粘附性膜的微結(jié)構(gòu)。當(dāng)藻酸鹽顆粒在黏膜表面上水化并和DMMB絡(luò)合時(shí)，從藍(lán)色到紫色的顏色變化劃出溶脹區(qū)域。在預(yù)定時(shí)間后圖像分析軟件捕獲圖像，將一系列圖像轉(zhuǎn)換成描述顆粒溶脹的程度隨時(shí)間的動(dòng)畫(huà)。然后將數(shù)碼柵格放在整個(gè)圖像上，對(duì)根據(jù)其具體的柵格參數(shù)選擇的一些顆粒進(jìn)行圖像分析。顆粒徑向溶脹程度的測(cè)定可以發(fā)現(xiàn)在生物粘附性膜內(nèi)溶脹藻酸鹽區(qū)域的形成特性。
放大鏡顯示，當(dāng)將組合物置于黏膜表面時(shí)，懸浮的藻酸鹽顆粒開(kāi)始水化和溶脹。稀釋劑中DMMB的存在意味著在顆粒開(kāi)始溶脹時(shí)，由于藻酸鹽和DMMB的絡(luò)合導(dǎo)致從藍(lán)色到紫色的顏色變化。使用圖像分析軟件，可以測(cè)定懸浮的藻酸鹽顆粒的溶脹面積隨時(shí)間的變化。
圖6顯示了懸浮在稀釋劑中的藻酸鹽顆粒被置于食管黏膜上時(shí)，其溶脹面積的變化。
圖6的結(jié)果表明，置于食管黏膜上的藻酸鹽顆粒的溶脹速率可以通過(guò)稀釋劑的選擇來(lái)調(diào)整。如下表所示，稀釋劑的選擇影響0～360秒之間的溶脹速率并影響溶脹程度。

懸浮在食管黏膜上的稀釋劑中的藻酸鹽的溶脹速率和程度配方—40重量％的藻酸鹽(Protanal LF120L 90～125μm)稀釋劑在90～360秒之間計(jì)算溶脹速率。
圖6表示，懸浮在含甘油的稀釋劑中的顆粒溶脹最快，不同的稀釋劑在平衡溶脹區(qū)域和平衡前的溶脹速率上表現(xiàn)出不同。例如，懸浮在聚乙二醇400中的顆粒在0.28的標(biāo)準(zhǔn)化溶脹面積時(shí)開(kāi)始平穩(wěn)，但是懸浮在甘油中的顆粒在類(lèi)似的溶脹面積仍然快速溶脹。很明顯，稀釋劑的選擇對(duì)顆粒溶脹產(chǎn)生影響。
實(shí)施例3為了研究生物粘附性和溶脹之間的關(guān)系而進(jìn)行這些實(shí)施例。
儀器安捷倫紫外-可見(jiàn)光系統(tǒng)8453(英格蘭斯托克波特，安捷倫科技英國(guó)公司(Agilent Technologies UK Td))Erweka ZT44 USP/BP崩解測(cè)試儀(英格蘭諾丁漢，CopleyInstruments)
方法概述按如下方法測(cè)定所述制劑的粘附性將一段豬食管外翻套在塑料管上，連接到USP崩解測(cè)試儀上，所述USP崩解測(cè)試儀進(jìn)行垂直浸漬移動(dòng)，將黏膜浸漬到40重量％的稀釋劑Protanal LF120L(120～125μm)懸浮液中。組織和粘附的制劑經(jīng)測(cè)試儀的垂直移動(dòng)到?jīng)_洗容器中并在人工唾液(如上述)中沖洗。相對(duì)于總粘附程度在預(yù)定時(shí)間后替換容器，以便用含有可分析量的藻酸鹽(0.7gL-1)采集約5個(gè)樣品。當(dāng)制劑看起來(lái)全部分離(目測(cè))之后，從崩解測(cè)試儀上取下組織，在人工唾液中攪拌2小時(shí)，以便除去殘余的粘附物質(zhì)。攪拌后，為了保證分離掉所有粘附的藻酸鹽，刮劃黏膜并分析殘余物的藻酸鹽濃度。
制備黏膜表面將豬宰殺后立即將新鮮的食管收集在磷酸鹽緩沖鹽水中，加冰運(yùn)輸。在宰殺1小時(shí)內(nèi)解剖除去肌肉組織，剩下清潔的上皮組織管道。然后將組織管道切成8cm的段，將這些段外翻套在崩解測(cè)試儀的棒上。
然后輕輕地清洗套在棒上的組織，在0.9％的氯化鈉中平衡1分鐘。
粘附試驗(yàn)該組織置于崩解測(cè)試儀上，下降到16g的制劑(40重量％的藻酸鹽/稀釋劑懸浮液)中，停留5秒鐘。然后開(kāi)動(dòng)崩解測(cè)試儀，該組織和粘附的藻酸鹽以USP預(yù)定的速率和距離在18ml的人工唾液(37℃)中進(jìn)出浸漬。浸漬動(dòng)作沖滌配方與組織的界面，使制劑經(jīng)崩解和溶解而分離。
樣品采集在預(yù)定的時(shí)間后，停止崩解測(cè)試儀，改變?nèi)斯ね僖簺_洗容器。由預(yù)試驗(yàn)來(lái)精確測(cè)量預(yù)定時(shí)間，該預(yù)試驗(yàn)提供分離制劑所需的大約沖洗時(shí)間。然后將該預(yù)定時(shí)間分成多個(gè)時(shí)間范圍，在這些時(shí)間范圍內(nèi)，可分析量的組合物(0.7g/L藻酸鹽)應(yīng)當(dāng)已被沖洗到18ml的人工唾液中。用視覺(jué)觀察測(cè)定終點(diǎn)，即全部分離的點(diǎn)。達(dá)到終點(diǎn)后，從崩解測(cè)試儀上取下組織，放在16ml的人工唾液中，攪拌2小時(shí)。這是為了保證剩余的粘附的藻酸鹽完全分離。
為了驗(yàn)證全部藻酸鹽分離，刮劃該組織，將刮劃下來(lái)的物質(zhì)溶解在1ml的人工唾液中，并且分析溶解的藻酸鹽。沒(méi)有檢測(cè)到可分析的藻酸鹽濃度。
因此，粘附在該食管黏膜段上的全部藻酸鹽進(jìn)入了所有的沖洗容器中?？梢詫?duì)每個(gè)容器取樣，定量分析藻酸鹽的存在量。
定量分析分離的藻酸鈉制備藻酸鹽標(biāo)準(zhǔn)校準(zhǔn)溶液將藻酸鈉加入人工唾液中，攪拌直到完全溶解，由此制備0.5重量％的藻酸鈉溶液。使用它制備1ml的0.7～3.0g/L范圍內(nèi)的標(biāo)準(zhǔn)溶液。
制備樣品溶液從每個(gè)容器取樣1000mg，但是如果藻酸鹽濃度高，需要稀釋該樣品，以保證待分析的藻酸鹽濃度在分析范圍(0.7～3.0g/L)內(nèi)。
藻酸鹽分析方法1ml的0.8M的氫氧化鈉加入到1ml的藻酸鹽溶液中，5分鐘后用120μL的2.25M的檸檬酸中和。渦旋混合樣品，加入40μL的DMMB，再混合，在室溫下培養(yǎng)45分鐘，使用安捷倫8453紫外光分光光度計(jì)(英格蘭斯托克波特，安捷倫科技英國(guó)公司)在1cm通路長(zhǎng)度的池中，在520和650nm下測(cè)定吸收強(qiáng)度。
由于在吸收比520∶650nm和0.7～3.0g/L范圍內(nèi)的藻酸鹽濃度之間存在線性關(guān)系，所以可以定量分析出從每個(gè)容器中取樣的藻酸鹽量，因此而確定在每個(gè)時(shí)間點(diǎn)的分離水平。
在沖洗的每個(gè)階段計(jì)算出保留率后，可以確定每種制劑隨沖洗時(shí)間增加的保留程度，然后比較生物粘附特性。
統(tǒng)計(jì)分析使用GraphPad InStat v.3.05(美國(guó)加州圣地亞哥，GraphPad軟件公司)進(jìn)行所有的統(tǒng)計(jì)計(jì)算。在p＜0.05的顯著水平下進(jìn)行單因子方差分析(ANOVA)和Tukey多重比較試驗(yàn)。使用GraphPad Prism v3.02(美國(guó)加州圣地亞哥，GraphPad軟件公司)進(jìn)行非線性回歸分析。
結(jié)果和討論懸浮在多種水溶性稀釋劑中的藻酸鈉在食管黏膜上的保留施用制劑后，圖7顯示稀釋劑的選擇對(duì)施用到食管黏膜上的藻酸鹽總量的影響。在各個(gè)稀釋劑之間，施用到食管黏膜上的藻酸鹽總量沒(méi)有顯著差異(p＞0.05)。
盡管稀釋劑的選擇不影響施用到食管黏膜上的藻酸鹽量，但是在沖洗時(shí)，施用的藻酸鹽從黏膜表面上的分離依賴(lài)于稀釋劑。這表示在圖8中。
圖8顯示藻酸鈉在食管黏膜上的保留量隨沖洗時(shí)間增加的變化。保留量用藻酸鹽保留的百分比表示，即在沖洗x分鐘時(shí)仍然保留在組織上的藻酸鹽相對(duì)于t＝0時(shí)的沖洗前施用到組織上的藻酸鹽總量的重量百分比。
可以清楚地看到，稀釋劑的選擇影響藻酸鹽在黏膜表面上的保留。懸浮在甘油中的藻酸鈉表現(xiàn)出對(duì)黏膜表面的最大保留，然而懸浮在聚乙二醇400中的藻酸鹽保留最少。
實(shí)施例4前面已經(jīng)表明，懸浮在水溶性稀釋劑中的藻酸鹽顆粒的溶脹影響藻酸鹽與黏膜之間的生物粘附性相互作用力的形成。懸浮在引發(fā)溶脹需要最少的人工唾液稀釋的稀釋劑中的顆粒對(duì)黏膜表面具有最大的保留。帶有人工唾液的稀釋劑稀釋程度影響顆粒溶脹，進(jìn)而影響藻酸鹽在黏膜上的保留，這種認(rèn)識(shí)對(duì)于這些制劑的體內(nèi)性能具有意義。
將一個(gè)劑量的制劑施用給患者之后，懸浮的藻酸鹽將進(jìn)入口腔，然后被吞咽進(jìn)入上部食管。隨著制劑沿口腔和食管的遷移，稀釋劑被口腔內(nèi)的唾液和黏膜表面上的流體稀釋。在充分的稀釋劑稀釋之后，懸浮的藻酸鹽顆粒開(kāi)始溶脹而保留在黏膜上。各種稀釋劑在引發(fā)顆粒溶脹所必需的稀釋劑稀釋程度上存在差別，受唾液的相對(duì)進(jìn)入量的影響，這種差別可使被激活的顆粒溶脹發(fā)生在胃腸道的特定區(qū)域中。這樣，可以使藻酸鹽的保留具有位置特異性。例如，懸浮在甘油中的藻酸鹽開(kāi)始溶脹需要用人工唾液的最小稀釋量，并且可以預(yù)期，藻酸鹽在胃腸通過(guò)的早期階段變?yōu)樯镎掣叫缘?，從而保留在口腔或上部食管?nèi)。
備選地，在聚乙二醇400制劑達(dá)到充分的稀釋而溶脹和粘附之前，它可以被運(yùn)輸?shù)较虏渴彻?；因此到達(dá)下部食管之前粘附將被延緩，使得用于包覆的藻酸鹽層能夠釋放到這個(gè)位置。
因此認(rèn)為，重要的是應(yīng)當(dāng)理解稀釋劑的選擇對(duì)于保留在黏膜表面上的藻酸鹽的區(qū)域化分布具有何種影響。
可以使用內(nèi)部的體外生物粘附測(cè)試系統(tǒng)來(lái)表征保留的藻酸鹽的分布。專(zhuān)門(mén)設(shè)計(jì)“蠕動(dòng)試管”生物粘附測(cè)試系統(tǒng)來(lái)測(cè)定潛在的生物粘附液體制劑在食管上的保留?！叭鋭?dòng)試管”生物粘附測(cè)試系統(tǒng)設(shè)備表示在圖9中。在圖9中，下列數(shù)字表示如下部件。
2-水加熱器/循環(huán)器；供應(yīng)金屬斜床水夾套(37℃)4-加熱的金屬斜床(傾斜45°)6-用注射器注射的制劑和人工唾液試樣量8-金屬?gòu)澢?夾鉗10-滾筒；提供蠕動(dòng)作用12-食管(用Clingfilm包覆)14-收集在小瓶中的洗出液部分將制劑直接施用到食管組織的管道中，用重復(fù)等分量的人工唾液沖洗食管，由此測(cè)定食管內(nèi)制劑的保留量。每次沖洗后，使用滾筒模擬咽下的蠕動(dòng)作用。
在一系列的沖洗和蠕動(dòng)波動(dòng)后，切開(kāi)食管組織的管道，刮劃黏膜表面，定量分析刮下來(lái)的物質(zhì)的藻酸鹽濃度，由此計(jì)算保留在食管管上、中和下部區(qū)域的藻酸鹽的分布。
實(shí)施例4使用了“蠕動(dòng)試管”生物粘附測(cè)試系統(tǒng)，其目的是，確定在模仿蠕動(dòng)條件下稀釋劑的選擇對(duì)沿食管組織管道的黏膜上保留的藻酸鹽分布的影響。
食管的準(zhǔn)備將豬宰殺后立即將新鮮的食管收集在磷酸鹽緩沖鹽水中，加冰運(yùn)輸。在宰殺1小時(shí)內(nèi)解剖除去肌肉組織，剩下清潔的上皮組織管道。切割上部食管，以保證31cm的均勻管長(zhǎng)。
食管連接在給藥口(dosing port)上需要將食管連接在在給藥口上。給藥口張開(kāi)食管，并且給藥口上有直接向食管內(nèi)注射制劑和人工唾液的裝置。給藥口由32mm長(zhǎng)的塑料管(內(nèi)徑8mm)組成，該塑料管上連接兩個(gè)緊密固定的硅酮橡膠法蘭。給藥口的法蘭端插入到食管的上端，采用繩索打結(jié)來(lái)使食管緊密地固定在兩個(gè)法蘭之間。
將組織固定到斜坡(slope)上給藥口和食管連接到彎曲架上，組織放在40cm長(zhǎng)×6cm寬的鋁斜坡(和水平方向成45度角)上。將食管定位，使其下端延伸出斜坡的底部之外，使下部食管口自由活動(dòng)，以便將液體排出到收集容器中。食管的整個(gè)長(zhǎng)度上用Clingfilm包覆以進(jìn)行隔絕，并防止水分損失。使用水流動(dòng)加熱器，水在斜坡的下側(cè)循環(huán)，以加熱金屬傾斜表面至37±1℃的溫度。使組織定位在加熱的斜坡上，使其平衡在37℃。
預(yù)沖洗食管在施用制劑之前必需預(yù)沖洗食管。這是為了保證洗去留在食管內(nèi)的食物和食管黏膜上的黏液。經(jīng)給藥口注入10ml等份的37℃的人工唾液試樣10次，以便沖洗食管。在每次注射后，使用100～150g的輕壓力沿組織管的長(zhǎng)度方向滾下塑料滾筒，以便通過(guò)蠕動(dòng)排出該液體。
施用制劑到食管內(nèi)使用給藥注射裝置將制劑施用到食管內(nèi)。給藥裝置的結(jié)構(gòu)為，通過(guò)由10ml的Luer lock注射器的蓋制成的接頭，將10ml的Luer lock注射器緊密地固定到1ml的注射器腔的頂部。
給藥裝置的填充方式為，用制劑充滿(mǎn)1ml的注射器，然后單獨(dú)稱(chēng)量10g的制劑到10ml注射器中，仔細(xì)地擦干凈注射器外邊的過(guò)量制劑。然后將兩個(gè)注射器固定在一起，再稱(chēng)重。將給藥注射器插入到給藥口，使得給藥口的上端與1ml注射器的頂端手把接觸。這保證給藥裝置穿透到給藥口下端的下方53mm，并且校準(zhǔn)在食管內(nèi)施用制劑的位置。上面的10ml注射器慢慢釋放，必需夾緊插入的1ml注射器周?chē)?，以防止施用的制劑反沖。慢慢地從食管拔出給藥裝置，重新稱(chēng)量，以計(jì)算施用到食管內(nèi)的制劑重量。
從食管中排出制劑同時(shí)進(jìn)行人工唾液沖洗和使用塑料滾筒重復(fù)產(chǎn)生蠕動(dòng)波動(dòng)，從而從食管中排出制劑。一旦施用制劑之后，在沖洗之前，使用滾筒沿食管長(zhǎng)度方向引發(fā)5次蠕動(dòng)波動(dòng)，從而排出過(guò)量的制劑。通過(guò)使用DMMB絡(luò)合分析法來(lái)分析排出液中的藻酸鹽濃度，可以定量地分析5次蠕動(dòng)波動(dòng)后藻酸鹽的初始分離。
通過(guò)給藥口注射30次1ml的37℃的人工唾液試樣，并且在每次1ml的沖洗之后，使用滾筒重復(fù)產(chǎn)生蠕動(dòng)波動(dòng)，從而可以排出保留在黏膜表面上的剩余的藻酸鹽。使用沖洗注射器經(jīng)給藥口注射人工唾液沖洗液。沖洗注射器是1ml塑料注射器，該注射器上固定有法蘭，以防止注射器穿入至給藥口以下14mm。這保證在制劑施用點(diǎn)以上40mm的地方開(kāi)始沖洗，同時(shí)防止未排出的制劑在給藥口周?chē)鄯e成池。
保留在黏膜表面上的藻酸鹽的測(cè)定在30次1ml沖洗之后，從斜坡上取下食管，將其分成70mm的3段，分別代表食管的上、中和下部。每段沿長(zhǎng)度方向切開(kāi)，露出內(nèi)黏膜表面，使其在聚苯乙烯支架上平整地伸展。使用顯微鏡載玻片刮劃該組織，以便從黏膜表面上除去保留的藻酸鹽。
將刮劃下來(lái)的物質(zhì)從載玻片上沖洗到燒杯中，用人工唾液稀釋到約0.7～2.5g/L的藻酸鹽濃度。將刮劃下來(lái)的物質(zhì)攪拌過(guò)夜，以保證藻酸鹽完全溶解。使用DMMB絡(luò)合分析法可以定量分析從每個(gè)組織段上刮下來(lái)的藻酸鹽的量。然后可以計(jì)算藻酸鹽相對(duì)于施用劑量的保留率。
測(cè)試的制劑用刮鏟充分混合兩相，以便將40重量％的粒徑為90～125μm的藻酸鈉(Protanal LF120L)制劑懸浮在下列稀釋劑中。
使用的稀釋劑—甘油；70∶30(重量)甘油∶丙二醇；40∶60(重量)甘油∶丙二醇；丙二醇；聚乙二醇200；聚乙二醇400。
使用GraphPad InStat V.3.00(美國(guó)加州圣地亞哥，GraphPad軟件公司)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)計(jì)算。在p＞0.05的顯著水平下進(jìn)行單因子方差分析(ANOVA)和t-檢驗(yàn)。
結(jié)果和討論5次蠕動(dòng)波動(dòng)后藻酸鹽的排出使用“蠕動(dòng)試管”生物粘附測(cè)試系統(tǒng)，可以研究稀釋劑選擇對(duì)食管內(nèi)藻酸鹽保留的影響。圖10顯示在進(jìn)行5次初始蠕動(dòng)波動(dòng)之后進(jìn)行沖洗，從食管流出的施用到食管黏膜上的藻酸鹽總量的百分比。
很明顯，甘油中懸浮的藻酸鹽顯著地(p＜0.05)減少了給藥后藻酸鹽從食管的排出。這應(yīng)當(dāng)是懸浮在甘油中的藻酸鹽與食管黏膜快速地形成了生物粘附性相互作用，并且能抵抗5次蠕動(dòng)波動(dòng)干擾的影響。懸浮在甘油中的藻酸鹽與食管黏膜快速地形成生物粘附性相互作用的能力類(lèi)似于上述沖洗60秒鐘后的保留行為?；诟视偷闹苿┑谋Ａ粼黾涌梢杂靡韵略騺?lái)解釋藻酸鹽顆粒在食管內(nèi)水化后，在甘油中的溶脹傾向增加，并且產(chǎn)生粘附性的內(nèi)聚相互作用。
沖洗后藻酸鹽在黏膜上的保留將制劑施用到黏膜后，用30次1ml的人工唾液沖洗食管。圖11顯示在沖洗后仍然保留在黏膜表面上藻酸鹽占給藥到食管的藻酸鹽總量的百分比。
懸浮在甘油和70/30(重量/重量)的甘油丙二醇中的藻酸鈉具有比懸浮在其它任何稀釋劑中的藻酸鹽顯著(p＜0.05)較大的保留率。懸浮在這兩種稀釋劑中的藻酸鹽在沖洗后其保留率增加，這與初始5次蠕動(dòng)波動(dòng)之后的更多保留有關(guān)系(圖10)。和其它稀釋劑相比，懸浮在甘油和70/30(重量/重量)的甘油丙二醇中的藻酸鹽具有更大的溶脹傾向。
增加的溶脹能力是造成5次蠕動(dòng)波動(dòng)后更多的藻酸鹽保留在食管中和在沖洗后最終更多地保留下的原因。但是對(duì)于懸浮在40∶60(重量)的甘油∶丙二醇、丙二醇、聚乙二醇和聚乙二醇400中的藻酸鹽，在5次蠕動(dòng)沖洗后流出了施用劑量的95％以上。懸浮在這些每種稀釋劑中的藻酸鹽在通過(guò)食管時(shí)不能充分地溶脹，不能形成與黏膜的生物粘附性相互作用。因此在30次1ml沖洗后，在食管內(nèi)保留很少的量(施用劑量的3％以下)。
可以看出，懸浮的藻酸鹽在通過(guò)食管時(shí)的溶脹能力是影響沖洗后藻酸鹽保留程度的決定性因素。
通過(guò)描述30次1ml沖洗后在食管上的保留總量，可以認(rèn)為，重要的是理解保留的藻酸鹽在黏膜表面上如何分布。不同的制劑可保留在食管的不同區(qū)域，這對(duì)于可能用于黏膜保護(hù)的制劑的臨床功效非常關(guān)鍵。在本發(fā)明的范圍內(nèi)，理想的制劑在通過(guò)胃腸時(shí)充分地溶脹，并且保留在下部食管的黏膜表面上，從而屏蔽胃回流物。
圖12顯示稀釋劑的選擇對(duì)藻酸鹽在食管的上、中和下部3個(gè)區(qū)域內(nèi)的保留的影響。
在食管的每個(gè)區(qū)域，懸浮在甘油中的藻酸鹽比在其它稀釋劑中的保留程度顯著(p＜0.05)較大。類(lèi)似地在下部食管中，基于70∶30(重量)的甘油∶丙二醇的制劑比除甘油外的所有其它稀釋劑的保留更為顯著。
還可以看出，對(duì)于懸浮在甘油或70∶30(重量)的甘油∶丙二醇的藻酸鹽，在下部食管中比在上部食管中保留的藻酸鹽顯著(p＜0.05)較多。藻酸鹽在食管的下部區(qū)域內(nèi)的保留增加應(yīng)當(dāng)與制劑的水化有關(guān)。當(dāng)制劑注射到食管中時(shí)，由于初始的蠕動(dòng)波動(dòng)，注射團(tuán)塊沿食管向下移動(dòng)。到達(dá)下部食管后，由于被食管中的流體的稀釋增加，所以懸浮的藻酸鹽將處于最大的溶脹狀態(tài)。相當(dāng)大量的溶脹藻酸鹽出現(xiàn)在下部食管中促進(jìn)了粘附性和內(nèi)聚性相互作用的形成，這可以解釋為何藻酸鹽在該區(qū)域內(nèi)具有更大的保留。
如圖11所示，懸浮在除甘油和70∶30重量的甘油∶丙二醇之外的稀釋劑中的藻酸鹽在沖洗后具有最低的保留程度。懸浮在這些稀釋劑中的藻酸鹽的低黏膜保留程度歸因于藻酸鹽不能溶脹且不能與黏膜產(chǎn)生必要的生物粘附性相互作用。另外，圖12表明，保留在食管每個(gè)區(qū)域內(nèi)的藻酸鹽量沒(méi)有顯著差異(p＞0.05)。保留在食管內(nèi)的藻酸鹽的平均分布表明，甚至在下部食管中藻酸鹽也不能溶脹，且不能以比上部食管更大的程度保留。這說(shuō)明懸浮在40∶60(重量)的甘油∶丙二醇、丙二醇、聚乙二醇200和聚乙二醇400中的藻酸鹽以相對(duì)不溶脹的狀態(tài)通過(guò)食管的整個(gè)長(zhǎng)度，不能被充分稀釋、溶脹并被保留在這個(gè)位置。但是，應(yīng)該清楚，如果在施用到食管之前用水稀釋它們，可以顯著增加使用這類(lèi)其它載體時(shí)的保留程度。
結(jié)論可以通過(guò)選擇稀釋劑來(lái)改變食管內(nèi)藻酸鹽保留的分布。已經(jīng)就藻酸鹽在食管內(nèi)的溶脹能力對(duì)此進(jìn)行了討論。懸浮甘油中的在藻酸鹽在施用到食管中后溶脹能力最大，并能因此形成充分的粘附性?xún)?nèi)聚相互作用，從而保留在食管內(nèi)。在下部食管中的保留最大。我們認(rèn)為，這是因?yàn)樵逅猁}在這個(gè)特定的通過(guò)點(diǎn)上處于高的溶脹狀態(tài)。
實(shí)施例1～4的結(jié)論已經(jīng)表明，可以調(diào)整懸浮在水溶性稀釋劑中的藻酸鹽顆粒的溶脹和在食管黏膜上的保留。通過(guò)選擇稀釋劑來(lái)進(jìn)行調(diào)整，這些稀釋劑表現(xiàn)為可以控制以下各項(xiàng)●引發(fā)顆粒溶脹所必需的制劑稀釋量●顆粒在黏膜組織上的溶脹速率●制劑保留在黏膜表面上的啟動(dòng)和持續(xù)時(shí)間●藻酸鹽在食管黏膜上的保留量的分布通過(guò)將藻酸鈉的干燥顆粒釋放進(jìn)入多種水溶性稀釋劑中形成制劑，這種制劑能夠控制因該制劑的水化作用而產(chǎn)生的生物粘附性。這種現(xiàn)象提供了靶向作用于作為粘附位置的食管(在這些實(shí)施例中)和其它體表(在其它實(shí)施例中)的手段。非常希望能夠設(shè)計(jì)這樣一種制劑，該制劑在達(dá)到足夠的稀釋程度之前不發(fā)生溶脹，從而不引發(fā)對(duì)體表的粘附。
理想的用于在食管中保留的組合物在口腔中不溶脹，而會(huì)在正常的蠕動(dòng)和胃腸道輸送作用的影響下，作為一個(gè)團(tuán)塊沿食管壁移動(dòng)。到達(dá)下部食管后，制劑開(kāi)始溶脹，產(chǎn)生必要的粘附性和內(nèi)聚性能，從而在下部食管內(nèi)形成生物粘附性膜。如果生物粘附性屏障是充分一體化的，則它將可以抵抗由于唾液沖洗和蠕動(dòng)所導(dǎo)致的溶解和崩解，從而成為保護(hù)性涂層保持在黏膜表面上。
這種類(lèi)型的組合物提供了一種用來(lái)治療/預(yù)防因胃返流導(dǎo)致的食管組織受損的優(yōu)異手段。
上述類(lèi)型的組合物還可以提供使其它活性組分延遲釋放到胃腸道其它部分的手段。
上述類(lèi)型的組合物在非治療性用途中也是有用的。
權(quán)利要求
1.一種用來(lái)粘附在表面上的液體組合物，所述組合物包含懸浮在水溶性液體稀釋劑中的水溶脹性聚合物顆粒，其中，所述液體稀釋劑基本上沒(méi)有水或包含不足以完全溶脹聚合物顆粒的量的水，其中，所述聚合物顆粒不同時(shí)包含陰離子聚合物顆粒和陽(yáng)離子聚合物顆粒。
2.如權(quán)利要求1所述的組合物，其中，所述聚合物顆粒包含陰離子聚合物的顆粒。
3.如權(quán)利要求2所述的組合物，其中，所述聚合物包含藻酸鹽、黃原膠或纖維素鹽。
4.如權(quán)利要求3所述的組合物，其中，所述陰離子聚合物是藻酸鹽。
5.如權(quán)利要求4所述的組合物，其中，所述藻酸鹽是藻酸鈉。
6.如前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的組合物，其中，所述聚合物顆粒具有30～500μm的平均粒徑。
7.如前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的組合物，基于所述組合物的總重量，所述組合物包含2～90重量％的所述聚合物顆粒。
8.如前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的組合物，其中，所述液體稀釋劑基本上不含水。
9.如前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的組合物，其中，所述液體稀釋劑包含選自一元醇、多元醇、糖醇和糖多元醇的一種或多種物質(zhì)。
10.如前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的組合物，其中，所述液體稀釋劑包含多元醇。
11.如權(quán)利要求9所述的組合物，其中，所述液體稀釋劑包含選自甘油、二元醇、二元醇醚或聚亞烷基二醇中的一種或多種物質(zhì)。
12.如權(quán)利要求11所述的組合物，其中，所述液體稀釋劑是甘油。
13.如權(quán)利要求11所述的組合物，其中，所述液體稀釋劑包含與(100-x)重量份甘油混合的x重量份丙二醇，其中x是最大為30的數(shù)字。
14.如權(quán)利要求11所述的組合物，其中，所述液體稀釋劑包含分子量在100～1000范圍內(nèi)的聚乙二醇。
15.如前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的組合物，其中，所述液體稀釋劑具有不大于35(Jcm-3)1/2的希爾德布蘭德溶解度參數(shù)。
16.如前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的組合物，其中，所述組合物用于治療或預(yù)防體表的發(fā)炎、受損或疾病，所述液體稀釋劑是藥用的。
17.如權(quán)利要求14所述的組合物，所述組合物還包含選自止痛、殺菌、抗酸或消炎化合物中的一種或多種物質(zhì)。
18.水溶脹性聚合物顆粒在制備治療或預(yù)防體表發(fā)炎或受損的液體藥物組合物中的應(yīng)用，所述組合物包含懸浮在藥用液體稀釋劑中的所述水溶脹性聚合物顆粒，所述液體稀釋劑基本上不含水或包含不足以顯著溶脹聚合物顆粒的量的水，其中，所述聚合物顆粒不包含陰離子聚合物顆粒和陽(yáng)離子聚合物顆粒。
19.如權(quán)利要求17所述的應(yīng)用，其中，所述體表是黏膜表面。
20.如權(quán)利要求18所述的應(yīng)用，其中，所述黏膜表面是食管表面。
21.一種治療或預(yù)防體表發(fā)炎、疾病或受損的方法，所述方法包括將權(quán)利要求15或16所述的組合物施用到所述體表，其中，在進(jìn)行所述方法之前或之中，所述組合物與水混合，使所述聚合物顆粒在體表附近溶脹。
22.如權(quán)利要求20所述的方法，其中，所述體表是黏膜表面。
23.如權(quán)利要求21所述的方法，其中，所述黏膜表面是食管表面。
24.如權(quán)利要求22所述的方法，其中，所述水來(lái)自唾液，所述混合在患者食管的上段發(fā)生。
25.一種用來(lái)治療受損的或易于受損的體表的液體藥物組合物，所述組合物基本上是特別參照所附實(shí)施例的本文所描述的組合物。
26.治療體表發(fā)炎或受損的應(yīng)用或方法，所述應(yīng)用或方法基本上是特別參照所附實(shí)施例的本文所描述的應(yīng)用或方法。
全文摘要
一種用來(lái)粘附在表面的液體組合物，該表面通常是體表，特別是黏膜表面。所述組合物包含懸浮在水溶性液體稀釋劑中的水溶脹性聚合物顆粒，其中所述液體稀釋劑基本上不含水或包含不足以完全溶脹聚合物顆粒的量的水。所述組合物與水混合后增稠，變得對(duì)表面的粘附性更強(qiáng)。于是，所述組合物易于施用，但在被處理位置上會(huì)變稠和變得具有粘附性。
文檔編號(hào)A61K47/10GK1753656SQ200480004836
公開(kāi)日2006年3月29日 申請(qǐng)日期2004年2月13日 優(yōu)先權(quán)日2003年2月20日
發(fā)明者喬納坦·克雷格·里查森, 科林·戴維·梅利亞, 彼得·威廉姆·德埃忒瑪, 弗蘭克·C·漢普森, 伊恩·G·喬利夫 申請(qǐng)人:雷克特本克斯?fàn)柋＝?英國(guó))有限公司